تحليل المكونات ونشاط مضادات الأكسدة للسكريات من Cistanche Deserticola

الملخص: في هذا البحث ، يتم استخلاص السكريات منCistanche Deserticola, Cistanche Deserticolaالخامعديد السكاريديتم تنقية CLP بواسطة كروماتوغرافيا عمود السليلوز DEAE ، ويتم الحصول على السكر المحايد CLP والسكر الحمضي CLP2 من Cistanche deserticola ، محتوى السكر الكلي وحمض اليورونيك والبروتين فيCistanche Deserticola الخام عديد السكاريدCLP ، Cistanche deserticola سكر محايد CLPl وCistanche Deserticola السكر الحمضييتم تحديد CLP2 عن طريق المسح الطيفي للأشعة فوق البنفسجية ، ويتم تحديد الوزن الجزيئي وتكوين السكاريد الأحادي لعديد السكاريد. في الوقت نفسه ، يتم تحليل قدرة الكسح الجذري DPPH والقدرة الإجمالية المضادة للأكسدة لـ Cistanche deserticola الخام عديد السكاريد CLP و Cistanche deserticola sugar المحايد CLP1 و Cistanche deserticola acidic sugar Cl.P2. تُظهر البيانات المقاسة أن مكونات Cistanche deserticola crud polysaccharide CLP و Cistanche deserticola سكر محايد CLP1 و Cistanche deserticola acidic sugarCLP2 متشابهة ، ولكن هناك اختلافات كبيرة في محتواها ، يمكن الحصول على قمم شطف متعددة عند Cistanche deserticola سكر محايد CLP1 و Cistanche يتم فصل السكر الحمضي الصحراوي CLP2 وتنقيته بواسطة عمود كروماتوغرافيا السليلوز DEAE ، وتوزيع الوزن الجزيئي هو 0 ~ 10 000 دا ، مما يشير إلى أن المكونات الرئيسية لعديد السكاريد Cistanche deserticola عبارة عن سكريات جزيئية صغيرة. تظهر نتائج تحديد السكاريد الأحادي للسكر Cistanche deserticola المحايد CLPl أن السكريات الأحادية في Cistanche deserticola السكر المحايد CLP1 هي أساسًا مانوز وحمض الجالاكتورونيك والجلوكوز والجالاكتوز والأرابينوز ، وتظهر نتائج تحديد السكاريد الأحادي لسكر Cistanche Deserticola الحمضي CLP2 أن السكريات الأحادية في Cistanche deserticola الحمضية CLP2 السكر الحمضي ClP2 عبارة عن رامنوز وحمض الجالاكتورونيك والجلوكوز والجالاكتوز ، وتظهر نتائج تجربة المسح الجذري DPPH وتجربة القدرة المضادة للأكسدة الكلية للسكريات من Cistanche CLP و Cistanche Deserticola السكر الحمضي CLP2.

الكلمات الدالة:Cistanche Deserticola; السكريات؛ تحليل المكونالنشاط المضاد للأكسدة؛ امتصاص.

احصل على مستخلص Cistanche Tubulosa للحصول على تأثير مستهدف

سيستانشهو نبات عشبي طفيلي يحتوي على عدد كبير منجليكوسيد الفينولs، التخليق الحيوي ،جليكوسيدات فينيلثانويدوالسكريات والكحوليات. الجليكانات بشكل رئيسي في شكل عديد السكاريد. يحتوي عديد السكاريد القيصري على نشاط مناعي قوي يعمل على تنظيم وظيفة [1-2].

بصفتها مستقلبات وسيطة في أنشطة حياة الإنسان ، تكون الجذور الحرة في حالة مستقرة غير مستقرة ولديها كثافة عالية من النشاط التأكسدي ، والذي يمكن أن يسبب جزيئات بيولوجية كبيرة ، وبالتالي ، فإن استخدام مضادات الأكسدة الطبيعية ، لذلك ، فإن استخدام المواد المضادة للأكسدة الطبيعية لكبح الجذور الحرة له أصبح الاتجاه الرئيسي لأبحاث الغذاء الحالية. تكوين عديد السكاريدسيستانشلديه قدرة مضادات أكسدة قوية ، والتي يمكن أن تعزز التخلص من الجذور الحرة في جسم الإنسان. تركيبة عديد السكاريد في Cistanches لديها قدرة قوية مضادة للأكسدة ويمكن أن تعزز إزالة الجذور الحرة في جسم الإنسان [3].

في هذه الورقة ، فإن ملفالسكرياتفي Cistanche stannic تم استخلاصها وتصنيفها بواسطة تغلغل هلام عالي الكفاءة. تم تحديد الوزن الجزيئي لعديد السكاريد في Cistanche بواسطة كروماتوغرافيا نفاذية هلامية عالية الأداء. تم تحديد الوزن الجزيئي لعديد السكاريد في Cistanche بواسطة كروماتوجرافيا نفاذية هلامية عالية الأداء ، كما تم تحديد الوزن الجزيئي لعديد السكاريد في Cistanche بواسطة كروماتوجرافيا نفاذية هلامية عالية الأداء ، وتم تحديد تكوين السكريات المتعددة. تحليلها.

تم تحليل النشاط المضاد للأكسدة لـ Cistanche عن طريق تحديد قوة الكسح الجذور الحرة والقدرة الكلية المضادة للأكسدة لمكونات السكاريد. لقد حددنا أيضًا القدرة على إزالة الجذور الحرة والقدرة الكلية المضادة للأكسدة لمكونات السكاريد في Cistanch ، وقدمنا ​​أساسًا نظريًا لتطوير واستخدام Cistanche وقيمته المضافة.

1 تحضير عينة واستخراج مواد عديد السكاريد من Cistanche

تزن 2.5 كجم من Cistanche ، قم بتقطيعها إلى شرائح ، أضف 12.5 لتر من الماء المقطر وقم بغليها لمدة 3 ساعات. بعد الغليان لمدة 3 ساعات ، تم جمع المرشح بالترشيح وإضافته إلى 75 بالمائة من الإيثانول ، وتركه لمدة 24 ساعة. بعد الغليان ، تم جمع المرشح عن طريق الترشيح ، تمت إضافته إلى 75 بالمائة من الإيثانول وتركه لمدة 24 ساعة ، بالطرد المركزي عند 4000 لفة / دقيقة لمدة 30 دقيقة ، وتم جمع الراسب. تم جمع الراسب ، وتجميده وتجفيفه للحصول على Cistanche الخام متعدد السكاريد CLP [4]. تم تجفيف الراسب بالتجميد للحصول على السكاريد الخام CLP من Cistanche [4]. تم أخذ السليلوز DEAE ، وغمره وتورمه ، وتم تفريغه من الغاز ، وتم تحميله على عمود تبادل أنيون السليلوز DEAE وتمت معايرته بالماء المقطر ومحلول كلوريد الصوديوم. تم استخدام محلول الماء وكلوريد الصوديوم للموازنة. تم إذابة 100 مجم من عديد السكاريد الخام لـ Cistanche tubulosa CLP في 10 مل من الماء المقطر ، وتم جمع الشطف بعد الشطف بالماء المقطر.

تم جمع الشطف بعد الشطف بالماء المقطر وتجفيفه بالتجميد بالتركيز للحصول على السكر المحايد CLP1 من Cistanche ؛ تم جمع الشطف بعد الشطف بمحلول NaCl ، ثم تم تركيزه وتجفيفه بالتجميد بعد غسيل الكلى للحصول على Cistanche acidic sugar CLP1. بعد الشطف بمحلول NaCl ، تم جمع الشطف وتركيزه عن طريق غسيل الكلى وتجفيفه بالتجميد للحصول على Cistanche acidic sugar CLP2 [5].

تم تحضير السكر المحايد CLP1 والسكر الحمضي CLP2 من Cistanche tubulosa بتركيز 1 مجم / كجم على التوالي. تم تحضير محاليل عديد السكاريد بتركيز 1 مجم / مل ، وتم تحليل السكريات بواسطة التحليل الطيفي للأشعة فوق البنفسجية باستخدام مقياس الطيف الضوئي عند 210-600 نانومتر. تم فحص أطياف الأشعة فوق البنفسجية باستخدام مقياس طيف ضوئي عند 210-600 نانومتر ، وعندما ظهرت الذروة عند 260-280 نانومتر عندما ظهرت الذروة عند 260-280 نانومتر ، ثبت أن المحلول يحتوي على بروتين وحمض نووي [6].

2 تحديد تكوين مادة السكاريد من Cistanche

تم استخدام طريقة حمض الفينول - الكبريتيك لتحديد محتوى السكر الكلي في عينات Cistanche. محاليل الجلوكوز 0. 1 مجم / مل ، 0. 2 ، 0. 4 ، 0. 6 ، 0. تم ​​قياس 8 و 1 مل في أنابيب اختبار زجاجية ، ويضاف الماء المقطر لتثبيت الحجم إلى 1 مل. ثم 0 تمت إضافة 5 مل من كاشف الفينول و 2.5 مل من حمض الكبريتيك المركز بتركيز 6 بالمائة إلى أنابيب الاختبار ، ورجها جيدًا وتبريدها إلى درجة حرارة الغرفة. تم قياس الامتصاصية عند 490 نانومتر باستخدام مقياس الطيف الضوئي ، وتم رسم المنحنى القياسي بمحتوى السكر باعتباره الإحداثي الأفقي والامتصاصية كإحداثي رأسي ، وتم حساب معادلة الانحدار [7-8].

تم تحديد محتوى البروتين في عينات Cistanche باستخدام طريقة Komas Brilliant Blue. تم قياس محتوى البروتين في العينات بواسطة مقياس الطيف الضوئي عند 495 نانومتر وتم حساب محتوى البروتين وفقًا لمعادلة المنحنى القياسية [9].

تم تحديد محتوى الجليوكسالات في عينات Cistanche باستخدام طريقة m-hydroxyphenyl. تراكيز مختلفة من المعيار و 0. 4 مل من محلول العينة بتركيز 0. تمت إضافة 1 مجم / مل إلى أنبوب الاختبار مع 2.5 مل من حامض الكبريتيك المركز ، ورجها

تمت إضافة تركيز m-hydroxybiphenyl و 0 .5٪ محلول هيدروكسيد الصوديوم إلى أنبوب الاختبار ، ورج جيدًا وتركه لمدة 30 دقيقة. تم قياس الامتصاصية عند 525 نانومتر بواسطة مقياس الطيف الضوئي ، وتم حساب كمية الجليوكسالات في العينة وفقًا لمعادلة المنحنى القياسية [10-11]. تم تحديد الوزن الجزيئي النسبي لعديد السكاريد في Cistanche بواسطة كروماتوجرافيا هلامية عالية الأداء ، وتم تحديد تكوين السكريات الأحادية لـ Cistanche بواسطة كروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء. تم تحديد تركيبة السكاريد الأحادي لـ Cistanche بواسطة كروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء [12].

3 نتائج وتحليل تكوين السكاريد من Cistanche Tubulosa

من الشكل 1 ، يمكن ملاحظة أن السكر المحايد CLP1 في Cistanche Tubulosa أظهر ذروة امتصاص واضحة عند 280 نانومتر ، بينما لم يكن للسكر الحمضي CLP2 في Cistanche Tubulosa ذروة امتصاص واضحة عند 260-280 نانومتر ، ولكن كان طيف امتصاص الأشعة فوق البنفسجية أعلى. نظرًا لأن التربتوفان والتيروزين الموجودان في البروتينات لهما قيم امتصاص أكبر للأشعة فوق البنفسجية عند 280 نانومتر ، يمكن الحكم على أن Cistanche السكر المحايد CLP1 يحتوي على بروتينات سكرية ، ولكن لا يمكن الحكم على ما إذا كان سكر Cistanche الحمضي CLP2 يحتوي على الأحماض النووية والبروتينات.

لا يمكن تحديد ما إذا كان السكر الحمضي CLP2 في Cistanche يحتوي على الأحماض النووية والبروتينات.

يمكن لتحليل عمود كروماتوغرافيا التبادل الأيوني السالب لـ DEAE أن يمتص المواد والشوائب الأيونية على العمود لتحقيق فصل مواد السكاريد ، وبعد تركيز وتجفيف شطف الماء المقطر ، تم الحصول على إجمالي 34.68 مجم من Cistanche السكر المحايد CLP1 ، وبعد ذلك باستخدام محلول كلوريد الصوديوم للتصفية والتركيز والتجفيف ، تم الحصول على إجمالي 16.52 مجم من السكر الحمضي Cistanche CLP2. معادلة المنحنى القياسية لمحتوى السكر الكلي ومحتوى البروتين ومعادلة منحنى الجليوكسيلات القياسي. تم الحصول على قياسات السكر الكلي والبروتين والجليوكسيلات من Cistanche. تم قياس إجمالي محتويات السكر والبروتين وحمض الجلوكورونيك في Cistanche وعرضها في الجدول 1.

يظهر منحنى مسح طيف الأشعة فوق البنفسجية لمقياس الضوء من 210 إلى 600 نانومتر في الشكل 1.

من الشكل 1 ، يمكن ملاحظة أن سكر Cistanche neutrophilic CLP1 أظهر ذروة امتصاص واضحة عند 280 نانومتر ، بينما أظهر سكر Cistanche الحمضي CLP2 ذروة امتصاص عند 260-280 نانومتر. وأظهر السكر الحمضي CLP2 في Cistanche Tubulosa ذروة امتصاص واضحة عند 260-280 نانومتر. على الرغم من عدم وجود ذروة امتصاص واضحة عند 260-280 نانومتر ، إلا أن طيف امتصاص الأشعة فوق البنفسجية كان أعلى. نظرًا لأن التربتوفان والتيروزين الموجودان في البروتينات لهما قيمة امتصاص أكبر عند 280 نانومتر لقيمة امتصاص الأشعة فوق البنفسجية ، يمكن الحكم على أن Cistanche neutrophilic sugar CLP1 يحتوي على بروتينات سكرية ، ولكن لم يكن من الممكن تحديد ما إذا كان سكر Cistanche الحمضي CLP2 يحتوي على أحماض نووية وبروتينات . لا يمكن تحديد وجود الأحماض النووية والبروتينات في Cistanche CLP2.

يمكن لتحليل عمود كروماتوغرافيا التبادل الأيوني السالب لـ DEAE أن يمتص المواد والشوائب الأيونية في العمود. تم تحقيق فصل مواد السكاريد عن طريق امتصاص المواد الأيونية والشوائب على العمود. تم تركيز وجفاف الماء المقطر للحصول على السكر المتعادل من Cistanche بعد التركيز وتجفيف شطف الماء المقطر ، تم الحصول على إجمالي 34.68 مجم من CLP1 ، وبعد التركيز والتجفيف باستخدام محلول NaCl ، تم الحصول على السكر الحمضي CLP1. تم الحصول على السكر الحمضي CLP2 من Cistanche على أنه 16.52 مجم. تم الحصول على معادلة المنحنى القياسية لمحتوى السكر الكلي ومحتوى البروتين ومحتوى الجليوكسيلات في Cistanche. ومعادلة المنحنى المعياري للجليوكسيلات. تم الحصول على قياسات السكر الكلي والبروتين والجليوكسيلات من Cistanche. تم قياس إجمالي محتويات السكر والبروتين وحمض الجلوكورونيك في Cistanche وعرضها في الجدول 1.

الجدول 1 محتوى السكر الكلي والبروتين وحمض البولي في Cistanche deserticola

يمكن تحديد الوزن الجزيئي ومنطقة الذروة للعينة القياسية ، ويمكن الحصول على معادلة الانحدار باستبدال إشارة انبعاث الضوء للعينة المراد اختبارها في معادلة الانحدار. يمكن الحصول على الوزن الجزيئي للعينة المراد اختبارها. يمكن الحصول على الوزن الجزيئي للعينات المراد اختبارها عن طريق استبدال قيم إشارة انبعاث الضوء للعينات المراد اختبارها في معادلة الانحدار. تم الحصول على متوسط ​​الوزن الجزيئي ومتوسط ​​الوزن الجزيئي الثقيل ومعامل التشتت لـ Cistanche Tubulosa CLP1 و Cistanche Tubulosa CLP2. تم تحديد Cistanche السكر المحايد CLP1 و Cistanche CLP2 الحمضي بواسطة كروماتوغرافيا نفاذية هلامية عالية الأداء. نتائج حساب وقت الاستبقاء والوزن الجزيئي موضحة في الجدول 2. تم استخدام نسبة متوسط ​​الوزن الجزيئي الثقيل إلى متوسط ​​الوزن الجزيئي للإشارة إلى عرض التوزيع الجزيئي. يتم استخدام نسبة الوزن الجزيئي المتوسط ​​الثقيل إلى متوسط ​​الوزن الجزيئي للإشارة إلى عرض التوزيع الجزيئي.

يطلب المزيد:

البريد الإلكتروني: wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp / Tel: plus 86 15292862950