التأثيرات الوقائية للجليكوزيدات القاتلة على إصابة نقص التروية الدماغية وضخه

جهة الاتصال: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 البريد الإلكتروني:audrey.hu@wecistanche.com

Zhang Yanhui1، Ren Xiaoli1، Pei Feixiang2

الملخص

الهدف: مراقبة آثارcistanche جليكوسيدات(GCs) على الأحماض الأمينية المثيرة (EAA) والتعبير عن NF-KB والبروتين في قرن آمون من الفئران معنقص التروية الدماغية - ضخه، واستكشاف آثار الوقاية والعلاج منcistanche جليكوسيداتعلىنقص التروية الدماغية - ضخهإصابة. الطريقة: تم تقسيم 60 جرذًا بشكل عشوائي إلى مجموعة صورية ، مجموعة نموذجية ، جرعة منخفضةcistanche جليكوسيداتالمجموعة ، جرعة عاليةcistanche جليكوسيداتالمجموعة ، والمجموعة الضابطة ، مع 12 جرذًا في كل مجموعة. نموذج الفئراننقص التروية الدماغية - ضخهتم تحضيره بواسطة طريقة البرغي السلكي. بعد النمذجة الناجحة ، تم إعطاء الجرذان في كل مجموعة العلاج بالتزقيم الدوائي. تقييم اختبار Memories Water Maze Navigation للتعلم المكاني وقدرة الذاكرة لدى الفئران ، عن طريق مجموعة اختبار كروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء (HPLC) ، وحمض الأسبارتيك للفئران (Glu) ، وحمض الجلوتاميك (Asp) ، وحمض أمينوبوتيريك (GABA) ، والجليسين (Gly) ) المحتوى ، باستخدام الطريقة الكيميائية المناعية للكشف عن مناطق دماغ الفئران في الحصين NF - KB ، tau ، P - tau ، مستوى التعبير عن بروتين الأميلويد. النتائج: تم تقصير متوسط ​​زمن هروب الفئران في كل مجموعة إلى درجات مختلفة خلال تجربة البحر 5d لتحديد المواقع المتاهة المائية. كمون هروب الفئران في الجرعات العاليةcistanche جليكوسيداتكانت المجموعة والمجموعة الضابطة في اليومين 4 و 5 أقل بكثير من تلك الموجودة في مجموعة النموذج (P <0. 05).="">نقص التروية الدماغية - ضخهتحدث الإصابة ، ومحتوى تنظيم EAA ومناطق الدماغ الحصينية في الجرذان NF - KB ، كانت مستويات التعبير البروتيني أعلى بشكل ملحوظ (P <0. 05) ، واستخدام محتوى EAA والتدخل الدوائي بعد أن كان لدى الفئران حصين دماغ NF - KB ، مستوى تعبير البروتين في درجات مختلفة من الانخفاض ، جرعة عاليةcistanche جليكوسيداتالمجموعة ومحتوى EAA وفئران مجموعة التحكم في العقاقير كان لها حصين دماغ NF - KB ، وكانت مستويات التعبير البروتيني أقل بكثير من تلك الخاصة بالمجموعة النموذجية (P <0. 05).="" الخلاصة:="" في="">نقص التروية الدماغية - ضخه، يتم تنظيم محتوى الأحماض الأمينية المثيرة (EAA) ، ويؤثر تنشيط البروتينات ذات الصلة على الوظيفة الإدراكية للفئران.Cistanche جليكوسيداتيمكن أن يقلل من مستوى EAA و NF-KB وتعبير البروتين في دماغ الفئران في الحصين ، وبالتالي تحسين الوظيفة الإدراكية للفئران.

الكلمات الدالة: سيستانش جليكوسيد; نقص التروية الدماغية - ضخه؛ الأحماض الأمينية المثيرة (EAA) ؛ NF - كيلوبايت ؛ مستوى التعبير البروتيني

cistanche جليكوسيدات

1. المواد والأساليب

1.1 الحيوانات التجريبية

60 8- ذكور جرذان SD صحية من فئة SPF عمرها أسبوع ، تزن (200 ± 20) جم ، تم شراؤها من مركز الحيوانات التجريبية بجامعة Anhui Medical ، رقم الشهادة: 0001507. إنها مناسبة للتكاثر لمدة أسبوع واحد في بيئة درجة حرارة الغرفة 22-24 درجة ورطوبة نسبية 45 في المائة ~ 55 في المائة. خلال هذه الفترة ، يمكنك أن تأكل وتشرب بحرية ، وتناوب الإضاءة لمدة 12 ساعة. تتبع العملية التجريبية بدقة "الآراء الإرشادية حول معاملة الحيوانات التجريبية".

1.2 الأدوات والكواشف الرئيسية

سيستانش جليكوسيداتهي من Shanxi Yuning Biotechnology Co.، Ltd. ، المواصفات: 80 بالمائة ؛ تم شراء Oxiracetam من شركة CSPC Ouyi Pharmaceutical Co.، Ltd. منتج EAA القياسي من American Sigma ، نقاء 99.9 بالمائة ؛ تم توفير كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء بواسطة Shimadzu ، اليابان ، LC -6 من النوع A ؛ تم شراء مجموعة NF-KB ومجموعة بروتين تاو ومجموعة بروتين P-tau ومجموعة بروتين الأميلويد من Shanghai Jingkang Biological Engineering Co.، Ltd.

1.3 التجميع والنمذجة

وفقًا لطريقة جدول الأرقام العشوائية ، تم تقسيم 60 ذكور جرذ SD بشكل عشوائي إلى مجموعة صورية ، مجموعة نموذجية ، جرعة منخفضةسيستانش جليكوسيدالمجموعة ، جرعة عاليةسيستانش جليكوسيدالمجموعة ، ومجموعة مراقبة المخدرات ، مع 12 جرذًا في كل مجموعة. نموذج الفئراننقص التروية الدماغية وضخهتم تكراره بطريقة الخياطة [6].

1.4 علاج الإدارة

وفقًا لجدول نسبة الجرعة المكافئة لتحويل سطح جسم الإنسان والحيوان ، تم حساب جرعة تزقيم الجرذ. الجرعة المنخفضة والعاليةcistanche جليكوسيداتتم تعقيم المجموعات عند 2.5 مجم / كجم و 10 مجم / كجم على التوالي ، ومجموعة مراقبة الأدوية وفقًا لجرعة 450 مجم / كجم من Oxiracetam ، أعطيت مجموعة العمليات الصورية والمجموعة النموذجية نفس الكمية من المحلول الملحي داخل المعدة ، مرة واحدة. لمدة أسبوعين من العلاج المستمر.

1.5 مؤشرات المراقبة

تقييم الوظيفة المعرفية تم استخدام اختبار متاهة موريس المائية لتقييم الوظيفة المعرفية لـنقص التروية الدماغية - ضخهالجرذان: بركة متاهة مائية دائرية من موريس يبلغ قطرها الداخلي 30 سم وقطرها الداخلي 160 سم. الجدار الداخلي للمسبح مطلي باللون الأسود وينقسم إلى أربعة أرباع بنفس المساحة. يتم اختيار رباعي بشكل عشوائي لبناء منصة مخفية 1 سم تحت سطح الماء. بعد يوم واحد من الإدارة ، بدأت تجربة الملاحة لتحديد المواقع في المتاهة المائية. ضع الجرذ المواجه لجدار البركة من نقطة دخول الربع العشوائي إلى البركة ، وسجل زمن هروب الجرذ (الوقت الذي يستغرقه الفأر في العثور على المنصة المخفية والوقوف عليها لمدة 3 ثوانٍ على الأقل). إذا فشل الجرذ في العثور على المنصة المخفية في غضون دقيقتين ، خذ عصا خشبية لتحريك مهبل الفئران إلى المنصة ، واجعله يقف على المنصة لمدة 30 ثانية. يتم تسجيل زمن هروب الفئران على أنه 120 ثانية ، وتستمر التجربة لمدة 5 أيام.

1.6 الطرق الإحصائية: تم استخدام برنامج SPSS22 0 للتحليل.

يتم تمثيل بيانات القياس بـ (x ± s) ، والتي يتم توزيعها بشكل طبيعي ولها تباين منتظم. يتم استخدام اختبار t للعينة المستقلة للمقارنة بين المجموعات ، ويتم استخدام اختبار t المقترن للمقارنة بين المجموعات. ص<0.05 is="" considered="" as="" the="" difference="" is="" statistically="">

2. النتائج

2.1 تأثير cistanche glycosides على زمن الهروب من تجربة الملاحة لتحديد المواقع في الفئران المصابة بإصابة نقص التروية الدماغية وضخه

تغير متوسط ​​زمن هروب الفئران في كل مجموعة بشكل ملحوظ في تجربة الملاحة بالمتاهة المائية 5d. مع استمرار التجربة ، أظهر زمن انتقال الفئران في كل مجموعة درجات متفاوتة من التقصير. بالمقارنة مع المجموعة النموذجية ، فإن الكمون الهروب من الفئران في الجرعات المنخفضة والجرعات العاليةcistanche جليكوسيداتتم تقصير المجموعة ومجموعة مراقبة المخدرات بشكل كبير ، وكان زمن هروب الفئران في مجموعة GCs ذات الجرعات العالية ومجموعة مراقبة المخدرات كبيرًا في 4 و 5 أيام.

أقل بشكل ملحوظ من المجموعة النموذجية (P<>

الجدول 1 تأثيرcistanche جليكوسيداتعلى زمن الهروب من تجربة الملاحة لتحديد المواقع في الفئران المصابة بإصابة نقص التروية الدماغية وضخه (x ± s ، s)

ملاحظة: بالمقارنة مع مجموعة العمليات الصورية ، △ P {0}. 05؛ مقارنة بالمجموعة النموذجية ▲ P ＜ 0.05.

2.2 تأثير cistanche glycosides على محتوى EAA في أنسجة دماغ الفئران المصابة بإصابة نقص تروية دماغية.

بعدنقص التروية الدماغية - ضخهالإصابة ، زاد محتوى EAA في أنسجة دماغ الفئران بشكل ملحوظ (P.<0.05). after="" drug="" intervention,="" the="" eaa="" content="" in="" the="" brain="" tissue="" of="" the="" rats="" decreased="" to="" varying="" degrees.="" compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" contents="" of="" eaa="" in="" the="" high-dose="">cistanche جليكوسيداتالمجموعة ومجموعة مراقبة المخدرات انخفضت بشكل ملحوظ (P.<>

الجدول 2 تأثيرcistanche جليكوسيداتعلى محتوى EAA في أنسجة دماغ الفئران المصابة بإصابة نقص التروية الدماغية (x ± s ، μmol / g)

ملاحظة: بالمقارنة مع مجموعة العمليات الصورية ، △ P {0}. 05؛ مقارنة بالمجموعة النموذجية ▲ P ＜ 0.05.

2.3 تأثير cistanche glycosides على التعبير عن NF-KB والبروتين في قرن آمون من الفئران المصابة بإصابة نقص التروية الدماغية

أظهرت الكيمياء الهيستولوجية المناعية أن البروتينات الأربعة في قرن آمون من المجموعة النموذجية أظهرت تعبيرًا عاليًا ، والذي كان مختلفًا بشكل كبير عن ذلك في مجموعة العمليات الوهمية (P 0. 05). بعد التدخل الدوائي ، انخفضت مستويات التعبير عن 4 بروتينات في دماغ الخيول للجرذان ، وكانت هناك اختلافات كبيرة بين الجرعات العالية.cistanche جليكوسيداتالمجموعة ، ومجموعة مراقبة المخدرات ، والمجموعة النموذجية (P.<>

3 مناقشة

نقص التروية الدماغية - ضخهيمكن أن يسبب استجابة التهابية مناعية ، وإطلاق كميات هائلة من أكسيد النيتروجين ، وتوليد الجذور الحرة للأكسجين ، والحمل الزائد للكالسيوم داخل الخلايا ، وزيادة إطلاق EAA ، وردود فعل أخرى ، والحث على تنكس الخلايا العصبية والنخر ، مما يؤثر بشكل خطير على الوظيفة الطبيعية لأنسجة المخ [8]. NF-KB هو عامل تنظيمي ينظم الاستجابات المناعية والالتهابية. أشارت الدراسات إلى أن تثبيط تنشيط NF-KB في النواة والسيتوبلازم يمكن أن يقلل بشكل فعال من موت الخلايا المبرمج في الدماغ للخلايا العصبية في منطقة تركيز الاحتشاء [9]. EAA هو ناقل عصبي مهم يتم توزيعه في الجهاز العصبي المركزي. بعد، بعدمانقص التروية الدماغية وضخه، تخضع الخلايا العصبية لعملية إزالة الاستقطاب وتقل قدرتها على تناول EAA بشكل كبير ، مما يؤدي إلى زيادة غير طبيعية في محتوى EAA في أنسجة المخ. عندما يكون محتوى EAA مرتفعًا جدًا ، فإن سميته العصبية ستسبب تلفًا مستمرًا لأنسجة المخ ، مما يؤدي إلى زيادة موت الخلايا المبرمج للخلايا العصبية ، وتلف الوظيفة الطبيعية لأنسجة المخ [10].

وانغ لو وآخرون. أظهر [15] أن:سيستانش جليكوسيديمكن أن يزيد من معدل بقاء الخلايا الفقرية في منطقة CA1 من الحصين ، ويقلل MDA لزيادة أنشطة GSH-Px و SOD ، مما يؤكد ذلكسيستانش جليكوسيديمكن أن تزيل الجذور الحرة للأكسجين بشكل فعال وتحسن فئران مرض الزهايمر تعلم الوظائف الإدراكية. Huang Huilian et al. [16] لاحظ الوظيفة الإدراكية للمرضى المصابين بالخرف الوعائي ووجدوا ذلكسيستانش جليكوسيديمكن أن يقلل من مستوى التعبير عن بروتين مصل P-tau في المرضى ويحسن قدرة المرضى على الحياة اليومية. اقترحوا ذلكسيستانش جليكوسيديمكن أن ينظم مستوى التعبير عن البروتين في الجسم ، وبالتالي يقلل من مستوى تلف دماغ مرضى الخرف الوعائي. تشي يو وآخرون. [17] لاحظآثار Cistanche glycosideكعقار رئيسي على السلوك وتعبير بروتين تاو للفئران النموذجية عن طريق تكرار نموذج فأر مرض الزهايمر ووجدت أن زمن هروب الفئران قد تم تقصير وتثبيط التعبير عن فسفرة البروتين ، وكان ضعف التعلم والذاكرة لدى الفئران تحسن بشكل فعال. ويمكن أن نرى أنسيستانش جليكوسيديمكن أن تقلل من تلف أنسجة المخ وإصلاح وظيفة الأعصاب من خلال آليات مثل تنظيم مستويات التعبير عن البروتين وتثبيط الإجهاد التأكسدي. الآلية المحتملة لإصابة ضخ الدم.

كمون هروب الفئران المعالجةسيستانش جليكوسيدتم تقصيرها بدرجات متفاوتة. تم تقليل محتوى EAA في أنسجة المخ والتعبير عن NF-KB والبروتين في الحُصين ، مما يشير إلى أن الوظيفة الإدراكية للفئران قد تحسنت بشكل فعال. يقلل محتوى EAA في أنسجة المخ من سميته العصبية ويحمي الخلايا العصبية إلى حد معين. بالإضافة الى،سيستانش جليكوسيديمكن أن يمنع التعبير عن بروتين NF-KB ويعيق عملية التنشيط ، وبالتالي يمنع عملية نقل مسار الإشارة ويقلل من موت الخلايا المبرمج للخلايا العصبية.سيستانش جليكوسيديمكن أن يقلل من تنظيم مستويات التعبير عن بروتين تاو ، وبروتين P-tau ، والأميلويد في قرن آمون ، ويمنعهم من التراكم بشكل مفرط في الخلايا ، مما قد يؤدي بدوره إلى إتلاف الخلايا العصبية. ويمكن أن نرى أنسيستانش جليكوسيديمكن أن تقللنقص التروية الدماغية - ضخهالإصابة من خلال EAA وتنظيم البروتين ، وبالتالي تحسين وظيفة أنسجة المخ في الجسم. بمقارنة تأثيرات مجموعات GCs ذات الجرعات المنخفضة والعالية في الجرذان ، يمكن ملاحظة أن الجرعات العالية من GCs لها تحسن أفضلتأثير على نقص التروية الدماغية - ضخهإصابة في الفئران. من المتوقع أنسيستانش جليكوسيدلديه علاج معين يعتمد على التركيزنقص التروية الدماغية - ضخهإصابة، وجرعة عاليةcistanche جليكوسيداتليس لها أقل من التأثير العلاجي لأوكسيراسيتام. ويمكن أن نرى أنسيستانشهو دواء عشبي صيني مع آلية تطبيق سريري عالية. آلية عملها معقدة نسبيًا وآلية عملها واسعة جدًا. إنه يتضمن على وجه التحديد البروتينات والخلايا والمجالات الأخرى. يمكن استخدامه لتطوير عقاقير جديدة مثل مرض باركنسون ومرض الزهايمر. المادة الرئيسية. ومع ذلك ، فإن البحث الحالي علىسيستانشضعيف نسبيًا ، ويحتاج علم الصيدلة وآلية عمله غير المعروفة والكافية إلى مزيد من التوضيح. لقد بدأنا بحثًا متعدد المستويات حول البروتينات والجينات والخلايا والجزيئات ، وما إلى ذلك ، لتوضيح أهداف المكونات الفعالة المختلفة. العلاج المستقبلي للأمراض العصبية والنفسية له آفاق تطبيق واسعة.

في تلخيص،نقص التروية الدماغية وضخهيمكن أن يسبب تعبيرًا غير طبيعي عن EAA و NF-KB والبروتين في حصين الفئران ، ويؤدي إلى تفاقم إصابة الدماغ والخلل الإدراكي.سيستانش جليكوسيديمكن أن تمنع بشكل فعال التعبير عن NF-KB ، وتنظم مستويات التعبير عن بروتين تاو ، وبروتين P-tau ، والأميلويد في EAA والحصين من أنسجة دماغ الفئران ، والتي يمكن استخدامها كطريقة جديدة للعلاجترويهمرض الأوعية الدموية الدماغية.

Cistanche glycoside يعالج نقص التروية الدماغية - ضخه

مراجع

[1] يوان Lingyue ، Zhai Dongyu. يقلل الكيتامين من الاستجابة الالتهابية لـنقص التروية الدماغية - ضخهإصابة الفئران ودراسة الارتباط لمسار إشارات NF- B [J]. صيدلي صيني، 2020 ، 23 (4): 614-619.

[2] Li Ping و Yu Jingping و Chen Yixuan وآخرون. آثارنقص التروية الدماغية - ضخهإصابة في التشكل المرضي للإصابة العصبية في منطقة EPL من القشرة الدماغية ومنطقة الحصين CA1 في الفئران [J]. المجلة الصينية للطب الصيني التقليدي ، 2020 ، 35 (3): 1488-1492.

[3] وين يان ، يو غوان. دور الحاجز الدموي الدماغي في التسبب في مرض الزهايمر [J]. مجلة تشونغتشينغ الطبية ، 2016 ، 45 (8): 1116-1118. [4] Li Chuanwen و Zhang Rong و Hou Liang وآخرون. يشارك مسار SIRT1 / NF-kB في ريسفيراترول لتحسين الاستجابة الالتهابية لـنقص التروية الدماغية - ضخهإصابة في الفئران [J]. مجلة جامعة أنهوي الطبية ، 2018،53 (1): 6-9.

[5] يين شويلينج ، وانغ هايبو ، يانغ شو. واقي الأعصابتأثير Cistancheالسكريات المتعددة عن طريق تنشيط مسار إشارات Wnt / -catenin على {{1} فئران مرض باركنسون الناجم عن HODA [J]. مجلة الطب الصيني التقليدي المتكامل والطب الغربي في أمراض القلب والأوعية الدموية ، 2020،18 (8): 1227-1230.

[6] لي Zhenzong ، Zhao Yumei ، Yuan Hui. تعديل نموذج الفئران البؤرينقص التروية الدماغيةمع طريقة الخياطة [J]. المجلة الصينية لجراحة الأعصاب بأقل تدخل جراحي ، 2018 ، 23 (9): 419-422.

[7] Longa EZ ، Weinstein PR ، Carlson S ، وآخرون. انسداد الشريان الدماغي الأوسط القابل للانعكاس دون استئصال الجمجمة في الفئران. [J]. السكتة الدماغية؛ مجلة التداول الدماغي ، 1989 ، 20 (1): 84.

[8] Xie Lihua ، Liao Jun. بحث في قانون تركيبات الطب الصيني في علاجنقص التروية الدماغيةعلىالإصابة على أساس قواعد الرابطة [J]. مجلة الطب الصيني التقليدي في هونان للجامعة الصيدلانية ، 2020 ، 40 (1): 65-69.

[9] لي فان. يقلل الكركمين من تلف الخلايا العصبية في الدماغ في الفئران المستعرضة لمرض الزهايمر عن طريق تثبيط مسار إشارات TLR4 / NF-kB [J]. البحث التشريحي ، 2017 ، 39 (2): 102-105.

[10] وانج ويياو ، تشين لينج ، يو شيولينج ، وآخرون. آثار إجهاد التقييد المزمن على التعلم المكاني والذاكرة ومستوى الأحماض الأمينية المثيرة في التلفيف المسنن الحصين للفئران المسننة [J]. مجلة جامعة جيلين (الطبعة الطبية) ، 2018 ، 44 (1): 8-12.

[11] يانغ جيانهوا ، ماي وو جودان أليفو ، جو بوي وآخرون. دراسة عن عملية الاستخلاص والديناميكا الدوائية للأجزاء الفعالة من المليناتسيستانش[J]. Journal of Food Safety and Quality Inspection، 2019، 10 (15)): 5069-5075.

[12] Ailadan · Maimaiti Aili و Yang Ting و Yuan Jie وآخرون. تكنولوجيا الاستخراج والنشاط المضاد للأكسدة في المختبر من السكريات منسيستانشالثمالة [J]. الكيمياء والهندسة الحيوية ، 2020 ، 37 (2)): 36-41.

[13] Ma Xiaoqing و Wang Jie و Hu Junping وآخرون. الديناميكا الدوائيةCistanche جليكوسيدات فينيليثانويدعلى إصابة الكلى الحادة التي يسببها الجنتاميسين في الفئران [J]. مجلة جامعة شينجيانغ الطبية ، 2020 ، 43 (7): 942 -946 ، 950.

[14] دينج نان ، شين ياجوان ، دينج هوي ، وآخرون. تقدم البحث في التأثيرات الدوائية لـسيستانشمكونات عديد السكاريد الصحراوي [J]. مجلة جامعة لياونينغ للطب الصيني التقليدي ، 2020 ، 22 (6): 67-71.

[15] وانغ لو ، باي يومينغ ، لي شياويو ، وآخرون. آثارسيستانش جليكوسيداتعلى تعلم الوظيفة الإدراكية والإجهاد التأكسدي في نموذج الجرذان لمرض الزهايمر [J]. مجلة التشريح ، 2020 ، 43 (3): 194-199 ، الغلاف الخلفي 3.

[16] هوانغ هويليان ، تشن لي. آثارسيستانش جليكوسيداتعلى الوظيفة المعرفية وتعبير بروتين مصل p-tau في مرضى الخرف الوعائي [J]. مجلة الطب الصيني التقليدي المتكامل والطب الغربي لأمراض القلب والأوعية الدموية ، 2019 ، 17 (8): 1248- 1250.