تعميم الحمض النووي للورم في المرضى الذين يعانون من سرطان الخلايا الكلوية. مراجعة منهجية للأدب

3.3. التوافق مع أنسجة الورم

أحد التطبيقات المحتملة لتحليل ctDNA هو قدرته على التغلب على عدم التجانس الوراثي. يحدث عدم التجانس الجيني في المكان (المكاني) والزمان (الزماني)، ويشكل تحديا كبيرا في إدارة السرطان. عدم التجانس المكاني هو وجود انحرافات وراثية في المناطق / النسائل الفرعية للورم الرئيسي أو في الآفات النقيلية. إذا لم تكن الانحرافات المستهدفة موجودة في أنسجة الخزعة من الورم الرئيسي بسبب عدم التجانس، فإنها ستبقى مجهولة ومن المحتمل أن تؤدي إلى علاج دون المستوى الأمثل للمريض. ينشأ عدم التجانس الزمني مع مرور الوقت نتيجة للتطور النسيلي للورم، والذي قد يكون ناجما عن الضغط الانتقائي بسبب العلاج الجهازي للمرض أو عدم الاستقرار الجيني للورم.

أجرى سميث وآخرون [16] تحليل عدم التجانس في مريض يتميز على نطاق واسع بعشر عينات من أنسجة الورم متميزة مكانيًا ولاحظوا أنه تم تحديد طفرات خاصة بالمنطقة من تسعة من عشرة مناطق للورم في البلازما، مما يشير إلى أن تحليل ctDNA قد يتغلب على عدم تجانس الورم.

انقر هنا للحصول على التركيبة العشبية للسيستانش للكلى

هناك طريقة أخرى لاستكشاف القدرة المحتملة لـ ctDNA للتغلب على عدم التجانس الوراثي وهي التحقق من التوافق بين عينة البلازما وخزعة نسيج واحدة من نفس المريض. استخدم بيكون وآخرون [23] هذا النهج ووجدوا توافقًا بنسبة 77٪ في أربعة مرضى إيجابيين ctDNA مع عينات أنسجة الورم المتاحة. وجد هان وآخرون [19] توافقًا بنسبة 8.6% فقط. ومع ذلك، ربما يكون هذا بسبب جمع عينات البلازما في مجموعة المرضى هذه بعد عدة أشهر من عينات أنسجة الورم المقابلة (يعني 22 شهرًا، المدى 0–70) وفي بعض الأحيان بعد الاستئصال الجراحي للورم الرئيسي. أدى التقسيم الطبقي للمرضى وفقًا للوقت بين جمع عينات الأنسجة والبلازما إلى زيادة طفيفة في معدل رقصة التوافق إلى 11.4٪ للمرضى الذين لديهم 6 أشهر بين أنسجة الورم وجمع البلازما. يشير هذا إلى التطور النسيلي للورم مع مرور الوقت، وهو ما يفسر انخفاض التوافق بين أنسجة الورم وعينات البلازما التي تم جمعها في نقاط زمنية مختلفة. يتم دعم هذه الفرضية من خلال النتائج التي توصلت إليها الدراسة التي أجراها Pal et al [21] والتي أجرى فيها 13 مريضًا تحليل ctDNA على أكثر من عينة واحدة، مع الحصول على العينة الثانية بمتوسط ​​157 يومًا (المدى 21-360) بعد العينة الأولى. . انخفض التوافق بين الانحرافات المكتشفة في العينتين الأولى والثانية مع زيادة الوقت بين جمع العينات، مما يشير إلى التطور النسيلي للورم.

3.4. التشخيص ومراقبة المرض

أحد التطبيقات المحتملة لتحليل ctDNA هو القدرة على توفير المعلومات النذير، والتي تم التحقيق فيها في أربع دراسات. وجد جونغ وآخرون، ولين وآخرون، وياماموتو وآخرون أن اكتشاف ctDNA في المرضى الذين يعانون من مراحل مختلفة من RCC كان مرتبطًا بشكل كبير إما بزيادة خطر الوفاة [31]، أو البقاء على قيد الحياة لفترة أقصر بدون تقدم [22،30]، البقاء على قيد الحياة للسرطان [22]، أو البقاء على قيد الحياة بشكل عام [30]. وجد بيكون وآخرون [23] أن المرضى إيجابيي ctDNA لديهم فترة بقاء إجمالية أقصر وبقاء خالٍ من التقدم في علاج الخط الأول مقارنةً بالمرضى سلبيي ctDNA. هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات، لكن هذه النتائج تشير إلى أن ctDNA قد يكون له القدرة كمؤشر حيوي إنذاري.

هناك تطبيق محتمل آخر لتحليل ctDNA وهو مراقبة المرض أثناء العلاج الجهازي ومتابعة المرضى. أجرت أربع دراسات [16،18،21،22] أخذ عينات طولية من المرضى وبشكل عام، وجدت أن مستوى ctDNA يتقلب حسب المسار السريري للمرض. قام سميث وآخرون [16] بتحليل 252 عينة طولية من 37 مريضًا. ولاحظوا أن مستوى ctDNA ارتفع قبل بدء العلاج، وانخفض مع الاستجابة للعلاج، وزاد أو بقي مرتفعًا مع تطور المرض أو عدم الاستجابة للعلاج. الدراسات التي أجراها لاسيتر وآخرون [18] وياماموتو وآخرون [22]، الذين بحثوا في مستويات ctDNA في عينات طولية من خمسة وستة مرضى، على التوالي، تدعم النتائج التي أبلغ عنها سميث وآخرون. وبالتالي تدعم هذه الدراسات فكرة أن ctDNA قد يكون علامة حيوية مناسبة لرصد الاستجابة للعلاج وتطور المرض.

3.5. خط العلاج وctDNA

بحثت دراستان [21،24] في تأثير علاج الخط الأول مقابل علاج الخط اللاحق على الانحرافات الجينية في ctDNA. أجرى Pal et al [21] دراسة كبيرة شملت 220 مريضًا يدرسون الاختلافات في التغيرات الجينية الموجودة بين المرضى الذين يتلقون علاجًا جهازيًا من الخط الأول والثاني أو من الخط اللاحق. ووجدوا أن متوسط ​​VAF كان 20% للمرضى الذين يتلقون علاج الخط الأول ولكنه ارتفع إلى 24% للمرضى الذين يتلقون علاج الخط اللاحق. علاوة على ذلك، لاحظوا ترددات طفرة مختلفة للعديد من الجينات بين المرضى الذين يتلقون علاج الخط الأول وأولئك الذين يتلقون علاج الخط اللاحق. وجد تشانغ وآخرون [24] أن عدد الانحرافات الجينية في ctDNA ارتبط بعدد خطوط العلاج المتلقاة. تشير الدراستان إلى أن ctDNA قد يكون له دور في تحديد الانحرافات الجينية المكتسبة أثناء العلاج الجهازي ويمكن أن يوفر وسيلة لتحديد آليات المقاومة العلاجية.

3.6. طرق الكشف عن ctDNA: أيهما تختار؟

غالبًا ما يوجد ctDNA بكميات صغيرة على خلفية cfDNA المنطلق من الخلايا السليمة. تتطلب مستويات ctDNA المنخفضة طرقًا حساسة للغاية للكشف، خاصة في RCC، حيث تبدو مستويات ctDNA منخفضة بشكل عام مقارنة بالسرطانات الأخرى. ولذلك فإن مقارنة الأساليب وتحسينها لهما أهمية قصوى.

قارنت دراستان طرقًا مختلفة للكشف عن ctDNA. قام سميث وآخرون [16] بتطبيق ثلاث طرق على مجموعتين مختلفتين من مرضى RCC؛ التحليل الموجه للورم، وتسلسل اللوحة المستهدفة، والتسلسل العالمي للبلازما. ووجدوا أن التحليل الموجه للورم كان له أعلى معدل للكشف عن الحمض النووي للدماغ، في حين أن التسلسل العالمي للبلازما كان لديه أدنى معدل. يتم دعم هذا الاستنتاج من خلال الدراسة التي أجراها Lasseter et al [18]، الذين طبقوا أيضًا ثلاث طرق للكشف عن ctDNA في مجموعة مريض واحدة من RCC: تحليل المثيلة العالمي (cfMeDIP-seq)، والتحليل الموجه للورم، وتسلسل اللوحة المستهدفة. من البلازما. ووجدوا أن cfMeDIP-seq كان أداؤه أفضل وأن التحليل الموجه للورم كان أكثر حساسية من تسلسل اللوحة المستهدفة. كان السبب المقترح لتفوق cfMeDIP-seq هو أن الانحرافات اللاجينية أكثر تواتراً من المتغيرات الجينية في RCC [34].

تشير العديد من الدراسات إلى أن حساسية تحليل ctDNA في RCC يمكن تحسينها عن طريق إثراء شظايا الحمض النووي الأقصر. قام موليير وآخرون [25] بإجراء WGS للبلازما ووجدوا أن معدل اكتشاف ctDNA في العديد من أنواع السرطان قد تم تحسينه عن طريق اختيار أجزاء الحمض النووي التي تتراوح بين 90 و150 نقطة أساس، وهو ما تدعمه النتائج التي أبلغ عنها سميث وآخرون [16] لـ دراستهم باستخدام sWGS وتحليل التسلسل الموجه للورم. قام ياماموتو وآخرون [22] بتحليل طول جزء cfDNA باستخدام بيانات من تسلسل اللوحة المستهدفة ووجدوا أن شظايا الحمض النووي ذات الطفرات تميل إلى أن تكون أقصر من الأجزاء غير المتحولة المقابلة، وبالمثل، فإن المرضى الذين لديهم تحليل ctDNA إيجابي يميلون إلى الحصول على نسبة أعلى من الأجزاء القصيرة مقابل شظايا طويلة. تشير النتائج في هذه الدراسات معًا إلى أنه يمكن أيضًا استخدام تحليل حجم الجزء لتحديد العينات ذات مستويات معينة من ctDNA لتجنب التحليل المكلف على العينات ذات مستويات ctDNA منخفضة جدًا.

هناك العديد من التفسيرات المحتملة لسبب كون معدلات اكتشاف ctDNA في الدراسات المشمولة أقل من 100%؛ قد يكون ذلك بسبب حساسية الطرق المستخدمة للكشف أو العوامل الأخرى المتعلقة بالتحليل، على سبيل المثال، إذا كانت طفرات الورم التي تم تحديدها كانت تحت النسيلة وموجودة فقط في جزء صغير من الورم [35]. الأسباب المحتملة الأخرى هي نوع السرطان، حيث يتسبب الموقع التشريحي للورم في إطلاق ctDNA في البول بدلاً من الدم، ويتم إزالة الحمض النووي للورم بشكل أسرع من الأورام الأخرى، أو ببساطة أن أورام الكلى تفرز كمية أقل من الحمض النووي مقارنة بالأورام الأخرى [15] . قد يكون الحل البسيط هو تحليل الحمض النووي من كمية أكبر من البلازما. ومع ذلك، فإن هذا من شأنه أن يزيد بشكل متناسب من تكلفة التحليل في معظم الحالات. نأمل أن تلقي الدراسات المستقبلية الضوء على بعض هذه الأسئلة وتحسين القدرة على اكتشاف ctDNA في RCC.

4 - نتائج

لا يزال عدد الدراسات التي تبحث في ctDNA لدى مرضى RCC منخفضًا وعدد المرضى المشمولين في هذه الدراسات محدود، على الرغم من ظهور دراسات أكبر في السنوات القليلة الماضية. تسلط الدراسات الضوء على أن مستوى ctDNA في RCC يبدو منخفضًا. ومع ذلك، فإن المرضى الذين يعانون من mRCC لديهم كمية أكبر من ctDNA مقارنة بالمرضى الذين يعانون من مرض موضعي. تشير الدراسات التي تستخدم طرقًا متعددة للكشف عن ctDNA إلى أن التحليل الموجه للورم يحسن معدل اكتشاف ctDNA مقارنة بالطرق غير الموجهة وتشير إلى أن cfMeDIP-seq قد يكون وسيلة حساسة للغاية للكشف عن ctDNA في RCC. هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات لتحديد التطبيقات المحتملة لتحليل ctDNA في RCC ولتحسين طرق هذه التطبيقات.

مراجع

[1] Parkin DM, Bray F, Ferlay J, Pisani P. إحصائيات السرطان العالمية، 2002. CA Cancer J Clin 2005;55(2):74–108.

[2] ليونجبيرج ب، ألبيجيس إل، بنصالح ك، وآخرون. إرشادات EAU: سرطان الخلايا الكلوية 2020 V 3-1. أرنهيم، هولندا: الجمعية الأوروبية لجراحة المسالك البولية؛ 2020. https://uroweb.org/wp-content/ uploads/EAU-Guidelines-on-Renal-Cell-Carcinoma-2020V3.pdf.

[3] Danske Multidisciplinære Cancer Grupper. سرطان الكلى – patologi. https://www.dmcg.dk/siteassets/forside/kliniske retningslinjer/godkendte-kr/darenca/darenca_patologi_adm-godk_ jbh100919.pdf.

[4] Baldewijns MM، van Vlodrop IJH، Schouten LJ، Soetekouw PMMB، de Bruïne AP، van Engeland M. علم الوراثة وعلم الوراثة اللاجيني لسرطان الخلايا الكلوية. بيوتشيم بيوفيس اكتا 200؛ 1785: 133–55.

[5] إلينجر جيه، فون روكر أ، باستيان بي جيه، مولر إس سي. تعميم الحمض النووي في المصل الخالي من الخلايا: أهمية كمؤشر حيوي جديد للأورام الخبيثة في المسالك البولية. أورولوجي أ 2010;49, 1131-2, 1134.

[6] Schwarzenbach H, Hoon DS, Pantel K. الأحماض النووية الخالية من الخلايا كمؤشرات حيوية في مرضى السرطان. نات ريف كانسر 201؛11: 426–37.

[7] إسبوزيتو أ، بارديلي أ، كريسيتييلو سي، وآخرون. مراقبة الحمض النووي الخالي من الخلايا المشتق من الورم في المرضى الذين يعانون من أورام صلبة: وجهات النظر السريرية وفرص البحث. علاج السرطان القس 201؛40:648-55.

[8] Fleischhacker M, Schmidt B. الأحماض النووية المنتشرة (CNAs) والسرطان – دراسة استقصائية. بيوتشيم بيوفيس اكتا 200؛ 1775: 181–232. [9] de Martino M، Klatte T، Haitel A، Marberger M. الحمض النووي الخالي من الخلايا في مصل سرطان الخلايا الكلوية: علامة تشخيصية وإنذارية. السرطان 2012;118:82–90. [10] كيديس إي، جيفري إس إس. الخلايا السرطانية المنتشرة مقابل الحمض النووي الخالي من الخلايا المشتقة من الورم: منافسون أم شركاء في رعاية مرضى السرطان في عصر تحليل الخلية الواحدة؟ جينوم ميد 201؛5:70.

الخدمة الداعمة لشركة Wecistanche - أكبر مصدر للسيستانش في الصين:

البريد الإلكتروني:wallence.suen@wecistanche.com

واتساب/هاتف:+86 15292862950

تسوق لمزيد من تفاصيل المواصفات:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

احصل على مستخلص السيستانش العضوي الطبيعي الذي يحتوي على 25% من الإكيناكوسيد و9% من الأكتيوسايد للكلى.