آثار داء السكري على الوظيفة الجنسية ، والهيكبورفولوجيا وتعبير أكتين العضلات في الجسم الكهفي من القضيب في الفئران

خلاصة:
موضوعي:لمراقبةالوظيفة الجنسية لمرض السكريالفئران النموذجية واستكشاف الآلية الممكنة لخلل الجنسي الثانوي الناجم عن ارتفاع السكر في الدم.

طُرقتم تقسيم الفئران التجريبية بشكل عشوائي إلى المجموعة الفارغة (n =5) ومجموعة مرض السكري(n =15). بعد أن تم بناء نموذج حيوان السكري بنجاح ، تم تقييم الوظيفة الجنسية لمجموعتين. وقد لوحظت الخصائص النسيجية للخصية في مجموعتين. تم قياس التعبير عن -smooth العضلات الأكتين (-SMA) في أنسجة القضيب لمجموعتين. النتائج انخفضت مستويات هرمونات الجنس في الدم بشكل كبير (P<0.01). Histomorphological observation showed that in the diabetes group the interstitial tissue of testis was disordered; Compared with the blank group, the number of smooth muscle cells in the penis tissue was reduced, and the degree of fibrosis was aggravated. The expression of α-SMA positive cells in the diabetes group was significantly decreased (P<0.01).

خاتمةانخفاض مستويات الهرمونات الجنسية ، وانخفاض عدد خلايا العضلات الملساء في الجسم الكهفي من القضيب ، وانخفاض التعبير عن -SMA في الجسم الكهفي من القضيب ، والبنية المضطربة للأنسجة الخلالية من هذا المرض ، والتغيرات المورفولوجية لخلايا العضلات الملساء وتفاقم التليف في الفئران في الدسم. سيكون استكشاف تشخيص هذا المرض وعلاجه مع هذا الملامح المظهرية ذات أهمية كبيرة.

الكلمات الرئيسية:مرض السكري.الضعف الجنسي لدى الرجال; الوظيفة الجنسية; هرمون الجنس؛ - تعبير أكتين العضلات الملساء

مكملات Cistanche العشبية لخلل وظيفي في مرض السكري

اتصل بنا الآن

 

مرض السكري (DM)لطالما كانت نقطة اهتمام محورية على الصعيدين المحلي والدولي بسبب حدوثها العالي وانتشارها [1]. المضاعفات المختلفة الناجمة عن DM تؤثر بشكل كبير على نوعية حياة المرضى. من بين هؤلاء ، حدوثضعف الانتصاب (ED)في الذكورمرضى DMمرتفعة بشكل ملحوظ. حاليًا ، أصبحت DM مجموعة عالية الخطورة لـ ED [2-3]. لذلك ، إجراء دراسات متعمقة علىإد الناجم عن DM (DME)يحمل أهمية كبيرة. تهدف هذه الدراسة إلى مراقبة آثار DM على وظيفة الانتصاب ، والهرمونات الجنسية ، ومستويات التعبير عن الأكتين العضلي (-SMA) في الجسم الكهفي القضيب ، ومورفولوجيا الخصية الخلالية والخلفية والعضلات الملساء الكهفية الكهفيةالأنسجة في الفئران ، استكشاف مسبقا الأساس المرضي المحتمل لـ ED الناجم عن DM.

 

1 مواد وطرق

1.1 الحيوانات التجريبية والكواشف

تم اختيار عشرين من الفئران SD SD من فئة SPF من فئة SPF مع وزن موحد للجسم. وشملت الكواشف التجريبية الرئيسية الستربتوزوتوسين (STZ) و Apomorphine (APO) ، وكذلك الأجسام المضادة المطلوبة للكشف عن تعبير -SMA. تمت الموافقة على هذه الدراسة من قبل لجنة رعاية الحيوان والأخلاق في مستشفى Dongzhimen ، جامعة بكين للطب الصيني (رقم 17-04).

1.2 الطرق التجريبية

1.2.1 إنشاء نموذج الفئران السكري

Twenty experimental SD rats were randomly divided into a control group (5 rats) and a diabetes group (15 rats). STZ was dissolved in citrate buffer to prepare a 10 mg/mL solution. The diabetes group was intraperitoneally injected with STZ solution at a dose of 55 mg/kg to induce the DM model rats. Blood glucose levels >16.7 مليمول/لتر في أي وقت بعد 5 أيام من الحقن داخل الصفاق STZ واعتبروا المعيار لتأسيس نموذج DM الناجح [4].

 

1.2.2 اختبار وظيفة الانتصاب في الفئران

بعد تأكيد نمذجة DM الناجحة ، تم وزن الفئران ووضعها في صندوق زجاجي شفاف. تم حقن مذيب APO (100 ميكروغرام/كيلوغرام) تحت الجلد في الجزء الخلفي من الرقبة على أساس وزن الجسم. ظلت البيئة المحيطة هدوءًا ، وتم تعديل الإضاءة الداخلية إلى مستوى يكفي لمراقبة الانتصاب في الفئران. وقد لوحظ وتسجيل عدد الانتصاب في القضيب في غضون 30 دقيقة بعد الحقن تحت الجلد. معايير الانتصاب القضيب: توسيع القضيب ، وتراجع القلفة ، وتعرض حشفة مصحوبة بفرط الدم والاحمرار ، ورؤية الأجزاء الوسطى والسفلية من القضيب.

 

1.2.3 قياس الهرمونات الجنسية في الفئران

تم قياس مستويات هرمون الجنس في المصل للمجموعتين باستخدام طريقة المقايسة المناعية الإشعاعية ، باتباع الإجراءات المحددة الموضحة في تعليمات مجموعة المقايسة المناعية.

 

1.2.4 الملاحظة النسيجية للأنسجة الخلالية الخصية

بعد جمع الدم من الشريان الأورطي في البطن من الفئران ، تم استخراج الخصية اليمنى بشكل موحد. تم غسل الخصية باستخدام PBS Buffer وثابتة بالكامل في بارافورمالدهيد لمدة 72 ساعة. تم تضمين الأنسجة في البارافين ، مقطوعة ، ملطخة بالهيماتوكسيلين-إيوسين (H&E) ، ولاحظ لخصائص النسيجية.

 

1.2.5 مراقبة التليف الكهفي القضيب في الفئران

بعد جمع الدم من الشريان الأورطي في البطن ، تم استئصال أنسجة القضيب وغسلها مع المخزن المؤقت لـ PBS. تم إصلاح الأنسجة بالكامل في بارافورمالدهيد لمدة 72 ساعة ، مضمنة في البارافين ، مقطوعة ، وملطخة مع ثلاثي الأبعاد ماسون. وقد لوحظ المحتوى النسبي لألياف العضلات/الكولاجين الملساء في الأنسجة الكهفية القضيب لكل مجموعة تحت المجهر.

1.2.6 قياس مستويات التعبير -SMA في الأنسجة الكهفية القضيب

تعرض الأنسجة الكهفية للقضيب لإعداد روتيني للمياه ، وغسلها مع المخزن المؤقت لـ PBS لمدة 5 دقائق ، وتعرض لإصلاح حرارة الميكروويف في المخزن المؤقت للسيترات (الرقم الهيدروجيني 6. 0) لمدة 20 دقيقة. بعد التبريد إلى درجة حرارة الغرفة ، تم غسل الأنسجة ثلاث مرات مع برنامج تلفزيوني ، 3 دقائق في كل مرة. تم تطبيق محلول بيروكسيد الهيدروجين بنسبة 3 ٪ في غرفة مظلمة في درجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة ، تليها غسل PBS. ثم تمت إضافة الجسم المضاد SMA ، وحضنت الأنسجة بين عشية وضحاها في 4 درجة. بعد العودة إلى درجة حرارة الغرفة ، تم غسل الأنسجة باستخدام PBS ، وحضنت بجسم مضاد ثانوي في 37 درجة لمدة 30 دقيقة ، وغسلها مرة أخرى مع PBS. تم تطبيق DAB لتطور الألوان في الظلام ، وتم إنهاء التفاعل بالماء. تم استخدام PBS كبديل للجسم المضاد الأساسي كعنصر تحكم سلبي ، وتم إجراء تحليل كمي مع محلل صور.

 

1.3 الطرق الإحصائية

تم تنظيم البيانات التي تم جمعها في هذه الدراسة باستخدام Microsoft Excel ثم تم تحليلها باستخدام SPSS 25. 0 للاختبار الإحصائي. يتم التعبير عن بيانات كل مجموعة على أنها الانحراف المعياري (X̄ ± S). واعتبرت قيمة p أقل من {3}}. 0 5 (p <0.05) ذات دلالة إحصائية.

 

2 نتائج

2.1 مقارنة بين وزن الجسم وتغيرات الجلوكوز في الدم بين المجموعتين

الرجوع إلى الجدول 1.

2.2 مقارنة معدلات انتصاب القضيب بين المجموعتين

الرجوع إلى الجدول 2.

2.3 مقارنة بين مستويات هرمون الجنس في المصل بين المجموعتين

الرجوع إلى الجدول 3.

2.4 الملاحظة المرضية للأنسجة الخلالية الخصية بين المجموعتين

ظهرت الأنسجة الخلالية الخصية لمجموعة التحكم بشكل طبيعي. كانت الخلايا الخلالية مستديرة أو بيضاوية الشكل ، مع التشكل المنتظم ، والتباعد الطبيعي بين الخلايا ، والترتيب المنظم ، ولا يوجد انخفاض كبير في عدد الخلايا. في المقابل ، أظهرت المجموعة السكري وذمة خلالية الخصية ، مورفولوجيا الخلايا غير المنتظمة ، المساحات الفضفاضة بين الخلايا ، والترتيب المضطرب ، والهياكل داخل الخلايا ، وعلامات التحديد في بعض الخلايا ، وفقدت السمات الهيكلية. الرجوع إلى الشكل 1.

 

مجموعة	حجم العينة (ن)	وزن الجسم الأساسي (ز)	وزن الجسم بعد 5 أيام من النمذجة (ز)	الجلوكوز في الدم بعد 5 أيام من النمذجة (مليمول/لتر)	وزن الجسم قبل التضحية (ز)	الجلوكوز في الدم قبل التضحية (مليمول/لتر)
مجموعة مرض السكري	15	220.4 ± 5.5	264.2 ± 10.8**	24.3 ± 5.0**	316.7 ± 16.4**	25.2 ± 5.1**
مجموعة التحكم	5	220.0 ± 5.2	286.2 ± 10.1	4.9 ± 1.3	319.1 ± 13.9	6.8 ± 1.2

ملحوظة: بالمقارنة مع المجموعة الضابطة ،P <0. 01.

 

 

الجدول 2: مقارنة معدلات انتصاب القضيب بين مجموعتين

مجموعة	حجم العينة (ن)	الحالات الإيجابية في اختبار الانتصاب (N)	معدل الانتصاب (٪)
مجموعة مرض السكري	15	5	33.3**
مجموعة التحكم	5	4	80.0

ملحوظة: بالمقارنة مع المجموعة الضابطة ،P <0. 01.

---

الجدول 3: مقارنة بين مستويات هرمون الجنس في المصل بين مجموعتين (X̄ ± S)

مجموعة	حجم العينة (ن)	T (nmol·l⁻⁻)	FSH (iu · l⁻⁻)	LH (ng · l⁻⁻)
مجموعة مرض السكري	15	3.38 ± 0.87**	8.49 ± 3.06**	489 ± 50.12**
مجموعة التحكم	5	6.04 ± 1.26	5.98 ± 1.03	386 ± 40.73

ملحوظة: بالمقارنة مع المجموعة الضابطة ،P <0. 01.

 

 

2.4 الملاحظة المرضية للأنسجة الخلالية الخصية بين مجموعتين

في المجموعة الضابطة ، ظهرت الأنسجة الخلالية الطبيعية طبيعية ، حيث تكون الخلايا الخلالية مستديرة أو بيضاوية الشكل ، والتي تظهر التشكل العادي ، والمساحات الطبيعية بين الخلايا ، والترتيب المنظم. لم يظهر عدد الخلايا أي تخفيض كبير. بالمقارنة مع المجموعة الضابطة ، أظهرت المجموعة السكرية وذمة خلالية الخصية ، والخلايا غير المنتظمة ، والمساحات الفضفاضة بين الخلايا ، والترتيب المضطرب ، والهياكل داخل الخلايا ، وعلامات الانتقاد في بعض الخلايا ، وفقدت ميزاتها الهيكلية. الرجوع إلى الشكل 1.

2.5 مراقبة التليف الكهفي القضيب بين مجموعتين

تم استخدام تلطيخ ماسون لمراقبة الاختلافات في درجة التليف في الأنسجة الكهفية القضيب بين المجموعتين. في المجموعة السكرية ، كانت نسبة ألياف الكولاجين أعلى بكثير ، مع زيادة في المحتوى النسبي ، في حين أن نسبة خلايا العضلات الملساء كانت أصغر ، مع انخفاض في المحتوى النسبي. الرجوع إلى الشكل 2.

 

الشكل 1 هو تلطيخ نتائج الخصيتين في مجموعتين (× 10 ، n=3)
 

 

الشكل 2 الشكل 2 نتائج تلطيخ ماسون من Corpora Cavernosa في مجموعتين (× 4 ، n=3)

 

2.6 التعبير عن -SMA في خلايا العضلات الملساء Covernosum في مجموعتين في مجموعتين
تم استخدام الكيمياء المناعية للكشف عن تعبير -SMA في المجموعتين. بالمقارنة مع المجموعة الفارغة ، تم تقليل الجزء الملون الأصفر البني في المجموعة السكري بشكل كبير ، أي تم تقليل تعبير الخلايا الإيجابية لـ -SMA في المجموعة السكرية بشكل كبير. انظر الشكل 3.

الشكل 3 نتائج الكيمياء المناعية لكهف كهف في مجموعتين (× 10 ، n=3)