التأثيرات الوقائية لمادة الكيرسيتين على الضرر الأنبوبي الظهاري الناجم عن الإجهاد التأكسدي في نموذج فرط أوكسالات البول التجريبي عند الجرذان

لمزيد من المعلومات. اتصلtina.xiang@wecistanche.com

الملخص: الخلفية والأهداف: الأكثر شيوعًاحصى الكلىحصوات الكالسيوم وحصوات أكسالات الكالسيوم (CaOx) هي أكثر أنواع حصوات الكالسيوم شيوعًا. فرط أوكسالات البول هو عامل خطر أساسي لتكوين هذه الحصوات.كيرسيتينهو بوليفينول مع مضادات الأكسدة ومضاد للالتهابات والعديد من الآثار الفسيولوجية الأخرى. كان الهدف من هذه الدراسة هو التحقيق في التأثير الوقائي للكيرسيتين في تحص الكلية الناجم عن فرط أوكسالات البول. المواد والطرق: تم تقسيم ذكور فئران Wistar-Albino التي تزن 250-300 جم (ن =24) بشكل عشوائي إلى ثلاث مجموعات: مجموعة التحكم (ن =8) ، إيثيلين جلايكول (EG) (ن {{6) }}) و EG plus quercetin (n =8). تم إعطاء محلول EG-water واحد بالمائة لجميع الفئران باستثناء المجموعة الضابطة كمياه شرب لمدة خمسة أسابيع. تم إعطاء محلول Quercetin-water لمجموعة EG plus quercetin عن طريق الحقن الفموي بجرعة 10 مجم / كجم / يوم. تم تحليل مستويات Malondialdehyde (MDA) ، الكاتلاز (CAT) ، اليوريا ، الكالسيوم ، والأكسالات في عينات الدم والبول. التقييمات النسيجية المرضية والتحاليل المناعيةالاكسدةواشتعالتم إجراء مؤشرات كيناز البروتين المنشط للميتوجين p38 (p 38- MAPK) والعامل النووي kappa B (NF-kB) على أنسجة الكلى. النتائج: كانت مستويات MDA أقل بشكل ملحوظ في المجموعة المعالجة بالكيرسيتين عنها في المجموعة المعالجة بالـ EG (ص =0. 001). على الرغم من أن مستويات CAT كانت أعلى في المجموعة المعالجة بالكيرسيتين مقارنة بالمجموعة التي تدار بالـ EG ، إلا أنها لم تكن مختلفة بشكل كبير بين هذه المجموعات. كان التعبير عن p38 MAPK أقل بشكل ملحوظ في المجموعة المعالجة بالكيرسيتين مقارنة بمجموعة EG (ص<0.004). there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" between="" the="" quercetin="" and="" eg="" groups="" in="" terms="" of="" nf-kb="" expression.="" conclusions:="" we="" conclude="" that="" hyperoxaluria="" activated="" the="" signaling="" pathways,="" which="" facilitate="" the="" oxidative="" processes="" leading="" to="" oxalate="" stone="" formation="" in="" the="" kidneys.="" our="" findings="" indicated="" that="" quercetin="" reduced="" damage="" due="" to="" hyperoxaluria.="" these="" results="" imply="" that="" quercetin="" can="" be="" considered="" a="" therapeutic="" agent="" for="" decreasing="" oxalate="" stone="" formation,="" especially="" in="" patients="" with="" recurrent="" stones="" due="" to="">

الكلمات الدالة: أكسالات الكالسيوم؛ فرط أوكسالات البول. الاكسدة؛ كيرسيتين

انقر هنا لمعرفة المزيد من المنتجات

1 المقدمة

يتضمن تكوين الحصوات البولية عدة عوامل ، بما في ذلك تركيز الأيونات المسببة لتكوين الحصوات ، ودرجة حموضة البول ، ومعدلات تدفق البول ، وتشريح المسالك البولية [l]. ما يقرب من 75 في المائة من حصوات الكلى عبارة عن حصوات الكالسيوم ، وحصوات أكسالات الكالسيوم (CaOx) هي حصوات الكالسيوم الأكثر شيوعًا [2،3]. من المعروف أن فرط أوكسالات البول هو عامل خطر أساسي لتكوين هذه الحصوات. تؤدي الزيادة الناتجة في تركيز أكسالات البول إلى تكوين حصوات عبر أيونات الكالسيوم والأكسالات لتكوين بلورات CaOx عند درجة الحموضة الفسيولوجية. لقد تم إثبات أن تركيز الأكسالات الزائد يضر بخلايا نبيبات الكلى عن طريق جذور الأكسجين الحرة ويزيد بيروكسيد الدهون ، وهذه العملية تسهل تكوين بلورات CaOx وتعلقها بالظهارة الأنبوبية للكلى [4،5].

على الرغم من التحسينات في علاج حصوات الكلى ، فقد تم الإبلاغ عن معدلات تكرار بنسبة 10 في المائة في عام واحد ، و 35 في المائة في خمس سنوات ، و 50 في المائة في عشر سنوات بالنسبة لحصوات أكسالات الكالسيوم [6،7]. دفعت معدلات التكرار العالية هذه الباحثين إلى استكشاف طرق وقائية محتملة لتكرار ظهور حصوات CaOx [6-8].

كيرسيتينهو فلافانول موجود في العديد من الأطعمة ، بما في ذلك المكسرات والنبيذ والبذور وبعض الفواكه والخضروات [8]. بالإضافة إلى أنشطته القوية كمضادات الأكسدة ، والكسح الجذري ، والمضادة للالتهابات ، فإنه يحتوي أيضًا على أنشطة مضادة للبكتيريا ، ومضادة للفيروسات ، ومضادة للجراثيم ، ومُعدلة للمناعة [8-10].

لوحظ زيادة في الإجهاد التأكسدي في المرضى الذين يعانون من حصوات الكلى [11]. على هذا النحو ، تم الإبلاغ عن انخفاض خطر الإصابة بتحصي الكلية في المرضى الذين لديهم مستويات عالية من مضادات الأكسدة من أولئك الذين لديهم مستويات منخفضة من مضادات الأكسدة [12]. وقد تبين أن لويحات راندال ، التي يُعتقد أنها تتشكل بسبب الإجهاد التأكسدي ، لها دور أساسي في تكرار حجر أكسيد الكالسيوم [13]. لذلك ، قد يكون تثبيط تكوين لوحة راندال والإجهاد التأكسدي مفيدًا لمنع تكرار الحصوات.

بحثت هذه الدراسة في التأثير الوقائي المحتمل للكيرسيتين في تحص الكلية والتكلس الكلوي من خلال تحديد تأثيره على الإجهاد التأكسدي والالتهاب في نموذج فرط أوكسالات الفئران.

2. المواد والأساليب

2.1 الحيوانات

تم استخدام ذكور فئران Wistar-Albino التي تزن 250-300 جم (ن =24) في هذه الدراسة التجريبية ، التي أجريت في مختبر الحيوانات التجريبية بجامعة سليمان ديميريل. تم إيواء الفئران في غرفة تم الحفاظ عليها بدرجة حرارة 25 ± 1 درجة مع رطوبة نسبية تبلغ 55 بالمائة. لقد تم إعطاؤهم الطعام والماء بالمال والشهرة. أجريت الدراسة بعد الحصول على موافقة لجنة المراجعة الأخلاقية لتجارب الحيوانات بجامعة سليمان ديميريل (رقم الموافقة: 33/01). تم إجراء جميع التجارب بناءً على المبادئ الأخلاقية الواردة في توجيه الاتحاد الأوروبي 2010/63 / EU للتجارب على الحيوانات.

2.2. مواد كيميائية

تم شراء Ethylene glycol (EG) من Merck Chemicals (Darmstadt ، ألمانيا) ، بينما تم شراء quercetin من Sigma Chemicals (سانت لويس ، ميزوري ، الولايات المتحدة الأمريكية).

2.3 نموذج تحص الكلية الناجم عن فرط أوكسالات البول وإدارة كيرسيتين

تم تقسيم الفئران بشكل عشوائي إلى ثلاث مجموعات. مجموعة التحكم (ن {{{1 0}}}) ، EG (ن =8) ، ومجموعة EG بالإضافة إلى كيرسيتين (ن =8). أعطيت جميع الفئران باستثناء المجموعة الضابطة 1 في المائة من محلول EG-water كمياه شرب لمدة خمسة أسابيع [14]. تم إعطاء جرعة 10 مجم / كجم / يوم من محلول الماء كيرسيتين للفئران في مجموعة EG plus quercetin عن طريق التزقيم عن طريق الفم. تم جمع عينات بول مدتها 24 ساعة من الحيوانات في اليوم 0 قبل إعطاء EG أو كيرسيتين وفي اليومين 15 و 30. تم تخدير الفئران في نهاية فترة التجربة التي استمرت خمسة أسابيع ، وتم جمع عينات الدم من الكافا السفلي الوريد. بعد ذلك ، تم التضحية بالجرذان ، وتم استئصال الكليتين بسرعة. تم دمج الكلى اليمنى في 10 في المائة من الفورمالديهايد المحايد. تم غسل الكلى اليسرى بمحلول بارد 0.9 بالمائة من كلوريد الصوديوم وتخزينها عند درجة -80 حتى التجانس.

2.4 التحليلات الكيميائية الحيوية

تم إجراء تحليل لمستويات أكسالات البلازما بواسطة التقنية الموصوفة سابقًا بواسطة Ladwig et al. [15]. تم تحديد مستوى أكسالات البول بواسطة مجموعة Trinity Biotech Oxalate الأنزيمية (Trinity Biotech pic ، سانت لويس ، ميزوري ، الولايات المتحدة الأمريكية). الكاتلاز (CAT) هو إنزيم مضاد للأكسدة [10،16]. تم قياس نشاط الكاتلاز بواسطة طريقة Aebi [16]. تم تحليل مستويات البروتين الطاف بواسطة ألبومين مصل البقر باستخدام طريقة لوري كما هو موضح في البروتوكول القياسي [17]. تم أيضًا تحليل مستويات Malondialdehyde (MDA) نظرًا لأن MDA يعتبر مؤشرًا حيويًا للإجهاد التأكسدي [9]. تم قياس مستويات Malondialdehyde بشكل طيفي وفقًا للطريقة التي اقترحها Ohkawa et al. [18] تم إجراء اكتشاف البروتين باستخدام الطريقة التي وصفها لوري وآخرون. [17]. تم قياس مستويات الكرياتينين في البلازما والبول عن طريق قياس الألوان حسب طريقة جاف. تم تحليل تركيزات اليوريا في البلازما بالطرق الحركية واللونية وتفاعلات اليورياز وتفاعلات نازعة الهيدروجين الجلوتامات. في المقابل ، تم قياس مستويات الكالسيوم في البول بواسطة محلل ذاتي عبر طريقة Schwarzenbach و o-Cresolphthalein المعقدة. تم جمع عينات البول والدم الموقوتة لحساب تصفية الكرياتينين. تم التعبير عن حجم البول (V) بالملليتر ، بينما تم التعبير عن مستويات الكرياتينين في الدم والبول بالملجم / ديسيلتر. تم حساب تصفية الكرياتينين وفقًا للصيغة:

تصفية الكرياتينين (مل / دقيقة)=U (ملجم / ديسيلتر) × V (مل / دقيقة) / S (ملجم / ديسيلتر) [V: حجم البول (مل / دقيقة) ، U: كرياتينين البول (مجم / ديسيلتر) ، S: مصل الكرياتينين (ملغم / ديسيلتر)]

2.5 التحليلات النسيجية المرضية

تم دمج الكلى اليمنى في الفورمالديهايد المحايد بنسبة 10 في المائة (Merck-KGaA ، دارمشتات ، ألمانيا). بدأت معالجة الأنسجة بعد 24-48 فترة تثبيت.الكلىتم تلطيخ الأنسجة بهيماتوكسيلين ويوزين (H&E) وفحصها تحت المجهر الضوئي. تم إجراء فحوصات الأنسجة المرضية بنسبة تكبير 10 × و 20 × و 40 × ، خاصة لتقييم احتقان الأوعية الدموية في كل من الكبيبات النخاعية والقشرية ، وشدة تسلل الخلايا أحادية النواة ، وأحجام وأشكال اللومينا الأنبوبية.

2.6. التحليلات المناعية

عامل النسخ النووي kB (NF-kB) والبروتين كيناز p38 المنشط بالميتوجين (p 38- MAPK) هما مساران رئيسيان للإشارة على مستوى البروتين في التخليق الحيوي للسيتوكين المسبِّب للالتهابات [19]. بالإضافة إلى ذلك ، تقوم الأكسالات بتنشيط انتقائي لمسار تأشير p 38- MAPK [20]. تم أخذ الشرائح في وعاء الحضانة بعد الانسداد. تمت إضافة الجسم المضاد NF-kB / p65 (سانتا كروز ، sc -109) إلى القسم الأول ، الجسم المضاد MAPK / p38 (سانتا كروز ، sc -7149) إلى القسم الثاني ، والجسم المضاد الثانوي ( تم إضافة Goat anti-polyvalent، Thermo) إلى الأقسام اللاحقة لأغراض التحكم وحفظها عند 4 درجات زائد طوال الليل. تم استخدام مجموعة ABCStaining (Santa Cruz ، sc -2018) لبقية بروتوكول التلوين. تم تخزين الأنسجة المغطاة بالصفيحة باستخدام Entella وتجفيفها لفحصها بالمجهر الضوئي. تم تصنيف الأقسام على النحو التالي ، اعتمادًا على شدة التلوين في الفحص المجهري الضوئي ، كما في الدراسة التي أجراها Liu HS et al. [19]: 一） درجة （درجة سلبية） ∶ لا تلطيخ ؛

(زائد) النتيجة (درجة واحدة إيجابية): معتدل ؛

(علامة زائد) الدرجة (درجتان إيجابيتان): معتدلة ؛

(زائد زائد) النتيجة (3 درجات إيجابية): التلوين الكامل موجود.

2.7 الإحصائيات

تم إجراء التحليل الإحصائي باستخدام برنامج الحزمة الإحصائية للعلوم الاجتماعية 11. 0 (SPSS 11. 0). أعطيت القيم كوسيلة ± الانحرافات المعيارية. تم اختبار التوزيع الطبيعي للمتغيرات من خلال عينة واحدة من اختبار Kolmogorov-Smirnov. تم إجراء ANOVA أحادي الاتجاه ، وإذا تبين أنه مهم ، فقد تم استخدام اختبار Duncan اللاحق لتقييم وتحديد الاختلافات بين المجموعات. تم اعتبار القيمة p مهمة عندما كانت أقل من ذلك<>

3. النتائج

3.1. النتائج البيوكيميائية

يتم عرض بيانات مجموعة الدراسة في الجدول 1. كان متوسط ​​مستوى MDA لمجموعة EG أعلى من مجموعة التحكم ، بينما كان متوسط ​​مستوى MDA لمجموعة كيرسيتين أقل بكثير من مجموعة EG (ص=0. 001) . لم يكن هناك فرق معتد به إحصائيا بين المجموعات من حيث نشاط CAT. في دراستنا ، تم تخفيض مستويات MDA بواسطة كيرسيتين ، بينما لم يتأثر نشاط CAT بواسطة كيرسيتين. كانت مستويات أكسالات البول أعلى بشكل ملحوظ في مجموعة EG مقارنة بالمجموعات الأخرى (ص<0.001). however,="" the="" urinary="" oxalate="" levels="" of="" the="" quercetin="" group="" were="" significantly="" lower="" than="" the="" eg="" group=""><0.001). these="" results="" indicated="" that="" quercetin="" reduced="" the="" urinary="" oxalate="" levels,="" which="" were="" increased="" by="" eg="" administration.="" while="" the="" plasma="" urea="" concentration="" increased="" significantly="" in="" the="" eg="" group="" compared="" to="" in="" the="" control="" group,="" a="" statistically="" significant="" decrease="" was="" observed="" in="" the="" quercetin="" group="" compared="" to="" the="" eg="" group=""><0.05). there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" between="" the="" groups="" in="" terms="" of="" creatinine="" clearance="" and="" plasma="" oxalate="" levels="" (p="">0 05). على الرغم من أن كيرسيتين قلل من مستوى أكسالات البلازما إلا أن ذلك لم يكن ذا دلالة إحصائية. كان تركيز الكالسيوم في البول أقل بكثير في المجموعات الأخرى منه في المجموعة الضابطة (ص<0.05). however,="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" between="" eg="" and="" quercetin="" groups="" in="" terms="" of="" mean="" urinary="" calcium="" concentrations.="" altogether="" these="" findings="" indicate="" that="" eg="" increased="" urinary="" oxalate="" excretion="" and="" plasma="" urea="" concentration="" and="" decreased="" urinary="" calcium="">

3.2 النتائج النسيجية المرضية

كشفت الفحوصات النسيجية المرضية لكلى الفئران في المجموعة الضابطة تحت المجهر الضوئي عن نتائج طبيعية (الشكل 1- مجموعة التحكم). تم اكتشاف النتائج ، بما في ذلك الازدحام في الأوعية الكبيبية ، وتسلل الخلايا أحادية النواة ، وتضييق اللومن الأنبوبي ، وخاصة في الأنابيب القريبة ، في مجموعة EG (الشكل 1- EG). ولوحظت نتائج نسيجية مرضية مماثلة في مجموعة الكيرسيتين ، لكنها كانت جميعها أكثر اعتدالًا (الشكل 1- EG بالإضافة إلى كيرسيتين). ومع ذلك ، لم يتم استخدام أي نظام تسجيل لتقييم ما إذا كان هذا الاختلاف ذا دلالة إحصائية.

3.3 النتائج المناعية

تم التحقيق في تأثير كيرسيتين على بروتين كيناز p38 المنشط بالميتوجين (p 38- MAPK) والعامل النووي كابا ب (NF-kB) عن طريق تلطيخ المناعية للأنسجة الكلوية (الشكل 2). أوضحت مقارنة المجموعات من حيث p 38- MAPK أن الأنسجة الكلوية لفئران مجموعة EG كانت ملطخة بشكل أكثر كثافة من تلك الخاصة بفئران المجموعة الضابطة (p<0.001). on="" the="" other="" hand,="" p38-mapkstaining="" was="" significantly="" less="" intense="" in="" the="" quercetin="" group="" than="" in="" the="" eg="" group.="" the="" statistical="" analysis="" revealed="" that="" quercetin="" reduced="" p38-mapk="" activity="" significantly="" compared="" to="" the="" eg="" group=""><>

كشفت مقارنة المجموعات المتعلقة بالتلوين المناعي NF-kB أن أنسجة الكلى للفئران في مجموعة EG كانت ملطخة بشكل أكثر كثافة من تلك الموجودة في الفئران في المجموعة الضابطة (p.<0.001). there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" between="" the="" other="" groups="" in="" terms="" of="" the="" intensity="" of="" nf-kb="" staining.="" altogether,="" these="" findings="" pointed="" out="" that="" eginduced="" the="" p38-mapk="" and="" nf-kb="" activities="" in="" renal="" tissues.="" additionally,="" quercetin="" significantly="" reduced="" p38-mapk="" activity="" while="" it="" had="" no="" significant="" effect="" on="" nf-kb="" activity.="" the="" relevant="" data="" are="" displayed="" in="" table="">

4. مناقشة

على الرغم من التقدم في طرق الحد الأدنى من التدخل الجراحي لعلاج تحص الكلية ، إلا أن ارتفاع الحصيات المتبقية ومعدلات التكرار لا تزال تشكل مشاكل خطيرة للمرضى وأطباء المسالك البولية [21]. لذلك ، هناك حاجة إلى استراتيجيات علاج طبي فعالة.

لم يتم تحديد الآليات الدقيقة لتشكيل الحصوات ؛ ومع ذلك ، فمن المعروف أن ما يقرب من 80 بالمائة من حصوات الكلى تحتوي على CaOx وأن أحد أكثر الأسباب شيوعًا لحصوات CaOx هو فرط أوكسالات البول [1،22]. الأوكسالات هو منتج ثانوي لعملية التمثيل الغذائي الطبيعي ، ويتم التخلص منه من الجسم في ظل الظروف العادية [20]. في حالة فرط أوكسالات البول. تتحد أكسالات البول الزائدة مع الكالسيوم عند درجة الحموضة الفسيولوجية وتشكل بلورات CaOxcrystals المتراكمة في الكلى. تبين أن بلورات CaOx تتلف الخلايا الطلائية الأنبوبية للكلية وتؤدي إلى مرض حصوات الكلى [14،20]. لذلك ، تم استخدام نماذج الفئران المفرطة أوكسالات البول على نطاق واسع لتقليد تكوين حصوات الكلى لدى البشر. في هذه الدراسات ، تم استخدام EG كعامل محفز لفرط أوكسالات البول ، كما كان الحال في دراستنا [14 ، 20].

تم الإبلاغ عن زيادة تركيز الأكسالات في البول في غضون يومين ، وتطور فرط أوكسالات البول في غضون ثلاثة أيام ، وتطور بيلة CaOx البلورية في غضون أسبوعين ، ولوحظ تحص كلوي CaOx في غضون {0} أسابيع عند صفر. {{2} } تم إعطاء EG في المئة للحث على فرط أوكسالات البول [14،22]. في نهاية هذه العملية ، ظلت العوامل البولية الأخرى وتصفية الكرياتينين ضمن الحدود الطبيعية ، في حين تم تقليل درجة الحموضة في البول وإفراز السترات بشكل كبير [14،22]. في دراستنا ، تسببنا في حدوث فرط أوكسالات البول عن طريق إعطاء 1 في المائة من EG ، مما أدى لاحقًا إلى تلف الخلايا في الخلايا الأنبوبية.

في حالة فرط أوكسالات البول ، يؤدي تراكم بلورات CaOx في لومن مجرى الهواء الحليمي الكلوي والترسبات الشبيهة بالحجر الناتجة إلى الانسداد ، مما يمهد الطريق للتدهور الكلوي. نتيجة لهذه العملية ، قد ترتفع مستويات الدم من منتجات النفايات النيتروجينية ، مثل حمض اليوريك ، ونتروجين اليوريا في الدم ، والكرياتينين [22،23]. في دراستنا ، تم إثبات الخلل الكلوي من خلال زيادة ملحوظة في مستويات اليوريا في الدم في الحيوانات المعالجة بـ EG. ومع ذلك ، فإن علاج كيرسيتين يقلل بشكل كبير من مستويات اليوريا في الدم.

الكيرسيتين هو جزيء له تأثيرات قوية مضادة للأكسدة ومضادة للالتهابات [24]. توجد في الخضروات والفواكه والشاي وأنواع عديدة من الأطعمة. بالإضافة إلى كونه الزبال القوي لأنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) ، فإن كيرسيتين يزيد من القدرة الكلية لمضادات الأكسدة في البلازما [25،26]. أفادت بعض الدراسات أن مركبات الفلافونويد تقلل الإجهاد التأكسدي في خلايا الكلى الأنبوبية ، وتمنع تراكم بلورات CaOx ، وتقلل بيروكسيد الدهون الناجم عن الأكسالات في مزارع الخلايا [27 ، 28].

من المسلم به على نطاق واسع أن الإجهاد التأكسدي يلعب دورًا مهمًا في تكوين حصوات الكلى [12،22]. تتراكم بلورات CaOx في أنسجة الكلى مما يؤدي إلى تخليق العديد من الجزيئات الكبيرة التي تبدأ العمليات الالتهابية والليفية. من المرجح أن تشترك أنواع الأكسجين التفاعلية في أحداث إرسال مختلفة خلال هذه الفترة [14]. في كل من دراسات زراعة الخلايا الظهارية للحيوان والكلى ، ظهر تكوين الجذور الحرة استجابةً لفرط أوكسالات البول وتكوين بلورات CaOx [20،22]. نظرًا لأن الدهون هي الجزيئات الحيوية الأكثر حساسية في غشاء الخلية ضد الجذور الحرة ، يحدث بيروكسيد الدهون في أغشية الخلايا [27 ، 28]. بيروكسيد الدهون هو الحدث الأساسي للضرر الخلوي لأنه يعطل بنية الغشاء وبالتالي يتسبب في تلف الخلايا. MDA هو مؤشر على بيروكسيد الدهون. كما يشير أيضًا إلى زيادة إنتاج أنواع ROS [22،29]. لذلك يتم استخدامه في تقييم بيروكسيد الدهون. من المعروف أن الضرر الناجم عن ترسب CaOxcrystal وتشكيل ROS يمكن منعه أو تقليله عن طريق مضادات الأكسدة الذاتية مثل ديسموتاز الفائق (SOD) و CAT و glutathione peroxidase (GSH-Px) [20،22،29]. في هذه الدراسة ، وجد أن مستويات MDA تزداد في نموذج حيواني تجريبي من تحص الكلية بفرط أوكسالوريك ، والذي تم إنشاؤه بنجاح عن طريق إدارة الإيثيلين جلايكول. أظهرت دراستنا أيضًا أن كيرسيتين قلل من التأثير المعزز للإجهاد التأكسدي لفرط أوكسالات البول ، كما يتضح من كل من المعلمات البيوكيميائية والمرضية النسيجية.

من المعروف أن ROS تنشط جزيئات الإشارة مثل بروتين كيناز C (PKC) و c-Jun N-terminal kinase (JNK) و p 38- MAPK [21]. يؤدي تنشيط جزيئات الإشارة هذه إلى تحريض عوامل النسخ NF-kB والبروتين النشط -1 (AP -1). نتيجة لهذه الأحداث ، التعبير عن البروتينات مثل بروتين الجاذب الكيميائي وحيد الخلية -1 (MCP -1) ​​، osteopontin (OPN) ، فبرونيكتين ، وتحويل عامل النمو بيتا 1 (TGF {{11} }) زيادة [20]. تسهل هذه البروتينات التصاق بلورات CaOx والعمليات الالتهابية ذات الصلة [20]. بيرابين وآخرون. ذكرت أن p 38- مسارات إشارات MAPK توسطت في تعطيل الروابط الضيقة بين الخلايا الظهارية [30]. أظهروا أيضًا أن تعبير البروتينات المشاركة في مسار تأشير p 38- MAPK زاد أثناء تكوين حصوات أكسالات الكالسيوم. كما تم إثبات أن الأكسالات تنشط بشكل انتقائي مسار إشارات p 38- MAPK ، والذي كان له دور أساسي في السمية الكلوية للأوكسالات في الخلايا الظهارية للكلى البشرية [31]. شيونغ تشي وآخرون. أثبت أن بلورات CaOx تسببت في تعزيز جزيئات الالتصاق في الخلايا الظهارية الأنبوبية القريبة ، وتم التوسط في هذه العملية بواسطة مسار إشارات p 38- MAPK [31]. أظهرت دراستنا أن تنشيط p 38- MAPK و NF-kB يسببه الأكسالات. بالإضافة إلى ذلك ، أظهرنا أن الكيرسيتين يقلل بشكل كبير من نشاط p 38- MAPK. بناءً على هذه المعلومات ، يمكن اقتراح أن كيرسيتين يمكن أن يمنع تكرار أحجار CaOx.

دراسة بعض القيود. الأول هو أنه لم يكن هناك مجموعة تحكم تدار كيرسيتين بمفردها ، لذلك ، لم يتم تقييم تأثير الكيرسيتين الذي يتم تناوله عن طريق الفم على إنتاج وامتصاص الأمعاء للأوكسالات بشكل واضح. ثانيًا ، لم يتم أيضًا تقييم تأثير الكيرسيتين على امتصاص الإيثيلين جلايكول. وبالتالي ، هناك حاجة إلى مزيد من البحث لتوضيح آلية عمل كيرسيتين على فرط أوكسالات البول.

5. الاستنتاجات

نستنتج أن كيرسيتين يثبط العمليات الالتهابية والأكسدة الناتجة عن فرط أوكسالات البول في أنسجة الكلى. نظرًا لأن هذه العمليات تؤدي إلى تكوين حصوات CaOx ، يمكن اعتبار كيرسيتين في العلاج الطبي الوقائي لحصى CaOx المتكررة. ومع ذلك ، هناك حاجة إلى مزيد من البحوث التجريبية والسريرية للتحقق من صحة النتائج التي توصلنا إليها.

مراجع

1 - جامبارو ج. Vezzoli ، G. ؛ كاساري ، ج. رامبولدي ، إل. D'Angelo ، A. ؛ بورجي ، ل. الوراثة من فرط كالسيوم البول وتحصي الكلية بالكالسيوم: من الأحادي المنشأ النادر إلى الأشكال متعددة الجينات الشائعة. أكون. J. الكلى ديس. 2004، 44، 963-986. [CrossRef]

2. Coe، FL؛ الحدائق ، JH ؛ Asplin، JH التسبب في حصوات الكلى وعلاجها. إنجل. جيه ميد. 1992 ، 327 ، 1141-1152. [CrossRef] [PubMed]

3. خان ، س. بيرل ، مس ؛ روبرتسون ، دبليو جي ؛ جامبارو ، جي. كاناليس ، BK ؛ دويزي ، س. تراكسير ، أو. حصوات الكلى Tiselius ، HG. نات. القس ديس. Primers 2016 ، 2 ، 16008. [CrossRef]

4. الشمس ، XY ؛ شو ، م. Ouyang، JM تأثير الشكل البلوري وتجمع مونوهيدرات أوكسالات الكالسيوم على السمية الخلوية في الخلايا الظهارية الكلوية. ACS أوميغا 2017 ، 2 ، 6039-6052. [CrossRef] [PubMed]

5. Jonassen، JA؛ كوجيموتو ، واي. شيد ، كر ؛ شميدت ، M. سمية الأكسالات في خلايا الكلى. أورول. الدقة. 2005 ، 33 ، 329-339. [CrossRef] [PubMed]

6. هيس ، ب. ؛ ريال ، RL ؛ كافانا ، جي بي ؛ خان ، س. كوك ، دي جي ؛ رودجرز ، أل ؛ Tiselius ، HG طرق لقياس التبلور في أبحاث تحص بولي: لماذا وكيف ومتى؟ يورو. أورول. 2001 ، 40 ، 220-230. [CrossRef]

7. مينون م. Koul، H. مراجعة سريرية 32: تحص الكلية من أكسالات الكالسيوم. J. كلين. إندوكرينول. متعب. 1992 ، 74 ، 703-707. [CrossRef]

8. أناند ديفيد ، AV ؛ أرولمولي ، ر. لمحات عامة عن الأهمية البيولوجية للكيرسيتين: فلافونويد نشط بيولوجيًا. العقاقير. القس 2016 ، 10 ، 84-89. [PubMed]

9. عبد الحليم ، ماك. موسى ، الشعيبة ؛ قايد ، هاي الدور الوقائي للكيرسيتين والأرجينين على جزيئات الذهب النانوية تسبب في تسمم الكبد في الفئران. كثافة العمليات J. نانوميد. 2018 ، 13 ، 2821-2825. [CrossRef] [PubMed]

10. اليرحمادي ، أ. زال ، ف. بولوكي ، أ. التأثيرات الوقائية للكيرسيتين على الإجهاد التأكسدي الناجم عن النيكوتين في "خلايا HepG2". توكسيكول. ميكانيكي. طرق 2017 ، 27 ، 609-614. [CrossRef]