Cistanche: Echinacoside يثبط نمو خلايا سرطان البنكرياس الغدي عن طريق تحفيز موت الخلايا المبرمج عبر مسار بروتين كينيز Mitogen المنشط

جهة الاتصال: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 البريد الإلكتروني:audrey.hu@wecistanche.com

WEI WANG و JINBIN LUO و YINGHUI LIANG و XINFENG LI

الملخص.

اكتسب التطبيق السريري للمنتجات الطبيعية المشتقة من الطب الصيني التقليدي اهتمامًا في العلاج الكيميائي للسرطان.إشيناكوسايد(ECH) ، أحد فينيلثانويدس ، معزول عن سيقانسيستانش(دواء عشبي صيني) له تأثيرات واقية للأنسجة ومضادة للاستماتة على الجهاز العصبي المركزي. ومع ذلك ، لا يزال بعيد المنال إلى حد كبير ما إذا كان ECH يمتلك نشاطًا قمعًا للورم. في هذه الدراسة ، تم إثبات أن ECH يمكن أن يمنع بشكل ملحوظ تكاثر خلايا سرطان البنكرياس عن طريق تحفيز إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية واضطراب إمكانات غشاء الميتوكوندريا وبالتالي تحفيز موت الخلايا المبرمج. علاوة على ذلك ، تم توضيح أن ECH(إشيناكوسايد)يثبط نمو الخلايا السرطانية من خلال تعديل نشاط MAPK. في الختام ، تكشف هذه الدراسة عن وظيفة جديدة لـ ECH (إشيناكوسايد) في منع تطور السرطان ، ويعني ضمنيًا أن استخدام ECH يمكن أن يكون استراتيجية علاج كيميائي محتملة للسرطان.

مقدمة

مسار مثبط الورم p53 عن طريق تحريض مثبط الورم ، ARF يخفف من تحلل p53 المكوّن من 3- ligase الماوس (MDM) 2- بوساطة تدهور p53 (3). هذه آلية ذاتية التنظيم وقائية ذاتية تمنع الخلايا من التحول الخبيث. والجدير بالذكر أن p53 يمكنه كبح نشاط Myc عن طريق التنشيط النصي ، على سبيل المثال ، miR -145 الذي يستهدفمايكمرنا لإسكات الترجمة (4،5) ، وبالتالي تشكيل حلقة تنظيمية ردود فعل سلبية.

تتمثل الإستراتيجية الأكثر مباشرة وفعالية لعلاج السرطان في قتل الخلايا السرطانية. تظهر الأدوية المضادة للسرطان شائعة الاستخدام ، مثل سيسبلاتين (6) وأكتينوميسين د (7) وأدرياميسين (8) أنها تمنع نمو الورم عن طريق تعزيز موت الخلايا المبرمج. في الآونة الأخيرة ، أثبتت الأدلة المتزايدة أن عددًا من المنتجات الطبيعية ومشتقاتها من النباتات ، لا سيما من النباتات الطبية المستخدمة في الطب الصيني التقليدي (TCM) ، تُظهر وظيفة قمع الورم عن طريق تحفيز موت الخلايا المبرمج للخلايا السرطانية ولديها إمكانية للتطبيق السريري في علاج السرطان (9). على سبيل المثال ، يتم عزل anthraquinone emodin الطبيعي من أنواع عديدة من الخلايا السرطانية (10،11). Camptothecin ، مشتق من "الشجرة السعيدة" الصينية ،كامبتوثيكا مستدق الطرف، هو منتج طبيعي قيم يمنع ربط الحمض النووي بعد فواصل حبلا توبو I بوساطة (12). في دراسة جماعية أخرى بأثر رجعي على السكان لما مجموعه 729 مريضًا مصابًا بسرطان الثدي المتقدم ، تم اقتراح أن العلاج بالطب الصيني التقليدي يمكن أن يساهم في علاج السرطان. من هذه المجموعة ، كان 115 مريضًا من مستخدمي الطب الصيني التقليدي بينما لم يستخدم 614 مريضًا الطب الصيني التقليدي. أظهر التحليل متعدد المتغيرات أنه ، مقارنة مع غير المستخدمين ، كان استخدام الطب الصيني التقليدي مرتبطًا بانخفاض كبير في مخاطر الوفيات لجميع الأسباب (13). أشارت جميع النتائج المذكورة أعلاه إلى أن الطب الصيني التقليدي هو دواء تكميلي وبديل مهم يمكن استخدامه في علاج السرطان.

الفئران المصابة بإصابة رئوية حادة (16،17). أيضا ، ECH(إشيناكوسايد)لقد ثبت أن لها تأثيرات وقائية على الأنسجة العصبية وتحسن الاضطرابات السلوكية في نماذج الفئران لمرض باركنسون (18). والجدير بالذكر أنه قد وجد أن ECH يعزز تكاثر الخلايا ويمنع موت الخلايا المبرمج في خلايا MODE-K الظهارية المعوية في الفئران (19). حتى الآن ، ومع ذلك ، فقد تم إيلاء اهتمام أقل للدور المحتمل لـ ECH في الوقاية من السرطان.

في هذه الدراسة ، تم استكشاف ما إذا كان علاج ECH يؤثر على نمو خلايا الورم وتكاثرها وما إذا كان ECH(إشيناكوسايد)يحث على موت الخلايا المبرمج ، ويزيد من إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) ويقلل من إمكانات غشاء الميتوكوندريا (MMP) ، وبالتالي يمنع نمو الخلايا السرطانية. علاوة على ذلك ، تهدف الدراسة الحالية إلى تحديد الآليات الجزيئية المسؤولة عن تثبيط نمو الخلايا بوساطة ECH.

المواد و طُرق

خلية خط، كاشف و الأجسام المضادة.SW199 0 خلايا سرطان البنكرياس الغدية (ATCC ، Manassas ، VA ، الولايات المتحدة الأمريكية) تمت تربيتها في وسط Dulbecco المعدل النسر مع 10 بالمائة من مصل بقري جنيني ، 50 وحدة / مل بنسلين و 0.1 مجم / مل ستربتومايسين عند 37 درجة مئوية في a الجو المرطب بنسبة 5 في المائة من ثاني أكسيد الكربون. إيك(إشيناكوسايد)تم شراؤها من Jrdun Biotechnology Corp. (شنغهاي ، الصين). تم شراء الأجسام المضادة ضد AKT و P-AKT و ERK و P-ERK و JNK و p-JNK و P38 و p-P38 و GAPDH من Cell Signaling Technology (Danvers ، MA ، USA) ؛ تم شراء anti-Bax و anti-Bcl -2 من شركة Santa Cruz Biotechnology Inc. (سانتا كروز ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية) ؛ و anti-Caspase -3 تم شراؤه من Abcam (شنغهاي ، الصين).

خلية بقاءفحص. لتقييم معدل نمو خلايا الورم ، تم استخدام مجموعة عد الخلايا {0} (CCK -8 ؛ Dojindo Molecular Technologies ، Rockville ، MD ، الولايات المتحدة الأمريكية) وفقًا لإرشادات الشركة المصنعة. تم بذر المعلقات الخلوية عند 5 ، 000 خلايا لكل بئر باستخدام معالجة ECH لمدة 0 أو 12 أو 24 أو 48 أو 72 ساعة في 96 - ألواح استنبات جيد. تم تحديد تثبيط نمو الخلية عن طريق إضافة كاشف WST -8 من مجموعة CCK-8 بتركيز نهائي قدره 10 في المائة لكل بئر ، وتم قياس امتصاص العينات عند 450 نانومتر باستخدام قارئ صفيحة ميكروسكوبية (Multiskan MK3 ؛ Thermo Fisher Scientific ، Inc. ، والثام ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية).

هويشت 33342 تلطيخ.تم علاج الخلايا (التقاء 60 بالمائة) بـ Hoechst 33342 (معهد Beyotime للتكنولوجيا الحيوية ، Haimen ، الصين) بتركيز نهائي قدره 1µجم / مل ، محضن في حاضنة 37 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة ، وغسله بمحلول ملحي مخزّن بالفوسفات مرتين ، ومثبت في بارافورمالدهيد بنسبة 4 في المائة لمدة 30 دقيقة عند درجة حرارة الغرفة ، ومركبًا على شرائح. لوحظت التغيرات المورفولوجية لنواة الخلية تحت مجهر مضان (أوليمبوس BX51 ، ميلفيل ، نيويورك ، الولايات المتحدة الأمريكية). كانت النوى الطبيعية مستديرة وملطخة باللون الأزرق الفاتح ، في حين أن نوى موت الخلايا المبرمج كانت منكمشة وملطخة باللون الأزرق الفاتح.

الإسفار تنشيط زنزانة فرز (FACS) التحليلات.لتقييم موت الخلايا المبرمج ، تم استخدام الفلورسين أيزوثيوسيانات (FITC) -Annexin V للكشف عن موت الخلايا المبرمج (BD Biosciences ، شنغهاي ، الصين) وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة. لفترة وجيزة ، تم غسل 5 × 1 0 4 خلايا باستخدام PBS بارد ، وتم تعليقها في محلول ربط 0.1 مل (معهد Beyotime للتكنولوجيا الحيوية) ، وملطخة بـ 10 مل من الملحق V المترافق مع FITC (10 مجم / مل) و 10 مل يوديد البروبيديوم (PI) (50 مجم / مل). بعد الحضانة لمدة 15 دقيقة في درجة حرارة الغرفة في الظلام وإضافة 400 مل من محلول الربط المؤقت ، تم تحليل الخلايا بواسطة مقياس التدفق الخلوي (C6 ؛ BD Biosciences ، شنغهاي ، الصين).

قياس من رد الفعل الأكسجين محيط (روس).لتقييم إنتاج ROS ، تم استخدام مجموعة فحص أنواع الأكسجين التفاعلية (Vigorous Biotechnology ، بكين ، الصين) وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة. باختصار ، تم حصاد الخلايا (التقاء 80 بالمائة) وغسلها باستخدام PBS قبل تلطيخها بمحلول ثنائي هيدرو إيثيديوم (DHE) (معهد بيوتايم للتكنولوجيا الحيوية). ثم تم تحليل الخلايا عن طريق تحليلات التدفق الخلوي.

قياس من ميتوكوندريا غشاء القدره (MMP).

تم استخدام مجموعة فحص رباعي ميثيل رودامين ميثيل استر (TMRM) (تقنيات الكيمياء المناعية ، بلومنجتون ، مينيسوتا ، الولايات المتحدة الأمريكية) لاكتشاف التغييرات في MMP. باختصار ، تم حصاد الخلايا (التقاء 80 بالمائة) وغسلها باستخدام برنامج تلفزيوني وتلطيخها بـ TMRM لمدة 15-20 دقيقة في حاضنة 37 درجة مئوية. تم بعد ذلك غسل الخلايا مرة واحدة باستخدام برنامج تلفزيوني وإخضاعها لتحليلات قياس التدفق الخلوي.

مناعيالتحليلات. تم حصاد الخلايا (8 0 في المائة من التقاء) وفصلها في محلول RIPA (Jrdun Biotechnology) يتكون من 50 ملي مولار من Tris-HCl ، ودرجة الحموضة 7.4 ؛ 150 ملي كلوريد الصوديوم ، 1 مم EDTA ، 1 في المائة NP 40 ، 1 في المائة حمض ديوكسيكوليك الصوديوم و 0.1 في المائة SDS ومثبطات البروتيازوم المضافة حديثًا. تم استخدام كميات متساوية من محلول الخلية الصافية لتحليل المناعة كما هو موضح سابقًا (20).

الإحصاء التحليلات.يتم التعبير عن البيانات الكمية على أنها المتوسط ​​± الانحراف المعياري. تم تقييم الفروق الإحصائية بواسطة اختبار t غير المزاوج للطالب باستخدام برنامج SPSS 15. 0 الإحصائي. ص<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

نتائج

إيك (إشيناكوسايد)يقمع ورم زنزانةنمو. على الرغم من أنه تم الإبلاغ عن أن ECH(إشيناكوسايد)يُظهر دورًا وقائيًا عن طريق تثبيط موت الخلايا المبرمج والإشارات الالتهابية في الخلايا الجسدية ، مثل الخلايا الظهارية العصبية والأمعاء (16-19) ، يظل من الصعب تحديد ما إذا كانت ECH تتحكم في نمو الخلايا السرطانية وتكاثرها. لاختبار هذا ، تم إجراء اختبار بقاء الخلية عن طريق معالجة خلايا SW1990 ، المشتقة من سرطان غدي بنكرياس من الدرجة الثانية ، بجرعات معايرة من ECH كما هو موضح في الشكل 1. بشكل ملحوظ ، تم إثبات أن ECH يؤخر بشكل كبير تكاثر الخلايا السرطانية في جرعة - بطريقة مستقلة خلال فترة الثقافة اليومية 5- (الشكل 1).إيك محفزاتموت الخلايا المبرمج. نظرًا لأن فقدان موت الخلايا المبرمج هو أحد الآليات المسببة الرئيسية الكامنة وراء الانتشار غير المنضبط لخلايا سرطان البنكرياس (21) ، أجرت الدراسة الحالية مجموعة من التجارب لتحديد ما إذا كانت ECH تؤدي إلى موت الخلايا المبرمج. أولاً ، من خلال تلطيخ نوى الخلايا السرطانية باستخدام Hoechst 33342 ، تم إثبات أن ECH يؤدي إلى موت الخلايا المبرمج بطريقة تعتمد على الجرعة (الشكل 2 أ). بالإضافة إلى ذلك ، أجريت تحليلات نظام مراقبة الأصول الميدانية باستخدام تلطيخ Annexin V / PI لتأكيد تأثير موت الخلايا المبرمج لـ ty ECH (الشكل 2 ب). كان متوسط ​​النسبة المئوية للخلايا المبرمجية 1.1 في المائة في ظل ظروف الاستنبات الطبيعي ، بينما زادت هذه النسبة بشكل ملحوظ إلى 10.6 و 21.4 و 51.3 في المائة استجابةً لعلاج ECH بطريقة تعتمد على الجرعة (الشكل 2 ج). توضح هذه النتائج ، جنبًا إلى جنب مع مقايسة قابلية الخلية الموضحة في الشكل 1 ، أن علاج ECH يمنع تكاثر الخلايا السرطانية عن طريق تحفيز موت الخلايا المبرمج.

توليد الإيثيديوم الذي يقحم مع الحمض النووي ، تم استخدامه في هذه الدراسة لتقييم إنتاج ROS. لقد وجد أنه ، مثل الأدوية الأخرى المضادة للسرطان ، يحفز ECH أيضًا إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية بطريقة تعتمد على الجرعة كما هو موضح في كثافة التألق المرتفعة عند علاج ECH (الشكل 3).

إيك (إشيناكوسايد)يقلل التمثيل التناسبي المختلط.لقد ثبت أن الخلل الوظيفي في الميتوكوندريا متورط في تحريض موت الخلايا المبرمج. تم إثبات أن فتح مسام انتقال نفاذية الميتوكوندريا للحث على إزالة الاستقطاب من إمكانات الغشاء وإطلاق العوامل المؤيدة للاستماتة (23). لذلك ، تم اختبار ما إذا كان ECH يمكن أن يؤدي إلى فقدان MMP في الخلايا السرطانية عن طريق إجراء اختبار TMRM ، وهو نهج راسخ ، حيث تتناسب كثافة مضان TMRM مع إمكانات الغشاء. تم إثبات أن علاج ECH يقلل بشكل كبير من MMP بطريقة تعتمد على الجرعة (الشكل 4).إيك ضوابط ورم زنزانة نمو عبر بروتين منشط ميتوجينتم فحص الأساس الجزيئي لموت الخلايا السرطانية بوساطة ECH ، ونشاط العديد من مسارات الإشارات الحيوية ، مثل MAPK و AKT (24،25) ، والتي تتحكم في بقاء الخلية وموتها. يتم حفظ MAPKs تطوريًا ، كينازات بروتين Ser / Thr الموجهة بالبرولين ، بما في ذلك كينازات تنظيم الإشارات خارج الخلية (ERKs) ، و c-Jun NH 2- كيناز طرفي (JNKs) وأفراد عائلة p38 الذين يتم تنشيطهم من خلال ثلاثة شلالات إشارات الطبقة كيناز (26،27). في هذه الدراسة ، تم تقييم التعبير عن MAPKs و AKT ، بالإضافة إلى أشكالها الفسفورية المنشطة ، وتم الكشف عن أن ECH يقمع بشكل ملحوظ نشاط JNK و ERK1 / 2 ، ولكنه يعزز نشاط p38 (الشكل 5). والجدير بالذكر أنه تم إثبات أن نشاط AKT ، وهو أيضًا مهم للغاية لتكاثر الخلايا ، لا يتأثر بعلاج ECH (الشكل 5). بالإضافة إلى ذلك ، تم توضيح أن معالجة ECH ترفع من تعبير Bax و Caspase -3 مع تقليل تعبير Bcl -2 (الشكل 5) ، وهو ما يتوافق مع الشكل 2. وبالتالي ، تشير النتائج إلى أن يؤدي ECH إلى موت الخلايا المبرمج للخلايا السرطانية عبر مسار MAPK.

مناقشة

على حد علمنا ، هذه هي الدراسة الأولى التي تُظهر أن ECH لها وظيفة قمع للورم عن طريق تحفيز موت الخلايا المبرمج (الشكل 2) ، وتعزيز إنتاج ROS (الشكل 3) وتحفيز إزالة الاستقطاب المحتمل لغشاء الميتوكوندريا (الشكل 4) ، مما يؤدي إلى تثبيط نمو الخلايا السرطانية (الشكل 1). علاوة على ذلك ، تبين أن الأساس الجزيئي لموت الخلايا السرطانية بوساطة ECH يحدث من خلال تنظيم مسارات إشارات MAPK (الشكل 5). توضح هذه النتائج وظيفة جديدة لـ ECH في منع تكون الأورام وبالتالي تشير إلى أنه قد يكون عاملًا مرشحًا لعلاج السرطان.

يمكن أن تؤدي غالبية الأدوية المضادة للسرطان إلى موت الخلايا المبرمج للخلايا السرطانية و / أو الشيخوخة و / أو توقف دورة الخلية ، مما يؤدي إلى تثبيط نمو الخلايا السرطانية وانتشارها. توقف دورة الخلية هو استجابة خلوية لإشارات الإجهاد الخفيفة التي تسمح للخلايا بإصلاح الحمض النووي التالف قبل البدء في تخليق الحمض النووي التكراري أو الانقسام ، في حين يحدث موت الخلايا المبرمج والشيخوخة (توقف دورة الخلية الدائم) استجابةً لإشارات الإجهاد التي تقضي على الخلايا الخبيثة أو غير القابلة للإصلاح ( 28 ، 29). لذلك ، تم تقييم تأثير موت الخلايا المبرمج لـ ECH على الخلايا السرطانية فقط في هذه الدراسة ، حيث أن قتل الخلايا السرطانية هو معيار رئيسي لتقييم فاعلية عامل مضاد للسرطان. والجدير بالذكر أنه تم إثبات أن ECH يستحث التعبير عنباكس(الشكل 5) ، وهو جين مؤيد للاستماتة ، يتم تنشيطه نسبيًا بواسطة مثبط الورم p53 (30). وبالتالي ، من المفيد اختبار ما إذا كان بإمكان ECH تنشيط مسار إشارات p53. إذا كان الأمر كذلك ، فقد تتمكن ECH أيضًا من إثارة 53- توقف دورة الخلية المعتمدة أو الشيخوخة أو موت الخلايا المبرمج أو الالتهام الذاتي. في هذه الدراسة ، تم توضيح وظيفة تثبيط الورم لـ ECH في خط خلايا سرطان البنكرياس الغدي SW1990. ومع ذلك ، هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات التي تلاحظ المزيد من خطوط خلايا سرطان البنكرياس. لقد ثبت أن الطفرات في بروتين الأورام RAS ومانع الورم p53 ترتبط بتطور سرطان البنكرياس (31) ؛ ومع ذلك ، لا يحتوي خط الخلية SW1990 على أي طفرة p53 ، وفقًا لقاعدة بيانات IARC p53 (http://p53.iarc.fr/CellLines.aspx). ومن ثم ، من المهم التحقق مما إذا كان ECH يمكن أن يؤثر على نمو وانتشار سلالات خلايا سرطان البنكرياس الأخرى ذات الطفرات p53 المختلفة. بالإضافة إلى ذلك ، سيكون من المثير للاهتمام تحديد ما إذا كانت ECH قادرة على تعزيز موت الخلايا المبرمج وتمنع نمو أنواع أخرى من الأورام.

ثبت أن ارتفاع ROS وتقليل MMP ، اللذان سببهما علاج ECH ، ضروريان في تحريض موت الخلايا المبرمج (22). بالإضافة إلى ذلك ، فقد وجد أن أنواع الأكسجين التفاعلية يمكن أن تحفز أكسدة مسام الميتوكوندريا مما يساهم في إطلاق السيتوكروم.c، وسيط في موت الخلايا المبرمج ، بسبب تعطيل MMP (22). وبالتالي ، يبقى أن نحدد ما إذا كانت ECH تعطل MMP بشكل غير مباشر من خلال تحريض ROS. علاوة على ذلك ، فقد ثبت أيضًا أن الإجهاد التأكسدي الناتج عن ROS متورط في تعديل عدد لا يحصى من إشارات التحكم في نمو الخلايا ، بما في ذلك p53 و NF-B و HIFs و PI3K (32). يبقى أن نحدد ما إذا كان الأمر كذلك ، وإذا كان الأمر كذلك ، كيف تنظم ECH مسارات الإشارات المهمة هذه. والجدير بالذكر أن الإجهاد التأكسدي يسبب العديد من الأمراض العصبية التنكسية بسبب ارتفاع استهلاك الأكسجين ، وضعف أنظمة مضادات الأكسدة وخصائص التمايز النهائي للجهاز العصبي المركزي (33). ومع ذلك ، فقد أظهرت العديد من الدراسات أن ECH لها تأثيرات وقائية ومضادة للاستماتة على الأنسجة العصبية. في هذا الصدد ، من المعقول افتراض أن ECH قد تقلل من إنتاج ROS في الخلايا العصبية المتمايزة الطرفية. لذلك ، يبقى تحديد ما إذا كان تنظيم إنتاج ROS بواسطة ECH يعتمد على حالة تمايز الخلايا. ومن ثم ، فإن النتائج الحالية جنبًا إلى جنب مع دراسات أخرى تكشف أن ECH ، الطب الصيني التقليدي المستخدم على نطاق واسع ، يمكن أن يكون استراتيجية علاج كيميائي مهمة ليس فقط لعلاج الأمراض التنكسية العصبية ولكن أيضًا السرطانات الخبيثة.

في الآونة الأخيرة ، اكتسب استخدام الطب الصيني التقليدي في علاج السرطان اهتمامًا متزايدًا. لقد تم الاعتراف بإمكانيات المنتجات الطبيعية من النباتات الطبية المستخدمة في الطب الصيني التقليدي من قبل المجتمع العلمي حتى في العالم الغربي (9). يلزم بذل جهود لتوضيح الآليات الأساسية لعمل هذه المنتجات الطبيعية ، والتي قد تؤدي في النهاية إلى تطوير أدوية فعالة وآمنة لعلاج السرطان.

في الختام ، أظهرت الدراسة الحالية الوظيفة المثبطة للورم لـ ECH وتوضح أيضًا الأساس الجزيئي لقمع الورم بوساطة ECH ، مما يشير إلى التطبيق السريري المحتمل لـ ECH في علاج السرطان.

شكر وتقدير

تم تمويل هذه الدراسة ودعمها من قبل البرنامج الرئيسي للبحث العلمي من FMU (المنحة رقم 09ZD014). يود المؤلفون أن يشكروا Biomedworld (شنغهاي ، الصين) للمساعدة في تحرير المخطوطة.

مراجع

1. Hanahan D و Weinberg RA: السمات المميزة للسرطان: الجيل القادم. الخلية 144: 646-674 ، 2011.

2. Alderton GK: النسخ: تأثيرات النسخ من MYC. نات ريف كانسر 14: 513 ، 2014.

3. Zindy F و Eischen CM و Randle DH و Kamijo T و Cleveland JL و Sherr CJ و Roussel MF: إشارات Myc عبر مثبط الورم ARF ينظم p 53- موت الخلايا المبرمج المعتمد والخلود. Genes Dev 12: 2424-2433 ، 1998.

4. Sachdeva M و Zhu S و Wu F و Wu H و Walia V و Kumar S و Elble R و Watabe K و Mo YY: p53 يقمع c-Myc من خلال تحريض مثبط الورم miR -145. Proc Natl Acad Sci USA 106: 3207-3212 ، 2009.

5. Liao JM و Cao B و Zhou X و Lu H: رؤى جديدة في وظائف p53 من خلال microRNAs المستهدفة. J Mol Cell Biol 6: 206-213 ، 2014.

6. Zamble DB و Lippard SJ: إصلاح السيسبلاتين والحمض النووي في العلاج الكيميائي للسرطان. Trends Biochem Sci 20: 435-439 ، 1995.

7. Kleeff J و Kornmann M و Sawhney H و Korc M: يحرض Actinomycin D موت الخلايا المبرمج ويمنع نمو خلايا سرطان البنكرياس. Int J Cancer 86: 399-407 ، 2000.

8. Tacar O و Sriamornsak P و Dass CR: Doxorubicin: تحديث عن العمل الجزيئي المضاد للسرطان والسمية وأنظمة توصيل الأدوية الجديدة. J Pharmacol 65: 157-170 ، 2013.

9. Efferth T و Li PC و Konkimalla VS و Kaina B: من الطب الصيني التقليدي إلى العلاج العقلاني للسرطان. مؤشرات Mol Med 13: 353-361 ، 2007.