يستحث Cistanche Tubulosa موت الخلايا المبرمج لأنواع الأكسجين التفاعلي لخلايا سرطان القولون البشرية الأولية والنقيلة

أفنان صالح المنهالي ، صفية علي جميلة ، عائشة لطيف ، محمد الريس ، محمد الصيرفي ، مورانا جاغانجاك

معمل مكافحة المنشطات قطر ، علم السموم ومتعدد الأغراض ، الدوحة ، قطر.

معمل مكافحة المنشطات قطر ، أبحاث علوم الحياة ، الدوحة ، قطر.

اتصال:joanna.jia@wecistanche.com

نبذة مختصرة

سرطان القولون هو ثالث أكثر أنواع السرطانات شيوعًا في جميع أنحاء العالم. أظهرت العلاجات التقليدية فعالية معتدلة مع تأثيرات ضارة شديدة ، لذلك هناك حاجة ملحة لبدائل أكثر أمانًا. في هذه الدراسة،سيستانشتوبولوسا، اسم محلي ثانون ، كان يعتبر استراتيجية علاج نباتي محتملة بسبب إمكاناته العلاجية العالية المعروفة في الطب التقليدي ووفرة واسعة في منطقة الشرق الأوسط. تم استخلاص المركبات النشطة بيولوجيا من البودرةسيستانشتوبولوساواختبرت خصائصها المضادة للسرطان ضد أربعة القولونسرطانخطوط خلوية بما في ذلك خطان مشتقان من الورم الأساسي (CaCo2 و HCT116) واثنان مشتقان من الموقع النقيلي (LoVo و SW620). تأثيرسيستانشتوبولوساعلى تحريض موت الخلايا المبرمج والتوازن الخلوي الأكسدة والاختزال كما تم التحقيق.سيستانشتوبولوساأظهر تركيزًا وتثبيطًا يعتمد على الوقت لتكاثر جميع خطوط الخلايا السرطانية المختبرة بأكثر من 60 في المائة على 72 ساعة من العلاج مع 1 مجم / مل من المستخلص الخام. تم تمييز تثبيط الانتشار عن طريق تحريض موت الخلايا المبرمج ، وإنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية داخل الخلايا ، وأكسيد الميتوكوندريا الفائق. تشير هذه البيانات إلى أن Cistanche tubulosa مرشح واعد للعلاج الإضافي المضاد لسرطان القولون. هذه هي الدراسة الأولى التي تظهر النشاط الحيوي المضاد للسرطان في Cistanche tubulosa ضد خلايا سرطان القولون.

العنصر النشطسيستانشلديهمضاد للسرطانتأثير

الاختصارات:

7- AAD ، 7- أمينو-أكتينوميسين د ؛

CTE ،سيستانشمستخلص أنبوبي

EMEM ، وسيط النسر الأساسي الأدنى ؛

FBS ، مصل بقري جنيني ؛ DCF ، 2 ، 7- ثنائي كلورو فلورسين ؛

DCFH-DA، 2، 7- ثنائي أسيتات ثنائي كلورو ديهيدروفلوريسين؛

DMEM ، Dulbecco's Modified Eagle's Medium ؛

DMSO ، ثنائي ميثيل سلفوكسيد ؛ MTT ، 3- [4 ، 5- dimethylthiazol -2- yl] -2 ، 5- diphenyltetrazolium ؛

PE ، Phycoerythrin ؛ RFU ، وحدات الفلورة النسبية ؛

أنواع الأكسجين التفاعلية

المقدمة

يعد سرطان القولون والمستقيم أحد أكثر أنواع السرطان شيوعًا في جميع أنحاء العالم (Brenner et al.، 2014) ، ويتزايد حدوثه باستمرار مع ما يقدر بنحو 2.4 مليون حالة في عام 2035 ، بسبب النظام الغذائي الحديث وأسلوب الحياة ، إلى جانب انخفاض النشاط البدني. الجهود الحالية ليست كافية لمكافحة الوباء الحالي لسرطان القولون والمستقيم ، وبالتالي هناك حاجة إلى مناهج جديدة للوقاية والعلاج الفعال بما في ذلك التغييرات في نمط الحياة مع التدخلات البديلة الأكثر أمانًا مثل العلاج بالنباتات (Weidner et al. ، 2015). كان العلاج بالنباتات ، وهو استخدام النباتات الطبية لعلاج الأمراض ، جزءًا لا مفر منه من تاريخ البشرية القديم. لطالما استخدمت النباتات الطبية كمصادر علاج بديلة للسرطان ، وتمثل أكثر من ستين بالمائة من العوامل المضادة للسرطان المستخدمة في الطب التقليدي (Balunas and Kinghorn ، 2005 ؛ Saibu et al. ، 2015). تتضمن بعض الأمثلة الأكثر شهرة مقتطفات من Catharanthus roseus G. Don. (Apocynaceae) و Taxus baccata L. (Taxaceae) و Camptotheca acuminate Decne (Nyssaceae) (Cragg and Newman، 2005؛ da Rocha et al.، 2001). أظهر العديد من المستخلصات العشبية والمواد الكيميائية النباتية تأثيرًا مضادًا للأورام في سرطان القولون والمستقيم يُعزى إلى تحفيز إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) وما يرتبط بها من موت الخلايا المبرمج للخلايا السرطانية كما هو الحال بالنسبة للمستخلصات من ميليسا أوفيسيناليس (Weidner et al. ، 2015).

سيستانشالصحراء له تأثير مثبطزنزانةموت الخلايا المبرمج

من بين المرشحين للعلاج بالنباتات ،سيستانشtubulosa ، نبات صحراوي طفيلي من Orobanchaceae (Jiang et al. ، 2009) يتم توزيعه على نطاق واسع في المناطق القاحلة وشبه القاحلة في إفريقيا وآسيا ومنطقة البحر الأبيض المتوسط ​​، وقد ثبت أن له خصائص طبية قيّمة.سيستانشتم استخدام tubulosa على نطاق واسع في الطب التقليدي ويقترح أن يكون لها آثار علاجية في قصور الكلى ، سرطان الدم المرضي ، النزيف الرحمي ، العقم عند النساء ، والإمساك الخرف (Jiang et al. ، 2009). تمت دراسة Cistanche Tubulosa بشكل مكثف خلال العقد الماضي بما في ذلك vasorelaxant (Yoshikawa et al. ، 2006) ، و Hepoprotective (Morikawa et al ، 2010) ، والآثار المضادة لفرط سكر الدم ونقص شحميات الدم (Xiong وآخرون ، 2013). يُقترح أيضًا Cistanche Tubulosawas كمحسّن قوي لجهاز المناعة ، ومحفز لتكوين العظام ، وعامل مضاد للشيخوخة ومضاد للإرهاق (Xu et al. ، 2014). علاوة على ذلك ، فقد ثبت أن مستخلص Cistanche tubulosa يمنع ترسب الأميلويد في نموذج مرض الزهايمر (Wu et al. ، 2015). على الرغم من استخداماته العلاجية المختلفة ، لم يتم دراسة تأثير Cistanche Tubulosa كعامل محتمل مضاد للسرطان حتى الآن.

في العمل الحالي ، قمنا بالتحقيق في التأثير المضاد للسرطانسيستانشTubulosa على سطرين أوليين واثنين من خطوط خلايا سرطان القولون النقيلي والآليات المحتملة الكامنة وراء هذا التأثير.

المواد والأساليب

جمع وتحضير المستخلصات النباتية

عيناتسيستانشتم جمع tubulosa من المناطق الصحراوية في قطر خلال عام 2014 وأكد اختصاصي الزواحف صحة النبات. يتم أرشفة عينات القسائم في قسم علم السموم والأغراض المتعددة في ADLQ. تم طحن عينات النباتات المجففة بالشمس باستخدام مطحنة Retsch Knife Grindomix GM300 إلى مسحوق ناعم. تم استخلاص عشرين جرامًا من المسحوق مع 200 مل من الماء عالي النقاوة طوال الليل عند 37 درجة على شاكر دوار الساعة 200 مساءً. الخامسيستانشتم الطرد المركزي لمستخلصات tubulosa (CTE) لمدة 3 0 دقيقة عند 8000 دورة في الدقيقة لمركبات غير قابلة للذوبان في الحبيبات ، وتم جمع المادة الطافية وتجفيفها بالتجميد باستخدام Labconco Freezone 6 بالإضافة إلى مجفف التجميد. أعيد تكوين المستخلص المجفف في Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM ، SIGMA ، ألمانيا) بتركيز 20 مجم / مل وتم تصفيته معقم من خلال مرشح غشاء 0. 2- ميكرون.

خطوط الخلايا وصيانة الخلايا

تم الحصول على سلالات خلايا سرطان القولون البشري CaCo2 و SW620 و LoVo من Cell Lines Service (CLS ، Eppelheim ، ألمانيا) بينما كان خط خلايا HCT 116 هدية كريمة من قسم العلوم البيولوجية والبيئية بجامعة قطر. تم اشتقاق CaCo2 و HCT11 من الموقع الأساسي لسرطان القولون بينما تم اشتقاق SW620 و LoVo من الموقع النقيلي. تمت زراعة خلايا SW620 و HCT116 و LoVo وصيانتها في وسط DME بينما تم الحفاظ على خلايا CaCo2 في الوسيط الأساسي الأدنى من Eagle (EMEM ، SIGMA ، ألمانيا). نمت الخلايا كطبقة أحادية مستزرعة عند 37 درجة في الوسط المعني مكملًا بنسبة 10 بالمائة من مصل بقري جنيني (FBS ، SIGMA ، ألمانيا) و 1 بالمائة بنسلين / ستربتومايسين (SIGMA ، ألمانيا) في جو رطب يحتوي على 5 بالمائة من ثاني أكسيد الكربون.

فحص جدوى الخلية

تم استخدام مقايسة {0} [4 ، 5- ثنائي ميثيلثيازول -2- yl] -2 ، 5- diphenyltetrazolium (MTT) لتقييم النشاط السام للخلايا في CTE بالمثل كما تم وصفه سابقًا (Jaganjac et al.، 2 0 1 0). كانت كثافة البذر لخلايا CaCo2 و HCT116 و SW62 0 و LoVo المستزرعة في 96- لوحات جيدة 104 خلايا لكل بئر. تم طلاء الخلايا في الوسط الخاص بها مع إضافة 10 بالمائة من FBS قبل 24 ساعة من العلاج. بعد 24 ساعة ، تمت إزالة الوسط وعولجت الخلايا بـ 0 و 0.25 و 0.5 و 1 و 2 مجم / مل من CTE لمدة 24 و 48 و 72 ساعة عند 37 درجة في جو رطب يحتوي على 5 في المائة من ثاني أكسيد الكربون. عند معالجة CTE ، تمت إزالة الوسط وإضافة 40 ميكرولتر من محلول MTT (0.5 مجم / مل) إلى كل بئر.

بعد 3 ساعات من الحضانة ، تمت إزالة محلول MTT ، وتم إذابة منتج فورمازان في ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO ، SIGMA ، ألمانيا) ، وتم قياس الامتصاصية عند 590 نانومتر باستخدام قارئ الصفيحة الدقيقة (Infinite 200 PRO NanoQuant ، Tecan Trading AG ، سويسرا).

فحص موت الخلايا المبرمج

تم اكتشاف موت الخلايا المبرمج في خلايا CaCo2 و HCT116 و SW62 0 و LoVo باستخدام PE Annexin V Apoptosis Detection Kit I مع 7- Amino-Actinomycin D (7- AAD) كصبغة حيوية (Becton Dickinson International، Belgium) وفقًا لتعليمات الشركة الصانعة. باختصار ، تم زرع الخلايا في 24- ألواح بئر بكثافة 5 × 1 0 4 خلايا / بئر في وسط معين مُكمّل بـ 10 بالمائة FBS لمدة 24 ساعة قبل إضافة CTE (0 ، 0.5 ، أو 1 مجم / مل). بعد حضانة 24 CTE ، تم حصاد الخلايا وغسلها مرتين بمحلول ملحي بارد من الفوسفات وملطخ بـ Phycoerythrin (PE) Annexin V و 7- AAD لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة في الظلام. تم تحليل الخلايا الملطخة في غضون ساعة واحدة عن طريق قياس التدفق الخلوي باستخدام FACS. مقياس التدفق الخلوي Aria III وبرنامج FACSDiva (Becton Dickinson) بمعدل تدفق منخفض بحد أدنى 104 خلايا. تم استخدام علاج الخلايا لمدة 4 ساعات باستخدام 6 ميكرومتر كامبتوثيسين (سيغما) كعنصر تحكم إيجابي للمقايسة.

إنتاج ROS داخل الخلايا

تم فحص إنتاج ROS داخل الخلايا باستخدام 2 ، 7- ثنائي أسيتات ثنائي كلورو ديهيدروفلوريسين (DCFH-DA ، SIGMA ، ألمانيا). DCFH-DA هو مسبار غير فلوري ، يتأكسد باستخدام ROS داخل الخلايا إلى المركب الفلوري 2 ، 7- ثنائي كلورو فلورسين (DCF) (Poljak-Blazi et al.، 2 0 11). تم إجراء اختبار DCFH DA بشكل مشابه كما وصفنا من قبل (Cindric et al ، 2 0 13 ؛ Poljak-Blazi et al. ، 2011). باختصار ، كانت كثافة البذر لخلايا CaCo2 و HCT116 و SW620 و LoVo المستزرعة في أطباق سوداء جيدة 96- 104 خلايا لكل بئر. تم طلاء الخلايا في الوسط الخاص بها مع إضافة 10 بالمائة من FBS لمدة 24 ساعة. قبل العلاج ، تم تحضين الخلايا بـ 10 ميكرومتر DCFH-DA عند 37 درجة لمدة 30 دقيقة في 5 بالمائة من ثاني أكسيد الكربون / 95 بالمائة من الهواء. تم بعد ذلك غسل الخلايا ومعالجتها باستخدام 0 ، 0.5 ، و 1 مجم / مل من CTE في الوسط w / o الفينول الأحمر. تمت مراقبة تكوين ROS داخل الخلايا بشكل مستمر طوال 25 ساعة عند 37 درجة و 5 في المائة من ثاني أكسيد الكربون باستخدام قارئ صفيحة ميكروسكوبية مع وحدة تحكم في الغاز وفلور علوي (Infinite 200 PRO ، Tecan Trading AG ، سويسرا). تم قياس شدة التألق بطول موجة إثارة يبلغ 500 نانومتر وكشف الانبعاث عند 529 نانومتر. استندت الوحدات التعسفية ، وحدات الفلورة النسبية (RFU) ، مباشرة إلى كثافة التألق.

جيل أكسيد الميتوكوندريا الفائق

تم تقدير قدرة CTE على تحفيز توليد الأكسيد الفائق بواسطة الميتوكوندريا باستخدام مسبار MitoSOX Red (تقنيات الحياة) و Hoechst 33342 للتلوين النووي (تقنيات الحياة). تم زرع خلايا CaCo2 و HCT116 و SW62 0 و LoVo في 96- ألواح بئر بكثافة 1 0 4 خلايا لكل بئر في وسط خاص مكمل بنسبة 10 بالمائة FBS لمدة 24 ساعة. تم بعد ذلك تحميل الخلايا بـ 4 ميكرومتر من MitoSOX و 2 ميكرومتر من Hoechst 33342 لمدة 20 دقيقة ، وتم غسل الصبغة الزائدة ومعالجة الآبار بـ 0 و 0.5 و 1 مجم / مل من CTE لمدة 24 ساعة عند 37 درجة و 5 في المائة من ثاني أكسيد الكربون. تم قياس شدة التألق بطول موجة إثارة يبلغ 510 نانومتر وكشف انبعاث عند 580 نانومتر لميتوزوكس وطول موجة إثارة 350 نانومتر وكشف انبعاث عند 461 نانومتر لهويشت 33342 باستخدام قارئ صفيحة ميكروسكوبية مع مضان علوي (Infinite 200 PRO، Tecan Trading AG ، سويسرا).

تحليل احصائي

تم عرض الإحصاء الوصفي كمتوسط ​​زائد / - SD. تم تقييم أهمية الاختلافات بين المجموعات باستخدام اختبار الطالب واختبار مربع كاي. عندما تمت مقارنة أكثر من مجموعتين ، استخدمنا ANOVA من جانب واحد مع اختبار لاحق مناسب. تم استخدام SPSS 11. 0 1 لـ Mircosoft Windows. تعتبر الفروق مع P أقل من 0.05 ذات دلالة إحصائية.

سيستانشلديهامضاد للسرطانخصائص ويحسنحصانة

النتائج

يظهر تأثير CTE على تكاثر خطوط خلايا سرطان القولون البشرية في الشكل 1. أظهرت جميع تركيزات CTE التي تم اختبارها تأثيرًا مثبطًا قويًا على خط خلية CaCo2 بتركيز وبطريقة تعتمد على الوقت (الشكل 1 أ). أدت 72 ساعة من العلاج بالاعتلال الدماغي الرضحي المزمن إلى إعاقة نمو خلايا CaCo2 بأكثر من 6 0 في المائة مقارنةً بالسيطرة (p <0. 0="" 5="" لجميع="" التركيزات).="" تم="" الكشف="" أيضًا="" عن="" التأثير="" الكبير="" لعلاج="" الاعتلال="" الدماغي="" الرضحي="" المزمن="" على="" نمو="" الخلايا="" hct116="" في="" جميع="" الأوقات="" عند="" أعلى="" تركيزين="" (1="" مجم="" مل="" و="" 2="" مجم="" مل)="" ،="" حيث="" وصل="" إلى="" انخفاض="" بنسبة="" تزيد="" عن="" 7="" 0="" في="" المائة="" في="" المرحلة="" الأخيرة.="" تركيز="" (الشكل="" 1="" ب="" ،="" ف=""><0.05). على="" الرغم="" من="" أن="" تراكيز="" cte="" المنخفضة="" (0.25="" و="" 0.5="" مجم="" مل)="" قللت="" بشكل="" كبير="" من="" نمو="" hct116="" للخلايا="" بعد="" 24="" ساعة=""><0.05), they="" had="" no="" significant="" effect="" following="" 72="" hours="" treatment="" compared="" to="" control="" (p="">{{0}}. {{1 0}} 5). تم تأكيد التثبيط المعتمد على الوقت والتركيز للتكاثر باستخدام CTE في خلايا LoVo بأكثر من 6 0 في المائة عند أعلى تركيز (p <0. 0="" 5)="" (الشكل="" 1="" ج)="" ،="" وخفضت="" جميع="" تركيزات="" cte="" الأربعة="" التي="" تم="" اختبارها="" نمو="" خلايا="" sw62="" 0="" بعد="" 48="" ساعة="" (الشكل="" 1="" د="" ،="" ف=""><0. 05="" للجميع).="" بعد="" 72="" ساعة="" من="" العلاج="" لوحظ="" نفس="" التأثير="" فقط="" لأعلى="" تركيزين="" (p=""><0.05) بينما="" لم="" تظهر="" تركيزات="" 0.25="" و="" 0.5="" مجم="" مل="" أي="" تأثير="" معنوي="" مقارنة="" بالتحكم="" (p=""> 0.05). تم اختبار تأثير 0.5 و 1 ملغم / مل من العلاج CTE على تحريض موت الخلايا المبرمج في جميع خطوط الخلايا الأربعة (الشكل 2). تم الكشف عن زيادة عدد الخلايا في موت الخلايا المبرمج المبكر في HCT116 و LoVo بعد 24 ساعة من العلاج باستخدام 0.5 مجم / مل (p<0.05, figure="" 2b="" and="" 2c)="" and="" in="" all="" cell="" lines="" at="" 1="" mg/ml=""><0.05). a="" significant="" increase="" in="" necrotic="" or="" late="" apoptotic="" cell="" number="" was="" further="" observed="" in="" caco2="" and="" sw620="" cell="" lines=""><0.05, figure="" 2a="" and="" 2d).="" the="" ability="" of="" cte="" to="" induce="" intracellular="" ros="" production="" is="" demonstrated="" in="" figure="" 3.="" three="" hours="" following="" cte="" treatment="" there="" was="" a="" strong="" increase="" in="" intracellular="" ros="" production="" in="" all="" cell="" lines=""><0.05). the="" intracellular="" ros="" production="" increased="" progressively="" throughout="" the="" 25="" hours="" of="" treatment="" in="" a="" time="" and="" concentration-dependent="" manner.="" furthermore,="" staining="" of="" cells="" with="" mitochondria-targeted="" probe="" revealed="" a="" strong="" impact="" of="" cte="" on="" mitochondrial="" superoxide="" production="" in="" a="" concentration-dependent="" manner="" (figure="" 4).="" the="" highest="" increase="" in="" superoxide="" production="" by="" mitochondria="" was="" observed="" in="" hct116="" (69%,="" figure="" 4b)="" and="" lovo="" cells="" (82%,="" figure="" 4c)="" following="" 24="" hours="" of="" treatment="" with="" 1="" mg/ml="" of="">

نقاش

على الرغم من أن الدراسات السابقة قد أبلغت عن العديد من الخصائص الطبية لـسيستانشtubulosa ، هذا هو التقرير الأول عن تأثيره المضاد للتكاثر في الخلايا الخبيثة. أظهرت المركبات النشطة بيولوجيا Cistanchetubulosa المستخرجة بالماء ، مذيب عالي القطبية ، نشاطًا حيويًا قويًا مضادًا للسرطان. لقد قمنا في السابق بمقارنة كفاءةسيستانشtubulosa قابل للذوبان في الماء ضد المذيبات الأخرى مثل الميثانول وخلات الإيثيل ، لكن المستخلصات المائية أظهرت أكثر الأنشطة الواعدة المضادة للسرطان (البيانات غير معروضة).

لقد أظهرنا قدرة CTE عند 1 مجم / مل و 2 مجم / مل على تثبيط 60 في المائة من نمو كل من خطوط خلايا سرطان القولون الأولية والنقيلة ، مما يكشف عن دور مهم محتمل لـ Cistanche tubulosa كعلاج لسرطان القولون. بالمقارنة مع الخلايا الطبيعية ، تتميز الخلايا السرطانية عمومًا باضطراب في توازن الأكسدة والاختزال ، وتتمثل الإستراتيجية الشائعة للعلاجات الحالية المضادة للسرطان في زيادة الإجهاد التأكسدي الخلوي (Yang et al ، 2013). على الرغم من أن المستويات المنخفضة من الناحية الفسيولوجية لـ ROS لها دور مهم كجزيئات إشارات ، إلا أن إنتاج ROS المفرط يمكن أن يساهم في عدم استقرار السرطان والأورام الخبيثة (Liou and Storz ، 2010). ومن المفارقات أن هذا الخلل في التوازن الخلوي الأكسدة والاختزال يجعل الخلايا السرطانية أكثر عرضة لموت الخلايا الناجم عن ROS (Jaganjac et al. ، 2008 ؛ Nogueira and Hay ، 2013). يمكن التوسط في التأثير المضاد للتكاثر للاعتلال الدماغي الرضحي المزمن المبلغ عنه في هذه الدراسة من خلال آليات مختلفة داخل وخارج الخلايا لمركبات معروفة وغير معروفة داخل المستخلص ، وتستهدف مسارات متعددة تلعب أدوارًا أساسية في موت الخلايا المبرمج. للتمييز بين الأنماط المختلفة لموت الخلايا ، قمنا بالتحقيق في الآلية المحتملة المسؤولة عن السمية الخلوية التي يسببها CTE المرصودة.

تشير بياناتنا إلى أن CTE يزيد من إنتاج ROS داخل الخلايا وبالتالي موت الخلايا الناجم عن ROS. تلعب حالة الأكسدة والاختزال في الخلية أيضًا دورًا مهمًا في تنظيم موت الخلايا المبرمج وسلسلة نقل الإلكترون في الميتوكوندريا هي واحدة من المواقع الرئيسية لتوليد ROS الخلوي (Trachootham et al. ، 2008). علاوة على ذلك ، يمكن أن يتسبب ROS داخل الخلايا في موت الخلايا المبرمج الخلوي عبر كل من المسارات المعتمدة على الميتوكوندريا والمستقلة (Sinha et al. ، 2013). في الواقع ، تشير بياناتنا أيضًا إلى أن تخارج الفوسفاتيديل سيرين الناجم عن CTE ، وهو تأثير شائع في موت الخلايا المبرمج ، في كل من خطوط الخلايا السرطانية الأولية والنقيلة ، مما يشير إلى أن آلية الموت الناجم عن CTE يتم توسطها عن طريق موت الخلايا المبرمج بدلاً من النخر. إن تنشيط موت الخلايا المبرمج في الخلايا السرطانية هو إستراتيجية تصحيحية وقد تؤدي العديد من الأدوية المضادة للسرطان إلى تأثيرات موت الخلايا المبرمج في الخلايا السرطانية.

لذلك من المحتمل أن تكون المركبات أو المستخلصات ذات الأنشطة المؤيدة للاستماتة في الخلايا السرطانية مفيدة في أبحاث الأدوية المضادة للسرطان (Wong ، 2011). لتحديد ما إذا كان التأثير المؤيد للاستماتة الناتج عن CTE يتم توسطه بواسطة آلية ROS المستحثة بالميتوكوندريا ، قمنا بقياس إنتاج الأكسيد الفائق باستخدام مسبار الفلورسنت الذي يستهدف الميتوكوندريا في الخلايا المعالجة بالـ CTE. تُظهر بياناتنا بوضوح أن CTE يحفز إنتاج أكسيد الميتوكوندريا الفائق مما يشير إلى أن نشاط Cistanche tubulosa المضاد للسرطان يتم على الأقل جزئيًا من خلال آلية ROS المستحثة بالميتوكوندريا.

سيستانشلديهامضاد للسرطانوكبدالحمايةتأثيرات

الاستنتاجات

في الختام ، تشير بياناتنا إلى أن المستخلص المائي للنبات الصحراوي Cistanche tubulosa قد يمثل مرشحًا واعدًا لنهج مضاد للسرطان بالاشتراك مع العلاجات التقليدية الأخرى للوقاية من سرطان القولون وعلاجه. نوضح أيضًا أن سمية المستخلص النباتي ضد الخلايا السرطانية يتم توسطها عن طريق زيادة إنتاج ROS داخل الخلايا ، وعلى الأقل جزئيًا عن طريق موت الخلايا المبرمج المعتمد على الميتوكوندريا. المزيد من الدراسات جارية لعزل وتمييز المكونات النشطة بيولوجيًا الفردية المسؤولة عن النشاط المضاد للسرطان.

هناك حاجة إلى مزيد من البحث لتقييم الاستخدام المحتمل لهذا المستخلص كعامل وقائي كيميائي فعال وفهم آليات العمل على خلايا سرطان القولون على المستوى الجزيئي. هناك حاجة أيضًا إلى مزيد من الدراسات قبل السريرية والسريرية لتأكيد الآثار الصحية المفيدة المرصودة لـ Cistanche tubulosa للوقاية من السرطان.

شكر وتقدير

الدعم المالي والرعاية

تم دعم هذه الدراسة من قبل مختبر مكافحة المنشطات في قطر.

تضارب المصالح:

الكتاب تعلن أي تضارب في المصالح.

المراجع

Balunas MJ ، Kinghorn ، AD. اكتشاف الأدوية من النباتات الطبية. علوم الحياة. 2005 ؛ 78: 431-41.

برينر إتش ، كلور إم ، جدري سي بي. سرطان قولوني مستقيمي. لانسيت 2014 ؛ 383 ، 1490-502.

Cindric M ، Cipak A ، Zapletal E ، Jaganjac M ، Milkovic L ، Waeg G ، Stolc S ، Zarkovic N ، Suzana Borovic S. Stobadine يخفف من ضعف نموذج الحاجز المعوي الناجم عن 4- hydroxynonenal. توكسيكول في المختبر. 2013 ؛ 27: 426-32.

كراغ جنرال موتورز ، نيومان دي جي. النباتات كمصدر للعوامل المضادة للسرطان. 2005 ؛ 100: 72-9. da

Rocha AB، Lopes RM، Schwartsmann G. المنتجات الطبيعية في العلاج المضاد للسرطان. كوروبينفارماكول. 2001 ؛ 1: 364-9.

Jaganjac M ، Matijevic T ، Cindric M ، Cipak A ، Mrakovcic L ، Gubisch W ، Zarkovic N. Induction of CMV -1 المروج بواسطة 4- هيدروكسي -2- الاسمي في خلايا الكلى الجنينية البشرية. اكتا بيوتشيم بول. 2010 ؛ 57: 179-83.

Jaganjac M ، Poljak-Blazi M ، Zarkovic K ، Schaur RJ ، Zarkovic N. تورط الخلايا الحبيبية في الانحدار التلقائي لسرطان Walker 256. ليت السرطان. 2008 ؛ 260: 180-6.

جيانغ Y ، Tu PF. تحليل المكونات الكيميائية في أنواع Cistanche. ي تشروماتوجر أ. 2009 ؛ 1216: 1970-9. Liou GY، Storz P. أنواع الأكسجين التفاعلية في السرطان. الدقة الراديكالية الحرة. 2010 ؛ 44: 479-96.

Morikawa T ، Pan Y ، Ninomiya K ، Imura K ، Matsuda H ، Yoshikawa M ، Yuan D ، Muraoka O. بيورج ميد كيم. 2010 ؛ 18: 1882-90.

Nogueira V، Hay N. المسارات الجزيئية: توازن أنواع الأكسجين التفاعلي في الخلايا السرطانية وآثارها على علاج السرطان. كلين كانسر ريس. 2013 ؛ 19: 4309-14.

Poljak-Blazi M، Jaganjac M، Sabol I، Mihaljevic B، Matovina M، Grace M. تأثير أيونات الحديديك على تكوين أنواع الأكسجين التفاعلية ، نمو خطوط خلايا سرطان عنق الرحم وتعبير الجين الورمي E6 / E7. توكسيكول في المختبر. 2011 ؛ 25: 160-6.

Saibu GM ، Katerere DR ، Rees DJG ، Meyer M. في التأثيرات السامة للخلايا والمؤيدة للاستماتة لمستخلصات الماء من أوراق ومصابيح Tulbaghia violacea. ي إثنوفارماكول. 2015 ؛ 164: 203-9.

Sinha K، Das J، Pal PB، Sil PC. الإجهاد التأكسدي: المسارات المعتمدة على الميتوكوندريا والمستقلة عن الميتوكوندريا من موت الخلايا المبرمج. قوس Toxicol.2013 ؛ 87: 1157-80.

Trachootham D، Lu W، Ogasawara MA، Nilsa RD، Huang P. تنظيم الأكسدة والاختزال لبقاء الخلية. إشارة الأكسدة والاختزال المضادة للأكسدة. 2008 ؛ 10: 1343-74.

Weidner C، Rousseau M، Plauth A، Wowro SJ، Fischer C، Abdel-Aziz H، Sauer S. مستخلص ميليسا أوفيسيناليس يحفز موت الخلايا المبرمج ويمنع الانتشار في خلايا سرطان القولون من خلال تكوين أنواع الأكسجين التفاعلية. طب النبات. 2015 ؛ 22: 262-70.

وونغ RS. موت الخلايا المبرمج في السرطان: من التسبب إلى العلاج. ياء أكسب نوتر ريس السرطان. 2011 ؛ 30: 87.

وو ش ، تشو إف بي ، تشياو سي سي ، تشن جي إتش ، تو إس إف ، لين إتش إتش. التأثيرات المضادة للسرطان لمستخلص الوسابيا جابونيكا في خلايا سرطان الكبد Hep3B عن طريق تراكم أنواع الأكسجين التفاعلية وتلف الحمض النووي وموت الخلايا المبرمج بوساطة p 73-. J Funct Foods. 2015 ؛ 14: 445-55.

Xiong WT ، Gu L ، Wang C ، Sun HX ، Liu X. تأثيرات خافضة لفرط سكر الدم ونقص شحميات الدم من Cistanche tubulosa في الفئران المصابة بداء السكري من النوع 2 DB / DB. ي إثنوفارماكول. 2013 ؛ 150: 935-45

Xu R و Sun S و Zhu W و Xu C و Liu Y و Shen L و Shi Y و Chen J. ميزات بصمة الماكرو متعددة الخطوات بالأشعة تحت الحمراء لمستخلصات الإيثانول من أنواع Cistanche المختلفة في الصين جنبًا إلى جنب مع بصمة HPLC. J مول الهيكل. 2014 ؛ 1069: 236-244.

Yang Y ، Karakhanova S ، Werner J ، Bazhin AV. أنواع الأكسجين التفاعلية في بيولوجيا السرطان والعلاج المضاد للسرطان. Curr Med Chem. 2013 ؛ 20: 3677-92.

Yoshikawa M و Matsuda H و Morikawa T و Xie H و Nakamura S و Muraoka O. و oligoglycosides فينيلثانويد و oligosugars مع نشاط vasorelaxant من Cistanche tubulosa. بيورج ميد كيم. 2006 ؛ 14: 7468-75.