تحليل المكونات الكيميائية في الأنواع الموجودة

اتصال:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساب: 008618081934791

يونغ جيانغ ، بنغ فاي تو ، وآخرون

الملخص

الأنواع من جنسسيستانش(Rou Cong Rong باللغة الصينية) هي أعشاب طفيليات معمرة وتنتشر بشكل أساسي في الأراضي القاحلة والصحاري الدافئة. كمنشط فائق لعلاج قصور الكلى والعجز الجنسي والعقم عند النساء وسيلان الدم المرضي والنزيف الرحمي الغزير والإمساك الخرف ،سيستانشأعشابحصل على شرف "جنسنج الصحراء". في الآونة الأخيرة ، كان هناك اهتمام علمي متزايد بـ Herba Cistanche نظرًا لأنشطته الحيوية الرائعة بما في ذلك مضادات الأكسدة والحماية العصبية ومقاومة الشيخوخة. المكونات الكيميائية لسيستانشالنباتاتتشمل بشكل أساسي الزيوت المتطايرة وغير المتطايرةفينيليثانويدجليكوسيدات(PhGs) ، إيريديويد ، قشور ، ألديتول ، قليل السكريات ، وعديد السكاريد. تظهر الدراسات الدوائية أن PhGs هي المكونات النشطة الرئيسية لعلاج نقص الكلى ، ومضادات الأكسدة ، وحماية الأعصاب. يعتبر الجالاكتيتول والسكريات قليلة السكاريد ممثلين لعلاج إمساك الشيخوخة ، في حين أن السكريات المتعددة مسؤولة عن تحسين مناعة الجسم. في هذه الورقة ، التطورات في المكونات الكيميائية لـسيستانشالنباتاتويتم مراجعة تحليلاتهم المقابلة.

الكلمات الدالة:Cistanche Herba ، Cistanches Chemical ، تحليل المكونات ، فينيلثانويد جليكوسيدات

1 المقدمة

سيستانشهوفمغ. Et Link ، أحد أجناس عائلة Orobanchaceae ، مع 22 نوعًا في العالم ، يتم توزيعه بشكل أساسي في الأراضي القاحلة والصحاري في نصف الكرة الشمالي ، مثل شينجيانغ ، ومنغوليا الداخلية ، ومناطق الحكم الذاتي في نينغشيا ، ومقاطعات جانسو وتشينغهاي في الصين ، وكذلك إيران والهند ومنغوليا ، إلخ. [1]. بيئات نموها قاسية للغاية: مناخ جاف شديد ، تباين حاد في درجات الحرارة ، أشعة الشمس الشديدة ، أقل من 250 ملم من الأمطار السنوية ، والتربة غير المعبأة [2،3]. السيستانشتنتمي الأنواع إلى أعشاب الطفيليات المعمرة ، والتي عادةً ما تلتصق بجذور النباتات المثبتة للرمال ، مثل نباتات Haloxylox amodendron ، و H. persicum ، و Kalidium foliated ، و Tamarix ، إلخ. [3]. هناك ستة أنواع من أنواع Cistanche في الصين ، وفقًا لسجل الفهرس التصنيفي للنباتات الصينية العليا [4]. ومع ذلك ، أكدت دراسة أخرى أن أربعة أنواع فقط ونوع واحد منسيستانشموجودة في الصين ، أيسيستانشالصحراءYC Ma، C. tubulosa (Schenk) R. Wight، C. salsa (CA Mey.) G. Beck، C. salsa var. albiflflora PF Tu et ZC Lou and C. sinensis G. Beck [5].

رو كونغ رونغ (هيرباسيستانش) ، التي سجلت لأول مرة في المواد الطبية الصينية لشين نونغ ، تشير إلى السيقان النضرة المجففة منسيستانشالنباتات.هيرباسيستانشتم اعتباره منشطًا فائقًا وحصل على شرف "جنسنج الصحاري". تكمن القيم العلمية لـ Herba Cistanche في علاج نقص الكلى ، والعجز الجنسي ، والعقم عند النساء ، وزيادة إفراز الدم المرضي ، وغزارة الرحم ، والإمساك الخرف [6،7]. لقد كان الدواء الأكثر شيوعًا لعلاج نقص الكلى في الصين للأسر المتعاقبة. من بين أنواع Cistanche ، تمت إعادة ترتيب C. مصدر ثري مقارنة ب C. Deserticola [9-11]. ومع ذلك ، في السنوات الأخيرة ، أصبحت نباتات C. بسبب نقص الموارد الطبيعية للموظفهيرباسيستانش، الأنواع الأخرى من هذا الجنس ، مثل C. salsa و C. Sinensis ، تستخدم أيضًا كبدائل في العديد من المناطق [10].

البحث العلمي علىسيستانشالنباتاتبدأت في الثمانينيات [12] ، وأشار التحليل الكيميائي إلى أن المركبات المختلفة ، بما في ذلك الزيوت الأساسية ،فينيليثانويدجليكوسيدات(PhGs) ، iridoids ، lignans ، alditols ، oligosaccharides ، و polysaccharides هي المكونات الرئيسية لـسيستانشالنباتات[13 ، 14]. أظهرت الأبحاث الدوائية أن المستخلصات منسيستانشتمتلك النباتات مجموعة واسعة من الأنشطة ، مثل علاج قصور الكلى وإمساك الشيخوخة ، وتعزيز القدرة على التعلم والحفظ ، وعلاج مرض الزهايمر ، وتعزيز المناعة ، ومكافحة الشيخوخة ، ومكافحة التعب [14-21]. مع تحسن مستويات المعيشة وظهور مجتمع شيخوخة ،سيستانشالنباتاتاكتسبت مزيدًا من الاهتمام وتم استخدامها على نطاق واسع بسبب أنشطتها الدوائية المميزة.

كانت هناك العديد من المراجعات حول دراسة المكونات الكيميائية والأنشطة الدوائية لـسيستانشالنباتات[13-15]. تركز هذه الورقة على التحليل الكيميائي لهذا الجنس والتقدم المحرز في دراسات المكونات الكيميائية.

2. المركبات المتطايرة

تشمل طرق الاستخراج الشائعة الاستخدام للمركبات المتطايرة من الطب الصيني التقليدي التقطير بالبخار واستخلاص المذيبات العضوية المحبة للدهون. باستخدام التقطير بالبخار ، تم استخلاص الزيوت الأساسية لنبات C. salsa و C. tubulosa ، وتم تحديد 38 و 21 مكونًا بواسطة GC-MS ، على التوالي (الجدول 1). تتكون المكونات الرئيسية في الزيوت الأساسية لنبات C. salsa من الألكانات والكحولات والألدهيدات وبعض المركبات الحلقية غير المتجانسة ، في حين أن حمض البالمتيك وحمض اللينوليك هما المكونان الرئيسيان لزيوت C. تم استخلاص المركبات المتطايرة من C. أغنى ثلاثة مكونات هي ميثيل 14- ميثيل بنتاديكانوات (13.61 بالمائة) ، إيثيل بالميتات (12.39 بالمائة) و ​​2.5 ، 6- تريميثيلوليثين (7.60 بالمائة) [24]. أظهر تقرير آخر عن المكونات المتطايرة لـ C. قد تكون النتائج التحليلية المختلفة لهاتين الورقتين [24 ، 25] ناتجة عن طرق الاستخراج المختلفة والظروف التحليلية المختلفة لـ GC-MS.

إلى جانب ذلك ، أبلغ ما عن طريقة استخراج السوائل فوق الحرجة (SFE) لاستخراج المكونات غير القطبية من C. salsa. أظهر تحليل المستخلص بواسطة GC-MS وجود بعض الإسترات والمركبات الجزيئية المنخفضة المحتوية على الأكسجين أو النيتروجين بالإضافة إلى الألكانات. أظهرت هذه النتيجة أنه يمكن استخلاص المزيد من المركبات القطبية بواسطة SFE من خلال إضافة معدل قطبي [26].

3. المركبات غير المتطايرة

المركبات غير المتطايرةسيستانشالنباتاتتشمل بشكل أساسي مركبات فينيل إيثانويد ، إيريديويد ، قشور ، ألديتول ، سكريات قليلة السكاريد ، وعديد السكاريد. حتى الآن ، تم عزل أكثر من 100 مركب غير متطاير منمصنع سيستانش. توزيع أنواع مختلفة من المركبات فيسيستانشالنباتاتمدرج في الجدول 2. في عام 1995 ، ذكرت موريا [27،28] أن المواد النباتية من C. salsa قد تم تحديدها بشكل خاطئ من قبل عندما قام بالتحقيق في مصادر Herba Cistanches من الأسواق الطبية اليابانية ، لذلك تم عزل المكونات الكيميائية من C تم إعادة تعيين الصلصا في الثمانينيات إلى C. deserticola في هذا الاستعراض.

3.1. جليكوسيدات فينيلثانويد

3.1.1. التركيبات الكيميائية ل PhGs

تم اعتبار PhGs بمثابة المكونات النشطة الرئيسية لـسيستانشمحيط. حتى الآن ، 34 PhGs(pخنيلجليكوسيدات)تم عزله عننباتات Cistanche، بما في ذلك 22 جليكوسيدات السكاريد ، و 10 جليكوسيدات ثلاثي السكاريد ، و 2 جليكوسيدات أحادية السكاريد (الجدول 3). من خلال تحليل هياكل PhGs فيسيستانش، تم تلخيص الخصائص الهيكلية التالية: يتكون جزء السكر من جليكوسيدات السكاريد من الجلوكوز ورامنوز ، مع ارتباط Rha (3 → 1). يرتبط الجلوكوز عادة مباشرة بالأجليكون ، وفي موضعه من C4 أو C6 ، حيث يوجد الكومارويل أو الكافويل عادةً. عندما يكون PhG عبارة عن جليكوسيد ثلاثي السكاريد ، عادةً ما يظهر جلوكوز إضافي أو رامنوز في موضع C6 من الجلوكوز الداخلي. من بين هؤلاء PhGs (pخنيلجليكوسيدات)منسيستانشالأنواع ، كريناتوسيد (34) هو نوع استثنائي ، لأن حلقة الأثير موجودة بين موضع aglycone و C -2 موضع الجلوكوز الداخلي في بنيته [34]. في الآونة الأخيرة ، تم الإبلاغ لأول مرة عن التركيب البلوري الأحادي للأشعة السينية من salidroside (15) ، PhG المعزول من C. deserticola ، [44].

دراسات النشاط الدوائي من PhGs(pخنيلجليكوسيدات)أثبتوا أن لديهم وظائف مختلفة ، مثل مضادات الأكسدة ، وحماية الأعصاب ، وتعزيز الوظيفة المناعية والجنسية ، وحماية الكبد ، ومكافحة الإشعاع ، وما إلى ذلك [15–17،40،48-50]. من بينها ، أصبحت الحماية العصبية موضوعًا ساخنًا. بعض المكونات الفردية أو كسور من PhGs(pخنيلجليكوسيدات)تم الإبلاغ عن تثبيط موت الخلايا المبرمج للخلايا العصبية التي تحدثها مواد كيميائية مختلفة [51-57] ، كما تم إثبات حمايتها العصبية في المختبر من خلال العديد من النماذج الحيوانية في الجسم الحي [58-64]. تشير هذه النتائج إلى أن PhGs(pخنيلجليكوسيدات)يمكن أن يكون مرشحًا جذابًا لعلاج الاضطرابات التنكسية العصبية ، مثل الخرف أو مرض باركنسون.

3.1.2. تحليل PhGs

باعتبارها المكونات النشطة الرئيسية فيسيستانشالنباتات، PhGs(pخنيلجليكوسيدات)تستخدم عادة كعلامات لتقييم جودة الأدوية الخام أو التركيبات المقابلة لها.

3.1.2.1. تحليل درجة الحموضة بواسطة كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة (TLC).

أنشأ Zhang أولاً طريقة تحديد TLC لـ acteoside (2) و echinacoside (11) و cistanoside A (3) فيهيرباسيستانشبواسطة هلام السيليكا ، باستخدام أسيتات إيثيل - ميثانول - 9 بالمائة حمض أسيتيك (20: 3: 2) كمذيب متطور ، ومحلول FeCl3 كمواد تلوين [65]. تم استخدام هذه الطريقة أيضًا في دستور الأدوية الصيني (2000) لتحديد مادة الأكتيوسايد (2) [8]. ومع ذلك ، في دستور الأدوية الصيني (2005) ، تم تغيير المادة الماصة للكروماتوغرافيا ذات الطبقة الرقيقة من هلام السيليكا إلى مادة البولي أميد من أجل الحصول على تأثير فصل أفضل بكثير ، وتم استخدام الميثانول - حمض الخليك - ماء (2: 1: 7) كمذيب نامي. اثنين من PhGs الرئيسية فيهيرباسيستانش، يمكن تحديد Echinacoside (11) و acteoside (2) في وقت واحد [9].

3.1.2.2. تحليل درجة الحموضة بواسطة قياس الطيف الضوئي فوق البنفسجي (UV).

كما ذكرنا سابقًا ، غالبًا ما توجد مجموعة سينامويل في تراكيب PhGs ، وبالتالي ، يمكن تحديد PhGs مباشرةً بواسطة الأشعة فوق البنفسجية أو بطريقة القياس اللوني بعد التفاعل مع بعض كواشف التلوين [66-72]. ومع ذلك ، كما نعلم أن طريقة القياس اللوني ليست طريقة معقولة للتحديد الدقيق للمكونات الكيميائية في الطب الصيني التقليدي ، نظرًا لعدم استقرارها وضعف استنساخها وخطأ اختبار ضخم. علاوة على ذلك ، فإن المعالجة المسبقة للعينات المكتشفة بواسطة الأشعة فوق البنفسجية أكثر صعوبة من الطرق الأخرى. وهكذا ، الآن ، لم تعد طريقة الأشعة فوق البنفسجية تستخدم لتقدير المركب النقي بعد الآن ، ولكن فقط لتحديد مجموع PhG بين الحين والآخر.

3.1.2.3. تحليل درجة الحموضة بواسطة تحليل كروماتوجرافي سائل عالي الأداء (HPLC). من بين جميع طرق التحليل ، يعد HPLC هو الأكثر استخدامًا للنوعية والكمية لـ PhGs ، ويلخص الجدول 4 الطرق المنشورة على تحليلات PhGs بواسطة HPLC في الأدبيات ، والتي سيتم تفصيلها على النحو التالي.

3.1.2.3.1. تحليل PhGs في الأدوية الخام والعينات البيولوجية والمنتجات المعقدة بواسطة HPLC.

في عام 1995 ، أجرى Xu مقارنة بين المكونات الكيميائية لـ C. أظهر تحليل HPLC أن التركيب الكيميائي لـ PhGs(pخنيلجليكوسيدات)بين هذين النوعين كانت متشابهة ولكن كميتها اختلفت [73]. في نفس العام ، أجرى موريا مقارنة بين المكونات الكيميائية لـ C. أظهرت النتائج أن السيستانوسيدات A (3) و C (5) وكمية ضئيلة من tubuloside A (17) كانت موجودة في Cd و C ، بينما فقط tubuloside A (17) كان موجودًا في Ct ، بدون cistanosides A (3) و C (5). أيضًا ، تم العثور على الكميات الإجمالية من PhGs في نباتات Ct و Cs أكثر من تلك الموجودة في نباتات الكادميوم [28]. من المفيد أن تقارن هذه الورقة الاختلاف بينسيستانشجنس من خلال تحليل متعدد المكونات ؛ ومع ذلك ، فمن المؤسف أن تحديد الكميات السبعة PhGs(pخنيلجليكوسيدات)تم إجراؤه فقط من خلال طريقة قياسية خارجية واحدة ، دون التحقق من صحة منهجية منهجية.

أجرى Tu تحليلًا نوعيًا لستة دكتوراه(pخنيلجليكوسيدات)والتحليل الكمي لاثنين من PhGs في جنس Cistanche بواسطة Rp-HPLC. أظهرت النتائج أن المكونات الكيميائية لـ C. albiflora و C. tubulosa كانت متشابهة ، بينما كانت تلك الخاصة بـ C. Sinensis مختلفة عن الآخرين [10]. أسس وانغ طريقة لتحليل سبع درجات حرارة في C. 74]. تمت مناقشة مسارات التجزئة للروابط الجليكوسيدية ورابطة الإستر وبعض الخسائر العصبية المثيرة للاهتمام لـ PhGs في هذه الورقة [74] وفي ورقة أخرى [75]. ومع ذلك ، لم يتم إثبات ميزة تقنية HPLC-MS بشكل شامل في هذه التحليلات ، لأنه تمت دراسة آلية تجزئة معايير PhG فقط. اعتماد هذه الآليات لتوضيح مركبات PhG غير المعروفة لإعطاء المزيد من المعلومات الكيميائية ، وقد تم إهمال دراسة آلية التجزئة لمركبات الهيكل العظمي الأخرى.

إلى جانب التحليل النوعي ، هناك أيضًا العديد من التقارير حول التحليل الكمي لـهيرباسيستاnches، ولا سيما من اثنين من PhGs الرئيسية(pخنيلجليكوسيدات)، إشنكوسايد (11) و أكتيوسيد (2). في عام 2000 ، أنشأ Zhang معيارًا للجودة لـ C. في عام 2003 ، تم إنشاء طريقة Rp-HPLC لاكتشاف إشنكوسايد (11) و acteoside (2) في Herba Cistanches المزروعة في نباتات وموائل عائل مختلفة. استخدم المؤلف مرحلتين متحركتين مختلفتين لتقدير إشنكوسايد (11) وأكتيوسايد (2) ، أي أسيتونيتريل - ماء - حمض أسيتيك جليدي (13: 86: 1) لإشنكوسايد وميثانول - ماء - حمض أسيتيك جليدي (32: 67: 1) لمضادات الأكسدة. أظهرت النتائج الأولية أن محتويات إشنكوسايد وأكتيوسيد تأثرت بشكل واضح بمضيفات مختلفة ، وكانت محتويات هذين المركبين في C. tubulosa المستضافة في Tamalrix L. المزروعة هي الأعلى [76].

بالنظر إلى أنه من الممل بعض الشيء تحديد مكونين في نفس المصنع باستخدام مذيلين مختلفين ، فقد تم إنشاء طريقة Rp-HPLC أبسط للكشف المتزامن عن إشنكوسايد (11) وأكتيوسيد (2) [77]. تبنى تشين بعد ذلك هذه الطريقة لتحديد محتويات إشنكوسايد (11) وأكتيوسايد (2) في البرية والمزروعة C. tubulosa [78]. أظهرت النتائج أن محتوى إشنكوسايد (11) كان أعلى بشكل ملحوظ من محتوى أكتيوسيد (2) في جميع العينات ، وأن محتوى هذين المكونين النشطين في البرية كان أعلى منه في المزروعة [78]. وتجدر الإشارة إلى أن تحضير العينة في هذا البحث اعتمد طريقة خلط الدُفعات المتعددة معًا ، مما يعني أن المؤلف قد أخذ في الاعتبار الفروق الواضحة في الجودة الفردية فيهيرباسيستانش.

منذ البريةسيستانشالأنواع على وشك الانقراض ، وتجري زراعة C. من أجل إعطاء بعض الإرشادات النظرية للزراعة ، تم تحليل العينات المزروعة المختلفة. حدد Cao محتوى PhGs(pخنيلجليكوسيدات)في الربيع والخريف مع LC-MS ، من أجل مقارنة عينات C. Deserticola التي تم جمعها في مواسم مختلفة. أربعة PhGs(pخنيلجليكوسيدات)، على سبيل المثال ، تم اختيار إشنكوسايد (11) ، أكتيوسيد (2) ، سيستانوسيد أ (3) ، و 2 - أسيتيل لاكتوزيد (1) كعلامات ، ولوحظ أن محتواها الإجمالي أعلى في الربيع منه في الخريف [79] . أجرى وانغ دراسة حول تباين المكونات الكيميائية في أوقات نمو مختلفة وأجزاء مختلفة من C. tubulosa المزروعة ، باستخدام بصمة الإصبع ومحتوى إشنكوسايد (11) كمؤشر. وجد أن التوزيع الكيميائي لل PhGs(pخنيلجليكوسيدات)كانت متشابهة بين العينات المختلفة ، ولكن كمية كل PhG ، وخاصة إشنكوسايد (11) ، كانت مختلفة بشكل كبير بين العينات المختلفة. بعد المقارنة ، خلص إلى أن وقت زراعة C. في هذا البحث ، وجد أن جودة النباتات المزروعة ليست أفضل من تلك البرية ، لذلك اقترح المؤلف أنه يجب تعزيز تقنية الزراعة لتحسين محتوى المركبات النشطة [80]. درس يانغ تراكم المادة الجافة ومحتوى إشنكوسايد (11) من C. tubulosa في سهل Huabei. أظهرت النتيجة أن تراكم المادة الجافة لنبات C. tubulosa كان في شكل متغير "S" ، وأن محتوى إشنكوسايد (11) كان الأعلى عندما نمت C. tubulosa لمدة 5 أشهر [81].

بخلاف ذلك ، تم استخدام تقنية البصمة ، وهي تقنية جديدة تركز على الخصائص النظامية والشاملة للعينات التي تم تحليلها أيضًا لتقييم جودةسيستانشالنباتات. كما ذكر أعلاه ، حلل وانغ المكونات الكيميائية وتنوعها في C. tubulosa المزروعة باستخدام بصمات الأصابع ومؤشرات أخرى [80]. أنشأ Xie بصمة كروماتوغرافية لـ C. أخيرًا ، تم العثور على اختلافات ملحوظة في جودة العينات من الموائل المختلفة [82]. وقد لوحظت نفس الظاهرة حتى أثناء بحثنا حول تقييم جودة C.

باستثناء الزراعة ، فإن الزراعة بواسطة الخلايا أو الكالس هي بديل جذاب آخر لحل نقص موارد Herbaسيستانش. أثناء عملية الزراعة ، تم وضع العديد من الأساليب التحليلية لتحليل النتيجة المزروعة ولتحسين الظروف المزروعة [83-88]. كما تم تلخيص الشروط التحليلية المقابلة في الجدول 4.

بالنسبة لتحليل PhGs في المنتجات المعقدة ، أبلغ Zhang عن طريقة تقدير كمية isoacteoside (12) في المجموعسيستانشكبسولات جليكوسيدات بواسطة HPLC [89]. أنشأنا طريقة لتحليل الأكتيوسايد (2) في كبسولات Shenqiyinao بواسطة HPLC [90] ، وقام Lei بتحديد إشيناكوسايد (11) في روح Congrong بواسطة HPLC [91]. النقطة الأساسية لتحليل PhGs(pخنيلجليكوسيدات)في المنتجات المعقدة هو تجنب اضطراب المكونات الأخرى ، لذلك ، عادة ما تكون المعالجة المسبقة للعينة وتحسين الظروف الكروماتوغرافية ضرورية.

3.1.2.3.2. التحليل الأيضي لـ PhGs بواسطة HPLC.

في عام 2001 ، أبلغ Lei لأول مرة عن عملية التمثيل الغذائي لـ PhGs(pخنيلجليكوسيدات)في الأمعاء المعدية لكلاب البيجل ، وتم عزل أربعة نواتج أيض ، إشنكوسايد (11) ، أكتيوسيد (2) ، أيزوكتيوسيد (12) ، و 2 - أسيتيل أكتيوسيد (1) من البراز بواسطة HPLC التحضيري [96]. في عام 2006 ، تم استقلاب الأكتيوسايد (2) وإشنكوسايد (11) ، وهما من المكونات النشطة الرئيسية لـهيرباسيستانشتمت دراستها على التوالي ، وتم تحليل الحرائك الدوائية والتوافر البيولوجي في الفئران [97،98،134]. أنشأنا طريقة LC-MS / MS حساسة مع استخلاص بسيط للطور الصلب لاكتشاف الأكتيوسايد (2) في بلازما الفئران ومتجانسات الأنسجة من أجل التحقيق في التوافر البيولوجي وتوزيع الدماغ في الجرذان التي تتحرك بحرية [97134]. طور جيا اقتران HPLC سريع وبسيط مع طريقة الأشعة فوق البنفسجية لتحديد محتوى إشنكوسايد (11) في مصل الفئران [98]. ومع ذلك ، تم العثور على التوافر البيولوجي لإشنكوسايد وأكتيوسيد ليكون فقط {{1 0}. 83 في المائة و 0.12 في المائة على التوالي ، وهو ما يتناقض مع التأثيرات البيولوجية الهامة ل PhGs(pخنيلجليكوسيدات)في الحيوانات [58-64]. في المستقبل ، يجب إجراء المزيد من الأبحاث لتوضيح عملية التمثيل الغذائي وآلية امتصاص PhGs(pخنيلجليكوسيدات).

3.1.2.4. تحليل PhGs(pخنيلجليكوسيدات)بواسطة كروماتوغرافيا عالية السرعة للتيار المعاكس (HSCCC).

HSCCC ، كروماتوغرافيا تقسيم سائل-سائل خالية من الدعم ، يزيل الامتزاز الذي لا رجعة فيه للعينة على الطور الثابت ويستخدم على نطاق واسع في الفصل التحضيري للمنتجات الطبيعية. بالمقارنة مع كروماتوغرافيا العمود الصلب والسائل التقليدي ، فإنه ينتج عنه استرداد وكفاءة أعلى. قام Lei بتطبيق HSCCC على فصل وتنقية الأكتوزيد (2) و 2- أسيتيل لاكتوزيد (1) من C. salsa باستخدام نظام مذيب رباعي الطور يتكون من إيثيل أسيتات - ن - بيوتانول - إيثانول - ماء ( 4: 0. 6: 0. 6: 5، v / v). كشف تحليل HPLC لكسور CCC أن اثنين من PhGs(pخنيلجليكوسيدات)كانت أكثر من 98 في المئة نقاء [99]. في وقت لاحق ، أنشأ لي طريقة باستخدام نظامين مذيب ، أحدهما يتكون من أسيتات الإيثيل - الإيثانول - الماء (5: 0. 5: 4.5 ، حجم / حجم / حجم) ، والآخر من أسيتات الإيثيل - ن - بيوتانول - إيثانول-ماء ({{1 0}}. 5: 0. 5: 0.1: 1 ، v / v / v / v) لعزل PhGs(pخنيلجليكوسيدات)من C. Deserticola. خمسة PhGs(pخنيلجليكوسيدات)، إشنكوسايد (11) ، سيستانوسيد A (3) ، أكتيوسيد (2) ، أيزوكتيوسيد (12) ، و 2 - أسيتيل لاكتوزيد (1) تم عزلها وتنقيتها ، وكانت درجة نقاء هذه المركبات المعزولة أعلى من 92.5 بالمائة تم تحديده بواسطة HPLC [100]. قدمت هذه الطرق مراجع جيدة لعزل وتنقية معايير PhGs في المستقبل.

3.2 بنزيل جليكوسيدات

في الآونة الأخيرة ، أبلغت Lei عن عزل وتوضيح هيكل ثلاثة بنزيل جليكوسيدات جديدة ، سالسايدات A - C (35-37 ، الشكل 2) من C. salsa ، والتي كانت أيضًا عبارة عن بنزيل جليكوسيدات معزولة منسيستانشالنباتاتلأول مرة [47]. تتشابه السمات الهيكلية لهذه الجليكوسيدات البنزيل مع تلك الخاصة بفينيل إيثانويد المعزول من هذا الجنس ، باستثناء أن كحول البنزيل استبدل الفينيثيلول في الأجليكون.

3.3 إيريديويدس

حتى الآن ، تم عزل ثلاثة أجليكون قزحي وأربعة عشر جليكوسيدات إيريدويد منسيستانشالنباتات(38-54 ، جدول 5) [102-109]. السمات الهيكلية للجليكوسيدات إيريدويد منسيستانشالنباتاتيتم تلخيصها على النحو التالي: يحدث الجلوكوز في موضع C1 من aglycone ، مع تكوين في H5 و H9 ؛ غالبًا ما يحدث الهيدروكسيل في مواضع C8 و C10 ؛ في بعض الأحيان ، قد يحدث الجفاف بين هيدروكسيل C10 مع C1 أو C3 لإعطاء جزء من الإيبوكسي.

3.4. قشور

تم عزل قشور قشور واحد وخامس جليكوسيدات قشدية من نباتات C. الهياكل الأساسية لهذه المركبات هي رباعي هيدرو فوران وقشور benzofuran. مصادر تلك C. tubulosa التي تم عزل العديد من قشور منها هي بشكل رئيسي من باكستان ، بينما تم عزل القليل من قشور من C. tubulosa التي تم جمعها في الصين. أثبت هذا كذلك أن الاختلافات الكيميائية موجودة بين C. tubulosa من الصين وباكستان [27،28].

3.5 السكريات ومشتقاتها

3.5.1. دراسة كيميائية على السكريات ومشتقاتها

تشكل الكربوهيدرات نسبة عالية من الكتلة الجافة للنباتات من أنواع Cistanche [110]. من بينها ، أحد السكريات الأحادية ، تم الإبلاغ عن galactitol باعتباره العنصر النشط الرئيسي مع نشاط ملين في Herba Cistanches [18،19،103،104]. بينما ، تم اعتبار السكريات كمكونات نشطة مع مناعة الجسم المتقدمة ، ومكافحة الشيخوخة ، والأنشطة المضادة للسرطان فيهيرباسيستانش[20,21,111–113].

في التسعينيات ، كانت الدراسات التي أجريت على عديد السكاريدسيستانشالأنواع قد ركزت على العزل / التنقية وتحليل تركيبة السكريات الأحادية [110،112،114-116]. الهياكل الدقيقة من السكريات منسيستانشلم يتم توضيح الأنواع حتى عام 1997. في الجدول 7 ، تم سرد الخصائص الهيكلية الموضحة للسكريات المعزولة من أنواع Cistanche. ومن المثير للاهتمام ، أن كل هذه العناصر تم عزلها عن C. الصحراء ، والسكريات في غيرهاسيستانشالنباتاتلم تدرس.

باستثناء هذه ، تم أيضًا عزل بعض مشتقات oligosaccharide ، مثل cistanoside F و cistanoside I و cistantubuloses A1 / A2 و cistansinensose A1 / A2 منهيرباسيستانش(الشكل 3) ، والتي هي في الواقع بقايا PhGs(pخنيلجليكوسيدات)بعد فقدان فينثيلول أجليكون. نظرًا لوجود تكوينات موجودة في الجلوكوز في الطبيعة ، في بعض الأحيان ، توجد مشتقات oligosaccharide هذه أيضًا على شكل شذوذ ، ويمكن ملاحظة هذه الظاهرة من إشارات NMR المزدوجة [37،39،40،11،45].

3.5.2. تحليل السكريات ومشتقاتها

من أجل تقييم جودةهيربا سيستانشبشكل شامل ، تم اختيار galactitol ، المكون النشط الرئيسي مع نشاط ملين في Herba Cistanches [18،19،97،98] مؤخرًا كمؤشر لتقييم جودةهيرباسيستانش، جنبا إلى جنب مع PhGs(pخنيلجليكوسيدات). من أجل إجراء تقييم شامل لجودة C. tubulosa من مناطق مختلفة ، طور Cai طريقة لتقدير الجالاكتيتول مقترنًا بـ echinacoside (11) و acteoside (2) بواسطة HPLC. تم اختيار ELSD ككاشف للجالاكتيتول ، نظرًا لامتصاصه الطرفي الضعيف في طيف الأشعة فوق البنفسجية ، وتم استخدام عمود هلام البوليمر Prevail Carbohydrate ES لفصله. تم قياس دفعات من C. أظهرت نتائجهم أن محتويات الجلاكتيتول ، إشنكوسايد (11) ، و أكتيوسيد (2) في قطعة مغلي C. tubulosa بالطريقة الموصوفة كانت أعلى بعدة مرات من تلك المجففة بالتشمس أو بالطريقة التقليدية [93]. بالإضافة إلى ذلك ، أنشأ Zhang طريقة تحديد TLC للمانيتول في C.

أما بالنسبة لتحديد محتوى السكريات فيسيستانشالأنواع ، حمض الفينول - الكبريتيك هو الطريقة الأكثر استخدامًا ، وتم تحديد محتوى السكريات في C. salsa من خلال طرق الاستخراج المختلفة ليكون من 11.61 في المائة إلى 13.22 في المائة [123-125]. ومع ذلك ، فهذه ليست سوى بعض النتائج التحليلية الأولية بسبب محدودية طريقة القياس اللوني.

3.6 القلويات والتحليل المقابل لها

حتى الآن ، تم عزل اثنين فقط من قلويداتسيستانشالأنواع ، أي البيتين (65) و N ، N-dimethyl glycine methyl ester (66) (الشكل 3) [126]. البيتين (65) عبارة عن مادة قلويدية يتم توزيعها بشكل شائع في النباتات ، لذلك هناك المزيد من التقارير حول تحليلها النوعي والكمي. قارن Zhang تباين محتوى البيتين في C. تم جمع طريقة TLC هذه أيضًا في دستور الأدوية الصيني 2000 [8] ، بينما تم اعتماد طريقة القياس الكمي هذه عن طريق قياس الألوان لاحقًا من قبل الآخرين لتحسين تقنية استخراجهيرباسيستانش[128129]. في عام 2007 ، أبلغ Gong عن طريقة HPLC للكشف عن البيتين في نباتات Cistanche المقترنة بكاشف ELSD ، وتم العثور على البيتين فقط في C. deserticola ، ولكن ليس في C. tubulosa. وهكذا ، اقترح المؤلف أنه ينبغي استخدام البيتين كعلامة للتمييز بين هذين النوعين من نباتات الكستانش [101]. ومع ذلك ، مع الأخذ في الاعتبار أن مجموعات العينات تتكون من مجموعتين فقط لكل نوع ، وأن أحد موائل C. tubulosa (يونان) غير مؤكد ، فقد أوصينا بضرورة إثبات هذا الاستنتاج بشكل أكبر. بالإضافة إلى ذلك ، تمت إزالة تحديد TLC للبيتين لـ Herba Cistanche من دستور الأدوية الصيني منذ عام 2005 ، نظرًا لخصائصه غير المحددة. وبالتالي ، فإن اعتباره كمؤشر وحيد لتحسين تقنية استخراج Herba Cistache لم يكن معقولًا [129].

3.7 مركبات أخرى

توجد كميات صغيرة من المركبات الأخرى ، مثل الجليكوسيدات الفينولية ، ومونوتيربينويدات ، والستيرول أو جليكوسيداتها ، والأحماض الدهنية ، والأحماض الأمينية ، وبعض العناصر النزرة ، وما إلى ذلك ، الموجودة في نباتات الكستانش [13،41،42،103،105،130–133].

4 - نتائج

في هذه المراجعة ، المكونات الكيميائية لـسيستانشالأنواع وطرق تحليلها. من بين التحليلات الموجودة ، تركزت الغالبية على PhGs(pخنيلجليكوسيدات)، و HPLC هي الطريقة الأكثر استخدامًا نظرًا لكفاءتها العالية ودقتها. من خلال تحليل الأعمال البحثية السابقة ، جنبًا إلى جنب مع سنوات دراستنا على أنواع Cistanche ، بعض المشاكل الرئيسية الموجودة في تحليلسيستانشالنباتاتتم تلخيصها على النحو التالي: الأول هو الاستخدام المختلط لمصدر الأنواع: C. ومع ذلك ، يتم استخدام نوعين آخرين من Cistanche ، C. salsa و C. Sinensis في بعض المناطق بسبب نقص الموارد. على الرغم من وجود العديد من المنشورات التي تشير إلى المقارنة بين الأنواع المختلفة [6-8] ، إلا أنها ليست مقنعة بما يكفي بسبب مجموعات العينات والعلامات المحدودة. وبالتالي ، من الضروري إنشاء طريقة شاملة ، مثل تقنية البصمات لتحليل الأدوية الخام من مصادر مختلفة نسبيًا. والثاني هو أن التناقض في جودة Herba Cistanches لم يتم إيلاء الكثير من الاهتمام له. أنواع Cistanche هي أعشاب طفيلية. هناك العديد من العوامل التي تؤثر على جودتها ، مثل المناخ والموائل والمضيفين ووقت الحصاد وطريقة المعالجة وأجزاء مختلفة من نفس النبات. أظهرت دراساتنا أن جودة أنواع Cistanche ليست مستقرة ، خاصة تلك الموجودة في البرية C. Deserticola [80،82،92]. ومع ذلك ، فقد تم إهمال هذه المشكلة في بعض التحليلات السابقة ، وتم استخدام عينة واحدة أو عينتين فقط [74 ، 76] ، مما قد يؤدي إلى استنتاجات غير دقيقة. لذلك ، في المستقبل ، يجب جمع المزيد من العينات وتحليلها للحصول على نتيجة أكثر موضوعية. والثالث هو أن التحليلات الحالية تركز بشكل أساسي على اثنين من PhGs الرئيسية(pخنيلجليكوسيدات)، إشنكوسايد (11) و أكتيوسيد (2) ، ولكن كما نعلم ، فإن التأثير الدوائي للطب الصيني التقليدي هو تعاون مكونات متعددة أو أنواع مختلفة من المكونات. وبالتالي ، فإن التحديد المتزامن للمكونات المتعددة النشطة يكون أكثر فائدة لمراقبة جودة الطب الصيني التقليدي. ومع ذلك ، حتى الآن ، لم يكن هناك تحليل كمي لأكثر من ثلاث درجات PhGs فيهيرباسيستانش، حتى لا يوجد تقرير عن تحليل جليكوسيدات البنزيل ، الإيريويد ، والليغنان. بعد ذلك ، يجب أن تعزز الأبحاث المستقبلية دراستهم التحليلية والصيدلانية. بشكل عام ، لا يزال البحث الحالي حول تحليل أنواع Cistanche في حالة منخفضة المستوى. Herba Cistanches هي أدوية منشط مهمة ، ولكن في الواقع ، لا يمكن التحكم في جودتها بشكل فعال إلا من قبل ممثلين PhGs(pخنيلجليكوسيدات)[9]. يُنظر إلى الجمع بين تحديد المكونات المتعددة مع بصمات الأصابع على أنه نهج قوي لمراقبة جودة أشكال الطب الصيني التقليدي. في المستقبل ، يجب تحسين مستوى البحث عن أنواع Cistanche في هذين المجالين. إنشاء طريقة يمكن أن التحليل النوعي والكمي في وقت واحد من PhGs ، iridoids ، والمكونات النشطة الأخرى فيهيرباسيستانشسيكون اتجاهًا بحثيًا ذا مغزى.

سيستانشتوبولوساله العديد من التأثيرات ، انقر هنا لمعرفة المزيد

شكر وتقدير

تم دعم هذا العمل ماليًا من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم 30472070) ، ومن برنامج مواهب القرن الجديد ، وزارة التعليم في الصين (رقم 985-2-102-113) ، والمؤلفون ممتنون أيضًا لـ Xiaoming Liu و Zhihong Song و LiLei من جامعة بكين لمساعدتهم الفنية الخبراء.

من: 'تحليل المكونات الكيميائية فيسيستانشالأنواع "بواسطة Yong Jiang ، Peng-Fei Tu

--- Journal of Chromatography A، 1216 (2009) 1970–1979