آثار بوليغونا-عديد السكاروز على الإصابة بداء السكري في الفئران المصابة بمرض السكري

الكلمات الدالة:اعتلال الكلية السكري;بوليغونا متعدد السكروز; فيروتوسيس؛ الترانسفيرين. FTH1 ؛ GPX4

 

اعتلال الكلية السكري(DN) هو اختلاط خطير في الأوعية الدموية الدقيقةالسكرى[1] DN جادمضاعفات الأوعية الدموية الدقيقة لمرض السكريداء البيلة الألبومينية [1] ، والذي يظهر عادةً على شكل بيلة ألبومينية زهيدة في المراحل المبكرة ، يتبعه تطور تدريجي للمراحل المبكرة تظهر عادةً مع البيلة الألبومينية الزهيدة ، يتبعها التطور التدريجي للبيلة البروتينية الهائلة ، وانخفاض تدريجي في معدل الترشيح الكبيبي ، وزيادة تدريجية في الكرياتينين في الدم [2] ]. زيادة تدريجية في الكرياتينين [2]. إذا تُرك المرض دون علاج ، يمكن أن يؤدي إلى مرض مزمن. إذا تُرك دون علاج ، يمكن أن يؤدي إلى تلف كلوي مزمن ومرض في نهاية المطاف. إذا تُرك دون علاج ، يمكن أن يؤدي إلى إصابة كلوية مترقية مزمنة وفي نهاية المطاف فشل كلوي [3]. الموت بالحديد الموت بالحديد هو تراكم يعتمد على الحديد من الأحماض الدهنية غير المشبعة موت الحديد هو تراكم يعتمد على الحديد من الأحماض الدهنية غير المشبعة وأكسدة الفسفوليبيد مما يؤدي إلى موت الخلايا ، ويتجلى ذلك بشكل أساسي في المظهر الرئيسي لموت الحديد هو تراكم الحديد المعتمد بيروكسيدات الدهون داخل الخلايا [4]. [4]. الدراسات لقد وجد أن إصابة الخلايا الطلائية الأنبوبية الكلوية ترتبط ارتباطًا وثيقًا بموت الحديد [5]. وانج وآخرون.

وجد وانج وزملاؤه [6] أن تعبير الجلوتاثيون بيروكسيديز 4 (GPX4) في التعبير الخلالي الأنبوبي الكلوي (GPX4) يرتبط ارتباطًا وثيقًا بشدة وتطور مرض DN. GPX4 ، كهدف مهم لبدء برنامج موت الحديد ، هو مستشعر الإجهاد التأكسدي وإشارات موت الخلايا ، ويؤدي انخفاض تعبير GPX4 إلى زيادة ملحوظة في انخفاض التعبير الحي لـ GPX4 ، مما يؤدي إلى زيادة كبيرة في الأكسجين الحي في الجسم [ 7]. . لذلك ، فإن تثبيط موت الخلايا الظهارية الأنبوبية الكلوية من خلال تنظيم موت الحديد ، لذلك ، فإن تثبيط موت الخلايا الأنبوبية الكلوية من خلال تنظيم موت الحديد للتخفيف من الإصابة الكلوية DN قد يكون استراتيجية فعالة لعلاج DN لذلك ، تثبيط الأنبوب الكلوي قد يكون موت الخلايا الظهارية من خلال تنظيم موت الحديد استراتيجية فعالة لعلاج DN.
العديد السكاريدلC. flavusيعتبر من أكثر العناصر الدوائية وفرة وأهمية وهو أحد المكونات الدوائية الأكثر وفرة والأكثر أهمية من C. flavus. وجدت الدراسة التجريبية أنه يلعب دورًا مهمًا في تحسين وظيفة الكلى من DN وتخفيف الاستجابة الالتهابية. لي وآخرون [8]. لي وآخرون [9]. وجد أن Li et al [9] وجدوا أن تدخل C. flavus polysaccharide يحسن بشكل ملحوظ اضطرابات التمثيل الغذائي للجلوكوليبيد وتحمل الأنسولين في الفئران المصابة بداء السكري. لي وآخرون. وجدت دراسة أخرى أن الجلوكوز و 24 ساعة من الجلوكوز وتحمل الأنسولين لدى الفئران المصابة باعتلال الكلية السكري قد تحسنت بشكل ملحوظ بعد تدخل مستخلص عديد السكاريد الأصفر. وجدت دراسة أخرى أن نسبة الجلوكوز في الدم ، 24- الألبومين الدقيق في البول ، والكرياتينين في الدم (SCr) ، ونتروجين اليوريا في الدم (BUN) في الفئران النموذجية لاعتلال الكلية السكري قد تحسنت بشكل ملحوظ بعد تدخل عديد السكاريد Fructus flavus. وانخفضت مستويات نيتروجين اليوريا في الدم بشكل ملحوظ في نموذج اعتلال الكلية السكري [10]. علاج DN مع عديد السكاريد من Flos Chrysanthemi ومع ذلك ، فإن الآلية المحددة لعمله غير واضحة. لذلك ، في هذه الدراسة ، تم استخدام نظام غذائي غني بالدهون مع حقن الستربتوزوتوسين (STZ) لإنشاء نموذج الفئران DN.
لذلك ، في هذه الدراسة ، أنشأنا نموذجًا لجرذان DN عن طريق نظام غذائي غني بالدهون مع حقن الستربتوزوتوسين (STZ) ، ولاحظنا تأثير C. flavus polysaccharide على موت الحديد في الفئران. لذلك ، أجريت هذه الدراسة لملاحظة تأثير C. flavus polysaccharide على موت الحديد في الفئران التي تغذت على نظام غذائي عالي الدهون مع حقن الستربتوزوتوسين (STZ) ، ولتوضيح آلية عمل C. flavus polysaccharide على DN.

المواد والأساليب
1.1 الحيوانات
تم إيواء خمسين فأرًا يتمتع بصحة جيدة من ذكور الجرذان ذات كتلة الجسم (200 ± 20) جم في معهد الأشعة ، الأكاديمية الصينية للعلوم الطبية ، بكين ، الصين ، في إطار 12- دورة من الضوء والظلام عند درجة حرارة تبلغ (25 ± 2) درجة ورطوبة نسبية (50 ± 15) بالمائة ، وتغذية بالشهرة الإعلانية. نظام غذائي عالي السكر والدهون (10 في المائة شحم الخنزير ، 20 في المائة سكروز ، 2.5 في المائة كوليسترول ، 67.5 في المائة علف تقليدي) ، (4.8 في المائة دهون ، 20 في المائة بروتين و 59.4 في المائة إجمالي سكر) ، شركة هوافوكانغ للتكنولوجيا الحيوية في بكين تمت الموافقة على هذه التجربة من قبل مستشفى Cangzhou للطب التكاملي (CZX 2022- KY -023).

1.2 المخدرات والتحضير
عديد السكاريدلفلوس استراغالوس(درجة نقاء 70 بالمائة ، رقم الدُفعة S27804) ، تم تحضير شركة Shanghai Yuanye Biotechnology Co. Ltd. المحدودة بمحلول ملحي بتركيز 200 ، 800 مجم / مل ، على التوالي. 800 مجم / مل محلول. تم تحضير أقراص Irbesartan (دفعة 8A411) ، Sanofi (Hangzhou) Pharmaceutical Co. (Hangzhou) Pharmaceutical Co. ، Ltd. في محلول ملحي عند 30 مجم / مل. حل.

 

1.3 الكواشف والأدوات الرئيسية
بروتين البول (رقم الدُفعة C 035-2-1) ، SCr (رقم الدُفعة C 011-2-1) ، BUN (رقم الدُفعة C 013-2-1) BUN (رقم الدُفعة C 013-2-1) ، malondialdehyde ( MDA ، رقم الدفعة C 003-1- 2) ، الجلوتاثيون (GSH ، الدفعة C 006-2-1) ، إجمالي محتوى أيون الحديد (رقم الدفعة A 039-2-1) ، معهد أبحاث الهندسة البيولوجية Nanjing Jiancheng معهد الهندسة البيولوجية ، نانجينغ ، الصين ؛ ترانسفرين (رقم الدُفعة ab278498) ، ترانسفيرين فيريتين (لوت ab278498) ، سلسلة ثقيلة فيريتين (FTH1 ، مجموعة ab75973) ، GPX4 (مجموعة ab252833) ، و- فيريتين (مجموعة ab252833). ab252833) ، -اكتين (الكثير ab179467) ، أبكام ، المملكة المتحدة. علامة إنزيم iMark680 متعددة الوظائف ، بيو راد ، الولايات المتحدة الأمريكية. جهاز الطرد المركزي Fresco17 ، Thermo ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ أجهزة الطرد المركزي المجمدة التي توضع على المنضدة 5810 ، إيبندورف ، ألمانيا ؛ ABI Prism® 7500 التألق الكمي التطبيقي للأنظمة الحيوية ، الولايات المتحدة الأمريكية ؛ DYCZ -24 خزان التفريد العمودي DN ، Beijing Liuyi Instrument Factory ، بكين ، الصين ؛ SH -523 chemiluminescence imaging Ltd، Hangzhou Shenhua Technology Co.

 

1.4 النمذجة والتجميع وإدارة الأدوية
بعد أسبوع واحد من التغذية التكيفية ، تم اختيار 10 فئران بشكل عشوائي كالمعتاد وتمت إحالة 40 فأر المتبقية إلى طريقة الأدب [11] لإنشاء نموذج الفئران DN. تم تغذية الفئران بنظام غذائي عالي السكر ودهون لمدة 7 أسابيع ، ثم صاموا لمدة 12 ساعة بدون ماء. تم تغذية الفئران بنظام غذائي عالي السكر ودهون لمدة 7 أسابيع ، ثم صاموا بالطعام والماء لمدة 12 ساعة. تم حقن STZ داخل الصفاق عند 30 مجم / كجم. بعد 72 ساعة ، تم جمع الدم من وريد الذيل للكشف عن الجلوكوز العشوائي في الدم ، واعتبر الجلوكوز في الدم أكبر من أو يساوي 16.7 مليمول / لتر كنمذجة ناجحة لمرض السكري. تم تغذية الفئران بنظام غذائي عالي السكر ودهون لمدة أسبوع ، وتم جمع البول 24- من القفص الأيضي.

 

 

1.5.5 فحص لطخة غربية
جمع أنسجة الكلى ، إضافة 150 ميكرولتر من المخزن المؤقت لتحلل RIPA ، وتجانس تم الاحتفاظ بطاف البروتين بعد الطرد المركزي. تم تحديد تركيز البروتين الكلي باستخدام مجموعة فحص بروتين BCA. تم تحديد تركيز البروتين الكلي باستخدام مجموعة فحص البروتين BCA ، وتم تجانس تركيز البروتين. تم استخدام كميات متساوية من البروتين 20 ميكروغرام ، 8 بالمائة -12 بالمائة SDS-PAGE لفصل البروتين ، وتم نقل البروتين. تم إغلاق الأغشية باستخدام مسحوق حليب منزوع الدسم بنسبة 5 بالمائة عند درجة حرارة الغرفة لمدة ساعتين. تمت إضافة الجسم المضاد الأساسي للأرنب المضاد للفئران Transferrin (1: 2 000) و FTH1 (1: 3 000) و GPX4 (1: 3 000). 3 ، 000) ، GPX4 (1: 3 ، 000) ، -اكتين (المخفف 1: 5 ، 000) ، وحضنت طوال الليل عند 4 درجات. احتضان بين عشية وضحاها في 4 درجات. تم غسل الغشاء ، تمت إضافة الجسم المضاد الثانوي (1: 9 000) واحتضانه لمدة ساعتين عند درجة حرارة الغرفة. تم غسل الأغشية باستخدام TBST ، الذي تم تطويره بواسطة اللمعان الكيميائي ECL واكتشافه باستخدام
تم استخدام برنامج Image J لتحليل قيم التدرج الرمادي للنطاقات.

 

1.6 الأساليب الإحصائية
SPSS Statistics25 - 0 تم استخدام برمجيات إحصائية للتحليل. التجربة تم التعبير عن النتائج كـ xˉ ± s ، وتم اختبار جميع البيانات من أجل الوضع الطبيعي ومربع كاي. تم اختبار جميع البيانات من أجل الحالة الطبيعية ومربع كاي ، واستخدمت اختبارات t إذا كانت راضية ، واستخدمت الاختبارات غير المعلمية إذا لم تكن راضية. ص<0.05 indicates that the difference is statistically significant.

 

2 النتائج
2.1 تأثيرات فلافوبيريديوم عديد السكاريد على كتلة الجسم وصيام جلوكوز الدم لدى الفئران النموذجية مقارنة بالمجموعة الطبيعية ، انخفضت كتلة جسم الفئران في المجموعة النموذجية بشكل ملحوظ (P<0.01) and FBG was significantly increased (P<0.01); compared with the model group, the body mass of rats in the positive drug group was significantly increased (P<0.05), and the differences in FBG of rats in each group were not statistically significant (P>0 05). انظر الجدول 2.

2.2 آثار Flavopiridium polysaccharide على فهارس الوظيفة الكلوية لنموذج الجرذان
مقارنة بالمجموعة العادية ، كان مستوى SCr و BUN و 24 ساعة من محتوى بروتين البول للفئران في المجموعة النموذجية أعلى بشكل ملحوظ (P<0.01); compared with the model group, the Cr, BUN level and 24 h urine protein content of rats in the positive drug group and the high dose group of Flavopiridium polysaccharide were significantly lower (P<0.05, P<0.01). See Table 3.

2.3 تأثيرات مستخلص عديد السكاريد الأصفر على التشكل التشريحي المرضي للكلية في الفئران النموذجية
لم يُظهر التركيب الكبيبي والأنبوبي لفئران المجموعة العادية أي تشوهات ، ولم يتكاثر غشاء الثايلاكويد وسدى الثايلاكويد ، ولم يكن هناك تسلل للخلايا الالتهابية ، وما إلى ذلك ؛ النموذج في الفئران النموذجية ، لوحظ ضمور وضمور أنبوبي بؤري ، وكان الغشاء القاعدي الكبيبي قليلاً. نبيبات. أظهرت الفئران في كل مجموعة من الأدوية آفات أقل ، وكان التحسن أكثر وضوحًا في مجموعة الأدوية الإيجابية والجرعة العالية من فلافوبيريديوم عديد السكاريد. كان التحسن أكثر وضوحًا في مجموعة الأدوية الإيجابية والجرعة العالية من عديد السكاريد Flavopiridium. انظر الشكل 1.