أنماط تعبير MRNA في دماغ الجرذ بعد استدعاء مزدوج للخوف والمكافأة على أساس المعلومات المكتسبة اجتماعيًا (2)

Arc في استدعاء جمعيات الخوف المباشرة والمكتسبة اجتماعيًا.

إن قدرتنا على تفسير النتائج التي توصلنا إليها فيما يتعلق بفئراننا التي خضعت لتذكر الخوف المكتسب من خلال التعلم المباشر تساعد بشكل كبير في مدى تميز النظام الكامن وراء تعلم الخوف والتذكر. عدد من المجالات التي درسناها متورطة في تعلم الخوف أو الانقراض (الأخير الذي نفترض أنه بدأ في المتظاهرين ، حيث خضعوا للعرض التقديمي CS غير المعزز أثناء FCbP) على وجه التحديد ACC و PLC و ILC30-32 ، 37. على الرغم من توفر مجموعة أصغر قليلاً من الأبحاث فيما يتعلق بالآليات العصبية للخوف الاجتماعي ، فإن النماذج المقترحة لتعلم الخوف الاجتماعي تفترض أن الأنظمة المماثلة تكمن وراء تعلم الخوف الاجتماعي والمباشر. تشير النتائج التي توصلنا إليها إلى عدم وجود دور عام لـ ACC أو PLC أو ILC في استدعاء ارتباط الخوف المكتسب اجتماعيًا أو ارتباط الخوف المكتسب مباشرةً (على الرغم من الاطلاع أيضًا على "مناقشة" الفروق بين الجنسين في نشاط PLC أدناه). ومع ذلك ، كما تم تناوله في القسم السابق ، من المحتمل أن يشير هذا فقط إلى أن Arc لا يعمل كمؤشر موثوق للنشاط في هذه الحالة. من المحتمل أن يروي فحص هذه المناطق اكتساب ما بعد الخوف قصة مختلفة. البحث الصريح الصارم في نشاط Arc بعد استدعاء الخوف محدود ، وهناك بعض الأبحاث السابقة يمكن الاستفادة منها. وجد كل من Chia و Otto أنه في الجرذان التي تتبع حالة الخوف ، كان لديها تعبير بروتين Arc أعلى بشكل ملحوظ في كل من الحصين الظهري والبطني مقارنةً بالضوابط غير المشروطة. والجدير بالذكر أنه تم قياس كمية القوس من خلال تحليل اللطخة الغربية للحصين البطني والظهري المتجانس في هذه التجربة ، لذلك لم يكن التوطين الدقيق لنشاط الحصين متاحًا. تشير هذه النتائج على الأرجح إلى أنه ، كما هو الحال في STFP ، قد يتم تحفيز نسخ القوس في مناطق معينة من الحُصين في 48- نقطة زمنية لذاكرة الخوف الملحوظة. قد تكون نتائجنا الفارغة أيضًا ناتجة عن فشل استدعاء من جانب المراقبين ، على عكس الدراسات السابقة في مختبرنا 12-14،26 ، لم نشهد تجميدًا أعلى لـ CS في المراقبين مقارنة بعناصر التحكم. ما إذا كان هذا في الواقع بسبب فشل استدعاء المراقبين أو بسبب إجراء استدعاء CS الفردي والتعرض المسبق لعناصر التحكم إلى CS ليس واضحًا.

ماذا يفعل cistanche لتحسين الذاكرة

الدور المحتمل للقشرة الأمامية المدارية البطنية في استدعاء المعلومات المكتسبة اجتماعيًا.

في دراسة تاريخية ، Lesburguères et al. 24. كانوا قادرين على إثبات أنه في حين أن نشاط الحصين الظهري (dHPC) كان ضروريًا لاكتساب واستدعاء STFP على المدى القصير ، تم تفريغ ذاكرة STFP في النهاية إلى OFC للتخزين طويل الأجل. بالإضافة إلى ذلك ، Lesburguères et al. كانت قادرة على إثبات أن وضع علامات على الخلايا العصبية في القشرة الأمامية المدارية أثناء الحصول على STFP ضروري للتخزين طويل الأجل لتفضيلات الطعام المنقولة اجتماعيًا وأن التداخل مع نشاط OFC بعد الاستحواذ يضعف استدعاء الذاكرة بعد 30 يومًا من الاستحواذ (على الرغم من انظر أيضًا). قد تشير هذه النتائج إلى الاتصال بين dHPC و OFC في الأيام أو الأسابيع الأولى بعد الحصول على STFP وإعادة التنظيم المستمرة لـ OFC في هذه النقطة الزمنية لاستيعاب التخزين طويل الأجل لذاكرة STFP. في حين أن عدم وجود فروق عامة في التعبير البطني أو الجانبي لـ OFC Arc بين المتظاهرين وعناصر التحكم والمراقبين في هذه الدراسة من شأنه أن يتحدى هذا التفسير ، فقد اكتشفنا وجود ارتباط سلبي كبير بين قياسنا المشترك لأداء التعلم الاجتماعي الكلي وخلايا التعبير عن القوس المزدوج في المركبات العضوية المتطايرة. علاوة على ذلك ، لم يتم ملاحظة هذا الارتباط بين مقياس مماثل تم تكوينه للمتظاهرين بناءً على أداء اختبار الاختيار والتجميد إلى CS. نظرًا لأن الاعتماد على المعلومات المكتسبة اجتماعيًا يمكن اعتباره اختيارًا بين المعلومات الاجتماعية التي يحتمل أن تكون غير موثوقة ومخاطر التعلم من خلال التجربة المباشرة ، فإن هذا الدور التثبيطي الواضح للصوت في التعبير عن المعلومات المكتسبة اجتماعيًا قد يكون مرتبطًا بالدور الأوسع لـ OFC في القيمة. اتخاذ القرار على أساس 39-42.

تجربة Cistanche Deserticola

الفروق بين الجنسين في نسخ القوس.

عدة أسباب إحصائية ومنهجية. أولاً ، حجم العينة المنخفض أحيانًا للإناث ، مع حجم المجموعة لمجموعات الجنس / الحالة التي تتراوح من n =2 إلى n =9 بعد إزالة الفئران التي ليس لديها أقسام كافية قابلة للحياة (على الرغم من أن<5 was only present for female Controls in the vOFC and lOFC and female Demonstrators and Observers in the lOFC, see Table S5 for specific group sizes). Additionally, our lack of entirely undisturbed controls means that we have no way to determine whether these sex differences are the result of baseline or task-specific differences in Arc mRNA production. Finally, because the pre-in situ PFA wash was not introduced until all female sections had been processed, this difference in tissue processing might have affected the overall stain. That said, if this were the case, we might expect to see a broader and more consistent effect of sex across regions and types of Arc expression (nuclear, cytoplasmic, and dual). As it is, 18 regions/cellular areas of Arc expression combinations are examined, and only 10 display a significant overall effect of sex. Furthermore, this effect is not uniform in its direction, with males displaying greater overall Arc expression in 5 cases and females displaying greater expression in the other 5. Regardless, we feel that our findings here should serve only to inform possible future research into sex differences in Arc expression. As it is, the limitation of the current study would make drawing definitive conclusions regarding sex effects on Arc expression inappropriate. This should be kept in mind in reading the following discussion.

على الرغم من أنه كان هناك القليل من التحقيق في الفروق بين الجنسين في تعبير القوس ، إلا أن هناك بعض النتائج التي تشير إلى أن إناث الجرذان تعبر عن المزيد من القوس في مناطق معينة من الحصين الظهري بعد التعرض المتكرر لبيئة غنية نسبيًا ، على الرغم من وجود اتجاه في الاتجاه المعاكس أيضًا. لوحظ في الفئران التي تم اختبارها دون تدخل سلوكي مسبق. قد تشير النتائج التي توصلنا إليها إلى أن الفروق بين الجنسين في نسخ Arc موجودة بعد بعض المهام أو التجارب السلوكية العامة. في منطقة CG1 من ACC ، وجدنا أن الذكور ، بشكل عام ، لديهم عدد أكبر من الخلايا النشطة في كلتا النقطتين الزمنيتين ، ربما بسبب ارتفاع خط الأساس Arctranscription في ACC للذكور أو زيادة النسخ بعد تغييرات السياق / إعادة التعرض (قفص المنزل → STFP غرفة الاختبار ← غرفة التكييف) نظرًا لوجود بعض الأدلة - على الرغم من محدوديتها - لدور لجنة التنسيق الإدارية في استدعاء الذكريات السياقية على المدى الطويل. أظهر ذكور الفئران أيضًا عددًا أعلى من التعداد النووي والقوس المزدوج في ILC. يمكن تفسير ذلك من خلال دور لجنة القانون الدولي في منع الانقراض والخوف (31 ، 45 ، 46) والعيوب الملحوظة في تثبيط وانقراض الخوف المكتسب لدى الإناث 47-49. إذا كانت هذه هي الحالة ، فإنها تثير السؤال عن سبب عدم ملاحظة أي اختلافات عامة بين الجرذان المسيطرة والمراقب والمتظاهر إذا تم تشغيل تعبير القوس بواسطة نشاط تحت الحجرة المستحثة من CS.

أظهرت الإناث مستويات أعلى من تعبير القوس لجميع التهم في vCA3. من المحتمل أن يكون الاختلاف في التعداد النووي ناتجًا عن تنشيط أكبر بعد التعرض لـ CS أو إعادة التعرض لغرفة التكييف في الإناث ، في حين أن المستويات الأعلى من تعبير القوس السيتوبلازمي في vCA3 بعد مهمة الطعام قد تشير إلى الاختلافات الجنسية في دور Arc في vCA3 إما الاعتراف بالطعام "المألوف" (حتى بالنسبة للمراقبين ، ستكون الرائحة مألوفة بسبب تفاعلهم السابق مع المتظاهر) أو المكافأة / العمليات الشاملة العامة. أظهرت تلك الأنثى أيضًا تصنيفًا مزدوجًا أعلى بشكل ملحوظ في vCA3 - على الرغم من أن هذا التأثير كان صغيرًا - قد يشير أيضًا إلى زيادات عامة في نسخ vCA3 Arc في الإناث. أظهرت إناث الفئران أيضًا نسخًا أعلى للقوس النووي في vOFC ومستويات مزدوجة أعلى من Arc mRNA في lOFC ، على الرغم من أن هذه النتائج أكثر صعوبة في التفسير بسبب انخفاض عدد فئران التحكم التي كانت أنسجة دماغها سليمة بما يكفي لأخذ تعداد OFC (ن =2 و 3 من أجل OFC الجانبي والبطني ، على التوالي). تشير البيانات من فئران التحكم المتاحة إلى زيادة محتملة بوساطة الجنس في إنتاج OFC Arc mRNA ، ولكن من الممكن ألا يستمر هذا التأثير مع ارتفاع n. والجدير بالذكر أن بعض الأبحاث السابقة قد أشارت إلى اختلافات هيكلية في OFC والاختلافات الوظيفية في السلوكيات بوساطة OFC بين الإناث والذكور القوارض 50-52.

مسحوق استخراج سيستانش

ربما تم اكتشاف الفروق الجنسية الأكثر إثارة للاهتمام في Arc mRNA في PLC. تيري ، أظهر الذكور أعدادًا أكبر من الخلايا التي تعبر عن القوس في السيتوبلازم وفي كل من السيتوبلازم والنواة (التعبير المزدوج) مقارنة بالإناث. وجدنا أيضًا أنه في حين أن المتظاهرين والمراقبين الذكور لم يظهروا زيادات في نسخ القوس على عناصر التحكم في النقطة الزمنية لاستدعاء الخوف ، أظهرت المتظاهرات نسخًا للقوس النووي أعلى بكثير من عناصر التحكم بينما سقطت المراقبات في المنتصف بين الاثنين. قد يكون هذا التأثير الجنسي مدفوعًا بالعجز المذكور أعلاه الذي لوحظ في تثبيط الخوف المكتسب والانقراض الذي لوحظ في الإناث 47-49 ، حيث اقترحت الأبحاث السابقة أن PLC متورط بشكل حاسم في تحفيز سلوك الخوف. علاوة على ذلك ، أشارت العديد من الدراسات إلى الاختلافات في إشارات PLC وهيكلها كعوامل دافعة محتملة لهذه الإعاقات الخاصة بالجنس في تثبيط الخوف والانقراض. بينما لم نجد فرقًا كبيرًا في سلوك التجميد للإناث والذكور للإشارة ، فإن تنظيم Arc mRNA استجابةً للخوف غير المعزز المرتبط بـ CS في المتظاهرين على وجه التحديد قد يكون مؤشراً على إعادة الهيكلة العصبية التفاضلية في PLC والتي يمكن أن تؤدي في النهاية إلى الفروق بين الجنسين في التعبير عن الخوف.

الاستنتاجات

في حين أن نتائج هذه الدراسة لم توسع فهمنا لآليات الدماغ المشاركة في استعادة الذكريات المكتسبة اجتماعيًا بقدر ما كنا نأمل ، فإن نتائجنا توفر بعض الأفكار المحتملة حول الفروق بين الجنسين في تعبير القوس بالإضافة إلى الدور (أو عدم وجود ذلك) من Arc في استدعاء الذاكرة طويلة المدى. تشير النتائج التي توصلنا إليها إلى أن - على الأقل في قشرة الفص الجبهي و vCA3 - لا يبدو أن تحفيز نشاط الدماغ من خلال استدعاء المعلومات المكتسبة اجتماعيًا كافيًا لإحداث زيادات في تعبير القوس على تلك التي يسببها إجراء الاختبار وحده. ومع ذلك ، فإن صحة هذه الوجبات الجاهزة موضع تساؤل بالتأكيد من خلال النتائج غير الحاسمة لاختباراتنا السلوكية ، حيث قد يكون ضعف الاحتفاظ بالمعلومات المكتسبة اجتماعيًا هو السبب في هذا النقص في التأثير. نحن نفترض أن هذا قد يكون بسبب الحد الأدنى من إعادة الهيكلة العصبية عند حدوث استدعاء قبل دمج الأنظمة. لا يزال هناك ما يبرر إجراء مزيد من الأبحاث حول دور بروتين Arc في عمليات استدعاء التعلم الاجتماعي نظرًا لأن نتائجنا السلوكية لا تُظهر التعلم الاجتماعي في الفئران المراقبة. قد تستفيد الأبحاث المستقبلية التي تبحث في التداخل في الآليات العصبية التي تحكم الأشكال المختلفة للتعلم الاجتماعي أيضًا من تضمين الحيوانات التي تخضع لإجراءات الاستحواذ والحيوانات التي تخضع لإجراءات الاسترجاع عن بُعد ، حيث قد تكون هذه النقاط الزمنية أكثر احتمالية لإحداث تغييرات اللدونة وبالتالي التغييرات في تعبير القوس .

ملحق Cistanche بالقرب مني - تحسين الذاكرة

انقر هنا لعرض منتجات Cistanche Improvement Memory

【اطلب المزيد】 البريد الإلكتروني: cindy.xue@wecistanche.com / تطبيق Whats: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

طُرق

المواضيع. كانت الموضوعات عبارة عن ذكور وإناث فئران سبراغ داولي التي تمت تربيتها في المنزل في مركز الموارد الحيوانية بجامعة تكساس في أوستن. أنتجت سبعة أزواج تربية موضوعات للفوج الأول (عدد =27 إناث ، ن =36 ذكور) ، وثمانية أزواج متكاثرة أنتجت موضوعات للفوج 2 (عدد =27 ذكور ، بدون إناث). كانت الإناث المربيات هي فئران سبراغ داولي (بين 215 و 260 جم ​​عند الوصول) تم الحصول عليها من تشارلز ريفرز (ويلمنجتون ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية) بينما كان المربيون الذكور هم فئران سبراغ داولي (بين 230 و 300 جم عند الوصول) التي تم الحصول عليها من هارلان (الآن) Envigo) (هيوستن ، تكساس ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم إيواء جميع الفئران مع رفيق من الجنس الآخر في القفص حتى أظهرت الأنثى علامات الحمل الواضحة ، وعند هذه النقطة تم إيواء الإناث بمفردها. تم فطام الجراء إلى ثلاثيات من أشقاء من نفس الجنس في يوم ما بعد الولادة 21 (ص 21) للمساعدة في ضمان تعلم الخوف الاجتماعي. تم فطام الجراء الاحتياطية إلى ثلاثيات أو ثنائيات مع فئران غير مرتبطة واستخدمت في تجارب أخرى في جامعة تكساس في أوستن. تم استخدام إناث الجراء من فضلات المجموعة الثانية في تجارب أخرى. سمح للصغار بالنضوج مع الحد الأدنى من الاضطرابات بصرف النظر عن إجراءات تربية الحيوانات الروتينية (على سبيل المثال ، تغييرات القفص) حتى بدأت إجراءات التعود (ثلاثية إناث) أو إجراءات تقييم الهيمنة (ثلاثية الذكور) (إجراءات الهيمنة والنتائج المفصلة في المواد التكميلية). بدأت جرذان الفوج 1 الإجراءات بين P106 و P112 يومًا من العمر وبدأت جرذان الفوج 2 بين P99 و P118 يومًا من العمر. تم الاحتفاظ بجميع الموضوعات في 12- دورة إضاءة عكسية مع إضاءة في الساعة 3 مساءً. تم الانتهاء من جميع الإجراءات التجريبية خلال الدورة المظلمة للموضوعات تحت الضوء الأحمر. تم إجراء جميع أجزاء هذه التجربة وفقًا لدليل المعاهد الوطنية للصحة لرعاية واستخدام الحيوانات التجريبية وتمت الموافقة عليها للاستخدام من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوان بجامعة تكساس في أوستن.

جهاز ومنبهات. تكييف الخوف. تم الانتهاء من جميع إجراءات تكييف الخوف وتكييف الخوف بالوكالة في غرف التكييف القياسية (30.48 سم × 25.4 سم × 30.48 سم) مبنية من جدران زجاجية شفافة في الأمام والخلف ، واثنين من الجدران الفولاذية على الجانب ، وسقف شبكي مع ثقب في المركز. كانت أرضية الغرفة عبارة عن صف من قضبان الفولاذ المقاوم للصدأ متصلة بمولد صدمة (Coulbourn Instruments ، Allentown ، PA). تم وضع جميع الغرف في صناديق عازلة للصوت (Coulbourn Instruments) ومضاءة بضوء أحمر داخلي. تم تسجيل السلوك بواسطة كاميرات ذات دائرة مغلقة (Panasonic ™ WV-BP334) مثبتة فوق غرف التكييف مع إدخال العدسة من خلال الفتحة الموجودة في السقف الزجاجي. تم مسح الغرف بالكامل بمحلول كحول بنسبة 70 في المائة بين كل موضوع. تم التحكم في جميع عمليات تسليم التحفيز باستخدام برنامج Freeze Frame (Coulbourn Instruments). كان CS عبارة عن 20 حجرًا (5 كيلو هرتز ، 80 ديسيبل) ، وفي إجراءات مع عروض تقديمية متعددة لـ CS ، فاصل زمني متغير بين التجارب (ITI) بمتوسط ​​180 ثانية. كان التحفيز غير المشروط (الولايات المتحدة) عبارة عن صدمة تبلغ 1 مللي أمبير والتي كانت مدتها 500 مللي ثانية وتنتهي مع المنبه المشروط.

الانتقال الاجتماعي لتفضيل الطعام. تمت جميع إجراءات STFP في غرفة مجاورة للغرفة التي تحتوي على غرف التكييف. تتكون الحميات الجديدة من خلط 100 جم من مسحوق 5LL2 Purina من طعام القوارض مع 1 جم من قرفة مكورميك المطحونة (دايت سين) أو 2 جم من مسحوق الكاكاو هيرشي (دايت كو). كان النظام الغذائي العادي ، الذي تم إعطاؤه لجميع الفئران خلال فترة تقييد الطعام ولمكافحة الفئران في اليوم الأخير من الإجراءات التجريبية ، عبارة عن مسحوق نقي 5LL2 Purina طعام القوارض. تم تقديم جميع الأطعمة المجففة - سواء أثناء تقييد الطعام أو أثناء الإجراءات التجريبية - في أكواب طعام معلقة مكونة من 4 أونصات. برطمانات زجاجية و 12- سلك أدوات قياس من الصلب. تم شطف أكواب الطعام ثم مسحها بمحلول إيثانول بنسبة 70 في المائة قبل غسلها جيدًا بالماء والصابون بين كل استخدام. تمت جميع المراحل التكميلية للإجراءات التجريبية STFP في أقفاص الفئران القياسية (26.7 سم × 48.3 سم × 20.3 سم) ، مع تلقي كل فأر قفصًا جديدًا. حدثت مرحلة التفاعل (مرحلة اكتساب STFP) في حاوية بلاستيكية كبيرة (50.5 سم × 39.4 سم × 37.5 سم) مع أرضيات من رقائق الخشب تم استبدالها بين كل مجموعة. تم مسح الحاويات البلاستيكية تمامًا باستخدام Windex بين كل جلسة.

نظرة عامة على التصميم التجريبي وإجراءات التعلم الاجتماعي.

(انظر الشكل 2 للحصول على نظرة عامة رسومية).

تم تقييد طعام جميع الفئران لمدة خمسة أيام وتم تعويدها على المناولة والغرفة التي ستتم فيها إجراءات STFP لمدة أربعة أيام مباشرة قبل اليوم الأول من الإجراءات التجريبية. بينما انتهت إجراءات التعود قبل اليوم الأول من الإجراءات التجريبية ، استمر تقييد الطعام حتى نهاية التجربة. تم تخصيص فأر واحد من كل ثالوث لواحد من ثلاثة شروط: معيد ، أو مراقب ، أو تحكم. تم تقييم الثلاثيات الذكور من الفوج 2 من أجل الهيمنة وأظهرت جميعها تسلسلاً هرميًا واضحًا وتم تعيينها بحيث يكون الجرذ السائد هو المتظاهر والمرؤوس هو المراقب لتعزيز الانتقال الاجتماعي للخوف. تم تقسيم الثلاثيات الفردية بشكل عشوائي إلى مجموعات حيث يتلقى المتظاهر والمراقب اختبار اختيار في استدعاء STFP (الاختيار) والمجموعات حيث سيحصلون فقط على الطعام المعروض (سين).

في اليوم الأول من الإجراء التجريبي ، تم نقل الفئران التي تم تعيينها في حالة معيد إلى غرف تكييف خائفة وسمح لها بالتأقلم لمدة 10 دقائق قبل تعرضها لـ 3 CS التي انتهت مع صدمة مؤلمة (انظر "الجهاز والمحفزات" من أجل تفاصيل). بعد إجراءات تكييف الخوف ، تم نقل المتظاهرين إلى قفصهم الأصلي. في اليوم الثاني من الإجراءات التجريبية ، بعد 24 ساعة من تكييف الخوف ، أعيد المتظاهرون إلى غرف التكييف مع رفيقهم القفص المخصص لحالة المراقب وخضعوا لإجراء FCbP (الشكل 2). مباشرة بعد إجراء FCbP ، تمت إعادة فئران Observer إلى قفصها المنزلي بينما تم نقل المتظاهرين إلى غرفة مجاورة ومنحهم ساعة واحدة لاستهلاك مسحوق تشاو بنكهة القرفة. بعد مرور ساعة ، تم نقل المراقبون إلى سلة تفاعل مع المتظاهرين وسمح لهم بالتفاعل معهم لمدة 30 دقيقة للسماح باكتساب تفضيل الطعام المنقول اجتماعيًا. أثبتت الأبحاث السابقة من مختبرنا صحة هذه النقاط الزمنية باعتبارها كافية لنقل STFP. بعد ذلك ، أعيدت فئران الأوبزرفر إلى قفصها الأصلي بينما تم نقل الفئران المتظاهرة إلى مسكن واحد لمنع المزيد من انتقال STFP إلى المراقب أو التحكم. في اليوم الثالث من الإجراءات التجريبية ، تم نقل الفئران الضابطة إلى غرف التكييف وحدها ، وبعد 10 دقائق من التعود على الغرفة ، تم تقديمها مع ثلاث وحدات CS لمدة 20 ثانية بدون أي صدمة مصاحبة. تم إجراء ذلك في يوم منفصل لتقليل احتمالية استمرار وجود فرمونات الإنذار - والتي من المعروف أن الفئران تطلقها استجابةً لمحفزات مهددة وتؤثر على التعلم المحدد 59 - لا تزال موجودة في الغرفة.

في اليوم الأخير من التجربة ، اليوم الرابع ، بدأ استدعاء لكل من تفضيل الطعام المنقول اجتماعيًا وتكييف الخوف / تكييف الخوف عن طريق الذكريات بالوكالة. تم السماح لجميع المراقبين والمتظاهرين من الثلاثيات المخصصة لشرط الاختيار لمدة 10 دقائق للوصول إلى كل من القرفة والوجبات الغذائية المفضلة للكاكاو ، بينما تم منح المراقبين والمتظاهرين من الثلاثيات المخصصة لحالة Cin الوصول لمدة 10 دقائق إلى حمية القرفة- فقط. في جميع الثلاثيات ، أعطيت الفئران الضابطة 10 دقائق من الوصول إلى مسحوق الطعام العادي. بعد ذلك مباشرة ، تمت إعادة الفئران إلى قفصها الأصلي وتركها دون إزعاج لمدة 10- دقيقة قبل نقلها مرة أخرى إلى مساحة المختبر ووضعها في غرف التكييف. تم منح جميع الفئران بعد ذلك 3- فترة تعويد دقيقة إلى الغرفة قبل تقديمها مع 20 ثانية CS واحدة. بعد 5 دقائق من نهاية CS ، تم التخلص من جميع الفئران عن طريق حقن محلول بنتوباربيتال وفينيتوين (Euthasol ؛ Virbac Animal Health) وتم ترطيبها. تمت معالجة أدمغتهم لاحقًا لتعبير Arc mRNA. نظرًا للدورة الزمنية لإجراءاتنا الطرفية والإطار الزمني للترحيل المعروف لـ Arc mRNA ، فإن زيادة التعبير السيتوبلازمي لـ Arc mRNA سيكون بسبب إجراءات استدعاء STFP ، في حين أن التعبير النووي سيكون بسبب إجراءات استدعاء FC / FCbP ، مع إظهار الخلايا للتنشيط المزدوج. تم تنشيطه في كلا الإطارين الزمنيين (انظر الشكل 1 ؛ انظر أيضًا "تحليل الأنسجة" للحصول على تفاصيل حول معالجة الأنسجة ومعالجتها).

حياة الصحراء

إجراءات.

التعود والقيود الغذائية. كل التعود حدث قبل اليوم الأول من الإجراءات التجريبية. يتألف التعود من نقل كل قفص من الفئران إلى الغرفة التي ستتم فيها جميع الإجراءات التجريبية لـ STFP والسماح لها بالتعود على الغرفة لمدة 15 دقيقة. خلال هذه الفترة ، تم التقاط كل فأر والتعامل معه من قبل المجرب الذي سيقوم بتشغيل السلوك لمدة دقيقتين لتعويده على التعامل وهذا الفرد. تمت جميع إجراءات التعود في غرفة مظلمة تحت الضوء الأحمر ، وحصلت جميع الفئران على 4 أيام من التعود. بدأ تقييد الطعام في اليوم السابق لبدء التعود واستمر حتى نهاية التجربة. في بداية تقييد الطعام ، تمت إزالة كريات الطعام التي كان جميع الأشخاص يتناولونها من القفص. بعد ذلك ، تم منح جميع الأقفاص إمكانية الوصول يوميًا إلى جرة معلقة مليئة بالنظام الغذائي Purina 5LL2 العادي المسحوق في قفصها المنزلي لمدة ساعة واحدة. تم وزن الفئران يوميًا بدءًا من بداية تقييد الطعام حتى انتهاء التجربة لضمان عدم فقدان الوزن بشكل غير عادي.

التهديف السلوكي.

تم الانتهاء من جميع الدرجات السلوكية لهذه التجربة باستخدام البرامج التفاعلية للأبحاث السلوكية (BORIS) 60.

تكييف الخوف من خلال تسجيل نقاط الاتصال الاجتماعي بالوكالة. أشارت الأبحاث السابقة من مختبرنا إلى وجود علاقة قوية بين مقدار الخوف الذي أظهره المراقبون في اختبار الذاكرة طويلة المدى والوقت الذي يقضونه في التفاعل مع معيدهم أثناء CS في الذكور 13 وبعد CS عند الإناث. على هذا النحو ، تم تسجيل مقاطع الفيديو الخاصة بمرحلة الاستحواذ الاجتماعي لتكييف الخوف بالوكيل للتفاعل الاجتماعي بين المراقب والمتظاهر لكل 20- فترة أثناء عرض CS و 20- الفترة التي تلي كل منها مباشرة عرض CS لتقديم مؤشر ثانوي لاكتساب الخوف. تم تسجيل الاتصال الاجتماعي عندما اتصلت فئران المراقبة والمتظاهر بغير المرور خلال فترة التلميح (أثناء اتصال CS) أو في العشرينات التالية لـ CS (بعد اتصال CS). تم احتساب النسبة المئوية لكل فترة تسجيل تم قضاؤها على اتصال مع المعيد. تم سحب بيانات نسبة الاتصال خلال فترة التلميح للذكور وبيانات النسبة المئوية للتلامس بعد فترة التلميح للإناث مباشرة ودمجها في مقياس "جهة اتصال ذات صلة" واحدة لاستخدامها في جميع التحليلات الإحصائية النهائية.

سجل اختبار الاختيار. تم تسجيل مقاطع فيديو لاختبار الاختيار لبدء استدعاء تفضيل الطعام المنقول اجتماعيًا لمقدار الوقت الذي يقضيه فأر معين في التفاعل مع كوب طعام بناءً على ما إذا كان يحتوي على النظام الغذائي المعروض / المستهلك بالفعل (دايت سين) أو الرواية دايت (دايت كو). تم إجراء ذلك كمقياس ثانوي محتمل لتفضيل الطعام ، حيث توقعنا أنه نظرًا لكون اختبار الاختيار قصيرًا بشكل غير طبيعي (10 دقائق) بالضرورة ، فقد لا نتمكن من اكتشاف التفضيلات بناءً على الكمية التي يتم تناولها بمفردها. تم تسجيل التفاعل مع كوب الطعام كلما كان الجرذ على اتصال جسديًا مع الكوب ولم يتحرك بنشاط بعيدًا عن الكأس (على سبيل المثال ، الكفوف الأمامية الملامسة للجرة ، أو الرأس داخل الجرة ، أو التسلق فوق الجرة ، أو الأكل بنشاط من الجرة). بالنسبة للتحليل الإحصائي ، قمنا بحساب النسبة المئوية للوقت المستغرق في التفاعل مع كوب يحتوي على نظام غذائي معين بناءً على إجمالي الوقت المنقضي في التفاعل مع أي من الكوبين (على سبيل المثال ، بالنسبة لنظام غذائي Cin ، النسبة المئوية للوقت=TimeDiet Cin / (TimeDiet Co plus TimeDiet Cin)). تم تسجيل 10- دقيقة كاملة لجلسة اختبار الاختيار لجميع الفئران التي خضعت لها.

تحليل الأنسجة.

لتقليل تحلل الرنا المرسال بواسطة الريبونوكلياز (RNase) ، تم تعقيم جميع المعدات والأسطح المستخدمة أثناء تحضير الدماغ ومعالجته بانتظام باستخدام RNase AWAY ™ (Termo Scientity؛ Waltham، MA، USA) أو RNAseZap ™ (Ambion؛ Grand Island، NY ، الولايات المتحدة الأمريكية).

تحضير الدماغ. مباشرة بعد القتل الرحيم ، تم إرواء الأشخاص داخل القلب باستخدام محلول بارافورمالدهيد (PFA) بنسبة 4 في المائة. ثم تمت إزالة الأدمغة وغمرها في 4 في المائة من PFA للسماح بالتثبيت اللاحق لمدة 24-48 ساعة. بمجرد اكتمال التثبيت اللاحق ، تم نقل الأدمغة إلى محلول يحتوي على 30 في المائة من السكروز في محلول ملحي مخزّن بالفوسفات للحماية بالتبريد. بمجرد أن تغرق الأدمغة في قاع القارورة ، مما يشير إلى امتصاص كافٍ للسكروز للحماية من التجمد ، تم تجميدها في مسحوق ثلج جاف ونقلها إلى ثلاجة - 80 درجة للتخزين حتى التقسيم. تم بعد ذلك تقطيع الأدمغة إكليليًا على مشراح منزلق بسمك 30 ميكرون إلى ست سلاسل (لذلك كانت الأقسام اللاحقة في سلسلة واحدة تفصل بينها 180 ميكرومتر) وتم تركيبها على الفور وتركها تجف في الهواء قبل وضعها في غرفة مفرغة بها إسفنج رطب حيث كانت يُترك ليجف تمامًا لمدة 24 ساعة. فقط أقسام الحصين (تقريبًا - 3.2 إلى - 5.2 من bregma) أو مناطق الفص الجبهي (تقريبًا زائد 3.7 إلى زائد 1.4 من bregma) التي تحتوي على مناطق الاهتمام تم تقسيمها ومعالجتها. ثم تم وضع المقاطع المُثبتة في صندوق منزلق محكم الغلق خالٍ من RNase وتخزينها عند -80 درجة حتى المعالجة.

معالجة الأنسجة. تم تعديل جميع الإجراءات من البروتوكولات المستخدمة في Lee et al. 61 و Petrovich et al. 62. قبل معالجة الأنسجة ، تم إنشاء مسبار cRNA لـ Arc mRNA بدءًا من البلازميد الذي يحتوي على cDNA كامل الطول (حوالي 3. 0 كيلو بايت) من نسخة Arc. لإنشاء المسبار ، تم قطع الحمض النووي أولاً عن طريق خلط البلازميد مع محلول هضم 10 × (NEBufer ؛ Biolabs ؛ Ipswich ، MA ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، إنزيم تقييد 10 × EcoRI (Biolabs) ، والمياه النقية الخالية من نوكلياز قبل أن يتم حضنت عند 37 درجة لمدة ساعتين. تم التحقق من القطع المناسب للحمض النووي باستخدام الرحلان الكهربائي ، وبعد ذلك تمت تنقية الحمض النووي طوال الليل في الإيثانول. بعد التنقية ، تم نسج حبيبات الحمض النووي في جهاز طرد مركزي ، وغسلها في EtOH ، وتجفيفها بالكامل ، وإعادة تعليقها في محلول TE. للتحقق من أن الحمض النووي خطي بشكل صحيح ، وحساب تركيز القوس ، والتحقق من عدم وجود ملوثات ، تم اختبار عينة من الحمض النووي عبر القياس الطيفي (Nanodrop Lite ؛ Thermo Scientific ، Waltham ، MA ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم نسخ المسبار المسمى Digoxigenin (DIG) عن طريق الجمع بين الحمض النووي الخطي والمياه الخالية من RNase ، ومخزن نسخ 10 × (Ambion) ، وكتلة RNAse (Ambion) ، ومزيج وضع العلامات DIG RNA (Roche Applied Science ، Indianapolis ، IN ، USA) ، و T7 RNA polymerase (Ambion) قبل احتضان المحلول عند 37 درجة لمدة ساعتين. أخيرًا ، تم تخفيف المسبار في ماء خالٍ من نوكلياز وتنقيته في عمود دوران سريع مصغر (Roche).

بمجرد إنشاء مسبار cRNA ، تم غمر الشرائح التي تحتوي على أنسجة من ذكور الفئران لمدة 4 0 دقيقة في محلول PFA بنسبة 4 بالمائة لزيادة سلامة الأنسجة خلال المعالجة في الموقع. تمت معالجة الأنسجة المأخوذة من إناث الفئران بدون غسل PFA. تم بعد ذلك غسل الشرائح واحتضانها في محلول بروتيناز K (PK) عند 37 درجة قبل معالجتها بمحلول 0.5 في المائة أنهيدريد الخل / 1.5 في المائة من محلول ثلاثي إيثانول أمين يحتوي على حمض الأسيتيك الجليدي للنفاذية. تم بعد ذلك غسل الشرائح في محلول ملحي-سترات الصوديوم (SSC) قبل تجفيفها عن طريق الغمر بتركيزات تصاعدية من الإيثانول وتجفيفها بالهواء. أخيرًا ، تمت تغطية كل شريحة في 300 ميكرولتر من المخزن المؤقت للتهجين الذي يحتوي على خميرة الحمض الريبي النووي النقال (Invitrogen ؛ كارلسباد ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، الحمض النووي للحيوانات المنوية للسلمون (Ambion) ، dithiothreitol (Sigma ؛ سانت لويس ، MO ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، ومسبار cRNA (1: 100). ثم تم تغطية كل شريحة وإغلاقها حول الحواف باستخدام DPX mountant (Electron Microscopy Sciences ؛ Hatfield ، PA ، USA) قبل أن يتم تحضينها في محلول التهجين لمدة 20 ساعة عند 60 درجة. والجدير بالذكر أن الغطاء يحمي الأنسجة من أي اتصال مباشر مع حامل DPX ، لذا فإن إزالة DPX المتصلب في وقت لاحق لم تسبب أي ضرر للأنسجة.

بمجرد اكتمال التهجين ، تمت إزالة الأغطية بعناية ، وتم تحضين الشرائح في مخزن مؤقت 4xSSC مختلط مع ثيوسلفات الصوديوم (ST) عند 60 درجة لمدة ساعة قبل معالجتها بمحلول قائم على حمض الإيثيلين ديامينيتراسيتيك لتثبيط نشاط RNAse عند 37 درجة مئوية. بعد ذلك ، تم غسل الشرائح بتركيزات تنازلية من محلول SSC المخلوط مع ST مرة أخرى عند 60 درجة. تم بعد ذلك غسل الأنسجة في محلول منظف (توين 20) قبل تلطيخها بنظام PerkinElmer TSA Fluorescein (NEL701001KT ؛ PerkinElmer ، Waltham ، MA ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم وضع الشرائح في غرفة رطبة وتم معالجتها بمخزن مؤقت للحظر متبوعًا بمقارن مضاد لـ DIG-HRP لمدة ساعتين. تم بعد ذلك غسل الشرائح لفترة وجيزة في محلول المنظف قبل إعادتها إلى غرفة رطبة مظلمة ومغطاة بمحلول يحتوي على كاشف فلورسين تيراميد (FITC) وتركها للجلوس لمدة 30 دقيقة. أخيرًا ، تم غسل الشرائح ، وتركها لتجف في الهواء ، وتغطيتها بحامل يحتوي على الصبغة النووية 4 ′ ، 6- دياميدينو -2- فينيلينودول (DAPI) (Vectashield ؛ Vector Lab ، Burlingame ، CA ، الولايات المتحدة الأمريكية) . تم تخزين الشرائح في الظلام عند -20 درجة حتى التصوير.

التصوير. تم الانتهاء من جميع التصوير باستخدام مجهر Axio Scope A1 (زايس ، تورنوود ، نيويورك ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم تحديد مناطق الاهتمام عبر تلطيخ DAPI باستخدام هدف 1 0 × بمساعدة أطلس الدماغ Paxinos و Watson ثم تم تصويرها تحت هدف 40 × (التكبير الفعلي ~ 900 ×). تم التقاط الصور لكل من بقع DAPI و FITC وتم تلوينها لاحقًا ودمجها تلقائيًا باستخدام ماكرو مخصص في برنامج ImageJ مع FIJI (NIH ، Bethesda ، MD). بسبب تدهور الأنسجة الذي يحدث في جميع أنحاء الموقع ، لم تكن جميع الأقسام أو المناطق ذات الأهمية المحتملة قابلة للتطبيق. على هذا النحو ، لم تكن الصور قادرة على التكديس على شكل z بشكل موثوق ، وبدلاً من ذلك ، تم التقاطها على مستوى واحد. تم تصوير وإحصاء المناطق التالية: القشرة الحوفية (بالإضافة إلى 3.72 إلى زائد 2.52 من bregma) ، والقشرة تحت الحوفية (بالإضافة إلى 3.52 إلى زائد 2.2 من bregma) ، والقشرة الجانبية (بالإضافة إلى 3.72 إلى زائد 3.2 من bregma) والبطني (بالإضافة إلى 3.72 إلى plus 3.0 من bregma) القشرة الأمامية المدارية ، ومنطقة CG1 من القشرة الحزامية الأمامية (بالإضافة إلى 3.72 إلى زائد 2.52 من bregma) ، ومنطقة CA3 من الحصين البطني (- 4.3 إلى - 4.8 من bregma) (الشكل S6). كانت نوى اللوزة القوية أيضًا ذات أهمية خاصة لدورها الراسخ في تعلم الخوف ، فإن تلف الأنسجة المذكور أعلاه يميل إلى أن يكون شديدًا بشكل خاص في هذا المجال. على هذا النحو ، لم نتمكن من الحصول على حجم عينة كبير بما يكفي لتضمين تلك المنطقة (كان مطلوبًا على الأقل 6 صور / منطقة قابلة للتطبيق لفأر ليتم تضمينه في التحليل الإحصائي لمنطقة معينة).

تم الانتهاء من الأعداد منطقة تلو الأخرى وتم تعيين رمز رقمي عشوائي لجميع ملفات الصور لتعمية المجرب الذي يكمل الأعداد من أي تفاصيل تتعلق بالصورة في وقت العد. تم أخذ جميع أعداد الخلايا في ImageJ باستخدام حزمة FIJI وتم إجراؤها باستخدام أداة عد الخلايا. تم حساب الخلايا لتعبير Arc mRNA النووي والهيولي بشكل منفصل وتم حساب الخلايا التي تظهر تعبيرًا متداخلاً على أنها تعبير مزدوج. تضمنت التعدادات النهائية للخلايا التي تعبر عن القوس النووي والخلايا التي تعبر عن القوس السيتوبلازمي فقط تلك الخلايا التي تعبر في تلك المنطقة فقط (أي ، لم تتضمن خلايا معبرة مزدوجة). تم أخذ التعداد الكامل للخلايا الملطخة DAPI وتم حساب النسبة المئوية للخلايا التي تظهر التعبير في كل منطقة معينة متبوعة بمتوسط ​​النسبة المئوية للخلايا التي تظهر كل نوع من التنشيط في الفئران الفردية. لمنع عشرات الفئران التي تحتوي على أعداد أكبر من الصور من التأثير غير المتناسب على إحصائياتنا ولمنع تضخم حجم العينة ، تم استخدام هذه المتوسطات فقط في تحليلنا النهائي.

نظرة عامة على التحليل الإحصائي. تم الانتهاء من جميع التحليلات الإحصائية باستخدام برنامج الترميز R. الكود الكامل متاح مجانًا للعرض في مستودع البيانات الخاص بنا على https://dataverse.tdl.org/dataverse/MonflsFearMemoryLab. ما لم يُنص على خلاف ذلك ، تم تعيين الحد الفاصل للاختبار الذي يعتبر ذا دلالة إحصائية على p<0.05. All of our Arc results, unless otherwise mentioned, were tested for significance using a series of two-way ANOVAs (type 2) containing sex and condition as between-subject variables (Sex and Condition) with an individual ANOVAs run for each area of expression (nucleus, cytoplasm, and dual). Similarly, a series of one-way ANOVAs were run with a combined variable containing the food task (diet Cin only or Choice test for Demonstrators and Observers; plain chow only for all Controls) for each area of expression. Sex was not included as a secondary variable as the relatively low number of female rats made sample sizes too small for certain condition/food task combinations. When ANOVA assumptions were violated, data were transformed using either a log(y+1) function or by taking the inverse square root. As these transforms did not always succeed in bringing ANOVAs in line with assumptions, Kruskal-Wallace tests were performed on datasets where transforms were not effective. Pairwise t-tests were performed for posthoc analyses against a Bonferroni-corrected alpha value when ANOVAs indicated a significant effect of condition (α=0.017) or a significant sex and condition interaction (α=0.008; conditions tested against each other within each sex-only) with between-group effect sizes calculated using Cohen's d. To provide a better gauge of variability for our smaller group sizes, the MSError obtained from our ANOVA was used in the denominator of post hoc t-tests. Effect sizes for ANOVAs were calculated using the standard partial η2 formula and for Kruskal-Wallace tests using the formula η2 H =(H − k+1)/(n – k). For simplicity of data presentation, unless the addition of the food task grouping variable resulted in a significant effect or unless a significant contribution of sex was detected all data were presented graphically split up by area of expression and overall experimental condition only. Any rats that had fewer than 6 viable images counted in a given brain region were excluded from the analysis for that area.

تم حساب الارتباطات ثنائية المتغير لفئران المراقبة والمتظاهر لتقييم العلاقات المحتملة بين المقاييس السلوكية وتعداد خلايا القوس للتعبير الذي يحدث في نقاط زمنية مناسبة (على سبيل المثال ، تعداد القوس السيتوبلازمي بالنسبة المئوية للقرفة التي يتم تناولها). تم استخدام معاملات ارتباط بيرسون إذا لم يتم اكتشاف القيم المتطرفة في أي من مجموعتي البيانات باستخدام اختبار Grubbs. إذا تم الكشف عن القيم المتطرفة ، تم استخدام معامل ارتباط سبيرمان بدلاً من ذلك. لقياس ما إذا كانت العلاقة بين التعلم الاجتماعي و Arc في خلايا معبرة مزدوجة في Observers ، تم حساب مقياس شامل للتعلم الاجتماعي - يشار إليه من الآن فصاعدًا بمقياس التعلم الاجتماعي (SLM) - عن طريق أخذ متوسط ​​الدرجات الموحدة ( z-Score) للنسبة المئوية لإجمالي ما تم تناوله من الطعام المعروض والنسبة المئوية للوقت الذي تم قضاؤه على اتصال مع المعيد أثناء مرحلة التعلم الاجتماعي FCbP أثناء عرض CS (الذكور) أو بعد عرض CS (للإناث). والجدير بالذكر أن نسبة التجميد في اليوم الأخير لم تُستخدم لفئران المراقبة لأن نتائجنا ونتائج تجربة المتابعة الخاصة بنا (انظر المواد التكميلية) أشارت إلى أن ظروف إجراء الاختبار السلوكي لدينا أدت إلى بعض سلوك التجميد حتى في الفئران الضابطة - على الأقل في الذكور - وعلى هذا النحو ، قد لا تكون أفضل مقياس لقوة استجابة الخوف المكتسبة اجتماعيًا. على هذا النحو ، نظرًا للنتائج السابقة التي توصلنا إليها والتي تشير إلى أن التفاعلات مع المعيد أثناء أو بعد CS (اعتمادًا على الجنس) تنبأت بشدة بالتجميد لاحقًا إلى cue12-14 ، تم اختبار التفاعل مع المتظاهر عند النقطة الزمنية المناسبة للجنس من أجل الارتباطات ضد نشاط القوس النووي بدلاً من التجميد في اليوم الأخير لجرذان الأوبزرفر. بالنسبة للمتظاهرين ، تم حساب مقياس مشابه بناءً على التجميد القياسي للإشارة في اليوم الأخير والنسبة المئوية الإجمالية التي تم تناولها التي كانت النظام الغذائي المألوف (دايت سين) وفحصها مقابل نشاط القوس المزدوج. لتصحيح الاختبارات المتعددة التي يتم إجراؤها على كل مجموعة بيانات سلوكية (6 ، لكل منطقة دماغية) ، تم تعديل قيمة p الحرجة للارتباطات إلى 0. 0083.

مراجع

1. Dawson، G.، Meltzof، AN، Osterling، J.، Rinaldi، J. & Brown، E. الأطفال المصابون بالتوحد يفشلون في التوجيه إلى المحفزات الاجتماعية التي تحدث بشكل طبيعي. J. التوحد ديف. ديسورد. 28 ، 479-485 (1998).

2. Zeeland، AAS-V.، Dapretto، M.، Ghahremani، DG، Poldrack، RA & Bookheimer، SY Reward Processing في التوحد. Res التوحد.

3 ، 53-67 (2010). 3. Chevallier، C.، Kohls، G.، Troiani، V.، Brodkin، ES & Schultz، RT Te نظرية الدوافع الاجتماعية للتوحد. اتجاهات كوغن. علوم. 16 ، 231-239 (2012).

4. Öst، L.-G. طرق اكتساب الرهاب ونتائج العلاجات السلوكية. Behav. الدقة. تير. 23 ، 683-689 (1985).

5. أولينديك ، تي إتش آند كينج ، نيوجيرسي أصول مخاوف الطفولة: تقييم لنظرية راتشمان عن اكتساب الخوف. Behav. الدقة. تير. 29 ، 117-123 (1991).

6. Merckelbach ، H. ، Arntz ، A. & de Jong ، P. تجارب التكييف في رهاب العنكبوت. Behav. الدقة. تير. 29 ، 333-335 (1991).

7. جيون ، د. وآخرون. يتضمن تعلم الخوف بالرصد نظام الألم المعيب وقنوات Cav1.2 Ca2 plus في ACC. نات. نيوروسسي. 13 ، 482-488 (2010).

8. Yusufshaq، S. & Rosenkranz، JA العزلة الاجتماعية بعد الفطام تضعف تكييف الخوف المرصود. Behav. Res الدماغ. 242 ، 142-149 (2013).

9. Kavaliers، M.، Choleris، E. & Colwell، DD التعلم من الآخرين للتعامل مع الذباب اللاذع: التعلم الاجتماعي للتسكين المشروط الناجم عن الخوف والتجنب النشط. Behav. نيوروسسي. 115 ، 661-674 (2001).

10. Kavaliers ، M. ، Colwell ، DD & Choleris ، E. تعلم الخوف والتعامل مع الضغوط الطبيعية: الكورتيكوستيرون المكتسب فرديًا واجتماعيًا واستجابات تجنب الذباب القارص. هورم. Behav. 43 ، 99-107 (2003).

11. Kavaliers ، M. ، Colwell ، DD & Choleris ، E. القرابة ، والألفة ، والحالة الاجتماعية تعدل التعلم الاجتماعي حول "الحيوانات المفترسة الصغيرة" (الذباب القارص) في فئران الغزلان. Behav. ايكول. سوسيوبيول. 58 ، 60-71 (2005).

12. Bruchey، AK، Jones، CE & Monfls، M.-H. تكييف الخوف بالوكالة: الانتقال الاجتماعي للخوف أثناء استرجاع الذاكرة. Behav. Res الدماغ. 214 ، 80-84 (2010).

13. Jones، CE & Monfls، M.-H. تتنبأ حالة الهيمنة بانتقال الخوف الاجتماعي في فئران المختبر. الرسوم المتحركة. كوغن. 19 ، 1051-1069 (2016).

14. Agee، LA، Jones، CE & Monfls، M.-H. اختلاف تأثيرات الألفة / القرابة في النقل الاجتماعي لجمعيات الخوف وتفضيلات الطعام في الفئران. الرسوم المتحركة. كوغن. 22 ، 1013-1026 (2019).

15. ميتشل ، سي جيه ، هايز ، سي إم ، جاردنر ، إم آر وداوسون ، جي آر قيود إجراء التحكم ثنائي الاتجاه للتحقيق في التقليد في الفئران: إشارات الرائحة على manipulandum. إكسب QJ. بسيتشول. ب 52 ، 193-202 (1999).

16. Galef، BG & Wigmore، SW نقل المعلومات المتعلقة بالأغذية البعيدة: تحقيق معمل لفرضية "مركز المعلومات". الرسوم المتحركة. Behav. 31 ، 748-758 (1983).

17. Galef و BG و Mason و JR و Preti و G. فيسيول. Behav. 42 ، 119-124 (1988).

18. Galef، BG دراسة حالة في التحليل السلوكي والتوليف والاهتمام بالتفاصيل: التعلم الاجتماعي لتفضيلات الطعام. Behav. Res الدماغ. 231 ، 266-271 (2012).

19. Posadas-Andrews، A. & Roper، TJ Social انتقال تفضيلات الطعام في الجرذان البالغة. الرسوم المتحركة. Behav. 31 ، 265-271 (1983).

20. Countryman، RA، Orlowski، JD، Brightwell، JJ، Oskowitz، AZ & Colombo، PJ CREB phosphorylation and c-Fos expression in the hippocampus of الفئران أثناء اكتساب واستدعاء الطعام المفضل المنتقل اجتماعيا. الحصين 15 ، 56-67 (2005).

21. Boix-Trelis، N.، Vale-Martínez، A.، Guillazo-Blanch، G.، Costa-Miserachs، D. & Martí-Nicolovius، M. -Fos التعبير. يتعلم. ميم. 13 ، 783-793 (2006).

22. Ross، RS & Eichenbaum، H. Dynamics of hippocampal and cortical activation أثناء تقوية الذاكرة غير المكانية. J. نيوروسسي. 26 ، 4852-4859 (2006).

23. Smith، CA، Countryman، RA، Sahuque، LL & Colombo، PJ الدورات الزمنية للتعبير عن Fos في حصين الفئران والقشرة المخية الحديثة بعد اكتساب واسترجاع تفضيلات الطعام المنقولة اجتماعيًا. نيوروبيول. يتعلم. ميم. 88 ، 65-74 (2007).

24. Lesburguères، E. et al. مطلوب وضع العلامات المبكرة للشبكات القشرية لتشكيل ذاكرة ارتباطية دائمة. العلوم 331 ، 924-928 (2011).

25. Knapska، E. et al. يثير نقل المعلومات العاطفية بين الموضوع أنماطًا معينة من تنشيط اللوزة. بروك. ناتل. أكاد. علوم. 103 ، 3858-3862 (2006).

26. جونز ، CE ، ريها ، PD ، Gore ، AC & Monfls ، M.-H. الانتقال الاجتماعي للخوف بافلوفيان: تكييف الخوف بالوكالة في إناث الفئران ذات الصلة. الرسوم المتحركة. كوغن. 17 ، 827-834 (2014). 27. التوأمة ، RC ، Vantrease ، JE ، Love ، S. ، Padival ، M. & Rosenkranz ، JA الدائرة داخل اللوزة تنظم على وجه التحديد تعلم الخوف الاجتماعي. نات. نيوروسسي. 20 ، 459-469 (2017).

28. Olsson، A.، Knapska، E. & Lindström، B. Te النظم العصبية والحاسوبية للتعلم الاجتماعي. نات. القس نيوروسسي. 21 ، 197-212 (2020).

29. Guzowski، JF، McNaughton، BL، Barnes، CA & Worley، PF تعبير خاص بالبيئة عن الجين المبكر الفوري القوس في مجموعات الخلايا العصبية الحُصَينية. نات. نيوروسسي. 2 ، 1120-1124 (1999).

30. Kim، JJ & Jung، MW الدوائر والآليات العصبية المشاركة في تكييف الخوف بافلوفيان: مراجعة نقدية. نيوروسسي. بيوبيهاف. القس 30 ، 188-202 (2006).

31. Laurent، V. & Westbrook، RF Inactivation of the infralimbic but not the prelimbic cortex dislimbing and Retrieved of foul extinction. يتعلم. ميم. 16 ، 520-529 (2009).

32. Tovote ، P. ، Fadok ، JP & Lüthi ، A. الدوائر العصبية للخوف والقلق. نات. القس نيوروسسي. 16 ، 317-331 (2015).

33. Agee، LA & Monfls، M.-H. تأثير موثوقية المتظاهر وحداثة العرض الأخير على اكتساب تفضيل غذائي منقول اجتماعيًا. R. Soc. افتح Sci. 5 ، 172391 (2018).

34. نيكولاينكو ، أو. ، باتيل ، إس ، إريكسن ، إم إس آند برامهام ، سي آر آرك بروتين: محور مرن لدونة التشابك والإدراك. سيمين. تطوير الخلية. بيول. 77 ، 33-42 (2018).

35. يتم تحفيز تعبير Chia، C. & Otto، T. Hippocampal Arc (Arg3.1) عن طريق استدعاء الذاكرة وهو مطلوب لإعادة توحيد الذاكرة في تكييف أثر الخوف. نيوروبيول. يتعلم. ميم. 106 ، 48-55 (2013).

36. بيلارزيك ، ك وآخرون. يُظهر فقدان وظيفة إنزيم الفوسفوديستيراز 11A4 أنه يمكن فصل الذكريات الحديثة والنائية طويلة المدى. بالعملة. بيول. 29 ، 2307-2321. e5 (2019).

37. جونز ، سي تي الانتقال الاجتماعي للخوف الترابطي في القوارض - الفروق الفردية في تكييف الخوف حسب المجلد بالوكالة. 17 (سبرينغر ، 2021).

38. سميث ، كاليفورنيا ، إيست ، بي إس وكولومبو ، بي جيه تي القشرة الأمامية المدارية ليست ضرورية لاقتناء أو استدعاء التفضيلات الغذائية المنقولة اجتماعيًا عن بُعد. Behav. Res الدماغ. 208 ، 243-249 (2010).

39. Rudebeck، PH، Walton، ME، Smyth، AN، Bannerman، DM & Rushworth، MFS تعالج المسارات العصبية المنفصلة تكاليف القرار المختلفة. نات. نيوروسسي. 9 ، 1161-1168 (2006).

40. Rolls، ET & Grabenhorst، F. Te orbitofrontal cortex وما بعده: من التأثير إلى اتخاذ القرار. بروغ. نيوروبيول. 86 ، 216-244 (2008).

41. Wallis، JD دراسات عبر الأنواع للقشرة الحجاجية الأمامية واتخاذ القرار على أساس القيمة. نات. نيوروسسي. 15 ، 13-19 (2012).

42. Izquierdo ، أ. عدم التجانس الوظيفي داخل القشرة الأمامية المدارية للفئران في مكافأة التعلم واتخاذ القرار. J. نيوروسسي. 37 ، 10529-10540 (2017).

43. Randesi، M. et al. الفروق بين الجنسين بعد الإجهاد المزمن في التعبير عن الجينات المرتبطة بالمواد الأفيونية والإجهاد والمرونة العصبية في حصين الفئران. نيوروبيول. الإجهاد 8 ، 33-41 (2018).

44. مارين ، س ، فان ، كوالالمبور وليبرزون ، آي. تي الدماغ السياقي: الآثار المترتبة على تكييف الخوف ، والانقراض ، وعلم الأمراض النفسية. نات. القس نيوروسسي. 14 ، 417-428 (2013).

45. Vidal-Gonzalez، I.، Vidal-Gonzalez، B.، Rauch، SL & Quirk، GJ Microstimulation يكشف عن التأثيرات المتعارضة لقشرة ما قبل الحوفي و infralimbic على التعبير عن الخوف المشروط. يتعلم. ميم. 13 ، 728-733 (2006).

46. ​​Sierra-Mercado، D.، Padilla-Coreano، N. & Quirk، GJ الأدوار المنفصلة للقشور ما قبل الحوفية وتحت الحوفية ، الحصين البطني ، واللوزة القاعدية الوحشية في التعبير عن الخوف المشروط وانقراضه. علم الأدوية النفسية والعصبية 36 ، 529-538 (2011).

47. باران ، سي ، أرمسترونج ، سي ، نيرين ، دي سي ، هانا ، جي جي وكونراد ، سي دي الإجهاد المزمن والاختلافات الجنسية على استدعاء تكييف الخوف والانقراض. نيوروبيول. يتعلم. ميم. 91 ، 323-332 (2009).

48. Greiner، EM، Müller، I.، Norris، MR، Ng، KH & Sangha، S. الفروق بين الجنسين في تنظيم الخوف وسلوكيات البحث عن المكافآت في مهمة التمييز بين الخوف والأمان والمكافأة. Behav. Res الدماغ. 368 ، 111903 (2019).

49. Day، HLL & Stevenson، CW Te الأساس العصبي البيولوجي للاختلافات بين الجنسين في الخوف المكتسب وتثبيطه. يورو. J. نيوروسسي. 52 ، 2466-2486 (2020).

50. van Hasselt، FN et al. ترتبط الاختلافات الفردية في رعاية الأم في وقت مبكر من الحياة مع اتخاذ القرار في وقت لاحق من الحياة والتعبير عن c-fos في المناطق الفرعية قبل الجبهية من الفئران. بلوس وان 7 ، e37820 (2012).

51. Bayless، DW & Daniel، JM الفروق بين الجنسين في مستويات البروتين المرتبطة بالمايلين داخل وكثافة الإسقاطات بين القشرة الأمامية المدارية والمخطط الظهري للفئران البالغة: الآثار المترتبة على التحكم المثبط. علم الأعصاب 300 ، 286-296 (2015).

52. Orsini، CA & Setlow، B. الفروق بين الجنسين في النماذج الحيوانية لصنع القرار. J. نيوروسسي. الدقة. 95 ، 260-269 (2017).

53. Corcoran، KA & Quirk، GJ النشاط في القشرة المخية قبل الحمل ضروري للتعبير عن التعلم ، ولكن ليس بالفطرة. مخاوف. J. نيوروسسي. 27 ، 840-844 (2007).

54. Burgos-Robles، A.، Vidal-Gonzalez، I. & Quirk، GJ ترتبط الاستجابات الشرطية المستمرة في الخلايا العصبية قبل الجبهية بتعبير الخوف وفشل الانقراض. J. نيوروسسي. 29 ، 8474-8482 (2009).

55. فنتون ، جنرال إلكتريك وآخرون. يساهم نشاط القشرة الحوفية المستمرة في تعزيز التعبير عن الخوف المكتسب لدى الإناث. يتعلم. ميم. 21 ، 55-60 (2014).

56. Fenton، GE، Halliday، DM، Mason، R.، Bredy، TW & Stevenson، CW تتضمن الفروق بين الجنسين في التعبير عن الخوف المكتسب والانقراض تذبذبات جاما المتغيرة في قشرة الفص الجبهي الإنسي. نيوروبيول. يتعلم. ميم. 135 ، 66-72 (2016).

57. Kirry، AJ et al. تعمل إشارات عديد ببتيد تنشيط إنزيم الغدة النخامية (PACAP) في قشرة الفص الجبهي على تعديل تعلم الخوف الملحوظ ، ولكن ليس الذاكرة العاملة المكانية ، في إناث الجرذان. علم الأدوية العصبية 133 ، 145-154 (2018).

58. Day ، HLL ، Suwansawang ، S. ، Halliday ، DM & Stevenson ، CW ترتبط الفروق بين الجنسين في تمييز الخوف السمعي بوظيفة قشرة الفص الجبهي الإنسي المتغيرة. علوم. ممثل 10 ، 6300 (2020).

59. Kikusui، T.، Takigami، S.، Takeuchi، Y. & Mori، Y. يعزز فرمون الإنذار ارتفاع الحرارة الناجم عن الإجهاد في الفئران. فيسيول. Behav. 72 ، 45-50 (2001).

60. Friard، O. & Gamba، M. BORIS: برنامج مجاني متعدد الاستخدامات مفتوح المصدر لتسجيل الأحداث لترميز الفيديو / الصوت والملاحظات الحية. طرق Ecol. Evol. 7 ، 1325-1330 (2016). 61. Lee، HJ، Haberman، RP، Roquet، RF & Monfls، M.-H. الانقراض والاسترجاع بالإضافة إلى انقراض الخوف المشروط ينشط بشكل تفاضلي قشرة الفص الجبهي الإنسي واللوزة في الفئران. أمام. Behav. نيوروسسي. 9 ، 1-10 (2016).

62. بتروفيتش ، GD ، هولندا ، PC & Gallagher ، M. Amygdalar ومسارات ما قبل الجبهية إلى منطقة ما تحت المهاد الجانبي يتم تنشيطها من خلال إشارة مكتسبة تحفز تناول الطعام. J. نيوروسسي. 25 ، 8295-8302 (2005).

63. Paxinos، G. & Watson، C. Te Rat Brain في الإحداثيات التجسيمية: غلاف صلب. (إلسفير ، 2006).