فوائد أكتيوسيد - علاج الورم الأرومي الدبقي

جهة الاتصال: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 البريد الإلكتروني:audrey.hu@wecistanche.com

تاي وونغ هوانغ ؛ دونغ هون كيم ؛ DA BI KIM1؛ TAE WON JANG؛ GUN ‑ HWA KIM؛ MINHO MOON؛ KYUNG AH YOON؛ DAE EUN CHO؛ JAE HO PARK؛ JWA ‑ ​​JIN KIM

1 المقدمة

ورم أرومي دبقيهو النوع الأكثر شيوعًا من أورام الدماغ الأولية الخبيثة وأورام الدماغ الأولية الأكثر تغلغلًا وتدميرًا (1،2) ، بمتوسط ​​معدل بقاء يصل إلى 18 شهرًا تقريبًا مع العلاج العدواني متعدد الوسائط. قرارات العلاج الحالية محدودة وتشمل الإشعاع والعلاج الكيميائي والجراحة بالاشتراك مع عامل الألكلة temozolomide (TMZ) (3،4). على الرغم من توافر العلاجات القوية ، إلا أن المرضى الذين يعانون منورم أرومي دبقيبشكل عام لديهم توقعات سيئة (5). TMZ هو دواء العلاج الكيميائي الرئيسي المستخدم في العلاج السريري للأورام الخبيثةورم أرومي دبقي(6-8) ؛ كعامل مؤلكل في السلسلة ، فهو قادر على اختراق الحاجز الدموي الدماغي (9-11). أثناء تطور الورم الأرومي الدبقي الخبيث والغزو الواسع في جميع أنحاء الدماغ ، فإن الزيادة المطردة في مقاومة الأدوية لـ TMZ تقلل من فعاليتها العلاجية (12 ، 13). وعليه ، فإن الأدوية العلاجية الجديدة لمواجهةورم أرومي دبقيعلى وجه السرعة.

أفادت الدراسات السابقة أن خلايا الورم الدبقي تخضع لموت الخلايا عن طريق الالتهام الذاتي ، أو موت الخلايا المبرمج من النوع الثاني ، استجابةً لـ TMZ (14 ، 15). يمكن منع الالتهام الذاتي بواسطة 3 ميثيل أدينين (3 ‑ MA) من خلال تحويل سلسلة خفيفة من البروتين 1 المصاحب للبروتين الصغير 3 (LC3) I إلى LC3 II ، وبالتالي تقليلورم أرومي دبقيموت الخلية (16،17) ؛ ومع ذلك ، فإن دور الالتهام الذاتي يعتمد على السياق الخلوي. باستثناء الدور السام للخلايا أثناء عمل TMZ ، فإن تحريض الالتهام الذاتي عن طريق الإجهاد الخلوي هو عملية حماية خلوية تقضي على الركام السيتوبلازمي الناجم عن الإجهاد والعضيات والجزيئات الكبيرة في خلايا الثدييات من خلال الجهاز الليزوزومي. في المقابل ، تتلقى الخلايا المشاركة في الحفاظ على التوازن الطاقة من خلال عمليات تقويضية (18،19). تشير الأدوار المعقدة للالتهام الذاتي إلى أن منشط الالتهام الذاتي قد يكون له تأثيرات مضادة للسرطان بالاشتراك مع علاج TMZ عن طريق تحفيزورم أرومي دبقيالالتهام الذاتي الخلوي دون إحداث آثار ضارة أو تقديم فوائد للأنسجة الطبيعية. من الجدير بالملاحظة أن TMZ أظهرت تأثيرات علاجية تآزرية بالاشتراك مع فيتامين د ، بما في ذلك قابلية بقاء الخلية المكبوتة والالتهام الذاتي المحسن فيورم أرومي دبقيالخلايا. علاوة على ذلك ، فقد ثبت أن الجمع بين TMZ وفيتامين D له تأثيرات مضادة للسرطان في الجسم الحي ، بما في ذلك تقليل حجم الورم ومعدل البقاء على قيد الحياة لفترات طويلة. تشير هذه الدراسات إلى أن العلاج المركب قد يكون له تأثيرات تآزرية مضادة للسرطان عبر آليات البلعمة الذاتية في TMZ.ورم أرومي دبقيالعلاج (15).

أكتوسيدهو جليكوسيد الفينيثانويد الذي يتم توزيعه على نطاق واسع في العديد من الأدوية العشبية الصينية التقليدية المنغمة (20،21). ارتبط عدد من الإجراءات الدوائية ، بما في ذلك مضادات الأكسدة ، ومضادات السرطان ، ومضادات الالتهاب ، ومضادات التهاب الكلية ، ومضادات الانتشاء.أكتيوسيد(22-24). أثبتت الدراسات السابقة ذلكأكتيوسيدله تأثيرات وقائية ضد إصابة الكبد التي يسببها رابع كلوريد الكربون و D ‑ galactosamine. من المحتمل أن تكون الآليات الكامنة وراء التأثيرات الوقائية للأكتيوسيد مرتبطة بقدرته على تثبيط التنشيط الحيوي بوساطة P450 وتأثيرات إزالة الجذور الحرة الناتجة عن التعرض لرابع كلوريد الكربون (25 ، 26).

لذلك ، تشير الدلائل إلى أن كليهماأكتيوسيدوتحفيز TMZ تأثيرات مضادة للسرطان من خلال موت الخلايا. ومع ذلك ، فإن ارتباطها وتأثيراتها المضادة للسرطان في سياقورم أرومي دبقيلا يزال يتعين توضيحها. لذلك ، كان الهدف من هذه الدراسة هو التحقق من التأثيرات التآزرية المضادة للسرطانأكتيوسيدجنبا إلى جنب مع TMZ فيورم أرومي دبقيعلاج نفسي. تم إجراء فحص قابلية الخلية لتحليل التأثيرات المضادة للسرطان للعلاج المركب في C6ورم أرومي دبقيخلايا (فأرورم أرومي دبقيخط الخلية) ، وتمت مقارنة النتائج مع تلك التي أعقبت العلاج باستخدام TMZ وحده. لمزيد من الدراسة لآلية موت الخلايا الناجم عن المعالجة بالمضادات الحيويةأكتيوسيدو TMZ ، تم فحص الجينات ذات الصلة بالالتهام الذاتي في الخلايا C6.

مضاد للورم أكتيوزيد

2. المواد والأساليب

زراعة الخلايا:

الجرذ C6ورم أرومي دبقيتم شراء خط الهاتف الخلوي من American Type Culture Collection (Rockville ، MD ، USA). تمت زراعة الخلايا في ظروف معقمة عند 37 درجة مئوية في بيئة رطبة مع 5 بالمائة من ثاني أكسيد الكربون في وسط Dulbecco المعدل النسر (DMEM) مع 10 بالمائة من مصل الأبقار الجنيني (FBS) ، ومضادات حيوية ومضادات حيوية بنسبة 1 بالمائة (جميع ويلجين ، دايجو ، كوريا).

المواد النباتية:

Abeliophyllum distichum Nakai [قسيمة رقم. Park1001 (ANH)] في متنزه Misun ‑ hyang الترفيهي ، Seongbul ‑ Mountain Recreation Forest ، كوريا.

تحريض الكالس:

للحث على تكوين الكالس (27) ، تم عزل إإكسبلنتس أوراق 1 سم 2 من النباتات الطازجة. تمت زراعة النبات المستأصل على وسط Murachige و Skoog (4٪ سكروز ، 0. 9٪ أجار مع 1 مجم / لتر من حمض النفتالين الخليك و 1 مجم / لتر 2،4 ‑ ثنائي كلورو حمض فينوكسي أسيتيك ، درجة الحموضة 5.7) عند 25 درجة مئوية. تم إحداث الكالس بعد 20 يومًا. كمية كافية منأكتيوسيدتم الحصول عليها من خلال ثقافة فرعية للفصل والتنقيةأكتيوسيدمن الكالس (الشكل 1). دفعات مختلفة من المنقىأكتيوسيدتم استخدامها في كل تجربة. تم إجراء كل تجربة ثلاث مرات باستخدام دفعة مختلفة.

العزلة والتنقية:

تم تركيز أجزاء أسيتات الإيثيل في وسط مفرغ واستخدمت كعينة لتنقية أكتيوسيد.أكتوسيدتم عزله وتنقيته بواسطة نظام العزل الكروماتوغرافي المعجل (Isolera ™ Spektra ، Biotage ، Uppsala ، السويد) باستخدام خراطيش SNAP KPHOSPHO-SIL و SNAP Ultra (Biotage). الأكتيوسيدالمنقى من الكالس تم تحليله كميًا باستخدام أكتيوسيد القياسي بواسطة تحليل HPLC-PDA. أخيرًا ، تم الحصول على أكتيوسيد أكبر من أو يساوي 95 في المائة من النقاوة من الكالس واستخدم كعينة للعلاج الكيميائي لتيموزولوميد ‑ورم أرومي دبقي.

3‑ (4،5 ‑ ديميثيلثيازول 2 لتر) - ، 5 ثنائي فينيل تيترازوليوم بروميد (MTT):

لتحديد تركيز المثبط نصف الأقصى TMZ (قيمة IC50) ضد خلايا C6 ، تم زرع 1x104 خلية في معلقات وحيدة الخلية في آبار فردية من أطباق 96 درجة جيدًا وحضنت لمدة 24 ساعة عند 37 درجة مئوية قبل علاج TMZ في المحدد تركيزات (1 ، 5 ، 10 ، 20 ملي مولار) عند 37 درجة مئوية لمدة 24 ساعة. بعد تحديد قيمة TMZ IC50 كـ 5 مم ، تمت معالجة الخلايا لمدة 24 ساعة بـ 5 ملي مولار TMZ ، 50 ميكرومترأكتيوسيد، أو مزيج من الاثنين (5 ملم TMZ و 50 ميكرومترأكتيوسيد). تمت إضافة محلول MTT (5 مجم / مل) إلى كل بئر (10 ميكرولتر) وتم تربيته عند 37 درجة مئوية لمدة ساعتين. بعد ذلك ، تمت إزالة الوسط وإضافة DMSO بحجم 200 ميكرولتر لكل منهما وتفاعل عند درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة. تم قياس الامتصاصية عند 595 نانومتر لتحديد صلاحية الخلية.

فحص التئام الجروح:

تمت زراعة معلق خلية C6 في 1 مل في صفيحة بئر 12 درجة ونموها حتى التقاء. تم علاج الخلايا بـ TMZ ،أكتيوسيدأو TMZ plusأكتيوسيدثم خدشها بطرف ماصة معقم مكون من 1 0 - ميكرولتر لتكوين جرح اصطناعي. في 0 و 24 ساعة بعد الجرح ، تم التقاط صور رقمية لعملية التئام الجرح باستخدام مجهر مقلوب. تم قياس ترحيل الخلايا عن طريق قياس حجم الندبة عند 0 و 24 ساعة باستخدام برنامج تحليل الصور ImageJ 1.43u / Java1.6. 0_22 (المعاهد الوطنية للصحة ، بيثيسدا ، ماريلاند ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم إجراء كل تجربة ثلاث مرات وتم إجراء القياسات في ثلاث نسخ.

التجلط المناعي:

تم علاج خلايا C6 باستخدام TMZ ،أكتيوسيدأو TMZ plusأكتيوسيدلمدة 24 ساعة. تم تفكيك الخلايا على الجليد بواسطة RIPA (25 ملي مولار تريس ‑ حمض الهيدروكلوريك ، درجة الحموضة 7.5 ، 15 {8}} ملي مول كلوريد الصوديوم ، 1 في المائة Nonidet P 4 0 ، 1٪ صوديوم deoxycholate ، 0.1٪ SDS) عازلة تحلل مكمل بكوكتيل مثبطات الأنزيم البروتيني والفوسفاتيز (روش ، بازل ، سويسرا) لمدة 30 دقيقة. بعد الطرد المركزي عند 18341 x ج لمدة 15 دقيقة عند 4 درجات مئوية ، تم الحصول على المادة الطافية. تم تحديد تركيز البروتين باستخدام Bradford Protein Assays (Bio ‑ rad ، Hercules ، CA ، USA). تم تحميل كميات متساوية من البروتينات الكلية (30 ميكروغرام) في آبار مفردة وتجزئتها عبر الرحلان الكهربائي عبر 10-15 بالمائة SDS PAGE. تم نقل البروتينات كهربائيًا إلى أغشية بولي فينيلدين ديفلورايد (EMD ميليبور ، بيدفورد ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية). بعد الحضانة في محلول مانع يحتوي على 5 في المائة من الحليب الخالي من الدسم في محلول ملحي Tween / Tris لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. تم فحص البقع باستخدام 1: 1 ، 000 - الأجسام المضادة الأولية المخففة (القط رقم 9662 ، كاسباس 3 ؛ Cell Signaling Technology ، Inc. ، Danvers ، MA ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، ورم الغدد الليمفاوية B0 خلية 2 (sc‑ 7382 ، Bcl ‑ 2) ، Bcl 2 بروتين X مرتبط (قطة رقم 2772 ، Bax) ، فسفوري (p‑) p53 (sc 101762) ، إجمالي ‑ p53 (sc ‑ 6243) ، ‑actin (cat. رقم 4970 ؛ الكل ؛ Santa Cruz Biotechnology، Inc.، Dallas، TX، USA)، LC ‑ 3 (L8918، Sigma؛ Merck KGaA، Darmstadt، Germany)، Rab7 (cat. no. 9367، Cell Signaling Technology، Inc. )، p62 (cat. no. 114)، p p38 (cat. no. 9211)، total ‑ p38 (cat. no. 9212)، p ‑ c ‑ Jun N ‑ terminal kinase (cat. no. 9251، p ‑JNK) ، إجمالي ‑ JNK (الفئة رقم 9252) ، p إشارة خارج الخلية ‑ كيناز منظم (القط رقم 9101 ، ص ERK) ، إجمالي ‑ ERK (الفئة رقم 9102 ؛ جميع تقنيات تشوير الخلايا ، وشركة .) بين عشية وضحاها في 4 درجات مئوية. تبع ذلك حضانة مع بيروكسيداز الفجل ‑ الأجسام المضادة الثانوية المقترنة (1: 2 ، 000 ؛ LF ‑ SA8001A ، Goat Anti ‑ Mouse IgG ‑ HRP) أو LF ‑ SA8002A (Goat Anti ‑ Rabbit IgG ‑ HRP) ، AB Frontier، Seoul، Korea.) لمدة ساعتين في درجة حرارة الغرفة. ثم تم تصور البروتينات من خلال التعرض لـ Chemi-Doc (Bio ‑ Rad Laboratories، Inc.، Hercules، cA، USA).

تلطيخ المناعي:

بروتين الغشاء 1 الليزوزومي المرتبط (LAMP1) و LC3 هما علامات على الليزوزومات والالتهام الذاتي. تم تحضير الخلايا (1 × 105 خلية / بئر) على أغطية زجاجية معقمة (BD Biosciences ، Franklin Lakes ، NJ ، الولايات المتحدة الأمريكية) في ثلاث نسخ. بعد العلاج بـ TMZ ،أكتيوسيدأو TMZ plusأكتيوسيدلمدة 24 ساعة ، تم إصلاح الخلايا في بارافورمالدهيد بنسبة 4 في المائة لمدة 3 {{5} دقائق ، وتم حظرها باستخدام مصل دجاج طبيعي بنسبة 5 في المائة (S ‑ 3000 ؛ Vector Laboratories ، Inc. ، Burlingame ، CA ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، 0.1 بالمائة Triton X ‑100 ثم حضنت لمدة ساعة واحدة للنفاذية ومنع تفاعلات البروتين غير المحددة للبروتين. تم تحضين الخلايا بعد ذلك بمضاد ‑ LAMP1 (1: 200 ؛ sc ‑ 19992 ، Santa Cruz Biotechnology ، Inc.) ومضاد ‑ LC3 (1: 400 ؛ PM036 ، MBL International ، Woburn ، MA ، الولايات المتحدة الأمريكية) طوال الليل عند 4 درجات مئوية. ج. تم بعد ذلك غسل الخلايا مرتين باستخدام برنامج تلفزيوني واحتضانها لمدة ساعتين إضافيتين في الظلام بمزيج من الأجسام المضادة الثانوية Alexa Fluor 488 و 594 (1: 200 ؛ Alexa Fluor 488 (A 11008) و 594 (A 11007) ، Thermo Fisher Scientific ، Inc. ، Waltham ، MA ، USA) وغسلها مرة أخرى باستخدام PBS. تم تلوين النوى باستخدام 4،6 Diamidino 2 phenylindole (Sigma ؛ Merck KGaA) ، ثم غسلها مرتين باستخدام PBS. تم بعد ذلك تركيب الشرائح والتقاط الصور باستخدام مجهر ليزر متحد البؤر LSM 700.

الشكل 1. التركيب الكيميائي للأكتيوسايد.

التدفق الخلوي.

تم تحليل الخلايا لـ Mitotracker Green و MitoSOX عن طريق قياس التدفق الخلوي باستخدام مقياس التدفق الخلوي FACSCanto II ، كما هو موضح من قبل الشركة المصنعة (BD Biosciences). بعد شطفتين باستخدام PBS ، تم تثبيت الخلايا في بارافورمالدهيد بنسبة 4 في المائة لمدة 3 0 دقيقة في درجة حرارة الغرفة وتم تنفيسها بنسبة 0.25 في المائة Triton X ‑ 100 في PBS لمدة 20 دقيقة. كانت الخلايا ملطخة بالأجسام المضادة الأولية طوال الليل عند 4 درجات مئوية (1: 200) ثم بأجسام مضادة ثانوية لمدة ساعة واحدة على الجليد. بعد غسل مرتين باستخدام PBS ، تم إصلاح الخلايا في بارافورمالدهيد بنسبة 4 في المائة ومعايرة على الفور. تم جمع بيانات قياس التدفق الخلوي باستخدام 10 ، 000 خلايا وتم تحليلها باستخدام برنامج FlowJo 7.6.1 (Tree Star، Inc.، Ashland، OR، USA).

تحليل احصائي:

تم تحليل جميع البيانات باستخدام GraphPad Prism 5. 0 وتم تقديمها على أنها متوسط ​​± الخطأ المعياري للمتوسط. تم تحليل البيانات من خلال تحليل أحادي الاتجاه للتباين مع اختبار Tukey متعدد المقارنات اللاحق لمقارنة القيم المتوسطة بين مجموعات متعددة. ص<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Cistanche Echinacoside: مضاد للاستماتة

3. النتائج

3.1 المعالجة باستخدام TMZ ومثبطات الأكتوزيدورم أرومي دبقيتكاثر الخلايا والهجرة.

العلاج المشترك مع TMZ وأكتيوسيدحالت دون جدوى خلايا C6. قلل TMZ قابلية الخلية للحياة بطريقة تعتمد على الجرعة (الشكل 2 أ) ، في حين أن الأكتيوسايد وحده لم يكن له تأثير كبير في أي مستوى معالجة (الشكل 2 ب). بعد الحضانة في وسط مزرعة يحتوي على TMZ مع أو بدون أكتيوسيد لمدة 24 ساعة ، تم إجراء اختبار MTT لمقارنة السمية الخلوية لمستويات العلاج المختلفة. قام TMZ بقمع بقاء الخلية بشكل كبير ، في حين أن الأكتوزيد لم يقمع نمو الخلية بشكل كبير. العلاج المشترك مع TMZ و acteoside قلل بشكل ملحوظ من بقاء الخلية (الشكل 2C). العلاج باستخدام TMZ أو Acteoside المطبق بمفرده يقلل من القدرة على التئام الجروح (الشكل 3 أ). تم قياس مسافة الجرح (النسبة المئوية) باستخدام النتائج الموضحة في الشكل 3 أ مع برنامج ImageJ. زادت مسافة الجرح بشكل ملحوظ بعد العلاج المركب (الشكل 3 ب) ، مقارنة بأي علاج فردي. تشير هذه النتائج إلى أن المعالجة باستخدام TMZ و acteoside كان مثبطًا فعالًا لـورم أرومي دبقيتكاثر الخلايا والهجرة.

3.2 يؤثر Acteoside و TMZ على موت الخلايا المبرمج بشكل تآزري في خلايا C6.

أظهرت نتائج تحليل اللطخة الغربية أن مستويات الكاسباس المشقوق ‑ 3 و Bax و p53 الفسفوري كانت أعلى وأن مستويات Bcl 2 كانت أقل بعد العلاج المركب مع TMZ وأكتيوسيدمن بعد العلاج بـ TMZ وحده (الشكل 4 أ).أكتوسيدتمت ملاحظة وظيفة الميتوكوندريا الوسيطة وتوليد أنواع الأكسجين التفاعلي (ROS) ، والتي تعد وسطاء رئيسيين لإشارات موت الخلايا المبرمج ، في خلايا C6 المعالجة بـ TMZ. للتحقق من كتلة الميتوكوندريا ، تم إجراء تحليل فرز الخلايا المنشطة الفلورية باستخدام MitoTracker Green. العلاج باستخدام TMZ وأكتيوسيدأدى إلى كتلة ميتوكوندريا أعلى من العلاج باستخدام TMZ وحده (الشكل 4 ب). كان توليد ROS أعلى بشكل ملحوظ بعد المعالجة باستخدام TMZ و acteoside من العلاج باستخدام TMZ وحده (الشكل 4C). تشير هذه النتائج إلى أن توليد ROS ووظيفة الميتوكوندريا مهمان في موت الخلايا المبرمج الناتج عن العلاج باستخدام TMZ بالإضافة إلى الأكتوزيد. يحفز العلاج باستخدام TMZ و acteoside البلعمة الذاتية في خلايا C6. تم الإبلاغ عن TMZ للحث على الالتهام الذاتي (28،29) ؛ لذلك ، فحصت الدراسة الحالية إلى أي مدى تم إحداث الالتهام الذاتي بواسطة علاج TMZ بالإضافة إلى الأكتوزيد. عولجت خلايا C6 باستخدام TMZ مع أو بدون أكتيوسيد ؛ بعد 24 ساعة ، تم تلوين الخلايا من أجل التألق المناعي للكشف عن LAMP1 و LC3 كعلامات على الالتهام الذاتي. لوحظ ارتفاع مستويات التعبير عن LAMP1 و LC3 بعد العلاج المركب (الشكل 5 أ). تم أيضًا فحص التعبير البروتيني المرتبط بالالتهام الذاتي ، ووجد أن TMZ تسببت في تحويل LC3-I إلى LC3-II ، وهو توقيع لتوليد البلعمة الذاتية. لوحظ ارتفاع معدل تحويل LC3-I إلى LC3-II بعد المعالجة باستخدام TMZ و acteoside مقارنة بالمعالجة باستخدام TMZ وحده. أشارت مستويات التعبير عن Rab7 و p62 إلى تحريض الالتهام الذاتي في الخلايا المعالجة بـ TMZ (الشكل 5 ب). تشير هذه النتائج إلى أن المعالجة باستخدام TMZ و acteoside عززت عملية البلعمة الذاتية فيورم أرومي دبقيالخلايا.

3.3 يحفز Acteoside التعبير الجيني لمسار MAPK في العلاج القائم على TMZ.

أظهرت الدراسات السابقة أن TMZ ينظم مسار MAPK ، بما في ذلك p38 و JNK و ERK (30). لذلك ، التحقيق في هذه الدراسة ما إذا كانأكتيوسيديؤثر على التعبير الجيني MAPK المرتبط بـ TMZ. تم علاج خلايا C6 باستخدام TMZ مع أو بدونأكتيوسيد. بعد 24 ساعة ، أدى علاج TMZ إلى مستويات تعبير أعلى من p p38 و p JNK و p ERK. كان التعبير عن الجينات المنظمة لـ TMZ أعلى بشكل ملحوظ بعد علاج TMZ بالإضافة إلى الأكتوزيد من العلاج باستخدام TMZ وحده (الشكل 6). هذه الملاحظات تشير إلى ذلكأكتيوسيديؤثر على الآليات العلاجية القائمة على TMZ عبر مسار MAPK.

مضاد أكتيوزيد-ورم أرومي دبقي

مناقشة

تثبت نتائج الدراسة الحالية أن العلاج المشترك مع TMZ معأكتيوسيديقدم إمكانات علاجية لـورم أرومي دبقيالعلاج ، وتقديم دليل على أن التحسس الكيميائي لمزيج من TMZ وأكتيوسيديمكن أن يحدث من خلال تحسين الالتهام الذاتي. كطفرةورم أرومي دبقييمكن أن تؤدي الخلايا إلى تعطيل مسار موت الخلايا المبرمج ، وتحريض الالتهام الذاتي بواسطة TMZ plusأكتيوسيدقد يمثل cotreatment طريقة بديلة لورم أرومي دبقيعلاج نفسي. ومع ذلك ، ما إذا كانت الالتهام الذاتي هي الآلية الوحيدةورم أرومي دبقيالعلاج باستخدام TMZ plusأكتيوسيدcotreatment لا يزال يتعين توضيحه.

الالتهام الذاتي هو آلية خلوية أساسية لتدهور البروتينات والعضيات السيتوبلازمية. قد تكون الميزة التقويضية للالتهام الذاتي المستحث مهمة في الظروف المجهدة ؛ لذلك ، قد يكون تحريض الالتهام الذاتي آلية تكيفية لمنع موت الخلايا (31-33). أفادت دراسات سابقة أن الالتهام الذاتي المنخفض يرتبط بالسرطان (34-36). بالإضافة إلى ذلك ، يتم تحرير العديد من البروتينات ومسارات الإشارات المرتبطة بالبلعمة الذاتية أثناء التحول الخبيث ، مما يؤدي إلى انخفاض نشاط البلعمة الذاتية. كما ارتبطت مستويات التعبير العالية لـ LC3 بزيادة معدلات البقاء على قيد الحياة لدى المرضى المصابينورم أرومي دبقيمع درجات أداء ضعيفة (37،38). وبالمثل ، تشير نتائج الدراسة الحالية إلى أن استعادة الالتهام الذاتي الطبيعي قد يكون استراتيجية كامنة لـورم أرومي دبقيالعلاج ، وقد يكون بمثابة آلية لتقييد نمو الخلايا السرطانية غير الطبيعية.

في الالتهام الذاتي الطبيعي ، يتم عزل مكونات معينة من السيتوبلازم داخل البلعمة الذاتية والتي تندمج بعد ذلك مع الليزوزوم ليتم تحللها وإعادة تدويرها (39 ، 40). عندما يتم تنظيم الالتهام الذاتي ، فإن معدلات تكوين البلعمة الذاتية تتجاوز معدلات التحلل الليزوزومي ؛ هذا الشرط يسمى إجهاد البلعمة. إذا استمر الإجهاد أو الالتهام الذاتي غير الطبيعي ، يمكن أن يحدث موت الخلية عن طريق استنفاد الطاقة أو تغييرات في توازن بيكلين ‑ 1 / Bcl ‑ 2. يمكن أيضًا أن يحدث موت الخلايا المبرمج عن طريق فرط نشاط البلعمة الذاتية ، وابتلاع العضيات السيتوبلازمية بما في ذلك الميتوكوندريا أو الشبكة الإندوبلازمية (41). لقد تم اقتراح أن الالتهام الذاتي العام يمكن أن يحفز موت الخلايا أثناء دوران السيتوبلازم والعضيات الطبيعي في الخلايا السليمة. في هذه العملية ، "تفكك" الخلية نفسها من الداخل ، وهي سمة أساسية لموت الخلية المبرمج من النوع الثاني. على الرغم من الآليات التيأكتيوسيديعزز التأثير العلاجي لمركب TMZورم أرومي دبقيلا يزال يتعين توضيح العلاج بالكامل ، وقد ترتبط التأثيرات المضادة للسرطان التي تظهر من خلال العلاج المركب الذي تم فحصه في هذه الدراسة بآليات البلعمة الذاتية هذه.

أكتوسيدهو جليكوسيد فينيل إيثانويد مشتق من النباتات (22،26). أبلغت الدراسات السابقة عن الأنشطة البيولوجية المختلفة للأكتيوسايد. توضح التغييرات في مستويات التعبير عن الكاسباس المشقوق ‑ 3 و LC3 في الدراسة الحالية أن العلاج بمزيج من TMZ وأكتيوسيدالمستحثة الاستماتة والالتهام الذاتي في الخلايا C6 (الشكلان 4 و 5). ثبت أن العلاج المركب له تأثير تآزري علىورم أرومي دبقيالخلايا. على الرغم من أن الآليات المحتملة الأخرى لهذه التأثيرات التآزرية لا تزال بحاجة إلى توضيح ، فقد حددت الدراسة الحالية تحريض الالتهام الذاتي كآلية مهمة لإبادة الأورامأكتيوسيدالتحسس الكيميائي خلال TMZورم أرومي دبقيعلاج نفسي.

يعالج Acteoside الورم الأرومي الدبقي

مراجع

1. Friedman HS و Kerby T و Calvert H: Temozolomide وعلاج الورم الدبقي الخبيث. كلين كانسر ريس 6: 2585-2597 ، 2000.

2. Mrugala MM و Chamberlain MC: آليات المرض: Temozolomide وورم أرومي دبقي-انظر للمستقبل. نات كلين براكت أونكول 5: 476-486 ، 2008.

3. Agarwala SS و Kirkwood JM: قد يحسن Temozolomide ، وهو عامل مؤلكل جديد له نشاط في الجهاز العصبي المركزي ، علاج سرطان الجلد النقيلي المتقدم. طبيب الأورام 5: 144-151 ، 2000.

4. Stevens MF و Hickman JA و Stone R و Gibson NW و Baig GU و Lunt E و Newton cG: Antitumor imidazotetrazines. 1. تخليق وكيمياء 8 carbamoyl ‑ 3‑ (2 ‑ chloroethyl) imidazo [5،1 ‑ d] ‑1،2،3، 5 tetrazine 4 (3 H) one ، مضاد جديد للورم واسع الطيف وكيل. J ميد كيم 27: 196-201 ، 1984.

5. Fulda S: العلاج القائم على موت الخلاياورم أرومي دبقي. موت الخلية ديس 9: 121 ، 2018.

6. Chen PH و Shen WL و Shih CM و Ho KH و Cheng CH و Lin CW و Lee CC و Liu AJ و Chen KC: إن مسار Notch3 المانع لـ CHAC1 متورط في السمية الخلوية التي يسببها تيموزولوميد. علم الأدوية العصبية 116: 300‑314 ، 2017.

7. Oshiro S و Tsugu H و Komatsu F و Ohmura T و Ohta M و Sakamoto S و Fukushima T و Inoue T: فعالية علاج تيموزولوميد في المرضى الذين يعانون من الورم الدبقي عالي الدرجة. أنتيكانسر ريس 29: 911-917 ، 2009.

8. Van den Bent MJ: علاج مساعد للأورام الدبقية عالية الجودة. آن أونكول 17 (ملحق 10): x186 × 190 ، 2006.

9. Shen W و Hu JA و Zheng JS: آلية التأثيرات المضادة للورم التي يسببها تيموزولوميد على خلايا الورم الدبقي. J Int Med Res 42: 164-172 ، 2014.

10.Barciszewska AM و Gurda D و Głodowicz P و Nowak S و Naskręt ‑ Barciszewska MZ: آلية جينية جديدة لعمل تيموزولوميد في خلايا الورم الدبقي. PLoS One 10: e0136669 ، 2015.