آثار Cistanche على التغيرات ATPase في الميتوكوندريا الكبد من الفئران تسمم الدم

الاتصال: أودري هو واتساب / حصان: 0086 13880143964 البريد الإلكتروني:audrey.hu@wecistanche.com

وانغ تشي تشيانغ يين غانغ

الملخص: الهدف:لدراسة تغيرنشاط ATPase للميتوكوندريا الكبد في الإنتانوتأثيرسيستانشعلى ذلك.أساليب:تم تقسيم 40 فأرا SD بشكل عشوائي إلى مجموعة عمليات صورية ، ومجموعة تحكم لمدة 12 ساعة ، ومجموعة إدارة لمدة 12 ساعة ، ومجموعة تحكم لمدة 16 ساعة ، ومجموعة إدارة لمدة 16 ساعة. التلوث الدمتم تكرار النموذج بواسطة ربط وثقب cecal (C LP) ومقارنته. معدل بقاء المجموعة على قيد الحياة، يعني الضغط الشرياني (MAP)، الكبدالميتوكوندريا ATPaseتغييرات النشاط.النتائج:بعد أن كررت الفئران نموذج الإنتان ،ATPaseنشاط الكبدالميتوكوندرياانخفض ، وانخفض معدل البقاء على قيد الحياة على مدار 24 ساعة بشكل ملحوظ. الATPaseنشاط الميتوكوندريا الكبد بعد إعطاءسيستانشتحسن بشكل ملحوظ مقارنة بالمجموعة الضابطة (P<0.05), which="" was="" significantly="" positively="" correlated="" with="" the="" reduction="" of="" rat="" mortality.="">استنتاج:انخفاض الميتوكوندريانشاط ATPase في الإنتان، والحمل الزائد للكالسيوم الخلوي، والوذمة والنخر هي الأسباب المباشرة للوفاة فيالفئران الصرف الصحي.Cistanche يعزز نشاط ATPaseهو آلية مهمة لعلاجتلوث الدم.

الكلمات الرئيسيه: Cistanche, cistanche تعفن الدم الميتوكوندريا ATP إنزيم ATP

تلوث الدمهو مرض خطير سريريا. على الرغم من تحديث المضادات الحيوية في السنوات ال 30 الماضية ، إلا أن معدل وفيات الإنتان لم ينخفض بشكل كبير ولا يزال مرتفعا بنسبة 50٪ [1]. العلاج الغربي المضاد للبكتيريا "القضاء على الشر" وحده لا يحسن تشخيصتلوث الدم.في التسبب في الطب الصيني التقليدي ، ينتمي الإنتان إلى "بر النقص والشر" ، ويجب أن يستند العلاج إلى مبدأ "تقوية الجسم" و "القضاء على الشر". أظهر الطب الصيني التقليدي إمكانات كبيرة في علاج الإنتان.تلوث الدممعقد بسبب فشل الأعضاء المتعددة هو السبب الجذري لارتفاع معدل الوفيات ، وتلف بنية الخلية هو الأساس المرضي المجهري لفشل الأعضاء المتعددة [2]. Cistanche هو الطب الصيني التقليدي لمنشط ، وقد أظهرت الدراسات الدوائية الحديثة أنسيستانشله تأثير مقاومة بيروكسيد استر الغشاء وحماية وظيفة الخلية [3]. وظيفةطاقة الميتوكوندرياالأيض هو واحد من الوظائف الأساسية للخلايا ، ونشاطATPaseهو مؤشر مهم لقياس وظيفةطاقة الميتوكوندرياأيض. في هذه التجربة ، لاحظنا تغيراتATPaseنشاط خلايا الكبد فيالفئران الصرف الصحيوالعلاقة بين آثارسيستانشعلى ذلك ووفيات الفئران وتهدف إلى توفير أساس نظري واستكشاف فعال لعلاج "تعزيز" السريرية منتلوث الدم.

سيستانش

1. المواد والأساليب

1.1 الكواشف

سيستانشتم شراؤها من شينجيانغ (التي حددها البروفيسور تان ديفو من كلية الطب بجامعة الخوانق الثلاثة). تم أخذ 200 غرام من Cistanche المجفف ومغلي مرتين في الماء المقطر. تبخر الترشيح وتركز إلى تركيز 1 جم / مل. بنتوباربيتال الصوديوم (001104) ، مجموعة الصين الوطنية للأدوية شنغهاي الكيميائيةالكاشفشركة;ATPase كاشف(20030108)، معهد نانجينغ جيانتشنغ لبحوث الهندسة الحيوية.

1.2 نموذج التجارب وتجميعها

تم تقسيم 40 من ذكور الفئران SD (التي تم شراؤها من مركز الحيوانات التجريبية التابع لكلية تونغجي الطبية بجامعة هواتشونغ للعلوم والتكنولوجيا) بشكل عشوائي إلى 5 مجموعات: مجموعة العمليات الصورية (n = 8) ، مجموعة التحكم لمدة 12 ساعة (n = 8) ، مجموعة الإدارة لمدة 12 ساعة (n = 8) ، مجموعة التحكم لمدة 16 ساعة (n = 8) ، مجموعة الإدارة لمدة 16 ساعة (n = 8). أعطيت مجموعة العمليات الصورية والمجموعة الضابطة محلول ملحي طبيعي بواسطة gavage ، وكانت مجموعة الإدارة عبارة عن gavage مع 1 جم / مل Cistanche ، مرتين في اليوم ، لمدة تصل إلى 15 يوما. النموذج الإنتانتم تكراره عن طريق ربط cecal وثقب [4]. قبل العملية ، كانت الحيوانات حرة في شرب الماء وصومت لمدة 12 ساعة.

1.3 تحديد متوسط الضغط الشرياني

تم إدخال الوريد الوداجي بإبرة فروة الرأس ، وتم استخدام الهيبارين لمنع التخثر ، وتم تعليب الشريان السباتي المشترك الأيسر إلى قوس الأبهر ، وتم توصيل القسطرة ذاتية الصنع بالأداة البيولوجية متعددة القنوات ، والمتوسطالضغط الشرياني(MAP) تم تسجيله. جرب بعد استقرار خطة عمل MAP.

1.4 تحديد نشاط ATPase الميتوكوندريا

خذ 6 جم من كبد الفئران وضعه بسرعة في وسط فصل 0 درجة مئوية [250 مليمول من السكروز ، 2 مليمول من إيثوكسي إيثيل بيبرازين 2-حمض سلفونيك إيثيل ، 0.1 مليمول من حمض الإيثيلين ديامين تتراسيتيك ، pH7.4] ، افتحه واغسل الشوائب ، افصل التعليق المتوسط (1: 10) ، تجانس مع مجانس كهربائي تفلون (1200r / min) ، جهاز طرد مركزي في 2000r / min لمدة 10 دقائق ، احتفظ بجهاز الطرد المركزي الفائق عند 10000r/min لمدة 15 دقيقة، وتخلص من السوبرناتانت، وخذ الراسب وعلقه في 2 مل من وسط الفصل للحصول علىتعليق الميتوكوندريا. يتم تنفيذ العملية برمتها في 0 إلى 4 درجة مئوية. تم استخدام طريقة تحديد الفوسفور [5] لقياسنشاط ATPase(تم شراء المجموعة من معهد نانجينغ جيانتشنغ للهندسة البيولوجية).

1.5 المعالجة الإحصائية

يتم التعبير عن جميع البيانات التجريبية على أنها متوسط ± الانحراف المعياري (X±S) ، ويقوم برنامج SPSS بإجراء تحليل أحادي الاتجاه لتحليل التباين والارتباط.

مستخلص سيستانش

2. النتائج

2.1 تأثير Cistanche على متوسط الضغط الشرياني ووفيات الفئران على مدار 24 ساعة

انخفض ضغط الدم في المجموعة الضابطة بشكل كبير في 12 ساعة بعد الربط والثقب ، وأصبح أكثر وضوحا في 16 ساعة. بالمقارنة مع مجموعة العمليات الصورية ، كان هناك فرق كبير. ضغط الدم منعلاج سيستانشتم تحسين المجموعة. وكان معدل وفيات المجموعة الضابطة أعلى بكثير من معدل وفيات مجموعة العمليات الصورية، وكان معدل وفيات المجموعة الإدارية أقل بكثير من معدل وفيات المجموعة الضابطة المقابلة.

2.2 تأثير Cistanche على نشاط ATPase الميتوكوندريا

أنشطةالصوديوم والبوتاسيوم ATPase، الكالسيوم ATPase، المغنيسيوم ATPase، والكالسيوم والمغنيسيوم ATPaseفي مجموعة الإدارة كانت أعلى بكثير من تلك الخاصة بالمجموعة الضابطة المقابلة ، حيث وصلت إلى مستوى مجموعة العمليات الصورية ، والتي ارتبطت ارتباطا إيجابيا كبيرا بتخفيضوفيات الفئران(ص = 0.834) ).

سيستانش

3. المناقشة

Na +-K+ -ATPase، المعروف أيضا باسم مضخة الصوديوم والبوتاسيوم، يلعب دورا فسيولوجيا مهما في الحفاظ على الأنشطة الفسيولوجية للخلية، ودرجة حرارة الجسم، والتمثيل الغذائي الطبيعي، وتنظيم توازن الأيونات داخل الخلية وخارجها.في الإنتان، هناك خلل وظيفي حاد في مضخة الصوديوم في غشاء الميتوكوندريا الداخلي، مما يسببالميتوكوندرياذمه. الNa+ -K+-ATPتلف الإنزيم ، وعدم توازنالميتوكوندريايزيد تركيز الأيونات ، ويتم تثبيط نشاط إنزيم استقلاب الطاقة ، ويتم استنفاد إمدادات الطاقة الخلوية ، وتحدث الوذمة السامة للخلايا. في الوقت نفسه ، تزداد نفاذية الغشاء ، مما يؤدي في النهاية إلى موت الخلايا. في التجربة ، وجدنا أن الميتوكوندرياNa+-K+-ATPaseتم تقليل نشاط خلايا الكبد الإنتانية بشكل كبير (P<0.01), indicating="" that="" the="" liver="" tissue="" is="" seriously="" damaged.="" after="" administration="" of="" cistanche,="" the="">Na+-K+-ATPaseنشاطالميتوكوندريا الكبدزيادة كبيرة (P<0.05), and="" the="" mortality="" of="">الفئران الصرف الصحيتم تخفيضه بشكل كبير. تشير النتائج التجريبية إلى أن انخفاضNa+ -K+ -ATPase النشاطيرتبط ارتباطا إيجابيا كبيرا مع تطورالإنتان في الفئران. تثبيطنشاط Na+ -K + -ATPase، وذمة الخلايا، والموت الذي يؤدي إلى فشل أعضاء متعددة قد يكون التطور السريع للإنتان. واحدة من الآليات الهامة. في السنوات الأخيرة ، كانت هناك العديد من التقارير حولNa + -K + -ATPaseوالعديد من الأمراض ، التي جذبت انتباه العمال السريريين والأساسيين. من الأهمية بمكان دراسة قانون التغيرات في نشاطNa + -K + -ATPaseولوائحه [6]. لا يعرف سوى القليل عن الآلية المحددة لNa + -K + - ATPaseفي تطوير ونتائجتلوث الدموهناك حاجة إلى مزيد من البحوث.

استقرار الكالسيوم والمغنيسيوم داخل الخلايا هو الأساس المادي الضروري للحفاظ على استجابة الإطلاق داخل الخلايا ونقل المعلومات [7]. في التجربة ، انخفاضCa2 + -نشاط ATPaseفي المجموعة الضابطة يؤثر بشكل مباشر على نشاط مضخة الكالسيوم ، وانخفاض نشاط مضخة الكالسيوم يضعف دورالميتوكوندريامضخة الكالسيوم لإفراز Ca2 + خارج الخلية ، و Ca2 + الحمل الزائد فيالميتوكوندريا. الحمل الزائد للكالسيوم في الميتوكوندريا هو سبب مهم لالميتوكوندريااضطراب الفسفرة التأكسدي ، والأضرار الهيكلية ، ونخر الخلايا [8 ، 9]. يقلل الحمل الزائد Ca2 + من إمكانات غشاء الميتوكوندريا ومحتوى ATP للأنسجة [10] ، ويضعف استخدام الطاقة لخلايا الأنسجة. Ca2+ يمكن تنشيط الفوسفوليباز على الميتوكوندريا ، مما يسبب أضرارا للغشاء الميتوكوندريا، وتدمير وظيفة توليف ATP الطبيعية للميتوكوندريا، وإعاقة إنتاج طاقة الميتوكوندريا [11]. اضطراباتاستقلاب الكالسيوم الميتوكوندريايمكن أن تؤثر بشكل مباشروظيفة الجهاز التنفسي الميتوكوندرياتسببأكسجين الميتوكوندريااضطرابات الامتصاص وأكسدة البروتون في سلسلة نقل الإلكترون [12]. في الوقت نفسه ، يمكن أن تؤدي زيادة Ca2 + إلى تفاقم تلف بيروكسيد الإستر للميتوكوندريا [13]. كل هذه تؤدي بشكل مباشر أو غير مباشر إلى فشل إمدادات الطاقة الخلوية وموت الأنسجة والأعضاء وتسريع تطور التغيرات المرضية في الإنتان. في التجربة ، وجدنا أيضا أن أنشطةM g2 + -ATPase و Ca2 +-M g2 + -ATPase في الفئران المعقمةكما انخفضت بشكل كبير.Mg2 + -ATPase و Ca2 + -M g2 + -ATPaseهي مواد مهمة للحفاظ على توازن الكالسيوم والمغنيسيوم داخل الخلايا. أفاد Widner أن انخفاض أيونات المغنيسيوم داخل الخلايا هو العامل المسبب لتلف الخلايا الذي لا رجعة فيه ، ونسبة Mg 2 +/Ca2 + هي مؤشر مهم يعكس الضرر الذي لا رجعة فيه للخلايا [14]. الMg2 + -ATPase و Ca2 + -M g2 +-ATPaseأنشطةسيستانشتم تعزيز المجموعة التي تدار ، A TPase هو سلفهيدريلاز ، وسيستانشله تأثير بيروكسيد استر مضاد للغشاء ، والذي قد يكون بسبب تعزيزATPaseنشاط Cistanche أساس الكيمياء وأساس علم الأدوية [15].

في الإنتان، الميتوكوندريااضطراب استقلاب الطاقة، انخفضنشاط إنزيم ATP، وذمة الميتوكوندريا، والحمل الزائد للكالسيوم داخل الخلايا، واضطراب توازن الكالسيوم والمغنيسيوم هي الأسباب المباشرة لموت خلايا الإنتان وفشل الأعضاء المتعددة.سيستانشيعادي بيروكسيد استر الغشاء ، ويعزز نشاط ATPase ، ويحافظ على توازن الكالسيوم والمغنيسيوم داخل الخلايا ، ويحمي التشغيل الطبيعي لوظائف الخلايا.سيستانشهي آلية مهمة للحد من وفياتالفئران الصرف الصحي. إنه يوضح الآفاق الجيدة لCistanche في علاج الإنتان