تعزيز ذاكرة التميُّز عن طريق التدخلات الدوائية والسلوكية التي تستهدف إعادة تنشيطها

لمزيد من المعلومات: ali.ma@wecistanche.com

تعزيز الانقراضذاكرةمن خلال التدخلات الدوائية والسلوكية التي تستهدف إعادة تنشيطها

Josué Haubrich و Adriano Machado و Flávia Zacouteguy Boos و Ana P. Crestani و Rodrigo O. Sierra و Lucas de Oliveira Alvares & Jorge A. Quillfeldt

الانقراض هو عملية تتضمن تعلمًا جديدًا يمنع التعبير عن الذكريات المكتسبة سابقًا. على الرغم من فعاليته مؤقتًا ، إلا أن الانقراض لا يمحو ارتباط الخوف الأصلي. نظرًا لأن أثر الانقراض يميل إلى التلاشي بمرور الوقت ، فإن الأصلذاكرةيمكن أن تعاود الظهور. من ناحية أخرى ، تم وصف تأثيرات التعزيز في العديد من دراسات إعادة الدمج باستخدام تلاعبات سلوكية ودوائية مختلفة. من أجل معرفة ما إذا كان يمكن تقوية ذاكرة الانقراض من خلال التدخلات القائمة على إعادة التنشيط في مهمة تكييف الخوف السياقي ، بدأنا بتكرار الظاهرة الكلاسيكية للتعافي التلقائي لإظهار أن جلسات إعادة التعرض القصيرة يمكن أن تمنع اضمحلال أثر الانقراض بمرور الوقت في طريقة طويلة الأمد. تبين أن توهين الخوف هذا يعتمد على قنوات الكالسيوم من النوع L وتخليق البروتين ، مما يشير إلى عملية إعادة توحيد وراء تأثير التعزيز الناجم عن إعادة التنشيط. كان أثر الانقراض أيضًا عرضة للتعزيز عن طريق التسريب بعد إعادة التنشيط لـ aذاكرة- عقار مُحسِّن (NaB) ، والذي كان أيضًا قادرًا على منع إعادة اكتساب الخوف السريع (المدخرات). تشير هذه النتائج إلى مناهج جديدة قائمة على إعادة التنشيط قادرة على تقوية ذاكرة الانقراض لتعزيز استمرارها. قد تمثل التفاعلات البناءة بين الانقراض وإعادة التوحيد نهجًا جديدًا واعدًا في مجال علاجات الاضطراب المرتبط بالخوف.

انقر فوق Cistanche و Cistanches للذاكرة

ذاكرةالاسترجاع ظاهرة ديناميكية يمكنها ، في ظل الظروف المناسبة ، إطلاق عمليتين متميزتين ، إعادة توحيد أو انقراض. بعد جلسة استرجاع موجزة في نفس سياق التدريب ، تم دمجها مسبقًاذاكرةقد يدخل في حالة قابلة للتغير تتطلب تخليق بروتين de novo لإعادة الاستقرار والاستمرار ، وهي عملية تسمى إعادة التجميع 1. ومع ذلك ، يمكن أن تؤدي جلسات الاسترجاع المطولة غير المقواة إلى الانقراض 2. على الرغم من أن إعادة توحيد ذكريات الخوف قد تمت دراستها على نطاق واسع 3 ، 4 ، إلا أن عددًا قليلاً جدًا من الدراسات قد بحثت حتى الآن في احتمال أن يخضع أثر الانقراض لعملية إعادة توحيد بعد الاسترجاع 5-7 ، ونتائجها المحتملة وتطبيقاتها السريرية غير مستكشفة حاليًا.

يقلل الانقراض الاستجابات المشروطة من خلال عملية تستلزم توحيد مثبط جديدذاكرة؛ يُعتقد أنه ليس إلغاء التعلم أو محو الأثر الأصلي 9 ، 10. تُستخدم العلاجات القائمة على الانقراض بشكل شائع لعرقلة الاستجابات البغيضة في المرضى الذين يعانون من اضطرابات مرتبطة بالخوف مثل اضطراب ما بعد الصدمة 11 ، 12. على الرغم من كونها تدخلاً فعالاً ، فإن الانتكاس غالبًا ما يتم الإبلاغ عن أعراض الخوف 13 مما يوضح أنه ، مقارنة بذكريات الخوف القوية ، فإن الانقراض أقل ديمومة وعرضة للانحلال. يمكن أن تتعافى استجابات الخوف بسهولة بسبب العديد من عمليات الانتكاس ، مثل التعافي التلقائي ، والعودة للوضع السابق ، والتجديد ، والاستعادة السريعة 14 ، 15. وبناءً على ذلك ، من الأهمية بمكان إيجاد نهج أفضل لتعزيز قوة الانقراض والمثابرة.

على الرغم من إعادة التوحيد والانقراض الناجم عن الاسترجاع ، إلا أنهما عمليتان منفصلتان. من الناحية السلوكية ، عادةً ما يتم استخدام إعادة التوحيد من خلال التعرض القصير للمحفز المشروط (CS) بينما يتطلب الانقراض حوافز أطول. بالإضافة إلى ذلك ، يتم تعديل تحريض إعادة الدمج بواسطة عوامل سياقية ومعرفية أخرى تُعرف مجتمعة باسم شروط الحدود. من خلال تغيير مدة التعرض لـ CS ، فإن العامل المسكن سوف يضعف بشكل انتقائي إما إعادة توحيد الأثر الأصلي أو التوحيد.

معمل علم النفس وعلم الأعصاب وعلم الأعصابذاكرةمختبر. برنامج الدراسات العليا في العلوم العصبية ، جامعة ريو غراندي دو سول الفيدرالية ، بورتو أليغري ، البرازيل. يجب توجيه المراسلات وطلبات المواد إلى JH (البريد الإلكتروني: biohaubrich@gmail.com) أو JAQ (البريد الإلكتروني: quillfe@ufrgs.br) من تتبع الانقراض 17–23. تشير حقيقة أن كلا العمليتين لا تحدثان في وقت واحد إلى تأثير هيمنة التتبع ، حيث أن التتبع السائد سيكون الأول ، إن لم يكن الوحيد ، الذي يتأثر بأي تداخل. تحدث هيمنة التتبع أيضًا عندما تتعايش آثار الخوف والانقراض السابقة ، مما يؤثر على استرجاعها. في مثل هذه الظروف ، فإن إعادة التعرض للـ CS ، والتي من المحتمل أن تنشط آثار الخوف والانقراض ، ستؤدي إلى التعبير عن الذاكرة السائدة وتثبيط الذاكرة الأخرى. كما نوقش أعلاه ، في البداية ، الانقراض هو المسيطر ويقمع الخوف بسهولة. ومع ذلك ، مع مرور الوقت ، يتغلب أثر الخوف الأصلي على التثبيط عن طريق الانقراض ويصبح التعبير عنه بشكل سائد مرة أخرى. بالإضافة إلى ذلك ، هناك انفصال مزدوج بين العمليتين فيما يتعلق بالواسمات الجزيئية مثل Zif26824 و calcineurin19 و 25 و BDNF26 ، مما يشير إلى أن كلا العمليتين لا تحدثان بالتوازي.

غالبًا ما يُقترح أن الدور الوظيفي لعملية زعزعة الاستقرار وإعادة الاستقرار وراء إعادة التوحيد هو السماحذاكرةلتحديثه للاحتفاظ بأهميته التنبؤية والتكيفية 3 ، 27-29. على سبيل المثال،ذاكرةيمكن تحديث المحتوى من خلال دمج المعلومات الجديدة 30–34. بالإضافة إلى ذلك ، أفادت العديد من الدراسات أن إعادة الدمج قد تتوسطذاكرةتعزيز وتقوية 30، 35-39 وكذلك توهين الذاكرة (بدون انقراض) للتجارب البغيضة 34، 40. ومن المثير للاهتمام ، أن هناك دراسات تُظهر أنه في بعض المهام تحدث إعادة التوحيد فقط عندما لا تكون الذاكرة بعد في المستوى المقارب 41-43 ، مما يبرز دورها في تقوية أثر الذاكرة. ومع ذلك ، من غير المعروف حتى الآن ما إذا كان يمكن تعديل أثر الانقراض الموحد عن طريق إعادة التوحيد.

يمكن أن تفتح إعادة التجميع نافذة للسماح بالتعديل الدوائي للمادة المعاد تنشيطهاذاكرة. وهذا من شأنه أن يوازي التجارب الكلاسيكية التي يؤدي فيها التسريب بعد إعادة التنشيط إلى ضعف الذاكرة ، أو على الأقل يقلل بشكل فعال من استجابات الخوف في الرهاب. أيضًا ، يمكن أن تؤدي تدخلات ما بعد التنشيط التي تعزز إعادة الدمج إلى تحسين الأداء 45-47. ومن ثم ، تدار مركبات محددة خلال نافذةذاكرةتسمح القابلية أثناء إعادة التوحيد بالتعديل الإيجابي أو السلبي لـذاكرةقوة.

نظرًا لأهميتها السريرية ، هناك اهتمام كبير بتطوير مناهج أكثر فاعلية قائمة على الانقراض. ذكريات الانقراض فعالة في قمع استجابات الخوف بشكل عابر ولكن الخوف يعود بسهولة 2. ينبع من حقيقة أن عملية الاسترجاع المدفوعة لإعادة التوحيد يمكن أن تؤدي إلىذاكرةتقوية ، إما سلوكيًا 30 أو 35-39 أو دوائيًا 45-47 ، نفترض أنه إذا حدث انقراضذاكرةيتم إعادة تنشيطه ، وقد يخضع لعملية إعادة توحيد ويتم تعديله بشكل إيجابي من خلال التدخلات السلوكية والدوائية ، مما يؤدي إلى زيادة مقاومة الانتكاس.

للتحقق من ذلك ، قمنا بتقييم تأثير إعادة التعرض القصيرة للسياق المشروط في الحيوانات التي تم تدريبها مسبقًا في تكييف الخوف السياقي (CFC) وتم إخضاعها للانقراض. وجدنا أن الشفاء التلقائي لوحظ بعد أسبوعين من الانقراض ، لكن جلسات إعادة التنشيط الدورية كانت قادرة على تأخير عودة ظهور أثر الخوف لمدة 4 أسابيع على الأقل. تبين أن هذا التأثير يعتمد على قنوات الكالسيوم ذات الجهد الكهربائي من النوع L (L-VGCC) ، وقد تبين أن إعادة التنشيط بعد يوم واحد من جلسة الانقراض تتسبب في أن يصبح أثر الانقراض عابرًا بطريقة تعتمد على تخليق البروتين. مجتمعة ، تشير البيانات بقوة إلى عملية إعادة توحيد تعمل على أثر الانقراض. أيضًا ، في البروتوكول المستخدم للتحقيق في الخوف من الاسترداد السريع - عملية أخرى للانتكاس بعد الانقراض 49 - كان التسريب الفردي بعد إعادة التنشيط من زبدات الصوديوم (NaB) ، وهو مثبط HDAC الذي ينظم بشكل إيجابي اللدونة العصبية ، قادرًا على تعزيز مرونة الخلايا العصبية. انقراضذاكرةلدرجة مقاومة استعادة الخوف. تشير الأدلة إلى أنه يمكن تعزيز أثر الانقراض بشكل فعال من خلال التدخلات القائمة على إعادة التنشيط.

التجربة 1: انقراضذاكرةفقط يمنع التعبير عن الخوف بشكل عابر. الانقراض هو تعلم جديد يقمع مؤقتًا ما تم اكتسابه مسبقًاذاكرة. وهكذا ، بعد الانقراض ، تتعايش ذكريتان متعارضتان وتتنافسان على التعبير. في البداية ، فإن ذاكرة الانقراض هي المهيمنة على أثر الخوف وبالتالي فهي قادرة على كبح التعبير عنه. ومع ذلك ، فإن هذا القمع ليس دائمًا. مع مرور الوقت ، تتغلب ذاكرة الخوف على تثبيط الانقراض وتعود الاستجابات السلوكية المكروهة. وتسمى هذه العملية الانتعاش التلقائي 15. أولاً ، قمنا بتقييم الملف الشخصي الزمني للانتعاش التلقائي في بروتوكول CFC الخاص بنا. وفقًا لذلك ، كانت الحيوانات خائفة وخضعت بعد 24 ساعة لتدريب على الانقراض. في اليوم التالي ، تم إجراء جلسة اختبار لتقييم الاحتفاظ بالانقراض. تم إجراء اختبار ثانٍ بعد 7 أو 14 أو 21 أو 28 يومًا لتقييم التعافي التلقائي (الشكل 1 أ).

أثناء جلسة الانقراض ، تلاشت مستويات التجميد بمرور الوقت في جميع المجموعات ، مما يشير إلى اكتساب الانقراض (مقاييس متكررة ANOVA ، F (5140)=13. 625 ، P=0. 001 ؛ الشكل 1 ب) . في الاختبار 1 ، أظهرت الحيوانات مستويات تجميد منخفضة ، مما يشير إلى احتباس الانقراض (الشكل 1C). لتقييم الانتعاش التلقائي ، تمت مقارنة الأداء في الاختبار 1 والاختبار 2 بمقاييس متكررة ANOVA ، والتي كشفت عن تفاعل كبير في المجموعة × جلسة (مقاييس متكررة ANOVA ، F (3،27)=8. 085 ، P { {18}}. 0005). أظهر Tukey اللاحق أنه كان هناك استرداد كبير لاستجابات الخوف فقط في المجموعات حيث تم إجراء الاختبار 2 إما 21 (P=0. 013) أو 28 يومًا (P=0. 0002) بعد الاختبار 1 ، ولكن ليس قبل ذلك (7 أيام: P=0. 999 ؛ 14 يومًا: P=0. 969 ؛ الشكل 1 ج).

توضح النتائج الشفاء التلقائي للخوف الذي يعتمد على الوقتذاكرةبعد الانقراض. في بروتوكولنا ، تقوم ذاكرة الانقراض بقمع استجابات الخوف لمدة 14 يومًا على الأقل. بعد 14 يومًا ، يمكن أن يحدث الشفاء التلقائي للخوف. وبالتالي ، على الرغم من أن ذاكرة الانقراض مهيمنة في البداية ، إلا أنها تتحلل مع مرور الوقت مما يسمح بعودة التعبير عن الخوف.

التجربة 2: عمليات إعادة التنشيط الدورية لتتبع الانقراض تؤخر تحللها المعتمد على الوقت (الانتعاش التلقائي). في التجربة الأولى وجدنا أنه في البداية ، ذاكرة الانقراض هي المهيمنة على الكرهذاكرةتتبع ، ومنع تعبيره. يتلاشى هذا التأثير في نقاط زمنية لاحقة عندما لا يعود الانقراض قادرًا على قمع تعبير الخوف. تم الإبلاغ عن أن جلسات إعادة التنشيط يمكن أن تؤدي إلىذاكرةتعزيز 30 ، 36 ، 39. بما أن أثر الانقراض يتحلل بمرور الوقت ، فقد توقعنا أن إعادة تنشيطه قد يؤدي إلى تقويته ، وبالتالي تعزيز ثباته وقدرته على قمع الخوف في نقاط زمنية بعيدة.

الشكل 1. الانقراضذاكرةيفشل في قمع الخوف بشكل دائم. (أ) تمثيل تخطيطي للإجراءات التجريبية. تم تقديم الفئران المكيفة الخوف إلى جلسة انقراض مدتها 30- دقيقة وتم اختبارها بعد 24 ساعة. تم إجراء اختبار ثانٍ بعد 7 أو 14 أو 21 أو 28 يومًا بعد الاختبار الأول (N=6 / 9 لكل مجموعة). (ب) مستويات التجميد أثناء جلسات الانقراض. (ج) مستويات التجميد أثناء الاختبارات. (*) فرق كبير بين الاختبارين 1 و 2 (ص<0.05, repeated-measures="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="">

وفقًا لذلك ، خضعت الفئران المكيفة للخوف لتدريب على الانقراض ، وتم اختبارها بعد يوم واحد وإعادة اختبارها بعد 28 يومًا من أجل الشفاء التلقائي. في الفترة الفاصلة بين الاختبار وإعادة الاختبار ، خضعت مجموعة من الحيوانات 3- لجلسات إعادة تنشيط دقيقة في الأيام 7 و 14 و 21 يومًا بعد الاختبار 1 (مجموعة إعادة التنشيط) أو بقيت في منازلها (مجموعة التحكم ، الشكل 2 أ) . تم تقديم مجموعة إضافية لجلسات إعادة التنشيط ولكن لم يكن هناك تدريب على الانقراض (لا يوجد انقراض بالإضافة إلى مجموعة إعادة التنشيط). تم اختيار الفاصل الزمني 7- يومًا بين عمليات إعادة التنشيط لأنه ، في هذه النقطة الزمنية ، لا يزال يتم التعبير عن الانقراض بقوة (التجربة 1).

أثناء التدريب على الانقراض ، أظهرت الحيوانات بشكل فعال انخفاضًا يعتمد على الوقت في استجابات الخوف (F (5110)=30. 516 ، P=0. {39}} 1 ؛ الشكل 2 ب). في الاختبار 1 ، كان هناك فرق كبير بين المجموعات (F (2،28)=8. 11، P=0. 002؛ الشكل 2C). أظهر Tukey posts post-hoc أن مجموعات التحكم وإعادة التنشيط عرضت مستويات تجميد مماثلة (P=0. 915) وأظهر كلاهما تجميدًا أقل من مجموعة لا انقراض بالإضافة إلى إعادة التنشيط (P=0. 007 و P { {21}}. 001 على التوالي). أثناء جلسات إعادة التنشيط ، أظهرت ANOVA ذات المقاييس المتكررة اختلافًا كبيرًا بين مجموعات إعادة التنشيط وعدم الانقراض بالإضافة إلى مجموعات إعادة التنشيط (F (1،19)=46. 63، P=0. 0001) وعدم وجود تأثير للجلسة (F (2،38)=2. 28، P=0. 116) أو تفاعل المجموعة × الجلسة (F (2،38)=1. 00، P=0. 376 ؛ الشكل 2 د). كشفت المقارنة بين الاختبار 1 والاختبار 2 عن تفاعل كبير للمجموعة × الجلسة (مقاييس متكررة ANOVA، F (2،28)=3. 89، P=0. 03). أظهر Tukey´spost-hoc أن الخوف في مجموعة إعادة التنشيط وفي مجموعة لا انقراض بالإضافة إلى إعادة التنشيط لم يتغير من الاختبار 1 إلى الاختبار 2 (P=0. 844) ، ولكن كان هناك انتعاش كبير للخوف في المجموعة الضابطة (ص=0. 02). الأهم من ذلك ، كان تجميد مجموعة إعادة التنشيط أقل من جميع المجموعات الأخرى في الاختبار 2 (إعادة التنشيط × التحكم: P=0. 007 ؛ إعادة التنشيط × عدم الانقراض بالإضافة إلى إعادة التنشيط: P=0. 0001 ؛ الشكل 2E). هذا يدل على أن إعادة التنشيط عزز الانقراضذاكرةوبالتالي حالت دون استعادة الخوف في وقت بعيد. والجدير بالذكر ، في هذا البروتوكول ، أن جلسات التنشيط بحد ذاتها لم يكن لها أي تأثير على مستويات الخوف عندما لم يحدث تعلم الانقراض.

التجربة 3 - يعتمد تقوية الانقراض الناجم عن إعادة التنشيط على L-VGCCs. من أجل إحداث إعادة توحيد ،ذاكرةيجب إعادة تنشيطها والدخول في حالة قابلة للتغير. أظهرت الأعمال السابقة أن تنشيط قنوات الكالسيوم ذات الجهد الكهربي (L-VGCC) أثناء إعادة التنشيط مطلوب لزعزعة الاستقرار ، كما أن حصارها بواسطة النيموديبين يمنع إعادة الاندماج. لتقييم دور L-VGCC في تعزيز الانقراض الناجم عن إعادة التنشيط ، كررنا التصميم التجريبي للتجربة الأخيرة وأدارنا النيموديبين قبل إعادة التنشيط (الشكل 3 أ).

أثناء التدريب على الانقراض ، أظهرت الحيوانات انخفاضًا يعتمد على الوقت في استجابات الخوف (F (5125)=13. 55، P=0. 001 ؛ الشكل 3 ب). في الاختبار 1 ، أظهرت الحيوانات من مجموعتي المركبة و Nimodipine مستويات تجميد منخفضة بشكل متساوٍ (اختبار t للطالب ؛ t (25)=0. 510 ، P=0. 615 ؛ الشكل 3C). أثناء جلسات إعادة التنشيط ، كان هناك تفاعل كبير بين المجموعة × الجلسة (F (2،50)=7. 863 ، P=0. 001 ؛ الشكل ثلاثي الأبعاد) مع عرض الحيوانات المعالجة بالنيموديبين زيادة الخوف عبر الجلسات (P=0. 004) ، بينما لم يكن هناك تغيير في تعبير الخوف في الفئران المعالجة بالمركبات (P=0. 983).

في الاختبار الثاني ، أظهرت الفئران المعالجة بالنيموديبين مستويات تجميد أعلى من المجموعة الضابطة (t (25)=5. 44، P=0. 0 001 ؛ الشكل 3E). بمقارنة أداء كلتا جلستي الاختبار ، وجدت ANOVA ذات المقاييس المتكررة تفاعلًا مهمًا بين المجموعة والجلسة (F (1،20)=7. 75، P=0. 006). كشفت Tukey'spost-أن أداء الحيوانات المعالجة بالنيموديبين في الاختبار 2 كان أعلى من أداء جميع المجموعات والجلسات الأخرى (P <0.001). هذا="" يدل="" على="" أن="" تعزيز="" الانقراض="" عن="" طريق="" عمليات="" إعادة="" التنشيط="" يتطلب="" تنشيط="">

التجربة 4: عملية إعادة تنشيط تتبع انقراض واحدة تفتح نافذة حساسة لتخليق البروتين. بعد إعادة التنشيط ،ذاكرةقد يمر بمرحلة تتطلب إعادة تجميع بروتين دي نوفو واستمراره. وبالتالي ، في هذه الحالة القابلة للتغير ، يكون عرضة للاضطراب بسبب مثبطات تخليق البروتين 1. في العمل السابق ، تم إثبات أن الانقراضذاكرةعرضة لإعادة التوحيد

الشكل 2. عمليات إعادة التنشيط الدورية تمنع الانتعاش التلقائي للانقراضذاكرة. (أ) تمثيل تخطيطي للإجراءات التجريبية. تم إرسال الفئران المكيفة الخوف إلى 30- جلسات انقراض دقيقة أو بقيت في منازلهم (لا يوجد انقراض بالإضافة إلى مجموعة إعادة التنشيط: N=7). تم إجراء اختبار في اليوم التالي وإعادة الاختبار بعد 28 يومًا. في الفترة الفاصلة بين الاختبارات ، تمت إعادة تنشيط الحيوانات بمقدار 3- دقيقة في الأيام 7 و 14 و 21 بعد الاختبار 1 أو بقيت في منازلها (الانقراض بالإضافة إلى عدم مجموعة إعادة التنشيط: N=10 ؛ مجموعة الانقراض وإعادة التنشيط: N=14). (ب) مستويات التجميد أثناء جلسات الانقراض. (ج) مستويات التجميد أثناء الاختبار. (د) مستويات التجميد أثناء عمليات إعادة التنشيط. (هـ) مستويات التجميد أثناء إعادة الاختبار. (*) فروق ذات دلالة إحصائية بين المجموعات (ص<0.05, two-way="" or="" repeated-measures="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="">

التعطيل عن طريق التداخل بعد إعادة التنشيط في نموذج تجنب المثبط 5 ، 6. بعد استخدام جلسات إعادة التعرض في التجارب السابقة ، قمنا هنا بتقييم ما إذا كانت عمليات إعادة التعرض هذه عبارة عن جلسات إعادة تنشيط بالفعل تتضمن توظيف تخليق البروتين. وبناءً على ذلك ، كانت الحيوانات مشروطة بالخوف وفي اليوم التالي خضعت مجموعة لتدريب على الانقراض (مجموعة الانقراض) بينما بقي آخرون في منازلهم (مجموعة عدم الانقراض). في اليوم الثاني بعد التدريب ، خضعت جميع الحيوانات لجلسة إعادة تنشيط قصيرة مدتها 3 دقائق وبعدها مباشرة تم حقنها بمانع تخليق البروتين سيكلوهكسيميد (CHX) أو مركبته. في اليوم التالي تم اختبار الحيوانات (الشكل 4 أ).

أثناء جلسة الانقراض ، كشفت ANOVA ذات المقاييس المتكررة اكتساب الانقراض (F (5،75)=24. 08، P {{5}. 001؛ Fig. 4B). أثناء إعادة التنشيط ، أشارت ANOVA ثنائية الاتجاه إلى أن الحيوانات التي تعرضت للانقراض سابقًا أظهرت مستويات تجميد أقل مقارنة بمجموعة عدم الانقراض (F (1،43)=23. 32، P=0. 001 ؛ الشكل 4 ج). في الاختبار ، كشفت ANOVA ذات الاتجاهين عن تفاعل كبير بين مجموعة × دوائية (F (1،43)=22. 64، P=0. 001). كشف Tukey´spost-hoc أن الحيوانات المعالجة بسيكلوهكسيميد في مجموعة عدم الانقراض أظهرت مستويات تجميد أقل من تلك التي عولجت بالمركبات (P=0. 01) ، مما يشير إلى هذا الخوفذاكرةكان ضعيفا. في مجموعة الانقراض ،

الشكل 3. تعزيز الانقراض الناجم عن إعادة التنشيط يعتمد على قنوات الكالسيوم ذات الجهد الكهربائي من النوع L. (أ) تمثيل تخطيطي للإجراءات التجريبية. تم تقديم الفئران المكيفة الخوف إلى جلسة انقراض مدتها 30- دقيقة. تم إجراء اختبار في اليوم التالي وإعادة الاختبار بعد 28 يومًا. في الفترة الفاصلة بين الاختبارات ، تمت إعادة تنشيط الحيوانات بمقدار 3- دقيقة في الأيام 7 و 14 و 21 بعد الاختبار 1. كان Nimodipine (N=15) أو مركبته (N=12) sc يتم ضخه قبل 30 دقيقة من كل إعادة تنشيط (ب) مستويات التجميد أثناء جلسة الانقراض. (ج) مستويات التجميد أثناء الاختبار. (د) مستويات التجميد أثناء عمليات إعادة التنشيط. (هـ) مستويات التجميد أثناء إعادة الاختبار. (*) فروق ذات دلالة إحصائية بين المجموعات (ص<0.05, two-way="" or="" repeated-measures="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="" test).="" chx-treated="" animals="" showed="" higher="" freezing="" levels="" than="" vehicle-treated="" ones="" (p="0.001)," indicating="" that="" extinction="">ذاكرةتعطلت.

وفقًا لذلك ، عندما لا يتم إجراء تدريب على الانقراض ، يتم زعزعة أثر الخوف عن طريق إعادة التنشيط وتعطيله بفعل CHX. عندما تتعايش ذكريات الانقراض والخوف ، يحدث أثر الهيمنة والانقراضذاكرةهو الشخص الذي يعاني من عدم الاستقرار ، مما يتطلب استمرار تخليق بروتين دي نوفو. تُظهر هذه النتيجة أن أثر الانقراض قد أعيد تنشيطه بشكل فعال ، مما يشير إلى أن إعادة التوحيد هي الآلية التي تتوسط في تقوية ذاكرة الانقراض.

التجربة 5 - يمكن احتجاز عملية أخرى لانتكاس تتبع الانقراض ، وهي Rapid Reacquisition ، دوائيًا باستخدام علاج ما بعد إعادة التنشيط. تم الإبلاغ عن أنه يمكن تعزيز إعادة الدمج عن طريق الإدارة بعد إعادة التنشيط لمركبات مثل مثبطات HDAC ، مما يؤدي إلى زيادة الأداء في فترة ما بعد التنشيط على المدى الطويلذاكرةاختبار 45 ، 52-54. هنا ، سألنا عما إذا كان الانقراض يمكن تعديله بشكل إيجابي عن طريق العلاج بعد إعادة التنشيط باستخدام مثبط HDAC بيوتيرات الصوديوم (NaB). لذلك استخدمنا بروتوكول تجديد يسمح باكتشاف التغيرات النسبية في قوة الخوف وذاكرة الانقراض وفقًا لنسبة استعادة الخوف. على سبيل المثال ، عادةً ما تكون إعادة الاستحواذ سريعة بعد إجراءات الانقراض القياسية ، ولكن يمكن أن تكون بطيئة في ظروف معينة مثل تعلم الانقراض الشامل أو التكييف الأولي الضعيف.

خضعت الفئران المكيفة الخوف إلى تدريب على الانقراض وجلسة إعادة تنشيط بعد 24 ساعة. مباشرة بعد إعادة التنشيط ، تم غرس NaB أو مركبه (IP). في الأيام الأربعة التالية ، خضعت الحيوانات لاختبارات مختلطة وإجراءات ترميم ضعيفة لتقييم إعادة اكتساب الخوف. تألفت كل جلسة من اختبار لمدة 4 دقائق متبوعًا بضربة قدم ضعيفة وفترة 30 ثانية إضافية في الصندوق (الشكل 5 أ). أثناء التدريب على الانقراض ، تم عرض الحيوانات

الشكل 4. الانقراضذاكرةيتطلب تخليق بروتين de novo بعد إعادة تنشيطه للاستمرار. (أ) تمثيل تخطيطي للإجراءات التجريبية. تم إرسال الفئران المكيفة الخوف إلى جلسات انقراض 30- دقيقة أو بقيت في منازلهم. تم إجراء جلسة إعادة التنشيط بعد 7 أيام تليها اختبار في اليوم التالي. مباشرة بعد إعادة التنشيط ، تلقت الحيوانات تسريب بروتوكول الإنترنت من الهكسيميد الحلقي (مجموعة الانقراض: N=10 ؛ مجموعة عدم الانقراض: N=14) أو مركبتهم (مجموعة الانقراض: N=9 ؛ لا يوجد انقراض المجموعة: N=11). (ب) مستويات التجميد أثناء جلسة الانقراض. (ج) مستويات التجميد أثناء جلسة إعادة التنشيط. (د) مستويات التجميد أثناء جلسات الاختبار. (*) فروق ذات دلالة إحصائية بين المجموعات (ص<0.05, repeated-measures="" or="" two-way="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="">

انخفاض معتمد على الوقت في استجابات الخوف (F (5110)=32. 89 ، P=0. 001 ؛ الشكل 5 ب). عند إعادة التنشيط ، لم يكن هناك فرق بين المجموعات الممزوجة لاحقًا بـ NaB أو فيه (t (22)=0. 59 ، P=0. 56 ؛ الشكل 5C). خلال جلسات الاختبار الأربع (المنتهية بتجديد ضعيف تم تحليل تأثيره في الاختبار التالي ؛ الشكل 5 د) ، أشارت المقاييس المتكررة ANOVA إلى تفاعل كبير بين الدواء والجلسة (F (3،66)=4. 82 ، ص=0. 004). كشف Tukey's post-hoc أنه خلال الاختبار الأول ، كانت مجموعات المركبات و NaB متساوية في مستوى التجمد (P=0. 99). ومع ذلك ، بعد جلسة تجديد واحدة ، أظهرت المعالجة بالمركبات على الفور استعادة الخوف (P=0. 0002) بينما لم تتم معالجة NaB (P=0. 99). أظهرت المجموعة المعالجة بـ NaB فقط إعادة اكتساب كبيرة بعد ثلاث جلسات تجديد ، في الاختبار 4 (P=0. 002).

تظهر هذه النتائج أن معالجة NaB بعد إعادة التنشيط أدت إلى الانقراضذاكرةمقاومة الاستحواذ السريع. أظهرت الحيوانات من مجموعة المركبات مدخرات بسهولة بعد جلسة إعادة تدريب ضعيفة واحدة.

الشكل 5. ضخ ما بعد إعادة التنشيط ، أذاكرة- تعزيز المخدرات ، كما يقوي أثر الانقراض عن طريق منع الاستعادة السريعة للخوف. (أ) تمثيل تخطيطي للإجراءات التجريبية.

تم تقديم الفئران المكيفة الخوف إلى جلسة انقراض مدتها 30- دقيقة. تم إجراء إعادة التنشيط بعد 24 ساعة متبوعة بالإعطاء الفوري لزبدات الصوديوم (NaB؛ N=12) أو مركبه (N=12). في الأيام الثلاثة التالية ، خضعت الحيوانات لجلسات اختبار تنتهي بإيصال صدمة قدم ضعيفة بالإضافة إلى 30 ثانية من الاستكشاف السياقي (بروتوكول الاستحواذ السريع). بعد يوم واحد ، تم إجراء اختبار قياسي. (ب) مستويات التجميد أثناء جلسة الانقراض. (ج) مستويات التجميد أثناء إعادة التنشيط. (د) مستويات التجميد أثناء الاختبارات. (*) فروق ذات دلالة إحصائية بين المجموعات (ص<0.05, independent-samples="" t-test="" or="" repeated-measures="" anova="" followed="" by="" tukey="" post-hoc="">

أظهرت الحيوانات المعالجة بـ NaB ، بدورها ، مدخرات فقط بعد 3 جلسات تجديد. هذا يوضح أن تتبع الانقراض يمكن تقويته من خلال التدخلات الدوائية بعد إعادة التنشيط.

مناقشة

في هذه الدراسة ، نظهر أن الخوف السياقي انقراضذاكرةيمكن تعزيزها من خلال جلسات إعادة التنشيط القصيرة. أولاً ، أظهرنا أنه بعد تعلم الانقراض ، يمكن ملاحظة التعافي التلقائي للخوف بعد 21 يومًا ، ولكن ليس 14 يومًا أو قبل ذلك (التجربة 1). بعد ذلك ، وجدنا ذلك عند الانقراضذاكرةتم إعادة تنشيطه بشكل دوري ، وتم منع تسوسه المعتمد على الوقت ولم يتم التحقق من أي تعافي تلقائي للخوف لمدة 28 يومًا على الأقل (التجربة 2) ، وهو تأثير يظهر أيضًا أنه تم التوسط فيه بواسطة L-VGCCs (التجربة 3). من أجل التحقق مما إذا كان يتم تجنيد تخليق البروتين من خلال جلسات إعادة التعرض ، قمنا بضخ سيكلوهيكسيميد بعد إعادة التنشيط ولاحظنا حدوث نافذة لدونة جديدة ، مما يدعم فكرة أن إعادة التوحيد هي العملية الجارية (التجربة 4). أخيرًا ، باستخدام بروتوكول مختلف يهدف إلى آلية انتكاس أخرى لذاكرة الانقراض - إعادة الشراء السريع (المدخرات) - تحققنا من أن التثبيط الدوائي لـ HDAC بعد إعادة التنشيط كان قادرًا أيضًا على تعزيز تتبع الانقراض ، كما ثبت من خلال المقاومة الملحوظة لإعادة الحيازة السريعة للذاكرة. استجابة الخوف.

من المعروف أن فقدان الاستجابات المشروطة بعد الانقراض ليس دائمًا لأن الانقراض لا يعتمد عليه في الواقعذاكرةمحو. بدلاً من ذلك ، يشجع التعلم الجديد الذي يمنع التعبير عن الارتباط المخزن مسبقًا 14. ومن ثم تتعايش ذكريات الانقراض والخوف وتتنافس على التعبير. هذا يؤدي إلى تأثير أثر الهيمنة مع الانقراض الذي يمنع التعبير عن الخوف. ومع ذلك ، يتحلل الانقراض بسهولة وتتغلب ذاكرة الخوف على تثبيطها من خلال العديد من آليات الانتكاس. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أن تنفصل ذاكرة الخوف عن تثبيط الانقراض من خلال الظواهر السلوكية مثل الاستحواذ السريع ، والاستعادة ، والتجديد. اضمحلال الانقراضذاكرةمع مرور الوقت يظهر في التجربة 1. في البداية ، يمنع الانقراض استجابات الخوف المشروطة. ومع ذلك ، في النقاط الزمنية البعيدة يتلاشى هذا التأثير ، مما يؤدي إلى الشفاء التلقائي. لوحظ إعادة اكتساب سريع في التجربة 5. تظهر الفئران الضابطة خوفًا شديدًا بسرعة بعد جلسة تجديد ضعيفة واحدة. من المحتمل أن تؤدي الأساليب الجديدة المصممة للتحايل على استمرار ضعف الانقراض من خلال تعزيز قوتها إلى تحسين العلاجات النفسية للاضطرابات المرتبطة بالخوف.

منذ الانقراضذاكرةيضعف بمرور الوقت ويفقد قدرته على قمع الخوف 15 ، ومنع هذا الاضمحلال سيكون مفيدًا. في التجربة 2 ، وجدنا أن استمرار ذاكرة الانقراض يمكن تعديله بشكل إيجابي من خلال إعادة تنشيطه البسيط. وفقًا لذلك ، لم تكن هناك علامات على التعافي التلقائي عندما خضعت الحيوانات لعمليات إعادة تنشيط قصيرة ، حتى بعد 4 أسابيع من التدريب على الانقراض. ومن المثير للاهتمام ، أن إعادة التنشيط لم تزيد من استجابات الخوف لدى الحيوانات التي لم تخضع للتدريب على الانقراض كما تم الإبلاغ سابقًا 30 ، وربما يرجع ذلك إلى تأثير السقف. ومن ثم ، كانت جلسات إعادة التنشيط القصيرة قادرة على منع الانقراض المعتمد على الوقت بطريقة طويلة الأمد.

غالبًا ما يُقترح أن تتم إعادة التوحيد للسماح بذلكذاكرةيتم تحديث المحتوى ، مع الحفاظ على أهميته التكيفية لتوجيه السلوكيات المستقبلية بشكل أفضل. تظهر تقارير تحديث الذاكرة المدفوعة بإعادة التوحيد أنه يمكن أن يحدث من خلال دمج معلومات جديدة 32 ، 34 أو عن طريق تعزيز الارتباطات الموجودة 30 ، 35-39. من المهم الإشارة إلى أنه حتى عندما ينتج التعزيز من التعلم الإضافي من تجربة تعليمية ثانية مماثلة ، فإن عملية زعزعة الاستقرار وإعادة الاستقرار لا تزال مطلوبة. ومن ثم ، افترضنا أن تأثير التعزيز المدفوع بإعادة التنشيط الذي لوحظ في التجربة 2 يمكن التوسط فيه من خلال عملية إعادة توحيد ، والتي تشمل مرحلة زعزعة استقرار تعتمد على إعادة التنشيط متبوعة بمرحلة إعادة الاستقرار التي تتطلب تخليق بروتين جديد. أظهرت الأعمال السابقة أن نيموديبين مانع L-VGCC يمنع زعزعة استقرار الذاكرة ، وبالتالي يمنع إعادة الاندماج. في التجربة 3 ، وجدنا أن تأثير التعزيز لإعادة التنشيط قد تم منعه بواسطة مانع L-VGCC nimodipine ، والذي يدعم مشاركة إعادة التوحيد في تعزيز تتبع الانقراض. وقد تورط النيموديبين أيضًا في إضعاف اكتساب الانقراض وكذلك التوحيد 56 ، 57. ومع ذلك ، في بروتوكولنا التجريبي ، تم حقن النيموديبين بعد عدة أيام من حدوث جلسة الانقراض ، مما يجعل آثاره متميزة عن تلك التي تم الحصول عليها حول تعلم الانقراض الأولي. وبالتالي ، بغض النظر عن العملية التي يتم حظرها فعليًا - إعادة الدمج أو الانقراض - تُظهر التجربة 3 أن تقوية الانقراض الناتجة عن إعادة التنشيط تتطلب تفعيل VGCC.

إعادة التوحيد هي العملية التي تم إنشاؤها مسبقًاذاكرةيعاد تنشيطه ويصبح قابلاً للتغير ، مما يتطلب استمرار تخليق بروتين de novo. لمزيد من معالجة مسألة ما إذا كانت جلسة إعادة التنشيط تؤدي إلى إعادة توحيد تتبع الانقراض ، قمنا بالتحقيق في تأثير تثبيط تخليق البروتين بعد إعادة التنشيط في الحيوانات التي خضعت أو لم تخضع سابقًا لتدريب على الانقراض (التجربة 4). في الحيوانات التي لم تتعرض للانقراض ، أدى تثبيط تخليق البروتين بعد إعادة التنشيط إلى تعطيل إعادة توحيد الخوف السياقيذاكرة، مما يؤدي إلى انخفاض مستويات التجميد. حدثت النتيجة السلوكية المعاكسة في المجموعة التي تعرضت للانقراض: في الاختبار ، أظهرت الحيوانات المعالجة بـ CHX مستويات تجميد عالية ، مما يشير إلى أن ذاكرة الانقراض قد تعطلت. في هذه التجربة ، نظرًا لأن الانقراض قد تعطل بسبب تثبيط تخليق البروتين بعد إعادة التعرض مرة واحدة (كما تم تأكيده في اختبار في اليوم التالي) ، لم يتم التحقيق في جلسات إعادة التعرض الإضافية. تشير نتائج هذه التجربة إلى أنه تم إعاقة أثر الانقراض لدرجة أنه لم يعد قادرًا على قمع الخوف. يشير العمل السابق 5 ، 7 ، إلى أن إعادة التنشيط لم تعزز فقط "تعلم الانقراض الإضافي" ، ولكنها دفعت تتبع الانقراض إلى الدخول في حالة قابلة للتغير تتطلب إعادة الدمج للاستمرار. يجب على المرء أن يلاحظ أنه تم التعبير عن ذاكرة الانقراض أو ذاكرة الخوف في وقت إعادة التنشيط. وفقًا لذلك ، فإن الأثر الذي يتم تنشيطه بشكل كبير عن طريق إعادة التنشيط هو الذي تم زعزعته وبالتالي إضعافه بسبب تثبيط تخليق البروتين.

أخيرًا ، قمنا بتقييم ما إذا كان تتبع الانقراض يمكن تعديله بشكل إيجابي من خلال علاج ما بعد إعادة التنشيط باستخدام أذاكرة- دواء مُعزز. ثبت أن العديد من العوامل الدوائية تعززذاكرةالتوحيد وإعادة الدمج ، بما في ذلك مثبطات HDAC مثل زبدات الصوديوم 45 ، 52 ، 53. في التجربة 5 ، وجدنا أن معالجة NaB بعد إعادة التنشيط عززت تتبع الانقراض ، مما سمح لها بمقاومة الانتكاس عن طريق بروتوكول استعادة سريع. أظهرت الحيوانات التي عولجت بـ NaB مقاومة ملحوظة للادخار بعد إجراء استعادة سريع. أظهرت الحيوانات المعالجة بالمركبات مدخرات بعد جلسة تجديد ضعيفة واحدة ، بينما احتاجت الفئران المعالجة بـ NaB إلى 3 جلسات تجديد لإظهار نفس تأثير الاسترداد. يوضح هذا أنه حتى جلسة إعادة التنشيط القصيرة تجعل أثر الانقراض قابلاً للتعزيز عن طريق التداخل الإيجابي. يشير تعزيز الانقراض عن طريق تثبيط HDAC بعد إعادة التنشيط ، كما ورد هنا ، إلى أنه يمكن تحقيق نفس التأثير المفيد مع أدوية أخرى لتعزيز الذاكرة لمنع التعبير عن الخوف بمرور الوقت.

يجب النظر في احتمال أن تعزيز الانقراض المعتمد على إعادة التنشيط يمكن أن يتم التوسط فيه من خلال انقراض إضافي بدلاً من إعادة التوحيد. تم الإبلاغ عن أنه حتى حالات إعادة التعرض القصيرة لسياق ما يمكن أن تؤدي إلى الانقراض عند إجرائها في نقاط زمنية بعيدة. على الرغم من اختلاف البروتوكول التجريبي لتلك الورقة عن بروتوكولنا في عدد كبير من الجوانب ، فقد قمنا بتضمين مجموعة تجريبية إضافية للتحكم في هذا القلق المحدد: في التجربة 2 ، خضعت مجموعة "عدم الانقراض بالإضافة إلى إعادة التنشيط" لجلسات إعادة التنشيط الثلاث نفسها ولكن لم يقدم إلى جلسة الانقراض. لم تظهر هذه المجموعة أي توهين للخوف ، لا أثناء إعادة التنشيط ولا الاختبار ، مختلفًا عما يمكن توقعه في الانقراض. تأتي أدلة إضافية من التجربة 4. إذا تسبب التعرض القصير في انقراض إضافي ، فإن العلاج الهيكسيميد الحلقي قد يعطل التعلم الإضافي لتلك الجلسة فقط ، تاركًا ما تم تخزينه سابقًا. ومع ذلك ، فقد أدى الهيكسيميد الحلقي بعد إعادة التنشيط إلى تعطيل تتبع الانقراض ، مما أدى إلى إلغاء تثبيط الخوف في اختبار تم إجراؤه بعد 24 ساعة. إن تعطيل الأثر المخزن مسبقًا عن طريق تثبيط تخليق البروتين بعد إعادة التنشيط يتوافق مع تفسير إعادة التجميع. وبالتالي ، بالنظر إلى تقارب جميع الأدلة السلوكية والدوائية التي تم الحصول عليها مع التصميم التجريبي الحالي ، تشير نتائجنا إلى أن ما حدث خلال جلسات إعادة التنشيط كان عملية إعادة توحيد توسطت في تعزيز الانقراضذاكرة.

يعد تعافي الخوف بعد الأساليب القائمة على الانقراض أمرًا بالغ الأهمية لفهم كيفية تحسين العلاجات السلوكية والدوائية لاضطرابات القلق. في الواقع ، يمكن اعتبار تعزيز الانقراض سمة مميزة لأبحاث الطب النفسي. وجدنا هنا أن جلسات إعادة التنشيط القصيرة كانت فعالة في منع التعافي التلقائي للخوف المنقرضذاكرة. تم التوسط في هذا التأثير بواسطة L-VGCCs ويتضمن تخليق البروتين ، مما يشير بقوة إلى أن إعادة التوحيد هي الآلية الكامنة وراء هذا التعزيز. وجدنا أيضًا أن التعديل الدوائي الإيجابي بعد إعادة التنشيط كان قادرًا على منع الخوف من الاسترداد السريع. تُظهر هذه النتائج معًا أن الانقراض يمكن أن يستفيد من التدخلات القائمة على إعادة التنشيط والتي تهدف إلى تعزيز قوتها ومثابرتها. كما أنه يضيف إلى الفكرة القائلة بأن إعادة التوحيد والانقراض ليسا عمليتين منفصلتين تمامًا كما توحي النماذج الحالية في كثير من الأحيان. نظرًا لبروز العلاجات السلوكية المعرفية القائمة على الانقراض ، فإن هذه النتائج تجلب رؤى ذات صلة لكل من الأبحاث الأساسية والسريرية.

طُرق

المواضيع. تم استخدام ذكور فئران ويستار من مستعمرة التكاثر لدينا بوزن 300-350 جم ، وتتراوح أعمارهم بين 60 و 70 يومًا. تم إيواء الحيوانات في أقفاص بلاستيكية ، من أربعة إلى خمسة في كل قفص ، مع الماء والغذاء المتاحين بالشهرة. تم إجراء جميع التجارب من خلال تشريعات وإرشادات رعاية الحيوان الوطنية (القانون البرازيلي 11794/2008) ووافقت عليها لجنة الأخلاقيات بالجامعة.

تكييف الخوف السياقي. تتكون غرفة CFC من صندوق زجاجي مضاء (25. 0 × 25. 0- سم شبكة متوازية 0. 1- سم عيار من الفولاذ المقاوم للصدأ متباعدة 1. {{ 7}} سم). في جلسة التكييف ، تم وضع الفئران في الغرفة لمدة 3- دقيقة ، ثم تلقت 2- ثانية 0 ، 7 مللي أمبير مفصولة بفاصل زمني 30- ثانية. تم الاحتفاظ بالحيوانات في بيئة التكييف لمدة 30 ثانية إضافية قبل العودة إلى منازلهم.

ذاكرةجلسات الانقراض وإعادة التنشيط والاختبار. تم استخدام إعادة التعرض لسياق موجز أو طويل للحث على إعادة تنشيط الذاكرة أو تعلم الانقراض ، على التوالي. يتألف تدريب الانقراض من 30- دقيقة من إعادة التعرض للسياق المشروط ودائمًا ما يحدث بعد 24 ساعة من CFC. تتكون جلسات إعادة تنشيط الذاكرة من 3- دقيقة من إعادة التعرض للسياق المشروط. في التجربتين 2 و 3 ، أجريت عمليات إعادة التنشيط في الأيام 7 و 14 و 21 بعد الاختبار 1. في التجارب 4 و 5 تم إجراؤها بعد 24 ساعة من التدريب على الانقراض.

تكونت جلسات الاختبار من 4- دقيقة لإعادة عرض السياق. في التجارب 1 و 2 و 3 ، تم إجراء الاختبار الأول بعد 24 ساعة من التدريب على الانقراض ، وتم إجراء اختبار ثان بعد 7 أو 14 أو 21 أو 28 يومًا لتقييم الخوف من التعافي التلقائي. في التجربتين 4 و 5 ، أجريت جلسة الاختبار بعد 24 ساعة من إعادة التنشيط لتقييم تأثير التلاعب الدوائي بعد إعادة التنشيط.

لمعالجة الاستحواذ السريع (أو "التوفير" ، التجربة 5) ، خضعت الحيوانات لاختبار دقيقة 4- متبوعًا بضربة قدم ضعيفة (واحدة 2- ثانية 0. 4 مللي أمبير). بعد 30 ثانية إضافية ، عادوا إلى ديارهم. تكرر هذا الإجراء ثلاث مرات يوميًا ، تلاه اختبار إضافي بعد يوم واحد. في هذا الإجراء ، تم دائمًا تسجيل درجة التجميد قبل صدمة القدم (التي تتكون من جلسة اختبار قياسية). سمح لنا ذلك بقياس الأداء وإخضاع الحيوانات لجلسة إصلاح ضعيفة.

المخدرات. تم إذابة مثبط تخليق البروتين سيكلوهكسيميد (CHX ؛ سيغما) في محلول ملحي معقم متساوي التوتر مع 1 في المائة ثنائي ميثيل سلفوكسيد إلى تركيز 2.2 ملغ / مل. تم حقن سيكلوهيكسيميد أو مركبته داخل الصفاق مباشرة بعد إعادة التنشيط. كان الحجم الإجمالي المحقون 1 مل / كجم.

تم إذابة نيموديبين (Sigma) مناهض قنوات الكالسيوم ذات الجهد الكهربائي من النوع L (Sigma) في محلول ملحي معقم مع 8 في المائة ثنائي ميثيل سلفوكسيد إلى تركيز 16 ملغ / مل. تم حقن Nimodipine أو مركبته تحت الجلد قبل 30 دقيقة من جلسات إعادة التنشيط. كان الحجم الإجمالي المحقون 1 مل / كجم.

تم إذابة زبدات الصوديوم (NaB ؛ Sigma) ، وهو مثبط هيستون ديستيلاز (HDAC) ، في محلول ملحي معقم متساوي التوتر بتركيز 0. 6 جم / مل. كان الحجم الإجمالي المحقون 1 مل / كجم IP ، مباشرة بعد إعادة التنشيط.

تحليل البيانات.ذاكرةتم قياسه من خلال تحديد سلوك التجميد ويتم التعبير عنه كنسبة مئوية من إجمالي وقت الجلسة. تم تسجيل التجميد بواسطة مراقب أعمى عن الظروف التجريبية. تم تأكيد التجانس والتماثل الطبيعي لتوزيع البيانات باختبار Levene واختبار Kolmogorov-Smirnov ، على التوالي. تم تحليل جلسات الانقراض باستخدام مقاييس متكررة ANOVA. تم تحليل جلسات إعادة التنشيط باستخدام اختبار الطالب ، أو ANOVA ثنائي الاتجاه ، أو المقاييس المتكررة ANOVA ، متبوعًا باختبار Tukey اللاحق. تم تحليل جلسات الاختبار باستخدام اختبار الطالب ، أو ANOVA ثنائي الاتجاه ، أو ANOVA المتكرر ، متبوعًا باختبار Tukey اللاحق.

المرجعي

1. نادر ، K. ، Schafe ، GE ، Le Doux ، JE ذكريات الخوف تتطلب تخليق البروتين في اللوزة لإعادة توحيدها بعد الاسترجاع. Nature 406، 722–6 (2000). (2010).

3. Finnie، PSB & Nader، K. دور آليات الميتابلاستيك في التنظيمذاكرةزعزعة الاستقرار وإعادة التوحيد. نيوروسسي. بيوبيهاف. القس 36 ، 1667-707 (2012).

5. Rossato، JI، Bevilaqua، LR، Izquierdo، I.، Medina، JH & Cammarota، M. Retrieval يستحث إعادة توحيد انقراض الخوفذاكرة. بروك. ناتل. أكاد. علوم. الولايات المتحدة الأمريكية 107 ، 21801–21805 (2010).

7. Eisenberg، M. & Dudai، Y. إعادة توحيد ذاكرة الخوف الجديدة والبعيدة والمطفأة في ميداكا: المخاوف القديمة لا تموت. Eur J Neurosci 20 ، 3397-3403 (2004).

8. Rosas-Vidal، L.، Rodriguez-Romaguera، J.، Do-Monte، F. & Anderson، R. استهداف إعادة توحيد ذكريات الانقراض: استراتيجية محتملة جديدة لعلاج اضطرابات القلق. مول. الطب النفسي 20 ، 1264-1265 (2015).

9. Bouton، ME، Westbrook، RF، Corcoran، KA & Maren، S. التعديل السياقي والزمني للانقراض: الآليات السلوكية والبيولوجية. بيول. الطب النفسي 60 ، 352-60 (2006).

11. Furini ، C. ، Myskiw ، J. & Izquierdo ، I. تعلم الانقراض من الخوف. نيوروسسي. بيوبيهاف. القس 47 ، 670-683 (2014).

13. Vervliet، B.، Craske، MG & Hermans، D. الخوف من الانقراض والانتكاس: حالة من الفن. Annu. القس كلين. بسيتشول. 9 ، 215–48 (2013). (2002).

15. ريسكورلا ، رع الشفاء العفوي. يتعلم. ميم. 11 ، 501-9 (2004).

17. Pedreira، ME & Maldonado، H. يؤدي تخليق البروتين إلى إعادة الاندماج أو الانقراض اعتمادًا على مدة التذكير. Neuron 38 ، 863 - 869 (2003).

18. Bustos، SG، Maldonado، H. & Molina، VA التأثير التخريبي للميدازولام على إعادة توحيد ذاكرة الخوف: التأثير الحاسم للمدى الزمني لإعادة التنشيط وعمر الذاكرة. علم الأدوية النفسية والعصبية 34 ، 446-57 (2009).

19. Merlo ، E. ، Milton ، AL ، Goozée ، ZY ، Theobald ، DE & Everitt ، BJ إعادة التوحيد والانقراض هي عمليات قابلة للفصل والاستبعاد المتبادل: الأدلة السلوكية والجزيئية. J. نيوروسسي. 34 ، 2422-31 (2014).

20. Eisenberg، M.، Kobilo، T.، Berman، DE & Dudai، Y. استقرار الذاكرة المسترجعة: الارتباط العكسي مع هيمنة التتبع. العلوم 301 ، 1102-1104 (2003).

21. سوزوكي ، إيه وآخرون. إعادة توحيد الذاكرة وانقراضها لهما توقيعات زمنية وكيميائية حيوية مميزة. نيوروسسي. 24 ، 4787-95

(2004).

22. Lee ، JLC ، Milton ، AL & Everitt ، BJ إعادة توحيد وانقراض الخوف المشروط: التثبيط والتقوية. J. نيوروسسي. 26 ، 10051-6 (2006).

23. Flavell، CR & Lee، JL إعادة توحيد وانقراض ذاكرة بافلوفيان الشهية. نيوروبيول ليرن ميم 104 ، 25-31

(2013).

24. Tedesco، V.، Roquet، RF، DeMis، J.، Chiamulera، C. & Monfils، M.-H. يتم تطبيق الانقراض بعد استرجاع ذاكرة الخوف السمعي ، ويزيد بشكل انتقائي بروتين إصبع الزنك 268 وتعبير بروتين الريبوسوم S6 الفسفوري في قشرة الفص الجبهي واللوزة الجانبية. نيوروبيول. يتعلم. ميم. 115 ، 78-85 (2014).

25. de la Fuente، V.، Freudenthal، R. & Romano، A. إعادة التوحيد أو الانقراض: تبديل عامل النسخ في تحديد دورة الذاكرة بعد الاسترجاع. J. نيوروسسي. 31 ، 5562-73 (2011).

27. Lee، JLC Reconsolidation: الحفاظ على ملاءمة الذاكرة. الاتجاهات العصبية. 32 ، 413-20 (2009).

29. Nadel، L. & Hardt، O. تحديث لأنظمة وعمليات الذاكرة. علم الأدوية النفسية والعصبية 36 ، 251-73 (2011).

31. Forcato، C.، Rodríguez، MLC، Pedreira، ME & Maldonado، H. Reconsolidation في البشر يفتح ذاكرة توضيحية لمدخل المعلومات الجديدة. نيوروبيول. يتعلم. ميم. 93 ، 77-84 (2010).

32. Monfils، M.-H.، Cowansage، KK، Klann، E. & LeDoux، JE Extinction-reconsolidation border: مفتاح التوهين المستمر لذكريات الخوف. علوم (80-.). 324 ، 951–955 (2009).

33. Hupbach، A.، Gomez، R.، Hardt، O. & Nadel، L. إعادة توحيد الذكريات العرضية: تذكير دقيق يؤدي إلى تكامل المعلومات الجديدة. يتعلم. ميم. 14 ، 47-53 (2007).

34. Haubrich، J. et al. تسمح إعادة التوحيد بتحديث ذاكرة الخوف إلى مستوى أقل كرهًا من خلال دمج المعلومات الشهية. علم الأدوية النفسية والعصبية 40 ، 315-326 (2015).

35. Inda، MC، Muravieva، EV & Alberini، CM استرجاع الذاكرة ومرور الوقت: من إعادة التوحيد والتقوية إلى الانقراض. J. نيوروسسي. 31 ، 1635-1643 (2011).

(2008).

37. فوكوشيما ، هـ وآخرون. تقوية ذاكرة الخوف عن طريق الاسترجاع من خلال إعادة التوحيد. إلييف 2014 ، 1–19 (2014).

39. Forcato، C.، Rodríguez، MLC & Pedreira، ME تقوي عمليات التوحيد وإعادة التجميع المتكررة الذاكرة التقريرية في البشر. PLoS One 6 ، e23305 (2011).

(2015).

41. Garcia-DeLaTorre، P.، Rodriguez-Ortiz، CJ، Arreguin-Martinez، JL، Cruz-Castaneda، P. & Bermudez-Mattoni، F. دفعات أنيسوميسين متزامنة ولكن غير مستقلة في القشرة المعزولة واللوزة تعيق استقرار ذاكرة التذوق عند التحديث. يتعلم. ميم. 16 ، 514-519 (2009).

42. لي ، إعادة توحيد ذاكرة JLC يتوسط في تحديث محتوى ذاكرة الحصين. أمامي. Behav. نيوروسسي. 4 ، 168 (2010).

44. Souter، M. & Kindt، M. تحول مفاجئ للسلوك الرهابي بعد عامل فاقد للذاكرة بعد الاسترداد. بيول للطب النفسي ، دوى: 10.1016 / j.biopsych.2015.04.006 (2015).

45. Bredy، TW & Barad، M. يعزز حمض الفالبرويك المانع للهيستون ديسيتيلاز اكتساب وانقراض وإعادة توحيد الخوف المشروط. يتعلم. ميم. 15 ، 39-45 (2008).

47. Tronson، NC، Wiseman، SL، Olausson، P. & Taylor، JR اللدونة السلوكية ثنائية الاتجاه لإعادة توحيد الذاكرة تعتمد على بروتين أميجدالار كيناز أ. نات. نيوروسسي. 9 ، 167-9 (2006).

48. Fitzgerald، PJ، Seemann، JR & Maren، S. هل يمكن أن يخشى الانقراض أن يتعزز؟ مراجعة النتائج الدوائية والسلوكية. Res الدماغ. ثور. 105 ، 46-60 (2014).

49. Bouton، ME، Winterbauer، NE & Todd، TP عمليات الانتكاس بعد انقراض التعلم الآلي: التجديد والانبعاث وإعادة الاكتساب. Behav. العمليات 90 ، 130-41 (2012).

50. جراف ، ج. ، كيم ، د. ، دوبين ، إم إم وتساي ، إل. التنظيم الوراثي للتعبير الجيني في عمليات الدماغ الفسيولوجية والمرضية. 603-649 ، دوى: 10.1152 / physrev.00012.2010 (2011).

51. سوزوكي ، أ ، موكاوا ، ت. ، تسوكاغوشي ، أ. ، فرانكلاند ، بي دبليو وكيدا ، س. تفعيل LVGCCs ومستقبلات CB1 اللازمة لزعزعة استقرار ذكريات الخوف السياقية التي أعيد تنشيطها. يتعلم. ميم. 15 ، 426-33 (2008).

52. Federman، N.، Fustinana، MS & Romano، A. تتضمن إعادة التوحيد أستلة هيستون اعتمادًا على قوة الذاكرة. علم الأعصاب 219 ، 145-156 (2012).

53. Villain ، H. ، Florian ، C. & Roullet ، P. تثبيط HDAC يعزز كل من التوحيد الأولي وإعادة توحيد الذاكرة المكانية في الفئران. علوم. ممثل 6 ، 27015 (2016).

54. Stefanko، DP، Barrett، RM، Ly، AR، Reolon، GK & Wood، MA تعديل الذاكرة طويلة المدى للتعرف على الأشياء عن طريق تثبيط HDAC. بروك. ناتل. أكاد. علوم. الولايات المتحدة الامريكية. 106 ، 9447-52 (2009).

56. Flavell، CR، Barber، DJ & Lee، JLC إعادة تجميع الذاكرة السلوكية للطعام وذكريات الخوف. نات. كومون. 2 ، 504

(2011).

57. Cain، CK، Blouin، AM & Barad، M. L-Type Voltage-Gated Calcium Channels مطلوبة للانقراض ، ولكن ليس للاكتساب أو التعبير ، الخوف الشرطي في الفئران. J. نيوروسسي. 22 ، 9113-9121 (2002).

58. Almeida-Correa، S. & Amaral، OB Memory Labilization in Reconsolidation and extinction - دليل على نظام لدونة مشترك؟ J Physiol Paris 108 ، 292-306 (2014).

شكر وتقدير

نشكر السيدة Zelma Regina V. de Almeida على مساعدتها الفنية اللطيفة والمهنية ، وماجستير. جين جانغ لمراجعتها السخية والمختصة للغة. كان هذا العمل مدعومًا بزمالات ومنح من CAPES (MEC) و CNPq (MCT) و PROPESQ (UFRGS). يعلن جميع المؤلفين أنه ليس لديهم أي مصدر آخر للتعويض غير المؤسسة الأولية والتمويل الفيدرالي.

الكاتب الاشتراكات

قام JH بتصميم الدراسة ، وإجراء التجارب ، وتحليل البيانات ، وكتابة المخطوطة. ساعدت AM و FZB و APC و ROS في التجارب وساهمت بالأفكار. ساعد LOA و JAQ في تصميم الدراسة وكتابة المخطوطة. راجع جميع المؤلفين المخطوطة.

معلومات إضافية

تضارب المصالح: يعلن المؤلفون أنه ليس لديهم مصالح متنافسة.

ملاحظة الناشر: تظل Springer Nature محايدة فيما يتعلق بالمطالبات القضائية في الخرائط المنشورة والانتماءات المؤسسية.

الوصول المفتوح تم ترخيص هذه المقالة بموجب Creative Commons Attribution 4. 0 دولي