مستخلصات الزهور كأصباغ متعددة الوظائف في صناعة مستحضرات التجميل الجزء الثاني

الرجاء التواصلoscar.xiao@wecistanche.comللمزيد من المعلومات

تستخدم العديد من المنتجات الطبيعية في الأنظمة الطبية التقليدية لعلاج أعراض الألم والالتهابات ، [61] لذلك ، تم التحقق من تأثير المستخلصات التي تم تحليلها على تثبيط نشاط إنزيم الليبوكسجين والبروتيناز. في نطاق التركيزات التي تم تحليلها (100-500 ميكروغرام / مل) ، أظهر مستخلص الماء CTE أقوى قدرة على تثبيط البروتيناز (الشكل 4) (بنسبة 57 بالمائة لتركيز 500 ميكروغرام / مل). تمت مقارنة هذا النشاط مع مثبط بروتيناز ديكلوفيناك المعروف جيدًا ، والذي يستخدم كعنصر تحكم (حوالي 89 بالمائة من التثبيط عند أعلى تركيز تم اختباره). ومع ذلك ، تم الحصول على نتائج مماثلة لمستخلص GGE و KTE (حوالي 56 بالمائة و 53 بالمائة على التوالي لأعلى التركيزات). لوحظ تثبيط بروتيناز أقل لمستخلصات PRE و PGE. في اختبار آخر يقيس القدرة على تثبيط إنزيم الليبوكسجيناز ، أظهرت المستخلصات المائية من KTE و CTE أعلى القيم (حوالي 67 بالمائة و 64 بالمائة تثبيط ، على التوالي ، لتركيز 500 ميكروغرام / مل. كما تم استخدام ديكلوفيناك كعنصر تحكم تتميز مستخلصات GGE و PGE و PRE أيضًا بقيم عالية بشكل ملحوظ (60 بالمائة و 57 بالمائة و 54 بالمائة على التوالي) كما لوحظ أن القدرة على تثبيط إنزيمات LOX والبروتينيز تعتمد على تركيز المستخلص (الشكل 5).

أشارت الدراسات السابقة إلى أن العديد من مركبات البوليفينول ساهمت بشكل كبير في الأنشطة المضادة للالتهابات للعديد من المستخلصات النباتية [62]. أظهرت الدراسات تورط أنواع الأكسجين التفاعلية في العملية الالتهابية ، وأن المركبات الفينولية مثل حمض الجاليك وحمض الكينيك قد تمنع استقلاب حمض الأراكيدونيك عن طريق تثبيط نشاط نشاط إنزيم الليبوكسجيناز ، أو قد تعمل ككسح للجذور الحرة التفاعلية ، والتي يتم إنتاجها خلال حمض الأراكيدونيك. [63]. النتائج التي حصل عليها BenSaad et al. تشير إلى أن حمض الإيلاجيك وحمض الغال و Punicalagin A & B المعزول من P. granatum يثبط إنتاج أكسيد النيتريك (NO) والبروستاغلاندين E2 (PGE2) والإنترلوكين 6 (IL -6) في عديدات السكاريد الدهنية (LPS) التي يسببها RAW 267.4 الضامة. ما إذا كانت هذه المركبات تعمل كعامل وحيد أو لها تأثير تآزري لا يزال سؤالًا [64]. نظرًا لأن العديد من مركبات الفلافونويد تظهر خصائص مضادة للالتهابات ، نظرًا لسلوكها الجوهري المضاد للأكسدة ، فقد تورطت في العديد من الاضطرابات الالتهابية.طريقة استخراج الفلافونويد pdf ،على وجه الخصوص ، يعتبر الكيرسيتين أكثر الجزيئات إثارة للاهتمام لأنه يتداخل مع مسارات بيولوجية محددة. علاوة على ذلك ، تشير الدراسات إلى أنه يمكن أن يقلل من عملية الالتهاب التي تنطوي عليها عدة نماذج من خلال آليات مختلفة [65]. على وجه الخصوص ، ينتج عن بروتين كيناز المنشط AMP ومسار هيستون / بروتين ديسيتيلاز (AMPK / SIRT1) إدارة التهاب أكثر إثارة للاهتمام. وبالتالي ، يمكن لمنشطات AMPK أن تقلل من التهاب البلاعم. قد يقلل الكيرسيتين والفلافونويدات الأخرى ، كمنشطات لـ AMPK و SIRT1 ، من الالتهاب عن طريق التدخل في هذا المسار [66]. وقد ثبت أيضًا أن كيرسيتين وكيرسيتين أحادي الجلوكوزيدات يمارسان قدرة أعلى على تثبيط LOX [67] Nair et al. أظهروا خصائص مضادة للالتهابات لمستخلص KTE من خلال تقييم وجود الفلافونول مع جزء كيرسيتين مثل manghaslin Qu 3- [2G] rhamnosylrutinoside و Qu 3- O-dirhamnoside و rutin. أظهرت هذه الجزيئات تثبيطًا قويًا لنشاط COX -2 وقمع جزئي لـ ROS. بشكل عام ، أظهرت مادة البوليفينول الموجودة في الاعتلال الدماغي الرضحي المزمن خصائص مضادة للالتهابات في الالتهاب الناجم عن LPS في خلايا البلاعم RAW 264.7 [68].

الرجاء الضغط هنا لمعرفة المزيد

2.5. تقييم السمية الخلوية

عند صنع مواد خام جديدة لمستحضرات التجميل ، فإن أحد أهم خصائصها هو سلامة استخدامها. يجب أن تكون المواد المخصصة للاستخدام في مستحضرات التجميل غير سامة ، خاصة فيما يتعلق بخلايا الجلد ، مثل الخلايا الكيراتينية والخلايا الليفية. تم استخدام نوعين من الاختبارات لتحديد سمية المستخلصات التي تم تحليلها على خلايا HaCaT و BJ.مركبات الفلافونويدتمكننا الدراسة الأولى ، باستخدام مقايسة الامتصاص الأحمر المحايد ، من تقييم جدوى الخلايا المعالجة بالمقتطفات التي تم تحليلها. تدخل هذه الصبغة في الجسيمات الحالة للخلية الحية ويتم إطلاقها في سيتوبلازم الخلايا الميتة. لوحظ (الشكل 6) أن مستخلص CTE لديه أعلى قدرة على زيادة تكاثر كل من خلايا HaCaT و BJ. بالمقارنة مع عنصر التحكم ، حقق هذا المستخلص قيمًا أعلى بحوالي 20 بالمائة و 40 بالمائة من المعلمة المختبرة بتركيز 250 ميكرولتر / مل HaCaT و B】） و 500 ميكرولتر / مل （خلايا BJ） ، على التوالي. يتميز مستخلص GGE بتركيزات 100 و 250 ميكرولتر / مل ومستخلص KTE بتركيز 500 ميكرولتر / مل بتأثير سام بسيط على خلايا BJ. كان لمستخلصات أخرى تأثير إيجابي على جدوى هذه الخلايا. لم تختلف مستخلصات PRE و PGE بتركيز 100 ميكرولتر / مل بشكل كبير عن المجموعة الضابطة ، وزادت من تكاثر خلايا BJ بحوالي 10-15 في المائة مقارنةً بالتحكم بتركيز 250 و 500 ميكرولتر / مل. في حالة الخلايا الكيراتينية ، لم يلاحظ أي انخفاض في حيوية الخلية. بالنسبة لمستخلصات PGE و PRE و CTE ، لوحظ زيادة في الانتشار مع زيادة التركيز ، بينما ظهر انخفاض في حيوية الخلية مع زيادة تركيز مستخلصات KTE و GGE.

الاختبار الثاني الذي تم إجراؤه لتحديد السمية الخلوية للمستخلصات المختبرة كان اختبار ريسازورين (الامار بلو). لقد تبين (الشكل 7) أن صلاحية الخلايا تعتمد على تركيز المستخلص الذي تم تحضين الخلايا به. في حالة الخلايا الليفية ، تتسبب مستخلصات PRE و PGE و CTE في زيادة تكاثر الخلايا مع زيادة تركيزها. عند أعلى تركيز تم تحليله 500 ميكرولتر / مل ، لوحظ انتشار أعلى بنسبة 20 بالمائة مقارنةً بمجموعة التحكم.يستخدم هسبريدينفي حالة مستخلصات KTE و GGE ، لوحظ انخفاض في حيوية الخلية مع زيادة تركيز المستخلصات. أظهرت هذه المستخلصات تأثيرًا سامًا طفيفًا على BJ بتركيزات 250 و 500 ميكرولتر / مل. في حالة الخلايا الكيراتينية ، لوحظ تأثير مماثل للمستخلصات التي تم تحليلها على خلايا الجلد ، لكن قدرتها على التكاثر لم تكن قوية كما في حالة الخلايا الليفية. لوحظت أعلى قدرة على زيادة تكاثر الخلايا الكيراتينية لمستخلص CTE في النطاق الكامل للتركيزات التي تم تحليلها. تم الحصول على قيم مماثلة لمستخلص PRE بتركيز 250 ميكرولتر / مل ومستخلص PGE بتركيز 500 ميكرولتر / مل. أظهر مستخلص KTE تأثيرًا سامًا أعلى بكثير على خلايا HaCa من مستخلص GGE.

لم يتم اختبار المستخلصات التي تم تحليلها على نطاق واسع لمعرفة مدى سميتها لخلايا الجلد من قبل. لا يوجد سوى عدد قليل من دراسات السمية الخلوية على المستخلصات أو مكوناتها النشطة الرئيسية ، خاصة تجاه الخلايا السرطانية. أشار مؤلفو الدراسات السابقة إلى أن هذه المستخلصات بشكل عام ليس لها تأثير سام على خلايا الجلد ، وغالبًا ما تُعزى قدرتها على زيادة تكاثر الخلايا إلى المحتوى العالي من مادة البوليفينول والأنثوسيانين والفلافونويد [45 ، 69-73 ]. أشار بعض المؤلفين أيضًا إلى أن المكونات الفردية الموجودة في المستخلصات قد تظهر تأثيرًا سامًا على خلايا الجلد ، في حين أن المستخلص ككل لا يفعل ذلك. علي حجازي وآخرون. [69] أظهرت أن القلويات المستخرجة من Punica granatum سامة لخطوط الخلايا السرطانية والعادية ، في حين أن المستخلص الكامل أقل سمية. دراسة نصيري وآخرون. [70] يشير إلى أن مستخلص زهرة Punica granatum قد يكون مفيدًا في تسريع عملية التئام الجروح نظرًا لقدرته على زيادة تكاثر خلايا الجلد. في بحثنا السابق [45] ، تبين أن المستخلصات المائية الإيثانولية التي تم الحصول عليها من النباتات التي تم تحليلها تتميز بقدرة أعلى على زيادة تكاثر خلايا BJ ، وأظهرت مستخلصات KTE و GGE تأثيرًا أقل سمية على هذه الخلايا .فقدت الإمبراطوريةكان تأثير مستخلصات الإيثانول المائي على خلايا HaCaT مشابهًا لتأثير المستخلصات المائية النقية ، ولكن في حالة المستخلصات التي تم الحصول عليها باستخدام الإيثانول ، لوحظت خصائص تكاثر أكثر تفضيلًا من حالة المستخلصات المائية. قد تؤدي الاختلافات بين تكوين كلا النوعين من المستخلصات التي تم تحليلها إلى اختلافات في سميتها. كما هو موضح ، فإن مستخلصات المياه ليست غنية بالمكونات النشطة بيولوجيًا مثل مستخلصات الإيثانول المائي. لوحظت أكبر الاختلافات في محتوى روتين وإيزوكيرسيتيرين.

يمكن للسيستانش مكافحة الشيخوخة

2.6 تحديد عامل الحماية من الشمس

قد يتم الكشف عن الآثار غير المواتية للأشعة فوق البنفسجية على الجلد بعد فترة وجيزة من التعرض وكذلك بعد سنوات. للإشعاع الشمسي تأثير مثبط للمناعة مما يسرع من شيخوخة الجلد مع كل العواقب المرتبطة به ، بما في ذلك زيادة التسرطن [74]. تشير الاتجاهات الملحوظة حاليًا إلى الحاجة المتزايدة لتطوير منتجات لا تتميز فقط بمستوى عالٍ جدًا من الأمان في الاستخدام ولكن أيضًا متعددة الوظائف بمعنى أن المنتجات ستتميز بحماية الجلد من الإشعاع مع نطاق عمل أوسع من المستخدم حتى الآن. تلعب بعض المواد النباتية دورًا لا يقدر بثمن في هذا الجانب ، حيث إنها قادرة ليس فقط على توفير الحماية من أشعة الشمس ولكن أيضًا لتحييد الآثار السلبية الموجودة بالفعل للإشعاع الشمسي على الجلد [75-77]. أظهر البحث الذي تم إجراؤه أن المستخلصات النباتية التي تم تحليلها PRE و PGE و KTE و CTE و GGE تتميز بمعاملات SPF عالية.

تم إجراء تحليل المعاملات (SPF) لمستخلصات المياه التي تم الحصول عليها من النباتات المذكورة أعلاه بتركيزات 10 و 50 مجم / مل. لكل نبات تم فحصه أدى التركيز الأعلى للمستخلص إلى قيمة أعلى بكثير من عامل الحماية من الشمس.استخدامات الفلافونويد المنقى المجهرية 1000 مجمتظهر المقارنة بين المستخلصات أن أعلى قيم SPF قد لوحظت لمستخلص KTE ، والتي تثبت لكلا التراكيز التي تم فحصها. ملاحظة أخرى مثيرة للاهتمام هي أنه حتى في التركيزات المنخفضة التي تم فحصها ، لا يزال مستخلص KTE يظهر ارتفاعًا في عامل الحماية من الشمس ، بينما انخفضت قيم المستخلصات الأخرى بشكل ملحوظ. يتضح هذا عندما نحلل مقدار نتيجة KTE أعلى من المقتطفات الأخرى. بالنسبة لتركيز 50 مجم / مل ، كان SPF أعلى بعامل 1.2 (عند مقارنته بـ PGE ، CTE) إلى عامل 1.9 تقريبًا (عند مقارنته بـ PRE ، GE). نفس الحساب لتركيز 10 مجم / مل سيعطي عوامل من 1.4 (عند مقارنتها بـ PGE) إلى عوامل النطاق 2-3 (عند مقارنتها بـ CTE ، GGE) ، حتى عوامل مثل 10 عند مقارنتها بـ قبل. عند التركيز على مستخلص KTE ، يمكن للمرء أن يلاحظ أن انخفاض تركيز المستخلص حسب العامل 5 (من قيمة 50 مجم / مل إلى قيمة 10 مل / مل) يؤدي إلى انخفاض قيمة عامل الحماية من الشمس (SPF) حسب العامل 3.4 ، مما يعني أن عامل الحماية من الشمس (SPF) ينخفض ​​بشكل أبطأ من التركيز. يوضح ما سبق أن مستخلص KTE يمكن أن يكون فعالًا حتى عند تطبيقه بتركيزات منخفضة (الشكل 8).

2.7. قياسات فقدان الماء عبر الجلد (TEWL) وترطيب الجلد

بسبب النطاق الواسع للنشاط البيولوجي والدوائي للمواد الخام النباتية ، فإن المواد النباتية الموجودة في المستخلصات لها تأثير كبير على حالة الجلد. على وجه الخصوص ، نحن نتحدث هنا عن تأثير المستقلبات الثانوية على حالة بشرتنا [78،79].

في المرحلة التالية من البحث ، تم إجراء تحليلات الترطيب و TEWL. تم تقييم تأثير المستخلصات المختبرة على الجلد. تم إجراء القياسات على فترتين زمنيتين 60 و 360 دقيقة لتركيز المستخلص 10 مجم / مل. بالنسبة لقياس TEWL ، ظهر أكبر انخفاض بالنسبة المئوية لمستخلص PGE ، حيث انخفضت قيمة التحكم البالغة 13.9 إلى 8.71 ، مما أدى إلى انخفاض بنسبة 37 بالمائة. يجدر أيضًا تحليل مستخلص KTE من هذا المنظور ، حيث كان هذا هو الذي يظهر أعلى قيم SPF. بالنسبة لمستخلص KTE ، انخفضت قيمة التحكم في TEWL إلى قيمة 10.22 ، مما يعني انخفاضًا بنسبة 26 بالمائة (الشكل 9 أ).

ومع ذلك ، في حالة القياس الثاني للأداة ، فقد تبين أن المستخلصات التي تم تحليلها تسبب زيادة في الترطيب بالنسبة لعينة التحكم ، سواء بعد 60 دقيقة أو بعد 360 دقيقة.

نتيجة للتحليلات ، وجد أن مستخلصات PRE و PGE و KTE و CTE و GGE التي تم تحليلها تزيد من ترطيب الجلد (الشكل 9 ب). لوحظت زيادة في خصائص الترطيب مع زيادة تركيز المستخلص في المستحضرات. تمت ملاحظة أقوى خصائص الترطيب لمستخلصات PRE و PGE التي تعادل 32 في المائة و 29 في المائة بعد 60 دقيقة وتساوي 21 في المائة و 22 في المائة بعد 360 دقيقة. على الرغم من ذلك ، تم العثور على أدنى مستوى من ترطيب الجلد لمستخلص KTE الذي يعادل 18 في المائة بعد 60 دقيقة وما يقرب من 3 في المائة بعد 360 دقيقة.

2.8. تحليل التطبيق

2.8.1. تحديد معاملات اللون للمستخلصات

بسبب لونها الطبيعي ، يمكن استخدام المكونات النشطة لأزهار النباتات كصبغات طبيعية في العديد من المنتجات التجارية ، مثل مستحضرات التجميل والمواد الغذائية. تم إجراء تحليل اللون للمستخلصات التي تم الحصول عليها (الجدول 5).

تم العثور على مستخلصات PRE و KTE و CTE ذات الإمكانات الأعلى كأصباغ مستحضرات التجميل الطبيعية. ومع ذلك ، لوحظت أعلى قيم صفاء (C *) بالنسبة للاعتلال الدماغي الرضحي المزمن. بناءً على قيمة معامل الدرجة h ، وجد أن اللون الأصفر لهذا المستخلص هو الذي يتم ملاحظته ومرئي للعين المجردة. في حالة مستخلصات KTE و PRE ، على الرغم من انخفاض قيمة C * (2.8) ، يمكن رؤية لون هذه المقتطفات بوضوح بالعين المجردة وتم تحديده باللون الأحمر الأرجواني لـ PRE والأزرق البنفسجي لمستخلص KTE. كانت المستخلصات المائية لـ PGE و GGE ذات لون ضارب إلى الحمرة وبرتقالية قليلاً ، وكانت قيم الصفاء التي تم الحصول عليها عند مستوى 1.3. بالنسبة لهذا اللون ، لم تكن هذه القيم واضحة للعين المجردة.

2.8.2. تحديد معاملات اللون لمستحضرات التجميل بناءً على المستخلصات

في السنوات الأخيرة ، كانت هناك حاجة ماسة لتطوير أصباغ جديدة ذات أصل طبيعي ، وخاصة في صناعات الأغذية ومستحضرات التجميل. بالمقارنة مع الأصباغ التي يتم الحصول عليها صناعياً ، قد يكون لها تأثير سلبي أقل على صحة الإنسان والبيئة [80]. تم استخدام المستخلصات التي تم الحصول عليها في صياغة نموذج سائل مزيل مكياج ميسيلار. في كل صيغة ، تم استخدامها بتركيز 1٪. يتم عرض نتائج المعلمات اللونية لمستحضرات التجميل النموذجية في الجدول 6.

لوحظ أن إضافة 1٪ من مستخلصات الماء من PRE و PGE و CTE و GGE أثرت بشكل كبير على لون مزيل المكياج. كانت كل عينة مرئية للعين المجردة بالألوان بوضوح. قام مستخلص PRE بتغيير لون مستحضرات التجميل إلى اللون البرتقالي ، وقام مستخلص PGE و CTE و GGE بتغييره إلى اللون الأصفر.

يتم تأكيد إمكانية استخدام المستخلصات التي تم تحليلها كصبغات محتملة من خلال القيم العالية نسبيًا لـ △ مزيل مكياج بخلاصة / مزيل مكياج أساسي ، مما يشير إلى تغير كبير في لون مستحضرات التجميل النموذجية مع إضافة المستخلص مقارنة إلى العينة الأساسية (بدون إضافة المقتطفات). تُظهر بيانات الأدب [73] أنه إذا كانت قيم AE أعلى من 5 ، فإن اللون يُدرك من خلال عشية عارية ويُنظر إليه على أنه تأثير لوني. بالنسبة لمزيلات المكياج التي تحتوي على مستخلصات PRE و KTE و CTE ، تم الحصول على قيم AE البالغة 8.83.9.17 و 8.14 على التوالي. في حالة المنتجات التي تحتوي على مستخلصات PGE و GGE ، لم يلاحظ أي تأثير كبير في المستخلص على لون المستحضر. تقع قيم AE في نطاق 2. 51-2 82. هذا يعني أن الاختلاف في اللون لا يمكن تمييزه إلا للمراقب المتمرس [80،81].

3. المواد والطرق

3.1. المواد النباتية وإجراءات الاستخراج

كانت المادة النباتية المستخدمة في البحث عبارة عن أزهار جافة لنبات P. rhoeas L. و P.granatum L. و C.ternatea L. و C.tinctorius L. و G.globosa L. ، والتي تم الحصول عليها من مخزن الأعشاب المحلي. . تم إجراء عملية الاستخراج في حمام بالموجات فوق الصوتية (Digital Mgtrasonic Cleaner ، برلين ، ألمانيا) ، والذي تم إجراؤه باستخدام الطريقة التي وصفها Yang et al. [82]. تم استخدام 10 جرام من الزهور الجافة و 100 جرام من الماء لتحضير المستخلصات المائية للنباتات المختبرة. تم تنفيذ العملية لمدة 20 دقيقة عند درجة حرارة الغرفة. تم بعد ذلك جمع المستخلصات التي تم الحصول عليها وتصفيتها ثلاث مرات من خلال ورق الترشيح Whatman No. 1. بعد الترشيح ، تم تبخير المستخلصات تحت ضغط مخفض عند 40 درجة. تم تحضير محلول مخزون بتركيز 100 مجم / مل من المستخلصات المجففة وتم تخزينه في الظلام عند 4 درجات حتى مزيد من التحليل. يتم استخدام الاختصارات التالية: PRE - مستخلص نبات الورود ، PGE - مستخلص بونيكا جراناتوم ، GGE - مستخلص Gomphrena globosa ، CTE - مستخلص Carthamus tinctorius ، KTE - مستخلص Clitoria ternatea.

3.2 تحديد المركبات النشطة بيولوجيا بواسطة HPLC-UV-ESI-MS

تم تحليل المستخلصات التي تم الحصول عليها لتحديد المركبات النشطة بيولوجيًا الرئيسية باستخدام HPLC (DionexUltiMate 3 0 0 {{2 0} RS Thermo Fisher Scientific ، Sunnyvale ، CA ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، إلى جانب بمقياس طيف الكتلة (4 0 0 0 QTRAP ، AB Sciex ، Concord ، ON ، كندا) ، ومجهز بمصدر تأين بالرش الكهربائي (ESI) وكتلة مصيدة ثلاثية الأيونات الرباعية محلل. تم تحقيق الفصل الكروماتوغرافي مع نظام الطور العكسي المتدرج. علاوة على ذلك ، تم شراء العمود الكروماتوغرافي مقاس 100 × 4.6 مم Kinetex 3.5 ميكرومتر XB-C 18 100 A مع سلاسل جانبية iso-butyl ومع مرحلة السد النهائي TMS المستخدمة مع تكوين عمود حماية مماثل من Phenomenex وصيانته عند 30 درجة . تم استخدام نظام مذيب ثنائي يشتمل على 0.1 بالمائة (o / v) حمض فورميك مائي كمذيب أ والميثانول كمذيب ب تحت وضع التدرج خلال 19.1 دقيقة من وقت التشغيل. كانت شروط الشطف المطبقة على النحو التالي: 0. 0-15. 0 دقيقة 25-100 بالمائة ب ، 15. 0-17. 0 دقيقة 100 بالمائة ب ، 17. 0-17. 1 دقيقة 100-25 بالمائة ب ، 17. 1-19. 1 دقيقة 25 بالمائة ب. كان معدل تدفق الطور المتحرك 0.6 مل / دقيقة وحجم الحقن 10 ميكرولتر. تمت مراقبة eluent بواسطة مطياف الكتلة الأيونية (ESI-MS) تحت وضع الأيونات السالبة وتم مسحها ضوئيًا من m / z 20 إلى 1000 Da. لتحليل القياس الكمي ، كان كاشف MS رباعي الأضلاع يعمل في وضع مسح مراقبة التفاعل المتعدد (MRM). تم تحديد الظروف المثلى لمحلل الكتلة واختيار أيونات المنتج للمركبات الفردية بشكل تجريبي. لهذا الغرض ، تم تقديم الحلول القياسية للمركبات التي تم فحصها (1 نانوغرام / مل) في تركيبة الطور المتحرك باستخدام مضخة التسريب التي تعمل في توصيل عينات ثابت. بعد التأكد من اختيار أيون السلائف الصحيح ، تم تحسين إمكانات إزالة التقسيم (DP) ، وإمكانية الدخول (EP) ، وإمكانية خروج خلية التصادم (CXP) ، وطاقة الاصطدام (CE) لكل انتقال MRM (الجدول S1). تم رصد تحوليين من MRM ، أحدهما للتقدير الكمي والآخر للتأكيد. تم تعيين معلمات MS على النحو التالي: درجة حرارة الشعيرات الدموية عند 600 درجة مئوية ، وغاز الستارة عند 35 رطل لكل بوصة مربعة ، وغاز البخاخات عند 60 رطل / بوصة مربعة ، وغاز التجفيف عند 50 رطل / بوصة مربعة. تم تطبيق جهد مصدر وضع التأين السالب -4500 V لتقدير المركبات النشطة بيولوجيًا. تم استخدام النيتروجين كستائر وغاز تصادم. تمت معالجة تحليل البيانات باستخدام برنامج Analyst 1.5.1. تم تحديد المركبات المختارة عن طريق الكتلة الجزيئية وجزء من مدخلات الأنيون لكل مركب فردي وتم تأكيده بواسطة تجزئة MS2. تم تحديد هويات تسعة مركبات جنبًا إلى جنب مع صيغتها الكيميائية ، والأيونات الجزيئية المنحلة ، وأيونات الشظايا المميزة لكل قمة فردية. تم تحديد كمية ستة مركبات بناءً على منحنى المعايرة الذي تم إنشاؤه باستخدام مناطق الذروة لأشد انتقالات MRM للمعايير التحليلية. تم توضيح الخطية لاستجابة الكاشف للمركبات الكمية عن طريق حقن معايير المعايرة عند ثمانية مستويات تركيز تتراوح من 0.01 ميكروغرام / مل إلى 2 ميكروغرام / مل. كانت منحنيات المعايرة خطية مع معاملات الارتباط (R) أكبر من 0.99. في حالة عدم وقوع العينات في النطاق الخطي لكاشف CMS ، تم تخفيف العينات.

تم شراء المعايير التحليلية لحمض الكينيك ، وحمض الغال ، وحمض الكافيين ، وأحماض الكافيين (CQA ، أيزومرين: 3- و 5- CQA) ، وكيرسيتين من Sigma-Aldrich ، سانت لويس ، ميزوري ، الولايات المتحدة الأمريكية ). كانت جميع المعايير المستخدمة من الدرجة التحليلية (2 أعلى من أو يساوي 99 في المائة من النقاوة).

تم تحضير محاليل المخزون القياسية عن طريق الوزن الدقيق وإذابة 2 0 مجم من كل معيار في 1 0 مل من الميثانول من الدرجة LC-MS لإعطاء تركيز 2 مجم / مل. التخفيفات التسلسلية 2. {{1 {12}}} ميكروغرام / مل ، 1.5 ميكروغرام / مل ، 1. 0 ميكروغرام / مل ، 0. 5 ميكروغرام / مل ، 0 تم بعد ذلك تصنيع .1 ميكروغرام / مل ، 0. 05 ميكروغرام / مل ، 0.02 ميكروغرام / مل ، و 0.01 ميكروغرام / مل باستخدام محلول ميثانول من الدرجة LC-MS. تم تحديد حد الكميات (LOQ) على أنه 0.01 ميكروغرام / مل.

تم إجراء فحص LC-MS / MS في ثلاث نسخ. تم تقديم البيانات التي تم الحصول عليها كوسيلة ± الانحرافات المعيارية.

3.3 تحديد خصائص مضادات الأكسدة

3.3.1.ABTS · بالإضافة إلى فحص الكسح

أولاً ، تم تحضير محلول ABTS بخلط 19.5 مجم ABTS و 3.3 مجم من بيرسلفات البوتاسيوم مع محلول فوسفات 7 مل (الرقم الهيدروجيني =7 .4) وتم إذابته لمدة 16 ساعة في الظلام. بعد ذلك ، تم تخفيف المحلول إلى الامتصاص عند مستوى حوالي 1. 0. تم قياس الامتصاصية عند الطول الموجي 入 =734 نانومتر. بعد ذلك ، تم خلط 20 مل من مستخلصات KTE و PGE و PRE و CTE و GGE (10،100،250،500 ميكروغرام / مل) مع 980 مل من محلول ABTSe ​​plus المخفف ثم حضنت لمدة 10 دقائق في الظلام. في الخطوة التالية ، تم قياس امتصاص العينات المحضرة عند 入 =734 نانومتر باستخدام مقياس الطيف الضوئي للأشعة المرئية / فوق البنفسجية Aquamate Helion (Thermo Fisher Scientific ، Waltham ، MA ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم استخدام الماء المقطر كفراغ. تم حساب الكسح ABTS plus من المعادلة (1):

حيث: كامتصاص للعينة ؛ AC - امتصاص العينة الضابطة. تم إجراء القياسات في ثلاث نسخ لكل عينة مستخرجة. تم وصف الإجراء بواسطة Gawel-Beben et al. [83].

3.3.2.DPPH مقايسة الكسح الجذري

تم تنفيذ قدرة المقتطفات على البحث عن الجذور الحرة باستخدام الطريقة التي وصفها Brand-Williams et al. [84]. يعتمد على استخدام 1 ، 1- diphenyl -2- picrylhydrazyl （DPPH root. أولاً ، تم خلط 33 ميكرولتر من المحاليل المائية للمستخلصات بتركيزات 100 ميكروغرام / مل مع 167 ميكرولتر من محلول الميثانول من DPPH 4 ملي مولار وتم نقلها إلى 96- صفيحة بئر ، ثم خلطها بالرج. بعد ذلك ، تم قياس امتصاص العينات بطول موجي قدره 517 نانومتر. تم إجراء القياسات كل 5 دقائق لمدة 30 دقيقة على مقياس الطيف الضوئي UV-VIS Max =5 Thermo Fisher Scientific ، Waltham ، MA ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم إجراء ثلاث مكررات مستقلة لكل مستخلص. تم استخدام الماء مع محلول DPPH كعنصر تحكم. تم التعبير عن قدرة مضادات الأكسدة كنسبة مئوية من تثبيط DPPH باستخدام المعادلة (2):

حيث: كامتصاص للعينة ؛ AC - امتصاص العينة الضابطة. تم إجراء القياسات في ثلاث نسخ لكل عينة مستخرجة.

3.3.3 الكشف عن المستويات داخل الخلايا لأنواع الأكسجين التفاعلية (ROS)

لتحديد قدرة المستخلصات التي تم تحليلها على توليد الإنتاج داخل الخلايا لأنواع الأكسجين التفاعلية في خلايا HaCaT و BJ ، تم استخدام صبغة H ، DCFDA الفلورية. هذا المركب لديه القدرة على دخول الخلايا عن طريق الانتشار السلبي ، حيث يتم نزع الأسيتيل بواسطة إسترات داخل الخلايا إلى مركب غير فلوري. في حالة وجود أنواع الأكسجين التفاعلية في الخلية ، يتحول هذا المركب إلى DCF عالي الفلورسنت. لتحديد المستوى داخل الخلايا لـ ROS في HaCaTs و BJ ، تم زرع الخلايا في 96- أطباق جيدة. بعد ذلك ، تمت زراعة الخلايا في حاضنة لمدة 24 ساعة. تمت إزالة وسيط DMEM واستبداله بـ 10 ميكرومتر H2DCFDA - Sigma Aldrich ، سانت لويس ، MO ، الولايات المتحدة الأمريكية） مذاب في وسط DMEM خالٍ من المصل. تم تحضين خلايا HaCaT و BJ في H و DCFDA لمدة 45 دقيقة ثم تم تحضينها بالمستخلصات بتركيزات 100 و 250 و 500 ميكروغرام / مل. تم استخدام الخلايا المعالجة بـ 1 ملي مولار من بيروكسيد الهيدروجين (H2O2) كعناصر تحكم إيجابية. عينات التحكم كانت عبارة عن خلايا غير معالجة بالمستخلصات المختبرة. تم قياس مضان DCF كل 90 دقيقة باستخدام قارئ الصفيحة الدقيقة FilterMax F5 (Thermo Fisher Scientific) بحد أقصى إثارة 485 نانومتر وأطياف انبعاث قدرها 530 نانومتر [85].

3.4. تقييم تثبيط المصفوفة Metallopeptidases

3.4.1 تحديد نشاط مضاد للإيلاستاز

لتحديد إمكانية تثبيط بروتين ميتالوبروتيناز المصفوفة ، تم تطبيق العدلة الإيلاستاز (NE) ، مجموعة قياس الفلور (Abcam ، ab118971). تم إجراء الاختبار وفقًا للتعليمات المرفقة بالمجموعة وللإجراء الموصوف بواسطة Niziol-Lukaszewska et al. [86]. تم إجراء التحليلات في 96- صفيحة بئر قياسية ذات قاع مسطح واضح. للتحليل تم استخدام مستخلصات نباتية بتركيز 100 و 250 ميكروغرام / مل. في البداية ، تم تحضير محاليل إنزيم NE ، وركيزة NE ، ومانع تحكم (SPCK) وفقًا للتعليمات. تمت إضافة محلول NE المخفف إلى جميع الآبار ثم تمت إضافة عينات الاختبار والتحكم في المانع والتحكم في الإنزيم (Assay Buffer) إلى الآبار اللاحقة. بعد ذلك ، تم خلط العينات واحتضانها عند 37 درجة لمدة 5 دقائق. في غضون ذلك ، تم تحضير خليط التفاعل عن طريق خلط محلول الفحص وركيزة NE. يضاف الخليط إلى كل بئر ويخلط جيدًا. تم قياس الإسفار على الفور عند الطول الموجي للإثارة 入 =400 نانومتر والانبعاث 入 =505 نانومتر باستخدام قارئ الصفيحة الدقيقة (FilterMax F5 ، Thermo Fisher Scientific ، Waltham ، MA ، الولايات المتحدة الأمريكية) القدرة على تثبيط نشاط NE للمحلل تم حساب العينات من المعادلة (3):

كانت النتيجة النهائية هي المتوسط ​​الحسابي لثلاثة قياسات مستقلة.

3.4.2. تحديد نشاط مضاد الكولاجيناز

لتقييم قدرة المستخلصات التي تم الحصول عليها على تثبيط نشاط الكولاجيناز ، تم استخدام مجموعة فلورو متري (Abcam ، كامبريدج ، المملكة المتحدة ، ab211108). تم إجراء الاختبار وفقًا للتعليمات المرفقة بالمجموعة وللإجراء الموصوف بواسطة Niziol-Lukaszewska et al. [86]. تم إجراء التحليلات في 96- صفيحة بئر قياسية ذات قاع مسطح واضح. للتحليل تم استخدام مستخلصات نباتية بتركيز 100 و 250 ميكروغرام / مل. أولاً ، تم إذابة كولاجيناز （COL في محلول مؤقت لتحليل الكولاجين (CAB). بعد ذلك ، تمت إضافة العينات التي تم تحليلها إلى COL و CAB. تم تحضير عينات التحكم عن طريق خلط مثبط الكولاجيناز (1 ، 10- الفينانثرولين (80 ملي مولار) مع محلول كولاجيناز و CAB. تم تحضير آبار التحكم في الإنزيم عن طريق خلط COL المخفف مع CAB. تم استخدام محلول CAB كعنصر تحكم في الخلفية. ثم تم تحضين العينات عند درجة حرارة الغرفة لمدة 15 دقيقة ، وتم تحضير خليط التفاعل بخلط ركيزة الكولاجيناز مع CAB ، وأضيف خليط التفاعل المحضر بهذه الطريقة لجميع العينات التي تم تحليلها وخلط جيداً. طول موجة الإثارة 490 نانومتر وانبعاث 520 نانومتر.أجري القياس في الوضع الحركي لمدة 60 دقيقة عند 37 درجة مئوية. تم حساب القدرة على تثبيط نشاط COL للمستخلصات التي تم الحصول عليها بواسطة المعادلة (4):

3.5 تحديد الخصائص المضادة للالتهابات

3.5.1. تثبيط تمسخ البروتين

تم إجراء النشاط المثبط للبروتين في مستخلصات PRE و PGE و KTE و CTE و GGE وفقًا لطريقة Sakat et al. [87] ، والتي تم تعديلها بواسطة Gunathilake et al. [88]. باختصار ، يتكون محلول التفاعل (2 مل) من 1 مل من 1 في المائة من التربسين في 2 {{1 0} ملي مولار من محلول Tris-HCl (pH7.4) و 1 مل من عينة الاختبار ({{17} } .02 مل مستخلص 0.980 مل ماء). تم تحضين المحلول (37 درجة لمدة 5 دقائق) ، ثم تمت إضافة 1 مل من 0.8 بالمائة (وزن / حجم) كازين وتم تحضين الخليط مرة أخرى لمدة 20 دقيقة. في نهاية الحضانة ، تمت إضافة 2 مل من حمض البيركلوريك بنسبة 70 بالمائة لإكمال التفاعل. تم الطرد المركزي للخليط ، وتم قياس امتصاص المادة الطافية عند 210 نانومتر مقابل المخزن المؤقت على شكل فراغ. تم استخدام محلول عازلة الفوسفات كعنصر تحكم. تم حساب النسبة المئوية لتثبيط تمسخ البروتين باستخدام الصيغة التالية:

حيث يتم 1= امتصاص عينة التحكم و 2= امتصاص عينة الاختبار.

3.5.2. تثبيط نشاط Lipoxygenase

تم تحديد قدرة المستخلصات التي تم الحصول عليها على تثبيط نشاط إنزيم الدهون باستخدام الطريقة التي وصفها Sarvesvaran et al. 89. أولاً ، تم خلط 10 ميكرولتر من المستخلصات النباتية بتركيزات مختلفة 100 و 250 و 500 ميكروغرام / مل في 96- صفيحة جيدة مع 160 ميكرولتر من 100 ملي PBS و 20 ميكرولتر من محلول فول الصويا ليبوكسيجيناز （167 وحدة / مل）. تم تحضين العينات عند 25 درجة لمدة 10 دقائق وبعد هذا الوقت تمت إضافة 10 ميكرولتر من حمض لينوليك الصوديوم لبدء التفاعل. بعد ذلك ، تم قياس امتصاص العينات عند 234 نانومتر على مدى 3 دقائق في كل دقيقة باستخدام قارئ الصفيحة المصغرة FilterMax F5 (Thermo Fisher Scientific ، Waltham ، MA ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم استخدام ديكلوفيناك كعنصر تحكم إيجابي. تم حساب النسبة المئوية لتثبيط نشاط ليبوكسيجيناز من المعادلة (6):

حيث: كما هو الحال بالنسبة لامتصاص العينة المختبرة ، فإن التيار المتردد هو امتصاص التحكم السلبي.

كانت النتيجة النهائية هي المتوسط ​​الحسابي لثلاثة قياسات مستقلة.

3.6 تحليل السمية الخلوية

3.6.1. زراعة الخلايا

في هذه الدراسة ، تم استخدام سطرين من خلايا الجلد: الخلايا الكيراتينية البشرية الطبيعية (HaCaT) والخلايا الليفية (BJ). تم الحصول على HaCaTs من CLSCell Lines Service (CLS Cell Lines Service GmbH ، Eppelheim ، ألمانيا) و BJs من American Type Culture Collection ( ماناساس ، فيرجينيا ، الولايات المتحدة الأمريكية). نمت الخلايا في Dulbecco's Modification of Eagle's Medium (DMEM ، Biological Industries ، Cromwell ، CO ، USA) مع بيروفات الصوديوم ، L- الجلوتامين ، ومحتوى عالي من الجلوكوز (4.5 جم / لتر). تم إثراء الوسط أيضًا بمصل بقري جنيني بنسبة 10 بالمائة (Gibco ، Waltham ، MA ، الولايات المتحدة الأمريكية) و 1 بالمائة بالمضادات الحيوية (100 وحدة / مل بنسلين و 1000 ميكروغرام / مل ستربتومايسين ، جيبكو) لمنع التلوث الجرثومي. نمت الخلايا في حاضنة عند 37 درجة في جو رطب بنسبة 95 في المائة من الهواء و 5 في المائة من ثاني أكسيد الكربون.

3.6.2.Alamar Blue Assay

بعد أن وصلت الخلايا المستنبتة (HaCaT و BJ) إلى التقاء المطلوب ، تم استنشاق وسط DMEM في قوارير الثقافة. تم غسل الخلايا الملحقة بالقاع مرتين بمحلول ملحي معقم بالفوسفات. تم فصل طبقة الخلية مع التربسين ثم تم وضع الخلايا في وسط DMEM جديد. تم طلاء الخلايا 96- بألواح مسطحة القاع جيدًا (VWR ، Radnor ، PE ، الولايات المتحدة الأمريكية) وبعد ربطها بأسفل الألواح ، تمت معالجة الخلايا بمستخلصات （100 و 250 و 500 ميكروغرام / مل. تم تحضين الخلايا لمدة 24 ساعة.

تم إجراء اختبار السمية الخلوية باستخدام اختبار Alamar Blue (Sigma ، R7017 ، Life Technologies ، Bleiswijk ، هولندا). بعد الحضانة ، تمت إضافة محلول ريسازورين بتركيز 60 ميكرومتر إلى الآبار ، ثم تم وضع الألواح في حاضنة عند 37 درجة لمدة ساعتين. بعد هذا الوقت ، تم قياس التألق （入 =570 نانومتر）. تم إجراء كل تركيز مستخلص على ثلاث مكررات.

3.6.3. مقايسة الامتصاص الأحمر المحايد

اختبار الامتصاص الأحمر المحايد هو الاختبار الثاني المستخدم لتحديد السمية الخلوية لـ PRE و PGE و KTE و CTE و GGE. أولاً ، تم تحضير 96- لوحات مسطحة القاع كما هو موضح في القسم السابق. بعد 24 ساعة من تعرض الخلايا للمستخلصات ، تم استنشاقها واستبدالها بصبغة حمراء محايدة (40 ميكروغرام / مل) وحضنت لمدة ساعتين. بعد هذا الوقت ، تم غسل الخلايا بمحلول ملحي مخزّن من الفوسفات. في الخطوة التالية ، تمت إضافة المخزن المؤقت لإزالة اللون （150 ميكرولتر） إلى الآبار. بعد ذلك ، تم تحديد امتصاص dve الأحمر المحايد عن طريق قياس الكثافة البصرية (OD) عند 540 نانومتر. تم إجراء كل تركيز مستخلص على ثلاث مكررات.

3.7 تحديد عامل الحماية من الشمس (في المختبر)

تم تحديد عامل الحماية من الشمس (SPF) عن طريق قياس امتصاص محلول مائي للمستخلصات بتركيزات 10 ميكروغرام / مل و 50 ميكروغرام / مل ، ضمن نطاق الطول الموجي من 290 إلى 320 نانومتر على فترات 5- نانومتر. من النتائج التي تم الحصول عليها ، تم حساب عامل الحماية من الشمس من معادلة المنصور [90]: حيث EE λ） - طيف التأثير الكلي ، I （入） - طيف شدة الشمس ، ABS （入） - امتصاص منتج واقي الشمس ، CF - عامل التصحيح （=10） ، E （N） × I （λ） - تم استخدام القيم التي حددها ساير [91].

3.8 قياسات فقدان الماء عبر الجلد (TEWL) وترطيب الجلد

تم إجراء قياسات TEWL وترطيب الجلد باستخدام مسبار TEWAmeter TM 3 0 0 ومسبار Corneometer CM 825 المتصل بمحول MPA (Courage plus Khazaka Electronic ، Köln ، Germany）. شارك خمسة متطوعين في الدراسة. على ساعدهم تم وضع علامة على الجلد بستة مناطق (حجم 2 × 2 سم) وتم وضع كمية 0.2 مل من المستخلصات النباتية المختبرة في خمسة أماكن والمركز السادس كان تحت السيطرة (لم يتم التعامل مع أي عينات) بعد 60 و 360 دقيقة. تم أخذ مستوى الماء وقياسات TEWL وكانت النتيجة النهائية هي المتوسط ​​الحسابي (من كل متطوع) لخمسة قياسات مستقلة (ترطيب الجلد) و 20 قياس (TEWL).

3-9 تحضير نموذج مستحضرات التجميل (مزيل مكياج) يحتوي على مستخلصات

تم تحضير نموذج مستحضرات التجميل (مزيل المكياج). كانت جميع المكونات المستخدمة متوافقة مع متطلبات EcoCert و COSMOS. تظهر الصيغة في الجدول 7.

تم إنتاج المنتج بخلط المكونات (من البند 1 إلى البند 6) عند درجة حرارة الغرفة حتى يتم الحصول على سائل متجانس. في الخطوة الأخيرة ، تم تعديل الرقم الهيدروجيني للصيغة. تم تقسيم مزيل المكياج إلى أجزاء. تمت إضافة كمية 1 في المائة من المحاليل المخزنة للمستخلص إلى كل جزء وخلطها جيدًا.

3.10 تحديد معاملات لون المستخلصات ومستحضرات التجميل (مزيلات المكياج) التي تحتوي على مستخلصات

تم اختبار عينات من المستخلصات ومستحضرات التجميل مع المستخلصات عند درجة حرارة الغرفة بعد 48 ساعة من تحضيرها. تم استخدام CHROMA METER CR -400 (Konica Minolta ، Sensing Inc. ، طوكيو ، اليابان) لتقييم معلمات اللون (إحداثيات CIELAB). تم تعريف نظام CIELAB من قبل اللجنة الدولية للإضاءة في عام 1978. وهو يعتمد على ثلاث سمات لونية: L * ، a * ، b ، حيث L * متغير سطوع يتناسب مع القيمة في نظام Munsell ، و * و ب * إحداثيات لونية. يشير الإحداثيان a * و b * إلى المواضع على المحاور الأحمر / الأخضر والأصفر / الأزرق ، على التوالي (بالإضافة إلى=أحمر ، -أ ​​= أخضر ؛ بالإضافة إلى ب=أصفر ، - ب=أزرق).

بناءً على البيانات التي تم الحصول عليها: L * و a * و b * ، تم حساب معلمات اللون التالية: اللون (C *) و hue (h). تم استخدام المعادلات التالية:

4 - نتائج

بناءً على النتائج التي تم الحصول عليها ، يمكن الاستنتاج أن المستخلصات النباتية التي تم اختبارها تظهر العديد من الخصائص الإيجابية ، والتي بفضلها يمكن استخدامها في إنتاج مستحضرات التجميل كعنصر آمن ونشط بيولوجيًا. لقد ثبت أن هذه النباتات هي مصدر غني للبوليفينول ، مما يمنحها خصائص مضادة للأكسدة. أظهر PRE أفضل قدرة على البحث عن الجذور الحرة ، وربما يرجع ذلك إلى احتوائه على معظم مادة البوليفينول مقارنة بالنباتات الأخرى. أظهر PGE و PRE أفضل قدرة على تقليل إنتاج ROS في الخلايا. علاوة على ذلك ، لا تظهر النباتات أي نشاط سام للخلايا. أظهرت جميع المستخلصات المختبرة تأثيرًا مثبطًا على إنزيمات الإيلاستاز والكولاجيناز ، حيث كان لـ P. granatum و GGE أكبر تأثير مثبط. قد يشير هذا إلى أنه يمكن استخدام هذه النباتات في مستحضرات التجميل كمواد تعمل على إبطاء عمليات الشيخوخة. علاوة على ذلك ، تشير النتائج التي تم الحصول عليها إلى أن هذه النباتات لها خصائص مضادة للالتهابات. في هذه الحالة ، يبدو أن CTE و KTE هما الأفضل. أظهر KTE و PGE تأثيرًا وقائيًا ضد الأشعة فوق البنفسجية ، حتى عند التركيزات المنخفضة. في التركيزات الأعلى ، كان لجميع النباتات تأثير وقائي من الأشعة فوق البنفسجية. علاوة على ذلك ، كان للنباتات تأثير إيجابي على ترطيب الجلد وتقليل فقد الماء عبر الجلد. يمكن استخدام مستخلصات PRE و KTE و CTE كملونات فعالة في منتجات مستحضرات التجميل. السائل النموذجي لإزالة المكياج المحتوي على المستخلصات المذكورة أعلاه يتميز بلون كثيف وثابت مع مرور الوقت. لا يمكن ملاحظة لون مستحضرات التجميل التي تحتوي على مستخلصات PGE و GGE إلا من قبل المراقبين ذوي الخبرة ، وهي لا تختلف بشكل كبير عن عينة مستحضرات التجميل الفارغة ، دون إضافة المستخلص. بالنظر إلى جميع النتائج التي تم الحصول عليها ، يمكن استنتاج أن Papaver rhoeas و Clitoria ternatea و Carthamus tinctorius يمكن استخدامها بنجاح كمصادر للأصباغ الصفراء والبرتقالية والأزرق والأرجواني في إنتاج مستحضرات التجميل التي ستكون آمنة للاستخدام ، و ، علاوة على ذلك ، سيكون له تأثير إيجابي على الجلد.

تم استخراج هذه المقالة من جزيئات 2022 ، 27 ، 922. https://doi.org/10.3390/molecules27030922 https://www.mdpi.com/journal/molecules