الخواص الكيميائية لمانوجلوكان من Cistanche Deserticola

جهة الاتصال: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 البريد الإلكتروني:audrey.hu@wecistanche.com

1. المواد

تم استخدام معاجين فموية للخيول من مصنعين مختلفين تحتوي على 10 مجم / جرام (أ) أو 20 مجم / جرام (ب) من الإيفرمكتين ، على التوالي. تم إجراء الاختبار الكمي للإيفرمكتين وكان المحتوى 104.4-107.7 في المائة من التركيز المعلن.

2. اختبار الذوبان

تم إجراء الاختبار بدرجة دكتوراه يورو. جهاز مجداف (Pharma Test ، Heinberg ، ألمانيا) ، عند تحريك 75 دورة في الدقيقة أو 5 0 دورة في الدقيقة ، عند 37 -0. 5 ج. كبريتات لوريل الصوديوم (BDH Chemicals ، بول ، إنجلترا) 0.5 بالمائة (w / v) تم استخدام محلول مائي كوسيط إذابة (900 مل). تم وضع العجينة (4 جم من A أو 2 جم B) في الوعاء باستخدام حقنة بها قنية (A) أو إسقاط العينة على سطح وسط الذوبان (B). بعد الفترات الزمنية (15 ، 30 ، 45 ، 60 دقيقة ، 2 ساعة) ، تم سحب عينة من وسط الذوبان (2 مل) ، وتصفيتها من خلال مرشح زجاجي ، وتحليلها.

3. تحليل HPLC

تم إجراء تحديد الإيفرمكتين باستخدام طريقة HPLC معدلة كما هو موصوف في Ph.Eur. تم تخفيف المحاليل التي تم تحليلها باستخدام الميثانول (1: 10). يتألف نظام HPLC من عمود ثماني الأوكتاديسيل (250 -4 مم ؛ 5 مم ؛ Lichrospher RP -18 ؛ Merck) ، مكامل D -12500 A ، كاشف UV-Vis L {{7} } ، مضخة L -6200 أ (ميرك-هيتاشي ، دارمشتات ، ألمانيا). تم استخدام خليط من أسيتونيتريل: ميثانول: ماء (64: 24: 16) كطور متحرك بمعدل تدفق 1.9 مل / دقيقة. كان حجم العينة المحقونة 20 مل وتم إجراء الكشف عند 254 نانومتر.

4. دراسات الذوبان

تم اهتزاز مدخل المادة في قوارير زجاجية مغلقة بإحكام مع مذيب مناسب (الجدول 1) لمدة 20 ساعة عند 37 0. 1 ج. تم ترشيح المعلقات وتم تحليل المادة المرشحة ، بعد التخفيف في الميثانول ، بواسطة HPLC .

5. الاستقرار في المحلول الحمضي

محاليل الإيفرمكتين في حمض الهيدروكلوريك {{0}. تم ​​تخزين 1 م في قوارير زجاجية مغلقة بإحكام عند 20 درجة مئوية و 37 درجة مئوية. تم حساب مساحة الإيفرمكتين (زمن الاحتفاظ 10.5 دقيقة) وقمم إضافية.

مراجع

إرشادات FDA للصناعة: أشكال جرعات SUPAC-SS غير معقمة شبه صلبة. تغييرات التوسع وما بعد الموافقة: الكيمياء ، والتصنيع ، والضوابط ؛ في اختبار الإطلاق في المختبر وتوثيق التكافؤ الحيوي في الجسم الحي. مايو 1997. إرشادات FIP لاختبار ذوبان المنتجات الفموية الصلبة (1997) Dissolute. تكنول. 4: 5-14. Siewert M ، Dressman J ، Brown C ، Shah VP (2003) إرشادات FIP / AAPS لحل / اختبار الإطلاق في المختبر لأشكال جرعات جديدة / خاصة ، AAPS PharmSciTech ، 4 (1) مقالة 7 مركز الأبحاث الحديثة للطب الصيني التقليدي ، المدرسة العلوم الصيدلانية ، مركز العلوم الصحية بجامعة بكين ، بكين ، الصين

شيانغ مي وو ، Pengfei Tu تلقى 13 فبراير 2004 ، تم قبوله في 4 أبريل 2004 ، الأستاذ الدكتور Pengfei Tu ، مركز الأبحاث الحديثة للطب الصيني التقليدي ، كلية العلوم الصيدلانية ، مركز العلوم الصحية بجامعة بكين ، رقم 38 ، طريق Xueyuan ، Haidian District، Beijing 100083، China Pengfeitu@bjmu.edu.cn Pharmazie 59: 815–816 (2004)

مانوجلوكان جديد منCistanche Deserticolaمن الصين يتميز. المركب مسؤول عن التحفيز الخفيف لتكاثر الخلايا اللمفاوية التائية والبائية التي يسببها الميثوجين.

Cistanche DeserticolaYC Ma هو طفيلي هولو ينمو على جذور نبات ثنائي الفلقة Haloxylon amodendron Bunge الذي يتم توزيعه على نطاق واسع في شمال غرب الصين. نظرًا لأنه منشط مهم في الطب الشرقي ، فقد تم المطالبة بالعديد من المكونات النشطة والأنشطة الدوائية (Karasawa et al. 1986 ؛ Yoshizawa et al. 1990). قد تترافق هذه الخصائص مع بعض مكونات السكاريدسيستانشالتي لم يتم التحقيق فيها بعد. تم عزل وتوصيف عديد السكاريد البكتيرية Mitogenic والسكريات المحايدةCistanche Deserticolaمن منغوليا (Radna et al. 1996 ؛ Anna et al. 1997 ؛ Bozena et al. 1999). هنا نقوم بالإبلاغ عن الخصائص الكيميائية لمانوجلوكان جديد منCistanche Deserticolaمن الصين ، وهي المسؤولة عن التحفيز الخفيف لتكاثر الخلايا اللمفاوية التائية والبائية التي يسببها الميتوجين. بعد ينبعCistanche Deserticolaتم استخلاص YC Ma بنسبة 95 بالمائة من الإيثانول ، وتم استخدام الماء المقطر البارد لاستخراج المتبقي. تم ترسيب مستخلص الماء البارد باستخدام EtOH ، تمت إزالة البروتين ودالته ، للحصول على عديد السكاريد الخام CCDP. تم تجزئة عديد السكاريد الخام على عمود DEAE وعمود Sephadex G -150 لتوفير عديد السكاريد الخالي من البروتين (CDP -6) ، والذي يتكون من الجلوكوز (89.2 بالمائة) والمانوز (1 {{58} } .4 بالمائة) ، والتي قُدِّر متوسط ​​السيد 6 منها. 8 -104. أظهر CDP متعدد السكاريد -6 [أ 20 D 42 (ج 1 ، H2O). تم تحديد التكوينات المطلقة للسكريات بواسطة GC لـ TMS (-) -2- بيوتيل جليكوسيدات. تمت ميثلة CDP -6 (Needs et al. 1993) ، وتحللها بالماء ، وتحويلها إلى أسيتات Alditol ، وتحليلها بواسطة GC و GC-MS (الجدول). اقترحت هذه النتيجة جنبًا إلى جنب مع بيانات النسبة المولية من تحليل المثيلة أن CDP -6 يحتوي في الغالب على 1 ، 6- ربط Glcp والعمود الفقري 1 ، 6- مرتبط بدرجة أصغر متفرعة في O {{ 24}} مانوز. أكد تحليل مثيلة اثنين من البوليمرات (CDP -6-1 ، CDP -6 - 2) من التحلل المائي الجزئي أن CDP -6 يحتوي على عمود فقري يتكون من 1 ، 6- بقايا جلوكوزيل مرتبطة و 1 ، 6- مخلفات mannosyl المرتبطة ، والتي يتم استبدالها في O -3 من مانوز بفروع تتكون من المحطة ، 1 ، 6- بقايا جلوكوزيل مرتبطة ، و 1،3 ، {{38} } بقايا مانوسيل مرتبطة. وفقًا للنسب المولية والأدبيات (Bozena et al. 1999؛ Bacon et al. 1996) ، أظهر طيف 13C NMR لـ CDP -6 إشارات بسبب الكربون غير العادي لـ a-d-Glcp (C {{45) }} بسرعة 98.4 صفحة في الدقيقة) وخريطة bd (C -1 بسرعة 104.3-104.9 صفحة في الدقيقة) وخريطة إعلانية (C -1 بمعدل 1 00. 0 جزء في المليون). أظهر طيف 1 H NMR لـ CDP -6-2 في D2O إشارات بروتون تتوافق مع ad-Glcp (H -1 عند 4.94–4.95 جزء في المليون) و a- d-Map (H -1 في 4.96-5.00 جزء في المليون). أظهر طيف 13C NMR لـ CDP -6-2 في D2O إشارات بروتون مطابقة لـ aD-Glcp (C -1 بسرعة 98.6 جزء في المليون) وخريطة إعلانية (C -1 عند 98.4 جزء في المليون). تم الإبلاغ عن Mannoglucans أن لديها 1 ، 4- جلوكوبيرانان مرتبط و 1 ، 4- عمود فقري mannopyrannan مرتبط (Radjabi Nassab et al. 1984؛ Tanabe et al. 2000). يحتوي CDP -6 على بعض الميزات الهيكلية المختلفة من خلال -1 ، و 6- Glcp و b -1 المرتبطين ، و 6- العمود الفقري للخريطة المرتبطة ، ويتم استبداله بفروع mannoglucan (تين.). من أجل التحقيق في استخدامCistanche Deserticolaفي الطب الشعبي ، تم تقييم تأثير CDP -6 على أنظمة الخلايا التائية والخلايا البائية. وجد أنه يحفز بشكل معتدل تكاثر الخلايا اللمفاوية التائية والبائية الناجم عن الميثوجين.

تجريبي

1. الإجراءات العامة

تم قياس الدوران البصري باستخدام مقياس الاستقطاب التلقائي W 22-1. تم تحديد أطياف الأشعة تحت الحمراء على مطياف Perkin-Elmer 599B. تم إجراء تحليل GC على أداة Agilent HP6890N ، مزودة بكاشف FID. تم إجراء GC-MS على أداة Finnigan Trace GC-MS. تم تقدير التجانس والسيد من CDP -6 من منحنى المعايرة لحجم التصفية لـ dextrans القياسي ، والذي تم إجراؤه على

جهاز سلسلة Agilent 11 0 0 مع عمود Shodex KS -805 تم تسجيل أطياف H NMR و 13 C NMR باستخدام أداة INOVA -500. تم تحليل محتوى البروتين بطريقة برادفورد (Andre et al. 1975). تم تحليل السكريات الأحادية فيما يتعلق بخلات الألديتول بعد أن تم تحللها بالماء (2 M TFA ، ساعتان ، 110 درجة مئوية) ، وتم تقليلها وخلتها. تم تحليل التحلل المائي باستخدام TLC على صفيحة من هلام السيليكا تحتوي على 5 في المائة من فوسفات ثنائي هيدروجين الصوديوم في كحول إيزوبروبيل BuOH-EtOAc-isopropyl-HOAC-H2Opyridine (3.5: 10: 6: 3.5: 3: 3) وتم الكشف عن السكريات عن طريق الرش بالأورسينول -H2SO4. تم تحليل خلات الالديتول الناتجة بواسطة GLC باستخدام عمود شعري HP -5 (30 م 0.32 مم). تمت ميثلة CDP -6 بواسطة طريقة Ciucanu ، متبوعة بالتحلل المائي ، وتم تحليلها على أنها أسيتات Alditol مميثل جزئيًا بواسطة GC-MS. بعد التحلل المائي الجزئي ، تم غسيل المنتجات وفصلها ، والحصول على بوليمرين ، CDP -6-1 و CDP -6 - 2.

2. المواد النباتية

تم جمع النبات من مقاطعة منغوليا الداخلية في الصين في أغسطس 2001 وتم التعرف عليه من قبل Hu-Biao Chen ، قسم الطب الطبيعي ، كلية العلوم الصيدلانية ، مركز العلوم الصحية بجامعة بكين. تم إيداع عينة قسيمة [E {2}} (9)] من هذا النبات في كلية العلوم الصيدلانية ، جامعة بكين. 3. استخراج وعزل وتنقية عديد السكاريد CDP -6 جذعCistanche Deserticolaتم استخلاص YC Ma (15 0 0 جم) مع 95 بالمائة من الإيثانول (6 لتر) تحت التكثيف. تم تعطين المتبقي من الإيثانول المجفف غير القابل للذوبان ثلاث مرات بالماء المقطر البارد لكل 12 ساعة. تم ترشيح مستخلص الماء البارد وطرد المرشح بالطرد المركزي. بعد الترسيب بأربعة أحجام من EtOH (التقليب والوقوف لمدة 24 ساعة عند 4 درجة مئوية) ، تم الحصول على منتج الراسب (35.5 جم). تمت إزالة البروتين الموجود في الراسب بطريقة سافاج. بعد الذوبان في الماء المقطر ، يتم غسيل المتبقي (25.5 جم) وتجفيفه بالتجميد (الناتج: 10.6 جم). تمت إذابة عديد السكاريد الخام (8 جم) في ماء مقطر (100 مل ، 8 بالمائة وزن / حجم) وفصل باستخدام عمود DEAE (70 5 سم ، التدرج 0-2 M NaCl ، لكل 1.5 لتر). تم الحصول على جزء مزال من الماء (600 مجم). تمت تنقية عينة (250 مجم) بواسطة كروماتوجرافيا عمود نفاذ الهلام على أعمدة Sephadex G - 150 (4 - 80 سم ، 1600 مل ، 5 مل لكل جزء). تم تجميع أجزاء CDP -6 (1500–1600 مل) ، وغسيلها ، وتجفيفها بالتجميد. بعد التحلية بواسطة Sephadex G -25 (60 1 سم). تم الحصول على CDP -6 (110 مجم) وتم تحديده على أنه ذروة واحدة بواسطة HPSGC.

إعتراف:يشكر المؤلف الدكتور Baomei Shao والبروفيسور Xiaoming Gao ، كلية العلوم الطبية الأساسية ، مركز العلوم الصحية بجامعة بكين ، على قياس نشاط تعديل المناعة لـ CDP -6.