العلاقة بين IL -2 وتركيزات IL -17 ومستويات الكرياتينين في الدم لدى الرجال المصابين بأمراض الكلى المزمنة

لمزيد من المعلومات. اتصلdavid.wan@wecistanche.com

الملخص

خلفية: فشل كلوي مزمن(كد) ، هو تحد كبير للصحة العامة في جميع أنحاء العالم. وهو أكثر انتشارًا في البلدان المتقدمة مقارنة ببقية العالم ، بسبب ارتفاع معدلات متوسط ​​العمر المتوقع والعوامل غير الصحية المتعلقة بنمط الحياة. الهدف من الدراسة الحالية هو تقييم العلاقة بين تركيزات الإنترلوكينات I -2 وأنا -17 وعلامات وظائف الكلى لدى الرجال المصابين بمرض الكلى المزمن.

طُرق:تم تسجيل خمسة وأربعين رجلاً مصابًا بمرض الكلى المزمن وسبعون عنصر تحكم في الدراسة الحالية لتقييم العلاقة بين إنترلوكين -2 (IL -2) ، وإنترلوكين -17 (IL -17) ، ومعلمات كد. تم جمع عينات دم الصيام من مرضى CKD وضوابطهم في نفس الوقت. تم قياس مصل IL -2 وأنا -17 في المرضى الذين يعانون من CKD وعناصر التحكم الخاصة بهم ، ثم تم تقييم العلاقة بين هذه الإنترلوكينات والكرياتينين في الدم ، واليوريا في الدم ، وحمض البوليك في الدم ، وألبومين البول.

نتائج: تم اكتشاف علاقة ذات دلالة إحصائية بين IL -2 (ص<0.001), il-17=""><0.001)levels, and="" serum="" creatinine="" concentrations.="" the="" significant="" increase="" in="" i-2="" and="" i-17="" levels="" were="" also="" paralleled="" with="" a="" significant="" increase="" in="" serum="" urea=""><0.001), and="" urine="" albumin=""><0.001) concentrations="">

الاستنتاجات:قد يلعب L -2 و L -17 دورًا مهمًا في الفيزيولوجيا المرضية لمرض الكلى المزمن. ترتبط الزيادة الكبيرة في I -2 و L -17 بتركيزات عالية بشكل ملحوظ من الكرياتينين ويوريا المصل وألبومين البول مما يشير إلى أنه يمكن استخدام هذه الإنترلوكينات كأهداف للعلامات الحيوية المستقبلية والعلاج الجزيئي. ومع ذلك ، نظرًا لحجم العينة المحدود للدراسة الحالية ، هناك حاجة إلى مجموعات مستقبلية أكبر لتأكيد هذه الملاحظات.

الكلمات الدالة: أمراض الكلى المزمنة ، الانترلوكينات ، مصل الكرياتينين ، مصل اليوريا ، البول الزلال.

انقر هنا لمعرفة المزيد عن Cistanche

مقدمة

يعد مرض الكلى المزمن (CKD) مشكلة صحية عامة رئيسية ، حيث يصيب 10 إلى 15 في المائة من عامة السكان في جميع أنحاء العالم ومعدل حدوثه آخذ في الازدياد (1 ، 2). مقارنة ببقية العالم ، يعتبر مرض الكلى المزمن أكثر انتشارًا في البلدان المتقدمة بسبب ارتفاع معدلات متوسط ​​العمر المتوقع والعوامل غير الصحية المتعلقة بنمط الحياة (3،4). البلدان المتقدمة لديها معدل انتشار مرتفع للأمراض المرتبطة بنمط الحياة مثل السمنة وارتفاع ضغط الدم والسكري من النوع 2 (T2D) وأمراض القلب والأوعية الدموية (CVD) ، والتي تُعرف جميعها بأنها عوامل خطر ثابتة لمرض الكلى المزمن (5،6،7) . إن الفيزيولوجيا المرضية لمرض الكلى المزمن معقدة للغاية وتتأثر عادة بالعوامل الخارجية والداخلية وتفاعلها.

السيتوكينات هي من بين العوامل الذاتية التي تنتج في الغالب بواسطة الضامة (8،9). بغض النظر عن سبب البدء ، يرتبط تطور مرض الكلى المزمن بمستوى أعلى من الالتهاب مما يؤدي إلى تنشيط جهاز المناعة. يؤثر الالتهاب على تطور مرض الكلى المزمن إما بشكل مباشر ، بسبب الحادةإصابة في الكلى(AKD) ، وإصابة الكلى الحادة بعد الكلى ، أو بشكل غير مباشر عن طريق تعزيز تصلب الشرايين الذي يؤدي إلى CKD وتدهور وظائف الكلى اللاحق (10 ، 11 ، 12). مدى الاستجابة الالتهابية يرتبط بشدة CKD ويزيد خطيًا مع تطور الفشل الكلوي (8).

تنتج البلاعم الدموية المنشطة السيتوكينات كوسيط أساسي للمساعدة في تحديد مدى الاستجابة المناعية التي تعتبر مهمة للغاية من أجل التوسط في تطور المرض (11). التوازن الفيزيولوجي المرضي بين السيتوكينات المؤيدة والمضادة للالتهابات ضروري لتحديد التأثير الصافي للاستجابة الالتهابية (2). يتم تنشيط هذه السيتوكينات في أمراض الكلى الحادة والمزمنة (2 ، 11 ، 12 ، 13). أشهر المؤيدينالتهاباتتشمل السيتوكينات ؛ إنترلوكين -1 (إيل -1) ، إنترلوكين -2 (إيل - 2) ، إنترلوكين -6 (إلينوي -6) ، إنترلوكين {{6} } (IL -8) ، وإنترلوكين -17 (IL -17) وعامل نخر الورم (TNF-a) (14،15). تشمل عوامل الخطر للالتهاب المزمن تقدم العمر ، السمنة ومرض السكري من النوع 2 والالتهابات المتكررة المزمنة (2 ، 5 ، 6 ، 13).

يصاحب تطور CKD زيادة في مستويات الكرياتينين في الدم (16) وغيرها من العلامات المرتبطة بمرض الكلى المزمن بما في ذلك اليوريا في الدم وألبومين البول وحمض اليوريك في الدم بدرجة أقل (10 ، 17 ، 18 ، 19 ، 20). ومع ذلك ، يتم قياس كرياتينين المصل بشكل روتيني من أجل تشخيص الأفراد المشتبه في إصابتهم بالتهاب المفاصل الروماتويدي (16 ، 21). كما أنها تستخدم لتقييم التحسن و / أو التدهور في وظائف الكلى خلال علاج AKI و CKD (16 ، 18). على الرغم من أن التهاب الكلى المزمن يتوسطه التهاب في مراحل مختلفة من تطور المرض (2 ، 11 ، 13) ، إلا أن الأدلة على ارتباطها المباشر بمخاطر المرض لا تزال غير حاسمة. صُممت الدراسة الحالية لتقييم العلاقة بين تركيز الإنترلوكينات I -2 و IL -17 وعلامات وظائف الكلى لدى الرجال المصابين بمرض الكلى المزمن الذين تم إدخالهم إلى أكبر مستشفى عام في مدينة الرمادي ، عاصمة مدينة- محافظة الانبار ، العراق.

المواد والأساليب

التخليص الأخلاقي:مائة وخمسة عشر رجلاً عراقيًا-عربي هو العدد الفعلي للمشاركين في الدراسة الحالية. تمت الموافقة على بروتوكول الدراسة أخلاقياً من قبل جامعة الأنبار (رقم: 166SC -2021) ، ووقع كل مشارك على استمارة موافقة خطية بعد الاستماع إلى عرض تقديمي موجز عن المشروع.

تعريف الحالة وتأكيد CKD:في الدراسة الحالية ، تم تعريف حالة CKD المؤكدة على أنها ؛ أي فرد لديه معدل ترشيح كبيبي تقديري (eGFR) أقل من 60 مل / دقيقة / 1.73 م 2 مساحة سطح الجسم أو دليل على تلف الكلى (حتى عندما يكون معدل الترشيح الكبيبي الطبيعي طبيعيًا) ، تم اكتشافه من خلال زيادة غير طبيعية في الكرياتينين في الدم وألبومين البول ، واستمرار أكثر من 3 أشهر كما هو مقرر سابقاً (18).

جمع المشاركين في الدراسة: أجريت هذه الدراسة خلال الفترة من أبريل 2021 إلى أغسطس 2021. تم تقييم جميع المرضى قبل بدء العلاج. لتسهيل عملية جمع الضوابط ، طلبنا من كل مريض مصاب بمرض الكلى المزمن إحضار قريب أو صديق. تمكنا كذلك من تجنيد المزيد من الضوابط من نفس المستشفى حيث تم تجنيد المرضى.

فحص طبي بالعيادة: تم إجراء المقابلات الشاملة المجدولة في المستشفى من قبل ممرضات مدربين تدريباً عالياً من أجل جمع التفاصيل الديموغرافية والاجتماعية والاقتصادية والأنثروبومترية. كما تم الحصول على تفاصيل حول التاريخ الطبي للأفراد. تم الحصول على ضغط الدم باستخدام آلة مؤتمتة بالكامل (جهاز قياس ضغط الدم عمران). خضع جميع المشاركين في الدراسة الحالية لفحص سريري للتأكد من أن كل مشارك (المرضى والضوابط) يناسب معايير الدراسة.

معايير الانتقاء والإقصاء:تم تضمين الرجال العراقيين الذين تتراوح أعمارهم بين 30 و 70 عامًا ، الذين يعيشون في محافظة الأنبار ، والذين كانوا على استعداد للانضمام إلى الدراسة في الدراسة الحالية. من أجل تجنب أي فاصل محتمل في جينات الأجناس الأخرى ، قمنا بتضمين العرب فقط. للقضاء على تأثير أي عوامل مرضية فيزيولوجية وممرضة قد تؤثر على نتائج الدراسة ، تم استبعاد الأفراد إذا لم يكونوا عربًا أو يعانون من داء السكري أو قيم دم غير طبيعية. استنادًا إلى سجل السجلات الطبية (المدعوم بتقرير التأكيد الذاتي) ، الأفراد المصابون بأمراض التهابية و / أو أمراض معدية مثل التهاب المفاصل الروماتويدي ، والصدفية ، وفرط نشاط الغدة الدرقية ، ومرض التهاب الأمعاء (IBD) ، وفيروس نقص المناعة البشرية (HIV) ، وفيروس التهاب الكبد B (HBV) وفيروس التهاب الكبد C (HCV) و covid -19 والإنفلونزا وعدوى الرئة والتهاب اللوزتين. تم استبعاد المزيد من الأشخاص إذا كانوا يعانون من مرض عضلي معروف ، أو أجروا تدريبات قوية في غضون 3 أشهر ، أو كانت لديهم وظيفة تتطلب رفع الأثقال. طُلب من جميع المشاركين في الدراسة الحالية الإقلاع عن التدخين واستهلاك الكحول.

جمع عينات الدم والتعامل معهاقبل أسبوع واحد من سحب الدم امتنع الأشخاص عن استخدام المسكنات والنشاط البدني. طُلب من جميع المشاركين عدم شرب أو تناول أي شيء بعد الساعة 9 مساءً في الليلة السابقة لأخذ دمائهم. بعد 8 إلى 10 ساعات من الصيام طوال الليل ، تم سحب 10 مل من الدم الطازج من الوريد الأمامي. من أجل إراحة المشاركين في الدراسة الحالية ، شرحت الممرضات المدربات جيدًا الإجراء لكل مشارك قبل ثقب الوريد باستخدام حقنة بلاستيكية يمكن التخلص منها. تم استخدام نوعين من الأنابيب لجمع الدم (الأصفر والأرجواني). جمعت جميع عينات الدم بين الساعة 7.30 و 8.30 صباحاً ، ثم تم حفظ عينات الدم لمدة 30 دقيقة في غرفة باردة قبل أن يتم فصل عينات الأنابيب الصفراء عن الخلايا بالطرد المركزي عند 3000xg لمدة 10 دقائق. تم تجميد البلازما بشكل مفاجئ وتخزينها في -20 درجة مئوية. تم ترك أنابيب أرجوانية على خلاط معمل الدم ، قبل المعالجة للحصول على قياسات glycohaemoglobin AlC (HbAlc) التي تحتوي على

تم الإبلاغ عنها كنسبة مئوية من إجمالي الهيموجلوبين. تمت معالجة جميع العينات وفقًا لبروتوكول موحد.

جمع عينات البول والتعامل معها: جمعت عينات البول في عبوات معقمة في الصباح الباكر قبل سحب عينات الدم. ثم في وقت لاحق من نفس اليوم ، تم نقل عينة كافية من البول ببطء إلى أنبوب عادي معقم سعة 6 مل باستخدام محقنة بلاستيكية للتخلص منها بسعة 50 مل بعد إزالة الإبرة. تم تخزين جميع العينات في الثلاجة حتى تم جمع عينات كافية وتحليلها في ثلاث نسخ. طُلب من جميع المشاركين الحصول على عينات بول دون انقطاع في منتصف الطريق. تم عرض فيلم كرتوني قصير توضيحي من قبل أحد موظفي المشروع الذي تم تعيينه لوصف تجميع البول خطوة بخطوة في منتصف الطريق لمساعدة جميع المشاركين على تطبيق التعليمات الدقيقة لجمع عينة بول تمثيلية نظيفة في منتصف الطريق.

تشخيص مرض السكري:تم استبعاد المشاركين إذا كان متوسط ​​مستويات الجلوكوز في الصيام لديهم أكثر من (125 مجم / لتر) وعدم الصيام أكبر من أو يساوي 200 مجم / لتر وكان مستوى السكر في الدم لديهم أكثر من 7. بالإضافة إلى ذلك ، لدينا أيضًا اعتمد في وقت سابق على السجلات الطبية الفردية وتاريخ العلاج لاستبعاد المتطوعين غير المناسبين.

قياس انترلوكينات بلازما الدم:تم قياس مستويات البلازما من IL -2 و IL -17 باستخدام مجموعة مقايسة ممتص مناعي مرتبط بالإنزيم (ELISA). تم توفير مجموعات ELISA من قبل شركة My-bio-source ، الولايات المتحدة الأمريكية) كما تم إجراء اختبارات وظائف الكلى مثل اليوريا في الدم وكرياتينين المصل وحمض البوليك في الدم وألبومين البول على جميع الأشخاص باستخدام محلل ذاتي. تم قياس كل عينة في ثلاث نسخ واعتبرت القيمة المتوسطة لكل عينة جاهزة للتحليل الإحصائي. تم تعريف البيلة الألبومينية الزهيدة على أنها إفراز 30-150 ملغ من البروتين يوميًا كعلامة على مرض الكلى المبكر الموصوف سابقًا (22). تم اتباع البروتوكول من قبل الشركة المصنعة للمقايسة بدقة وتم اختبار جميع العينات دون تخفيف.تحليل احصائي:تم إجراء التحليل الإحصائي باستخدام GraphPad Prism الإصدار 7. 0 4 و Software Excel 2016. تتألف الإحصائيات الوصفية لكل معلمة من الخطأ المعياري (SE) والمتوسط ​​والانحراف المعياري (SD). تم تعيين مستوى الدلالة الإحصائية طالما كانت قيمة P أقل من 0.05 ، وتم تقييم العلاقة بين I -2 و I -17 والمعلمات الأخرى لمرضى CKD وعناصر التحكم باستخدام ارتباط بيرسون ( ص=-1 إلى 1). تم إجراء نموذج الانحدار اللوجستي لتبرير العلاقة بين متغيرات الإنترلوكينات و CKD وللتخلص من أي تداخل محتمل للمتغيرات الأخرى. المتغيرات التي قد تربك نتائج الدراسة الحالية هي ؛ العمر ومؤشر كتلة الجسم ومحيط الخصر ونسبة الخصر إلى الورك.

نتائج: وقع ثمانية وسبعون مريضًا وخمسة وسبعون عنصر تحكم نماذج موافقة للتسجيل في الدراسة الحالية. بعد تطبيق معايير التضمين والاستبعاد واستنادًا إلى التاريخ الطبي لكل مشارك ، تم استبعاد سبعة وعشرين مريضًا مصابًا بمرض الكلى المزمن حيث تم تشخيص خمسة منهم سابقًا بفيروس التهاب الكبد الوبائي والباقي يعانون من مرض السكري. علاوة على ذلك ، تم استبعاد ستة مرضى آخرين بعد أن أظهرت قيم الدم لديهم (الجلوكوز الصائم و HbAlC) أنهم مصابون بالسكري من النوع الثاني. من إجمالي عدد الأفراد الذين انضموا إلى المجموعة الضابطة ، تم استبعاد خمسة فقط حيث تم تشخيص إصابتهم بداء السكري من النوع 2. وبالتالي ، كان الرقم النهائي الذي استوفى معايير التضمين للدراسة الحالية 45 رجلاً مصابًا بمرض الكلى المزمن السائد (النطاق العمري 30-70 سنة ، متوسط ​​العمر ؛ 53.66 ± 6.03 ، يعني مؤشر كتلة الجسم: 28.91 ± 3.39 ؛ متوسط ​​محيط الخصر: 106.41 زائد 8.81 ؛ متوسط ​​SBP: 140.3915.90 ؛ متوسط ​​DBP: 86. 77 ± 10.20 ؛ متوسط ​​FSG: 118 ± 4.71 ؛ متوسط ​​HbAlc:

5.67 ± 1.38) وسبعون رجلاً يتمتعون بصحة جيدة في نفس الفئة العمرية (متوسط ​​العمر: 51.64 زائد 5.59 ؛ متوسط ​​مؤشر كتلة الجسم: 26.83 ± 1.85 ؛ متوسط ​​محيط الخصر: 93.25 ± 6.46 ؛ متوسط ​​SBP: 123.34 ± 5.91 ؛ متوسط ​​DBP: 8 {{29) }} 95 ± 4.39 ؛ يعني FSG: 101 ± 5.24 ؛ يعني HbAlc: 5.1 ± 0.97) مع عدم وجود أمراض معدية نشطة معروفة وأمراض التهابية أخرى بمثابة عناصر تحكم.

معلمات كد:بالمقارنة مع الضوابط ، لاحظنا زيادة كبيرة في كرياتينين المصل (ص< 0.0="" 01),="" urine="" 0.0="" 01),="" and="" serum="" urea=""><0.0 01)="" as="" seen="" in="" figures="" 1,="" 2,="" and3.no="" such="" relationship="" was="" seen="" in="" serum="" uric="" acid="" concentrations="" between="" ckd="" patients="" and="" their="" controls(fig.="">

العلاقة بين معلمات الإنترلوكينات و CKD:أظهرت الدراسة الحالية لأول مرة وجود علاقة خطية مهمة بين مستوى الكرياتينين وأنا -2 (p<0.001)and il-17=""><0.001)as shown="" in="" figure="" l,="" respectively.="" these="" interleukins="" have="" also="" been="" associated="" with="" a="" significant="" increase="" in="" serum=""><0.001), and="" urine="" albumin=""><0.0 01),="" respectively="" (figs.2="" and="" 3).="" no="" significant="" differences="" in="" uric="" acid="" were="" observed="" between="" serum="" patients="" with="" ckd="" and="" controls,="" neither="" there="" was="" any="" association="" with="" il-2="" and="" il-17="" levels="" (fig.="">

مناقشة:في التقارير السريرية وعلم الأمراض ، تُستخدم تركيزات الكرياتينين في المصل بشكل شائع لتشخيص مرضى القصور الكلوي الحاد وللحصول على تقييم عام للأفراد المعالجين (16 ، 17 ، 21). بالإضافة إلى ذلك ، تم استخدام كرياتينين المصل مع ألبومين البول لمراقبة المرضى الذين يعانون من مرض الكلى المزمن في جميع أنحاءعلاج او معاملةولتقييم أي تحسن أو تدهور في وظائف الكلى (16،18،22،23). في المرضى الذين يعانون من مرض الكلى المزمن ، تزداد تركيزات الكرياتينين في الدم بشكل مطرد ، جنبًا إلى جنب مع اليوريا في الدم وألبومين البول بالتوازي مع تدهور وظائف الكلى (17 ، 20) ، 22). على الرغم من أن عددًا محدودًا من الدراسات السابقة قد أظهرت زيادة كبيرة في مستويات حمض اليوريك في الدم في المرضى الذين يعانون من AKI و CKD ، إلا أنه لا يتم طلبها كثيرًا في الممارسة السريرية اليومية (24). يحدث تدهور وظائف الكلى في مرضى الكلى المزمن بشكل تدريجي ، وهي عملية لا رجعة فيها وعادة ما ترتبط بمستويات عالية بشكل ملحوظ من علامات الالتهاب. يعد الالتهاب المزمن أحد عوامل الخطر المؤكدة للإصابة بمرض الكلى المزمن وقد تم ربطه بزيادة ملحوظة في معدل الإصابة بالأمراض والوفيات (2 ، 19 ، 25) ، في الدراسة الحالية ، لاحظنا زيادة كبيرة في الكرياتينين في الدم (p<0.001), serum=""><0. 001),="" and="" urine=""><0.001) in="" patients="" with="" ckd="" compared="" with="" controls.="" in="" contrast,="" no="" significant="" relationship="" was="" observed="" in="" serum="" uric="" acid="" between="" ckd="" patients="" and="" their="">

ارتبط ارتفاع تركيز الكرياتينين في الدم بزيادة كبيرة في كل من L -2 (ص<0.001)and><0.001)levels(fig.1). similarly,="" il-2="" and="" il-17="" levels="" were="" strongly="" associated="" with="" urine albumin="" concentrations="" (fig.2),="" and serum="" urea="" (fig.3),="" suggesting="" that="" these="" interleukins="" may="" play="" critical="" roles="" in="" the="" pathogenesis="" of="" ckd.="" no="" correlation="" was="" detected="" between="" serum="" uric="" acid="" and="" il-2="" and="" i-17="" levels(fig.4).to="" our="" knowledge,="" this="" is="" the="" first="" study="" performed="" to="" evaluate="" the="" relationship="" between="" these="" interleukins="" and="" the="" classic="" biochemical="" markers="" of="" ckd.="" the="" prognostic="" importance="" of="" elevated="" il-2="" and="" i-17levels="" are="" independent="" of="" and="" additive="" to="" the="" prognostic="" effect="" of="" creatinine="" and="" other="" classic="" kidney="" function="" markers="" including="" serum="" urea="" and="" urine="" albumin.="" a="" previous="" study="" targeted="" interleukins="" in="" relationship="" to="" lupus="" nephritis="" histopathology="" and="" therapy="" response="" has="" suggested="" that="" high="" levels="" of="" i-17="" could="" be="" related="" to="" therapy="" resistance,="" the="" severity="" of="" the="" disease,="" or="" disease="" phenotype(26).="" the="" high="" levels="" of="" interleukins="" have="" been="" reported="" in="" a="" wide="" range="" of="" diseases="" such="" as="" metabolic="" syndrome="" (27)="" and="" different="" types="" of="">سرطان(28).