فعالية العلاج المركب لمستخلصات Laminaria Japonica و Cistanche Tubulosa في نمو الشعر

جهة الاتصال: emily.li@wecistanche.com

كيونغها شين 1 # وآخرون

نظرًا لأن تساقط شعر فروة الرأس قد ازداد مؤخرًا حتى لدى الشباب ، مما يؤثر بشكل خطير على جودة حياة الأفراد ، فإننمو الشعر- تحفيز تأثير مستخلص Laminaria japonica (LJE) وCistanche tubulosaتم التحقيق في استخراج (CTE). بعد التأكد من طور التنامي للبصيلات تحت الحلاقة ، تم وضع ذكور C57BL / 6 الفئران عن طريق الجلد مع 3 في المائة من المينوكسيديل أو عن طريق الفم مع توليفات من LJE و CTE （Cistanche tubulosaمقتطف)لمدة 21 يومًا. شجع المينوكسيديل على إعادة نمو الشعر وزيادة أنشطة ترانسبيبتيداز الجلوتاميل (-GTP) وأنشطة الفوسفاتيز القلوية (ALP). بالإضافة إلى ذلك ، مستويات عامل نمو البشرة المنتظم في مينوكسيديل (EGF) وعامل نمو بطانة الأوعية الدموية (VEGF). الإدارة المشتركة لـ LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)عند 54 مجم / كجم من LJE بالإضافة إلى 162 مجم / كجم ، CTE (Cistanche tubulosaمقتطف)يمارس تأثيرًا تآزريًا معززًا على إعادة نمو الشعر ، مقارنة بنسبة 3 في المائة من المينوكسيديل. عزز LJE نشاط ALP بشكل تفضيلي ، بينما CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)زيادة أنشطة GTP و ALP بالإضافة إلى تعبيرات EGF و VEGF. تم قمع نموذج التهاب كيس الهواء في الجسم الحي ، والنضح الوعائي الناجم عن الكاراجينان ، وزيادة تركيز أكسيد النيتريك والبروستاغلاندين E2 في الإفرازات بشكل تآزري عن طريق الإدارة المشتركة لـ LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف). بالإضافة إلى ذلك ، تم منع تسلل الخلايا الالتهابية بشكل كبير من خلال العلاج التوافقي. تشير النتائج إلى أن العلاج الفموي التوافقي مع LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)الجرعات والنسب غير المناسبة تمنع تساقط الشعر وتحسن من تساقط الشعر ، والذي يمكن أن يتم توسطه جزئيًا من خلال أنشطتهم المضادة للالتهابات.

الكلمات الدالة نمو الشعر، التهاب ، لاميناريا جابونيكا ،Cistanche tubulosaالعلاج التوافقي

Cistanche tubulosaاستخراج له وظائف عديدة

في الآونة الأخيرة ، يتزايد تساقط شعر فروة الرأس حتى لدى الشباب ، مما يؤثر بشكل خطير على نوعية حياة الفرد. على الرغم من أن الصلع ليس من المشاكل الصحية ، إلا أنه قد يسبب ضغوطًا اجتماعية عميقة وغير مريحة من الناحية النفسية. لذلك ، من الأهمية بمكان تطوير مواد وقائية و / أو علاجية جديدة لتساقط الشعر وإعادة نموه. على الرغم من سوق المليار دولار ، هناك عدد قليل من المنتجات الفعالة المتاحة حاليًا [1].
تعيد بصيلات الشعر تشكيل نفسها خلال فترات النمو الدورية (طور التنامي) ، والتراجع (التراجع) ، والراحة (التيلوجين) ، والتساقط (الخارج) [2]. خلال فترة التراجع ، تخضع الكثير من الخلايا الجريبية لموت الخلايا المبرمج (موت الخلايا المبرمج) [3] ، مما يقلل من حجم الجريب عندما تدخل الجريبات في التيلوجين. تنشيط الخلايا الجذعية الظهارية التي نادرًا ما تكون متدرجة والموجودة في منطقة الانتفاخ للبصيلات يؤدي إلى تجديد المسام في بداية مرحلة التنامي التالية [4]. تشكل ذرية الخلايا الجذعية مصفوفة جرابية جديدة خلال طور التنامي المبكر ، ويتم اشتقاق جذع الشعرة وغمد الجذر الداخلي من خلايا المصفوفة غير المتمايزة نسبيًا [5]. من المعروف أن حجم بصيلات الشعر ومدة طور التنامي يتحكمان في حجم (القطر) وطول جذع الشعرة ، على التوالي. يتم تنظيم هذا النمو الدوري للشعر من خلال عوامل النمو المتنوعة.

المينوكسيديل والفيناسترايد والبروبيكيا متوفرة تجارياً لإبطاء تساقط الشعر وتسهيل إعادة نمو الشعر. المينوكسيديل موسع للأوعية الدموية له آثار جانبية لتسهيلنمو الشعر[6] والتي قد تكون بسبب أنشطة توفير المغذيات وفتح قنوات البوتاسيوم [7،8]. المينوكسيديل فعال في علاج الصلع الأندروجيني ، من بين علاجات الصلع الأخرى ، على الرغم من أن فعاليته تختفي في غضون أشهر بعد التوقف عن العلاج. بالمقارنة ، تم تسجيل فيناسترايد وبروبيكيا ، علاجات تضخم البروستاتا الحميد وسرطان البروستاتا ، في العديد من البلدان لعلاج الصلع الوراثي (الصلع الذكوري). الفيناسترايد والبروبيكيا هما من مضادات الأندروجين الاصطناعية ، مما يثبط اختزال النوع الثاني 5- ، وهو إنزيم يحول التستوستيرون إلى ديهدروتستوستيرون (DHT) في الخلايا الحليمية أسفل بصيلات الشعر [9].

تم استخدام Laminaria japonica و Undaria pinnatifida و Cladosiphon okamuranus ، الموزعة على نطاق واسع في العديد من البلدان ، كعلاجات في الطب الشرقي لفترة طويلة. في الدراسات السابقة ، تم استخراج الفوكويدان ، وهو مركب عديد السكاريد الكبريتات ، وتم التعرف عليه من الأعشاب البحرية وتأكد أنه يمتلك أنشطة مضادة للأكسدة ومضادة للتخثر ومضادة للسرطان ومضادة للالتهابات [10،11]. بعد ذلك ، تم إثبات الآثار المفيدة للفوكويدان على الأمراض الالتهابية ، ونقص التروية ، والضعف المناعي ، والأورام [12 ، 13]. من ناحية أخرى،Cistanche tubulosaكما تم استخدام مستخلص (CTE) على نطاق واسع للأدوية التقليدية في الصين. CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)يحسن تدفق الدم عن طريق خفض مستويات الكوليسترول في الدم [14]. تم الإبلاغ مؤخرًا عن أن الاعتلال الدماغي الرضحي المزمن يقلل من إنتاج عامل نخر الورم (TNF-) والإنترلوكين -4 (IL -4) وهما عاملان رئيسيان لإنتاج أكسيد النيتريك (NO) في مسار الالتهاب [15]. أظهرنا أيضًا أن الفوكويدان من مستخلص Laminaria japonica (LJE) و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)التهاب موهن تآزريًا في المختبر وفي الجسم الحي [16]. والجدير بالذكر أنه تم إثبات وجود ارتباط وثيق بين التهاب الجلد (وخاصة الغدة الدمعية) مع تساقط الشعر [17]. وهكذا ، تظهر الجوانب المضادة للالتهابات في علاج الثعلبة [18].
بناءً على أنشطة التحسين المتعلقة بتدفق الدم والالتهابات ، فإننا نحقق في الفعالية التوليفية بين LJE و CTE（Cistanche tubulosa مقتطف)علىنمو الشعروالآليات الأساسية ، مقارنة بنسبة 3 في المائة من Minoxidil (Hyundai Pharmaceutical ، سيول ، كوريا) ، وهو معروفنمو الشعرمحسن.

Cistanche tubulosaاستخراج جيد لنمو الشعر

المواد والأساليب

المواد

LJE و CTE (Cistanche tubulosaمقتطف)تم الحصول عليها من شركة Misuba RTech المحدودة (Asan ، كوريا). تم استخراج مسحوق Laminaria japonica المجفف في ماء نقي عند 6 0 درجة مئوية لمدة 24 ساعة ، وتصفيته من خلال غشاء 0.45 ميكرومتر ، وتطهيره ، وتجفيفه بالرش.Cistanche tubulosaتم استخراجه في 80 في المائة من الإيثانول وتطهيره وتركيزه وتجفيفه. LJE و CTE (Cistanche tubulosaمقتطف)تم حفظها عند 4 درجات مئوية ، مختلطة (1: 3) ومذابة في ماء نقي قبل الاستخدام ، وتعطى عن طريق الفم بحجم 5 مل / كجم.
الحيوانات
ذكر C57BL / 6 الفئران لنمو الشعرتم شراء فئران الدراسة وفئران اختبار ICR لدراسة الالتهاب من Daehan Biolink (Eumseong ، كوريا) ، وتم وضعها في غرفة ذات ظروف بيئية ثابتة (23 ± 2 درجة مئوية ؛ 45-65 نسبة الرطوبة النسبية ؛ 12- ساعة ضوء -دورة مظلمة ؛ 150-300 سطوع لوكس). كانت أعلاف الحبيبات والمياه النقية متوفرة بشكل إعلاني. تمت الموافقة على جميع التجارب على الحيوانات من قبل لجنة رعاية الحيوان المؤسسية واستخدامها (IACUC) بجامعة تشونغبوك الوطنية (CBNU) ، كوريا ، وتم إجراؤها وفقًا لإجراءات التشغيل القياسية (SOP) لمركز أبحاث حيوانات المختبر ، CBNU.

علاج لنمو الشعر

بعد التأكد من طور التنامي من خلال ملاحظة لون الجلد الوردي المتجانس في الجلد الخلفي لفئران C57BL / 6 (6 أسابيع ، n =8 / مجموعة) بعد القص في مرحلة التيلوجين ، تم حلق الشعر [1،19 ، 20]. من اليوم التالي ، تم اختيار الفئران التي ليس لها خدوش مرئية وشفويًا
عولجت بـ LJE (18 أو 54 مجم / كجم) ، CTE (54 أو 162 مجم / كجم) ، أو خليطها (18 زائد 54 أو 54 بالإضافة إلى 162 مجم / كجم) مرة واحدة يوميًا لمدة 21 يومًا. تم الحصول على جرعات منخفضة من LJE (18 مجم / كجم) و CTE (54 مجم / كجم) من الجرعات البشرية المقدرة 100 مجم / جسم (70 كجم) و 300 مجم / جسم بعد ترجمة مساحة السطح لوزن الجسم (كم {{14} } للإنسان / كم =3 للماوس) ، على التوالي. جرعات عالية من LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)تم ضبطها على 3 طيات ، منفردة أو مجتمعة ، لتقييم أقصى تأثيرات التآزر [16]. تم تطبيق مينوكسيديل (3 بالمائة ، 0. 2 مل) موضعيًا مرة واحدة يوميًا على الجلد المحلوق في نفس الجدول مع علاج LJE / CTE.

الملاحظة الإجمالية لنمو الشعر

في أيام على فترات 3- يوم بعد الحلاقة وأثناء العلاج ، تم تخدير الفئران برفق باستخدام ثنائي إيثيل إيثر ، والتُقطت الصور على ظهرها. تم تحليل نسبة نمو الشعر (المنطقة المعاد نموها / منطقة الحلاقة) على الصور باستخدام نظام تحليل الصور المحوسب (Imageinside ، Daejeon ، كوريا).

الفحص المجهري لبصيلات الشعر

في اليومين 14 و 21 ، تم التضحية بالفئران بالتخدير العميق باستخدام ثنائي إيثيل إيثر ، وتمت إزالة جلودها الظهرية [1]. تم قطع الجلد الظهري إلى قسمين. تم تلوين أقسام الأنسجة المثبتة بالفورمالين والمضمنة بالبارافين (قطرها 5 ميكرون) من جزء واحد بهيماتوكسيلين يوزين لفحص عدد بصيلات الشعر والنتائج النسيجية. تم تجميد الجزء الآخر من الأنسجة في النيتروجين السائل لفحص الإنزيم والمقايسة المناعية.

فحص نشاط الانزيم

تم تجانس أنسجة الجلد في 4 أحجام من محلول الفوسفات (الرقم الهيدروجيني 7.4). تم طرد المتجانس عند 3 ، 000 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقة ، وتم استخدام المادة الطافية لمقايسة -جلوتاميل ترانسببتيداز (-GTP) وأنشطة الفوسفاتيز القلوية (ALP) باستخدام فوسفات نيتروفينيل (PNPP) -DEAV كما الركيزة [1،21].

Cistanche tubulosa

القياس الكمي لعوامل النمو

تم قياس عامل نمو البشرة (EGF) وعامل نمو البطانة الوعائية (VEGF) باستخدام مجموعات مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) (أنظمة R&D ، مينيابوليس ، الولايات المتحدة الأمريكية) وفقًا لتعليمات التصنيع [1،22].

علاج الالتهاب

تم علاج الفئران ICR (عمرها 7 أسابيع ، n =8 / مجموعة) عن طريق الفم باستخدام LJE (18 أو 54 مجم / كجم) ، CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)(54 أو 162 مجم / كجم) أو خليطهم (18 زائد 54 أو 54 بالإضافة إلى 162 مجم / كجم) مرة واحدة يوميًا لمدة 7 أيام [16]. في اليوم الأول من LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)العلاج ، تم حقن الفئران تحت الجلد مع 10 مل من الهواء المعقم في المؤخرة لتشكيل كيس [16،23،24]. بعد يومين و 5 أيام ، تم إعادة حقن الكيس بـ 5 مل من الهواء. بعد ساعة واحدة من نهايتي LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)العلاج ، 1 مل من الكاراجينان (1 في المائة في محلول ملحي ؛ Sigma-Aldrich ، سانت لويس ، الولايات المتحدة الأمريكية) أو مركبه (محلول ملحي) تم حقنه في الحقيبة.

تحليل الإفرازات

تم غسل كيس الهواء بـ 1 مل من محلول ملحي بارد بعد 6 ساعات من حقن الكاراجينان ، وتم تسجيل الحجم الصافي لسائل الغسل [16]. تم تحديد العدد الإجمالي للخلايا الالتهابية بما في ذلك العدلات والخلايا الوحيدة والخلايا الليمفاوية باستخدام عداد كولتير.

تم تحديد تركيزات NO و prostaglandin E2 (PGE2) بواسطة كاشف Griess (Sigma-Aldrich) والمقايسة المناعية الإنزيمية (EIA) باستخدام مجموعة Correlate-EIA (Assay Designs ، آن أربور ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، على التوالي [16].

تحليل احصائي

يتم تقديم البيانات على أنها تعني ± خطأ معياري. تم تحديد الدلالة الإحصائية من خلال تحليل التباين أحادي الاتجاه ، متبوعًا باختبار Tukey متعدد المقارنة بعد انتهاء الدراسة. قيم ف<0.05 were="" considered="" to="" be="" statistically="">

نتائج

تطبيق مينوكسيديل (3 في المائة) ، مادة مرجعية ، سهل بشكل ملحوظنمو الشعرمن C57BL / 6 الفئران ، تظهر تغطية شبه كاملة (92.4 في المائة) من منطقة الحلق (الأشكال 1 ، 2 ب) مقارنة بنسبة 29.2 في المائة في النمو الطبيعي (الأشكال 1 ، 2 أ) في اليوم 21. على الرغم من أنها أقل فعالية من تطبيق المينوكسيديل ، العلاج عن طريق الفم من LJE سهلت أيضانمو الشعر، مما أدى إلى تغطية 33.5 و 69.1 في المائة عند 18 و 54 ملغم / كغم على التوالي (الأشكال 1 ، 2 ج ، 2 د). CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)كانت فعالة أيضًا في تعزيزنمو الشعر، لتصل إلى تغطية 73.6 و 80.4 في المائة عند 54 و 162 ملغم / كغم على التوالي (الأشكال 1 ، 2E ، 2F). والجدير بالذكر أن العلاج التوليفي مع جرعات عالية من LJE (54 مجم / كجم) والاعتلال الدماغي الرضحي المزمن（Cistanche tubulosaمقتطف)(162 مجم / كجم) عزز بشكل ملحوظنمو الشعرمن اليوم 12 ، مقارنة بتأثير المينوكسيديل (الأشكال 1 ، 2 ح) ، على الرغم من الجرعات المنخفضة من LJE (18 مجم / كجم) والاعتلال الدماغي الرضحي المزمن（Cistanche tubulosaمقتطف)(54 مجم / كجم) تمارس تأثيرًا تآزريًا فقط في المرحلة المبكرة (الأشكال 1 ، 2G).

الشكل 1. الدورة الزمنية لإعادة نمو شعر الفئران المعالجة بالمينوكسيديل ، أو مستخلص لاميناريا جابونيكا (LJE) و / أوCistanche tubulosaاستخراج (CTE). و

○ طبيعي ● ، تطبيق مينوكسيديل (3 في المائة) ؛ △ ، 18 مجم / كجم LJE ؛ ▼ ، 54 مجم / كجم LJE ؛ □ ، 54 مغ / كغ CTE ؛ ■، 162 مغ / كغ CTE؛ ◇، 18 مجم / كجم LJE زائد 54 مجم / كجم CTE؛ ◆، 54 مجم / كجم من LJE بالإضافة إلى 162 مجم / كجم CTE（Cistanche tubulosaمقتطف).

الشكل 2. النتائج الإجمالية التمثيلية لإعادة نمو شعر الفئران المعالجة بالمينوكسيديل ، أو مستخلص لاميناريا جابونيكا (LJE) و / أوCistanche tubulosaاستخراج (CTE) في اليوم 21.

أ ، طبيعي ؛ ب ، تطبيق مينوكسيديل (3 بالمائة) ؛ C ، 18 مجم / كجم LJE ؛ D ، 54 مجم / كجم LJE ؛ ه ، 54 مغ / كغ CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)؛ F ، 162 مغ / كغ CTE ؛ G، 18 mg / kg LJE plus 54 mg / kg CTE ؛ H، 54 مجم / كجم LJE زائد 162 مجم / كجم CTE（Cistanche tubulosaمقتطف).

مقارنة ببصيلات الشعر العادية (الشكل 3 أ) ، حسّن تطبيق المينوكسيديل سلامة بصيلات الشعر ، وأظهر بصيلات أكبر وأعمدة شعر أكثر سمكًا (الشكل 3 ب). تم العثور على هذه التأثيرات أيضًا في جلود الفئران المعالجة بـ LJE و / أو CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)(الأشكال 3 ج -3 ح). على وجه الخصوص ، فعالية تقوية بصيلات الشعر للعلاج التوليفي بين LJE و CTE (Cistanche tubulosaمقتطف)كان مشابهًا لمينوكسيديل.

الشكل 3. النتائج المجهرية التمثيلية لإعادة نمو شعر الفئران المعالجة بالمينوكسيديل ، أو مستخلص لاميناريا جابونيكا (LJE) و / أوCistanche tubulosaاستخراج (CTE) في اليوم 21.

أ ، طبيعي ؛ ب ، تطبيق مينوكسيديل (3 بالمائة) ؛ C ، 18 مجم / كجم LJE ؛ D ، 54 مجم / كجم LJE ؛ ه ، 54 مغ / كغ CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)؛ F ، 162 مجم / كجم CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)؛ G، 18 mg / kg LJE plus 54 mg / kg CTE ؛ H، 54 مجم / كجم LJE زائد 162 مجم / كجم CTE

زاد تطبيق المينوكسيديل من نشاط -GTP الذي يحفز بصيلات الشعر إلى مرحلة التنامي بنسبة 90-120 في المائة في اليومين 14 و 21 ، مقارنة بمستوى الجلد الطبيعي (الشكل 4). عزز LJE (54 مجم / كجم) أيضًا نشاط الإنزيم ، على الرغم من وجود اختلافات عالية. كان للاعتلال الدماغي الرضحي المزمن تأثيرات مماثلة ، مما أدى إلى تعزيز نشاط -GTP بشكل ملحوظ في اليوم الرابع عشر.（Cistanche tubulosaمقتطف)زاد نشاط الإنزيم بشكل أكبر من ذلك عند استخدام المستخلصات وحدها.
زاد نشاط ALP ، وهو علامة على نمو العظام وتكوين الأوعية الدموية ، بشكل ملحوظ في الجلد في اليومين 14 و 21 بعد التطبيق الموضعي للمينوكسيديل (الشكل 5). LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)زاد أيضًا من نشاط ALP بعد تناوله عن طريق الفم بطريقة تعتمد على الجرعة. والجدير بالذكر أن نشاط الإنزيم قد تم تعزيزه بشكل تآزري من خلال العلاج التوافقي مع LJE و CTE.

الشكل 4. آثار المينوكسيديل (MXD ، 3 في المائة) ، أو مستخلص Laminaria japonica (LJE) و / أوCistanche tubulosaمستخلص (CTE) (ملغم / كغم) على نشاط الجلوتاميل ترانسببتيداز (-GTP) في اليومين 14 (أ) و 21 (ب) من العلاج.

* تختلف بشكل كبير عن التحكم العادي (ولا) (ص<>

الشكل 5. آثار المينوكسيديل (MXD ، 3 في المائة) ، أو مستخلص Laminaria japonica (LJE) و / أوCistanche tubulosaمستخلص (CTE) (ملغم / كغم) على نشاط الفوسفاتيز القلوي (ALP) في اليومين 14 (أ) و 21 (ب) من العلاج.

* تختلف بشكل كبير عن التحكم العادي (ولا) (ص<>

في تحليل EGF ، معروفة جيدانمو الشعرعامل ، عزز تطبيق Minoxidil مستوى EGF 3.5 أضعاف من التحكم العادي في كلا اليومين 14 و 21 (الشكل 6). زاد LJE (18 مجم / كجم) من EGF فقط في اليوم 21 ، بينما أدى CTE (162 مجم / كجم) إلى زيادة تنظيم إنتاجه في اليومين 14 و 21.（Cistanche tubulosaمقتطف)حتى في الجرعات المنخفضة تظهر تأثيرات تآزرية ملحوظة.

كما أدت معالجة المينوكسيديل إلى زيادة مستوى VEGF بنسبة 50-80 أعلى من قيمة التحكم (الشكل 7). على الرغم من أن LJE كان غير فعال ، CTE (Cistanche tubulosaمقتطف)بذلت آثار تعزيز ملحوظة. بالإضافة إلى ذلك ، العلاج التوليفي لـ LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)عرض نشاطًا تآزريًا في المرحلة المبكرة في اليوم 14.

الشكل 6. آثار المينوكسيديل (MXD ، 3 في المائة) ، أو مستخلص Laminaria japonica (LJE) و / أوCistanche tubulosaمستخلص (CTE) (ملغم / كغم) على محتوى عامل نمو البشرة (EGF) في اليومين 14 (أ) و 21 (ب) من العلاج.

* تختلف بشكل كبير عن التحكم العادي (ولا) (ص<>

الشكل 7. آثار المينوكسيديل (MXD ، 3 في المائة) ، أو مستخلص Laminaria japonica (LJE) و / أوCistanche tubulosaمستخلص (CTE) (ملغم / كغم) على محتوى عامل نمو بطانة الأوعية الدموية (VEGF) في اليوم 14 (أ) و 21 (ب) من العلاج.

* تختلف بشكل كبير عن التحكم العادي (ولا) (ص<>

أدى حقن الكاراجينان في كيس هواء الماوس ICR إلى زيادة حجم الإفرازات داخل الحقيبة 6 أضعاف مستوى التحكم (الجدول 1). تم تخفيف هذا النضح المتزايد بشكل كبير عن طريق العلاج باستخدام LJE (18 و 54 مجم / كجم) أو CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)(54 و 162 ملغم / كغم). والجدير بالذكر أن العلاج التوافقي مع LJE و CTE قلل من حجم الإفرازات ، مقارنة بالتأثيرات الفردية. تم زيادة عدد الخلايا الالتهابية بشكل كبير عن طريق حقن الكاراجينان: 34.6 ، 4.2 ، و 24.9 أضعاف مستويات التحكم في العدلات ، وحيدات ، والخلايا الليمفاوية ، على التوالي (الجدول 1). ومع ذلك ، LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)خفضت بشكل كبير الخلايا الالتهابية بطريقة تعتمد على الجرعة ، حيث كان LJE متفوقًا إلى حد ما على الاعتلال الدماغي الرضحي المزمن（Cistanche tubulosaمقتطف). من المتوقع حدوث تأثيرات تآزرية في تسلل الخلايا الالتهابية عن طريق التناول المتزامن لـ LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف).
بالتوازي مع تسلل الخلية الالتهابية في الحقيبة ، زادت محتويات NO و PGE2 في الحقيبة بشكل كبير بعد حقن الكاراجينان (الجدول 1). بالمقارنة مع التأثير الخفيف لـ LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)خفض تركيز NO بشكل ملحوظ. العلاج التوليفي بين LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)انخفض مستوى NO بطريقة تعتمد على الجرعة. بطريقة مماثلة ، تم قمع مستوى PGE2 المتزايد بشكل تآزري بواسطة العلاج التوافقي لـ LJE و CTE (الجدول 1).

مناقشة

يبلغ متوسط ​​عدد بصيلات الشعر في رأس الإنسان 100 000. خلال العمر ، تنمو كل بصيلة وتتساقط حوالي 20 مرة ، مما يظهر تساقط الشعر يوميًا لـ 100 شعرة [25]. يعتبر تساقط الشعر بما في ذلك الثعلبة والصلع حالة مؤلمة للرجال والنساء ، وخاصة في المجتمع الحديث. لذلك ، من الأهمية بمكان تطوير علاجات جديدة تمنع تساقط الشعر وتعزز نموه. في هذا الصدد ، اجتذب الطب البديل اهتمام المحققين.

تم الكشف عن الجوانب المورفولوجية والكيميائية النسيجية والكيميائية الحيوية المرتبطة بالشيخوخة للصلع الذكوري من خلال سلسلة من الدراسات على قرود المكاك ذات الذيل الجذع. في الصلع الذكوري ، تطول طور التيلوجين ، بينما تم تقصير طور التنامي. وبالتالي ، فإنه من أجل تحسين تساقط الشعر ، فإن الحفاظ على استطالة بصيلات الشعر التي تحدث من طور التنامي المبكر إلى منتصف طور التنامي مهم جدًا [26]. في هذه الدراسة ، أظهرنانمو الشعر- تسهيل نشاط العلاج التوافقي LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف). الأهم من ذلك ، أظهرت الوصفة التوليفية لـ LJE (54 مجم / كجم) و CTE (162 مجم / كجم) نشاطًا ممتازًا لإعادة نمو الشعر ، على الرغم من تناول المستخلصات عن طريق الفم. والجدير بالذكر أن تأثير العلاج التوافقي كان مشابهًا للتطبيق الجلدي لتركيز عالٍ (3 في المائة) من مركب مينوكسيديل المنقى ، على الرغم من تركيزات المكونات النشطة لـ LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)في الجلد بعد تناوله عن طريق الفم لم يتم تأكيده.
في جلد الفأر أثناء ركوب الدراجات ، يظهر نشاط -GTP أثناء طور التنامي ولكنه يتضاءل بشكل كبير أثناء التيلوجين [27]. في الجلد ، يوجد الإنزيم بشكل حصري في أغلفة الجذور الخارجية والداخلية لبصيلات الشعر تحت مستوى الغدد الدهنية التي تغيب فيها -GTP [27]. بالمقارنة ، يتم التعبير عن ALP بشكل بارز في الوحدات الشعرية الدهنية ، ويزداد النشاط في منطقة إعادة نمو الشعر. ALP كعامل مولد للأوعية يحسن الإمداد الغذائي للحليمات الجلدية وبالتالي يحفز سماكة أثناء طور التنامي [28]. ومع ذلك ، فقد تم التأكيد على أن نشاط ALP انخفض في الجلد الثعلبي [21]. في الدراسة الميكانيكية ، عزز المركب المرجعي Minoxidil بشكل ملحوظ نشاط -GTP و ALP ، مما يعني أن المينوكسيديل يسهلنمو الشعرليس فقط عن طريق تحفيز بصيلات الشعر
لمرحلة التنامي ولكن أيضًا عن طريق تحسين تدفق الدم عن طريق تكوين الأوعية. نظرًا لأن LJE زاد نشاط ALP ، فمن المقترح أن يُظهر LJE تأثيرًا مفيدًا علىنمو الشعرمن خلال قدرتها على تكوين الأوعية ، كما استنتج من دراسة سابقة أن الفوكويدان ، وهو مكون نشط في LJE ، له نشاط يحسن تدفق الدم [29]. بالمقارنة ، CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)عزز كلاً من أنشطة -GTP و ALP ، مما يوحي بآثاره على تحريض طور التنامي بالإضافة إلى تحسين تدفق الدم. وفقًا للإجراءات التآزرية على إنزيمات GTP و ALP ، يُعتقد أنه يمكن تحقيق نمو شعر أعلى عن طريق الإدارة المشتركة لـ LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف).
من المعروف أن السيتوكينات المتنوعة وعوامل النمو بما في ذلك عامل النمو العشوائي (EGF) وعامل النمو البطاني (VEGF) تشارك في تنظيم تشكل الشعر ونموه [30،31]. من الجدير بالملاحظة أن العوامل المشتقة من خلايا الحليمة الجلدية لها أنشطة كيميائية على الخلايا المحيطة ، مما يؤدي بدوره إلى تعزيزنمو الشعر[32]. يتم التعبير عن EGF بالاشتراك مع تطور بصيلات الشعر [33 ، 34]. على الرغم من أن التعبير عن كل من EGF ومستقبلاته (EGFR) في غلاف الجذر الخارجي يتم تنظيمه مع اكتمال نمو الجريبات ، إلا أن تعبيرهم يتعافى عندما تدخل الخلايا الجريبية مرحلة التنامي. يلعب VEGF دورًا مهمًا في تكوين الأوعية أثناء التفاعل الالتهابي وتطور الورم [35]. على وجه الخصوص ، ترتبط شبكة الأوعية الدموية ارتباطًا وثيقًا بدورة نمو الشعر [36-38]. لذلك ، تم التأكيد على أن التعبير الجيني لـ VEGF يختلف باختلاف دورة شعر الإنسان [39].

من نتائج الدراسة الحالية ، تم توضيح أننمو الشعر- قد يكون التأثير المعزز لمينوكسيديل بسبب احتمال تنظيم عامل نمو الجريب وعامل نمو الأوعية الدموية الذي يسهل نمو الجريب وتكوين الأوعية. على الرغم من أن LJE لم يؤثر على تعبير VEGF ، إلا أنه زاد من محتوى EGF في الجلد بعد تناوله عن طريق الفم. بالمقارنة ، CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)كانت فعالة في التعبير عن كل من EGF و VEGF. بشكل خاص ، LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)تمارس تأثيرات مضافة على التعبير عن عوامل النمو.

بالإضافة إلى استطالة الشعر ، تم تحسين سلامة بصيلات الشعر بشكل ملحوظ بعد العلاج بالمينوكسيديل و / أو LJE و / أو CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)في الفحص المجهري. في المرحلة المبكرة من تساقط الشعر والصلع عند المرضى من البشر والنماذج الحيوانية ، تراجعت سلامة البصيلات وتقلص سمك جذع الشعرة ، في حين تعافت سلامة البصيلات وسماكة العمود في تجديد الشعر. ومن المثير للاهتمام ، أن هذه التأثيرات الإيجابية على سلامة مكونات الشعر وإعادة نموها قد تحققت من خلال تناول LJE plus CTE عن طريق الفم.（Cistanche tubulosaمقتطف)، حيث كان التأثير مشابهًا للتطبيق الموضعي لتركيز عالٍ من المينوكسيديل. لذلك ، من المتوقع أن يكون الجمع بين تناول الفم من LJE بالإضافة إلى CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)يمكن أن تكون وصفة طبية ملائمة نسبيًا مقارنة باستخدام المينوكسيديل عن طريق الجلد.
في نموذج ثعلبة الفأر ، تسلل الخلايا الليمفاوية الحساسة للستيرويد حول بصيلات الشعر أمر شائع ، ويظهر نمطًا مشابهًا للعلاج المناعي للثعلبة البشرية مع التهاب الغدة الدمعية [17،40]. في هذه الدراسة ، تم تخفيف التهاب الجلد الناجم عن الكاراجينان بشكل ملحوظ بواسطة LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)علاج او معاملة؛ على سبيل المثال ، تم قمع نضح الأوعية الدموية وتسلل الخلايا الالتهابية بشكل تآزري. في التحليل الكمي ، تم التحكم بشكل كبير في الوسطاء الالتهابيين الرئيسيين NO و PGE 2 بعد الإدارة المشتركة عن طريق الفم لـ LJE و CTE (Cistanche tubulosaمقتطف). من المثير للاهتمام ، نظرًا لأن LJE أظهر نشاطًا مضادًا للالتهابات أعلى من نشاط الفوكويدان شبه المنقى [16] ، فمن المفترض أنه قد يكون هناك عنصر (مكونات) نشطة إضافية ، إلى جانب الفوكويدان ، في LJE.

مجتمعة ، تشير النتائج إلى أن العلاج الفموي التوافقي مع LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)يحسن تساقط الشعر عن طريق تنظيم عوامل النمو وأنشطة الإنزيم ذات الصلة وجزئيًا من خلال إمكانات مضادات الالتهاب. لذلك ، يُقترح أن يكون هناك توليفة بما في ذلك LJE و CTE（Cistanche tubulosaمقتطف)يمكن أن تكون الجرعات والنسب السريرية غير المناسبة وصفة مرشحة لمرضى تساقط الشعر.

Cistanche tubulosaالمنتجات المستخرجة

شكر وتقدير

تم دعم هذا البحث مالياً من قبل التطوير الصناعي الرائد للمنطقة الاقتصادية التابع لمكتب الصناعة الرائد في تشونغتشونغ ، والمعهد الكوري لتقدم التكنولوجيا (KIAT) ووزارة اقتصاد المعرفة (MKE) ، وجزئيًا من خلال برنامج تطوير تكنولوجيا الأغذية ذات القيمة المضافة العالية ، وزارة الزراعة والأغذية والشؤون الريفية (MAFRA ، رقم المنحة 113034-3).

تضارب المصالح

يعلن المؤلفون أنه لا يوجد تضارب مالي في المصالح لنشر هذه النتائج.

من: "فعالية العلاج التوافقي لمستخلصات Laminaria japonica و Cistanche tubulosa في نمو الشعر" بواسطةكيونغها شين 1 # وآخرون

--- Lab Anim Res 2015: 31 (1) ، 24-32http://dx.doi.org/10.5625/lar.2015.31.1.24

المراجع

1. Kim JS، Kang BS، Park HJ، Kim DY، Hwang SY، Nam SY، Yun YW، Lee BJ. تعزيز تأثير خلطات المستخلصات العشبية على نمو الشعر في الفئران C3H / HeJ. J بيوميد ريس 2009 ؛ 10 (3): 99-108.
2. Paus R، Cotsarelis G. بيولوجيا بصيلات الشعر. إن إنجل جي ميد 1999 ؛ 341 (7) ؛ 491-497.
3. Cotsarelis G. بصيلات الشعر: الموت للفت الانتباه. آم جيه باتول 1997 ؛ 151 (6): 1505-1509.
4. كوتسارليس جي ، صن تي تي ، لافكر آر إم. توجد الخلايا التي تحتفظ بالعلامات في منطقة الانتفاخ للوحدة الشعرية الدهنية: الآثار المترتبة على الخلايا الجذعية المسامية ، ودورة الشعر ، وتسرطن الجلد. خلية 1990 ؛ 61 (7): 1329-1337.
5. Oshima H ، Rochat A ، Kedzia C ، Kobayashi K ، Barrandon Y. تشكل وتجديد بصيلات الشعر من الخلايا الجذعية البالغة متعددة القدرات. خلية 2001 ؛ 104 (2): 233-245.
6. بيرتون جيه إل ، مارشال أ. فرط الشعر الناتج عن المينوكسيديل. بر J Dermatol 1979 ؛ 101 (5): 593-595.
7. Meisheri KD، Cipkus LA، Taylor CJ. آلية عمل توسع الأوعية الناجم عن كبريتات المينوكسيديل: دور لزيادة K بالإضافة إلى النفاذية. J فارماكول إكس ثير 1988 ؛ 245 (3): 751-760.
8. بوهل إيه إي ، والدون دي جي ، بيكر كاليفورنيا ، جونسون جي إيه. المينوكسيديل سلفات هو المستقلب النشط الذي يحفز بصيلات الشعر. J إنفست ديرماتول 1990 ؛ 95 (5): 553-557.
9. كوفمان دينار كويتي ، دوبر ر. فيناسترايد ، أحد مثبطات اختزال ألفا من النوع 2 5 ، في علاج الرجال المصابين بالثعلبة الأندروجينية. خبراء الرأي التحقيق المخدرات 1999 ؛ 8 (4): 403-415.
10. Feldman SC ، Reynaldi S ، Stortz CA ، Cerezo AS ، Damont EB. الخصائص المضادة للفيروسات لكسور الفوكويدان من Leathesia difformis. طب النبات 1999 ؛ 6 (5): 335-340.
11. وانغ جي ، تشانغ س ، زانغ زد ، سونغ إتش ، لي ب. قدرة مضادات الأكسدة المحتملة ومضادات التخثر لكسور الفوكويدان ذات الوزن الجزيئي المنخفض المستخرجة من Laminaria japonica. إنت J بيول ماكرومول 2010 ؛ 46 (1): 6-12.
12. Bojakowski K ، Abramczyk P ، Bojakowska M ، Zwoliñska A ، Przybylski J ، Gaciong Z. يحسن Fucoidan تدفق الدم الكلوي في المرحلة المبكرة من نقص التروية الكلوية / إصابة ضخه في الفئران. J فيزيول فارماكول 2001 ؛ 52 (1): 137-143.
13. Li N، Zhang Q، Song J. التقييم السمي للفوكويدان المستخرج من Laminaria japonica في فئران Wistar. الغذاء Chem Toxicol 2005 ؛ 43 (3): 421-426.
14. Shimoda H، Tanaka J، Takahara Y، Takemoto K، Shan SJ، Su MH. آثار نقص الكولسترول في الدم لمستخلص Cistanche tubulosa ، وهو دواء خام صيني تقليدي ، في الفئران. آم J تشين ميد 2009 ؛ 37 (6): 1125-1138.
15. Yamada P ، Iijima R ، Han J ، Shigemori H ، Yokota S ، Isoda H. التأثير المثبط للأكتيوسيد المعزول من Cistanche tubulosa على إطلاق الوسيط الكيميائي وإنتاج السيتوكين الالتهابي بواسطة خلايا RBL -2 H3 و KU812. بلانتا ميد 2010 ؛ 76 (14): 1512-1518.
16. Kyung J، Kim D، Park D، Yang YH، Choi EK، Lee SP، Kim TS، Lee YB، Kim YB. التأثيرات التآزرية المضادة للالتهابات لمستخلص Laminaria japonica fucoidan و Cistanche tubulosa. Lab Anim Res 2012 ؛ 28 (2): 91-97.
17. تشي إي ، فونج كانساس ، الجاجه الأول ، ناصيري إن ، روتمان ج. ارتباط التهاب الغدة الدمعية مع داء الثعلبة. أوربت 2015 34 (1): 45-50.
18. Brzezinska-Wcislo L، Bergler-Czop B، Wcislo-Dziadecka D، LisSwiety A. جوانب جديدة من علاج الثعلبة البقعية. Postepy Dermatol Alergol 2014 ؛ 31 (4): 262-265.
19. هاتوري م ، اوجاوا ح. تحليل الكيمياء الحيويةنمو الشعرمن جوانب الشيخوخة وأنشطة الإنزيم. J ديرماتول 1983 ؛ 10 (1): 45-54.
20. Lee SH ، Lee HJ ، Baek IJ ، Yon JM ، Nam SY ، Lee BJ ، Yun YW ​​، Kim YB ، Hwang SY ، Hong JT. تأثير غسول فروة الرأس DREAMMO® علىنمو الشعرالترويج في نموذج تساقط الشعر C57BL / 6 الفئران. لاب انيم ريس 2006 ؛ 22 (1): 91-96.
21. Handjiski BK، Eichmüller S، Hofmann U، Czarnetzki BM، Paus R. نشاط الفوسفاتيز القلوي وتوطينه خلال دورة شعر الفئران. Br J Dermatol 1994 ؛ 131 (3): 303-310.
22. Cross MJ، Dixelius J، Matsumoto T، Claesson-Welsh L. VEGF تحويل إشارة مستقبلات. اتجاهات علم الكيمياء الحيوية 2003 ؛ 28 (9): 488-494.
23. Shin S، Jeon JH، Park D، Jang JY، Joo SS، Hwang BY، Choe SY، Kim YB. التأثيرات المضادة للالتهابات لمستخلص الإيثانول من أنجليكا جيغاس في نموذج التهاب كيس الهواء الكاراجينان. إكسب أنيم 2009 ؛ 58 (4): 431-436.
24. Kim D، Park D، Kyung J، Yang YH، Choi EK، Lee YB، Kim HK، Hwang BY، Kim YB. التأثيرات المضادة للالتهابات لمستخلص Houttuynia cordata فوق الحرج في نموذج التهاب كيس الهواء الكاراجينان. Lab Anim Res 2012 ؛ 28 (2): 137-140.
25. Rebora A. التسبب في تساقط الشعر الوراثي. J آم أكاد ديرماتول 2004 ؛ 50 (5): 777-779.
26. Shirai A، Ikeda J، Kawashima S، Tamaoki T، Kamiya T. KF19418، مجمع جديد لـنمو الشعرالترويج في نماذج الفئران المختبرية والحيوية. J ديرماتول سسي 2001 ؛ 25 (3): 213-218.
27. Kawabe TT ، Kubicek MF ، Johnson GA ، Buhl AE. استخدام نشاط غاما جلوتاميل ترانسببتيداز كعلامة لدورة الشعر وتحريض طور التنامي في بصيلات شعر الفأر. J إنفست ديرماتول 1994 ؛ 103 (1): 122-126.
28. Hamada K، Suzuki K. تقييم المؤشرات البيوكيميائية كمؤشر دورة الشعر في الفئران C3H. إكسب أنيم 1996 ؛ 45 (3): 251-256.
29. Park SJ ، Lee KW ، Lim DS ، Lee S. يحفز الفوكويدان متعدد السكاريد الكبريت التمايز العظمي للخلايا الجذعية المشتقة من الدهون البشرية. الخلايا الجذعية ديف 2012 ؛ 21 (12): 2204-2211.

30. Danilenko DM، Ring BD، Pierce GF. عوامل النمو والسيتوكينات في تطور بصيلات الشعر وركوب الدراجات: رؤى حديثة من نماذج حيوانية وإمكانيات العلاج السريري. مول ميد اليوم 1996 ؛ 2 (11): 460-467.
31. Ozeki M ، Tabata Y. In vivo عزز نمو بصيلات شعر الفئران عن طريق الإطلاق المتحكم فيه لعوامل النمو. المواد الحيوية 2003 ؛ 24 (13): 2387-2394.
32. فوجي تي ، كاتوه إس ، أورا إتش ، أورانو واي ، أرايس س. التأثير الكيميائي لعامل مشتق من الخلايا الجلدية على خلايا غلاف الجذر الخارجي. J ديرماتول سسي 2001 ؛ 25 (3): 206-212.
33. Stenn KS، Paus R. ضوابط دورة بصيلات الشعر. فيسيول القس 2001 ؛ 81 (1): 449-494.
34. Chapman RE ، هاردي MH آثار عامل نمو البشرة داخل الأدمة المحقون والموضعي موضعياً على نمو الصوف والجلد وبصيلات الصوف لأغنام ميرينو. أوست جي بيول سسي 1988 ؛ 41 (2): 261-268.
35. Dvorak HF، Brown LF، Detmar M، Dvorak AM. عامل نفاذية الأوعية الدموية / عامل نمو بطانة الأوعية الدموية ، فرط نفاذية الأوعية الدموية الدقيقة ، وتكوين الأوعية. آم جيه باتول 1995 ؛ 146 (5): 1029-1039.
36. Ellis RA ، Moretti G. أنماط الأوعية الدموية المرتبطة بصيلات الشعر في فروة الرأس البشرية. آن نيويورك أكاد علوم 1959 ؛ 83: 448-457.
37. Stenn KS، Fernandez LA، Tirrell SJ. ترتبط الخصائص المولدة للأوعية لبصيلات الشعر الاهتزازية للجرذ بالبصلة. J إنفست ديرماتول 1988 ؛ 90 (3): 409-411.
38. يانو K ، براون LF ، ديتمار M. Control ofنمو الشعروحجم الجريب عن طريق تكوين الأوعية الدموية بوساطة VEGF. J كلين إنفست 2001 ؛ 107 (4): 409-417.
39. Lachgar S ، Charveron M ، Ceruti I. توزيع مراحل بصيلات الشعر غير المبالية VEGF mRNA عن طريق التألق في التهجين الموضعي جنبًا إلى جنب مع الفحص المجهري بالليزر متحد البؤر. في: أبحاث الشعر للألفية القادمة (Van Neste DJJ، ed)، Elsevier، Amsterdam، 1996؛ ص 407-12.
40. Freyschmidt-Paul P، Sundberg JP، Happle R، McElwee KJ، Metz S، Boggess D، Hoffmann R. العلاج الناجح لتساقط الشعر الشبيه بالثعلبة باستخدام محسس التلامس سكواريك حمض ثنائي بيوتيل استر (SADBE) في الفئران C3H / HeJ . J إنفست ديرماتول 1999 ؛ 113 (1): 61-68.