الاستجابة الوظيفية لخلايا الذاكرة التائية من مرضى COVID -19

لمزيد من المعلومات: ali.ma@wecistanche.com

Ece Tavukcuoglua ،، Utku Horzum1 a ،، Ahmet Cagkan Inkaya1، Serhat Unal، bb Gunes Esendaglia، *

قسم علم الأورام الأساسي ، معهد السرطان بجامعة حجيتيب ، أنقرة ، تركيا

ب قسم الأمراض المعدية ، كلية الطب ، جامعة حجة تبه ، أنقرة ، تركيا

الكلمات الدالة: SARS-CoV -2 وسطذاكرةالخلايا التائية ، المستجيبذاكرةالخلايا التائية سبايك S1 بروتين سكري الخلايا الجذعية الخلايا التائية المساعدة الخلايا اللمفاوية التائية السامة للخلايا

نبذة مختصرة: حضور الذاكرةتم التعرف على الخلايا التائية في مرضى COVID -19 ، ولكن الفاعلية الوظيفية لـذاكرةالاستجابات أمر بالغ الأهمية للحماية. في هذه الدراسة ، السذاجة ، المستجيب ، ذاكرة المستجيب ، والمركزيةذاكرةتم إعادة تعريض خلايا CD4 plus و CD8 plus T التي تم الحصول عليها من الناجين من COVID -19 لمراكز DC مشتقة من الخلايا الأحادية والتي تم تحميلها بـ SARS-CoV -2 ارتفاع البروتين السكري S1. سعة الانتشار CD25 و 4-1 BB و PD -1

التعبير ، وإفراز IFN- و IL -6 و granzyme و granulysin و FasL في المستجيب CD4 plus و CD8 plusذاكرةووسطىذاكرةالخلايا التائية. على الرغم من كونها على مستويات غير متجانسة ، فإنذاكرةتمتلك الخلايا التائية من الأفراد المصابين بتاريخ COVID -19 قدرات وظيفية لتنشيط المناعة المضادة للفيروسات ضد SARS-CoV -2.

انقر لCistanche deserticola ma لتحسين الذاكرة

1 المقدمة

على الرغم من البيانات الناشئة عن مرض فيروس كورونا 2019 (COVID -19) ، لا يزال يتعين تحديد الاستجابة المناعية لمتلازمة الجهاز التنفسي الحادة الوخيمة فيروس كورونا 2 (SARS-CoV -2) بشكل أفضل. ارتبطت قوة ومدة الاستجابات الخلطية والخلوية ضد فيروس السارس {6}} بتحييد الأجسام المضادة وذاكرةالخلايا التائية [1،2]. على وجه الخصوص ، يحمل البروتين السكري المرتفع S1 مناعة كبيرة لأن الأجسام المضادة المعادلة تمنع ارتباطها بالإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2 (ACE2) وتعيق دخول الفيروس [3]. بالإضافة إلى ذلك ، أظهر ما يقرب من 50 بالمائة من المرضى استجابات الخلايا التائية المحددة S 1- [4،5].

ومع ذلك ، فإن عدم التجانس الذي لوحظ بين حالات COVID -19 له تأثير مربك. في حين أن غالبية المرضى يطورون مناعة مضادة للفيروسات ، إلا أنه حتى الأشخاص الناهضين قد لا يكونون محميين من إعادة العدوى والتي من المحتمل أن تكون بسبب عدم كفاية حجم و / أو استقرار إنتاج الخلايا التائية والأجسام المضادة [6-8]. من المثير للاهتمام ، في حالات عدوى فيروس السارس -2 الشديدة ، أن التفاعل بين خلايا CD4 بالإضافة إلى الخلايا التائية المساعدة (Th) والخلايا البائية يكون ضعيفًا في المركز الجرثومي ، مما يؤدي إلى إضعاف استمرارية استجابات الجسم المضاد [9]. جنبًا إلى جنب مع الأنشطة Th ، فإن متانة CD8 بالإضافة إلى الخلايا التائية السامة للخلايا تعد أيضًا أمرًا محوريًا لنجاح المناعة المضادة للفيروسات [10]. سابقا ، وجود CD4 plus أو CD8 plusذاكرةتم الإبلاغ عن الخلايا التائية في COVID -19 ، ومع ذلك ، يجب معالجة القدرات الوظيفية لهذه الخلايا بدقة [11-13]. في هذه الدراسة ، الاستجابة الوظيفية للسذاجة ، المستجيب ، المركزيذاكرة، وذاكرة المستجيب CD4 plus أو CD8 بالإضافة إلى الخلايا التائية ، والتي تم الحصول عليها من المرضى الذين لديهم تاريخ COVID -19 ، ضد الخلايا التغصنية المشتقة من الخلايا الوحيدة (DC) والتي تحمل مستضد SARS- CoV -2 S1.

2. المواد والأساليب

2.1. المرضى وجمع العينات

في نقطتين زمنيتين مختلفتين ، تم جمع عينات الدم المحيطي حديثًا من المرضى الذين تم شفاؤهم من COVID -19 (الجدول 1) وتم فصل الخلايا أحادية النواة في الدم المحيطي بمقدار 1.077 جم / مل من تدرج كثافة Ficoll (Sigma-Aldrich). تمت الموافقة على جميع البروتوكولات من قبل اللجان الأخلاقية المحلية ووزارة الصحة في جمهورية تركيا. تم الحصول على موافقة مستنيرة من المرضى. تم تسجيل المرضى الذين لديهم اختبار RT-PCR إيجابي و / أو إيجابية مصلية في الدراسة. تم تصنيف الأعراض السريرية على أنها خفيفة (المرضى الذين لم يتم إدخالهم إلى المستشفى) ، ومتوسطة (المرضى الذين يعانون من التهاب رئوي متوسط) ، وشديدة (المرضى الذين يعانون من التهاب رئوي حاد وتم نقلهم إلى المستشفى لأكثر من 5 أيام). تم استخدام عينات دم من متبرعين أصحاء [n=10 (6 إناث ، 4 ذكور) ، متوسط ​​العمر 33 (بحد أدنى 28 إلى 55 كحد أقصى)] بدون سجل SARS-CoV -2 والإيجابية المصلية كعناصر تحكم.

2.2. إنشاء مزارع الخلايا DC و T الخلايا المشتقة من الوحيدات

تم إنشاء DC من الخلايا الوحيدة (CD14 MACS ، Miltenyi) وفقًا لبروتوكول منشور مسبقًا [14]. تحميل مستضد مع بروتين S1 المؤتلف (S1 ؛ 10 ميكروغرام / مل ، Abcam) أو مستضد HIV Gag (10 ميكروغرام / مل ، مركز أبحاث TUBITAK مرمرة) [15] أو ذوفان الكزاز (TT ؛ 10 ميكروغرام / مل ، ترك إيلاك ) في وقت واحد مع نضوج DCs المشتقة من الوحيدات مع LPS (1 ميكروغرام / مل ، سيجما- Aldrich). الناضجة المشتقة وحيدات DCs التي تم إنشاؤها في حالة عدم وجود

تم استخدام مستضد معين كعناصر تحكم. في نهاية 7- فترة الحضانة التي استمرت يومًا كاملاً ، تم تمييز DC المشتق من خلية واحدة على أنها CD11bhiCD14loCD1a بالإضافة إلى CD83 بالإضافة إلى عدد السكان.

من نفس COVID -19 مريض ، ساذج ذاتي T (TN) ، مستجيب متمايز نهائيًا T (TEMRA) ، مركزيذاكرةT (TCM) ، والمستجيبذاكرةتمت تنقية الخلايا T (TEM) (أكبر من أو تساوي 96 في المائة) بواسطة FACS (FACSAria II ؛ Becton Dickinson) كخلايا لمفاوية سالبة CD 3- ولم تمسها 19- و CD 56- وفقًا للتعبير التفاضلي لعلامات CD45RA و CD45RO و CCR7 (الشكل 1 أ).

تمت تربية وحدات DC المشتقة من الخلايا الأحادية (5 × 104) مع الأنواع الفرعية المنقاة من الخلايا التائية (10) 5 لمدة 96 ساعة في لوحة بئر مستديرة القاع 96- تحتوي على 200 ميكرولتر من وسائط RPMI 1640 مكتملة بنسبة 10 بالمائة FBS ، 1 في المائة بنسلين / ستربتومايسين (الصناعات البيولوجية) ، 5 نانوغرام / مل إيل -2 (بيو-

عنوان تفسيري). قبل الاستزراع المشترك ، تم تصنيف الأنواع الفرعية من الخلايا التائية بـ 5 ميكرومتر CFSE (BioLegend). كعنصر تحكم إيجابي ، تمت إضافة جسم مضاد لـ CD3 (HIT3a ، 25 نانوغرام / مل ؛ BioLegend) إلى الثقافات المشتركة. تم تلخيص الإعداد التجريبي في الشكل 1 أ.

2.3 التنميط المناعي والمقايسات ذات الصلة بالوظيفة عن طريق قياس التدفق الخلوي

تم إجراء التنميط المناعي باستخدام الأجسام المضادة أحادية النسيلة المضادة للإنسان CD4 (OKT4) ، -CD8 (RPA-T8) ، -CD56 (MEM -188) ، -CD19 (SJ25C1) ، -CD45RA (HI100) ، -CD45RO (UCHL1) ) ، -CCR7 (G043H7) ، -CD25 (M-A251) ، -CD38 (HIT2) ، -4-1 BB (4B 4-1) ، -PD -1 (NAT105) ، -CD14 (M5E2) ، -CD11b (ICRF44) (أسطورة بيولوجية) ؛ -CD1a (REA736) ، -CD83 (REA714) (Miltenyi). تم تحديد قيم شدة التألق المتوسطة (MFI) على خلايا CD4 plus و CD8 plus T ، ووفقًا لتخفيف CFSE.

تم حساب التغيير في MFI من خلال مقارنة البيانات من الثقافات المشتركة مع DC المحملة بمولد الضد و DCs الضابطة.

تم تقييم النسبة المئوية للخلايا التائية مع تخفيف CFSE للتكاثر. تم حساب قدرة الانتشار الخاصة بالمستضد للخلايا التائية على أنها التغيير في التكاثر حيث تم استخدام البيانات من المزارع ذات التحكم في وحدات تحكم المجال المستمدة من الخلايا الوحيدة كعناصر تطبيع. تم استخدام المواد الطافية التي تم جمعها في ELISA متعدد الإرسال (LEGEND- plex ، BioLegend). تم إجراء جميع تحليلات التدفق الخلوي على فارز FACSAria II.

2.4 تحليل احصائي

يتم تقديم النتائج على أنها وسيط ± SEM. تم استخدام اختبار Kruskal-Wallis وتصحيح Bonferroni للتحليلات الإحصائية. قيمة AP<0.05 was="" considered="" statistically="">

3. النتائج

بعد الحضانة مع S {0} DC ، تم تحديد نسبة صغيرة من تكاثر الخلايا التائية (النطاق ، CD4 plus ، TN {{1 0}}. 49–6.8 ، TEMRA 3.29–7.7، TCM 0. 38–2 0. 2، TEM 0.2–16.7؛ Range٪، CD8 plus، TN 0.64–5.6، TEMRA 2.16– 10.3، TCM0.8–15، TEM 1.6 - 19.4). أظهر كل من خلايا CD4 plus و CD8 plus TCM و TEM تواترًا متزايدًا للتكاثر بشكل كبير من مجموعات الخلايا التائية الساذجة أو المستجيبة (الشكل 1 ب). أظهرت خلايا CD4 plus TCM و CD8 plus TEM أعلى نشاط تكاثر. قرص CD4 plusذاكرةيمكن أن يحدث تكاثر الخلايا التائية في حوالي 90 بالمائة من مرضى COVID -19 ، ومع ذلك ، فإن CD8 plusذاكرةتم إثبات تكاثر الخلايا التائية فقط في حوالي 60 بالمائة من المرضى (الشكل 1 ب). تم أيضًا تحميل DCs المشتقة من الخلايا الأحادية مع مستضد فيروسي غير ذي صلة ، HIV Gag ؛ بشكل متوقع ، لم يتم الحصول على استجابة مهمة في الخلايا التائية من الناجين من COVID -19 (الشكل 1 ج). وبالمثل ، فإن الخلايا التائية من الأفراد الأصحاء لم تستجب لـ S 1- DC. من ناحية أخرى ، كان التيار المستمر المشتق من الخلية الوحيدة الذي يقدم مستضد TT بمثابة عنصر تحكم إيجابي للخلية التائيةذاكرةالردود (الشكل 1C). بالإضافة إلى ذلك ، تم تنظيم التعبير السطحي لبعض العلامات المتعلقة بالتنشيط ، خاصة CD25 و PD -1 و 4-1 BB ، بشكل كبير على الخلايا التائية المستجيبة S 1- (الشكل 1 د). تفرز الخلايا TEM المحفزة بالتيار المستمر 1- أعلى مستويات IFN- و IL -6 ، والتي يتم إنتاجها بشكل كبير عن طريق النوع 1 CD4 بالإضافة إلى الخلايا التائية و CD8 بالإضافة إلى الخلايا التائية السامة للخلايا. تم أيضًا رفع علامات الاستجابة السامة للخلايا ، جرانزيم A ، جرانولايسين ، يجند فاس (FasL) ، وخاصة الجرانزيم ب في الثقافات المشتركة التي تؤوي خلايا TEM من مرضى COVID -19 (الشكل 1E). احتوت المواد الطافية للثقافة المشتركة التي تم قياس العوامل القابلة للذوبان منها على الوسطاء الذي تفرزه الخلايا التائية والـ DC. وبالتالي ، كما هو مذكور في الأدبيات ، يمكن أيضًا إنتاج كميات معتدلة من السيتوكينات مثل TNF- و IL -6 و IL -4 و IFN- بواسطة DC [16،17]. في بعض الحالات ، استجابت الخلايا التائية غير الذاكرة لـ S 1- DC ، ونظمت تعبير CD38 و 4-1 BB ، وإفراز IL -4 و TNF- (الشكل 1) . كما لوحظ عدم التجانس بين معلمات الخلايا التائية التي تمت دراستها ووقت أخذ عينات الدم بعد الشفاء ، أو شدة الأعراض السريرية ، أو مستوى الأجسام المضادة لـ S1 (البيانات غير معروضة).

4. مناقشة

في -19 الناجين من COVID ، احتفظت خلايا TEM و TCM المعينة المنتشرة 1- بالاستجابة الوظيفية وعرضت قدرات المستجيب المعزز مثل التنشيط والتكاثر وإفراز الوسطاء المناعيين. على الرغم من أن الاستجابة التكاثرية فيذاكرةلم تكن خلايا CD8 plus T قوية كما في CD4 plusذاكرةالخلايا التائية ، تشير بياناتنا إلى أن هذه الخلايا يمكن أن تتقدم بسرعة إلى حالة المستجيب عند تعرضها لمستضد S1 SARS-CoV -2. تعتبر خلايا TEM حراس بوابات حاسمة لأنها تميل إلى تحديد موقع الأنسجة المعرضة للغزو من قبل الكائنات الحية الدقيقة المسببة للأمراض ، في حين يتم تجنيد خلايا TCM في الأعضاء اللمفاوية الثانوية لتسريع التفاعلات المناعية التي افتتحها DCs التي تقدم المستضد [18]. على الرغم من أنها تغطي عددًا محدودًا من حالات COVID -19 ، في دراستنا ، فإن غالبية المرضى يؤويون خلايا TEM و TCM التي استجابت وظيفيًا لبروتين S1 من حيث معامل واحد على الأقل تم اختباره. قد تشير هذه النتائج الأولية إلى وجود تباين محتمل بين الكفاءة الوظيفية للخلايا التائية وشدة COVID -19. أفادت دراسة سابقة عن تكرار أعلى 1- للخلايا التائية النوعية من الخلايا التائية المحددة للبروتينات N و M [8]. في المقابل ، لا يزال يتعين توضيح الاستجابة الوظيفية للخلايا T لمستضدات أخرى لـ SARS-CoV -2. أظهر العمل المنوي المنشور مؤخرًا وجود طويل الأمدذاكرةفي الخلايا التائية لـ COVID -19 من المرضى [19،20]. باستخدام نهج تجريبي متميز حيث تم استخدام وحدات تحكم المجال (DC) المشتقة من خلية واحدة كعنصر ممكن لاختبار استجابة الخلايا التائية ، أكدت دراستنا وظيفة وخصائص الخلايا التائية المذكورة سابقًا في الأفراد الذين لديهم تاريخ COVID -19. إن تراكم الأدلة على المناعة التي تم تأسيسها في -19 الناجين من COVID من شأنه أن يوفر فهمًا أفضل لإحداث المرض ، والأساليب العلاجية ، وتطوير اللقاحات.

الشكل 1. تقييم الاستجابات الوظيفية في الخلايا التائية من -19 الناجين من COVID. أ) يظهر مخطط رسومي للإعداد التجريبي. تم إنشاء الخلايا التغصنية المشتقة من الخلايا الوحيدة من الأفراد الذين لديهم تاريخ COVID -19 وتحميلها بـ SARS-CoV -2 Spike Glycoprotein-S1 (S 1- DC) ؛ ثم ، السذاجة الذاتية T (TN) ، المستجيب المتمايز نهائيًا T (TEMRA) ، المركزيذاكرةT (TCM) ، والمستجيبذاكرةتمت تنقية خلايا T (TEM) وزراعتها بشكل مشترك مع DCs. تم قياس تكاثر الخلايا التائية والتعبير عن علامات التنشيط وإفراز السيتوكين بعد فترة الحضانة لمدة 96 ساعة. ب) تم رسم التغيير في تكاثر الخلايا CD4 plus و CD8 plus T لكل مريض مقارنةً بتلك التي تم الحصول عليها من خلال الثقافات المشتركة للتحكم مع DCs المشتقة من الخلايا الأحادية دون تحميل مستضد محدد. يتم إعطاء الرسوم البيانية التمثيلية للتدفق الخلوي على الجانب الأيمن. تم تحفيز الثقافات المشتركة باستخدام الجسم المضاد أحادي النسيلة المضاد لـ CD3 كعنصر تحكم إيجابي تقني لتكاثر الخلايا التائية. ج) تمت مقارنة استجابة تكاثر خلايا TCM و TEM المستمدة من المريض ضد S {{1 {2 0}}} DC مع تلك التي تم الحصول عليها باستخدام HIV Gag أو مستضد ذوفان الكزاز (TT) DC محملة. تم أيضًا استخدام الخلايا التائية والخلايا S 1- التي تم الحصول عليها من الأفراد الأصحاء (S1 (hd)) كعناصر تحكم. د) تم عرض التغييرات في مستويات علامة تنشيط الخلايا التائية CD4 plus و CD8 بالإضافة إلى تلك التي تم الحصول عليها من خلال الثقافات المشتركة للتحكم مع DCs المشتقة من الخلايا الأحادية دون تحميل مستضد محدد. ه) تم تقييم كمية السيتوكينات المرتبطة بالخلايا التائية التي تفرز في طاف الثقافة المشتركة. (* ف <0.05 ،="" **="" ف=""><>

بيان مساهمة التأليف CRediT

Ece Tavukcuoglu: التحقيق ، التصور ، التحليل الرسمي ، الكتابة - المراجعة والتحرير. Utku Horzum: تحقيق ، تصور ، تحليل رسمي ، كتابة - مراجعة وتحرير. أحمد كاجكان إنكايا: التصور ، الموارد. سرحات أونال: التصور ، المصادر. Gunes Esendagli: تصور ، كتابة - مراجعة وتحرير ، إشراف.

إعلان تضارب المصالح

يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح مالية متنافسة معروفة أو علاقات شخصية يمكن أن يبدو أنها تؤثر على العمل الوارد في هذه الورقة.

مراجع

[1] A.Mazzoni ، L. Maggi ، M. Capone ، M. Spinicci ، L. Salvati ، MG Colao ، A. Vanni ، ST Kiros ، J. Mencarini ، L. Zammarchi ، E. Mantengoli ، L. Menicacci ، E . Caldini، S. Romagnani، F. Liotta، A. Morettini، GM Rossolini، A. Bartoloni، L. Cosmi، F. Annunziato ، استجابات مناعية خلطية وخلطية لـ SARS- CoV -2 أقل في -19 المرضى بدون أعراض من أعراض COVID ، Eur. J. إمونول. 50 (2020) 2013-2024.

[2] Y. Tan، F. Liu، X. Xu، Y. Ling، W. Huang، Z. Zhu، M. Guo، Y. Lin، Z. Fu، D. Liang، T. Zhang ، J. Fan ، M. Xu ، H. Lu ، S. Chen ، متانة تحييد الأجسام المضادة واستجابة الخلايا التائية بعد عدوى SARS-CoV -2 ، الجبهة. ميد. 14 (2020) 746-751.

[3] C. Conte، F. Sogni، P. Affanni، L. Veronesi، A. Argentiero، S. Esposito، Vaccines against Corones: The State of the Art، Vaccines (Basel) 8 (2020).

[4] CK Li، H. Wu، H. Yan، S. Ma، L. Wang، M. Zhang، X. Tang، NJ Temperton، RA Weiss، JM Brenchley، DC Douek، J. Mongkolsapaya، BH Tran، CL Lin ، GR Screaton ، JL Hou ، AJ McMichael ، XN Xu ، استجابات الخلايا التائية لفيروس كورونا SARS الكامل في البشر ، J. Immunol. 181 (2008) 5490-5500.

[5] M. Koblischke، MT Traugott، I. Medits، FS Spitzer، A. Zoufaly، L. Weseslindtner، C. Simonitsch، T. Seitz، W. Hoepler، E. Puchhammer-Stockl، SW Aberle، M. Fodinger، A. Bergthaler، M. Kundi، FX Heinz، K. Stiasny، JH Aberle، Dynamics of CD4 T cell and antibody response in COVID {3}} مرضى بدرجات شدة مرض مختلفة ، من الأمام. ميد. (لوزان) 7 (2020) ، 592629.

[6] GA Poland، IG Ovsyannikova، RB Kennedy، SARS-CoV -2 مناعة: المراجعة والتطبيقات للمرحلة الثالثة من اللقاحات المرشحة ، Lancet 396 (2020) 1595–1606.

[7] R. Zhou، KK To، YC Wong، L. Liu، B. Zhou، X. Li، H. Huang، Y. Mo، TY Luk، TT Lau، P. Yeung، WM Chan، AK Wu، KC Lung، OT Tsang، WS Leung، IF Hung، KY Yuen، Z. Chen، Acute SARS-CoV -2 تضعف عدوى الخلايا التغصنية واستجابات الخلايا التائية ، المناعة 53 (2020) 864 - 877 e { {7}}.

[8] A. Grifoni، D. Weiskopf، SI Ramirez، J. Mateus، JM Dan، CR Moderbacher، SARawlings، A. Sutherland، L. Premkumar، RS Jadi، D. Marrama، AM de Silva، A. Frazier، AF كارلين ، جي إيه جرينباوم ، بيترز ، إف كرامر ، دي إم سميث ، إس.كروتي ، إيه سيت ، أهداف استجابات الخلايا التائية لـ SARS-CoV -2 فيروس كورونا في البشر المصابين بـ COVID -19 مرض و الأفراد غير المعرضين للخطر ، الخلية ، 181 (2020) 1489-1501 e1415.

[9] PF Canete، CG Vinuesa، COVID -19 يجعل الخلايا البائية تنسى ، لكن الخلايا التائية تتذكر ، الخلية 183 (2020) 13-15.

[10] I. Schulien، J. Kemming، V. Oberhardt، K. Wild، LM Seidel، S. Killmer، F. Sagar، MS Daul، A. Lago، H. Decker، B. Luxenburger، D. Binder، O . Bettinger، S. Sogukpinar، M. Rieg، D. Panning، M. Huzly، G. Schwemmle، CF Kochs، A. Waller، D. Nieters، F. Duerschmied، HE Emmerich، AR Mei، S. Schulz، DA Llewellyn - لاسي ، ت. برايس ، ب. بوتلر ، ر. بينجش ، إم ثيم ، C.-H. هوفمان ، توصيف الخلايا التائية الخاصة بمرض السارس -2- الموجودة مسبقًا والمستحثة ، نات. ميد. 27 (2021) 78-85.

[11] أي. أوداك ، جيه باروس مارتينز ، ب. بوسنجاك ، ك. ستال ، إس. ديفيد ، أو. ويزنر ، إم بوش ، إم.

إم هوبر ، آي بينك ، تي ويلتي ، إم كورنبرغ ، إم ستول ، إل جوديفا ، آر بلاسكزيك ، إيه غانسر ، آي برينز ، آر فورستر ، سي كوينيك ، سي آر شولتز فلوري ، إعادة الظهور من الخلايا التائية المستجيبة المرتبطة بالتعافي من COVID -19 ، EBioMedicine 57 (2020) ، 102885.

[12] AE Oja، A. Saris، CA Ghandour، NAM Kragten، BM Hogema، EJ Nossent، LMA Heunks، S. Cuvalay، E. Slot، F. Linty، FH Swaneveld، H. Vrielink، G. Vidarsson، T. Rispens و E. van der Schoot و RAW van Lier و A. Ten Brinke و P. Hombrink و Divergent SARS-CoV -2- استجابات محددة للخلايا التائية والخلايا البائية في مرضى COVID الشديد ولكن ليس خفيفًا -19 ، يورو. J. إمونول. 50 (2020) 1998-2012.

[13] ب. كراتزر ، د. ترابين ، ب. إيتل ، يو كورموزي ، أ. روتال ، إف توبي ، إم فيشتر ، ب. جاتينجر ، ك.بوروشوفا ، واي.دوروفيفا ، آي تولايفا ، إم ويبر ، ك. ، R. Henning ، R. Valenta ، WF Pickl ، البصمة المناعية لـ COVID -19 على تجمعات الكريات البيض في الدم المحيطي البشري ، الحساسية (2020).

[14] AM Bruger، C. Vanhaver، K. Bruderek، G. Amodio، E. Tavukcuoglu، G. Esendagli، S. Gregori ، S. Brandau ، P. van der Bruggen ، بروتوكول لتقييم قمع تكاثر الخلايا التائية بواسطة MDSC البشري ، طرق الإنزيمول. 632 (2020) 155 - 192.

[15] SA يونس ، ب. ياسين دياب ، AR Dumont ، MR Boulassel ، Z. Grossman ، JP Routy ، RP Sekaly ، HIV -1 viremia يمنع إنشاء الإنترلوكين 2- المنتج لفيروس HIVذاكرةتتمتع خلايا CD4 بالإضافة إلى T بقدرة تكاثرية ، J. Exp. ميد. 198 (2003) 1909-1922.

[16] DM Frucht ، T. Fukao ، C. Bogdan ، H. Schindler ، JJ O'Shea ، S. Koyasu ، إنتاج IFN-gamma بواسطة الخلايا العارضة للمستضد: تظهر الآليات ، Trends Immunol. 22 (2001) 556-560.

[17] EO Gubernatorova، EA Gorshkova، OA Namakanova، RV Zvartsev، J. Hidalgo، MS Drutskaya، AV Tumanov، SA Nedospasov ، وظائف غير زائدة من IL -6 تنتجها البلاعم والخلايا التغصنية في التهاب مجرى الهواء التحسسي ، أمامي. إمونول. 9 (2018) 2718.

[18] YD Mahnke ، TM Brodie ، F. Sallusto ، M. Roederer ، E. Lugli ، من هو من تمايز الخلايا التائية: الإنسانذاكرةمجموعات فرعية من الخلايا التائية ، يورو. J. إمونول. 43 (2013) 2797-2809.

[19] JM Dan، J. Mateus، Y. Kato، KM Hastie، ED Yu، CE Faliti، A. Grifoni، SI Ramirez، S. Haupt، A. Frazier، C. Nakao، V. Rayaprolu، SA Rawlings، B بيترز ، إف كرامر ، في سايمون ، إي أو سافير ، دي إم سميث ، دي ويسكوبف ، إيه سيت ، إس كروتي ، علم المناعةذاكرةإلى SARS-CoV -2 الذي تم تقييمه لمدة تصل إلى 8 أشهر بعد الإصابة ، العلوم 371 (2021).

[20] LB Rodda، J. Netland، L. Shehata، KB Pruner، PA Morawski، CD Thouvenel، KK Takehara، J. Eggenberger، EA Hemann، HR Waterman، ML Fahning، Y. Chen، M. هيل ، ج. راثي ، سي ستوكس ، إس ورين ، بي فيالا ، إل.كارتر ، جيه إيه هامرمان ، إن بي كينج ، إم جيل ، جونيور ، دي جي كامبل ، دي جي رولينغز ، إم بيبر ، وظيفية SARS-CoV { {2}} مناعة محددةذاكرةاستمرت بعد COVID المعتدل -19 ، الخلية ، 184 (2021) 169-183 e117.