تأثير الإيتشيناكوسايد على الفئران التي تعاني من نقص التروية الدماغية

خلاصة: الهدف دراسة تأثيرإشينوسايد(ECH) على الناقلات العصبية أحادية الأمين في السائل خارج الخلية للجسم المخطط في الجرذان المصابة بنقص تروية دماغية بؤرية، ولاستكشاف الآلية المحتملة لتأثير ECH الوقائي العصبي على الدماغ. الطرق تم تقسيم فئران SD بشكل عشوائي إلى مجموعة مراقبة، ومجموعة نموذجية، ومجموعات جرعة عالية ومنخفضة ECH، ومجموعة ليجوترازين (CXQ). أعطيت الفئران في كل مجموعة الأدوية المقابلة أو المياه المالحة الفسيولوجية داخل الصفاق مرة واحدة يوميا لمدة 7 أيام. في اليوم الثالث من الإعطاء، تم وضع غلاف المسبار في الجسم المخطط للدماغ. بعد ساعة واحدة من آخر جرعة، تم صنع نموذج الفئران لنقص تروية الدماغ البؤري (MCAO). بعد صنع النموذج، تم إجراء غسيل الكلى الدقيق على الفور. تم حقن الديالة في كاشف التحليل اللوني الكهروكيميائي السائل عالي الأداء (HPLC-ECD) لتحديد محتوى النورإبينفرين (NE)، الدوبامين (DA)، 5- هيدروكسي تريبتامين (5- HT)، 3 ،4- حمض ثنائي هيدروكسي فينيل أسيتيك (DOPAC)، وحمض الهوموفانيليك (HVA)، 5- حمض هيدروكسي إندول أسيتيك (HIAA) في السائل خارج الخلية للمخطط لكل مجموعة. النتائج بالمقارنة مع مجموعة التحكم، زادت مستويات NE وDA و5-HT في المجموعة النموذجية، كما زادت المستقلبات الحمضية DOPAC وHVA وHIAA. بالمقارنة مع المجموعة النموذجية، انخفضت محتويات ستة مواد في مجموعات الجرعات العالية والمنخفضة من ECH (30، 15 مجم · كجم - 1 · d - 1) ومجموعات CXQ. الاستنتاج قد يكون التأثير الوقائي العصبي لـ ECH مرتبطًا بزيادة الناقلات العصبية أحادية الأمين بعد نقص التروية الدماغية.

مسحوق سيستانش

الكلمات الدالة: إشينوسايد; نقص التروية الدماغية؛ الجسم المخطط. [هبلك]-نماء الطفولة المبكرة؛ الناقلات العصبية أحادية الأمين والأيضات

إشناسيوسايد(ECH) هو مكون فعال من جليكوسيدات الفينيلثانويد المعزولة والمنقاة منهاسيستانش ديزيرتيكولا, مصنع خاص في شينجيانغ. أظهرت الدراسات أن ECH له تأثيرات وقائية عصبية مثل مضادات الأكسدة [1-2]، وحماية الأعصاب [3-4]، ومكافحة الشيخوخة [5]، وتحسين التعلم والذاكرة [6-8]. نتائج تشن هونغ وآخرون. أكد أن ECH له تأثير وقائي على الخلايا العصبية DA في مرض باركنسون [9]. الناقلات العصبية أحادية الأمين هي نوع من المواد المهمة التي تنظم الأنشطة الفسيولوجية للجسم.يمكن أن يعكس المحتوى الموجود في الأنسجة عمليات التخليق الحيوي للناقل العصبي، وإطلاقه، وامتصاصه، وتعطيله [10-11]. في الوقت الحاضر، لا يوجد تقرير ذو صلة حول تأثير ECH على أجهزة إرسال أحادي الأمين في دماغ الجرذان المصابة بنقص التروية الدماغية. في هذه الدراسة، تم دراسة تأثير ECH على محتوى الناقلات العصبية أحادية الأمين في السائل خارج الخلية في الجسم المخطط للفئران المصابة بنقص التروية الدماغية باستخدام تقنية التحليل الدقيق للدماغ، وتم استكشاف الآلية المحتملة لـ ECH على الحماية العصبية للدماغ بشكل مبدئي.

مسحوق استخراج Cistanche tubulosa

1.مادة

1.1 حيوانات التجارب

فئران SD، ♂، كتلة الجسم 250 ~ 300 جرام (تم شراؤها من مركز شينجيانغ للحيوانات التجريبية، رقم الترخيص: 2009-0053).

1.2 الأدوية والكواشف

يتم التبرع بـ ECH من قبل البروفيسور Tu Pengfei، كلية الصيدلة، جامعة بكين (درجة نقاء أعلى من 95٪)؛ نورإبينفرين (NE)، دوبامين (DA)، 5- هيدروكسي تريبتامين (5- HT)، 3، 4- حمض ثنائي هيدروكسي فينيل أسيتيك (DOPAC)، حمض هوموفانيليك (HVA)

5-حمض أسيتيك هيدروكسي إندول (HIAA) هو سيجما؛ رباعي ميثيل بيرازين هيدروكلوريد للحقن (CXQ، Harbin Sanlian Pharmaceutical Co.، Ltd.)؛ أسمنت فوسفات الزنك (منتج لشركة Shanghai Medical Instruments Co., Ltd.، مكون من سائل ومسحوق، مخلوط مع الزمن)؛ الصوديوم 1- كبريتات الألكيل (DIKMA)؛ هيدرات حامض الستريك (معهد تيانجين جينكه للبحوث الكيميائية الدقيقة)؛ سترات ثلاثي الصوديوم (أكروس)؛ ثنائي الصوديوم إيثيلينديامين حمض رباعي الأسيتيك (JTTakerChemicalco)؛ الميثانول (ديكما) ؛ الأسيتونيتريل (ديكما)؛ سائل نضح غسيل الكلى الدماغي هو مركب حقن كلوريد الصوديوم (Beijing Shuanghe Pharmaceutical Co., Ltd.)؛ جميع المياه المستخدمة هي مياه إعادة البخار.

1.3 الصك

جهاز التوجيه المجسم لدماغ الفئران BAS4100 الأمريكي؛ CMA/12 مسبار وغطاء مسبار؛ CMA/120 جهاز الحيوان الواعي؛ مضخة صغيرة CMA/402؛ جهاز تجميع العينات الأوتوماتيكي ذو درجة الحرارة المنخفضة CMA/150. مضخة التسريب ESA 5600A؛ مضخة التسريب ESA 5600A؛ جهاز حقن العينات الأوتوماتيكي Esa 542؛ كاشف Esa's CoulArray الكهروكيميائي؛ القطب الكهربائي الكربوني الزجاجي والقطب المرجعي Ag/AgCl؛ عمود C18 (DIKMA، ODS5 ميكرومتر، 150 مم × 4.6 مم)؛ محطة عمل التحليل اللوني CoulArraywin (شركة Esa)؛ خلاط دوامي (نوع QL -861)؛ جهاز اختبار الحموضة المكتبي (HANNA-211); جهاز طرد مركزي عالي السرعة لسطح المكتب (نوع XYJ-2).

2.طريقة

سيستملحق anche بالقرب مني — ايمإثبات الذاكرة

انقر هنا لعرض منتجات Cistanche Improve Memory

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

2.1 تجميع الحيوانات وإدارتها

تم تقسيم ثلاثين فأرًا عشوائيًا إلى خمس مجموعات: ① مجموعة التحكم: 1 مل · كجم -1 · د -1 محلول ملحي عادي؛ ② المجموعة النموذجية: محلول ملحي عادي 1 مل · كجم -1 · د -1؛ ③ الموديل + ليجوترازين (CXQ) 30 مجم · كجم -1 · د-1; ④ - ⑤ مجموعات الجرعات العالية والمنخفضة الطراز + ECH (ECHB، ECHS): 30، 15 مجم · كجم-1 · d-1; تم حقن جميع الحيوانات في كل مجموعة داخل الصفاق لمدة 7 أيام.

2.2 طريقة النمذجة والتحليل الدقيق

تم دفن كل فأر باستخدام قنية في اليوم الثالث من تناوله: تم تخدير الفئران بنسبة 10٪ من هيدرات الكلورال (3.5 مل · كجم -1)، مثبتة على جهاز التصويب المجسم للدماغ BAS4100، و تم زرع قسطرة المسبار في المخطط الأيسر (الإحداثيات AP: +0.2mm؛ ML: - 3.0mm؛ DV: - 3.5mm) بخصوص "الخريطة المجسمة لدماغ الجرذ" لجورج باكسينوس. بعد الإدارة الأخيرة، تم تخدير الفئران بعد ساعة واحدة، وتم صنع نموذج نقص تروية دماغية بؤري للفئران (نموذج MCAO) باستخدام طريقة خياطة لونجا المحسنة الخاصة بـ Yang Zanzhang [12]. تم إدخال خط السمك في مجموعة التحكم بمقدار 10 مم فقط، وكانت الخطوات الأخرى هي نفس تلك الموجودة في مجموعة العمليات. بعد النمذجة، أدخل مسبار غسيل الكلى الدقيق في حالة الحركة الواعية والحرة، واستخدم محلول Ringer لـ μ تم جمع غسيل الكلى الدقيق في الدماغ عند 4 درجات وتم جمع أنبوب من غسيل الكلى في 20 دقيقة. بعد جمع كل أنبوب من الدياليت، يجب تخزينه على الفور في ثلاجة بدرجة - 20، ونقله إلى ثلاجة بدرجة - 70 بعد غسيل الكلى. تم قياس معدل استرداد المسبار قبل الاستخدام، والذي تم استخدامه لتحويل تركيز الناقلات العصبية أحادية الأمين في الديالة.

ماذا يفعل cistanche tubulosa - تحسين الذاكرة

2.3 تحليل HPLC-ECD

تكوين الطور المتحرك: يحتوي الطور المتحرك على 829 مل من 0.15mol · L-1 عازل سيترات حمض الستريك والصوديوم لكل لتر؛ 0.1mol · L-1 ثنائي الصوديوم EDTA 1 مل؛ ميثانول 150مل؛ صوديوم {{10}}كبريتات الألكيل 0.283 جم. اضبط معدل تدفق الطور المتحرك على 0.7ml · min-1، ودرجة حرارة فرن العمود على 28 درجة. جهد تشغيل الكاشف الكهروكيميائي هو 200mV، 400mV، و600mV، مع 2، 3، و4 قنوات على التوالي؛ الربح هو 2nA. حجم الحقن 25 ميكرولتر. يتم رسم المنحنى القياسي باستخدام 0.025، 0.05، 0.1، 0.2، 0.5 ملجم · L-1 محلول قياسي مختلط متدرج.

2.4 المعالجة الإحصائية

يتم التعبير عن البيانات التجريبية بالمجال x ± s، ويتم تحليل بيانات القياس المتكررة باستخدام البرنامج الإحصائي SPSS13.0.

يوضح الشكل 1-6 التغييرات في مستويات NE وDA وDOPAC وHIAA وHVA و5-HT في السائل خارج الخلية في مخطط الفئران. يتبين من الشكل أنه بعد نقص تروية الدماغ، تعاني الناقلات العصبية أحادية الأمين في السائل خارج الخلية في الجسم المخطط من اضطراب أيضي، ويزداد محتوى كل ناقل عصبي. وفي نطاق معين، تكون الزيادة أكثر وضوحًا مع إطالة زمن نقص التروية. عند 90 دقيقة من نقص التروية، كان تركيز DA وNE في السائل خارج الخلية للمخطط أكثر من ثلاثة أضعاف مستوى المجموعة الضابطة. انخفضت مستويات NE وDA وDOPAC وHIAA وHVA و5-HT في المجموعة الضابطة من الأعلى إلى الأدنى، والذي قد يكون مرتبطًا بنقص تروية الدماغ الأيسر المؤقت بعد ربط الشريان السباتي المشترك الأيسر. والأضرار الناجمة عن إدخال المسبار. من منحنى التغيير، يمكن لـ ECH وCXQ تقليل التركيز الأقصى لـ DA وDOPAC وHIAA وHVA و5-HT بعد نقص تروية الدماغ، كما أن CXQ وجرعة عالية من ECH أكثر وضوحًا. يشير التحول التنازلي لمنحنى المسار الزمني لكل ناقل عصبي إلى أن ECH يمكن أن يمنع زيادة الناقلات العصبية ومستقلباتها في دماغ الفئران المصابة بنقص التروية الدماغية.

                                                                           الشكل 2 تأثير Echinoside على المستوى خارج الخلية لـ DA في الجسم المخطط للفئران

الشكل 3 تأثير الإشينوسايد على المستوى خارج الخلية للدوباك في الجسم المخطط للفئران الشكل 4 تأثير الإشينوسايد على المستوى خارج الخلية لفيروس نقص المناعة البشرية في الجسم المخطط للفئران

الشكل 5 تأثير الإشينوسايد على المستوى خارج الخلية لـ HVA في الجسم المخطط للفئران الشكل 6 تأثير الإشينوسايد على المستوى خارج الخلية لـ 5- HT المخطط للفئران

4.مناقشة

سوبرمان سيستانشعشب—محسنلقد الذاكرة

【اطلب المزيد】 البريد الإلكتروني: cindy.xue@wecistanche.com / تطبيق Whats: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

آلية إصابة الدماغ الناجمة عن نقص تروية الدماغ معقدة. في حالة نقص التروية الدماغية، تتعطل الناقلات العصبية أحادية الأمين في الدماغ، وتنخفض محتويات NE وDA و5-HT بشكل ملحوظ. كلما زادت شدة نقص التروية الدماغية، انخفضت محتويات NE وDA و5-HT في أنسجة المخ [13]. أثبتت طريقة التحليل الدقيق داخل المخ أن محتوى الناقلات العصبية أحادية الأمين زاد في السائل خارج الخلية أثناء نقص تروية الدماغ، واستمر طوال الفترة الإقفارية بأكملها، وزاد بشكل أكبر مع إطالة الوقت الإقفاري. وكانت النتائج التجريبية متسقة مع التقرير [14].إشينوسايدهو مكون فعال من جليكوسيدات فينيلثانويد المعزولة والمنقاة من نبات Cistanche deserticola، وهو نبات خاص في شينجيانغ. له العديد من التأثيرات الوقائية للأعصاب مثل مكافحة الشيخوخة، وتحسين التعلم والذاكرة، ومضاد لموت الخلايا العصبية. في هذه الدراسة، تم استخدام غسيل الكلى الدقيق المحلي المتقدم مع تقنية الكشف عن HPLC-ECD لاستكشاف تأثيرإشينوسايدعلى الناقلات العصبية أحادية الأمين ومستقلباتها في السائل خارج الخلية في الجسم المخطط لفئران التجارب المصابة بنقص التروية الدماغية. أظهرت النتائج أن ECH يمكن أن يقلل من زيادة الناقلات العصبية أحادية الأمين في السائل خارج الخلية في الجسم المخطط الناجم عن نقص تروية الدماغ، وله تأثير أفضل على تحسين تلف الأنسجة الدماغية.