هل مستخلصات Cistanche مفيدة لعلاج مرض باركنسون (مرض باركنسون)؟

الاتصال:joanna.jia@wecistanche.com

مقدمة: طفرة DJ-1 هي سبب مسبب للعائلةمرض باركنسون(PD). Leucine166Proline (L166P) و C106S هما طفرات DJ-1 مهمة. في هذه الدراسة ، أنشأنا بيروكسيد الهيدروجين (H ، O) المستحث L166P و C106S DJ-1-1-transected neuroblastoma (SH-SY5Y) نماذج خلوية من PD (مرض باركنسون) والتحقيق في آثارمقتطفات سيستانشوالمركبات النشطة بيولوجيا الرئيسية ، بما في ذلك acteoside و echinacoside وحمض الكافيين و Cistanche إجمالي جليكوسيدات في هذين النموذجين. الطرق: بعد التعبير عن بلازميدات L166P و C106S DJ-1 الموسومة بالعلم في الإشريكية القولونية ، تم جمع البلازميدات المعبر عنها ، ومعالجتها بإنزيم تقييد ، وتحديد تحديدها باستخدام الرحلان الكهربائي للحمض النووي. بعد التنقية ، تم نقل بلازميدات L166P DJ-1 و C106S DJ-1 بشكل منفصل إلى خلايا SH-SY5Y باستخدام الجسيمات الشحمية. تم الكشف عن خلايا SH-SY5Y المنقولة عن طريق النشاف الغربي والكيمياء المناعية. تم تحديد صلاحية الخلية باستخدام فحص MTT.

النتائج: أظهر كل من النشاف الغربي والكيمياء المناعية أن L166P و C106S DJ-1 تم التعبير عنهما بشكل كبير في خلايا SH-SY5Y المنقولة. أظهرت اختبارات MTT أن النقل مع L166P أو C106S DJ-1 قلل من صلاحية خلايا SH-SY5Y المعرضة ل H ، O ، مقارنة بخلايا SH-SY5Y غير المنقولة. بالإضافةمقتطفات سيستانشوالمركبات النشطة بيولوجيا الرئيسية ، بما في ذلك acteoside و echinacoside وحمض الكافيين و Cistanche الكلي جليكوسيدات ، تمنع بشكل كبير انخفاض صلاحية الخلايا الناجمة عن H و O و inL166P و C106S DJ-1-transfected SH-SY5Y الخلايا. الاستنتاجات: تشير هذه النتائج إلى أننا نجحنا في إنشاء نماذج خلايا SH-SY5Y حساسة ومستقرة H و O و L166P DJ-1 و C106S DJ-1 المنقولة من PD(مرض باركنسون)ومقتطفات سيستانشوبالتالي قد يكون مفيدا لعلاج مرض باركنسون(مرض باركنسون).

سيستانشاستخراج له العديد من الفوائد

انقر هنا للجزء 1

مناقشة

طفرات DJ‐1 هي من الارتباط الوثيق مع PD الصبغي الجسدي المتنحي المبكر الحدوث(مرض باركنسون)(بونيفاتي وآخرون، 2003؛ بارك وآخرون، 2015). في إحدى العائلات الإيطالية ، السبب هو طفرة سوء الفهم في DJ‐1 (L166P) (Bonifati et al.، 2003). يتمركز Leu‐166 في منتصف الحلزون الطرفي C (Bonifati et al.، 2003). من المحتمل أن يؤدي وجود Pro ، وهو قاطع حلزوني قوي ، إلى زعزعة استقرار الحلزون الطرفي في متحور DJ‐1 (Bonifati et al.، 2003) ، مما يؤدي إلى تكشف الجزء C-terminal من البروتين ، مما قد يضعف تشكله المثلي (Bonifati et al.، 2003). في الخلايا المنقولة ، L166P DJ‐1 غير مستقر بسبب التدهور المفرط (Bonifati et al.، 2003; غورنر وآخرون، 2004؛ مور ، تشانغ ، داوسون ، وداوسون ، 2003). اقترح Bonifati et al. (2003) أن طفرة L166P تضعف التجانس والوظيفة الطبيعية ل DJ-1 ، وبالتالي تؤدي إلى البداية المبكرة ل PD(مرض باركنسون).

في هذه الدراسة ، وجدنا أن L166P DJ-1 موجود داخل بوليمر / مركب بكتلة جزيئية تبلغ 70 kDa في خلايا SH-SY5Y المنقولة. كان من المفترض أن يعتمد هيكل DJ-1 نفس بنية a/βsandwich مثل البروتياز PH1704 (Bonifati et al.,2003). نظرا للهياكل المتشابهة ل DJ-1 و PH1704 ، افترضنا أنه ، مثل PH1704 ، يشكل DJ-1 مجاميع أعلى (تقليم المخفتات). أظهر Gorner et al. (2004) أنه داخل الخلايا المنقولة والخلايا الليمفاوية في PD(مرض باركنسون)المرضى ، L166P DJ-1 أحادي موجود داخل الهياكل العليا في الخلايا المنقولة والخلايا الليمفاوية من PD(مرض باركنسون)المرضي. قد يكون هذا نتيجة مباشرة لاختلال بروتين L166P DJ-1 أو تكوين مجمعات بين L166P DJ-1 الأحادي والبروتينات الأخرى. علاوة على ذلك ، بالإضافة إلى بنية البروتين ، غيرت طفرة L166P DJ-1 أيضا الوظيفة المضادة للأكسدة ل DJ-1 (Macedo et al.، 2003; Taira et al,2004). هذا جدير بالملاحظة ، لأن الإجهاد التأكسدي هو عامل مهم في PD(مرض باركنسون)، وكانت خلايا SH-SY5Y المنقولة باستخدام L166P DJ-1 أكثر حساسية ل H، O، من الخلايا غير المنقولة. جنبا إلى جنب مع الأبحاث السابقة التي تفيد بأن خلايا DJ-1 من النوع البري المنقولة SH-SY5Y قد تم إنشاؤها بنجاح في مختبرنا (Zhang, Wang,& Pu,2007) ، نقترح أن H ، O ، المستحثة L166P DJ-1-transfected SH-SY5Ycells هي نموذج خلوي جديد مفيد ل PD(مرض باركنسون).

سيستانشاستخراج يمكن أن تمنعمرض باركنسون

وقد أبلغ عن أن DJ-1 يقلل من الإجهاد التأكسدي (Taira et al, 2004; تشو وحرر، 2005). واحدة من الآليات هي أكسدة البروتين نفسه (Taira et al.، 2004). من بين بقايا Cys الثلاثة من DJ-1 ، Cys-106 هو الأكثر حساسية للإجهاد التأكسدي. وعلاوة على ذلك، فإن

يتم تنظيم الوظيفة المضادة للأكسدة ل DJ-1 من خلال أكسدة Cys-106 (Freed & Zhou,2006) ، وطفرة Cys-106 تؤدي إلى فقدان الوظيفة المضادة للأكسدة ل DJ-1 (Blackinton et al,2009; كينومي، كيماتا، تايرا، أريغا، ونيكي، 2004). يعمل DJ-1 أيضا كمرافق جزيئي يمنع تكوين مجاميع α-synuclein (Shendelman et al.,2004) عندما يتأكسد Cys-106 إلى حمض السلفينيك (Zhou & Freed,2005). تشير هذه النتائج إلى أن Cys-106 هو مساهم رئيسي في وظيفة DJ-1 المناسبة. كما هو موضح في الجدول 1 ، كانت خلايا SH-SY5Y المنقولة مع C106S DJ-1 أكثر حساسية ل H ، O ، من الخلايا غير المنقولة. استنادا إلى البحث السابق (Zhang et al.,2007) ، يشير هذا أيضا إلى أن خلايا H ، O ، المستحثة C106S DJ-1-transfected SH-SY5Y قد تكون أيضا نموذجا خلويا مفيدا ل PD(مرض باركنسون).

باستخدام خلايا SH-SY5Y المنقولة باستخدام L166P DJ-1 أو C106S DJ-1 ، اكتشفناتأثير مستخلصات سيستانشوالمركبات النشطة بيولوجيا الرئيسية ، بما في ذلك أكتيوسيد ، إشيناكوسيد ، حمض الكافيين ، وجليكوسيدات Cistanche الكلية على HO ، مما أدى إلى انخفاض في صلاحية الخلايا. تظهر النتائج الحالية أن أكتيوسيد ، إشيناكوسيد ، حمض الكافيين ، وجليكوسيدات Cistanche الكلية كلها زادت من صلاحية الخلايا بطريقة تعتمد على التركيز ، مما يشير إلى وجود علاقة مستقرة وخطية بين مستويات L166P DJ-1 و C106S DJ-1 وجدوى خلية SH-SY5Y.

باختصار ، نجحنا في إنشاء نماذج خلايا SH-SY5Y حساسة ومستقرة من طراز H-SY5Y المستحثة من طراز L166P DJ-1 و C106S DJ-1 من PD(مرض باركنسون)وأكدت أنمقتطفات سيستانشخفف من السمية العصبية الناجمة عن H ، O ، في هذين النموذجين. نتوقع أن يتم استخدام هذين النموذجين الخلويين بشكل فعال ل PD(مرض باركنسون)البحوث ومقتطفات سيستانشوبالتالي قد يكون مفيدا لعلاج مرض باركنسون(مرض باركنسون)في المستقبل.

فوائد مستخلصات Cistanche: مضادمرض باركنسون

مراجع

1. أبو سليمان ، ب. م ، هيلي ، د. ج. ، كوين ، ن. ، ليز ، أ. ج. ، وود ، ن. و. (2003). دور طفرات DJ‐1 المسببة للأمراض في عدم ارتياح مرض باركنسون. حوليات علم الأعصاب ، 54 ، 283-286. https://doi.org/10.1002/ (ISSN)1531‐8249

2. أندريس ماتيوس ، E. ، بيرير ، C ، تشانغ ، L. ، بلانشارد فيليون ، B. ، غريكو ، T. M. ، توماس ، B. ، ... داوسون ، ف. ل. (2007). يكشف حذف جين DJ‐1 أن DJ‐1 هو بيروكسيديز غير نمطي يشبه البيروكسيدياز. وقائع الأكاديمية الوطنية للعلوم في الولايات المتحدة الأمريكية، 104، 14807-14812. https://doi.org/10.1073/pnas.0703219104

3. بيوسا، أ.، ساندريلي، ف.، بلتراميني، م.، جريجيو، إ.، بوباكو، ل.، وبيساجليا، م. (2017). النتائج الحديثة حول الوظيفة الفسيولوجية ل DJ‐1: Beyondمرض باركنسون. البيولوجيا العصبية للأمراض ، 108 ، 65-72. https://doi.org/10.1016/j.nbd.2017.08.005

4. بلاكينتون ، ج. ، لاكشميناراسيمهان ، م. ، توماس ، ك. ج. ، أحمد ، ر. ، جريجيو ، إ. ، رازا ، أ. س. ، ويلسون ، م. أ. (2009). يعد تكوين حمض سلفينيك السيستين المستقر أمرا بالغ الأهمية لوظيفة الميتوكوندريا لبروتين باركنسون DJ‐1. مجلة الكيمياء البيولوجية ، 84 ، 6476-6485. https://doi.org/10.1074/jbc.M806599200

5. بونيفاتي، ف.، ريزو، ب.، سكويتيري، ف.، كريغر، إ.، فاناكور، ن.، فان سويتن؛ ج. س. ، ... هيوتينك ، ب. (2003). DJ‐1 (DJ‐1) ، هو جين جديد للباركنسون الصبغي الجسدي المتنحي المبكر الظهور. العلوم العصبية ، 24 ، 159-160. https://doi.org/10.1007/s10072‐003‐0108‐0

6. بونيفاتي ، ف. ، ريزو ، ب. ، فان بارين ، م. ج. ، شاب ، أو ، بريدفيلد ، ج. ج. ، كريجر ، إي ، ... فان سويتن ، ج. س. ، وآخرون (2003). الطفرات في جين DJ‐1 المرتبط بالصبغي الجسدي المتنحي المبكر الظهور القريب. العلوم ، 299 ، 256-259.

7. بيرك ، ر. إ. ، وأومالي ، ك. (2013). انحطاط المحور العصبي في عدم ارتياح مرض باركنسون. علم الأعصاب التجريبي ، 246 ، 72-83. https://doi.org/10.1016/j. إكسبنيورول.2012.01.011

8. ديكستر ، د. ت. ، كارتر ، سي ، ويلز ، ف. ر. ، جافوي أجيد ، ف. ج. ، أجيد ، ي. ، ليز ، أ. ج. ، مارسدن ، س. د. (1989). يزداد بيروكسيد الدهون القاعدية في المادة السوداء فيمرض باركنسون. مجلة الكيمياء العصبية ، 52 ، 381-389. https://doi.org/10.1111/j.1471

9. ديكستر ، د. ت. ، هولي ، أ. إ. ، فليتر ، دبليو دي ، سلاتر ، ت. ف. ، ويلز ، ف. ر. ، دانيال ، س. إ. ، ... مارسدن ، سي دي (1994). زيادة مستويات هيدروبيروكسيدات الدهون في المادة النيوزيلندية الباركنسونية: دراسة HPLC و ESR. اضطرابات الحركة ، 9 ، 92-97.

10. Freed, C. R., & Zhou, W. (2006). يحمي DJ‐1 الخلايا العصبية الدوبامين عن طريق التنشيط الانتقائي إما للجلوتاثيون أو بروتين الصدمة الحرارية. علم الأعصاب التجريبي ، 198 ، 558-597.

11. Glizer، D.، & MacDonald، P. A. (2016). التدريب المعرفي فيباركنسونمرضاستعراض الدراسات من عام 2000 إلى عام 2014.:باركنسونمرض, 2016, 9291713. https://doi.org/10.1155/2016/9291713

12. غورنر ، ك. ، هولتورف ، إي ، أودوي ، س. ، نوشر ، ب. ، ياماموتو ، أ. ، ريجولا ، ج. ت. ، كاهل ، ب. ج. (2004). الآثار التفاضلية لباركنسونمرضالطفرات المرتبطة على استقرار وطي DJ‐1. مجلة الكيمياء البيولوجية ، 279 ، 6943-6951. https://doi.org/10.1074/jbc.M3092

13. لاهاي ، س. ، روغايفا ، إي ، هرنانديز ، د. ، غوليك ، سي ، سينغلتون ، أ. ، هانسون ، م. ، ... سانت جورج هيسلوب ، ب. ه. ، وآخرون (2003). بداية مبكرةباركنسونمرضالناجمة عن طفرة DJ‐1 غير متجانسة الزيجوت. حوليات علم الأعصاب ، 54 ، 271-274. https://doi.org/10.1002/(ISSN)1531‐8249

14. كيم ، ر. ه. ، بيتر ، م. ، جانغ ، ي. ج. ، شي ، دبليو ، بينتيلي ، م. ، فليتشر ، ج. س. ، ... براي ، م. ر. ، وآخرون (2005). DJ‐1 ، منظم جديد لمثبط الورم PTEN. الخلية السرطانية ، 7 ، 263-273. https://doi.org/10.1016/j. ccr.2005.02.010

15. كينومي ، تي ، كيماتا ، ج. ، تايرا ، ت. ، أريغا ، إتش ، ، إي (2004). السيستين‐106 من DJ‐1 هو بقايا السيستين الأكثر حساسية للأكسدة بوساطة بيروكسيد الهيدروجين في الجسم الحي في الخلايا البطانية الوريدية السرية البشرية. اتصالات البحوث البيوكيميائية والفيزيائية الحيوية ، 317 ، 722-728. https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2004.03.110

16. كيتادا ، تي ، أساكاوا ، س. ، هاتوري ، ن. ، ماتسومين ، إتش ، يامامورا ، ي. ، مينوشيما ، س. ، ... شيميزو ، ن. (1998). تسبب الطفرات في جين باركين الصبغي الجسدي المتنحي للشباب. الطبيعة ، 392 ، 605-608. https://doi.org/10.1038/33416

17. ماسيدو ، م. ج. ، أنار ، ب. ، برونر ، إ. ف. ، كانيلا ، م. ، سكويتيري ، ف. ، بونيفاتي ، ف. ، ... ريزو ، ب. (2003). البروتين الطافر DJ‐1 L166P المرتبط بالبداية المبكرةباركنسونمرضغير مستقر ويشكل مجمعات بروتين أعلى مرتبة. علم الوراثة الجزيئية البشرية ، 12 ، 2807-2816.

18. مور ، د. ج. ، تشانغ ، ل. ، داوسون ، ت. م. ، وداوسون ، ف. ل. (2003). طفرة سوء فهم (L166P) في DJ‐1 ، مرتبطة بالأسرةباركنسونمرض، يمنح ثباتا منخفضا للبروتين ويضعف التعدد البسيط. مجلة الكيمياء العصبية ، 87 ، 1558-1567. https://doi.org/10.1111/ (ISSN)1471‐4159

19. مولارد ، أ. (2017). دواء السكري يظهر وعدا فيباركنسونمرض. مراجعات الطبيعة. اكتشاف المخدرات ، 16 ، 593.

20. ناغاكوبو، د.، تايكا، ت.، كيتورا، ه.، إيكيدا، م.، تاماي، ك.، إيغوتشي-أريغا، س. م. م.، وأغريا، ه. (1997). ، وهو جين ورمي جديد يحول خلايا الفأر NIH3T3 بالتعاون مع راس. اتصالات البحوث البيوكيميائية والفيزيائية الحيوية ، 231 ، 509-513. https://doi. org/10.1006/bbrc.1997.6132

21. نيكام ، س. ، نيكام ، ب. ، أهالي ، س. ك. ، وسونتاك ، أ. ف. (2009). الإجهاد التأكسدي فيباركنسونمرض. المجلة الهندية للكيمياء الحيوية السريرية ، 24 ، 98-101. https://doi.org/10.1007/s12291‐009‐0017‐y

22. ، ت. ، تاكاهاشي - ، ت. ، تايرا ، ت. ، إيغوتشي - أريغا ، س. م. م. ، وأغريا ، ه. (2003). DJBP: بروتين جديد ملزم ل DJ‐1 ، ينظم سلبا مستقبل الأندروجين عن طريق تجنيد مركب هيستون deacetylase ، و DJ‐1 يعادي هذا التثبيط عن طريق إلغاء هذا المجمع. أبحاث السرطان الجزيئي ، 1 ، 247-261.

فوائدسيستانشمقتطفات: علاجباركنسونمرض