معاملات الاستخلاص وطرق التجفيف لنبات Cistanche Deserticola
May 24, 2024
Cistanche هو Cistanche deserticola YC Ma أوCistanche tubulosa (شينك) وايتساق لحمي جاف بأوراق متقشرة من نبات OrobanchiaceaeCistanche deserticola YC Ma[1]. العنصر النشط الرئيسي في Cistanche deserticola هو جليكوسيدات الفينيل إيثانول [2-4]. وقد أظهرت الدراسات الدوائية أنه يحتوي على وظائفمثير للشهوة الجنسية, تحسين المناعة، وتعزيز الذاكرة[4-9].
في السنوات الأخيرة، تم استخدام منهجية سطح الاستجابة على نطاق واسع في استخلاص الطب الصيني التقليدي [{{0}}]. تتمتع طريقة سطح الاستجابة بمزايا متأصلة تتمثل في دقة الكشف العالية، وعدد أقل من التجارب المطلوبة، والتنبؤ الدقيق لنماذج الوظائف، والقدرة على عكس العلاقة بين العوامل والقيم المتوقعة [15-17]. ولذلك، تستخدم هذه التجربة النتيجة الشاملة لمحتوى جليكوسيدات الفينيل إيثانول الخمسة كقيمة الاستجابة، وتستخدم برنامج Design-Expert 8.0.6.1 لتصميم التجربة، وتحسين عملية استخراج Cistanche deserticola، وتوفير معلومات لتحديد و وضع معايير الجودة فيسيستانش ديزيرتيكولا.
حاليا، المؤشرمكونات إشنساسيد و فيرباسكوسيدهي موضوعات بحثية ساخنة في تكنولوجيا الاستخراج والمعالجةسيستانش ديزيرتيكولا. تنص طبعة 2015 من دستور الأدوية الصيني على أن طريقة معالجة Cistanche deserticola هي "إزالة الشوائب، وغسلها، وترطيبها، وتقطيعها إلى شرائح سميكة، وتجفيفها". [1] لا توجد لوائح واضحة بشأن طريقة التجفيف. ولذلك، استخدمت هذه التجربة ثماني طرق تجفيف مختلفة، بما في ذلك التجفيف بالشمس، والتجفيف بالظل، والتجفيف بالفرن (40، 60، 80، 100، 120 درجة)، والتجفيف بالتجميد، لمعالجة Cistanche deserticola [18]، والتي قدمت الأساس النظري ل عملية تجفيف Cistanche deserticola.
على التوجيه.
مستخلص السيستانش مع 30% من الإشينكاوسيد
1 المواد والأدوات
تم حصاد Cistanche deserticola الطازجة في أكتوبر 2018. مكان المنشأ هو بلدة ميتان، مقاطعة مينكين، بايين، مقاطعة قانسو. وحدد البروفيسور المساعد قوه يونغ من جامعة قانسو الزراعية اسم Cistanche deserticola YC Ma، وهو ساق لحمي بأوراق قشور. المواد المرجعية إشنساسيد (رقم الدفعة 82854-37-3، جزء الكتلة أكبر من أو يساوي 98٪)، سيستانتشيسيد A (رقم الدفعة 93236-42-1، جزء الكتلة أكبر من أو يساوي 95٪)، فيرباسكوسيد (رقم الدفعة { {5}}، الكسر الكتلي أكبر من أو يساوي 98%)، إيزوموراباسين (رقم الدفعة 61303-13-7، الكسر الكتلي أكبر من أو يساوي 98%)، 2′-أسيتيل فيرباسكوسيد (رقم الدفعة 94492-24-7 ، تم شراء جزء كتلي أكبر من أو يساوي 95٪ من Chengdu Pu. شركة فيدي للتكنولوجيا الحيوية المحدودة؛ حمض الفورميك والميثانول من الدرجة اللونية، شركة ميرك الألمانية؛ الماء هو الماء النقي، والكواشف الأخرى من الدرجة التحليلية.
جهاز كروماتوجرافيا سائل Waters Acquity، وكاشف PDA، ومحطة عمل كروماتوغرافيا تمكينية ونظام إدارة المذيبات الرباعية؛ KQ-100E المنظف بالموجات فوق الصوتية، Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.
شركة؛ الميزان التحليلي AL104، شركة Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd.؛ مجفف التجميد LyoQuest-85، تلستار، أسبانيا.
2 الطرق والنتائج
2.1 إعداد الحل المرجعي
قم بوزن الكميات المناسبة بدقةإشنساسيد، سيستانتشيوسيد أ، فيرباسكوسيد، إيزورباسكوسيد، و 2'-أسيتيل فيرباسكوسيد المعايير المرجعية، وإضافة 7 0٪ ميثانول لجعل تركيزات الكتلة 1.04، 0.61، 0.63، 0.39 و 0.48 ملغم / مل من المحلول المرجعي المختلط.
2.2 الظروف الكروماتوغرافية لنبات Cistanche deserticola
تماثل المياه C18 (250 مم × 4.6 مم، 5 ميكرومتر)؛ درجة حرارة العمود 30 درجة، حجم التدفق 1.0 مل/دقيقة؛ الطور المتحرك هو الميثانول -0.1% محلول مائي لحمض الفورميك، تدرج الشطف: 0~12 دقيقة، 29%~34% ميثانول؛ 12-40 دقيقة، 34%-40% ميثانول؛ 30-35 دقيقة، 40%-35% ميثانول؛ 35-40 دقيقة، 30% ميثانول؛
1- إشيناكوسيد 2- سيستانش A 3- فيرباسكوسيد 4- إيزواكتيوسايد 5-2′-أسيتيللاكتيوسايد
الشكل 1: HPLC من المرجع المختلط (A) وعينة C. deserticola (B)
2.3 تحضير محلول الاختبار
قم بوزن 1 جم من مسحوق Cistanche deserticola المجفف بدقة في دورق مخروطي (مرر عبر منخل شبكي 65-)، أضف 50 مل من 50٪ ميثانول، قم بوزن الكتلة، بالموجات فوق الصوتية عند 40 كيلو هرتز عند 150 وات، بارد إلى درجة حرارة الغرفة ، وتشكل الكتلة للحصول عليها.
2.4 التحقيق في العلاقة الخطية
خذ {{0}}.1، {{20}}.5، 1، 2، 4، و8 مل من المحلول المرجعي المختلط أعلاه إلى 10 مل دورق حجمي، وأضف 70% ميثانول إلى العلامة. رسم بدقة 10 ميكرولتر وقياس وفقا للشروط الكروماتوغرافية "2.2". تركيز الكتلة هو الإحداثي السيني (X) ومنطقة الذروة هي الإحداثي (Y). إجراء الانحدار الخطي ومعادلات الانحدار هي: إشنسا Y =128 049 X -830 189، ص =0. 999 5، النطاق الخطي 10.4 ~ 832.0 ميكروغرام / مل؛ سيستانشيسيد AY=87 980 -447 963، r＝0.999 8، النطاق الخطي 6.3-504.0 ميكروغرام/مل; إيزوموراباسين Y＝92 831 جليكوسيد Y=79 207 X-304 428، r=0.999 4، النطاق الخطي 4.8~384.0 ميكروغرام/مل.
2.5 المراجعة المنهجية
2.5.1 الفحص الدقيق
خذ 20 ميكرولتر من المحلول المرجعي المختلط في البند "2.1" واحقنه 6 مرات بشكل مستمر لقياس مناطق الذروة في إشنساسيد، سيستانتشياسيد A، فيرباسكوسيد، إيزوريباسكوسيد، و2'-أسيتيل فيرباسكوسيد. RSDs هي 0.23% على التوالي. ، {{10}}.71%، 0.59%، 0.41%، 0.29%، مما يشير إلى أن الجهاز يتمتع بدقة جيدة.
2.5.2 اختبار التكرار
أخذ 6 أجزاء من نفس عينة Cistanche deserticola، وتحضير محلول الاختبار طبقاً للبند "2.3"، وحقن العينة تحت الظروف الكروماتوغرافية للبند "2.2"، وقياس مساحة الذروة. النتائج كان متوسط الكسور الكتلية للإشنساسيد، والسيستانشيوسايد A، والفيرباسكوسيد، والإيزوريباسكوسيد، و2′-أسيتيل فيرباسكوسيد 1.83%، 0.21%، 2.34%، 0.13%، و{{15 }}.68% على التوالي، وكانت RSDs 1.32 على التوالي. %، 0.83%، 1.24%، 2.19%،
0.78%، مما يشير إلى أن الطريقة تتمتع بقابلية تكرار جيدة.
2.5.3 اختبار الاستقرار
حدد ثبات محلول الاختبار نفسه (المُعد وفقًا لـ "2.3") عند 0، 2، 4، 8، 12، 24، و48 ساعة للحصول على إشناسيسيد، سيستانتشيوسيدي A، فيرباسكوسيد، وإيزوليباسكوسايد. ، منطقة الذروة 2′-أسيتيل فيرباسكوسيد، RSD كانت 0.58%، 0.21%، 1.58%، 1.46%، 2.19% على التوالي، مما يشير إلى أن محلول الاختبار كان مستقرًا خلال 48 ساعة.
2.5.4 اختبار استرداد العينة
خذ 1 جرام من 6 عينات من Cistanche deserticola ذات محتوى معروف، وأضف بدقة كمية معينة من المحلول المرجعي المختلط (Echinaceaside 1.06 mg/mL, Cistancheoside A 0.86 mg) / مل، فيرباسكوسيد 2.17 ملغم / مل، إيزوليباسكوسيد 0.79 ملغم / مل، 2′-أسيتيل فيرباسكوسيد 0.91 ملغم / مل)، أضف 70٪ ميثانول لتكوين ما يصل إلى 50 مل، و حقن العينات طبقاً للشروط الكروماتوغرافية "2.2". متوسط المبالغ المستردة المقاسة هي 101.52%، 99.21%، و102.62% على التوالي. ، 98.62%، 97.36%، RSD هي 1.64%، 1.95%، 0.87%، 1.59%، 1.13% على التوالي، ومعدل استرداد العينة جيد.
Cistanche هو عشب منشط معروف يمكنه تغذية وحماية الكلى. في نظرية الطب الصيني التقليدي، يعتبر السيستانش أفضل عشب للكلى. السيستانش غني بالإيتشيناكوسايد والأكتيوزيد والفلافونويدات. هذه المكونات الفعالة في السيستانش يمكن أن تقلل من موت الخلايا المبرمج في الكلى وتزيد من تكاثر خلايا الكلى. ولذلك، Cistanche هو مكمل طبيعي للكلى.
