جزء تطوير مقايسة مناعية للجسيمات النانوية من اليوروبيوم للتدفق الجانبي للكشف عن NGAL في البول وتشخيص إصابة الكلى الحادة

نتائج

1. التعبير عن البروتين NGAL المؤتلف وتنقيته

تم نقل البلازميد المؤتلف pSecTag2A-NGAL إلى خلايا CHO. يتم التعبير عن NGAL -6 × البروتين الخاص به بشكل أساسي في طاف الخلية ويتم تنقيته لاحقًا بواسطة Ni Sepharose. تم الحصول على بروتين NGAL المنقى المأشوب بنقاوة 95 بالمائة وتم تحليله بواسطة SDS-PAGE بوزن تقريبي جزيئي يبلغ 23.7 كيلو دالتون (الشكل 1 أ). أكدت لطخة غربية أيضًا تعبير NGAL للبروتين المؤتلف وتنقيته (الشكل 1 ب).

2. جيل من MAbs

أولاً ، قمنا بمقارنة تأثيرات جهد التيار المستمر على ثقب غشاء الخلية تحت شدة المجال الكهربائي المختلفة ، وكانت سعة النبض 4 0 0 فولت ، 450 فولت ، 500 ، 550 فولت على التوالي ، لتحسين مخطط الانصهار الكهربائي. وفقًا للتقارير السابقة ، فإن تركيز الخلايا له تأثير كبير على كفاءة الاندماج [16]. تم نقل التعليق المختلط لخلايا الطحال المعزولة وخلايا المايلوما SP2 / 0 إلى غرفة الاندماج بتركيزات مختلفة تبلغ حوالي 2 × 106 و 2 × 107 و 2 × 108 خلية / مل. كانت كفاءة الاندماج هي الأعلى عند 450 فولت تيار مستمر ، وكان تركيز الخلية الأمثل 2 × 107 خلية / مل (الشكل 2).

3. توصيف MAbs

تمت تنقية MAbs بواسطة عمود البروتين A. تم فصل MAbs المنقى بنسبة 12 بالمائة SDS-PAGE ، ولوحظ شريطين بأوزان جزيئية 55 كيلو دالتون و 25 كيلو دالتون تحت ظروف الاختزال. تمت ملاحظة النطاقات الواضحة البالغة 17 0 كيلو دالتون في ظل ظروف غير مختزلة ، وهو البروتين السليم لـ 2F4 و 1G1 (الشكل 3 أ). أشارت لطخة غربية إلى أن جميع MAbs ترتبط بشكل خاص بالبروتين NGAL البشري (الشكل 3 ب). بعد الاندماج الكهربائي للخلية والاستنساخ الفرعي ، تم اكتشاف المواد الطافية للأورام الهجينة بواسطة ELISA غير المباشر مع NGAL -6 × His and PCT - 6 × His لضمان ارتباط محدد للأجسام المضادة بـ NGAL. تم اختيار اثنين من الأورام الهجينة الإيجابية للغاية (1G1 ، 2F4) مع ارتباط NGAL محدد بينما بدون تفاعل متقاطع مع PCT -6 × تم اختياره بنجاح لإنتاج وتنقية MAbs (الشكل 3 ج). للكشف عن تقارب اثنين من MAbs ، تم تحليل التفاعل بين الأجسام المضادة بتركيزات مختلفة وبروتين NGAL بواسطة نظام BIAcore T200. أظهر الرسم البياني الحركي أن تقارب 2F4 و 1G1 كان 4.5 × 10− 7 و 6.0 × 10− 7 ، على التوالي (الشكل ثلاثي الأبعاد). كانت الأنماط المتشابهة لهاتين MAbs اللتين تم اكتشافهما بواسطة المجموعات التجارية هي IgG1. كان معدل حظر 2F4 و 1 G 1- اقتران HRP بنسبة 63 في المائة من خلال اكتشاف cELISA ، مما يشير إلى أنهم تعرفوا على حلقات مختلفة.

4. إجراءات الاتحاد الأوروبي و NPS-LFIA

استنادًا إلى EU-NPS مثل الملصقات والمقايسة المناعية من نوع الساندويتش ، تم إنشاء LFIA للكشف عن NGAL. تم طلاء MAb 2F4 على غشاء النيتروسليلوز وتم إقرانه بـ EU-NPS -1 G1 استنادًا إلى اقتران الأجسام المضادة في منصة الكروماتوغرافيا المناعية للتدفق الجانبي. كما هو موضح تخطيطيًا (الشكل 4) ، تم طلاء TL و CL لغشاء النيتروسليلوز بـ MAbs 2F4 والماعز IgG المضاد للفأر. تم تمييز EU-NPS -1 G1 على اللوحة المرافقة. هاجرت العينة المحتوية على مستضد NGAL نحو الوسادة المقترنة لتتحد مع EU-NPS -1 G1 وتشكل معقدات مستضد - جسم مضاد. بعد ذلك ، تم التقاط المجمعات بواسطة mAb 2F4 في الخط T أثناء الهجرة لتشكيل مجمعات شطيرة. تم دمج المركب الزائد مع IgG المضاد للفأر من الماعز. تم قياس شرائط الاختبار بكاشف التألق بعد 15 دقيقة.

5. تقييم الأداء

تم استخدام أزواج الأجسام المضادة (2F 4- labled1G1) ككاشف والأجسام المضادة للقبض لتأسيس كروماتوجرافي مناعي فلوري ، وتم تقييم الأداء التحليلي لـ EU-NPS-LFIA من خلال بناء المنحنى القياسي. تمت زيادة نسبة كثافة التألق النسبية (HT / HC) بتركيز NGAL. أظهر EU-NPS -1 G1 رد فعل على mAb 2F4 (الشكل 5 أ). لم يتم اكتشاف تأثير الخطاف للجرعة العالية عندما وصل تركيز المستضد إلى 3 0 0 0 نانوغرام / مل. تم عرض معادلة الانحدار على النحو التالي: y=0. 0012 x زائد 0.0059 (R 2=0. 99) ، حيث يمثل y نسبة HT / HC ، ويمثل x تركيزات NGAL (الشكل. 5 ب). كان حد الاكتشاف (LOD) 0.36 نانوغرام / مل (3 أضعاف الانحراف المعياري للفراغ ، n=20) محسوبًا بواسطة إرشادات معهد معايير المختبرات الإكلينيكية (CLSI) EP 17- A2 ، تركيز NGAL علاقة خطية في النطاق 1-1500 نانوغرام / مل [17].

6. الدقة

أجريت تجارب الاسترداد للمقايسة البينية والمقايسة البينية لتقييم دقة واستنساخ الطريقة المناعية. تمت إضافة التركيزات المختلفة (50 و 200 و 800 نانوغرام / مل) من مادة NGAL القياسية إلى عينات البول السلبية. تم حساب دقة الفحص الداخلي بثلاث مكررات في كل تركيز مسنن في يوم واحد ، وتم حساب دقة الفحص الداخلي بثلاث مكررات عند كل تركيز مسنن كل ثلاثة أيام لمدة خمسة عشر يومًا بشكل مستمر [18]. تم عرض النتائج في الجدول 1 ، حيث تراوح معامل التباين المحسوب بين 2.57 إلى 4.98 بالمائة (n=10) ، أي أقل من 10 بالمائة. تراوحت السيرة الذاتية بين المقايسات من 4.11 إلى 7.83 بالمائة (ن=15) ، أقل من 10 بالمائة أيضًا.

تم التحقق من دقة الفحص الداخلي والمقايسة البينية بواسطة جهازي تقييم (Guangzhou Wondfo Biotech Co.، Ltd و Guangzhou Labsim Biotech Co.، Ltd) ، وكانت النتيجة متسقة في النهاية. أوضحت هذه النتائج أن دقة LFIA المتقدمة كانت على مستوى عالٍ ، وأن التكاثر كان عند مستوى مقبول.

انقر هنا للشراءمكملات Cistanche

7. الخصوصية

تم تقييم خصوصية شرائط الاختبار بإضافة مواد داخلية بتركيزات طبيعية ومختلفة لعينات البول ، بما في ذلك الكرياتينين والجلوكوز ونتروجين اليوريا. كما هو مبين في الجدول 2 ، أشارت النتائج إلى أن جميع الانحرافات النسبية (RD) كانت في نطاق ± 10 بالمائة ، مما يشير إلى أن تفاعل المستضد والجسم المضاد كان مستقرًا وتوضيح خصوصية شرائط الاختبار كانت مقبولة تجاه NGAL.

8. فحوصات العينات السريرية

لتقييم الكفاءة التطبيقية لـ NGAL على أساس EU-NPS-LFIA لتحديد العينات السريرية ، ما مجموعه 83 عينة بول تحتوي على 26 عينة منخفضة القيمة (11-7 0 نانوغرام / مل) ، 19 متوسط عينات القيمة (11 0 - 800 نانوغرام / مل) ، 38 عينة عالية القيمة (800-1740 نانوغرام / مل) ، تم قياسها بمقايسة البول NGAL للبول المعماري. كانت نتائج معامل الارتباط (R2) لمنحنى الانحدار 0.9829 (p <0.01) ، مما يشير إلى أن طريقتين الكشف لهما علاقة خطية كبيرة (حيث تمثل x تركيزات NGAL التي تم الحصول عليها بواسطة محلل ARCHITECT ، وتمثل y القيم المقاسة بواسطة شرائط اختبار مطورة) (الشكل 6). وبالتالي ، فإن EU-NPS-LFIA الذي تم تطويره لتحديد NGAL كان دقيقًا للغاية في الاختبار السريري.

مناقشة

تم تطوير EU-NPS-LFIA للكشف عن NGAL في البول البشري وتشخيص القصور الكلوي الحاد في دراستنا. يتم تأكيد التشخيص الحالي لـ AKI من خلال تركيز الكرياتينين في الدم (sCr) ، وهو ثابت ما لم يكن 50 بالمائة على الأقل من وظائف الكلى التالفة [19]. تطور القصور الكلوي الحاد في 89 بالمائة من المرضى الحادين المصابين بفيروس COVID -19 ، وكان غالبية المرضى يعانون من قلة البول في الغالب عندما يظهر قبل ظهور الكرياتينين في البلازما [20]. زادت المؤشرات الحيوية من المستويات المرتفعة عند القبول ، والذي يرتبط بزيادة معدل الوفيات. NGAL هي واحدة من هذه المؤشرات الحيوية ، والتي قد ترتبط مستوياتها بشكل إيجابي مع خطر الوفاة في COVID -19 المرضى في المستشفيات [21]. في AKI ، اكتشفت العديد من الدراسات أن تركيز NGAL في البول يرتبط بشكل كبير بتركيز sCr [22]. في السنوات الأخيرة ، تم تطوير العديد من الطرق الكهروكيميائية والمناعية للكشف عن NGAL ، وحالات التحديد الكهروكيميائي ، ومقايسة ربط القرب من المرحلة الصلبة ، والمقايسة المناعية الكهروكيميائية الخالية من الإنزيم [23 ، 24]. ومع ذلك ، تتطلب هذه التقنيات معدات دقيقة وموظفين متخصصين وتفسيرًا احترافيًا للنتائج. لذلك ، فإن تطوير مقايسة كشف فعالة وملائمة لتركيز NGAL في البول أمر بالغ الأهمية لمراقبة هذا الاضطراب. الكفاءة المنخفضة لانصهار البولي إيثيلين جلايكول (PEG) في الطرق التقليدية يسبب صعوبات في الحصول على الأجسام المضادة الوظيفية ، قمنا بتحسين معلمات الاندماج الكهربائي التي مكنت من تعزيز كفاءة الاندماج لتحضير أورام هجينة قابلة للحياة وحصلنا على اثنين من مضادات NGAL MAbs. MAbs ليست فقط تقارب عالي ولكنها موجهة أيضًا نحو حواتم مختلفة ، تستخدم لإنشاء مقايسة تشخيصية عالية الجودة.

هيربا سيستانش

في السنوات الأخيرة ، تم الإبلاغ عن العديد من الدراسات لتطوير العديد من المقايسات المناعية التشخيصية السريعة NGAL ، بما في ذلك جهاز الاستشعار المناعي الكهروكيميائي وثلاثة أجهزة استشعار كهروكيميائية ، ومقايسة ربط القرب من المرحلة الصلبة ، ومقايسة التدفق الجانبي [25]. في إحدى الدراسات ، تم تصنيع جهاز استشعار مناعي بواسطة الأجسام المضادة لالتقاط NGAL التي تم تجميدها إلى قطب كربون معدل بطباعة الشاشة وإضافة ملصق لجسم مضاد ثانوي ضد NGA إلى صفائح نانوية G-C3N4 المزينة بـ PB-NP لتشكيل شطيرة على SPCE [24]. طورت الدراسة الأخرى جسمًا مضادًا ضد NGAL تم تثبيته على قطب كهربائي مطبوع بالشاشة (SPCE) تم تعديله بواسطة الأنيلين المبلمر كهربائيًا المترسب فوق الجرافين / بولي أنلين (G / PANI). أظهر تقريران أن مستوى اللد اختلف بشكل كبير من 0 .6 بيكوغرام / مل إلى 21.1 نانوغرام / مل ، اعتمادًا على الصفائح النانوية g-C3N4 مع عنصر N المعزز بالكهرباء التحفيزية للهيبريد النانوي مقارنة بألواح الجرافين النانوية ، و LOD لـ NGAL يختلف المقايسة اعتمادًا على المستشعر المناعي والمعقد المترافق والأجسام المضادة [26]. وفقًا لتلك الدراسات ، قمنا بتوضيح أنه يمكن تحسين حساسية LFIA من خلال الاعتماد على الجسيمات النانوية الفلورية المختلفة المذكورة في قسم التمهيد. تم البحث باستمرار عن الجسيمات النانوية عالية الحساسية التي تم تصنيفها في LFIA على أنها مجسات الفلورسنت على مدار العقود الماضية ، والجسيمات النانوية الذهبية هي الأكثر استخدامًا ، ولكن تطبيق اختبارات التدفق الجانبي بناءً على الملصقات التقليدية يقتصر على تحديدها الضعيف وإشاراتها الضعيفة [ 27]. حاليًا ، هناك أجسام مضادة متاحة لتطوير NGAL تم تطبيقها على منصات مختلفة لاكتشاف NGAL ، ولكنها غير متوفرة في LFIA استنادًا إلى ملصقات EU-NPS التي تم اختبارها على اكتشاف NGAL بالإضافة إلى اختبار التدفق الجانبي القائم على تقنية UCP [28 ، 29].

تتمتع المقايسات المناعية الفلورية بميزة في مجالات الكشف المختلفة ، لا سيما في النقاط الكمومية الناضجة ، وقد تأثرت حساسيتها بالمعايير MAbs والمواد الفلورية ، ويمكن أن تتحسن بشكل كبير بواسطة EU-NPS و MAbs المحددة لاستخدام مجسات الفلورسنت [3 0 ]. تم تطبيق EU-NPS على شرائط LFIA الفلورية التي نضجت في مجال الكشف وعززت العديد من مزايا LFIA من أجل حساسية الفحص والنوعية والاستقرار [31]. نظرًا للخصائص الممتازة لـ EU-NPS ، كان حد اكتشاف NGAL في هذه الطريقة 0. 36 نانوغرام / مل ، بينما كان متوسط ​​مستويات NGAL في البول حوالي 7.0 نانوغرام / مل في الأفراد الأصحاء [32] . لا تزال تطورات وتطبيق EU-NPS-LFIA of NGAL في المرحلة الأولية ، وهذا الاختبار يحتاج إلى اختبار NGAL لعينات المصل والبول مع مرضى COVID -19 الذين تحسن العلاج في مستقبل الأعمال .

الاستنتاجات

في الدراسة ، نجحنا في الحصول على اثنين من الفئران المضادة للـ NGAL MAbs (2F4 ، 1G1) وتم تصنيفها بـ EU-NPS لتأسيس تقنية مناعة التدفق الجانبي. تم العثور على EU-NPSLFIA للكشف عن NGAL في نطاق واسع من 1- 3000 نانوغرام / مل في غضون 15 دقيقة ، وصلت حساسية الكشف إلى 0. 36 نانوغرام / مل. يمكن استخدام هذه الأجهزة المضادة للـ NGAL بشكل موثوق في مضان LFIA للكشف عن NGAL في عينات البول لذلك يجب أن تكون قابلة للتطبيق في تشخيص AKI.

سيستانش توبولوسا

فعالية مستخلص القيزان على إصابة الكلى الحادة

إصابة الكلى الحادة (AKI) ، والمعروفة أيضًا بالفشل الكلوي الحاد ، هي حالة طبية شائعة مرتبطة بالتدهور المفاجئ في وظائف الكلى. يمكن أن يسبب القصور الكلوي الحاد مراضة ووفيات كبيرة ، خاصة إذا تركت دون علاج. على هذا النحو ، فإن التشخيص المبكر والعلاج الفوري ضروريان لتحسين نتائج المرضى.

تم استخدام مستخلص Cistanche ، المشتق من نبات Cistanche deserticola ، في الطب الصيني التقليدي لعلاج مختلف الحالات الصحية. أظهرت الأبحاث الحديثة أن مستخلص Cistanche قد يبشر بالخير في علاج القصور الكلوي الحاد.

حددت الدراسات الآليات المحتملة التي من خلالها يمارس مستخلص Cistanche آثاره العلاجية على القصور الكلوي الحاد. وتشمل هذه قمع الالتهاب ، وتقليل الإجهاد التأكسدي ، وتقليل تنظيم مسارات موت الخلايا المبرمج ، وتعزيز تجديد الأنسجة. بالإضافة إلى ذلك ، فقد ثبت أن مستخلص Cistanche يمنع تطور التليف الكلوي ، والذي يمكن أن يحدث نتيجة التهاب المفاصل الروماتويدي.

تشير الدراسات التي أجريت على الحيوانات إلى أن إعطاء مستخلص Cistanche له تأثير وقائي على وظائف الكلى في نماذج AKI ، مما يؤدي إلى تحسين معدل الترشيح الكبيبي ، وتقليل الأضرار التي تلحق بالخلايا الأنبوبية ، وانخفاض مستويات نيتروجين اليوريا في الدم ومستويات الكرياتينين في الدم. تشير دراسات أخرى في الممارسة السريرية على البشر إلى زيادة في إنتاج البول ومعدل الترشيح الكبيبي (GFR) مع منع حدوث زيادات أخرى في مستويات المصل من نيتروجين اليوريا والكرياتين في المرضى الذين يعانون من أمراض القلب الكلوية المزمنة المرتبطة بجراحة القلب.

ومع ذلك ، لا تزال هناك العديد من الأسئلة فيما يتعلق بالجرعات المثالية ، وملامح السلامة طويلة الأجل ، وتوحيد الاستعدادات. مطلوب تجارب إضافية معشاة ذات شواهد عالية الجودة لتقييم الجرعة المثلى ونظام الإعطاء لاستخراج Cistanche.

بشكل عام ، تشير الأدلة إلى أن مستخلص Cistanche قد يكون علاجًا فعالًا لـ AKI ، على الرغم من الحاجة إلى مزيد من البحث والاختبار المكثف للحصول على توصيات أكثر تحديدًا. في الختام ، على الرغم من بعض القيود ، يُظهر مستخلص Cistanche إمكانية تقليل شدة القصور الكلوي الحاد. يمكن للاكتشاف المبكر والعلاج الفوري تحسين نتائج المرضى ونوعية الحياة. يجب على المرضى الخضوع للتشاور مع مقدمي الرعاية الصحية قبل الانخراط في العلاجات البديلة لضمان السلامة وتجنب أي آثار ضارة.

آثار Cistanche

مراجع

15. Huang X ، Aguilar Z ، Xu H ، Lai W ، Xiong Y: شريط كروماتوجرافي مناعي قائم على الغشاء مع جسيمات نانوية كمراسلين للكشف: مراجعة. Biosensors bioelectronics 2016 ، 75: 166-180.

16. Weeratna R ، Comanita L ، Davis H: CPG ODN يسمح بجرعة أقل من مستضد ضد مستضد التهاب الكبد B السطحي في الفئران BALB / ج. بيولوجيا الخلية المناعية 2003 ، 81 (1): 59-62.

17. تونج كيو ، تشين ب ، زانج آر ، زو سي: توحيد معايير تحليل الإنزيم السريري باستخدام مجمعات مصل بشرية مجمدة مع القيم التي يحددها الاتحاد الدولي للكيمياء السريرية وإجراءات القياس المرجعية للطب المخبري. المجلة الاسكندنافية للتحقيقات المخبرية السريرية 2018 ، 78: 74-80.

18. Huang D، Ying H، Jiang D، Liu F، Tian Y، Du C، Zhang L، Pu X: الاكتشاف السريع والحساس للإنترلوكين -6 في المصل عن طريق المقايسة المناعية للتدفق الجانبي التي تم حلها بمرور الوقت. الكيمياء الحيوية التحليلية 2020 ، 588: 113468.

19. Shapiro N ، Trzeciak S ، Hollander J ، Birkhahn R ، Otero R ، Osborn T ، Moretti E ، Nguyen H ، Gunnerson K ، Milzman D et al: دقة تشخيص الليبوكسين المرتبط بالجيلاتيناز العدلات في البلازما في التنبؤ بالكلى الحادة إصابة في مرضى قسم الطوارئ المشتبه في تعفن الدم. حوليات طب الطوارئ 2010 ، 56 (1): 52-59 هـ.

20. Luther T، Bülow-Anderberg S، Larsson A، Rubertsson S، Lipcsey M، Frithiof R، Hultström M: COVID -19 المرضى في العناية المركزة يصابون في الغالب بإصابة الكلى الحادة القلة. طبيب التخدير أكتا سكاندينافيكا 2021 ، 65 (3): 364-372.

21. Abers M، Delmonte O، Ricotta E، Fintzi J، Fink D، de Jesus A، Zarember K، Alehashemi S، Oikonomou V، Desai J: يرتبط توقيع المرقم الحيوي القائم على المناعة بالوفيات في COVID -19 مرضى. JCI Insight 2021، 6 (1).

22. فاغنر جي ، جان إم ، كيم إم ، موري ك ، باراش جي ، سلادين آر ، لي إتش: الارتباط بين الزيادات في ليبوكالين العدلات البولية المرتبط بالجيلاتيناز والخلل الكلوي الحاد بعد جراحة القلب للبالغين. التخدير 2006 ، 105 (3): 485-491.

23. Kannan P ، Tiong H ، Kim D: التحديد الكهروكيميائي عالي الحساسية لليبووكالين المرتبط بالجيلاتيناز العدلات لإصابة الكلى الحادة. Biosensors bioelectronics 2012 ، 31 (1): 32-36.

24. Zhang F ، Zhong H ، Lin Y ، Chen M ، Wang Q ، Lin Y ، Huang: هجين نانوي مكون من صفائح نانوية CN Prussian Blue والجرافيت كعلامة توليد إشارة في مقايسة مناعية كهروكيميائية خالية من الإنزيم للجيلاتيناز العدلات- ليبوكالين المرتبط. ميكروشيميكا أكتا 2018 ، 185 (7): 327.

25. Yukird J ، Wongtangprasert T ، Rangkupan R ، Chailapakul O ، Pisitkun T ، Rodthongkum N: جهاز استشعار مناعي خالٍ من الملصقات يعتمد على الجرافين / بوليانيلين النانو المركب للكشف عن الليبوكالين المرتبط بالجيلاتيناز العدلات. Biosensors bioelectronics 2017 ، 87: 249-255.

26. Gong Y ، Li M ، Wang Y: نيتريد الكربون في تحويل الطاقة وتخزينها: التطورات والتوقعات الحديثة. ChemSusChem 2015 ، 8 (6): 931-946.

27. Chen A، Yang S: استبدال الأجسام المضادة بـ aptamers في المقايسة المناعية للتدفق الجانبي. Biosensors bioelectronics 2015 ، 71: 230–242.

28. Li H، Mu Y، Yan J، Cui D، Ou W، Wan Y، Liu S: جهاز استشعار مناعي كيميائي ضوئي خالٍ من الملصقات من أجل ليبوكالين العدلات المرتبط بالجيلاتيناز على أساس استخدام الأجسام النانوية. الكيمياء التحليلية 2015 ، 87 (3): 2007-2015.

29. Lei L، Zhu J، Xia G، Feng H، Zhang H، Han Y: اختبار سريع وسهل الاستخدام للكشف عن ليبوكالين العدلات المرتبط بالجيلاتيناز (NGAL) باستخدام الجسيمات النانوية المحولة. تالانتا 2017 ، 162: 339-344.

30. Yeo S و Bao D و Seo G و Bui C و Kim D و Anh N و Tien T و Linh N و Sohn H و Chong C وآخرون: تحسين التطبيق التشخيصي السريع للأجسام المضادة وحيدة النسيلة ضد فيروس أنفلونزا الطيور من النوع الفرعي H7 باستخدام جسيمات اليوروبيوم النانوية. التقارير العلمية 2017 ، 7 (1): 7933.

31. Chen E، Xu Y، Ma B، Cui H، Sun C، Zhang M: MonascusCarboxylFunctionalized، Europium Nanoparticle-Based Fluorescent Immunochromatographic Immunochromatographic للكشف عن الحساسية للسيترينين في الأطعمة المخمرة. السموم 2019 ، 11 (10).

32. Bolignano D ، Coppolino G ، Campo S ، Aloisi C ، Nicocia G ، Frisina N ، Buemi M: الليبوكالين المرتبط بالجيلاتيناز العدلات في المرضى الذين يعانون من مرض الكلى المتعدد الكيسات السائد. المجلة الأمريكية لأمراض الكلى 2007 ، 27 (4): 373-378.

Moli Yin 1 و Yuanwang Nie 2 و Hao Liu 2 و Lei Liu 1 و Lu Tang 1 و Yuan Dong 2 و Chuanmin Hu 1 و Huiyan Wang 1

1 مركز جيلين التعاوني للابتكار لهندسة الأجسام المضادة ، جامعة جيلين الطبية ، 132013 جيلين ، جمهورية الصين الشعبية.

2 أكاديمية المختبرات ، جامعة جيلين الطبية ، 132013 جيلين ، جمهورية الصين الشعبية.