يتحكم قارئ RNA M6 A YTHDF2 في الخلايا القاتلة الطبيعية المضادة للأورام والمناعة المضادة للفيروسات الجزء 2

مطلوب YTHDF2 للوظيفة المضادة للفيروسات للخلايا NK

لتحديد ما إذا كان نقص Ythdf2 يؤثر على النشاط المضاد للفيروسات للخلايا NK، قمنا بحقن 2.5 × 104 PFU من MCMV في الفئران Ythdf2WT وفئران Ythdf2ΔNK.

النشاط المضاد للفيروسات والمناعة لا ينفصلان ولهما علاقة وثيقة. الفيروسات كائنات دقيقة صغيرة جدًا، ولكنها يمكن أن تسبب العديد من الأمراض وحتى الموت في الحالات الشديدة.

يشير النشاط المضاد للفيروسات إلى قدرة الجسم على محاربة الفيروسات. يمكن للأشخاص الذين لديهم مستويات عالية من النشاط المضاد للفيروسات التخلص من الفيروسات بسرعة أكبر ومقاومة ظهور المرض بشكل أكثر فعالية. تشير المناعة إلى المواد الدفاعية التي ينتجها الجسم بعد فترة التكيف، والتي يمكنها إزالة المواد الضارة من الجسم.

يعد الحصول على قسط كافٍ من النوم وتناول نظام غذائي صحي وممارسة الرياضة أمرًا في غاية الأهمية للحفاظ على صحة جيدة. هذه العوامل يمكن أن تحسن مناعة الإنسان وبالتالي تعزز نشاط الجسم المضاد للفيروسات. خاصة خلال هذا الوقت الذي ينتشر فيه جائحة فيروس كورونا-19، من المهم أن تحافظ على صحتك.

بالإضافة إلى ذلك، فإن المزاج المستقر له أيضًا تأثير كبير على المناعة. إن الموقف المتفائل يمكن أن يجعل الناس يشعرون بالراحة الجسدية والعقلية، وبالتالي تحسين المناعة والنشاط المضاد للفيروسات. على العكس من ذلك، فإن المشاعر المتشائمة ستقلل من مناعة الجسم وتجعل الجسم أكثر عرضة لهجمات الفيروسات.

باختصار، النشاط المضاد للفيروسات والمناعة مترابطان، ويجب الاهتمام بتحسين مناعة الجسم والنشاط المضاد للفيروسات بشتى الطرق لضمان الصحة البدنية ونمط الحياة الصحي. يمكن أن نرى أننا بحاجة إلى تحسين الذاكرة، ويمكن أن تحسن Cistanche deserticola الذاكرة بشكل كبير، لأن Cistanche deserticola لها تأثيرات مضادة للأكسدة ومضادة للالتهابات ومضادة للشيخوخة، والتي يمكن أن تساعد في تقليل الأكسدة والتفاعلات الالتهابية في الدماغ، وبالتالي حماية البشرة. صحة الجهاز العصبي. بالإضافة إلى ذلك، يمكن لـ Cistanche deserticola أيضًا تعزيز نمو وإصلاح الخلايا العصبية، وبالتالي تعزيز اتصال الشبكات العصبية ووظيفتها. يمكن أن تساعد هذه التأثيرات في تحسين الذاكرة والتعلم وسرعة التفكير، وقد تمنع أيضًا تطور الخلل المعرفي والأمراض التنكسية العصبية.

انقر فوق معرفة المكملات الغذائية لتعزيز الذاكرة

أظهرت النتائج أن الفئران Ythdf2ΔNK كانت أكثر عرضة للإصابة بعدوى MCMV، كما يتضح من فقدان الوزن بشكل كبير وزيادة التتر الفيروسي في الدم والطحال والكبد مقارنة مع الفئران Ythdf2WT (الشكل 3، A وB؛ والشكل S2، A وB). .

لاحظنا أيضًا انخفاضًا كبيرًا في النسبة المئوية والعدد المطلق لإجمالي خلايا NK في الطحال والدم لدى الفئران Ythdf2ΔNK مقارنةً بتلك الموجودة في الفئران Ythdf2WT بعد الإصابة (الشكل 3 وC وD؛ والشكل S2 وC وD). أظهر التحليل الإضافي أن خلايا NK من الفئران Ythdf2ΔNK كان لها تعبير أقل بكثير عن Ki67 مقارنة بفئران Ythdf2WT (الشكل 3، E – G).

ومع ذلك ، كانت قابلية بقاء الخلايا NK متشابهة بين الفئران Ythdf2WT والفئران Ythdf2ΔNK ، كما هو موضح تلطيخ byannexin V (الشكل S2 E). تشير هذه البيانات إلى أن نقص YTHDF2 في الخلايا القاتلة الطبيعية يؤدي إلى خلل في تكاثر الخلايا بدلاً من بقاء الخلية أثناء العدوى الفيروسية.

تمنع خلايا NK عدوى MCMV من خلال المستقبلات المنشطة Ly49H وLy49D، وتتميز العملية بالاستجابة المضادة للفيروسات بوساطة perforin أو IFN (Arase et al.، 2002؛ Lee et al.، 2009؛ Loh et al.، 2005؛ Orr et al. آل، 2010؛ سوماريا وآخرون، 2009). لقد وجدنا أن الفئران Ythdf2ΔNK قد خفضت بشكل كبير خلايا Ly49H + و Ly49D + NK في الطحال والدم مقارنةً بفئران Ythdf2WT بعد الإصابة (الشكل 3، H – J؛ والشكل S2، F – K).

أظهر التحليل الإضافي أنه على الرغم من النسبة المئوية، أظهرت خلايا Ly49D + Ly49H + فقط اختلافًا في الفئران Ythdf2ΔNK مقارنة بفئران Ythdf2WT، وأعداد الخلايا المطلقة لخلايا Ly49D − Ly49H + NK، وخلايا Ly49D + Ly49H− NK، وخلايا Ly49D + Ly49H + NK في انخفض الطحال والدم بشكل ملحوظ في الفئران Ythdf2ΔNK مقارنة مع الفئران Ythdf2WT بعد الإصابة (الشكل S2، L – W).

تشير بياناتنا إلى أن التحكم في عدوى MCMV بواسطة YTHDF2 يبدو أنه يتم بوساطة خلايا Ly49D + Ly49H + NK بشكل أساسي. كان إنتاج الجرانزيم B و IFN- بواسطة خلايا NK في الفئران Ythdf2ΔNK مشابهًا لإنتاج الفئران Ythdf2WT (الشكل S2 و X و Y).

لقد وجدنا انخفاضًا ملحوظًا في إنتاج البيفورين بواسطة الفئران Ythdf2ΔNK مقارنةً بفئران Ythdf2WT في كل من الطحال والدم 7 أيام بعد الإصابة (الشكل 3، K –M)، مما يشير إلى أن YTHDF2 يؤثر بشكل رئيسي على النشاط المضاد للفيروسات بوساطة البرفورين ضد MCMV في خلايا NK. هذه البيانات تشير إلى أن YTHDF2 أمر بالغ الأهمية لتوسيع خلايا NK ووظيفة المستجيب أثناء الإصابة بـ MCMV.

يتحكم YTHDF2 في توازن الخلايا NK والنضج النهائي في حالة مستقرة

النتائج المذكورة أعلاه والتي تفيد بأن نقص Ythdf2 في خلايا NK قد عزز النقائل السرطانية وضعف قدرة خلايا NK على السيطرة على عدوى MCMV شجعتنا على التحقيق فيما إذا كان YTHDF2 مطلوبًا لصيانة خلايا NK في حالة مستقرة.

كما هو مبين في الشكل 4 أ، تم تقليل التردد والعدد المطلق للخلايا NK بشكل كبير في الدم المحيطي والطحال والكبد والرئة ولكن ليس في النخاع العظمي (BM) لفئران Ythdf2ΔNK مقارنةً بفئران Ythdf2WT.

ومع ذلك، لم تكن هناك تغييرات كبيرة بين السلف اللمفاوي المشترك، والسلف خلية ما قبل NK، والسلف خلية NK المكرر (NKP) في BM (Fathman وآخرون، 2011) بين الفئران Ythdf2WT وYthdf2ΔNK (الشكل S3 A)، مما يشير إلى أن قد لا يؤثر YTHDF2 على التطور المبكر لخلايا NK في نموذجنا. لاستكشاف الآليات المحتملة المسؤولة عن انخفاض خلايا NK في الفئران Ythdf2ΔNK، قمنا بالتحقق من تكاثر الخلايا وقدرتها على البقاء والقدرة على الاتجار بالخلايا NK بعد حذف Ythdf2 في حالة مستقرة.

كانت النسبة المئوية لخلايا NK المتكاثرة قابلة للمقارنة بين الفئران Ythdf2WT و Ythdf2ΔNK، كما يتضح من تلطيخ Ki67 (الشكل S3 B). كانت صلاحية خلايا NK متكافئة أيضًا بين الفئران Ythdf2WT و Ythdf2ΔNK، كما هو موضح في تلطيخ Annexin V (الشكل S3 C).

للتحقق مما إذا كان YTHDF2 يؤثر على خروج خلايا NK من BM إلى المحيط، تم حقن الفئران Ythdf2WT وYthdf2ΔNK الرابع بجسم مضاد لـ CD45 لتحديد الخلايا المناعية والتضحية بها بعد دقيقتين، وتم تحليل خلايا BM الخاصة بهم. سمح لنا هذا بتحديد عدد الخلايا NK في المناطق الجيبية مقابل المناطق المتني في BM، وهو مؤشر على تهريب الخلايا NK من BM إلى الدم المحيطي في ظل حالة مستقرة (Leong et al.، 2015).

أظهرت النتائج انخفاضًا كبيرًا في تواتر خلايا CD45+ NK في الفئران Ythdf2ΔNK مقارنةً بفئران Ythdf2WT في الجيوب الأنفية (الشكل 4 ب)، مما يشير إلى أن نقص Ythdf2 يضعف خروج خلايا NK من BM إلى نظام الدورة الدموية في الجسم الحي. .تخضع الخلايا المناعية لتكاثر متجانس أثناء قلة اللمفاويات الناجمة عن بعض أنواع العدوى الفيروسية أو الناجمة عن العلاج الكيميائي (Sun et al., 2011).

على الرغم من أننا وجدنا أن YTHDF2 يمكن الاستغناء عنه لتكاثر خلايا NK في حالة مستقرة، فقد لاحظنا انخفاضًا كبيرًا في تكاثر الخلايا أثناء الإصابة بـ MCMV (الشكل 3، E – G). لذلك قمنا بالتحقق من دور YTHDF2 في تنظيم تكاثر الخلايا القاتلة الطبيعية في بيئة لمفاوية في الجسم الحي. قمنا بنقل عدد متساوٍ من خلايا NK الطحالية من الفئران CD45.2 Ythdf2ΔNK أو الفئران الجينية CD45.1 إلى الفئران Rag2 -/−Il2rg−/− التي تعاني من نقص الخلايا الليمفاوية.

أظهرت النتائج أن نسبة أكبر من خلايا NK مشتقة من فئران التحكم CD45.1WT مقارنةً بفئران CD45.2 Ythdf2ΔNK في اليوم الثالث بعد نقل الخلية (الشكل S3 D). أظهر التحليل الإضافي أن انخفاض خلايا NK من الفئران Ythdf2ΔNK كان بسبب ضعف تكاثر الخلايا (الشكل S3 E) ولكن ليس موت الخلايا المبرمج (الشكل S3 F)، مما يشير إلى أن YTHDF2 يدفع تكاثر الخلايا المتجانسة NK في الجسم الحي تحت ظروف الليمفاوية.

يمكن تصنيف التمايز الإضافي لخلايا NK الفأرية إلى مراحل غير ناضجة (CD11b − CD 27+)، ومتوسطة ناضجة (CD11b + CD 27+)، ومراحل ناضجة طرفية (CD11b + CD27−) بناءً على مستويات CD11b وCD27 ( تشيوسون وآخرون، 2009؛ جيجر وصن، 2016).

لقد وجدنا أن تعبير Ythdf2 يزداد مع النضج وأن CD11b − CD 27+ وCD11b + CD 27+ وCD11b + CD27− يعرض مستويات التعبير الأدنى والمتوسط ​​والأعلى لـ Ythdf2، على التوالي (الشكل S3 G). ) ، مما يشير إلى أن YTHDF2 قد يكون متورطًا في نضوج خلايا NK. لذلك قمنا بالتحقق من دور YTHDF2 في نضوج الخلايا NK المحددة بواسطة العلامات السطحية للخلية CD11b و CD27.

لقد وجدنا أن فقدان Ythdf2 في خلايا NK أدى إلى انخفاض كبير في تواتر خلايا NK الناضجة و/أو زيادة في خلايا NK الناضجة وغير الناضجة في الطحال والكبد والرئة والدم ولكن ليس في BM (الشكل 4 C و الشكل S3 H) ، مما يشير إلى أن YTHDF2 ينظم بشكل إيجابي نضوج الخلايا NK الطرفية. تمشيا مع هذه البيانات ، كانت مستويات KLRG1 ، وهي علامة نضوج الخلايا NK الطرفية ، أقل بشكل ملحوظ في الفئران Ythdf2ΔNK في الطحال والكبد والرئة ولكن ليس BM مقارنة مع تلك الخاصة بفئران Ythdf2WT في الأعضاء أو حجرات الأنسجة المقابلة (الشكل 4 د).

لتحديد ما إذا كان انخفاض عدد خلايا NK الناضجة بسبب نقص Ythdf2 هو خلية جوهرية، أنشأنا خيمرات في الفئران Rag2−/−Il2rg−/− عن طريق حقن خلايا BM من الفئران CD45.1 WT وCD45.2 Ythdf2ΔNK، مختلطة بمعدل 1:1 نسبة.

كما هو موضح من خلال قياس التدفق الخلوي عند 8 أسابيع بعد عملية الزرع، تم اشتقاق نسبة منخفضة من خلايا NK الناضجة الطرفية من خلايا CD45.2 Ythdf2ΔNK BM مقارنة بتلك الموجودة في خلايا التحكم CD45.1 WT (الشكل 4 E)، مما يشير إلى أن نضوج المحطة الخلوية NK يتحكم فيه YTHDF2 تعتبر عوامل النسخ الجوهرية للخلية T-box Eomes و Tbet حاسمة لنضج NKcell (Daussy et al.، 2014؛ Gordon et al.، 2012).

كشف تلطيخ داخل الخلايا عن انخفاض كبير في مستويات البروتين في Eomes في خلايا NK من الفئران Ythdf2ΔNK مقارنة مع الفئران Ythdf2WT (الشكل S3 I). بالإضافة إلى ذلك، وجدنا أن انخفاض مستويات البروتين وmRNA في Eomes حدث على وجه التحديد في الخلايا NK الناضجة (CD11b + CD27−) (الشكل S3، J – L).

ومع ذلك ، على عكس Eomes ، كان تعبير Tbet مكافئًا في خلايا NK بين الفئران Ythdf2ΔNK و Ythdf2WT (الشكل S3 و I و K) ، مما يشير إلى أن YTHDF2 ربما ينظم نضوج محطة NKcell من خلال استهداف Eomes.

YTHDF2 يعزز وظيفة المستجيب للخلايا NK

إن اكتشافنا أن نقص Ythdf2 أعاق توازن الخلايا NK ونضجها حفزنا على تحديد ما إذا كان YTHDF2 يقمع أيضًا وظيفة المستجيب لخلايا NK. الآلية الرئيسية التي تنظم وظيفة الخلايا NK هي المساهمة النسبية للمستقبلات المثبطة والمنشطة (Chan et al.، 2014).

قمنا بعد ذلك بفحص مستويات التعبير عن الجزيئات المرتبطة بتنشيط أو تثبيط الخلايا NK. لقد وجدنا أن مستويات التعبير عن المستقبلات المنشطة CD226 و NKG2D، ولكن ليس CD69، قد انخفضت في خلايا NK الطحالية من الفئران Ythdf2ΔNK مقارنة بتلك الموجودة في الفئران Ythdf2WT (الشكل 5 أ)، في حين أن المستقبلات المثبطة NKG2A وTIGIT وPD{{ 7}} كانت متشابهة بين الفئران Ythdf2ΔNK والفئران Ythdf2WT (الشكل 5 A والشكل S3 M).

بالإضافة إلى ذلك، أنتجت خلايا Ythdf2ΔNK NK عددًا أقل بكثير من IFN- من خلايا Ythdf2WT NK عند تحفيزها باستخدام IL-12plus IL-18 أو مع خلايا سرطان الغدد الليمفاوية الفأرية YAC-1 (الشكل 5 وB وC). ).

قمنا بعد ذلك باختبار القدرة السامة للخلايا لخلايا Ythdf2ΔNK NK. لقد وجدنا أن خلايا Ythdf2ΔNK NK قد قللت بشكل كبير من السمية الخلوية ضد خلايا سرطان الغدد الليمفاوية الفأرية الناقصة من الفئة MHC من الفئة الأولى RMA-S (الشكل 5 د) ولكنها أظهرت سمية خلوية مماثلة ضد خلايا RMA الكافية من الفئة MHC من الفئة الأولى (الشكل S3 N) كما هو موضح بواسطة 51Crassay . توضح هذه النتائج مجتمعة أن YTHDF2 ضروري لوظيفة المستجيب لخلايا NK.

For more information:1950477648nn@gmail.com