يحسن القسطرة من عدوى الكلى بسبب الذئبة الحمامية الجهازية

اتصال:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساب: 008618081934791

للجزء الأول ، الرجاء الضغط هنا.

نقاش

كسر التسامح ضد المستضدات النووية هو السمة المميزةالنظامية الذئبةحماميوإلى جانب الخلايا البائية ، يُعتقد أن الخلايا التائية ذاتية النشاط تلعب دورًا رئيسيًا في التسبب في المرض. ومع ذلك ، كاكتشاف (تلقائي) لمستضد معينCD4^زائد لا تزال الخلايا التائية تشكل تحديًا كبيرًا في أبحاث المناعة الذاتية ، حتى الآن ، لا يُعرف سوى القليل عن المستضد النووي CD4 التفاعلي^زائدالخلايا التائية فيالنظاميةالذئبةحمامي.

في الآونة الأخيرة ، طرق جديدة لاكتشاف وتعداد CD4 الخاص بمستضد^زائدتم تطوير الخلايا التائية. يستغل نهج مكتبة الخلايا التائية التوسع متعدد الأضلاع السابق للخلايا التائية لتمكين اكتشاف استنساخ الخلايا التائية النادرة الخاصة بمستضد معين. توفر هذه الاستراتيجية حساسية عالية وتسمح بالعمل بكميات محدودة من الخلايا. باستخدام هذه التقنية ، تمكنا من إظهار الخلايا التائية التفاعلية ضد 5 مستضدات نووية أساسية في المرضى الذين يعانون من النشاطالنظاميةالذئبةحمامي. تتمثل عيوب الكشف المستند إلى المكتبة ، إلى جانب كونها كثيفة العمالة ، في أنه لا يمكن استبعاد نمو أو فقدان بعض الحيوانات المستنسخة أثناء التوسع ، والخيارات المحدودة لتحليل النمط الظاهري للخلايا.

القياس الخلوي القياسي الزميل مقيد بعدد الأحداث القابلة للاكتشاف ، والتي عادةً ما تقصر تحليل العينات على السكان بترددات أعلى من 0. 01 بالمائة. كشفت ملاحظتنا باستخدام مكتبة الخلايا التائية أن تواتر تعميم CD4 التلقائي^زائدكانت الخلايا التائية لمستضد ذاتي معين في المرضى الذين يعانون من نوبة المرض عبارة عن خلايا W2 0 في مليون خلية ، وهو ما يمثل تواترًا قدره 0.002 في المائة ؛ لذلك ، الكشف عن CD4 الخاص بالمستجين الذاتي^زائدتكاد تكون الخلايا التائية التي تستخدم القياس الخلوي القياسي غير المعالج أمرًا مستحيلًا. باشر وآخرون قدم التخصيب المسبق لل CD4^زائدالخلايا التائية التي تتفاعل مع مستضدات معينة قبل اكتسابها على قياس الخلايا الزميلة ، والمعروفة باسم طريقة ARTE. اعتماد هذا النهج للكشف عن CD4 الخاص بمستضد نووي^زائدالخلايا التائية ، تمكنا من تأكيد النتائج التي توصلنا إليها وإثبات توسع المستضد النووي CD4 التفاعلي^زائدالخلايا التائية نشطةالنظاميةالذئبةحمامي. والجدير بالذكر أن تواتر تفاعل الخلايا التائية مع ترانستيريتين و C. Albicans كان غير مبال بين الضوابط الصحية والمرضى الذين يعانون منالنظاميةالذئبةحماميمع نشاط مرض متفاوت. لذلك ، فإن التوسع الملحوظتلقائيT الخلايامن المحتمل ألا يكون نتيجة لفرط النشاط العام غير النشطالنظاميةالذئبةحماميولكن لتوسيع الخلايا التائية الخاصة بالمستضد.

الالذئبة الحمامية الجهازيةيصيبالكلى، لذلك يتم استخدام cistanche للحمايةالكلى.

لقد أثبتت التقارير السابقة بالفعل وجودتلقائيالخلايا التائيةفيالنظاميةالذئبةحمامي، في المقام الأول باستخدام الانتشار أو إنتاج السيتوكينات أو تنظيم علامات التنشيط ، وإن كان ذلك دون القدرة على تحديد عدد واضح من هذه الخلايا. يوجد أفضل دليل على تواتر الخلايا التائية الخاصة بالمستضد النووي للتفاعل ضد البروتين النووي الصغير U1 ، وهو هدف مستضد ذاتي مميز في مرض النسيج الضام المختلط ولا يوجد إلا في جزء صغير من المرضى الذين يعانون منالنظاميةالذئبةحمامي. U1 بروتين نووي صغير نووي - CD4 تفاعلي^زائدتم تحديد الخلايا التائية باستخدام التخفيف المحدود والمقايسة البقع المناعية المرتبطة بالإنزيم (ELISPOT) وتم الإبلاغ عن حدوثها بتردد (40 إلى 250) 106 خلايا T و (20 إلى 60) 106 PBMCs ، على التوالي ، وهو من نفس النوع. حجم تواتر الخلايا ذاتية الحركة في دراستنا. في عملنا ، قمنا بالتحقيق في التفاعل ضد العديد من الخصائصالنظاميةالذئبةحماميالمستضدات النووية المرتبطة. ومن المثير للاهتمام ، على الرغم من أن جميع المرضى الذين يعانون من LN النشط أظهروا ترددات متزايدة من المضاد النووي المضاد للنووي CD4^زائدالخلايا التائية ، اختلف المرضى في محفظتهم المستهدفة ، وكان التفاعل يستهدف مجموعة أوسع من المستضدات مقارنة بالمرضى غير النشطين.النظاميةالذئبةحمامي. الدلالة البيولوجية لهذا غير معروفة في الوقت الحاضر. CD4 مختلفة^زائدقد ترتبط تفاعلات الخلايا التائية ببعض المظاهر السريرية لأنشطة مختلفة قد تكون زائدة عن الحاجة لإحداث المرض.

على غرار أمراض المناعة الذاتية الأخرى ، تمكنا أيضًا من إثبات وجود CD4 النشط ذاتيًا^زائدالخلايا التائية في الأفراد الأصحاء ، وإن كانت بترددات أقل بكثير مقارنة بالمرضى المصابين بالذئبة الحمامية الجهازية النشطة. كانت هذه الخلايا غير قابلة للكشف عن طريق مقارنة عدد الخلايا المنشطة مع أو بدون تحفيز المستضد ، حتى مع التقنيات شديدة الحساسية مثل مكتبات الخلايا التائية أو طرق ARTE. ومع ذلك ، من خلال الاستنساخ أحادي الخلية ، تمكنا من إثبات أن إشارة "الخلفية" تحتوي بالفعل على CD4 خاص بالمستضدات الذاتية^زائدالخلايا التائية. أي أحداث معينة تؤدي إلى كسر التسامح وزيادة تردداتتلقائيT الخلايالا يزال تخميني ومع ذلك ، توضح بياناتنا أن توسع استنساخ ذاتي النشاط يلعب دورًا في التسبب في مرض الذئبة الحمامية الجهازية.

تعميم المستضد النووي - رد الفعل CD4^زائدأنتجت الخلايا التائية بشكل أساسي IFN-g ، وبدرجة أقل ، IL -17 و IL -10. يشير ملف تعريف السيتوكين هذا مع الارتباط الضعيف / عدم وجود ارتباط مع إنتاج الأجسام المضادة الذاتية إلى أن دور المستضد النووي CD4 التفاعلي^زائدقد لا تكون الخلايا التائية هي المزود الحصري لمساعدة الخلايا البائية. لقد ثبت أن IFN-g لا غنى عنه في التسبب في LN. لقد ثبت أن خلايا Th1 يتم تجنيدها فيمُصاب الكلىالأنسجة فيهاالنظامية الذئبةحمامي، مما يجعل الخلايا التائية النووية التفاعلية للمستضد مرشحة أولية لغزوالكلى، حيث سيواجهون المستضدات الذاتية المتواجدة في كل مكان. سبق وصف الخلايا التائية البولية لتعكس نشاط المرض وتعكس النمط الظاهري للخلايا داخل الكلى في LN20،33 ؛ وبالتالي ، استخدمنا الخلايا التائية البولية كبديل لـالكلىالخلايا التائية. كشفت الخلايا التائية البولية عن تباين TCR مقيد ، وهو ما يتماشى مع الملاحظات فيالكلىالخزعات ، مما يشير إلى تخصيب بعض الحيوانات المستنسخة من الخلايا التائية فيمُصابالكلىالانسجة. بين الخلايا التائية البولية ، تمكنا من الكشف عن الخلايا التائية النووية التفاعلية للمستضد ، وتم إثراء ترددها مقارنة بالخلايا التائية الدموية. وبالتالي ، يبدو من المحتمل أن الخلايا النووية التفاعلية للمستضد تشارك بشكل مباشر في انتشار تلف الأعضاء المحلي.

باختصار ، نوضح هنا أن المستضد النووي CD4 التفاعلي^زائديتم توسيع الخلايا التائية غير النشطةالنظاميةالذئبةحمامي؛ وهي تنميط ظاهري بشكل رئيسي وتنتج خلايا Th1 T وتغزو IFN-gمُصابالأعضاء المستهدفة مثلالكلى.

يمكن أن يتجنب Cistanche الإصابة بـالكلىبسببالنظاميةالذئبةحمامي.

طُرق

يتم إعطاء الطرق التفصيلية في المواد التكميلية.

الموضوعات وعينات الدم والبول

تم الحصول على عينات دم من 17 شخصاً سليماً و 12 مريضاً غير نشيطينالنظاميةالذئبة حمامي(النظاميةالذئبةحمامينقاط DAI<10), and="" 20="" patients="" with="" active="">النظاميةالذئبةحمامي(النظاميةالذئبةحماميDAI score >10). بالإضافة إلى ذلك ، تم الحصول على عينات بول من 12 مريضًا نشطًاالنظاميةالذئبةحماميو LN. أعطت جميع المواد الدراسية موافقتها المستنيرة على أساس الموافقة الأخلاقية التي حصل عليها مجلس المراجعة المؤسسية وسلطات الأخلاقيات في Charité - Universitätsmedizin Berlin (EA 1/342/12 ، EA 1/098/07 ، و EA 1/036/16 ). تم تحضير PBMCs والخلايا البولية باستخدام تدرج كثافة FicollHypaque.

الأجسام المضادة واتباع القياس الخلوي

اعتمادًا على التجارب ، تم تلوين العديد من الجزيئات السطحية على الخلايا المحفزة للمستضد في مجموعات مختلفة من الأجسام المضادة وحيدة النسيلة التالية: anti-CD3 و -CD4 و -CD8 و -CD14 و -CD20 و -CD69 و -CD154 ؛ للتمييز بين الخلايا الحية والميتة ، فإن مجموعة LIVE / DEAD Aqua (Life Technologies Ltd. ،نظاميالذئبةحمامي، المملكة المتحدة).

لتلطيخ حجرة الخلايا داخل الخلايا ، تم تثبيت الخلايا بنسبة 2 في المائة (ت / ت) بارافورمالدهيد لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة وتم نفاذيةها باستخدام محلول نفاذ BD FACS 2 (BD Biosciences ، سان خوسيه ، كاليفورنيا) ؛ تم تلوين المستضدات التالية داخل الخلايا باستخدام بروتوكول قياسي: CD154 و IFN-g و IL -2 و IL -4 و IL -10 و IL -17.

تم الحصول على العينات على BD FACSCanto II و BD LSRFortessa (BD Biosciences) تتبع مقاييس السيتومتر في Flow Cytometry Core Facility Deutsches Rheuma-Forschungszentrum Berlin باستخدام برنامج BD FACSDiva (BD Biosciences). تم تحليل بيانات قياس التدفق الخلوي باستخدام برنامج FlowJo (FlowJo v10، Three Star، Ashland، VA).

إعداد تجمع المستضد والمستضد

استخدمنا المستضدات التالية لتحفيز CD4^زائدفحص الخلايا التائية في مكتبة الخلايا التائية: {0}. 5 مجم / مل من البروتين المأشوب SNRPD1 البشري (SmD1) (Biorbyt Ltd. ، كامبريدج ، المملكة المتحدة) ، 5 0 نانوغرام / مل من SNRP7 البشري 0 (RNP7 0) البروتين المؤتلف (Abcam Plc. ، كامبريدج ، المملكة المتحدة) ، 0.5 مجم / مل من بروتين هيستون البشري الطبيعي (Abcam Plc.) ، 0.5 مجم / مل من SS البشري -A / Ro المؤتلف البروتين (يتم توفيره من قبل Euroimmun AG ، Lübeck ، ألمانيا) ، 0.5 مجم / مل من البروتين المؤتلف SS-B / La البشري (يرجى توفيره بواسطة Orgentec Diagnostika GmbH ، ماينز ، ألمانيا) ، 1 مجم / مل من SEB (Sigma-Aldrich Chemie GmbH ، Steinheim ، ألمانيا) ، 1 مجم / مل من PepTivator Candida albicans MP65 (Miltenyi Biotec GmbH ، Bergisch Gladbach ، ألمانيا) ، و 0.5 مجم / مل من البروتين البشري المؤتلف ترانستيريتين (ATGen ، Seongnam ، كوريا الجنوبية ).

مكتبات الخلايا التائية الطرفية والبولية تم اعتماد بروتوكول إنشاء مكتبات الخلايا التائية الطرفية والبولية المكبرة وتكييفه كما تم وصفه سابقًا.^زائدالخلايا التائية أو 500 إلى 2000 CD4 البولي^زائدتم عزل الخلايا التائية باستخدام مادة CD4 المضادة للإنسان^زائدMicroBeads (Miltenyi Biotec GmbH) وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة. نقاء CD4^زائدتم فحص جزء الخلايا التائية بشكل روتيني باستخدام متابعة القياس الخلوي على أساس CD3^زائدCD4^زائد expression, where the purity always reached >99 في المائة و 70 في المائة إلى 75 في المائة لعينات الدم المحيطي وعينات المسالك البولية ، على التوالي. في موازاة ذلك ، تم تحضير الخلايا العارضة للمستضد عن طريق جمع خلايا CD3 من PBMCs بعد استنفادها باستخدام CD3 MicroBeads المضاد للإنسان (Miltenyi Biotec GmbH) وحفظها بالتبريد. بعد أسبوع إلى أسبوعين من الثقافة ، تم تضخيم أجزاء من CD4^زائدتم توزيع الخلايا التائية في 96- لوحات جيدة ، اعتمادًا على عدد المستضدات المراد تحليلها. قبل التحفيز بالمستضدات ، تم إراحة الخلايا لمدة 4 أيام على الأقل. في يوم التحفيز ، تم إذابة تجميد الخلايا العارضة للمستضد وتوزيعها في مزرعة الخلايا التائية بنسبة 1 خلية عرض مستضد على الأقل إلى 100 CD4^زائدالخلايا التائية. CD4^زائدتم دائمًا تضمين مكتبات الخلايا التائية للتحكم السلبي (الخلايا غير المحفزة) والتحكم الإيجابي (الخلايا المحفزة باستخدام SEB) في التجارب. CD4^زائد تم تحفيز الخلايا التائية بالمستضد لمدة 4 أيام ، وتم تحديد الانتشار باستخدام بروتوكول ثيميدين [3 H] القياسي.

استجابت انفجارات الخلايا التائية المتضخمة بشكل مختلف للمستضدات المعروضة بواسطة التلألؤ غير المتجانس للغاية CPM ؛ وبالتالي ، كان من الضروري تطبيع عتبة الانتشار التي تم تحديدها على أنها درجة z الخاصة بالمانحين. تم حساب النتيجة z على أنها 5 اختلافات في المئين 75 و 25 أعلى من متوسط ​​التكلفة لكل ألف ظهور للزراعات الصغيرة غير المحفزة. عملت الخلايا في المزارع الصغيرة التي تم تحفيزها باستخدام SEB كعنصر تحكم إيجابي. وتجدر الإشارة إلى أن الثقافات الصغيرة ذات مؤشر التحفيز SEB يبلغ<5 for="" peripheral="" blood="" samples,="" or="" 4="" for="" urinary="" samples,="" were="" excluded="" because="" it="" indicated="" poor="" cell="" viability.="" enumeration="" of="" the="" precursor="" frequency="" of="" antigen-specific="">^زائدتم حساب الخلايا التائية باستخدام عدد الثقافات الدقيقة السلبية وفقًا لتوزيع بواسون ويتم التعبير عنها لكل مليون خلية ، كما هو موضح سابقًا. يعتمد استخدام توزيع بواسون على احتمال وجود 1CD4 على الأقل^زائدتوجد الخلية التائية في مزرعة صغيرة واحدة من مكتبات الخلايا التائية عندما تم الكشف عن الإشارة المشعة بعد التحفيز الخاص بالمستضد.

طرق ARTE المحيطية والبولية ، اتبعنا البروتوكول الذي يستخدم CD154 MicroBead Kit (Miltenyi Biotec GmbH). باختصار ، تم تحفيز الخلايا لمدة 7 ساعات باستخدام المستضدات ثم تمييزها بأجسام مضادة للبيوتين المضاد للإنسان 154- وميكروبيدات مضادة للبيوتين وفقًا لتعليمات الشركة الصانعة. تم تحميل الخلايا المصنفة على أعمدة MS تمت معايرتها (Miltenyi Biotec GmbH) لإثراء الخلايا المعبر عنها للقرص المضغوط 154-. تم وضع العلامات على الخلايا التي تحتوي على كربوكسي فلورسين ثنائي الأسيتات N-succinimidyl ester (Sigma-Aldrich Chemie GmbH) باتباع بروتوكول قياسي.

يحسن Cistancheالكلىالمهام.

جيل من الحيوانات المستنسخة وحيدة الخلية

تم إنشاء الحيوانات المستنسخة أحادية الخلية من الخلايا التفاعلية للمستضد ، والتي تم إثرائها بتعبير CD154 بعد بروتوكول ARTE. تمت تصفية الخلايا التي تعبر عن القرص المضغوط 154- باستخدام مرشح تحضير 30- مم (Miltenyi Biotec GmbH) وتم تعليقه في 1 مل من 2 0 بالمائة (حجم / حجم) محلول ملحي مخزّن من الفوسفات البارد ، 0.5 نسبة الألبومين المصل البقري ، وحمض الإيثيلين ديامينيتراسيتيك 2 ملي مولار. كانت الخلايا عبارة عن خلايا مفردة تم فرزها لـ CD154^زائدCD69^زائدتمت زراعة النمط الظاهري والخلايا المفردة الفرز في بئر مفردة مكونة من 96- ألواح جيدة في وجود خلايا مغذية. تم الحفاظ على مزارع الخلايا لمدة 3 إلى 4 أيام حتى ظهرت العديد من الحيوانات المستنسخة. قبل يوم واحد من إعادة التحفيز ، تمت إذابة تجميد الخلايا العارضة للمستضد وتوزيعها في مزرعة الخلايا التائية بنسبة

ما لا يقل عن خلية تقديم مستضد واحدة إلى 100 CD4^زائدالخلايا التائية. تم تحفيز الخلايا باستخدام 1 مجم / مل من المستضد ، وكانت الحيوانات المستنسخة غير المحفزة بمثابة عنصر تحكم سلبي.

تحليل ذخيرة TCR المستند إلى التسلسل من الجيل التالي

تم عزل الحمض النووي الجيني من CD4 المحيطي^زائدالخلايا التائية والخلايا البولية باستخدام مجموعة AllPrep DNA / RNA Micro Kit (Qiagen ، Venlo ، هولندا). تم تضخيم الموضع المعاد توحيده TCR-b باتباع البروتوكول كما هو موضح سابقًا. تمت معالجة القراءات باستخدام IMSEQ ، وتم تجميع أنماط استنساخ متساوية وتحليلها بشكل أكبر.

إحصائيات

تم إجراء الاختبارات الإحصائية باستخدام برنامج GraphPad Prism (Prism 8 ، GraphPad Software Inc. ، لا جولا ، كاليفورنيا). تم تطبيق تعديل Bonferroni لمقارنات متعددة. تم استخدام اختبار Mann-Whitney U واختبار تصنيف موقع Wilcoxon في التجارب مع مجموعة البيانات المستقلة والمعتمدة ، على التوالي. بعد تعديل Bonferroni للمقارنات المتعددة ، تم تصحيح حساب قيم P الحرجة لأنه يعتمد على عدد المقارنات المخطط لها. قيم P.<0.01 were="" considered="" statistically="" significant="" with="" the="" following="" indication:="" *p="" <="" 0.01,="" **p="" <="" 0.005,="" and="" ***p="" <="" 0.0005.="" correlation="" analyses="" were="" performed="" using="" spearman="" rank="" correlations="" by="" showing="" the="" absolute="">النظاميةالذئبةحماميقيم DAI بدلاً من القيم المرتبة لتوفير فهم أفضل للعلاقة بين عدد الخلايا ونشاط المرض. لتحليل الارتباط ، قيم P.<0.5 were="" considered="" statistically="" significant="" with="" the="" following="" indication:="" *p="" <="" 0.05,="" **p="" <="" 0.01,="" and="" ***p="" <="" 0.001.="" when="" background="" frequencies="" were="" higher="" than="" the="" frequencies="" of="" nuclear="" antigen–reactive="">^زائدالخلايا التائية ، تم تعريف الترددات بدون خلفية على أنها صفر. تم تطبيق تحويل السجل (x 1) على مجموعة البيانات عندما تضمنت قيمًا صفرية. تتوفر بيانات المريض والبيانات الإحصائية التكميلية في الجداول التكميلية S1 و S2.

المستضد النووي - CD4 التفاعلي^زائدتتوسع الخلايا بشكل نشطالنظاميةالذئبةحمامي، وتنتج السيتوكينات المستجيبة ، وتصيبالكلى، يمكن أن يحمي cistancheالكلى.

إفشاء

أعلنت جميع المؤلفين لا المصالح المتنافسة.

شكر وتقدير

نشكر Toralf Kaiser و Jenny Kirsch (مرفق قياس التدفق الخلوي وفرز الخلايا ، Deutsches Rheuma-Forschungszentrum Berlin) للمساعدة في قياس التدفق الخلوي وفرز الخلايا. تم تقديم الدعم لهذه الدراسات من خلال المنح المقدمة من Deutsche Forschungsgemeinschaft داخل Sonderforschungsbereich 650 إلى GR ومنح من Deutsche Gesellschaft für Nephrologie and Clinical Scientist Program of Charité-Universitätsmedizin Berlin ومعهد برلين للصحة إلى PE.

ملف المواد التكميلية التكميلية (PDF)

الشكل S1. CD4 الخاص بمستضد نووي ذاتي التفعيل^زائدتم الكشف عن الخلايا التائية بطريقة مكتبة الخلايا التائية. الشكل S2. CD154^زائدCD69^زائدCD4^زائدالخلايا التائية المعزولة بعد التحفيز بمولدات المضادات النووية من الأفراد الأصحاء هي CD4 الخاصة بمستضد النيتروجين^زائدالخلايا التائية.

الشكل S3. ترددات CD4 ذاتية التفعيل المنتجة للسيتوكين^زائدتمت مقارنة الخلايا التائية مع عيار الأجسام المضادة للنواة (anti-ANA) (A) ، ومع تركيز الأجسام المضادة لـ DNA الخيط المزدوج (anti-dsDNA) (B).

الشكل S4. CD4 التفاعلي للمستضد النووي^زائدتم الكشف عن الخلايا التائية في البول النشطالنظاميةالذئبةحماميالمرضى الذين يعانون من LN.

الجدول S1. بيانات سريرية.

الجدول S2. ملخص القيم المتوسطة.

الطرق التكميلية.

مرة واحدة فيالكلىمصاب بسبب المستضد النووي CD4 التفاعلي^زائدتتوسع الخلايا بشكل نشطالنظاميةالذئبةحمامي، الالكلىيتم تدمير الوظيفة ، ويستخدم التحسين لتحسينالكلىوظيفة.

المراجع

1. استهداف Casciola-Rosen LA و Anhalt G و Rosen A. Autoantigens فيالنظامية الذئبةحماميتتجمع في مجموعتين من الهياكل السطحية على الخلايا الكيراتينية الأبوطوزية. J إكسب ميد. 1994 ؛ 179: 1317-1330.

2. Arbuckle MR ، McClain MT ، Rubertone MV ، et al. تطوير الأجسام المضادة الذاتية قبل بداية السريريةالنظاميةالذئبةحمامي. إن إنجل جي ميد. 2003 ؛ 349: 1526-1533.

3. Suarez-Fueyo A، Bradley SJ، Tsokos GC. الخلايا التائية فيالنظاميةالذئبةحمامي. أوبن بالعملة إمونول. 2016 ؛ 43: 32-38.

4. كرو إم كي ، ديلجيوديس-آش جي ، زييتباور جي بي ، إت آل. تكاثر الخلايا التائية الخاصة بالمستجين الذاتي الناجم عن بروتين الريبوسوم P2 في المرضى المصابينالنظاميةالذئبةحمامي. ياء كلين إنفست. 1994 ؛ 94: 345–352.

5. إنجلر جي بي ، أونديوتش آر ، كلوك إل ، وآخرون. الكشف عن CD4 النشط ذاتيًا^زائدالخلايا التائية عن طريق استنفاد الخلايا التائية التنظيمية CD25 فيالنظاميةالذئبةحمامي. آن ريوم ديس. 2011 ؛ 70: 2176-2183.

وإلخ.