نانوريبون مضاد للأكسدة من أكسيد الجرافين كعامل تبييض جديد يمنع عامل النسخ المرتبط بالميكروفين آلية تكوين الميلانين

اتصال:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساب: 008618081934791

نبذة مختصرة:في الالميلانينتلعب عملية التوليف والتفاعلات المؤكسدة دورًا أساسيًا ، وهي استراتيجية جيدة لتثبيط إنتاج الميلانين عن طريق تقليل الإجهاد التأكسدي. تم اعتبار الفوليرين ومشتقاته ، أو المجمعات ، كاسحات قوية للجذور الحرة ، وقمنا أيضًا بتطبيق sp2nanocarbon متعدد الطبقات لاكتشافالميلانينآليات تثبيط التوليف: في الدراسة الحالية ، استخدمنا مواد نانوية جديدة ، مثل الأنابيب النانوية الكربونية متعددة الجدران (MWCNTs) ، و MWCNTs قصير المدى ، وأكسيد الجرافين النانوي (GONRs) ، و GONRs من النوع القصير ، والعوامل المؤكسدة أسانتي لتنظيمالميلانينإنتاج. أظهرت النتائج أن GONRs لديها قدرات مضادة للأكسدة أفضل في منصات تحليل الإجهاد التأكسدي داخل الخلايا وخارج الخلية من غيرها. اقترحنا أن تحتوي GONRs على مجموعات وظيفية تحتوي على الأكسجين. في اختبار ثنائي كلورو ثنائي كلورو فلورسيسين ثنائي كلورو فلورسين ثنائي الأسيتات ، اكتشفنا أن GONR يمكن أن يخلّب أيونات المعادن لأنواع الأكسجين النشطة. في وجهة نظر البصيرة الجزيئية ، لاحظنا أن هذه المواد النانوية قللت من تنظيم تخليق الميلانين عن طريق تقليل التعبيرات الجينية المرتبطة بعامل النسخ المرتبط بالميكروفيلم ، وكانت هناك عواقب مماثلة في تعبيرات البروتين. خلاصة القول ، إن GONRs عامل محتمل كروايةمضادات الأكسدةومواد التجميل لتبييض البشرة.

cistancheتمنع تكوين الميلانين

1 المقدمة

الجلد هو العضو الذي يغطي السطح الخارجي لجسم الإنسان. نظرًا لأن الواجهة تلامس البيئة ، تلعب طبقة الجلد دورًا مهمًا في حماية الجسم من مسببات الأمراض ، وتجنب فقدان الماء الزائد ، وتنظيم درجة حرارة الجسم ، وما إلى ذلك. تنمو الخلايا الصباغية في الغشاء القاعدي لبشرة الجلد وتمثل 5 إلى 10 في المائة من المحتوى الخلوي. وقد تم تصنيفها على أنها "غدد" غير متصلة بالخلية لها تشعبات رفيعة وطويلة تشبه الدفق المتفرعة ومتفرعة. تتحرك الخلايا الصباغية عبر خلايا البشرة في جوارها المباشر ، مكونة كوكبة من الخلايا الجلدية حول كل خلية صباغية. هناك العديد من الأسباب الداخلية والخارجية لشيخوخة الجلد ، وأحد هذه العوامل هو الأشعة فوق البنفسجية من أشعة الشمس .1 أثناء التعرض للأشعة فوق البنفسجية ، تزداد مستويات أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) في الجلد بشكل كبير ، وهو ما يُعرف باسم الإجهاد التأكسدي. يعزز أيضًا الأكسدة للجلد ، مثل المبيدات الحشرية ورابع كلوريد الكربون والمعادن الثقيلة والأمينات العطرية والجسيمات 2.5 (PM2.5) .2 في الآلية الكيميائية الحيوية ، يتم إنتاج المؤكسدات داخل الخلايا من النظام غير الأنزيمي ، ROS لتحفيز مسار تكون الميلانين.

بالإضافة إلى ROS ، هناك العديد من العوامل التي تؤثر على إنتاج الميلانين ، بما في ذلك التعبير الجيني ، والالتهاب ، وتغيرات الغدد الصماء ، وامتصاص الصباغ .1 في الخطوات الأولى لإنتاج الميلانين ، يلعب التيروزيناز دورًا في تحفيز التيروزين إلى فيوميلانين وإيوميلانين. تتشابه آليتا تصنيع الأصباغ ، والتي تتضمن L-tyrosine hydroxylation إلى 3 ، 4- dihydroxy-L-phenylalanine (L-DOPA) وأكسدة L-DOPA إلى dopaquinone. في الخطوة التالية ، يتأكسد الدوبامين بواسطة البروتين المرتبط بالتيروزيناز 1 (TRP -1) والبروتين المرتبط بالتيروزيناز 2 (TRP -2) in melanosome ، والذي ينظمه عامل النسخ المرتبط بالميكروفيلم (MITF) لتشكيلالميلانينأخيرًا ، ينضج الميلانين ويترسب داخل الطبقة القرنية .4،5 تخترق هذه الخلايا الكيراتينية المجاورة للطبقة القاعدية وتحمي حمضها النووي من أي طفرات أو تعديلات ناتجة عن الأشعة فوق البنفسجية. نضجتالميلانينداخل الميلانوسومات يتم نقله إلى الخلايا الكيراتينية ويؤدي في النهاية إلى تصبغ طويل الأمد. النمش والنمش والبقع البنية / السوداء تسبب مشاكل اجتماعية عند الرجال والنساء في بعض الأحيان. يُعد منع الإجهاد التأكسدي أو تثبيط نشاط التيروزيناز إحدى الاستراتيجيات لتقليل متلازمة فرط التصبغ والاضطرابات الجلدية.مضادات الأكسدةشفاء التصبغات المفرطة والأضرار الخلوية التي تسببها أنواع الأكسجين التفاعلية .10،11 لذلك ، تحتوي المركبات المضادة للأكسدة المركبة على العديد من التطبيقات الوظيفية الحيوية في تطبيقات العناية بالبشرة.

إن الفوليرين (C60) ، والأنابيب النانوية الكربونية (CNT) ، والجرافين ، والجرافين النانوريبون (GNR) هي أربعة أنواع من الكربون النانوي sp2 التي تم البحث عنها على نطاق واسع في جميع أنحاء العالم. يودوه وآخرون. يستخدم C60 القابل للذوبان في الماء كعامل وقائي ضد التنكس الناجم عن الإجهاد التقويضي. إنجاك وآخرون خلص إلى أن C60 (OH) 24 قويمضادات الأكسدةمركب عندما يكون الإجهاد التأكسدي مرتفعًا جدًا. أوكودا وآخرون اقترح أن مجمعات C60 يمكن أن تمنع إصابة الخلايا غير الوسيطة .13،14 Tong et al. أظهر أن مركبات C60 قد تكون مرشحة واعدة لعلاج الأمراض المرتبطة بالدماغ الناتجة عن زيادة مستويات الأكسيد الفائق. في الواقع ، حددت شركة يابانية الفوليرين مع نشاط قوي مضاد للأكسدة للاستخدام في مستحضرات التجميل في عام 2006. Lucente Schultz et al. أظهر أن قابلية الكسح الجذري للأكسجين للأنابيب النانوية الكربونية أحادية الجدار الوظيفية (SWCNTs) أكبر بحوالي 40 مرة من تلك الموجودة في C60.15 - 19 شجيري Fenoglio et al. لاحظ أن الأنابيب النانوية الكربونية متعددة الجدران (MWCNTs) تمتلك قدرة ملحوظة على الكسح الجذري عند التلامس مع مصدر خارجي لجذور الهيدروكسيل أو الأكسيد الفائق. كشفت حسابات نظرية الكثافة الوظيفية أيضًا عن نموذج لـ SWCNTs على أنها كاسحات للجذور الحرة. في عام 2004 ، أظهر نوفوسيلوف وزملاؤه أولاً أن الجرافين أظهر تأثيرًا قويًا للقطب الكهربائي ويمكن أن يكون واعدًا للتطبيقات الإلكترونية .21 وبعد ذلك ، استمروا في إظهار أن للجرافين خصائص إلكترونية مميزة لغاز ثنائي الأبعاد من الجسيمات الموصوفة في معادلة ديراك. 22،23 سينسيثيان ورقتان رائدتان ، تم إيلاء المزيد والمزيد من الاهتمام للبحوث القائمة على الجرافين. في عام 2014 أظهر أن أكسيد الجرافين وقليل من طبقات الجرافين يظهران بشكل كبيرمضادات الأكسدةالنشاط ويمكن أن تحمي جزيئات الجزيئات الحيوية المختلفة من الأكسدة .31 Han et al. أثبت تجريبياً في عام 2007 أنه يمكن التحكم في فجوة الطاقة في GNRs أثناء عملية الطباعة الحجرية عن طريق تغيير عرض الشريط .32 من بين الكربونات النانوية الأربعة ، حظيت GNRs بأقل قدر من الاهتمام. على حد علمنا ، هناك القليل من الأبحاث حول الخصائص المضادة للأكسدة لأكسيد الجرافين النانوية (GONRs). وبالتالي ، في هذه الدراسة ، قمنا بإعداد MWCNTs و MWCNTs القصيرة و GONRs و GONRs القصيرة بهدف مقارنة خصائصها المضادة للأكسدة والنتائج ذات الصلة بشكل منهجي. .

2. النتائج والمناقشة

2.1. مورفولوجيا MWCNTs و GONRs.

Figure 1a shows the low- and high-magnification transmission electron microscopy (TEM) images of MWCNTs and short MWCNTs. Following acidic cutting under ultrasonication, the length of MWCNTs could be shortened from >1 0 ميكرومتر إلى2−3 ميكرومتر. في الوقت نفسه ، لوحظ أن معالجة حمض النيتريك تخفف أسطح الأنبوب الملساء. يتم عرض بعض الشقوق والأشكال غير المنتظمة في صورة عالية التكبير. علاوة على ذلك ، فإن استخدام MWCNTs و MWCNT قصير من خلال تفاعلات الميكروويف يحصل على GONR و shortGONR ، على التوالي. لقد أوضحنا أيضًا صور TEM ذات التكبير المنخفض والعالي لـ GONR و GONR القصير. بسبب فك الضغط الطولي الرئيسي والقطع الأفقي الصغير ، يبدو أن GONRs كانت أقصر من MWCNTs. من ناحية أخرى ، أظهرت الصور عالية التكبير أقطارًا أكبر ، أي 0. 11−0.18 ميكرومتر ، من GONR من تلك الخاصة بـ MWCNTs ، مما يشير إلى أن عملية فك الضغط كانت ناجحة. وبالمثل ، أظهرت GONRs القصيرة طولًا أقصر وقطرًا أكبر من MWCNTs القصيرة. في الضاغط الجوي لعملية فك الضغط الجديدة ، كانت الهياكل الرقيقة للطبقات GONRs أقل مما حصلنا عليه في التقرير المبكر لنفس قوة الميكروويف البالغة 250 واط مع الحفاظ على MWCNTs المركزية الأكثر سمكًا. تظهر بدلاً من بنية الشريط النانوي غير المضغوطة بالكامل من خلال جميع قوى الميكروويف في العملية الجديدة. للمقارنة مع GONR القصير في دراساتنا السابقة ، 34 ولدت طاقة الميكروويف الأعلى المزيد من الشقوق على جانب الشرائط ولم تشكل أشرطة ناعمة لطيفة. لاحظ أننا استخدمنا نوعين مختلفين من شبكات النحاس في الشكل 1 أ. بالنسبة إلى MWCNTs و GONRs ذات الطول الكافي ، تم استخدام شبكةGu ذات الشكل اللامع مع الكربون (رقم المنتج. 01881- F ، Ted Pella ، Inc. ، الولايات المتحدة الأمريكية). حالت الثقوب المفتوحة في فيلم الكربون اللاسي دون تداخل صورة النقل بين الكربون النانوي والغشاء الكربوني. تنتمي الشبكات ذات اللون الرمادي الغامق إلى فيلم الكربون ليسي ، ومع ذلك ، فإن شبكة Gu ذات الشكل المستقر مع الكربون (المنتج رقم 01800- F ، Ted Pella ، Inc. ، الولايات المتحدة الأمريكية) كانت مطلوبة لـ MWCNT القصير و GONR القصير. كان هذا بسبب أن الثقوب في فيلم الكربون لاسي تسببت في حدوث مشاكل في الاحتفاظ بـ MWCNT القصير و GONR القصير بكفاءة. كما هو موضح في الشكل 1 ، فإن التباين الرمادي الفاتح أسفل MWCNTs القصير و GONRs القصير عبارة عن طبقة خفيفة من الكربون. هذه الطبقة الكربونية استقرت في غشاء فورفار الذي تعرض لحزمة الإلكترون من خلال خصائص توصيل الحرارة والكهرباء.

2.2. تكوينات الترابط من MWCNTs و GONRs.

يتم عرض أطياف رامان لأربعة كربونات النانو في الشكل 1 ب ؛ كان النطاق D لـ GONRs أعلى من نطاق MWCNTs بعد عملية فك الضغط. يعزى ذلك إلى ارتفاع مستوى الأكسدة وعدد أكبر من هياكل الحواف لـ GONR مقارنة بـ MWCNTs. تتشابه هذه الظاهرة أيضًا مع ما لاحظناه في 2 0 11.12 نظرًا لمستوى الرسم البياني العالي ، فإن النطاق G من MWCNTs كان لديه أقل عدد من العرض الكامل بنصف الحد الأقصى. كانت نسب المعرف / IG للأربعة مركبات النانوية 0. 0 76 و 0. 5 0 2 و 0.483 و 0.700 على التوالي. باختصار ، أدى انخفاض الطول وأكسدة السطح إلى زيادة مستوى الخلل وبالتالي جعل نسبة ID / IG أعلى. توجد ذروة D في جميع الرسوم البيانية المعيبة ويتم عرضها كمقياس للجودة .35 كما هو موضح في الشكل 1 ب ، تصبح قمم D ′ في الأطياف الأربعة أكثر بروزًا بعد عملية القطع أو فك الضغط ، مما يشير إلى أنها كانت عمليات مدمرة تقدم عيوب كثيرة. الشكل 1 ج ، يعرض أطياف التحليل الطيفي للأشعة السينية لأربعة كربونات نانوية. على ما يبدو ، فإن قمة D ′ هي الأوضح بالنسبة لـ GONRs القصيرة. كما هو مبين في الشكل 1 ج ، ارتفع مستوى O بشكل ملحوظ من 7.6 بالمائة (MWCNTs) إلى 19.9 بالمائة (GONRs) بسبب قدرة الأكسدة القوية لـ KMnO4 في بيئة حمضية. من ناحية أخرى ، ارتفع مستوى O بشكل طفيف بنسبة 0.8 في المائة من MWCNT إلى MWCNTs القصيرة. الأهم من ذلك ، أن أعلى مستوى O هو 38.3 في المائة لـ GONR القصير ، مما يعني أن نهايات النانوريبونات سيكون من الأسهل إرفاق مجموعات وظيفية للأكسجين من الأسطح المستوية sp2. يوضح الشكل 1 د الرقم الأقصى للعرض الكامل عند النصف والتحول إلى طاقة الربط العالية لقمم C 1s بعد عملية فك الضغط لكل من MWCNTs و MWCNTs القصيرة. يمكن تعيين الجانب إلى روابط C C (CC) و C O و CO و COOH. 36 قمنا بتمييز GONR (200W) في عام 2013 ، وكانت النتائج مشابهة لنتائج هذه الدراسة. ظاهرة أطياف رامان ، مما يعني أن المزيد من المجموعات الوظيفية المحتوية على الأكسجين قد تم إنشاؤها أثناء التحول من أنبوب إلى شريط (الشكل 2).

2.3 الخصائص المضادة للأكسدة لـ MWCNTs و GONRs.

2.3.1. تحديد 1 ، 1- Diphenyl -2- picrylhydrazyl free Radical scavising Activity.

1 ، 1- ثنائي فينيل -2- بيكريلهيدرازيل (DPPH) يعتبر نشاط مسح الجذور الحرةمضادات الأكسدةمنصة مطبقة للكشف عن القدرة المضادة للأكسدة ؛ تم وصف نتائج الكربونات النانوية الأربعة في الجدول 2. في اختبار DPPH ، تم استخدام فيتامين C بتركيز 1 0 0 ميكرومتر كعنصر تحكم إيجابي. اختبار الأنشطة المضادة للأكسدة لـ MWCNTs ، و MWCNTs القصيرة ، و GONRs ، و GONRs القصيرة ، تم تحضين جرعات 1 و 5 و 1 0 مجم / لتر في محلول التفاعل لقياس الخصائص. تتمتع MWCNTs و MWCNTs القصيرة و GONRs و GONRs القصيرة بقدرات تثبيط معتدلة عند 1 {{2 0}} ملغم / لتر (19.2 ± 0. 3 و 12.1 ± 0.3 و 26.8 ± 0.3 و 30.0 ± 0.4 بالمائة) ، بينما فيتامين تشاد حالة مماثلة عند 100 ميكرومتر (93.4 ± 0.1 بالمائة) للقمع.

2.3.2. فحص نشاط الأيونات المخلبية.

في حالة الإجهاد المؤكسد ، يمكن للفيروزين تطوير معقد مع Fe2 plus ليتم قياسه كميًا. في وجود الوسطاء المخلبين ، ينكسر المركب ، مما يتسبب في تمزق الأيونات الحديدية من اللون الأحمر الداكن لمركب Fe2 plus. استخدمنا EDTA كعنصر تحكم إيجابي. يوضح الجدول 2 أن MWCNTs ، و MWCNTs القصيرة ، و GONRs ، و GONRs القصيرة كان لها نشاط مخلب عند 1 0 ملغم / لتر (29.2 ± {{1 {14}}}. 8 ، 28.7 ± 0. 7 ، 69.7 ± 0. 6 ، و 68.9 ± 0.3 بالمائة) ، بينما كان لعنصر التحكم الإيجابي حالة مماثلة عند 100 ميكرومتر (93.4 ± 0.1 بالمائة).

2.3.3. قياس الطاقة المضادة للأكسدة الحديديك.

المقايسة المحتملة لخفض الحديديك هي اختبار بسيط وموثوق يستخدم لتحديد تخليق مركب Fe (III) −ferricyanide. في هذا الاختبار ، تم اكتشاف القوة المختزلة للكربون النانوي الأربعة المنتجة لمركب الحديد (III) −TPTZ من خلال التغيرات في لون المحلول من الأصفر إلى الأخضر والأزرق. يوضح الجدول 2 أن قوى الاختزال لـ MWCNT ، و MWCNT القصير ، و GONR ، و GONR القصير كانت كثافة بصرية (OD) 1.11 ، 1.13 ، 1.15 ، 1.11 عند 10 مجم / لتر.

2.3.4. تمنع MWCNTs و GONRs تراكم ROS داخل الخلايا.

أظهرت العديد من التقارير أن أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) تدمر السلامة الهيكلية لأغشية الخلايا ، بما في ذلك أغشية الخلايا والأغشية النووية مما يؤدي إلى تلف الخلايا وفقدان الوظيفة الطبيعية. يعتبر منع إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية استراتيجية جيدة للتنظيمالميلانين synthesis. In this study, we used the 2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFDA) staining assay to analyze the intracellular oxidative stress level in MWCNT and GONR treatment cells. Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) induced oxidative stimulations in MWCNT and GONR groups and was used as a negative control.41 When the concentration of PMA was 20 ng/mL, it induced oxidative stress, increasing the value to 38%; after treating GONRs and MWCNTs, the levels of ROS were downregulated to the normal level. The data showed that both materials inhibited oxidative stress levels, and the anti-oxidative effect of GONRs was higher than that of MWCNTs (Figure 3). Table 1 shows a similar consequence list. We contended that there are three reasons for our new findings: first, the order of solubility of these materials was as follows: short GONRs > GONRs >MWCNTs القصيرة> MWCNTs ، مما يعني أن منطقة التلامس الخاصة بـ GONRs القصيرة كانت الأكبر ، لذلك كانت متفوقة في مسح ROS. ثانيًا ، كانت GONRs و MWCNTs عبارة عن 2- هياكل كربون يمكن أن تدمر كهرباء ROS من خلال التقريب أو نقل الإلكترون .42 وجدنا أنتأثيرات مضادات الأكسدةكانت الهياكل النانوية أفضل من تلك الموجودة في هياكل الأنابيب النانوية ، لذا فإن الأشرطة النانوية تجعل نقل الإلكترونات أسهل من الأنابيب النانوية. أخيرًا ، في الشكل 1 ب ، لاحظ أن موقع الكربون GONR sp 2- يحتوي على مجموعات وظيفية أكسجين أكثر من MWCNTs ، ويمكن لمجموعات الأحماض الكربوكسيلية أن تخلّب أيونات المعادن ، ويمكن أن تكون مجموعات الهيدروكسيل متبرعًا بالـ H لكبح ROS وتثبيط إنتاج الميلانين.

2.4 السمية الخلوية لـ MWCNTs و GONRs المعالجة في خلايا الخلايا الليفية الجلدية البشرية.

تم تطبيق طريقة {0} (4 ، 5- Dimethylth-triazole -2- yl) -2 ، 5- diphenyltetrazolium bromide (MTT) لتقييم السمية الخلوية تمت تربية خصائص GONRs على خلايا Hs68 (الشكل 3) ، وخلايا بجرعات مختلفة من 1 و 5 و 10 ميكروغرام / مل. لقد فحصنا أن قابلية بقاء الخلية لـ MWCNT كانت 100.7 ± 3.7 ، 99.8 ± 4.9 ، و 94.1 ± 4.7 بالمائة بتركيزات 1 و 5 و 10 ملغم / لتر ، على التوالي ؛ تم حساب الجدوى الخاصة بـ MWCNT القصير بنفس الترتيب وتم العثور عليها لتكون 93.9 ± 2.2 ، 86 .4 ± 3.0 ، و 98.9 ± 2.1 بالمائة. لقد لاحظنا أن خلايا B16 - F10 حضنت بتركيزات عالية ، وأن بقاء خلايا Hs68 كان أكثر من 80 في المائة ، مما يشير إلى أن MWCNT و MWCNT القصير لم يكن لهما تأثير سام على خلايا الخلايا الليفية الجلدية البشرية. كانت إمكانيات الخلية لـ GONR و GONR القصير 86. 24 ± 2.1 ، 90.87 ± 3.5 ، 88.58 ± 2.5 ، 89.03 ± 3.6 ، 90.71 ± 2.8 ، و 90.64 ± 2.5 بالمائة. يشار أيضًا في الشكل 4 أ إلى أن GONR و shortGONR لم يكن لهما تأثير سام للخلايا واضح على خلايا HS68. في التقارير السابقة ، يمكن اعتبار استخدام الأغراض التجميلية للمواد النانوية غير المختبرة أمرًا مشكوكًا فيه ، وكان ذلك عادةً بسبب هجوم الحمض النووي بعد دخول الجسيمات النانوية إلى الخلايا. بعد اختبار السمية الخلوية ، وجدنا أن موادنا لا تسبب سمية لخلايا الجلد الطبيعية. استنتجنا أنه بعد دخول المواد النانوية إلى الخلايا ، فإن المواد النانوية تمنع فقط إنتاج الميلانين عن طريق تقليل الإجهاد التأكسدي وأيونات المعادن المخلبية ولا تلحق الضرر بالميتوكوندريا أو الحمض النووي ، مما يعني أن MWCNTs و GONRs كانت آمنة للاستخدام.

2.5 نوعان من MWCNTs و GONRs في نشاط التيروزيناز الخلوي B16 F10 ومحتوى الميلانين.

في الالميلانينمسار التوليف ، يلعب التيروزيناز دورًا مهمًا ، حيث يتأكسد التيروزيناز ويشكل الإيوميلانين والفيوميلانين من خلال سلسلة من التفاعلات الكيميائية الحيوية. من أجل تحديد ما إذا كانت GONRs و MWCNTs تثبط أنشطة التيروزيناز وتسبب انخفاضًا في إنتاج الميلانين ، قمنا بتحليل نشاط التيروزيناز في خلايا B16 − F10. وجدنا أن MWCNTs و MWCNTs القصيرة تثبط نشاط التيروزيناز بحوالي 17.1 في المائة و 23 في المائة عند 10 ملجم / لتر. كان لـ GONRs و GONRs القصيرة تأثير أفضل في قمع نشاط التيروزيناز بنفس التركيزات مقارنة بـ GONR آخر. كانت أيضًا بطريقة تعتمد على الجرعة وتم تثبيتها بنسبة 49.8 في المائة و 44.7 في المائة من نشاط التيروزيناز ، كما هو موضح في الشكل 4 ب.

الميلانينهو صبغة لا غنى عنها في جسم الإنسان ، إلا أن الإفراط في إفراز الميلانين يؤدي في كثير من الأحيان إلى سلسلة من الأمراض. في الدراسات السابقة ، Xiao et al. استخدم مادة مماثلة ، الإسفنج الراديكالي ، جسيمات نانوية من الفوليرين ، كمضاد للميلانين .45 كانت هناك بعض النتائج الجيدة ؛ حوالي 20 في المئة منالميلانينيمكن منع الإنتاج. من أجل تحسين كفاءتها ، قمنا بتحسين مادة الاختبار لقياس معدل تثبيط الميلانين وآليته الجزيئية ، كما هو موضح في الشكلين 4 ج و 5. MWCNTs و MWCNTs القصيرة قللت محتوى الميلانين بمقدار 17.6 ± 5.5 و 13.2 ± 0. 2 في المائة بتركيز 1 0 ملغم / لتر وبطريقة تعتمد على الجرعة. خفضت GONRs و GONRs القصيرة بقوة القيم إلى 32.0 ± 2.3 و 35.3 ± 3.4 في المائة عند 10 مجم / لتر. اقترحت النتائج التجريبية أن جميع الأنواع الأربعة يمكن أن تمنع تخليق الميلانين وأن GONRs لها تأثير أقوى. من ناحية أخرى ، لاحظنا أيضًا أن GONR القصير له تأثير أفضل في تثبيط إنتاج الميلانين. نستنتج أن GONRs القصيرة لديها مجموعات وظيفية أكثر ويمكن أن تمنع بشكل فعال التيروزيناز المحفز بأيونات المعادن ، مما يثبط إنتاج الميلانين (الشكل 2). في الجدول 1 ، نلاحظ أن الجهد من النوع القصير المخلب للأيونات المعدني أعلى من النوع العادي ؛ هذا يعني أنه يمكن تطبيق GONRs القصيرة هذه في مجال مستحضرات التجميل كعوامل للعناية بالبشرة.

2.6. تمنع آلية MWCNTs و GONRs محتوى الميلانين الخلوي B16 F10.

تستجيب الخلايا للإجهاد التأكسدي الخارجي من خلال تنظيم التعبير عن البروتين. تعمل خلايا B16 − F10 على تعزيز التعبير الجيني c-myc و AMPK المنظم لتقليل مستويات الأكسدة ، 46 وفي هذا العمل ، MITF هو عامل نسخ محدد للتيروزيناس لتنظيم مسار إشارة تخليق الميلانين الجزيئي .47-49 في الشكل 5 أ ، MWCNTs و GONRs تنظيم عامل النسخ المرتبط بالميكروفيلم عن طريق تقليل الإجهاد التأكسدي ، وبعد ذلك ، تم أيضًا تقليل تنظيم الجين المصب TRP -1 و TRP -2. بالنسبة لمستوى البروتين ، تم العثور على ظاهرة مماثلة ، حيث قامت MWCNTs و GONR بتنظيم مسار تكوين الميلانين المرتبط بـ MITF ثم خفضت أخيرًاالميلانينالمحتوى (الشكل 5 ب).

cistanche كمال الاجسام

3. المواد والطرق التجريبية

3.1. إعداد MWCNTs و GONRs.

تم الإبلاغ عن العملية ذات الصلة لصنع GONRs في ورقة سابقة. تم تعليق 12 MWCNT (0. 0 5 جم) في 9: 1 H2SO4 / H3PO4 ومعالجتها بمفاعل ميكروويف (CEM-Discover) مع مجموعة الطاقة عند 250 وات لمدة دقيقتين. بعد إضافة KMnO4 (0.25 جم) إلى المحاليل ، تمت معالجة المحاليل بقوة الميكروويف نفسها عند 65 درجة لمدة 4 دقائق ، ثم قمنا بتعديل هذه العملية باستخدام وقت ميكروويف أقصر للمرحلة الثانية يبلغ 8 دقائق باستخدام ضاغط هواء. هنا ، يتم استخدام ضاغط الهواء للتحكم في درجة حرارة تفاعل الميكروويف أثناء العملية. تم ضبط طاقة الميكروويف على 250 واط في الاختبارات الأولية.

3.2 إعداد MWCNTs قصيرة و GONRs قصيرة.

تم الإبلاغ عن العملية ذات الصلة لجعل GONRs قصيرة في ورقتنا السابقة .34 تم اختيار وقت المعالجة الحمضية 8 ساعات. تم ضبط طاقة الميكروويف على 250 واط ، وهو نفس الشيء للحصول على GONRs.

3.3 نشاط الكسح الجذري DPPH.

تم استخدام DPPH بشكل متكرر لتحديد قدرة الكسح للعينات وخصائص مضادات الأكسدة. 50 DPPH هو كاشف أرجواني يغير اللون من اللون الأرجواني إلى الأصفر إذا تم نقل الجذور الحرة إلى التحليل. تمت إضافة عينات موجبة مضادة للأكسدة بتركيزات مناسبة إلى المحلول ، وتم تحليل العينات عند 517 نانومتر لمدة 30 دقيقة. استخدمنا النسب المتبقية من DPPH بالإضافة إلى عينات الاختبار لقياس عددمضادات الأكسدةالمطلوب toreduce جذور DPPH السابقة. تم استخدام فيتامين ج عند 100 ميكرومتر كعنصر تحكم إيجابي. تم قياس نشاط الكسح (النسبة المئوية) على أنه

3.4. نشاط استخلاب المعادن.

أيون المعدن هو العامل الذي يسبب أكسدة مفرطة للدهون ، و Fe2 plus هو واحد من أكثر الأيونات المؤثرة. 50 تم تحميل تركيزات مختلفة من المواد الحيوية النانوية (1 ميكرولتر) في 96- صفيحة بئر ، والتي تحتوي على 2 ملي مولار FeCl2 · 4H2O ( 10 ميكرولتر) ، ثم تحميلها في فيروزين (5 ملم ، 20 ميكرولتر). تم مزج الخليط بالكامل مع 69 ميكرولتر منثول وحفظه في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. بعد ذلك ، لوحظ محلول تفاعل العينة عند 562 نانومتر. تم استخدام EDTA كعنصر تحكم إيجابي عند 100 ميكرومتر ، واستندت صيغة حساب نشاط خالب المعادن على مكافئ 1.

3.5 الحد من قوة.

يعتمد حساب الاختزال على دراسة سابقة 50 أولاً ، تم خلط 2.5 ميكرولتر من مادة الجرافين مع محلول PBS (67 ملي مولار ، ودرجة الحموضة 6.8) و K3Fe (CN) 6 (2.5 ميكرولتر ، 20 بالمائة) ثم حضنت عند 50 درجة لمدة 20 دقيقة. بعد ذلك ، تم مزج 10 في المائة من حمض ثلاثي كلورو أسيتيك (160 ميكرولتر) مع عناصر أخرى عند 300 جم بالطرد المركزي لمدة 20 دقيقة. تم تحديد طول الامتصاص عند 700 نانومتر بعد خلطه مع 25 ميكرولتر من FeCl3 (2 بالمائة). تم استخدام هيدروكسيانيزول بوتيل (BHA) عند 100 ميكرومتر.

3.6 فحوصات انتشار الخلايا.

تم استخدام خط خلايا أرومات الجلد الليفية البشرية HS68 لتحليل نسبة تكاثر الخلايا. تم تحضين HS68 في وسط Dulbecco المعدّل النسر (DMEM) الذي يحتوي على 10 في المائة من مصل بقري جنيني و 1 في المائة من البنسلين والستربتومايسين مختلطة 50،51 بعد المعالجة بتركيزات مختلفة من العينات ، طبقنا MTT للكشف عن نسبة تكاثر الخلايا. تم زرع 8000 خلية في 96- أطباق جيدة وتم معالجتها بالعينات لمدة 24 ساعة. تمت إزالة هذا المحلول الفائق ، واستخدمنا حل MTT للثقافة لمدة ساعتين عند 37 درجة. بعد الحضانة ، أزلنا الوسائط المحتوية على MTT وقمنا بحلها بواسطة ميثيل سلفوكسيد (DMSO). تمت قراءة المحلول عند OD 590 نانومتر وتم حساب المعدل بواسطة مكافئ 1.

3.7 تقييم محتويات الخلوية الميلانين.

استخدمنا طريقة مع تعديلات طفيفة بناءً على الاختبار السابق. 52،53 كريات خلوية من B16 F1 0 من مركز أبحاث وتجميع المصادر الحيوية (BCRC ، CRL 6323 ، Hsinchu ، تايوان) تم حلها في خليط من 2.0 N هيدروكسيد الصوديوم و 10 بالمائة DMSO. تم تسخين العينة بعد ذلك لمدة ساعة واحدة عند 90 درجة وطردها عند 10 ، 000 جم لمدة 10 دقائق أخرى للحصول على المادة الطافية الموضحة. الالميلانينتم تحديد العد من خلال رصد OD للطاف عند 475 نانومتر.

3.8 نشاط التيروزيناز الخلوي B16 − F10.

بالنسبة لنشاط التيروزيناز الخلوي B16 − F10 ، أشرنا إلى العمل السابق مع بعض التعديلات. تمت زراعة 50 خلية في 12- ألواح بئر في 105 خلية لكل بئر. بعد العلاج بالعينات ، تم تحليل الخلايا في 1 بالمائة Triton X -100 / PBS و 2 ملي مل-تيروسين (50 ميكرولتر) لمدة 3 ساعات. بعد الحضانة ، أزلنا الوسائط وقراءة الامتصاصية عند OD 590 نانومتر. تم حساب صيغة نشاط التيروزيناز بواسطة مكافئ 1.

3.9 الكشف عن ROS عن طريق تلطيخ DCFDA.

بالإشارة إلى الدراسة السابقة ، 54 1. 2 1. تم ​​زرع خلايا 105 B16 − F10 في 6- أطباق جيدة وتم معالجتها بتركيزات مختلفة من العينات. تم تعليق الخلايا في برنامج تلفزيوني ثم تحميلها بـ DCFDA (5 ميكرومتر) في DMEM أحمر غير الفينول لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة. تم استخدام مقياس التدفق الخلوي (جوافة ، ميرك ، ألمانيا) لاكتشاف إشارة الفلورسنت الخاصة بـ DCFDA. كانت أطوال موجات الإثارة والانبعاث لـ DCFDA 488 و 535 نانومتر ، على التوالي.

3.10. تفاعل سلسلة البوليميراز الكمي في الوقت الحقيقي.

اتبعنا طرق Lin et al. (2018) .1 في الوقت الحقيقي يتألف تفاعل البوليميراز المتسلسل للنسخ العكسي الكمي (qRT-PCR) من مسبار تمهيدي حصري لتوليد التألق. استخدم تقنية الكشف عن التألق التي تستشعر كل دورة باستخدام 7500 qRT-PCRSystem (Applied Biosystems ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم الكشف عن الدورة بناءً على كمية الفلورة المنبعثة ، ثم تم حساب ناتج كل دورة للمحتوى الناتج ، مما أدى إلى تحقيق أغراض كمية في الوقت الفعلي. تم استخدام Trizol (Invitrogen ، الولايات المتحدة الأمريكية) لاستخراج الحمض النووي الريبي الكامل من أنسجة الرئة ، وفقًا للإرشادات التي قدمتها الشركة المصنعة ، وبعد ذلك ، تم استخدام مجموعة النسخ العكسي (تاكارا ، اليابان) لتوليد الحمض النووي. في qRT-PCR باستخدام الاشعال ، المدرجة في الجدول 1 ، أولاً ، تم تسخين العينة لتشكيل حبلا DNA واحد ؛ ثم تم إجراء ارتباط تمهيدي لتكوين DNA مزدوج الشريطة (dsDNA) ، وبعد ذلك تم دمج SYBR Green dsDNA ، حيث تم استخدام مجموعة SYBR green plus كاشف (Roche ، Basel ، Swiss) ، مما أدى إلى إطلاق الفلورة. تم تمرير الناتج من خلال نظام الكشف عن التألق. تم الكشف عن إشارات الفلورسنت أثناء مرحلة الاستطالة أو التلدين لكل دورة ؛ بعد الكشف ، تم دفع محتويات العينة للخلف بواسطة شدة التألق المكتشفة. 55 تم تطبيع مستويات التعبير عن الجينات المستهدفة إلى مستويات -Tubulin باستخدام طريقة 2 − Ct .

cistanche تأثير التبييض على الجلد لمضادات الأكسدة

3.11. اختبار اللطخة الغربية.

تم تحليل خلايا B16 − F10 عند 4 درجات خلال الليل باستخدام محلول مؤقت لفحص ترسيب مناعي إشعاعي (شركة Thermo Scientific ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، والذي يحتوي على مثبطات الأنزيم البروتيني. تم استخدام مجموعة فحص بروتين حمض bicinchoninic (BCA ، Sigma-Aldrich Corp. ، الولايات المتحدة الأمريكية) لتحديد كمية البروتين. تم فصل بروتينات العينة على هلام الصوديوم دوديسيل كبريتات-بولي أكريلاميد بنسبة 10 بالمائة ونقلها إلى غشاء أبوليفينيليدين ديفلورايد (PVDF) (Pall LifeScience ، آن أربور ، ميتشيغن ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم حظر غشاء PVDF بمخزن مؤقت للحجز (Thermo Scientific) لمدة ساعة واحدة واحتضانه بالجسم المضاد الأولي المحدد طوال الليل عند 4 درجات ، وبعد ذلك ، تم غسل الغشاء باستخدام محلول ملحي Tween 20 من Tris مرتين واحتضانه مع الأجسام المضادة الثانوية لمدة 1.5 ساعة. بعد ذلك ، تم غمس الغشاء في كواشف الكشف عن التلألؤ الكيميائي (علمي حراري) وتم تحليله بواسطة MiniChemi Chemiluminescenceimager (Beijing Sage Creation Science ، الصين). وشملت مصادر الأجسام المضادة الأرانب المضادة لـ MITF ، ومضاد الأرانب لـ TRP -1 ، ومضاد TRP للأرانب -2 ، و -actin (Thermo Scientific).

3.12. تحليل المواد.

تم استخدام TEM (JEOL JEM -1230 ، 100 كيلو فولت) لمراقبة مورفولوجيا الكربون النانوي. تم تطبيق مطياف Amicro Raman (PTT ، RAMaker) لفحص أوضاع الرنين للكربون النانوي. تم إجراء قياسات التحليل الطيفي للأشعة السينية (XPS و Kratos Axis Ultra DLD) لتحديد التحليل التكويني.

3.13. تحليل احصائي.

تم تكرار جميع العينات والتجارب القياسية ثلاث مرات على الأقل. طبقنا اختبار t للطالب لمقارنة والتعبير عن متوسط ​​القيم الأساسية ± إحصاء الانحراف المعياري.

4 - نتائج

باختصار ، لاحظنا أن GONR القصير كان مادة محتملة لإنتاج العناية بالبشرة نظرًا لخصائصه الوظيفية المتعددة (الشكل 6). أظهرت النتائج أن الكربون النانوي يلعب دورًا كمضاد للأكسدة خارج الخلايا وداخل الخلايا. وفي الوقت نفسه ، فإن النانو كربون يثبط نشاط التيروزيناز والميلانينالمحتوى ولم يتسبب في أي إصابة خطيرة للخلايا الصبغية. أسس هذا العمل الوظائف المضادة لتكوين الميلانين لأربعة أنواع من الكربون النانوي ؛ ستفحص الدراسات المستقبلية آلية هذه المركبات على جينات معينة وتعبيرات بروتينية تتعلق بنضج الميلانين ونقله وتراكمه.

cistanche bienfaits

المراجع

(1) لين ، إل سي ؛ تشين ، سي واي. كو ، سي إتش. لين ، Y.-S. ؛ هوانغ ، البوسنة والهرسك ؛ وانغ ، تي كيه ؛ Kuo ، Y.-H. ؛ وانج ، H.-MD 36H: مثبط جديد فعال لتكوين الخلايا المضادة. أكسدة. ميد. خلية. طول العمر 2018،2018 ، 6354972.

(2) لي ، ر. Qiu ، X. ؛ شو ، ف. لين ، واي. فانغ ، واي. تشو ، ت. آثار البلاعم المتوسّطة للمواد الجسيمية الدقيقة المحمولة جواً (PM2.5) على مقاومة الأنسولين في خلايا الكبد في المختبر. ACS أوميغا 2016 ، 1 ، 736-743.

(3) أنت ، Y.-J. ؛ وو ، ص. ليو ، واي. هوى ، سي دبليو. وو ، سي-إس. ون ، ك. لين ، سي واي. شيانغ ، هـ. يمنع سيسامول فرط التصبغ الناجم عن الأشعة فوق البنفسجية والأضرار في جلد الفأر C57BL / 6 مضادات الأكسدة 2019 ، 8 ، 207.

(4) Hseu، Y.-C .؛ تشنغ ، ك. لين ، Y.-C. ؛ تشين ، سي واي. تشو ، H.-Y. ، Ma ، D.-L. ؛ ليونغ ، سي إتش. ون ، Z.-H. ؛ وانغ ، هـ. التأثيرات التآزرية لـ Linderanolide B مع Arbutin أو PTU أو Kojic Acid على تثبيط التيروزيناز. بالعملة. فارم. التكنولوجيا الحيوية. 2015 ، 16 ، 1120-1126.

(5) باي-هاربو ، Y.-SC ؛ بارك ، H.-Y. Tyrosinase: بروتين تنظيمي مركزي لتصبغ الجلد. J. الاستثمار. ديرماتول. 2012، 1322678-2680.

(6) Rezapour-Lactose، A .؛ يجانيه ، هـ. Ostad، SN؛ الغريبي ر. مظاهري ز. Ai، J. مستجيب للحرارة من مادة البولي يوريثين / غشاء السيلوكسان لتضميد الجرح وزرع صفائح الخلايا: دراسات في المختبر وداخل الجسم الحي. ماطر. علوم. المهندس ، ج 2016 ، 69 ، 804-814.

(7) Boo ، YC p-Coumaric Acid كمكون نشط في مستحضرات التجميل: مراجعة تركز على آثاره المضادة للتكاثر ، مضادات الأكسدة 2019 ، 8 ، 275.

(8) أوان ف. الإسلام ، MS ؛ مايو.؛ يانغ ، سي. شي ، زي. بيري ، آر إم ، تام ، كيه سي سيليلوز نانوكريستال- ZnO نانويهيبريد للتحكم في نشاط التحفيز الضوئي والحماية من الأشعة فوق البنفسجية في مستحضرات التجميل. ACS Omega 2018، 3، 12403-12411.

(9) كريستينا نيجريتو ، م. فالديز ، سي. شارما ، ياء ؛ Rosenberg ، C. ؛ Selassie ، تثبيط نمو CR وتلف الحمض النووي الناجم عن X الفينولات في الخميرة: دراسة العلاقة الكمية بين البنية والنشاط. ACS أوميغا 2017 ، 2 ، 8568-8579.

(10) هاملين ، م. Hemmati، S.؛ فارما ، ك. Veisi ، H. Greensynthesis ، المضاد للبكتيريا ، التأثير المضاد للأكسدة والسمية للخلايا لجسيمات الذهب النانوية باستخدام مستخلص الفستق الأطلنطي. J. تايوان إنست. كيم م. 2018 ، 93 ، 21-30.

(11) Meneses-Gutierrez، CL ؛ Herna ́ ndez-Damia ́ n، J .؛ بيدرازا- تشافيري ، ياء ؛ Guerrero-Legarreta ، I. ؛ Tellez ، DI ؛ جاراميلو فلوريس ، M. ́E. قدرة مضادات الأكسدة والتأثيرات السامة للخلايا لمضادات الاكسدة وأوليغومرات الريسفيراترول التي تنتجها الأكسدة الإنزيمية ضد خلايا سرطان المثانة البولية البشرية T24. مضادات الأكسدة 2019 ، 8 ، 214.

(12) صن ، سي-إل ؛ تشانغ ، سي تي ؛ لي ، هـ. تشو ، ياء ؛ وانغ ، ياء ؛ شام ، T.-K. ؛ بونغ ، دبليو- ف. تخليق بمساعدة الميكروويف لبنية غير متجانسة MWCNT / GONR للكشف الكهروكيميائي لحمض الأسكوربيك والدوبامين وحمض البوليك. ACS نانو 2011 ، 5 ، 7788-7795.

(13) لين ، تي إي. لو ، Y.-J. ؛ صن ، سي-إل ؛ انتقاء ، H. تشين ، جي بي. ليش ، أ. Girault ، مجسات كهروكيميائية ناعمة HH لرسم خرائط توزيع المؤشرات الحيوية والمواد النانوية المحقونة في الأنسجة الحيوانية والبشرية. انجيو. علم. ، كثافة العمليات. إد. إنجل. 2017 ، 56 ، 16498-16502.

(14) أوكودا ، ك. هيروتا ، تي. هيروبي ، م. ناغانو ، تي. Mochizuki ، M. ؛ Nishino ، T. توليف مختلف مشتقات G60 القابلة للذوبان في الماء ونشاط التبريد الفائق. علوم الفوليرين. تكنول. 2000 ، 8127-142.

(15) Lucente-Schultz، RM؛ مور ، VC ؛ ليونارد ، م ؛ السعر ، BK ؛ كوسينكين ، د. لو ، م. بارثا ، ر. كونيرز ، جيه إل ؛ جولة ، الأنابيب النانوية الكربونية أحادية الجدار المضادة للأكسدة JMA. جيه. تشيم. شركة 2009،131 ، 3934-3941.

(16) إنجاك ، ر. بيرس ، م. أوبرماجر ، ن. Djordjevic-Milic، V.؛ Prijatelj، M.؛ دجوردجيفيتش ، أ. سيرار ، أ. Strukelj ، B. التأثيرات الواقية للكبد المحتملة للفوليرين C60 (OH) 24 في السمية الكبدية التي يسببها دوكسوروبيسين في الفئران المصابة بسرطان الثدي. المواد الحيوية 2008 ، 29 ، 3451−3460.

(17) تونغ ، ج. زيمرمان ، إم سي ؛ لي ، س. يي ، X. Luxenhofer ، R. ؛ الأردن ، ر. Kabanov، AV امتصاص الخلايا العصبية والأكسيد الفائق داخل الخلايا لتكوين الفوليرين (C60) - بولي (2- أوكسازولين) snanoformulation. المواد الحيوية 2011 ، 32 ، 3654-3665.

(18) يوجيوه ، ك. شيشيدو ، ك. موراياما ، هـ. يانو ، م. ماتسوباياشي ، ك. تاكادا ، ح. ناكامورا ، هـ. ماسوكو ، ك. Kato ، T. ؛ Nishioka ، K. يمنع الفوليرين C60 القابل للذوبان في الماء تنكس الغضروف المفصلي في هشاشة العظام عن طريق التنظيم السفلي لنشاط تقويض الغضروف وتثبيط تنكس الغضروف أثناء تطور المرض. التهاب المفاصل الرومات. 2007، 56، 3307−3318.

(19) تاكادا ، هـ. ميمورا ، ح. شياو ، إل. الإسلام ، جمهورية مقدونيا ؛ ماتسوباياشي ، ك. إيتو ، إس. ميا ، إن. مضاد للأكسدة مبتكر: الفوليرين (INCI #: 7587) بمثابة "إسفنجة جذرية" على الجلد. يتمتع بمستوى عالٍ من الأمان والاستقرار وإمكانية استخدامه كمكون ممتاز في مكافحة الشيخوخة والتبييض. الفوليرين ، الأنابيب النانوية ، البنية النانوية الكربونية 2006 ، 14 ، 335−341.

(20) Fenoglio، I.؛ جريكو ، جي ؛ توماتيس ، م. مولر ، ياء ؛ Raymundo Piñero، E.؛ بيجوين ، ف. فونسيكا ، أ. ناجي ، جي بي ؛ ليسون ، د. فوبيني ، ب. تلعب العيوب الهيكلية دورًا رئيسيًا في سمية الرئة الحادة للأنابيب النانوية الكربونية متعددة الجدران: الجوانب الفيزيائية والكيميائية. تشيم. ريس توكسيكول. 2008، 21، 1690-1697.

(21) نوفوسيلوف ، كانساس ؛ جيم ، أ. موروزوف ، إس في ؛ جيانغ د. تشانغ ، واي. دوبونوس ، إس في ؛ غريغوريفا ، الرابع ؛ فيرسوف ، AA تأثير المجال الكهربائي في أغشية الكربون الرقيقة ذريًا. العلوم 2004، 306، 666−669.

(22) نوفوسيلوف ، كانساس ؛ جيم ، أ. موروزوف ، إس في ؛ جيانغ د. كاتسنلسون ، ميشيغان ؛ غريغوريفا ، الرابع ؛ دوبونوس ، إس في ؛ فيرسوف ، AA غاز ثنائي الأبعاد من فرميونات ديراك عديمة الكتلة في الجرافين. الطبيعة 2005،438 ، 197-200.

(23) Zhou، X .؛ وي ، واي. هو ، س. بوي ، ف. تشانغ ، س. Zhang، H. تستخدم أفلام أكسيد الجرافين المخفّضة كمصفوفة MALDI-TOF-MS للكشف عن ثماني كلورو ثنائي بنزو-ف-ديوكسين. تشيم. كومون. 2010، 466974-6976.

(24) Zhao، W. المشجعين.؛ شياو ، ن. ليو ، د. تاي ، YY ؛ يو ، سي ؛ سيم ، د. تشانغ ، س. بوي ، ف. الأعلى.؛ تشانغ ، هـ. يان ، أوراق الأنابيب النانوية المرنة ذات الخصائص الكهروحرارية المحسنة. علوم. 2012 ، 5 ، 5364-5369.

(25) Wang، Z .؛ وو ، إس. تشانغ ، ياء ؛ تشين ، ب. يانغ ، جي ؛ زو ، X. ؛ تشانغ ، س. يان ، س. Zhang، H. دراسات مقارنة لأغشية أكسيد الجرافين أحادية الطبقة التي تم الحصول عليها عن طريق الاختزال الكهروكيميائي وتقليل بخار الهيدرازين. الدقة النانوية. بادئة رسالة. 2012 ، 7 ، 161.

(26) Liang، X .؛ فو ، زي. صنعت ترانزستورات الجرافين Chou، SY من خلال نقل الطباعة في المناطق النشطة للجهاز على الرقاقة الكبيرة. نانو ليت 2007 ، 7 ، 3840-3844.

(27) الشمس ، العاشر ؛ ليو ، زي. ويلشر ، ك. روبنسون ، جى تى ؛ جودوين ، أ. زاريك ، س. داي ، أكسيد النانو الجرافين للتصوير الخلوي وتوصيل الأدوية. نانو الدقة. 2008 ، 1 ، 203-212.

(28) تشين ، دبليو. شياو ، ب. تشين ، هـ. تشانغ ، هـ. تشانغ ، س. تشن ، واي المواد البوليمرية الجرافين السائبة مع شبكة ثلاثية الأبعاد مترابطة أحادية الجرافين. حال. ماطر. 2019 ، 31 ، 1802403.

(29) تشين ، د. فنغ ، هـ. أكسيد الجرافين Li ، J.: التحضير والتشغيل والتطبيقات الكهروكيميائية. تشيم. القس 2012،112 ، 6027-6053.

(30) رانجان ، ص. أغراوال ، إس. سينها ، أ. راو ، TR ؛ Balakrishnan ، J. ؛ Thakur ، AD توليفة منخفضة التكلفة وغير قابلة للانفجار لأكسيد الجرافين للتطبيقات القابلة للتطوير. علوم. ممثل. 2018، 8، 12007.

(31) Qiu، Y .؛ وانغ ، زي. أوينز ، إيس ؛ كولاوت ، أنا ؛ تشين ، واي. كين ، أب ؛ Hurt، RH الكيمياء المضادة للأكسدة للمواد القائمة على الجرافين ودورها في تكنولوجيا الحماية من الأكسدة. مقياس النانو 2014 ، 611744-11755.

(32) هان ، ماي ؛ أوزيلماز ، ب. تشانغ ، واي. كيم ، ب.هندسة فجوة نطاق الطاقة لأشرطة الجرافين النانوية. فيز. القس ليت. 2007، 98206805.

(33) سوزا ، جي بي ؛ مانسانو ، أ. فينتوريني ، FP ؛ Santos ، F. ؛ Zucolotto ، V. التمثيل الغذائي المضاد للأكسدة من الزرد بعد التعرض شبه الكامل لأكسيد الجرافين والانتعاش. فيزيول السمك. بيوتشيم. 2019،45 ، 1289-1297.

(34) صن ، سي-إل. مثل.؛ وو ، J.-J. توليف شرائط نانوية قصيرة من الجرافينوكسيد لتحسين الكشف عن العلامات الحيوية لمرض باركنسون. بيوسنس. بيوإلكترون. 2015 ، 67 ، 327-333.

(35) الملك ، آك. ديفيس ، BR ؛ نوربيهشت ، ن. نيومان ، ب. الكنيسة ، TL ؛ هاريس ، AT ؛ رازال ، جم ؛ Minett ، AI مقياس رامان جديد لتوصيف أكسيد الجرافين ومشتقاته. مندوب .2016، 6، 19491.

(36) Hsu، H.-C.؛ يظهر ، أنا ؛ وي ، H.-Y. ؛ تشانغ ، Y.-C. ؛ دو ، H.-Y. ؛ لين ، واي جي ؛ Tseng ، C.-A. ؛ وانغ ، سي إتش. تشين ، إل سي ؛ لين ، Y.-C. ؛ تشين ، ك. أكسيد الجرافين كمحفز ضوئي واعد لثاني أكسيد الكربون لتحويل الميثانول. مقياس النانو 2013 ، 5 ، 262-268.

(37) لين ، إل واي. نعم ، م. تساي ، ج.ت. هوانغ ، واي إتش. الشمس ، C.-L. ؛ Ho ، K.-C. أنبوب نانوي كربوني جديد متعدد الجدران ذو غلاف أساسي @ بنية مغايرة للجرافينوكسيد النانوي باعتباره مادة فائقة السعة. جيه ماتر. تشيم. 2013 ، 1 ، 11237-11245.

(38) يين ، هـ. شو ، إل. بورتر ، NA بيروكسيد الدهون الجذور الحرة: الآليات والتحليل. تشيم. القس 2011، 111، 5944-5972.

(39) تونغ ، سي.إتش. تشانغ ، جيه إتش. هسيه ، Y.-H. ؛ Hsu ، J.-C. ؛ إليس ، أ في ؛ Liu ، W.-C. ؛ يان ، ر. مقارنة عائدات جذور الهيدروكسيل بين معالجات المياه المحفزة بالصور والكهرباء. J. تايوان إنست. كيم م. 2014 ، 45 ، 1649-1654.

(40) أوهشيما ، هـ. يوشي ، واي. أوريول ، إس. Gilbert، I. الإجراءات المضادة للأكسدة ومضادات الأكسدة للفلافونويدات: التأثيرات على تلف الحمض النووي الناجم عن أكسيد النيتريك ، البيروكسينيتريت ، وأنيون النيتروكسيل. بيول الراديكالي الحر. متوسط ​​1998 ، 25 ، 1057-1065.

(41) تشو ، هـ. لي ، سي. بان ، جيه إل. ون ، Z.-H. ؛ هوانغ ، S.-H. ؛ لان ، سي دبليو ؛ ليو ، دبليو- تي. ساعة ، T.-C. ؛ Hseu ، Y.-C. ؛ هوانج ، ب. تشنغ ، ك. وانغ ، هـ. مستخلص أستازانتين المخصب من المكورات الدموية بلوفياليس يزيد إفرازات عامل النمو لزيادة تكاثر الخلايا ويحث على تحلل MMP1 لتعزيز إنتاج الكولاجين في الخلايا الليفية الجلدية البشرية. كثافة العمليات J. مول. علوم. 2016 ، 17955.

(42) بيتنر ، بي آر ؛ ماركانو ، دي سي ؛ برلين ، JM ؛ فابيان ، ر ؛ شيريان ، إل. كولفر ، جي سي ؛ ديكنسون ، مي ؛ روبرتسون ، سي إس ؛ باوتلر ، RG ؛ كينت ، تا. جولة ، جزيئات الكربون المضادة للأكسدة JM تحسن الخلل في الأوعية الدموية الدماغية بعد إصابات الدماغ الرضحية. ACSNano 2012 ، 6 ، 8007-8014.

(43) لياو ، سي. لي ، واي. Tjong، S. الجرافين النانوي: التوليف ، التوافق الحيوي ، والسمية الخلوية. كثافة العمليات J. مول. علوم. 2018 ، 19 ، 3564.

(44) كونج ، هـ. وانغ ، إل. تشو ، واي. هوانغ ، س. Fan ، C. رؤى فيزيائية كيميائية مرتبطة بالثقافة حول السمية الخلوية للمواد النانوية الكربونية. تشيم. الدقة. توكسيكول. 2015 ، 28 ، 290-295.

(45) Xiao، L .؛ ماتسوباياشي ، ك. Miwa، N. التأثير المثبط لمشتق الفوليرين المغلف بالبوليمر القابل للذوبان في الماء على تكوين الميلانين المستحث بالأشعة فوق البنفسجية عن طريق تقليل تنظيم تعبير التيروزيناز الخلايا الصباغية اللاإنسانية وأنسجة الجلد. قوس. ديرماتول. الدقة. 2007، 299،245-257.

(46) كفوري ، أ. أمارو ، م. كوليت ، سي ؛ Sordet-Dessimoz، J.؛ Giner، MP؛ كريستين ، إس. موكو ، إس. Leleu ، M. ؛ ليفال ، إل. كوخ ، يو.ترومب ، ك. ساكاموتو ، ك. بيرمان ، ف. Radtke ، F. AMPK يعزز بقاء خلايا الورم الميلانيني إيجابية c-Myc عن طريق قمع الإجهاد التأكسدي. EMBO J. 2018، 37، No. e97673.

(47) Hseu، Y.-C .؛ تشنغ ، ك. لين ، Y.-C. ؛ تشين ، سي واي. تشو ، H.-Y. ما ، D.-L. ؛ ليونغ ، سي إتش. ون ، Z.-H. ؛ وانغ ، هـ. SynergisticEffects من Linderanolide B مع Arbutin أو PTU أو KojicAcid على تثبيط التيروزيناز. بالعملة. فارم. التكنولوجيا الحيوية. 2015، 161120−1126.

(48) لي ، إس. كيم ، ياء ؛ سونغ ، ح. سوك ، ياء ؛ هونغ ، س. Boo، Y. Luteolin 7- الكبريتات تضعف تخليق الميلانين من خلال تثبيط CREB وتعبير Tyrosinase بوساطة MITF. مضادات الأكسدة 2019 ، 8 ، 87.

(49) دوفال ، سي. كوهين ، سي. شاغنولو ، سي. Flouret ، V. بورو ، إي. برنارد ، ف. الدور التنظيمي الرئيسي لتصبغ الخلايا الليفية الجلدية كما هو موضح باستخدام نموذج الجلد المعاد بناؤه: تأثير الشيخوخة الضوئية. PLoS One 2014 ، 9 ، رقم e114182.

(50) Li، P.-H .؛ تشيو ، Y.-P. ؛ شيه ، سي-سي ؛ ون ، Z.-H. ؛ Ibeto ، LK ؛ Huang ، S.-H. ؛ تشيو ، CC ؛ ما ، D.-L. ؛ ليونغ ، سي إتش. Chang ، Y.-N ؛ Wang ، H.-MD الأنشطة الوظيفية الحيوية لـ Equisetum ramosissimumExtract: التأثيرات الوقائية ضد الأكسدة ، سرطان الجلد ، وتكوين الخلايا. أكسدة. ميد. خلية. طول العمر 2016 ، 2016 ، 2853543.

(51) Liang، C.-H .؛ تشان ، ل.ب. دينغ ، H.-Y. ؛ لذا ، EC ؛ Lin ، R.-J. ؛ Wang ، H.-M. ؛ تشين ، Y.-G. ؛ تشو ، T.-H. نشاط إزالة الجذور الحرة لـ 4- (3 ، 4- ثنائي هيدروكسي بينزويلوكسيميثيل) فينيل أو - - د-غلوكوبيرانوسيد من Origanum vulgare وحمايته من الأضرار التأكسدية. J. أجريك. الغذاء تشيم. 2012 ، 60 ، 7690-7696.

(52) وانغ ، إتش. إم. تشين ، سي واي. ون ، Z.-H. تحديد مثبطات تكون الميلانين من Cinnamomum SubGenius مع أنظمة الفحص في المختبر وفي الجسم الحي عن طريق استهداف التيروزيناز البشري. إكسب ديرماتول. 2011 ، 20 ، 242-248.

(53) وانج ، واي- سي. هوانغ ، X.-Y. ؛ تشيو ، سي-سي ؛ لين ، م. لين ، دبليو-H ؛ تشانغ ، دبليو تي. تسنغ ، سي-سي ؛ وانغ ، H.-MD مثبطات تكوين الميلان عبر مسحوق مستخلص فاكهة Phyllanthus Emblica في خلايا B16F10. الغذاء Biosci. 2019 ، 28 ، 177-182.

(54) بانتشوك ، ر. Skorokhyd ، NR ؛ كوزاك ، YS ؛ Lehka ، LV ؛ Moiseenok ، AG ؛ Stoica، RS لا يرتبط النشاط الوقائي للأنسجة لسيلينوميثيونين و D-pantherine في الفئران الحاملة للورم الميلانيني B16 تحت علاج دوكسوروبيسين بإمكانيات ROS. الكرواتية. ميد. 2017 ، 58 ، 171.

(55) وانغ ، هـ. تشين ، سي-سي ؛ هوينه ، ب. Chang، J.-S. استكشاف إمكانات استخدام الطحالب في مستحضرات التجميل. بيوريسور. تكنول 2015، 184 ، 355-362