إمكانات نيوهيسبيريدين المضادة للشيخوخة وتأثيراته التآزرية الجزء 2

الرجاء التواصلoscar.xiao@wecistanche.comللمزيد من المعلومات

2.4 كان النشاط المضاد للأكسدة في المختبر للنيوهيسبيريدين ضعيفًا نسبيًا

تتوفر العديد من الطرق لقياس قدرة مضادات الأكسدة في المختبر ويقوم معظم الباحثين بتطبيق واحد أو أكثر من الاختبارات لأن كل طريقة تقيس خصائص مضادات الأكسدة المختلفة للمركب [32]. في هذه الدراسة ، استخدمنا ثلاث طرق لتحديد قدرة مضادات الأكسدة بما في ذلك فحوصات DPPH و ABTS و FRAP. تم تحديد مؤشر مركب الفاعلية المضادة للأكسدة (APCI) لوصف وتقييم القدرة الكلية لمضادات الأكسدة في المختبر للمركبات المختبرة ومجموعاتها. تم سرد معادلات الانحدار الخطي للمقايسات الثلاثة في الجدول 1. وتم عرض جميع البيانات ذات الصلة في الجدول 2. وفي الوقت نفسه ، تم رسم مؤشر APCI في الشكل 4B. من هذه النتائج ، يمكننا أن نرى أن نيوهيسبيريدين كان ضعيفًا نسبيًا في قدرة مضادات الأكسدة في المختبر. هذا يعني أن وظيفة تمديد CLS للنيوهيسبيريدين لا تعتمد على نشاطها المضاد للأكسدة في المختبر. ومع ذلك ، مع النشاط المضاد للأكسدة المرتفع نسبيًا في المختبر ، قام CD BCD بتمديد CLS من الخميرة BY4742. بشكل عام ، لا يمكننا توقع قدرة تمديد CLS للمركب بناءً على نشاطه المضاد للأكسدة.

A: naringin, B: hesperidin, C: hesperetin, D: neohesperidin, the concentration of A, B, Cand Dis luM. APCI=>(قيمة كل عينة / أكبر قيمة عينة في تلك الطريقة) / عدد الطرق. تم التعبير عن البيانات على أنها متوسط ​​± SEM (n {0}) ومقارنتها باستخدام اختبار المقارنات المتعددة Sidak من ANOVA أحادي الاتجاه عند p <0.05 بواسطة="" graphpad="" prism="" 7.="" 00.="" تشير="" الأحرف="" المختلفة="" (a="" ،="" b="" ،="" c="" ،="" d="" ،="" e="" ،="" f="" ،="" g="" ،="" h="" ،="" i="" ،="" j="" ،="" k)="" بعد="" البيانات="" إلى="" قيم="" في="" نفس="" العمود="" مع="" وجود="" اختلافات="">

الرجاء الضغط هنا لمعرفة المزيد

2.5.Neohesperidin لا يمكن أن يبطئ تباين تحمض خارج الخلية من الخميرة BY4742

تشمل المعلمات المهمة تكوين وسط النمو بالإضافة إلى قيمة الأس الهيدروجيني. ثبت أن تكوين وسط النمو وقيمة الأس الهيدروجيني لهما تأثير كبير على CLS من S.cerevisiae [33]. تمت دراسة تأثيرات الأس الهيدروجيني على CLS لخميرة التبرعم من خلال الدراسات السابقة ، وتشير النتائج إلى آلية سمية حمض الأسيتيك المتعلقة بتحريض مسارات إشارات النمو والإجهاد التأكسدي في الخميرة [34]. من أجل معرفة تأثير مركبات الفلافونويد الأربعة على تباين التحمض خارج الخلية لمزارع الخميرة ، اكتشفنا قيم الأس الهيدروجيني كل خمس دقائق باستخدام مقياس الأس الهيدروجيني.مستخلص سيستانش المضاد للإشعاعفي الشكل 5،10uM ، من الواضح أن النارينجين أبطأ تباين التحمض خارج الخلية لخميرة التبرعم BY4742 في حالات الشيخوخة المختلفة بينما لم تؤثر مركبات الفلافونويد الثلاثة الأخرى بشكل كبير في نفس التركيز عند مقارنتها بمجموعات التحكم.

الشكل 5. تباين وسط الاستزراع بعد الخميرة الناشئة BY4742 المعالجة بواسطة مركبات الفلافونويد الأربعة عند 10 ميكرومتر. تم إجراء التجربة على الأقل في ثلاث نسخ. ∶ نارينجين ، ب: هيسبيريدين ، ج: هسبريتين ، د: نيوهيسبيريدين.

3. مناقشة

أفادت الدراسات السابقة أن نيوهيسبيريدين أظهر العديد من الوظائف المضادة للشيخوخة المرتبطة ، مثل التأثير الوقائي للأعصاب [15] ، وكسح ROS والأنشطة المضادة للالتهابات [35] ، والتخفيف من انخفاض إمكانات غشاء الميتوكوندريا ، وزيادة الكاسبيز { {5}} النشاط الذي يثيره H2O2 [16] ، والنشاط الخلوي المحفز للاستماتة [21]. وضعت كل هذه الوظائف أساسًا جيدًا للنتيجة التي أدت إلى زيادة نيوهيسبيريدين CLS من الخميرة الناشئة BY4742 هنا. من المدهش أن neohesperidin مدد CLS بشكل كبير فقط عند أدنى تركيز تم اختباره. تقرير كراكر وآخرون. أظهر أيضًا تركيزًا أقل من أوكسين (10-6 IAA) يعزز بثق البروتون. يتم تثبيط قذف البروتون تحت تركيز عالٍ من الأكسين (10-4 IAA) بواسطة الإيثيلين المستحث بالأوكسين [36].cistanche هيرباتم التحقق من نشاط الكسح ROS للنيوهيسبيريدين في بحثنا. كانت قدرة مضادات الأكسدة في المختبر للنيوهيسبيريدين ضعيفة نسبيًا ، وهو ما يفسر سبب عدم اعتماد وظيفة CLSextension لـ neohesperidin على نشاطه المضاد للأكسدة في المختبر. ومع ذلك ، فإن التوليفات CD و BCD كان لها نشاط مضاد للأكسدة في المختبر وزيادة CLS من الخميرة (الشكل 3B). قد يكون الارتباط الضعيف بين أنواع الأكسجين التفاعلية ونشاط مضادات الأكسدة ناتجًا عن الطريقة التي استخدمناها لتحليل نشاط مضادات الأكسدة. حاولت طريقة النشاط المضاد للأكسدة التفاعل مع رابطة مزدوجة عند C 2- C3 و / أو مجموعة هيدروكسيل عند C3 على الحلقة C من الفلايونويد. في Areias et al. أشارت النتائج بقوة إلى أن النشاط العالي لمضادات الأكسدة للفلافونويدات لا يرتبط بوجود رابطة مزدوجة عند C 2- C3 و / أو مجموعة الهيدروكسيل عند C 3 على الحلقة C ، ولكن بدلاً من ذلك قد يعتمد على القدرة على تثبيط إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية للتفاعل مع الأغشية بطريقة كارهة للماء [37]. في الوقت نفسه ، أظهر عدد كبير من الدراسات أن بعض مضادات الأكسدة لها وظيفة إطالة العمر ، لكن آليات عملها المحددة معقدة. تم إثبات أن بعض مضادات الأكسدة فقط تظهر آثارًا مضادة للشيخوخة تتعلق بالتطهير المباشر للجذور الحرة و ROS. لكن تأثيرات إطالة العمر لمضادات الأكسدة الأخرى على الكائنات الحية النموذجية لم تقتصر على وظيفة مضادات الأكسدة المباشرة ، بل تشمل أيضًا تنظيم التعبير الجيني المرتبط بالإجهاد وتحريض التأثيرات المنشطة السامة [38]. لذلك ، من المستحيل التنبؤ بقدرة مادة ما على تمديد CLS للخميرة بناءً على نشاطها المضاد للأكسدة. على الرغم من أننا لم نختبر النتيجة في سلالات أخرى ، إلا أنها قدمت معلومات للباحثين والعلماء الآخرين للتحقق من صحة النتيجة في سلالات أخرى وكائنات نموذجية.

يمكن لمكافحة الشيخوخة

تؤثر العديد من العمليات الخلوية والعوامل الخارجية سلبًا على العمر الزمني للخميرة ، بما في ذلك التحمض المتوسط ​​والإجهاد التأكسدي [39]. أحد التغييرات المبكرة التي تحدث في خلايا الخميرة المزروعة في وسط يحتوي على 2 في المائة من الجلوكوز (الدكستروز) هو إنتاج حمض الأسيتيك وتحمض الوسط ، والذي ثبت أنه يؤثر على الشيخوخة الزمنية [38]. يمنع التخزين المؤقت للوسيط إلى درجة الحموضة 6-7 التحمض ويزيد من العمر الزمني [10 ، 39-41]. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن استخدام حمض الخليك بواسطة Saccharomyces cerevisiae للنمو والتمثيل الغذائي على الرغم من السمية المحتملة [42]. حافظ 10 uM neohesperidin و hesperidin و hesperetin على اتجاه التباين لقيم الأس الهيدروجيني خارج الخلية عند مقارنتها بالتحكم (الشكل 5). ومع ذلك ، من الواضح أن 10 أوم نارينجين أبطأ تباين التحمض خارج الخلية (الشكل 5). عند هذا التركيز ، تمت معالجة CLS من الخميرة BY4742 باستخدام نيوهيسبيريدين وهيسبيريدين وهسبريتين تقريبًا نفس المجموعة الضابطة.

كان لزيادة نفايات ROS تأثيرات ملحوظة على CLS في الخميرة ، لكن السبب يظل مشكلة لم يتم حلها [33]. الشيخوخة والأمراض ذات الصلة هي نتيجة الضرر الناتج عن الجذور الحرة للجزيئات الخلوية الكبيرة وعدم قدرتها على موازنة آليات الدفاع المضادة للأكسدة الذاتية [43]. ومع ذلك ، فقد أشارت البيانات إلى أن أنواع الأكسجين التفاعلية يمكنها أيضًا أن تلعب دورًا إيجابيًا في تحفيز جينات الاستجابة للتوتر (التوليف) [43-46].

علاوة على ذلك ، تشير النتائج الحديثة إلى أن نوع أنواع الأكسجين التفاعلية ووقت حدوثها مهمان أيضًا لإطالة العمر في S.cerevisiae [47-49] ، مما يوضح الدور المعقد لـ ROS في شيخوخة الخميرة. Graziano et al. [47] ذكرت أن نيوهيسبيريدين يقلل من توليد ROS في الخلايا الكيراتينية البشرية.cistanche نمو القضيبنوهارا وآخرون. كشفت مؤخرًا أن نوبيليتين (أحد مركبات الفلافونويد الموجودة في الحمضيات) يقوي تنفس الميتوكوندريا في العضلات الهيكلية لتعزيز الشيخوخة الصحية ضد تحديات التمثيل الغذائي. تم قمع إنتاج ROS بشكل كبير عن طريق علاج نوبلتين بطريقة تعتمد على الجرعة [50]. أظهر الشكلان 3 ب و 4 أ أن D و CD زادوا من CLS للخميرة BY4742 وانخفضوا محتوى ROS داخل الخلايا. ولكن ، بالنسبة لـ ABD و BCD ، قاموا بإطالة CLS مع زيادة ROS داخل الخلايا. كانت هذه النتيجة متوافقة مع 51 وو]. لذلك ، لم تكن هناك علاقة إيجابية أو سلبية مؤكدة بين أنشطة الكسب ROS للمركبات وتأثيراتها على العمر الافتراضي ، وكان هذا أيضًا يتماشى مع الدور المعقد لـ ROS في شيخوخة الخميرة.

في الشكل 3 أ ، لم تتناقص تدريجياً معدلات بقاء الخميرة BY4742 تحت معالجة المركبات المختلفة وتوليفاتها من اليوم 2 إلى اليوم 20. يقدمون قمم مزدوجة. يمكن العثور على هذا أيضًا في نتيجة Wu et al. (2014). في الأيام القليلة الأولى ، كانت معدلات البقاء على قيد الحياة مرتفعة نسبيًا. يمكن تفسير ذلك من خلال ما يكفي من العناصر الغذائية وانخفاض ضغط البقاء على قيد الحياة خلال هذا الوقت. مع مرور الوقت ، ظهرت نقاط الوادي لفترة قصيرة جدًا حيث أصبحت التغذية أقل. ثم ظهرت القمم مرة أخرى. قد تنسب هذه الظاهرة النجاح إلى استقلاب مادة مغذية أخرى خففت من ضغط البقاء.

الهدوء آل. [36] ذكرت أن النشاط المضاد للأكسدة لخليط مضادات الأكسدة / تركيبة المركب كان أكثر فعالية من مركب واحد. في تجربتنا ، كان للتركيبات AB و AC و CD و ABC و BCD قدرة مضادات أكسدة أقوى من أي مادة واحدة مماثلة لها.فوائد الصلصا cistancheبناءً على ملاحظاتنا ، يمكن أن نستنتج أن مركبات الفلافونويد الموجودة في خليط يمكن أن تتفاعل ، ويمكن أن تؤثر تفاعلاتها على السعة الإجمالية لمضادات الأكسدة للحل (الشكل 4 ب). على الرغم من أننا أظهرنا أن تفاعلات الفلافونويد الأربعة تؤدي إلى تأثيرات تآزرية أو معادية للقوة المضادة للأكسدة ، إلا أن هناك مجموعات أخرى من الفلافونويد تتطلب دراسة أكثر تفصيلاً من أجل فهم أفضل للآليات المشاركة في هذه التفاعلات. لوتشمان وآخرون. [52] ذكرت المستخلصات النباتية التي أدت إلى زيادة CLS في الخميرة. وتعتبر عملية الالتهام الذاتي التي يتم تعزيزها من خلال انخفاض إشارات TORC1 ذات أهمية حاسمة بالنسبة إلى CLS طويل [10]. بالرجوع إلى هذه الدراسات ، يمكننا استكشاف الطريقة التي تنفذ بها المركبات تأثيرها في الدراسات المستقبلية.

4. المواد والطرق

4.1 المواد

تم الحصول على سلالة من النوع البري S. cerevisiae BY4742 (ATCC⑧، 2 0 1389TM) (Mata his3A1 leu2 △ 0 lys2A 0 ura3A0) من American Type Culture Collection (Manassas، VA، الولايات المتحدة الأمريكية). تم تقسيم ثقافة سلالة الخميرة المرجعية إلى 10 ميكروليتر وتخزينها عند درجة -80. جميع الأحماض الأمينية L ، وقاعدة نيتروجين الخميرة بدون أحماض أمينية (YNB) ، وكبريتات الأمونيوم ، والببتون ، وخلاصة الآجار والخميرة ، و H2DCFDA ، 2،4 ، 6- tripyridyl-s-triazine (TPTZ) ، 2 ، 2'-and-bis (3- ethylbenzothiazoline -6- sulfonic acid) (ABTS) ، 1 ، 1- diphenyl -2- picrylhydrazyl (DPPH) ، dimethyl sulfoxide (DMSO) ، neohesperidin و naringin و hesperidin و hesperetin تم شراؤها من Sigma-Aldrich (شنغهاي ، الصين). YPDBroth و YPD والمواد الكيميائية الأخرى كانت من شركة Solebo Biotech Co.، Ltd. (بكين ، الصين). تم شراء 96- ألواح ميكروبلسترين ذات قاع مسطح من شركة Corning (Kennebunk ، ME ، الولايات المتحدة الأمريكية).

4.2.عمر وخلايا الخميرة مقايسة جروزوث

تم تحديد العمر الزمني للخميرة (CLS) وفقًا لطريقة Wu et al. [25] مع تعديل معتدل على النحو التالي. باختصار ، تم تحضير خلايا الخميرة عن طريق نقل سلالة مخططة من المخزونات المجمدة إلى أطباق أجار YPD (0. 5٪ خلاصة الخميرة / 1٪ ببتون / 2٪ دكستروز / 1.4٪ أجار). بعد احتضان الخلايا عند درجة 3 0 لمدة يومين ، تم انتقاء مستعمرة واحدة وتلقيحها في وسط سائل YPD بسعة 1. {1 0} مل (1٪ مستخلص الخميرة / 2٪ ببتون / 2٪ دكستروز) في أنبوب طرد مركزي معقم 10- مل (قاع دائري) وزرع عند درجة 3 0 لمدة يومين في حاضنة مسطحة في الساعة 200 مساءً. تم تخفيف ثقافة YPD 2- يومًا باستخدام تعقيم 18 Qm Milli-Q من درجة المياه (1:10) وتخزينها في الثلاجة عند 4 درجات لمدة يومين. بعد 2- يوم حضانة عند 4 درجات ، تم نقل 5 ميكرولتر ≈1 × 10 * خلايا） من الثقافة المخففة إلى 993 ميكرولتر من الوسائط التركيبية المحددة (SD) (الجدول التكميلي S1 ، [51]) وصيانتها عند 30 درجة و 200 دورة في الدقيقة للتجربة بأكملها. تمت إضافة المركبات في DMSO بتركيزات عديدة （2.0 ميكرولتر） عند التلقيح الأولي 0 ساعة）. تم إجراء كل تجربة على الأقل في ثلاث نسخ. تم تحضين مزارع الخلايا عند 30 درجة دون استبدال وسط الشيخوخة طوال التجربة. بعد يومين من الاستنبات في وسط الشيخوخة ، وصلت الخلايا إلى مرحلة الثبات وأخذت نقطة العمر الأولى. تم أخذ النقاط العمرية اللاحقة كل 2-4 يوم. لكل نقطة عمرية ، تم ضخ 5.0 ميكرولتر من المزرعة المختلطة في كل بئر من صفيحة ميكروية ذات قاع مسطح جيد 96-. ثم تمت إضافة خمسة وتسعين ميكرولتر وسط YPD إلى كل بئر. تمت مراقبة عدد الخلايا باستخدام قارئ صفيحة ميكروسكوبية (Varioskan Flash ؛ Thermo Scientific ، Waltham MA ، الولايات المتحدة الأمريكية) عن طريق تسجيل OD660 كل 10 دقائق لمدة 24 ساعة.

تم حساب معدل البقاء على قيد الحياة على النحو التالي [25]. حيث tOD =0. 3،2day هو الوقت الذي تصل فيه قيمة OD لليوم الثاني إلى النقطة العمرية 0 .3 في منحنيات النمو. يتم تعريف النقطة العمرية الأولية (اليوم الثاني) على أنها قابلية بقاء بنسبة 100 في المائة ويمكن حساب نسبة البقاء النسبية لكل نقطة عمرية متتالية على النحو التالي:

يتم تعريف تكامل البقاء (Sl) لكل بئر على أنه المنطقة الواقعة تحت منحنى البقاء (AUC) ويمكن تقديره بالصيغة:

حيث اليوم هو النقطة العمرية ، مثل الأيام 2،4،6،8،10،12،14،16،18 و 20.

4.3 فحوصات قدرة الكسح ROS داخل الخلايا

لتحديد مستوى أنواع الأكسجين التفاعلي داخل الخلايا (ROS) لخلايا الخميرة المزروعة في وسط SD قياسي مع / بدون المركبات الأربعة ، الطريقة الموضحة في Wu et al. [51] تمت الإشارة إليه. على وجه التحديد ، تمت إضافة 2 ميكرولتر من مسبار ROS H2DCFDA من 5- محلول مخزون جديد في DMSO إلى 1. 0 مل ثقافة شيخوخة الخميرة (في اليوم 2) عند 3 {{1 0 }} درجة لمدة ساعة واحدة. تم بعد ذلك غسل الثقافة مرتين في ماء مقطر معقم وتعليقها في 1.0 مل من محلول منظم Tris / Cl 50 ملي مولار (درجة الحموضة 7.5). تمت إضافة عشرين ميكرولتر من الكلوروفورم و 10 ميكرولتر من 0.1 بالمائة وزن / س كبريتات دوديسيل الصوديوم （SDS） ، وحضنت الخلايا عند 200 دورة في الدقيقة لمدة 30 دقيقة للسماح للصبغة بالانتشار. تم الطرد المركزي للثقافة عند 5000 دورة في الدقيقة لمدة 5 دقائق ، وتم قياس تألق المادة الطافية باستخدام قارئ صفيحة ميكروسكوبية مع إثارة عند 480 نانومتر وانبعاث عند 520 نانومتر.

4.4 فحوصات نشاط مضادات الأكسدة

في هذه الدراسة ، تم استخدام اختبارات DPPH و FRAP و ABTS لتقييم قدرة مضادات الأكسدة في المختبر. تم إجراء اختبار DPPH وفقًا للطريقة التي وصفها Barreca وآخرون [53]. تم خلط جزء من كل عينة (0. 5 مل) مع 75 ميكرومتر (3.5 مل) من ميثانول DPPHin إلى حجم نهائي قدره 4. 0 مل بعد التفاعل لمدة 3 0 دقائق بدون ضوء ، تم الكشف عن امتصاص الخليط عند طول موجة 517 نانومتر. كانت نسبة تثبيط نشاط الكسح الجذري هي قيمة DPPH. تم إجراء اختبار FRAP وفقًا لـ Hunger et al. [54] مع بعض التعديلات. تم خلط 0 قسامة 2 مل من العينة مع 3.8 مل من كاشف FRAP (0. 3 مول / لتر أسيتات عازلة (pH3.6) ، 1 0 مليمول / لتر TPTZ تم خلط المحلول و 2 0 مليمول / لتر من كلوريد الحديديك (FeCl3) (10: 1: 1 ، نسبة الحجم)). بعد 30 دقيقة ، تم الكشف عن الامتصاص بطول موجة 593 نانومتر. واتبع اختبار ABTS طريقة Mnb et al. [55] مع بعض التعديلات. تم إنشاء جذر ABTS (ABTS · plus) عن طريق تفاعل 176 ميكرولتر من محلول بيرسلفات البوتاسيوم （140 ملي مولار و 10 مل من محلول ABTS المائي 7 ملي مولار تحت حالة عدم وجود ضوء لمدة 12-16 ساعة. ثم تم تخفيفه بالميثانول إلى قيمة امتصاص 0.7 ± 0.02 وحدة عند 734 نانومتر. تمت إضافة عينة 0.1 مل إلى 4.9 مل من كاشف ABTS.cistanche tubulosa جرعة redditتم قياس الامتصاصية بطول موجة 734 نانومتر بعد 10 دقائق من التفاعل. تم تحديد جميع قيم الامتصاصية باستخدام مقياس الطيف الضوئي UV-VIS (PerkinElmer Lambda 25 UV / VIS ، Waltham ، MA ، الولايات المتحدة الأمريكية) تم حساب قيم مضادات الأكسدة بواسطة طريقة المنحنى القياسية وتم التعبير عنها كمكافئات Trolox (TE mg / g DW).

4.5 كشف الأس الهيدروجيني خارج الخلية

كانت عملية استزراع الخميرة في المرحلة المبكرة هي تقريبًا نفس الطريقة الموضحة في جزء "مقايسة نمو خلايا الخميرة والعمر". كانت العملية المحددة على النحو التالي. تم تحضير خلايا الخميرة عن طريق نقل سلالة الخميرة من المخزونات المجمدة إلى أطباق أجار YPD. بعد احتضان الخلايا عند درجة 3 0 لمدة يومين ، تم انتقاء مستعمرة واحدة وتلقيحها في وسط سائل YPD بسعة 1. 0- مل في أنبوب طرد مركزي معقم 10- مل وتم تربيتها في 3 درجة 0 لمدة يومين في حاضنة مسطحة الساعة 200 مساءً. تم تخفيف ثقافة YPD التي تبلغ 2- يومًا باستخدام تعقيمها 18 متر مكعب من المياه-Qgrade （1∶10） وتخزينها في الثلاجة عند 4 درجات لمدة يومين. بعد 2- حضانة يوم عند 4 درجات ، تم نقل 10 ميكرولتر ~ 2 × 104 خلية） من الثقافة المخففة إلى 1986 ميكرولتر من وسائط SD والحفاظ عليها عند 30 درجة و 200 دورة في الدقيقة لمدة 2/10/20 يومًا. تمت إضافة مركبات مختلفة في DMSO （4.0 ميكرولتر） إلى الوسط إلى تركيز نهائي قدره 10 ميكرومتر عند التلقيح الأولي （0 ساعة）. ثم تمت إضافة 1 مل من 2/10 / {33}} يوم من ثقافة SD إلى 19 مل من وسط سائل YPD الطازج. تم اختبار الأس الهيدروجيني كل خمس دقائق باستخدام مقياس الأس الهيدروجيني بينما تمت زراعة الخميرة عند 30 درجة مئوية في شاكر عند 200 دورة في الدقيقة للكشف الكامل. تم إجراء كل تجربة على الأقل في ثلاث نسخ.

4.6 تحليل البيانات

تم تصدير البيانات الأولية من قارئ الصفيحة الدقيقة إلى Microsoft Excel 2007 (ريدموند ، واشنطن ، الولايات المتحدة الأمريكية). من منحنيات النمو ، يمكن الحصول على صلاحية الخميرة وفقًا لتقرير سابق [25]. تم تعريف تكامل البقاء على قيد الحياة [56] لكل ثقافة شيخوخة على أنها المنطقة الواقعة تحت منحنيات البقاء على قيد الحياة [25،57]. تم تحليل البيانات عن طريق تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA أحادي الاتجاه) وتم التعبير عنها على أنها القيم المتوسطة ± الخطأ المعياري للمتوسط ​​(SEM). دلالة الاختلاف (* ص<><0.01;***><0.001;*><0.0001) was="" determined="" using="" sidak's="" multiple="" comparisons="" test.="" graphpad="" prism="" 7(graphpad="" software,="" inc.,="" la="" jolla,="" ca,="" usa)was="" used="" for="" the="">

5. الاستنتاجات

في الختام ، أظهر neohesperidin ، مع قدرة عالية نسبيًا على إزالة ROS داخل الخلايا ، إمكانات كبيرة في تمديد CLS من الخميرة الناشئة BY4742 بشكل فردي أو تآزر مع الهسبريتين. قد يؤدي هذا إلى خيارات جديدة لعلاج مشاكل الشيخوخة نظرًا لوجود علاقة محدودة بين امتداد CLS للخميرة والفهارس المختبرة (على سبيل المثال ، قدرة الكسح ROS ، نشاط مضادات الأكسدة في المختبر ، ودرجة الحموضة خارج الخلية). مزيد من الدراسات لاكتشاف الآليات الجزيئية لهذه الظاهرة ستكون مفيدة للغاية لمنع الشيخوخة. لهذا السبب ، يجب مراعاة أهمية اختيار أفضل مزيج من مركبات الفلافونويد عند تصميم مكملات غذائية جديدة أو أطعمة وظيفية.

تم استخراج هذه المقالة من Molecules 2019 ، 24 ، 4093 ؛ دوى: 10.3390 / جزيئات 24224093 www.mdpi.com/journal/molecules