المدخول الفموي لببتيدات الكولاجين في عظام الدجاج مضاد للشيخوخة في الفئران عن طريق تنظيم تدهور الكولاجين وتكوينه ، وتثبيط الالتهاب وتنشيط الجسيمات الحالة ، الجزء الأول

الرجاء التواصلoscar.xiao@wecistanche.comللمزيد من المعلومات

الملخص:أصبح تأثير النظام الغذائي على شيخوخة الجلد موضوع بحث مثير للاهتمام. ركزت الدراسات السابقة في الغالب على الآثار المفيدة لببتيدات الكولاجين المشتقة من الكائنات البحرية على الجلد المتقدم في السن عند تناولها عن طريق الفم ، بينما نادرًا ما تم الإبلاغ عن الآثار المفيدة لببتيدات الكولاجين المشتقة من الدواجن على جلد الشيخوخة. في هذه الدراسة ، تم تحضير ببتيدات الكولاجين من عظام الدجاج عن طريق التحلل المائي الأنزيمي ، وتم فحص تأثير وآلية عمل ببتيدات الكولاجين التي يتم تناولها عن طريق الفم على التخفيف من شيخوخة الجلد التي تسببها الأشعة فوق البنفسجية جنبًا إلى جنب مع D-galactose. أظهرت النتائج أن كولاجين عظام الدجاج له خصائص نموذجية للكولاجين ، وأن ببتيدات كولاجين عظام الدجاج (CPs) كانت بشكل أساسي ببتيدات جزيئية صغيرة بوزن جزيئي قدره<3000 da.="">تمديد الحياة cistancheأظهرت التجارب المجراة أن الـ CPs لها تأثير مخفف هام على شيخوخة الجلد ، تدل عليه التغيرات في تكوين وبنية الجلد المتقدم في السن ، تحسن مستوى مضادات الأكسدة في الجلد ، وتثبيط الالتهاب. ارتبط تأثير التخفيف ارتباطا إيجابيا مع جرعة CPs. أظهر المزيد من التحقيق أن CPs تقلل أولاً مستوى أكسدة الجلد ، وتمنع التعبير عن عامل النسخ الرئيسي AP -1 (c-Jun و c-Fos) ، ثم تنشيط مسار إشارات TGF- / Smad لتعزيز تخليق الكولاجين ، وتثبيط التعبير عن MMP -1 / 3 لمنع تدهور الكولاجين ، وتثبيط التهاب الجلد للتخفيف من شيخوخة الجلد لدى الفئران. علاوة على ذلك ، وجد ترنسكريبتوم الجلد أن الجسيمات الحالة التي يتم تنشيطها بعد تناول الـ CP عن طريق الفم قد تكون مسارًا مهمًا للـ CP في مكافحة شيخوخة الجلد ، وهي جديرة بمزيد من البحث. تشير هذه النتائج إلى أنه يمكن استخدام CP كمكون غذائي وظيفي مضاد للشيخوخة.

الرجاء الضغط هنا لمعرفة المزيد

الكلمات الدالة:ببتيدات الكولاجين مكافحة الشيخوخة. نسخة الجلد تخليق الكولاجين الجسيمات المحللة

1 المقدمة

عصر الصحة ، اتباع نظام غذائي صحي بدقة ، وتحديد دور التغذية في شيخوخة الجلد ، وتحديد ما تأكله للحفاظ على بشرة شابة وصحية هي مشاكل صعبة. الجلد هو أكبر عضو في الجسم ، ويتكون من البشرة والأدمة والطبقة تحت الجلد. يعمل كحاجز لحماية الجسم من العوامل الخارجية ويلعب أيضًا دورًا في الصحة والجمال [1]. شيخوخة الجلد هي عملية معقدة ، تنقسم إلى الشيخوخة الزمنية والشيخوخة الضوئية وتتأثر بالعوامل الداخلية والخارجية. تشمل الخصائص الرئيسية تراكم الضرر الجزيئي في الخلية ، وتدهور وظيفة الخلايا الجذعية (تعزيز تجديد الأنسجة) ، والفقدان التدريجي للسلامة الجسدية للجلد [2]. تشمل الآليات الجزيئية الرئيسية التي تسبب شيخوخة الجلد بشكل أساسي الإجهاد التأكسدي ، وتقصير التيلومير ، وتلف الحمض النووي ، والطفرة الجينية ، وتنظيم الحمض النووي الريبي الدقيق ، وتراكم المنتج النهائي للجليكيشن المتقدم ، والشيخوخة الملتهبة [3]. شيخوخة الصور هي تضخم البشرة ، والتجفيف ، وتدهور المصفوفة خارج الخلية الناجم عن الأشعة فوق البنفسجية.cistanche nzالسبب الرئيسي لشيخوخة الصور هو أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) الناتجة عن الأشعة فوق البنفسجية التي تتوسط في التعبير عن البروتينات المعدنية المصفوفة (MMPs) والنوع الأول من الكولاجين المؤيد من خلال مسارات الإشارة مثل إشارات بروتين كيناز (MAPK) الذي ينشط الميتوجين (MAPK) المسار ، مما يؤدي إلى تدهور المصفوفة خارج الخلية (ECM) في الجلد وموت الخلايا المبرمج للخلايا الليفية [4]. في السنوات الأخيرة ، أصبح الحفاظ على صحة الجلد وتأخير الشيخوخة أمرًا شائعًا ، وأصبح العثور على المكونات الطبيعية مثل الببتيدات النشطة بيولوجيًا والبوليفينول مع مضادات الأكسدة ووظائف مكافحة الشيخوخة نقطة ساخنة للبحث [5].

ومع ذلك ، فإن الكولاجين له وزن جزيئي كبير ويصعب امتصاصه واستخدامه بشكل مباشر ، في حين أن ببتيدات الكولاجين الجزيئية الصغيرة بعد التحلل المائي للكولاجين لها نشاط بيولوجي أقوى ومعدل امتصاص مرتفع [6]. وفي الوقت نفسه ، أدى التطبيق الواسع للكولاجين في الغذاء والدواء وهندسة الأنسجة ومستحضرات التجميل وغيرها من المجالات إلى جعل ببتيدات الكولاجين ذات الوزن الجزيئي المنخفض وكفاءة الامتصاص العالية والنشاط البيولوجي الأقوى مفضلاً جديدًا في الأغذية الوظيفية والأبحاث الطبية [{{1) }}]. ببتيدات الكولاجين صغيرة وتحتوي على 2-20 بقايا الأحماض الأمينية التي تم الحصول عليها بعد التحلل المائي للكولاجين. يتم استخدامها كمكمل غذائي لعلاج شيخوخة الجلد بسبب وظائفها المحتملة المضادة للالتهابات ومضادات الأكسدة وتنظيم المناعة وتأثير مضادات الأكسدة والتكاثر على الخلايا الليفية الجلدية [10].

يمكن لمكافحة الشيخوخة

بعد تناوله عن طريق الفم ، تُمتص ببتيدات الكولاجين على شكل ببتيدات صغيرة وتنتقل بسرعة إلى الدم ، وفي النهاية ، إلى الكلى والجلد والمفاصل والأنسجة الأخرى ليتم تخزينها واستخدامها. بعد 14 يومًا ، ظلت مستويات النشاط الإشعاعي مرتفعة في جلد الفئران التي تم تطعيمها ببتيدات الكولاجين المسمى C 14-. يمكن للجسم امتصاص ببتيدات الكولاجين بالكامل تقريبًا واستخدامها ، في حين أن معدل امتصاص واستخدام الكولاجين هو 50-60 بالمائة فقط [6 ، 11-13]. في السنوات الأخيرة ، تم الإبلاغ عن تحلل الكولاجين من جلد السمك وقشور السمك وعظام البقر وجلد البقر وجلد الخنازير على نطاق واسع أن لها آثارًا مفيدة في التخفيف من شيخوخة الجلد وقد حظيت باهتمام كبير من الباحثين. على سبيل المثال ، تعمل ببتيدات الكولاجين المعزولة من جلد الكارب الفضي على تعزيز تخليق الكولاجين المحترف وتمنع تعبير البروتين AP -1 و MMP -1 و MMP -3 عن طريق تنشيط مسار TGF- / Smad لمنع تدهور الكولاجين وإصلاح خلايا الجلد التالفة [14]. يمكن أن يؤدي تناول ببتيدات الكولاجين البقري عن طريق الفم إلى تحسين استرخاء الجلد وزيادة محتوى الكولاجين ونشاط الإنزيم المضاد للأكسدة وإصلاح ألياف الكولاجين وتطبيع نسبة الكولاجين في الجلد في الفئران المسنة [15]. ومع ذلك ، فإن ببتيدات الكولاجين من مصادر مختلفة لها تأثيرات مختلفة. تعتمد كمية وهيكل الببتيدات عالية النشاط في الدم بعد تناول ببتيدات الكولاجين عن طريق الفم على مصدر الكولاجين [10]. كان التأثير الوقائي لببتيد الكولاجين المستخرج من جلد الدجاج ضد إصابة الخلايا الليفية التي تسببها الأشعة فوق البنفسجية أعلى من تأثير ببتيد الكولاجين المستخرج من جلد الخنزير أو البقر أو البلطي ، وكان تأثيره مكافئًا لثلاثي الببتيد المشتق من الكولاجين (Gly-Pro). - الهيب) [16]. أدت المعتقدات الدينية والمخاوف المتعلقة بالأمراض (مثل مرض جنون البقر) بالناس إلى تغيير اتجاه تطور الكولاجين ومنتجاته تدريجيًا من الثدييات الأرضية إلى الكائنات الداجنة والبحرية [17]. كمنتج ثانوي رئيسي لمعالجة الدواجن ، يعد عظام الدجاج مصدرًا واعدًا لمنتجات الكولاجين. إنه لا يقلل فقط من إهدار الموارد والتلوث البيئي ولكنه يسمح أيضًا بالاستخدام الفعال للمنتجات الثانوية. لذلك ، في هذه الدراسة ، استخدمنا ببتيدات كولاجين عظام الدجاج كمواد خام ، مع الفئران العارية المعالجة بـ D-galactose و UV للحث على شيخوخة الجلد ، كنموذج لتقييم تأثير تناول ببتيد الكولاجين عن طريق الفم على التخفيف من شيخوخة الجلد في الفئران وتحديد الآلية ذات الصلة.

2. المواد والأساليب

2.1. المواد والكيماويات والحيوانات

قدمت مزارع الدجاج في جامعة يونان الزراعية (كونمينغ ، الصين) الدجاج المستهلك ، الذي تم فصله وتجفيفه وسحقه للحصول على وجبة عظام الدجاج. تم شراء مجموعات Su-peroxide disutase (SOD) ، و catalase (CAT) ، و glutathione peroxidase (GSH-PX) من شركة Soleibao Biotechnology Co.، Ltd. (بكين ، الصين). Hydroxyproline (HYP) ، interleukin -1 (IL -1) ، matrix metalloproteinase -1 / 3 (MMP -1 / 3) ، النوع الأول pro-collagen ، وحمض الهيالورونيك ( HA) تم شراء مجموعات المقايسة المناعية المرتبطة بالإنزيم (ELISA) من معهد Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute (نانجينغ ، الصين). تم شراء أنثى فئران خالية من الشعر BALB / C صحية (18 ± 2 جم ، عمرها ستة أسابيع) من Nanjing Junke Bioengineering Corporation، Ltd. (نانجينغ ، الصين) برقم التصريح: SCXK (SU) 2016-0010. تم شراء Pepsin و Papain من Aladdin Biochemical Technology Co.، Ltd. (شنغهاي ، الصين) ، وكانت المواد الكيميائية الأخرى من الدرجة التحليلية. تم التعامل مع جميع الفئران وفقًا للوائح رعاية الحيوانات المختبرية في مقاطعة يوننان والتي وافقت عليها لجنة رعاية الحيوان واستخدامه بجامعة يونان الزراعية (معرف الموافقة: YAUACUC01).

2.2. تحضير الكولاجين وتكوين الأحماض الأمينية

استخلاص كولاجين عظام الدجاج وتركيب الأحماض الأمينية يتبع الطريقة التي وصفها الملازم أول. [18] مع تعديلات طفيفة. تم تقليب مسحوق عظام الدجاج ونقعه في 0. 0 5 مولار هيدروكسيد الصوديوم ، و 1 0 بالمائة n-hexane ، و 0. 25 محلول MEDTA (درجة الحموضة 7.5) عند نسبة 1/10 (م / س). في كل خطوة ، تمت معالجة العينة لمدة 36 ساعة ، وتم تغيير محلول النقع كل 6 ساعات لتضخم مسحوق العظام وإزالة البروتينات والدهون والمعادن من مسحوق العظام. تم غسل العينة بالماء النقي إلى الحياد بعد كل خطوة. تم خلط وجبة عظام الدجاج المعالجة مسبقًا مع 0.5 مولار من حمض الأسيتيك الجليدي المحتوي على 0.1 في المائة (وزن / حجم) بيبسين بنسبة صلبة إلى سائلة تبلغ 1:10 (وزن / حجم) وتقليبها باستمرار واستخلاصها عند 4 درجات من أجل 48 ساعة تم ترشيحه بعد ذلك ، وطرد المرشح عند 15 ، 000 × جم لمدة 15 دقيقة عند 4 درجات.cistanche حجم القضيبتم تعديل المادة الطافية إلى 7. 5-7 .8 بمحلول NaOH ، ويضاف NaCl إلى تركيز نهائي قدره 1.5 م. بعد أن ظل الخليط غير مضطرب لمدة 12 ساعة عند 4 درجات مئوية للتمليح ، تم الطرد المركزي لترسيب الكولاجين عند 15 ، 000 × جم لمدة 15 دقيقة عند 4 درجات ، ثم يذوب بـ 0. 5 مولار من حامض الخليك ، ويحلل في ماء نقي ، ويجفف بالتجميد ، والمنتج النهائي عبارة عن كولاجين عظم الدجاج.

تم تحديد تركيبة الأحماض الأمينية لكولاجين عظام الدجاج بواسطة محلل الأحماض الأمينية Sykam S433D (ميونيخ ، ألمانيا). تم أخذ كمية معينة من عينة الكولاجين المراد اختبارها في أنبوب مغلق ، تمت إضافته بـ 1 0 مل من حمض الهيدروكلوريك ، وتم تحللها عند 110 درجة لمدة 24 ساعة. تم تركيز التحلل المائي عن طريق نفخ النيتروجين وإعادة إذابته في محلول حامض الستريك سعة 20 مل. بعد الترشيح الدقيق باستخدام غشاء دقيق المسام 0.22 ميكرومتر ، تم أخذ 20 ميكرولتر من التحلل المائي لتحليل طيف الأحماض الأمينية. تم التعبير عن محتوى الأحماض الأمينية في العينة بالنسب المئوية.

2.3 تحضير وتوزيع الوزن الجزيئي لببتيدات الكولاجين (CPs)

وفقًا لنتائج عملية التحسين السابقة لدينا ، تم تحضير CPs باستخدام غراء بنسبة إنزيم إلى ركيزة تبلغ 1: 4 0 (نسبة الكتلة). بعد تعديل الأس الهيدروجيني إلى 7 والتحلل المائي الأنزيمي عند 63 درجة لمدة 5 ساعات ، تم تعطيل الإنزيم في حمام مائي مغلي لمدة 15 دقيقة. تم تحلية الإنزيم المائي وتجفيفه بالتجميد ، وإعادة إذابته في محلول حمض الفورميك بنسبة 0.1 في المائة ، وطرده مركزيًا للحصول على المادة الطافية. تم استخدام AQ Exactive HF Orbitrap High-Resolution Mass Spectrometer-OE-HF (Thermo Fisher ، Waltham ، MA ، USA) ، المجهزة بتأين بالرش الكهربائي (ESI) ، لتحليل تحلل الكولاجين في وضع المسح الكامل لـ 350-1800 m / z ، وتم استرجاع النتائج وتحليلها باستخدام Proteome Discoverer

2.1 برنامج

2.4 اختبار الحيوان

تم الاحتفاظ بإناث الفئران BALB / Chairless (n {0}) في غرفة تحت ظروف درجة حرارة مضبوطة (24 ± 1 درجة) ، ورطوبة (6 0 ± 5 بالمائة) ، و 12 h دورة نهارية وليلية لمدة أسبوع. تم تزويدهم بإمكانية الوصول إلى الطعام والماء. بعد أسبوع واحد من التكيف ، تم تقسيم الفئران بشكل عشوائي إلى المجموعات الخمس التالية (ن =11 لكل مجموعة) :( i). المجموعة الطبيعية (N): الأشعة فوق البنفسجية غير معرضة ؛ تناول 0 عن طريق الفم .4 مل من محلول ملحي يوميًا. (2). مجموعة النماذج (M): UVexposed plus D-galactose (0. 2 mL) ؛ تناول 0.4 مل من المحلول الملحي عن طريق الفم يومياً. (أنا). مجموعة ببتيدات الكولاجين بجرعة منخفضة (LCPs): التعرض للأشعة فوق البنفسجية بالإضافة إلى D-galactose (0.2 مل) ؛ عن طريق الفم

تناول 0. 4 مل سي بي (الجرعة: 200 مجم / كجم {3}} من وزن الجسم) يوميًا. (رابعا). مجموعة ببتيدات الكولاجين بجرعة متوسطة (MCPs): تتعرض للأشعة فوق البنفسجية بالإضافة إلى D-galactose ؛ عن طريق الفم

تناول 0. 4 مل سي بي (الجرعة: 500 مجم: كجم -1 من وزن الجسم) يوميًا.

(الخامس). مجموعة ببتيدات الكولاجين بجرعات عالية (HCPs): تتعرض للأشعة فوق البنفسجية بالإضافة إلى D-galactose ؛ تناول عن طريق الفم من 0. 4 مل سي بي (الجرعة: 1000 مجم · كجم -1 من وزن الجسم) يوميًا.

تم إجراء معالجة D-galactose عن طريق الحقن تحت الجلد لـ 0. 2 مل من محلول D-galactose بنسبة 1 0 في المائة في مؤخرة عنق الفأر (الجرعة: 1. 0 جم / كجم -1 من وزن الجسم) يوميًا. تم إجراء تشعيع الأشعة فوق البنفسجية باستخدام مصباح 40 واط UVA {9}} (O-panel ، كليفلاند ، الولايات المتحدة الأمريكية ، ذروة الطول الموجي: 340 نانومتر) ، وكانت المسافة بين المصباح وظهر الفئران 30 سم (230 م J / سم-) ، واستمر التشعيع لمدة 30 دقيقة كل يوم لمدة سبعة أسابيع (49 يومًا). تم قياس شدة الإشعاع بواسطة مقياس إشعاع UVA 365- (Xinbao Keyi Electronic Technology Co.، Ltd.، Xi'an، China). بعد ساعة واحدة من العلاج D-galactose و UV ، تم إعطاء الفئران 0.4 مل من CPs عن طريق الفم كل يوم. بعد التشعيع الأخير ، تم تخدير الفئران ووزنها وأخذ عينات من الأنسجة لتحليلها لاحقًا.

2.5 رطوبة الجلد ، مؤشر الحشوية ، واكتساب وزن الجسم

تم تحديد رطوبة الجلد بواسطة ISO 1442 ، وتم حساب المؤشر الحشوي باستخدام المعادلة التالية: المؤشر الحشوي (جم / كجم)=الوزن الحشوي / وزن الجسم.

2.6.Oxidatioe Stress و HA و HYP محتوى الجلد

تم تجانس عينات الجلد مع تسعة أضعاف كمية المحلول الملحي العادي (وزن / وزن) في حمام جليدي مع خالط الأنسجة (TGrinder OSE-Y30 ، Tiangen Biochemical Technology Co.، Ltd. ، بكين ، الصين) ، ثم طردها في عام 2000 × ز و 4 درجة لمدة 10 دقائق. تم تحديد أنشطة ديسموتاز الفائق (SOD) ، الكاتلاز (CAT) ، الجلوتاثيون بيروكسيديز (GSH-PX) ، ومحتويات حمض الهيالورونيك (HA) والهيدروكسي برولين (HYP) في المادة الطافية المجمعة وفقًا للطريقة الموضحة في التعليمات. المقابلة للمجموعات المعنية.

2.7. نسيج الجلد

تم إصلاح عينات جلد الفأر في محلول بارافورمالدهيد بنسبة 4 في المائة لمدة 24 ساعة ، وتجفيفها ، وتضمينها في البارافين ، ومقطعة إلى شرائح. كانت أقسام الجلد ملطخة بالهيماتوكسيلين ويوزين (HE) ولوحظت باستخدام مجهر مضان ECLIPSE CI-E (نيكون ، اليابان). تم تقييم سمك البشرة والأدمة باستخدام برنامج Halcon 13. 0 1.1 (MVTec ، ميونيخ ، ألمانيا).

2.8 تسلسل ترنسكريبتوم الجلد

2.8.1. استخراج الحمض النووي الريبي ، وبناء المكتبة ، وتسلسل النسخ

تم استخراج Total RNA من جلد الفئران باستخدام RNeasy Mini Kit (Tiangen Biochemical Technology Co.، Ltd. ، بكين ، الصين) وفقًا لتعليمات الشركة الصانعة. تم فحص نقاء وتركيز الحمض النووي الريبي باستخدام مقياس الطيف الضوئي kaiaoK5500 (كاياو ، بكين ، الصين) ؛ تم تقييم سلامة الحمض النووي الريبي باستخدام RNA Nano 6000 Assay Kit ونظام Bioanalyzer 2100 (Agilent Technologies ، سانتا كلارا ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم إجراء تحليل التسلسل النسخي لكل عينة بواسطة Biolinker Technology Company Limited (كونمينغ ، الصين).مسحوق cistancheباختصار ، تم إجراء تجميع العينات المشفرة بالفهرس على نظام إنشاء مجموعة cBot باستخدام HiSeq PE Cluster Kit v 4- cBot-HS (Illumina) وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة. بعد إنشاء الكتلة ، تم تسلسل المكتبات على منصة Illumina ، وتم إنشاء قراءة نهائية مقترنة بمقدار 150 نقطة أساس.

2.8.2. تحليلات المعلوماتية الحيوية لبيانات تسلسل الحمض النووي الريبي

تم إجراء تحليل التخصيب الجيني (GO) وموسوعة كيوتو للجينات والجينوم (KEGG) للجينات المعبر عنها تفاضليًا (DEGs) باستخدام حزمة محلل مجموعة اللغة R. عندما كانت القيمة p أقل من 0. 05 ، تم اعتبار العناصر والمسارات المخصبة بواسطة GO و KEGG مهمة.

2.8.3. تفاعل سلسلة إنزيم النسخ العكسي والبوليميراز المتسلسل (qRT-PCR)

تم إجراء QRT-PCR كما هو موضح سابقًا [19].

2.9.Wester1 لطخة

وفقًا للطريقة التي وصفها Park et al. [20] ، تم إجراء تحليل لطخة ويسترن (WB) لقياس التعبير عن البروتينات المرتبطة بشيخوخة الجلد في الفئران. تم تحديد كمية تركيز البروتين في محلول الجلد في كل مجموعة معالجة باستخدام مجموعة BCA ، مفصولة بواسطة SDS-PAGE (10 بالمائة أكريلاميد جل) ، تم نقلها إلى غشاء PVDF ، محجوبًا بنسبة 5 بالمائة من الحليب منزوع الدسم ، وحضنت بكمية مناسبة من الأولية الأجسام المضادة (TGF-b1 و c-Fos و c-Jun و Samd2 / 3 و -actin) عند 4 درجات طوال الليل. بعد الغسل باستخدام TBST ، تم خلط العينات مع الأجسام المضادة الثانوية وحضنت في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة واحدة. تم استخدام مصور ChemiDoc XRS plus هلام التلألؤ الكيميائي (BioRAD ، Hercules ، CA ، الولايات المتحدة الأمريكية) لاكتشاف بروتينات معينة. Image] تم استخدام برنامج لقياس تعبير البروتين المستهدف في كل مجموعة معالجة ، وتم تمثيل النتائج بقيم الكثافة الطبيعية لبروتين اكتين.

2.10.ELISA

تم تحديد مستويات التعبير عن MMP -1 ، MMP -3 ، النوع الأول من الكولاجين المحترف ، و IL -1 في سائل تحلل الجلد عن طريق المقايسة المناعية المرتبطة بالإنزيم. تم إجراء الفحص وفقًا للتعليمات المقدمة مع المجموعة.

2.11. تحاليل احصائية

تم تحليل جميع النتائج باستخدام برنامج SPSS 21 (IBM Inc. ، Armonk ، NY ، الولايات المتحدة الأمريكية) من خلال تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA) واختبار النطاق المتعدد Duncan ، مع ضبط مستوى الأهمية على p.<0.05. originpro="" 2017="" (originlab,="" northampton,="" ma,="" usa)was="" used="" to="" plot="" the="" data.="" all="" data="" were="" expressed="" as="" the="" mean="" ±standard="" deviation="">

3. النتائج والمناقشة

3.1. تكوين حمض الأميني للكولاجين

يظهر تكوين الأحماض الأمينية لكولاجين عظام الدجاج في الجدول 1. كان Gly هو الحمض الأميني الرئيسي في العينات ، ويمثل ما يقرب من ثلث (27. 86 بالمائة) من إجمالي الأحماض الأمينية ، وكان Hyp هو حمض أميني خاص في الكولاجين بنسبة 9.83٪. كانت الخصائص الرئيسية لجزيئات الكولاجين هي تسلسل Gly-XY المتكرر والبنية الحلزونية الثلاثية الفريدة المكونة من ثلاث سلاسل c. يمثل Gly حوالي ثلث إجمالي الأحماض الأمينية ، وكان X و Y غالبًا عبارة عن برولين وهيدروكسي برولين ، أو يمكن أن يكونا أي بقايا [21]. كان تكوين الأحماض الأمينية للعينة مشابهًا لتكوين كولاجين عظام الدجاج المذكور في الدراسات السابقة وكان له الخصائص النموذجية للكولاجين [22].

3.2 توزيع الوزن الجزيئي لـ CPs

Molecular weight distribution reflects the degree of collagen hydrolysis. The molecular weight of the CPs was mainly below 3000 Da(Figure 1), accounting for about 87.61%of all collagen hydrolysates, indicating that almost all of the CPs were small peptides. Many studies claim that collagen peptides with a lower molecular weight have better biological activity [23]. For example, Song et al. [24]. reported that lower molecular weight (200-1000 Da,65%)silver carp skin collagen peptides repaired UV-induced aging skin in mice more effectively than similar peptides with a higher molecular weight(>1000 دا ، 72 بالمائة). ومع ذلك ، أظهرت شركة Gelita الألمانية من خلال العديد من الدراسات السريرية أن تأثير ببتيدات الكولاجين يتم تحديده بشكل أساسي من خلال درجة مطابقته مع خصائص ببتيدات الكولاجين بعد تحلل الكولاجين البشري ، بدلاً من الوزن الجزيئي لببتيدات الكولاجين. ووجدوا أن منتج VERISOL⑧ بمتوسط ​​وزن جزيئي يبلغ 2000 دا له التأثير الأكثر تحفيزًا على الخلايا الليفية للجلد ، في حين أن منتج FortigelTM بمتوسط ​​وزن جزيئي يبلغ 3000 Da له تأثير خاص على إصلاح الغضروف [25-27].

3.3 تأثير سي بي الفم على التخفيف من شيخوخة الجلد

3.3.1. وزن الجسم ومؤشر الجهاز

يعتبر مؤشر وزن الجسم ومؤشر الجهاز مهمين ويعكسان الحالة الصحية للفئران. زاد وزن الفئران في كل مجموعة بشكل طبيعي خلال فترة الاختبار (الجدول 2). كان متوسط ​​زيادة الوزن للمجموعة M أقل من المجموعة N ، وكان متوسط ​​زيادة الوزن في المجموعة M أعلى من المجموعة M ، مما يشير إلى أن CP ليس لها آثار جانبية على الفئران. في التقارير السابقة ، كانت جرعة الفئران المعالجة بببتيد الكولاجين تتراوح في الغالب بين 100-1000 ملغم / كغم من وزن الجسم في اليوم ، وبلغت الجرعة الآمنة من ببتيدات الكولاجين البلطي 4.07 جم / كجم. }].استخراج الصلصا cistanche Similarly, the growth of skin-aged mice after gavage with tilapia scale collagen peptides (dose: 500 and 1000 mg/kg.bw·d)was also similar to our results [29]. The spleen plays an important role in humoral and cellular immunity, thus, the spleen index is often used to evaluate immune system function. The liver index was used to evaluate the toxicity of the tested sample. In these tests, the liver and spleen indices in the M group were lower than those in the N group, and both recovered after treatment with CPs, but there was no significant difference across the treatment groups(p>0 05). كانت النتائج مماثلة لتلك التي توصلت إليها الدراسات السابقة [30] ، مما يشير إلى أن CPs آمنة وقد تحسن بشكل طفيف مناعة الفئران.

3.3.2. تكوين الجلد

قلل العلاج بالأشعة فوق البنفسجية ودال الجالاكتوز (المجموعة M) بشكل كبير من محتوى الرطوبة و HA و Hyp في الجلد ، مقارنةً بالمجموعة ، بنسبة 13.36٪ و 24.08٪ و 15.83٪ على التوالي (p.<0.05)(table 2).the="" contents="" of="" moisture,="" ha,="" and="" hyp="" in="" the="" skin="" were="" significantly="" higher="" in="" mice="" after="" the="" oral="" administration="" of="" cps="" compared="" to="" the="" contents="" of="" those="" in="" the="" mice="" of="" the="" m="" group=""><0.05). among="" the="" dose="" groups,="" the="" contents="" of="" the="" three="" skin="" components="" were="" significantly="" different="" between="" the="" lcp="" and="" hcp="" groups="" and="" were="" dependent="" on="" the="" dose="" of="" intake="" of="" cps.="" the="" hcp="" group="" had="" even="" higher="" contents="" than="" the="" n="" group,="" and="" ha="" and="" hyp="" were="" significantly="" different="" between="" the="" two="" groups="" (p=""><>

تؤدي التغييرات في محتوى رطوبة الجلد إلى ظهور التجاعيد وترهل الجلد وتتأثر بمكونات المصفوفة مثل كولاجين الجلد و HA [31]. Hydroxyproline هو حمض أميني ثابت وغني وخاص في الكولاجين ، ويمكن لمحتواه أن يعكس بشكل غير مباشر محتوى الكولاجين في الجلد ، وكذلك شيخوخة الجلد. بالإضافة إلى ذلك ، HA ، الذي يتم التعبير عنه بشكل كبير في ECM للبشرة ، يلعب دورًا مهمًا في التحكم في توازن الماء في الجلد ، والضغط الاسموزي ، والاحتفاظ بالرطوبة ، والمرونة كنظام تخزين المياه والمكون الهيكلي للجلد [32]. في هذه الدراسة ، زاد محتوى الرطوبة ، HYP ، و HA في الجلد بشكل ملحوظ بعد تناول الشلل الدماغي ، والذي قد يكون مرتبطًا بتعزيز إنتاج الكولاجين و HA بواسطة CPs. علاوة على ذلك ، أدت الزيادة في HYP و HA إلى زيادة محتوى الرطوبة.

3.3.3. التغيرات النسيجية للجلد

يظهر الشكل 2 التغيرات النسيجية في الجلد الخلفي للفئران بعد سبعة أسابيع من العلاج المستمر. أظهر شيخوخة الجلد للمجموعة M خصائص السطح الخشن ، والبشرة السميكة ، والأدمة الرقيقة ، والخلايا المتناثرة ، مقارنة بجلد المجموعة N. ومع ذلك ، فقد تحسنت حالة الجلد المتقدم في السن لدى الفئران بعد تناول الـ CP عن طريق الفم ، مما يحافظ على بنية ناعمة ومنظمة وكاملة مماثلة لتلك الموجودة في فئران المجموعة N. وهكذا ، كانت الأدمة الجلدية أرق بشكل ملحوظ ، وكانت البشرة أكثر سمكًا بشكل ملحوظ في المجموعة M عنها في المجموعة N (ص.<0.05). the="" change="" in="" skin="" dermis="" and="" epidermal="" thickness="" was="" significantly="" better="" after="" treatment="" with=""><0.05), and="" the="" effect="" was="" more="" obvious="" with="" the="" increase="" in="" the="" dose="" of="" cps="" (figure="" 2).="" the="" effect="" of="" oral="" cps="" on="" the="" histological="" structure="" of="" aging="" skin="" was="" similar="" to="" that="" reported="" previously[4,28,31].="" the="" increase="" in="" the="" thickness="" of="" the="" epidermis="" might="" be="" an="" adaptive="" change="" to="" protect="" the="" skin="" from="" external="" stimuli,="" loss="" of="" skin="" moisture,="" and="" uv="" damage,="" possibly="" due="" to="" the="" increase="" in="" uv-activated="" epidermal="" growth="" factor="" receptor="" (egfr)="" that="" induces="" keratinocyte="" proliferation="" and="" epidermal="" hyperplasia[4].="" however,="" the="" mechanism="" by="" which="" oral="" cps="" alleviate="" the="" increase="" in="" epidermal="" thickness="" remains="" unclear.="" the="" dermis="" imparts="" elasticity="" and="" strength="" to="" the="" skin,="" and="" the="" degradation="" of="" ecm="" and="" the="" reduction="" in="" the="" ability="" to="" repair="" fibroblasts="" are="" the="" main="" causes="" of="" dermal="" thinning="" in="" aging="" skin.="" dermal="" thickness="" increased="" after="" the="" treatment="" with="" cps,="" which="" might="" be="" due="" to="" the="" removal="" of="" ros="" from="" the="" skin="" and="" inhibition="" of="" the="" increase="" of="" mmps="" by="" cps.="" this,="" in="" turn,="" inhibited="" the="" degradation="" of="" skin="" collagen="" and="" elastin="" (figure="" 3),="" the="" entry="" of="" cps="" into="" the="" skin,="" and="" their="" participation="" in="" the="" synthesis="" of="" collagen="" and="" ha="" [6],="" which="" was="" confirmed="" by="" the="" increase="" in="" the="" content="" of="" hyp="" and="" ha="" in="" the="" skin="" (table="">

3.3.4 مستويات الجلد المضادة للأكسدة والالتهابات

يعتبر تحديد نشاط إنزيمات مضادات الأكسدة الطريقة الأكثر استخدامًا لتقييم مستوى مضادات الأكسدة في الجسم [28]. كما هو موضح في الشكل 3 ، كانت أنشطة محتوى CAT و SOD و GSH-Px و MDA في المجموعة M أقل بكثير من تلك الموجودة في المجموعة N (ص.<0.05). administering="" cps="" effectively="" inhibited="" the="" decrease="" of="" cat,="" sod,="" gsh-px="" activities,="" and="" the="" mda="" content="" in="" the="" skin="" of="" mice,="" compared="" to="" those="" in="" the="" mice="" skin="" of="" the="" m="" group,and="" was="" positively="" correlated="" with="" the="" dose="" of="" cps;="" there="" were="" significant="" differences="" among="" the="" different="" dose="" groups=""><0.05). when="" ros,="" accumulated="" by="" skin="" oxidative="" stress,="" exceed="" the="" antioxidant="" defense="" ability="" of="" the="" body,="" they="" destroy="" the="" ecm,="" which="" is="" the="" key="" cause="" of="" skin="" aging.="" ros="" can="" cause="" the="" oxidation="" of="" lipids="" and="" proteins="" in="" the="" skin,="" resulting="" in="" fibroblast="" degeneration="" and="" changes="" in="" the="" skin.="" ros="" activates="" the="" mapk="" signaling="" pathway="" and="" the="" ap-1="" protein="" to="" upregulate="" the="" expression="" of="" mmps="" and="" promote="" the="" degradation="" of="" matrix="" collagen="" [21].="" although="" the="" antioxidant="" enzymes="" and="" antioxidants="" in="" the="" body="" can="" remove="" ros="" to="" protect="" the="" skin="" from="" damage,="" when="" the="" content="" of="" rosexceeds="" the="" defense="" (antioxidant)="" ability="" of="" the="" body="" or="" the="" body's="" defense="" ability="" declines,="" it="" causes="" oxidative="" stress="" and="" skin="">

بالإضافة إلى ذلك ، فإن الاستجابة الالتهابية الخلوية التي تسببها أنواع الأكسجين التفاعلية تساهم أيضًا في شيخوخة الجلد. بعد العلاج بالأشعة فوق البنفسجية وجالاكتوز D (المجموعة M) ، زاد محتوى IL -1 في جلد الفئران بشكل ملحوظ مقارنة بالمجموعة N (الشكل ثلاثي الأبعاد) ، مما يشير إلى أن الجلد أظهر استجابة التهابية كبيرة (ص<0.05). the="" cps="" significantly="" reduced="" the="" content="" of="" il-1α="" in="" the="" skin="" in="" a="" dose-dependent="" manner,="" compared="" to="" that="" in="" the="" skin="" of="" mice="" in="" the="" m="" group.="" there="" was="" a="" significant="" difference="" between="" hcps="" and="" lcps=""><0.05), indicating="" that="" cps="" alleviated="" skin="" inflammation.="" the="" o2="" produced="" by="" ultraviolet="" irradiation="" stimulated="" the="" expression="" of="" mmp-1="" in="" dermal="" fibroblasts="" through="" the="" secretion="" of="" il-1α="" and="" il-6,="" thereby="" disrupting="" the="" ecm="" [33].="" therefore,="" this="" study="" suggested="" that="" cps="" significantly="" increased="" the="" activity="" of="" skin="" antioxidant="" enzymes="" and="" inhibited="" inflammatory="" responses,="" which="" might="" be="" important="" in="" delaying="" skin="" aging="" in="">

3.4. آلية عمل CPs الغذائية في التخفيف من شيخوخة الجلد

3.4.1. تحليل والتحقق من صحة بيانات RNA-Seq

Analysis techniques, such as PCA, HCA, gene GO enrichment, and KEGG pathway enrichment were used to analyze the transcriptome data. Based on the PCA analysis (Figure 4A)and hierarchical clustering analysis (heat map)of 4303 differential genes with average channel strength greater than 100, the relative expression levels of total DEGs between the two treatment groups are shown to provide an overview of the changes in gene expression(Figure 4B).The M group and the HCP group were significantly separated, and the expression patterns of most DEGs in the M and HCP groups were opposite, indicating that there were significant differences between the mouse skin after HCP treatment and the M group(Figure 4A,B).Pairwise comparisons showed that after feeding HCPs, 4303 genes were significantly expressed in the mice's skin, including 1790 upregulated genes and 2513 downregulated genes(Foldchange>2,p<0.05)(figure 4c).among="" the="" six="" genes="" associated="" with="" skin="" aging="" quantified="" by="" qrt-pcr,="" five="" genes(including="" fos,="" jun,="" cxcl1,="" and="" egr1)were="" downregulated,="" and="" one="" gene="" was="" upregulated(figure="" 4d),="" which="" was="" consistent="" with="" the="" overall="" trend="" of="" transcriptomic="" data.="" the="" rna="" expression="" levels="" of="" fos,="" jun,="" and="" cxcll="" were="" significantly="" upregulated="" in="" damaged="" skin="" compared="" to="" that="" in="" intact="" skin="" [34],="" and="" inhibition="" of="" egr1="" expression="" alleviated="" skin="" inflammation="" [35].="" these="" results="" reflected="" the="" reliability="" of="" transcriptome="" sequencing="" data,="" and="" oral="" cps="" effectively="" alleviated="" skin="">

قدم تحليل التخصيب وتحليل إثراء قاعدة بيانات KEGG الدعم لمزيد من التحقيق في الوظائف البيولوجية لـ DEGs. أظهر تحليل GO أن DEGs تم إثرائها بشكل كبير في العمليات البيولوجية مثل تكرار الحمض النووي وتنظيم تكوين الدم وتنظيم نشاط الهيدرولاز وإنتاج السيتوكين ؛ في مكونات الخلايا ، والتي تضمنت فجوة ليتي وليزوزوم ، تم إثراء الجينات المحتوية على الكولاجين وغيرها من الجينات ذات الصلة بشكل كبير ؛ من حيث الوظيفة الجزيئية ، تم إثراء نشاط مستقبلات يجند ، نشاط السيتوكين ، والجينات الأخرى ذات الصلة بشكل كبير (الشكل 5). يوضح الشكل 5. تحليل تخصيب KEGG لأول 20 مسارًا للإشارة تم تغييرها بشكل كبير بواسطة DEGs. تفاعل مستقبلات السيتوكين ، الليزوزوم ، تفاعل مستقبلات الليجند النشط عصبيًا ، دورة الخلية ، الذئبة الحمامية الجهازية ، ومسار TGF (p<0.05)were closely="" related="" to="" aging,="" especially="" cytokine-receptor="" interactions,="" lysosomes,="" and="" tgf-βsignaling.="" an="" important="" feature="" of="" cellular="" senescence="" is="" the="" accumulation="" of="" damaged="" organelles="" and="" protein="" aggregates.="" lysosomes="" play="" an="" important="" role="" in="" degrading="" damaged="" organelles="" and="" protein="" aggregates="" in="" senescent="" cells="" [36].="" cytokine-receptor="" interaction="" is="" the="" main="" pathway="" of="" enrichment="" in="" the="" skin="" after="" being="" affected="" by="" various="" factors="" such="" as="" inflammation="" [37],="" sulfur="" mustard="" exposure="" [38],="" and="" terahertz="" pulse="" [39].="" cytokines,="" as="" small="" molecular="" proteins="" synthesized="" and="" secreted="" by="" various="" tissue="" cells,="" maintain="" skin="" homeostasis="" by="" controlling="" the="" balance="" between="" keratinocyte="" proliferation,="" differentiation,="" and="" apoptosis="" through="" complex="" interactions="" with="" growth="" factors="" [40].="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" is="" also="" important="" for="" regulating="" skin="" aging="" [14].="" gene="" functional="" enrichment="" analysis="" showed="" that="" tgf-β="" was="" highly="" expressed="" during="" cytokine-receptor="" interaction="" and="" in="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway.="" tgf-β="" is="" a="" major="" pro-fibrotic="" cytokine="" that="" regulates="" cell="" differentiation="" and="" proliferation="" while="" inducing="" extracellular="" matrix="" protein="" synthesis="" [41.="" therefore,="" we="" verified="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" and="" some="">

3.4.2. التحقق من آلية عمل CPs في التخفيف من شيخوخة الجلد

للتحقق من دور مسار إشارات TGF- وتفاعل مستقبلات السيتوكين في التخفيف من شيخوخة الجلد عن طريق CPs عن طريق الفم ، تم إجراء تحليل WB للتحقق من عامل TGF- والنسخ Smad2 / 3 في مسار إشارات TGF ، وكذلك المفتاح عامل النسخ AP -1 (c-Fos و c-Jun) الذي ينظم السيتوكينات. تم تحديد محتويات MMP -1 و MMP -3 و Type I pro-collagen و I -1 بواسطة ELISA. أظهرت نتائج تحليل WB أن تعبير TGF- و Smad2 و Smad3 في المجموعة M كان أقل بكثير من التعبير في المجموعة N (p).<0.05). the="" expression="" levels="" of="" tgf-β="" and="" smad3="" were="" significantly="" higher="" in="" mice="" after="" the="" oral="" administration="" of="" cps="" compared="" to="" their="" levels="" in="" group="" m="" mice;="" additionally,="" smad2="" also="" increased="" significantly=""><0.05), except="" for="" in="" the="" lcps="" in="" a="" dose-dependent="" manner="" (figure="" 6).="" on="" the="" contrary,="" the="" expression="" of="" c-fos="" and="" c-jun="" in="" the="" m="" group="" was="" significantly="" higher="" than="" that="" in="" the="" n="" group.="" the="" expression="" of="" c-fos="" and="" c-jun="" in="" the="" cp="" group="" was="" significantly="" lower="" than="" that="" in="" the="" m="" group,="" except="" for="" the="" expression="" of="" c-jun="" in="" the="" lcp=""><0.05), and="" the="" change="" was="" dose-dependent.="" these="" results="" indicated="" that="" the="" tgf-β="" signaling="" pathway="" was="" activated="" and="" ap-1="" was="" inhibited="" after="" feeding="">

بروتين AP -1 هو مركب قاتم من بروتينات عائلة Jun و Fos وهو منظم مهم لالتهاب الجلد والتعبير الخلوي. بشكل عام ، يُظهر المركب المكون من c-Jun و c-Fos أعلى نشاط نسخي في الجلد [41 ، A42]. تعمل أنواع الأكسجين التفاعلية التي يتم إنتاجها في خلايا الجلد المسنة أولاً على تنشيط بروتين AP -1 ثم تنظيم السيتوكينات في اتجاه مجرى الدم (مثل IL -1) و MMPs ومسار إشارات TGF من خلال النسخ والترجمة ، مما يسهل شيخوخة الجلد [43 ، 44]. تفاعل إشارات TGF- / Smad هو مسار تخليق الكولاجين الكلاسيكي ، وعامل نسخ Smad هو جوهر مسار تحويل الإشارة هذا. TGF- يطلق الفسفرة وتنشيط المصب Smad2 و Smad3 من خلال الارتباط بالمستقبل ، وبالتالي زيادة تخليق COLI [14].

بالإضافة إلى ذلك ، أظهرت نتائج ELISA أن محتوى MMP -1 و MMP -3 و IL-l في جلد المجموعة M كان أعلى بكثير من محتوى المجموعة N ، ومحتوى النوع كان I pro-collagen أقل بكثير (ص<0.05). however,="" the="" contents="" of="" mmp-1,="" mmp-3,="" and="" il-1α(figure="" 3d)in="" the="" skin="" after="" oral="" administration="" of="" cps="" were="" significantly="" lower="" than="" those="" in="" the="" m="" group="" (p=""><0.05); type="" i="" pro-collagen="" increased="" significantly,="" and="" all="" the="" changes="" were="" dose-dependent="" with="" cps="" (figure="" 7).="" mmps="" are="" involved="" in="" the="" decomposition="" of="" skin="" collagen,="" il-1α="" shows="" the="" level="" of="" inflammation="" of="" the="" skin,="" and="" type="" i="" pro-collagen="" reflects="" the="" synthesis="" of="" skin="" collagen.="" accumulating="" evidence="" suggests="" that="" the="" role="" of="" the="" jun/ap-1="" protein="" pathway="" has="" also="" been="" proposed="" to="" regulate="" skin="" inflammation="" [40].="" the="" elisa="" results="" showed="" that="" the="" combined="" treatment="" of="" uv="" and="" d-galactose="" caused="" skin="" collagen="" degradation,="" decreased="" collagen="" synthesis,="" and="" caused="" skin="" inflammation,="" leading="" to="" skin="" aging.="" however,="" these="" changes="" were="" reversed="" after="" the="" oral="" administration="" of="">

بالإضافة إلى المسارات المذكورة أعلاه ، في هذه الدراسة ، تم إثراء الجينات التي تم تنظيمها بعد علاج الشلل الدماغي بشكل كبير في مسار الليزوزوم ، مما يشير إلى أن علاج CP ينشط الجسيم في الجلد (الشكل 5). تشير الدراسات السابقة إلى أن الجسيمات الحالة المنشطة تزيل التكتلات وتزيد من تنشيط الخلايا الجذعية العصبية المتشيخة أثناء الشيخوخة [45]. بالإضافة إلى ذلك ، فإن زيادة وظيفة الجسيمات الحالة يمكن أن تقلل من تركيز ROS داخل الخلايا لمنع سكون الخلية. وبالمثل ، فإن أي انخفاض في وظيفة الجسيمات الحالة يمكن أن يعزز تركيز ROS داخل الخلايا الذي يعزز في النهاية سكون الخلية [46]. على الرغم من أننا لم نتحقق منه بشكل منهجي في هذه الورقة ، إلا أن هذه النتائج والتقارير السابقة تشير إلى أن تنشيط الوظيفة الليزوزومية قد يكون الطريقة الرئيسية للـ CP للتخفيف من شيخوخة الجلد ، وسنواصل السعي للتحقق من ذلك.

لذلك ، أظهرت هذه الدراسة أن الـ CPs الغذائية يمكن أن تخفف من شيخوخة الجلد التي تسببها الأشعة فوق البنفسجية والجالاكتوز D بطريقة تعتمد على الجرعة. تخفف CPs من شيخوخة الجلد عن طريق خفض مستويات أكسدة الجلد ، وتثبيط التعبير عن عوامل النسخ الرئيسية AP -1 (c-Jun و c-Fos) ، وتفعيل مسار إشارات TGF- / Smad لتعزيز تخليق الكولاجين ، مما يمنع التعبير عن MMP -1 و MMP -3 (يمنعان تدهور الكولاجين) ، ويمنعان التهاب الجلد للتخفيف من شيخوخة الجلد (الشكل 8). علاوة على ذلك ، النتائج التي توصلنا إليها في الوقت الحاضر

4 - نتائج

باختصار ، أكدت هذه الدراسة أن المكملات الغذائية لببتيدات كولاجين عظام الدجاج يمكن أن تخفف بشكل كبير من شيخوخة الجلد الناتجة عن الأشعة فوق البنفسجية و D-galactose من خلال مسارات متعددة ، والتي تشمل تعزيز تخليق الكولاجين ، وتثبيط تدهور الكولاجين ، وتحسين مستوى مضادات الأكسدة في الجلد ، وتثبيط اشتعال؛ كان التخفيف يعتمد على الجرعة مع CPs. أظهر تحقيق مفصل أن CPs تقلل أولاً مستوى أكسدة الجلد ، وتمنع التعبير عن عامل النسخ الرئيسي AP -1 (c-Jun و c-Fos) ، ثم تنشيط مسار إشارات TGF- / Smad لتعزيز تخليق الكولاجين ، يمنع التعبير عن MMP -1 و MMP -3 لمنع تدهور الكولاجين ، وتثبيط التهاب الجلد للتخفيف من شيخوخة الجلد في الفئران. بالإضافة إلى ذلك ، قد يكون تنشيط الجسيمات الحالة أيضًا هو المسار الرئيسي للـ CPs للتخفيف من شيخوخة الجلد ، وهو أمر يستحق متابعة البحث والتحقق. توفر هذه النتائج أساسًا نظريًا لتطبيق ببتيدات الكولاجين للتخفيف من شيخوخة الجلد وتوسيع نطاق الاستخدام الشامل للمنتجات الثانوية الحيوانية في الأطعمة الوظيفية.

مساهمات المؤلف: تم تصميم المخطوطة وقياسها وكتابتها ؛ قامت ZX و HT بتصميم وتنقيح المخطوطة ؛ إرشادات منهجية مقدمة من YL ؛ قام CGand Y بمراجعة المخطوطة. قرأ جميع المؤلفين النسخة المنشورة من المخطوطة ووافقوا عليها.

تم استخلاص هذه المقالة من Nutrients 2022، 14، 1622. https://doi.org/10.3390/nu14081622 https://www.mdpi.com/journal/nutrients