الجزء 3: إشيناكوسيد معزول من Cistanche Tubulosa يفترض أنه يحفز إفراز هرمون النمو عن طريق تنشيط مستقبلات الجريلين
Mar 06, 2022
Echinacoside معزولة من Cistanche tubulosa يفترض أنه يحفز إفراز هرمون النمو عن طريق تنشيط مستقبلات الجريلين
تشيه جو وو 1، مي يين تشين 2، نان هي لين 1، يي تشياو لين 1، ون يينغ تشن 3، تشاو هسيانغ تشن 2،4،* وجيسون تي سي تزين 1،*
(1) المعهد العالي للتكنولوجيا الأحيائية، جامعة تشونغ - هسينغ الوطنية، تايتشونغ 402، تايوان؛ baby159357520@gmail.com (C.-J.W.)؛ CMNHEI@mohw.gov.tw (N.-H.L.)؛ s9755702@gmail.com (Y.-C.L.)
2 كو دا الدوائية المحدودة ، تاويوان 324 ، تايوان ؛ rd1@koda.com.tw
3 قسم الطب البيطري، جامعة تشونغ هسينغ الوطنية، تايتشونغ 402، تايوان؛ wychen@dragon.nchu.edu.tw
4 المعهد العالي للعقاقير، جامعة تايبيه الطبية، تايبيه 110، تايوان
* المراسلات: gm@koda.com.tw (C.-H.C.)؛ TCTZEN@dragon.nchu.edu.tw (J.T.C.T.)؛ هاتف: +886-4-22840328 (تحويلة 776) (J.T.C.T.)؛ فاكس: +886-4-22853527 (J.T.C.T.)
المحرر الأكاديمي: بيناروسا أفاتو
تاريخ الاستلام: 22 كانون الثاني/يناير 2019؛ تاريخ القبول: 14 شباط/فبراير 2019؛ نشر بتاريخ: 17 شباط/فبراير 2019
الاتصال:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساب: 008618081934791
تجريدي:سيستانشتم تسجيل الأنواع ، الجينسنغ في الصحراء ، لامتلاك العديد من الأنشطة البيولوجية في دستور الأدوية الصيني التقليدي وتم استخدامه كدواء مضاد للشيخوخة. ثلاثة جليكوسيدات فينيل يثانويد —إشيناكوسيد، توبولوسيد A، وأكتيوسيد - تم اكتشافها في مستخلص الماء منسيستانش توبولوزا(شينك) ر. وايت والمكون الرئيسي،إشيناكوسيد، تم تنقيته بشكل أكبر.إشيناكوسايدمن تركيز أعلى من 10_6 M أظهر نشاطا كبيرا لتحفيز إفراز هرمون النمو من خلايا الغدة النخامية الفئران. على غرار هرمون الإفراج عن هرمون النمو -6, تناظرية اصطناعية من الجريلين, تم تثبيط تحفيز إفراز هرمون النمو عن طريق إشيناكوسيد من قبل [D-Arg1, D-Phe5, D-Trp7,9, Leu11]-المادة P, ناهض عكسي من مستقبلات الجريلين. أظهرت النمذجة الجزيئية أن جميع جليكوسيدات الفينيل إيثانويد الثلاثة تفاعلت بشكل كاف مع جيب الربط لمستقبل الجريلين ، وأظهر إشيناكوسيد تفاعلا أفضل قليلا مع المستقبل من توبولونوسيد A وأكتيوسيد. تشير النتائج إلى أن جليكوسيدات الفينيل إي ثانويد ، وخاصة إشيناكوسيد ، هي مكونات نشطة يفترض أنها مسؤولة عن الآثار المضادة للشيخوخة ل C. tubulosa ويمكن اعتبارها تتطور كنظائر غير الببتيديل من الجريلين.
الكلمات الرئيسيه: سيستانشتوبولوسا.إشيناكوسيد; الجريلين. إفراز هرمون النمو.فينيل إيثانويدجليكوسيدات
إشيناكوسيدفيسيستانشله العديد من الآثار
الثابتة والمتنقلة انقر هنا إلى الجزء 2
4. المواد والأساليب
4.1. المواد الكيميائية والمواد النباتية
سيستانشتم الحصول على ديزرتيكولا Y.C. Ma من سوق محلي وتم توثيقها من قبل الدكتور نان هي لين.سيستانشتم شراء tubulosa (Schenk) R. Wight من Sinopharm Tian-Li Pharmaceutical Co.، Ltd. ، (هانغتشو ، الصين). تم شراء الأسيتونيتريل من الدرجة HPLC وحمض الفورميك والميثانول من شركة ECHO Chemical Co.، Ltd ، (Miaoli ، تايوان). تم شراء وسيط النسر المعدل من دولبيكو (DMEM) ، ومصل البقر الجنيني (DFBS) ، والتريبسين-EDTA من Invitrogen (كارلسباد ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية). DNase تم شرائي من Worthington Biochemical (Lakewood ، NJ ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم الحصول على هرمون الافراج عن هرمون النمو -6 (GHRP-6) من Gen Way Biotech, Inc. (سان دييغو، كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية). تم شراء الكولاجيناز من النوع الأول و [D-Arg1 و D-Phe5 و D-Trp7,9 و Leu11] من شركة سيغما ألدريتش (سانت لويس ، MO ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم شراء هرمون نمو الفئران ELISA عدة من شركة Sunred التكنولوجيا البيولوجية (شنغهاي، الصين).
4.2. HPLC / UV والتحليلات LC_MSn لاستخراج المياه من Cistanche spp.
الجذع المجفف (25 جم) منسيستانشديزرتيكولا واي سي ما أوسيستانشتم استخراج tubulosa (Schenk) R ثلاث مرات مع 500 مل من الماء المقطر لمدة 60 دقيقة عند 50 درجة مئوية في حمام مائي. تمت تصفية المحلول من خلال مرشح سوري 13 مم مع مرشح غشاء 0.45 um PP (Pall Corporation ، Glen Cove ، نيويورك ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، وخضع للتحليلات التالية. تم تحليل المكونات الكيميائية في المستخلصات
باستخدام عمود Syncronis C18 (4.6 × قطر داخلي 250 مم ، 5 أم ، Thermo Scientific ، Waltham ، MA ، الولايات المتحدة الأمريكية) في نظام HPLC إلى جانب كاشف مصفوفة الصمام الثنائي الضوئي طراز 600E (Waters Corporation ،
ميلفورد، ماساتشوستس، الولايات المتحدة الأمريكية). تألفت المرحلة المتنقلة من (أ) ماء يحتوي على 0.1٪ من حمض الفورميك و (ب) أسيتونيتريل. كان التدرج المائل على النحو التالي: 0-60 دقيقة ، تدرج خطي من 14٪ B. 0-3 دقائق ، 14٪ إلى 17٪ B ؛ 3-4 دقائق ، 17٪ ب ؛ 4-15 دقيقة ، 17٪ إلى 20٪ B ؛ 15-20 دقيقة ، 20٪ B ؛ 20-50 دقيقة ، 20٪ إلى 14٪ B ؛ 50–60
الحد الأدنى ، 14 ٪ ب. تم تعيين الطول الموجي للكشف عن امتصاص الأشعة فوق البنفسجية (UV) عند 330 نانومتر. تم توصيل مطياف كتلة ترادف (Thermo Electron ، سان خوسيه ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية) مزود بواجهة تأين الرش الكهربائي (ESI) بنظام Surveyor LC (Thermo Electron)
مع حلقة عينة 5 uL. كان التدرج المائل على النحو التالي: 0-90 دقيقة ، تدرج خطي من 14٪ B. 0-24 دقيقة ، 14٪ إلى 17٪ B ؛ 24-25 دقيقة ، 17٪ ب ؛ 25-36 دقيقة ، 17٪ إلى 20٪ B ؛ 36-37 دقيقة ، 20٪ ب ؛ 37-80 دقيقة،
20٪ إلى 14٪ ب ؛ 80-90 دقيقة، 14٪ ب. تم ضبط درجة الحرارة الشعرية الساخنة على 300 درجة مئوية مع جهد رش يبلغ 4.5 كيلو فولت. تم مسح وضع ESI السلبي أولا بدءا من m / z 400-1000. تم الحصول على MSN المعتمد على البيانات باستخدام الهيليوم عالي النقاء (>99.99٪) كغاز تصادم.
4.3. عزل إشيناكوسيد
تم تركيز مستخلص الماء من الجذع المجفف (25 جم) من C. tubulosa تحت ضغط منخفض لإعطاء شراب بني عميق. تم تعليق استخراج الخام بالماء المقطر وتجميده بواسطة مجفف تجميد. تم حل مسحوق 100 ملغ في ماء مقطر من 5 مل وخضع للتنقية باستخدام عمود Sephadex LH-20 (100 مل; GE Healthcare Bio-Sciences AB ، السويد) مع محلول الميثانول المائي بنسبة 10٪ ومراقبته بواسطة HPLC. تم الكشف عن الكسور التي تحتوي على إشيناكوسيد عن طريق قراءة الامتصاص عند 245 نانومتر وحصادها باستخدام جهاز أخذ العينات التلقائي.
4.4. الحيوانات
تمت الموافقة على التجارب من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها التابعة للجامعة الوطنية Chung_Hsing برقم موافقة IACUC 106-079. تم شراء ذكور الفئران Sprague_Dawley التي تزن 250_300 غرام من BioLASCO ، Taiwan Co.، Ltd. (تايبيه ، تايوان). تم الحفاظ على حيوانين لكل قفص في بيئة خاضعة للرقابة من 23 o2 ، ورطوبة 60 o 10٪ ، ودورة ضوء / مظلمة لمدة 12 ساعة. تم تغذية الفئران بنظام غذائي تشاو قياسي (السعرات الحرارية المقدمة)
بنسبة 28.7٪ بروتين ، 13.4٪ دهون ، و 57.9٪ كربوهيدرات ، 5001 Rodent LabDiet ، سانت لويس ، MO ، الولايات المتحدة الأمريكية) والماء المقطر ad.
4.5. زراعة خلايا الغدة النخامية الأولية
تم عزل خلايا الغدة النخامية وفقا لطريقة تشتت إنزيمي معدلة طورها يامازاكي وآخرون [29]. باختصار ، تم تخدير ذكور فئران Sprague Dawley باستخدام Zoletil 50 (40 mg / kg ، IP; تم إزالة مختبرات فيرباك ، كاروس ، فرنسا) ، والغدد النخامية الأمامية وتوزيعها على خلايا الغدة النخامية المستزرعة في التعليق ، كما هو موضح سابقا [30].
4.6. فحص إفراز هرمون النمو
تم زراعة خلايا الغدة النخامية الأمامية الأولية المكونة من 4 × 104 خلية / بئر عند 37 درجة مئوية تحت 5٪ CO2 لمدة يومين قبل فحص إفراز هرمون النمو وفقا للبروتوكول الموصوف سابقا [30].
بعد إزالة وسط الزرع، تم تجويع الخلايا في وسط النسر المعدل من دولبيكو الخالي من المصل (DMEM) لمدة 90 دقيقة لتحقيق الاستقرار في إفراز الهرمونات القاعدية. تم استبدال وسط التجويع ب DMEM طازج يحتوي على إشيناكوسيد (من 10_8 إلى 10_5 M) أو GHRP-6 (ناهض لمستقبل جريلين بشري ، GHSR ، 10_7 M) كعنصر تحكم إيجابي ، وتم احتضان الخلايا لمدة 15 و 30 دقيقة عند 37 درجة مئوية تحت 5٪ CO2. للكشف عن التأثير المضاد ، تم احتضان الخلايا باستخدام GHSR
ناهض عكسي ، [D-Arg1 ، D-Phe5 ، D-Trp7,9 ، Leu11] - مادة P (0.5 uM) ، ثم عولجت باستخدام DMEM يحتوي على إشيناكوسيد (10_5 M) أو GHRP-6 (10_7 M) لمدة 30 دقيقة. تم جمع الوسيط من أجل
تحديد إفراز هرمون النمو بواسطة هرمون نمو الفئران ELISA عدة (شنغهاي Sunred التكنولوجيا البيولوجية شركة).
4.7. التحليل الإحصائي
وقدمت البيانات كقيم متوسطة o SD. تم تحليل الاختلافات بواسطة T-Test. تم إجراء الحسابات الإحصائية بواسطة GraphPad Prism 6 (GraphPad Software Inc. ، La Jolla ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية). مستوى p< 0.05="" was="" considered="" to="" be="" statistically="">
4.8. نمذجة التماثل والالتحام
تم تأسيس نمذجة التماثل والالتحام بمستقبل جريلين بشري ، مستقبل إفراز هرمون النمو (GHSR ، رقم الانضمام AAI13548) ، من خلال اتباع بنائنا السابق [21,24]. باختصار ، تم استخدام الهياكل البلورية للمستقبلات الأدرينالية β1 و β2 (PDB 2YCY و 3PDS) مع روابط مرتبطة ، سيانوبيندولول ، و FAUC50 كقوالب لبناء بنية GHSR [31,32]. تم اختيار هيكل GHSR مع أقل طاقة إجمالية PDF لمزيد من الالتحام مع GHRP-6 و echinacoside و tubuloside A و acteoside. تم تنفيذ جميع عمليات النمذجة باستخدام النظام الأساسي Discovery Studio 2.1 (http://accelrys.com/).
تم تنزيل الهيكل ثلاثي الأبعاد ل GHRP-6 من قاعدة بيانات Pub-Chem المركبة على موقع NCBI على الويب (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/). تم بناء الهياكل ثلاثية الأبعاد من إشيناكوسيد ، توبولوزيد A ، و acteoside باستخدام برنامج Chem3D (http://www.cambridgesoft.com/). تم تعريف موقع ربط الرباط في GHSR على أنه الفضاء الكروي الذي يبلغ نصف قطره 14 Å من وسط جيب الربط في محاكاة الالتحام. تم تنفيذ التحام GHRP-6 أو echinacoside أو tubuloside A أو acteoside بموقع ربط GHSR في silico من خلال استخدام وحدة LibDock في حزمة Discover Studio 2.1 وتحسينها بشكل أكبر بواسطة خوارزمية التصغير الذكية مع حقل قوة CHARMm في حزمة Discover Studio 2.1 [33]. لمقارنة التقاربات الملزمة النسبية ل echinacoside و tubuloside A و acteoside في GHSR ، تم استخدام منطقة المركز النشطة التي تم بناؤها باستخدام GHRP-6 في GHSR للالتحام ، وتم حساب طاقة الربط بواسطة GEMDOCK (معهد المعلوماتية الحيوية ، جامعة تشياو تونغ الوطنية ، تايوان).
مساهمات المؤلف: التجارب على الحيوانات، C.-J.W، Y.-C.L.، و W.-Y.C.; تحديد الهوية والتنقية: M-Y.C.، N.-H.L.، و C.-H.C.؛ النمذجة الجزيئية: C.-J.W.، Y.-C.L.، و J.T.C.T.؛ تصميم المشروع وكتابته: C.-H.C. و J.T.C.T.
التمويل: تم دعم العمل جزئيا من خلال منحة إلى جيسون تي سي تزن من جامعة تشونغ هسينغ الوطنية (NCHU-102D604).
شكر وتقدير: يشكر المؤلفون تيان شون وينغ على مشاركة خبرته المهنية في استخدام أنواع Cistanche.
تضارب المصالح: يعلن جميع المؤلفين عدم وجود تضارب في المصالح.
مراجع
1. وانغ ، ت. ؛ تشانغ ، X. ؛ Xie, W. Cistanche deserticola YC Ma, "Desert ginseng": A Review. أ. ج. تشين. Med. 2012,40, 1123–1141. [CrossRef] [PubMed]
2. وانغ ، ت. ؛ تشن ، C. ؛ يانغ ، م. دنغ ، ب. كيربي, M.G.; تشانغ ، X. Cistanche tubulosa استخراج الإيثانول يتوسط مستويات هرمون الجنس الفئران عن طريق تحريض الإنزيمات الستيرويدية الخصية. Pharm. Biol. 2016, 54, 481–487. [CrossRef] [PubMed]
3. لين ، و. ي. ؛ تشون ، ي. جاك ، C. ؛ كاو ، س. ت. ؛ تساي ، ف. ج. ؛ Liu, H.P. المسارات الجزيئية المتعلقة بتعزيز طول العمر والتحسين المعرفي ل Cistanche tubulosa في ذبابة الفاكهة. الطب النباتي 2017 ، 26 ، 37-44. [CrossRef]
4. وو ، C.R. ؛ لين ، إتش سي. Su, M.H. الانعكاس بواسطة مستخلصات مائية من Cistanche tubulosa من العجز السلوكي في نموذج الفئران الشبيهة بمرض الزهايمر: الصلة لترسيب الأميلويد ووظيفة الناقل العصبي المركزي. BMC تكملة. الألترن. ميد 2014، 14، 202. [CrossRef]
5. شوان ، G.D. ؛ Liu, C.Q. Research on the effect of phenylethanoid glycosides (PEG) of the Cistanche deserticola on anti-aging in the old mice induced by D-galactose. تشونغ ياو تساي 2008، 31، 1385-1388. [PubMed]
6. جيانغ ، Y. ؛ Tu, P.F. تحليل المكونات الكيميائية في أنواع Cistanche. ج. كروماتوغر. 2009, 1216, 1970–1979. [CrossRef] [PubMed]
7. غاو ، C. ؛ وانغ، سي. Wu, G. Cistanche مجموع جليكوسيدات على تأثير الفئران الخرف الوعائي التعلم والذاكرة وآلية البحث. ذقن. عشب. Med. 2005, 36, 1852–1855.
8. لي ، ف. ؛ يانغ ، ي. تشو ، ب. ؛ تشن ، دبليو ؛ تشي، د. شي ، X. تشانغ ، C. ؛ يانغ ، Z. ؛ Li, P. Echinacoside يعزز تجديد العظام عن طريق زيادة نسبة OPG / RANKL في خلايا MC3T3-E1. فيتوتيرابيا 2012، 83، 1443–1450. [CrossRef]
9. شيمودا ، H. ؛ تاناكا، ج. تاكاهارا ، ي. تاكيموتو ، ك. ؛ شان ، س. ج. ؛ سو ، م. ه. آثار نقص الكوليسترول في الدم من استخراج Cistanche tubulosa ، وهو دواء خام تقليدي صيني ، في الفئران. أ. ج. تشين. Med. 2009, 37, 1125–1138. [CrossRef]
10. تانغ ، F. ؛ هاو ، ي. تشانغ ، X. ؛ Qin, J. تأثير إشيناكوسيد على تليف الكلى عن طريق تثبيط مسار إشارات TGF-β1 / Smads في نموذج الفئران DB / DB لاعتلال الكلية السكري. المخدرات ديس ديفيل. ثير. 2017, 11,2813–2826. [CrossRef]
11. شيونغ ، دبليو تي ؛ غو ، ل. ؛ وانغ، سي. الأحد ، H.X. ؛ Liu, X. الآثار المضادة لارتفاع السكر في الدم ونقص الدهون من Cistanche tubulosa في الفئران DB / DB السكري من النوع 2. ج. إثنوفارماكول. 2013, 150, 935–945. [CrossRef] [PubMed]
12. باو ، X.X. ؛ ما ، ه. دينغ، ه.; لي, W.W.; Zhu, M. التحسين الأولي لصيغة الأدوية العشبية الصينية على أساس التأثيرات الوقائية العصبية في نموذج الفئران لمرض باركنسون الناجم عن الروتينون. ياء - التكامل. Med. 2018, 16, 290–296. [CrossRef] [PubMed]
13. كوجيما ، م. ؛ هوسودا ، H. ؛ التاريخ، Y.; ناكازاتو، م. ماتسو ، ه. Kanagawa, K. Ghrelin هو الببتيد الأسيلي الافراج عن هرمون النمو من المعدة. طبيعة 1999 ، 402 ، 656-660. [CrossRef] [PubMed]
14. زيغمان ، ج. م. ؛ جونز, J.E.; لي، سي إي؛ سابر ، سي بي ؛ Elmquist, J.K. التعبير عن مستقبلات الجريلين mRNA في دماغ الفئران والفئران. J. Comp. Neurol. 2006, 494, 528–548. [CrossRef] [PubMed]
15. كاستانيدا ، تي آر ؛ تونغ ، ج. داتا، ر. كولر، م. Tschop ، M.H. Ghrelin في تنظيم وزن الجسم والتمثيل الغذائي. أمام. الغدد الصماء العصبية. 2010, 31, 44–60. [CrossRef] [PubMed]
16. رودمان ، د. ؛ فيلر، أ.ج.; ناجراج ، إتش إس ؛ الألمان, G.A.; لاليثا ، بي واي ؛ غولدبرغ، أ. ف. شلنكر، ر. أ. كوهن ، ل. ؛ رودمان ، I.W. ؛ ماتسون, D.E. آثار هرمون النمو البشري في الرجال الذين تزيد أعمارهم عن 60 عاما. N. Engl. J. Med. 1990, 323, 1–6. [CrossRef] [PubMed]
17. ليو ، H. ؛ برافاتا, D.M.; أولكين ، I. ؛ ناياك ، س. ؛ روبرتس ، ب. غاربر، أ.م. هوفمان, A.R. مراجعة منهجية: سلامة وفعالية هرمون النمو في كبار السن الأصحاء. آن متدربة. Med. 2007, 146, 104–115. [CrossRef] [PubMed]
18. جيوردانو ، ر. ؛ بونيلي ، ل. ؛ مارينازو ، إي ؛ غيغو، إي. Arviat, E. العلاج بهرمون النمو في شيخوخة الإنسان: الفوائد والمخاطر. الهرمونات 2008 ، 7 ، 133-139. [CrossRef] [PubMed]
19. ساتلر, F.R. هرمون النمو في الذكور الشيخوخة. أفضل ممارسة. القرار كلين. إندوكرينول. 2013, 27, 541–555. [CrossRef]
20. لو ، ي. ه. تشن ، ي. ج. تشانغ ، سي آي. لين ، ي. و. تشن ، سي واي ؛ لي, M.R.; لي, V.S.; Tzen ، J.T.C. Teaghrelenns ، رباعي غليكوزيدات فلافونويد فريدة من نوعها في شاي Chin-SHIN Oolong ، هي ناهضات فموية مفترضة لمستقبل الجريلين.
J. Agric. Food Chem. 2014, 62, 5085–5091. [CrossRef]
21. هسيه ، س. ك. ؛ لو ، ي. ه. وو ، سي سي. تشونغ ، تي واي ؛ Tzen, J.T.C. تحديد المواد الوسيطة الاصطناعية الحيوية للمركبات الشبيهة ب teaghrelins و teaghrelinlike في شاي أولونغ ، والالتحام الجزيئي بمستقبل الجريلين.
J. الغذاء المخدرات الشرجية. 2015 ، 23 ، 660-670. [CrossRef]
22. هسيه ، س. ك. ؛ تشونغ ، تي واي ؛ لي ، ي. س. ؛ لو ، ي. ه. لين ، ن. ه. Kuo, P.C.; تشن ، و. ي. Tzen, J.T.C. Ginkgoghrelins, جليكوسيدات فلافونويد فريدة من نوعها في الجنكة فوليوم, تحفيز إفراز هرمون النمو عن طريق تنشيط مستقبلات الجريلين. ج. إثنوفارماكول. 2016, 193, 237–247. [CrossRef]
23. هان ، ل. ؛ مافيس, B.Y.; ليو ، إي ؛ تشانغ ، ي. لي ، دبليو ؛ أغنية ، X. فو ، ف. Gao, X. التوصيف الهيكلي وتحديد جليكوسيدات الفينيل إيثانويد من Cistanches deserticola YC Ma بواسطة UHPLC / ESI-QTOF-MS / MS. Phytochem. شرجي. 2012، 23، 668–676. [CrossRef]
24. لو ، د. ؛ تشانغ ، ج. يانغ ، Z. ؛ ليو ، H. ؛ لي ، س. ؛ وو ، ب. Ma, Z. التحليل الكمي ل Cistanches Herba باستخدام كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء إلى جانب الكشف عن مصفوفة الصمام الثنائي وقياس الطيف الكتلي عالي الدقة جنبا إلى جنب مع طرق القياس الكيميائي. J. Sep. Sci. 2013, 36, 1945–1952. [CrossRef]
25. القمر ، م. ؛ كيم ، إتش جي ؛ هوانج ، ل. سيو ، J.H. ؛ كيم ، س. هوانج ، س. ؛ كيم ، س. لي ، د. تشونغ ، H. ؛ أوه ، م. س. ؛ اخرون. تأثير الحماية العصبية للجريلين في 1-methyl-4-phenyl-1 ، 2 ، 3 ، نموذج فأر 6-tetrahydropyridine لمرض باركنسون عن طريق منع تنشيط الخلايا الدبقية الصغيرة. السموم العصبية. () القرار 2009، 15، 332-347. [CrossRef]
26. لوبيان ، س. ج. ؛ إيزابيل ، O.M. ؛ هوباخ ، أ. تو ، م. ت. ؛ الحافلات ، C. ؛ ووكر، د. بروسنر، ج. Mcewen، B.S. ما وراء مفهوم الإجهاد: الحمل الوستاتيكي - منظور بيولوجي ومعرفي تنموي. في علم النفس المرضي التنموي: المجلد الثاني: علم الأعصاب التنموي. شركة John Wiley & Sons, Inc.: نيويورك، نيويورك، الولايات المتحدة الأمريكية، 2015; صفحات 578–628.
27. ريزو ، م. ؛ رضوي، أ. أ. سودار، إي. سوسكيك، س. أوبرادوفيتش ، م. ؛ مونتالتو، ج. بوتجدير، م. ميخائيلديس ، D.P. ؛ إيسينوفيتش، إ. ر. مراجعة للآثار القلبية الوعائية والمضادة لتصلب الشرايين من الجريلين. كور. Pharm. Des. 2013, 19, 4953–4963. [CrossRef]
28. هولست ، ب. لانغ ، م. براندت ، E. ؛ باخ ، أ. هوارد ، أ. فريمورر، ت.م. بيك سيكينجر ، أ. Schwartz, T.W. Ghrelin مستقبلات ناهضات عكسية: تحديد نواة الببتيد النشطة وتفاعلاتها على المستقبل. مول فارماكول. 2006, 70, 936–946. [CrossRef]
29. يامازاكي ، م. ؛ ناكامورا، ك. كوباياشي، ه. ماتسوبارا ، م. ؛ هاياشي، ي. كاناغاوا، ك. Sakai, T. تأثير تنظيم الجريلين على إفراز هرمون النمو من خلايا الغدة النخامية الأمامية للفئران. J. الغدد الصماء العصبية. 2002, 14, 156–162. [CrossRef]
30. لو ، ي. ه. تشن ، ي. ج. تشونغ ، تي واي ؛ لين ، ن. ه. تشن ، و. ي. تشن ، سي واي ؛ لي, M.R.; تشو, C.C.; Tzen, J.T.C. Emoghrelin, مشتق الإيمودين فريدة من نوعها في Heshouwu, يحفز إفراز هرمون النمو عن طريق تنشيط مستقبلات الجريلين. ج. إثنوفارماكول. 2015, 159, 1–8. [CrossRef]
31. موخاميتسيانوف ، ر. ؛ وارن ، ت. إدواردز, بي سي; سيرانو فيغا، م. ج. ليزلي ، أ. ج. تيت ، سي جي. شيرتلر، جي إف اثنين من التكوينات المتميزة من الحلزون 6 لوحظت في الهياكل المرتبطة بالخصم من مستقبلات بيتا 1 الأدرينالية. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2011, 108, 8228–8232. [CrossRef]
32. روزنباوم، د.م. تشانغ ، C. ؛ ليونز ، ج. أ. هول، ر. أراغاو، د. أرلو ، د. ه. راسموسن ، س. ج. ؛ تشوي ، إتش جيه. ديفري ، بي تي. سوناهارا ، ر. ك. ؛ اخرون. هيكل ووظيفة مجمع ناهض بيتا (2) لا رجعة فيه. طبيعة 2011 ، 469 ، 236-240. [CrossRef]
33. بروكس ، بي آر ؛ بروكوليري، ر. إ. أولافسون، دكتور في الطب؛ الدول، د. ج. سواميناثان ، س. ؛ Karplus ، M. CHARMM - برنامج للطاقة الجزيئية الكبيرة ، والتقليل إلى أدنى حد ، وحسابات الديناميكيات. ياء - الحساب. كيمياء 1983، 4، 187–217. [CrossRef]