يتحكم قارئ RNA M6 A YTHDF2 في الخلايا القاتلة الطبيعية المضادة للأورام والمناعة المضادة للفيروسات الجزء 6
Feb 22, 2024
نموذج سرطان الجلد النقيلي وتحدي MCMV
تم حقن خلايا B16F10 (105) في الفئران في الوريد. 14 د بعد الحقن، تم الموت الرحيم للفئران لتحليل ما بعد الوفاة. تم تحليل العقيدات النقيلية في الرئة مجهريا وإحصاءها. تم توفير خط الخلايا B16F10 بواسطة Hua Yu (City ofHope، Los Angeles، CA). أصيبت الفئران Ythdf2ΔNK وYthdf2WT بحقن IP لسلالة سميث MCMV (2.5 × 104 PFU)، والتي تم شراؤها من مجموعة American Type Culture Collection (VR -1399). تم الحصول على عينات الدم المحيطية من خلال ثقب تحت الفك السفلي في الأيام 0 و 4 و 7 بعد الإصابة.
تشير عقيدات النقائل الرئوية إلى عقيدات تتكون من خلايا سرطانية خبيثة من مواقع أخرى تهاجر إلى الرئتين عبر الدم أو الجهاز اللمفاوي. بالنسبة للعديد من المرضى، يعد هذا مظهرًا شائعًا لسرطان الرئة.
ومع ذلك، على الرغم من أن عقيدات ورم خبيث في الرئة تشكل تهديدًا للصحة البدنية للمرضى، إلا أنه لا توجد علاقة مباشرة بينها وبين الذاكرة. لذلك، يجب علينا أن نواجه بفعالية تحديات سرطان الرئة وعقيدات ورم خبيث في الرئة، وألا ندع المشاعر السلبية والقلق تؤثر على صحتنا الجسدية والعقلية.
وفي الوقت نفسه، يمكننا الحفاظ على الذاكرة وتحسينها من خلال بعض الطرق الإيجابية. على سبيل المثال، إجراء بعض تدريبات الذاكرة، مثل العمليات الحسابية الرياضية، والقراءة، والاستماع إلى الموسيقى، وممارسة الألعاب، وما إلى ذلك. بالإضافة إلى ذلك، يمكن أيضًا الالتزام بعادات معيشية جيدة، مثل ممارسة التمارين الرياضية بانتظام، والحصول على قسط كافٍ من النوم، وتناول الطعام الصحي، وما إلى ذلك. تحسين ذاكرتنا.
الشيء الأكثر أهمية هو الحفاظ على موقف إيجابي. مهما كانت الصعوبات التي تواجهها، يجب أن تؤمن بقوتك ومرونة جهازك العصبي، ومن خلال التعديلات والاستجابات الإيجابية، ستتغلب في النهاية على الصعوبات بنجاح.
باختصار، على الرغم من أن العقيدات المنتشرة في الرئتين تشكل تهديدًا للصحة البدنية، إلا أنها لا ترتبط بشكل مباشر بالذاكرة. وعلينا أن نواجه الأمر بإيجابية ونحافظ على ذاكرتنا ونحسنها من خلال تعديل نمط حياتنا والحفاظ على السلوك الجيد. يمكن ملاحظة أننا بحاجة إلى تحسين الذاكرة، ويمكن لـ Cistanche deserticola أن يحسن الذاكرة بشكل كبير، لأن Cistanche deserticola يمكنه أيضًا تنظيم توازن الناقلات العصبية، مثل زيادة مستويات الأسيتيل كولين وعوامل النمو. هذه المواد مهمة جدًا للذاكرة والتعلم. بالإضافة إلى ذلك، يمكن لـ Cistanche deserticola أيضًا تحسين تدفق الدم وتعزيز توصيل الأكسجين، مما يضمن حصول الدماغ على العناصر الغذائية والطاقة الكافية، وبالتالي تحسين حيوية الدماغ والقدرة على التحمل. يمكن ملاحظة أننا بحاجة إلى تحسين الذاكرة، ويمكن لـ Cistanche deserticola أن يحسن الذاكرة بشكل كبير، لأن Cistanche deserticola يمكنه أيضًا تنظيم توازن الناقلات العصبية، مثل زيادة مستويات الأسيتيل كولين وعوامل النمو. هذه المواد مهمة جدًا للذاكرة والتعلم. بالإضافة إلى ذلك، يمكن لـ Cistanche deserticola أيضًا تحسين تدفق الدم وتعزيز توصيل الأكسجين، مما يضمن حصول الدماغ على العناصر الغذائية والطاقة الكافية، وبالتالي تحسين حيوية الدماغ والقدرة على التحمل.
انقر فوق معرفة المكملات الغذائية لتعزيز الذاكرة
لقياس الأحمال الفيروسية في الدم المحيطي والطحال والكبد، تم عزل الحمض النووي باستخدام QIAGEN DNeasy Blood and Tissue Kit لتحليل qPCR. تم استخدام الاشعال التالية: MCMV-IE1، 59-AGCCACCAACATTGACCACGCAC-39 (للأمام) وMCMVIE1، 59-GCCCCAACCAGGACACACAACTC-39 (للخلف).
علاج الفئران في الجسم الحي باستخدام IL-15
بالنسبة لعلاج الفئران في الجسم الحي باستخدام IL-15، تم حقن الفئران Ythdf2ΔNK وYthdf2WT بـ 2 ميكروغرام من IL البشري المؤتلف من IP -15 (cat.no. 745101؛ المعهد الوطني للسرطان) لمدة 5 أيام. تم بعد ذلك الموت الرحيم للفئران المعالجة والسيطرة عليها لتحليل التدفق الخلوي.
التدفق الخلوي
تم تحضير معلقات أحادية الخلية من BM والدم والطحال والكبد والرئة لدى الفئران Ythdf2ΔNK وYthdf2WT كما هو موضح سابقًا (Wang et al.، 2018b). تم إجراء تحليل التدفق الخلوي والفرز الخلوي على LSRFortessa X -20 ومقياس التدفق الخلوي FACSAriaFusion (BD Biosciences)، على التوالي.
تم تحليل البيانات باستخدام برنامج NovoExpress (Agilent Technologies).
تم استخدام الأجسام المضادة التالية ذات الصبغة الفلورية من BD Biosciences أو BioLegend أو Invitrogen أو Cell Signaling Technology: CD3ε (145-2C11)، CD19 (1D3)، Gr-1 (RB6-8C5) )،TER-119 (TER-119)، CD11c (N418)، CD4 (GK1.5)، CD8 (53-6.7)، CD122 (5H4)، CD132 (TUGm2)، NK1.1 (PK136)، CD11b (M1/70)، CD27 (LG.3A10)، CD117 (2B8)، CD127 (SB/199)، CD135 (A2F10.1)، KLRG1 (2F1)، CD45 ({{46) }}F11)، CD45.1 (A20)، CD45.2 (104)، IFN- (XMG1.2)، 2B4 (m2B4)، جرانزيم B (QA16A02)، بيرفورين (S16009A)، Ly49H (3D10)، Ly49D ( 4e5)، CD69 (H1.2F3)، CD226 (TX42.1)، NKG2D (CX5)، NKG2A (16A11)، NKp46 (29A1.4)، TIGIT (1G9)، PD -1 (J43)، Annexin V، Ki67 (b56)، Tbet (4b10)، وEomes (WD1928)، phospho-p44/42 Erk1/2 (Thr202/Tyr204، #9101)، phospho-Akt (Ser473، #5315)، بروتين الريبوسوم الفوسفو-S6 ، الفوسفو-Stat3 (Tyr705، #9145)، والفوسفو-Stat5 (Tyr694،#9539).
لتقييم تكاثر الخلايا القاتلة الطبيعية، تم تصنيف الخلايا بـ 5 ميكرومتر CTV (Invitrogen) وفقًا لبروتوكول الشركة المصنعة قبل نقلها إلى الفئران المتلقية. تم إجراء تلطيخ داخل الخلايا لـ Ki67 وTbet وEomes عن طريق التثبيت والنفاذية باستخدام مجموعة تلوين عامل النسخ Foxp3/Transcription (eBioscience).
للكشف عن البروتينات المفسفرة، تمت معالجة خلايا NK الطحالية المنقاة باستخدام IL -15 البشري المؤتلف (50 نانوغرام / مل) لمدة ساعة واحدة ثم تم تثبيتها باستخدام Phosflow Fix Buffer I متبوعة بالنفاذية باستخدام Phosflow Perm Buffer III (BD Biosciences) وتلطيخها. الأجسام المضادة.
نقل الخلايا بالتبني
لتقييم تأثير نقص Ythdf2 على نضوج خلايا NK، تم نقل خليط من 5 × 106 خلايا BM بنسبة 1:1 من CD45.1 أو Ythdf2ΔNK CD45.2 الفئران إلى Rag2−/−Il2rg−/− الفئران. تم تقييم إعادة تكوين المتلقين عن طريق قياس التدفق الخلوي 8 أسابيع بعد الزرع.
بالنسبة لتجارب انتشار التماثل الساكن الناجم عن نقص اللمفاويات، تم نقل أعداد متساوية من خلايا الطحال NK النقية من الفئران CD45.1 أو Ythdf2ΔNK CD45.2 إلى الفئران Rag2−/−Il2rg−/− متبوعة بتقييم النسب المئوية لخلايا WT وYthdf2ΔNK NK المنقولة في الطحال من مستلمي Rag2−/−Il2rg−/− عن طريق قياس التدفق الخلوي في نقاط زمنية محددة.
بالنسبة لنموذج سرطان الجلد النقيلي، تم حقن 106 IL-2 - خلايا NK موسعة من Ythdf2ΔNK أو Ythdf2WT الفئران iv في الفئران Rag2−/−Il2rg−/−. وبعد يوم واحد، تم حقن خلايا B16F10 (105) في الفئران عبر الوريد. 14 د بعد الحقن، الموت الرحيم الفئران لتحليل ما بعد الوفاة. في بعض التجارب، تم تصنيف الخلايا باستخدام CTV (5 ميكرومتر، Invitrogen) لتتبع تكاثر الخلايا قبل النقل.
في فحص الاتجار بالجسم الحي
للكشف عن تهريب الخلايا NK من BM إلى الدم المحيطي، تم حقن 1 ميكروغرام من الجسم المضاد لـ CD45 المسمى APC في الفئران C57BL/6. بعد دقيقتين من حقن الجسم المضاد، تم الموت الرحيم للفئران على الفور، وتم جمع خلايا BM لقياس التدفق الخلوي بعد تلطيخ الخلايا بالأجسام المضادة CD3 وNK1.1. تم التعرف على خلايا NK المتني من خلال تلطيخ CD45، في حين تم التعرف على خلايا NK الجيبية من خلال وجود علامات CD45. لذلك، تشير نسبة خلايا NK الموجودة في الجيوب الأنفية (CD 45+) إلى تلك الموجودة في المناطق المتني (CD45−) إلى تهريب خلايا NK من الدم المحيطي BM في حالة مستقرة.
في الوقت الحقيقي RT-qPCR والتحصين المناعي
تم عزل الحمض النووي الريبي (RNA) باستخدام RNeasy Mini Kit (QIAGEN) ثم تم نسخه عكسيًا إلى cDNA باستخدام PrimeScript RT Reagent Kit مع ممحاة gDNA (Takara Bio) وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة. تم تحليل مستويات التعبير mRNA باستخدام SYBRGreen PCR Master Mix ونظام QuantStudio 12K Flex Real-TimePCR (كلاهما من Thermo Fisher Scientific). يتم سرد تسلسلات التمهيدي في الجدول S1.
تم إجراء النشاف المناعي وفقًا للإجراءات القياسية، كما هو موضح سابقًا (Denget al., 2015; Yu et al., 2006). تم استخدام الأجسام المضادة التالية: METTL3 (cat. no. 15073-1-AP; Proteintech)، METTL14 (cat. no.26158-1-AP; Proteintech)، YTHDF1 (cat. no. 17479-1-AP) ؛ Proteintech)، YTHDF2 (cat. no. RN123PW؛ MBL)، YTHDF3 (cat. no.25537-1-AP؛ Proteintech)، ALKBH5 (cat. no. ab195377؛ Abcam)،FTO (cat. no. ab124892؛ Abcam)، MDM2 (cat. no. 33-7100؛ Invitrogen)، TDP -43 (cat. no. PA 5-29949؛ Invitrogen)، و -actin(cat. no. {{20 }}إيج؛ بروتينتك).
فحص ضربة قاضية سيرنا
IL-2–expanded NK cells were transfected with Accell mouse Tardbp siRNA (cat. no. E-040078-00-0005; Dharmacon) or Mdm2 siRNA (cat. no. E-041098-00-0005; Dharmacon) using Accell delivery media (Dharmacon) according to the manufacturer's instructions in the presence of IL-15 (50 ng/ml). The Accell eGFP control pool was used as siRNA control. The transfection efficiency was >90% كما تم قياسها بواسطة قياس التدفق الخلوي. تم تحديد كفاءة Geneknockdown بواسطة qPCR والتطعيم المناعي. تم تحليل 3 د بعد ترنسفكأيشن، وموت الخلايا المبرمج، وانتشارها عن طريق قياس التدفق الخلوي كما هو موضح أعلاه.
فحص مراسل لوسيفيراز
تم تضخيم منطقة المروج Ythdf2 التي تتراوح من -2،000 bp إلى +100 bp من TSS من خلايا NK الفأرية واستنساخها في apGL4- ناقل مراسل Luciferase الأساسي (Promega) لإنشاء apGL{ {5}} بلازميد مراسل Ythdf2. تم نقل خلايا HEK293T المشتراة من ATCC باستخدام بلازميدات مراسل pGL 4- Ythdf2 بالإضافة إلى بلازميدات التعبير الزائد STAT5a أو STAT5b أو ناقلات فارغة، جنبًا إلى جنب مع بلازميد مراسل pRL-TK Renilla (Promega) لتطبيع كفاءة ترنسفكأيشن. تم حصاد الخلايا للتحلل لمدة 24 ساعة بعد ترنسفكأيشن، وتم قياس نشاط اللوسيفيراز كمياً باستخدام نظام ثنائي اللوسيفيراز (بروميجا). تم إدراج التسلسلات التمهيدية لاستنساخ بلازميدات التعبير الزائد Ythdf2 و STAT5a و STAT5b في الجدول S1.
فحوصات رقاقة
تم إجراء فحوصات ChIP باستخدام مجموعة Pierce Magnetic Chip Kit (القط رقم 26157؛ Thermo Fisher Scientific) وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة. باختصار ، تم استخدام كمية متساوية من ananti-anti-phospho-Stat5 (Tyr694، cat. No. 9351؛ Cell Signaling Technologies) أو التحكم المقابل IgG للأرنب الطبيعي بشكل منفصل لترسيب مجمعات البروتين DNA المترابطة المشتقة من 5 × 106 خلايا NK أولية منقية للفأر تمت معالجتها مسبقًا بـ IL -15 (50 نانوغرام / مل) لمدة ساعة واحدة. بعد عكس التشابك، تم اختبار الحمض النووي المناعي بواسطة الجسم المضاد المشار إليه بواسطة qPCR. يتم سرد تسلسل جميع الاشعال في الجدول S1.
مقايسة السمية الخلوية خارج الجسم الحي
تم تقييم السمية الخلوية للخلايا NK خارج الجسم الحي بواسطة فحوصات 51Crrelease القياسية. تم استخدام خلايا ستارجيت في خطوط خلايا سرطان الغدد الليمفاوية الفأرية RMA-S (فئة MHC غير الكافية) وخلايا RMA (فئة MHC الكافية)، وهي هدية من Andre´Veillette (جامعة ماكجيل، مونتريال، كندا). عولجت الفئران بحقن البوليينوسينيك: حمض البوليسيتيديليك [بولي (I: C)؛ 200 ميكروغرام/الفئران] لمدة 18 ساعة. تم عزل خلايا NK النشطة من Poly (I: C) من الطحال باستخدام EasySepMouse NK Cell Isolation Kit (STEMCELL Technologies). تمت زراعة خلايا NK النقية مع الخلايا المستهدفة بنسبة 5:1 و2.5:1 و1.25:1 في وجود IL-2 (50 وحدة / مل).
m6A-seq
تم توسيع خلايا NK الطحالية المنقية بواسطة IL -2 (1، 000 U / ml، cat. no. Bulk Ro 23-6019؛ المعهد الوطني للسرطان) في المختبر لمدة 7 د. تم عزل إجمالي الحمض النووي الريبي (RNA) بواسطة كاشف TRIzol (Thermo FisherScientific) من 50 مليون IL -2 - خلايا NK موسعة. تم إثراء الحمض النووي الريبي متعدد الأدينيلات بشكل أكبر من الحمض النووي الريبي الكلي باستخدام مجموعة تنقية Dynabeads mRNA (Invitrogen). تم تجزئة عينات mRNA إلى أجزاء طولها 100- nt باستخدام كواشف تجزئة الحمض النووي الريبي (Invitrogen).
تم استخدام mRNA المجزأ (5 ميكروجرام) من أجل الترسيب المناعي m6A باستخدام الجسم المضاد m6A (202003؛ Synaptic) باتباع البروتوكول القياسي لمجموعة Magna MeRIP m6A (Merck Millipore). تم إثراء RNA من خلال RNA Clean & Concentrator -5 (Zymo Research) لإنشاء مكتبة باستخدام مجموعة KAPA RNA HyperPrep Kit (Roche). تم إجراء التسلسل في منشأة علم الجينوم بمدينة الأمل على جهاز Illumina HiSeq 2500 مع وضع قراءة واحد 50-bp. تم تعيين قراءات التسلسل إلى الفأر باستخدام برنامج HISAT2 v101 (كيم وآخرون، 2015).
تم توفير قراءات Mappedreads لهطول الأمطار ومكتبات الإدخال باستخدام حزمة R exomePeak (Meng et al.، 2014). تم تصور m6Apeaks باستخدام برنامج Integative Genomics Viewersoftware (http://www.igv.org). تم تحليل فكرة ربط m6A بواسطة MEME (https://meme-suite.org) وHOMER(http://homer.ucsd.edu/homer/motif). تم شرح القمم المستدعىة عن طريق التقاطع مع بنية الجينات باستخدام Rpackage ChIPseeker (Yu et al.، 2015).
StringTie was used to assess expression levels for mRNAs from input libraries by calculating the total exon fragments/mapped reads in millions × exon length in kb (Pertea et al., 2015). The differentially expressed mRNAs were selected with log2(fold change) >1 orlog2 (تغيير الطية)<−1 and P < 0.05 using the R package edgeR (Robinson et al., 2010).
YTHDF2 RIP-seq
تم حصاد 5 0 مليون IL-2 - من خلايا NK الموسعة وغسلها مرتين باستخدام برنامج تلفزيوني بارد، وتم التخلص من حبيبات الخلية باستخدام 2 حجم من محلول التحلل (1 0 ملي مولار هيبس، درجة الحموضة 7.6، 150 ملي مولار بوكل، 2 ملي مولار EDTA، 0.5% NP-40، 0.5 ملي مولار ثنائيثيوثريتول، كوكتيل مثبط الأنزيم البروتيني 1:100 [Thermo Fisher Scientific]، و400 U/ml مثبط SUPERase-In RNase [Thermo Fisher Scientific]).
تم تحضين المحللة على الجليد لمدة 5 دقائق وطردها لمدة 15 دقيقة لإزالة المحللة. تم حفظ عُشر حجم المحللة الخلوية كمدخل. تم تحضين الجزء المتبقي من محللة الخلية بـ 5 ميكروغرام مضاد لـ YTHDF2 (cat.no. RN123PW؛ MBL) الذي كان مقترنًا بخرز مغناطيسي من البروتين A (cat. رقم 1 0 0 01D؛ Invitrogen) عند 4 درجات لمدة ساعتين مع دوران لطيف. بعد ذلك ، تم غسل الخرزات خمس مرات باستخدام 1 مل من محلول الغسيل البارد المثلج (50 ملي مولار HEPES ، الرقم الهيدروجيني 7.6،200 ملي كلوريد الصوديوم ، 2 ملي مولار EDTA ، 0.05٪ NP -40 ، 0.5 ملي مولار ديثيوثريتول ، و 200 وحدة / مل RNase المانع).
تم إخضاع العينات المترسب مناعيًا لهضم بروتيناز K في محلول غسيل مكمل بـ 1٪ SDS و 2 ملغم / مل بروتيناز K (ThermoFisher Scientific) المحتضنة مع الرج عند 1200 دورة في الدقيقة عند 55 درجة لمدة ساعة واحدة. تم استخراج إجمالي الحمض النووي الريبي (RNA) من كل من المدخلات والحمض النووي الريبي المناعي (RNA) عن طريق إضافة كاشف TRIzol 5 مجلدات متبوعًا بـ Direct-zol RNA Miniprep (Zymo Research).
تم إنشاء مكتبة cDNA باستخدام مجموعة KAPA RNA HyperPrep Kit (Roche) وتسلسلها على منصة Illumina HiSeq 2500. تم إنشاء نتائج استدعاء الذروة مع الهطول المناعي ومكتبات الإدخال بواسطة حزمة R RIPSeeker (Li et al.، 2013). تم استخدام HOMER للعثور على نماذج لتوزيع البيانات في مناطق الذروة. وتم شرح القمم المطلوبة عن طريق التقاطع مع بنية الجينات والنسخ باستخدام ChIPpeakAnno (Zhu et al., 2010).
فحص الاستقرار مرنا
تمت زراعة خلايا NK الطحالية المنقية من الفئران Ythdf2ΔNK وYthdf2WT باستخدام IL -15 (5 0 نانوغرام / مل). بعد 3 أيام من الاستنبات، عولجت الخلايا بالأكتينوميسين D (5 ميكروغرام/مل، رقم القطة A9415؛ سيجما) للوقت المحدد. واستخدمت الخلايا بدون علاج عند الساعة 0. وتم جمع الخلايا في الوقت المحدد، وتم استخراج إجمالي الحمض النووي الريبي (RNA) من الخلايا من أجل qPCR. تم حساب نصف عمر mRNA باستخدام الطريقة الموصوفة مسبقًا بواسطة Weng et al. (2018). يتم سرد تسلسلات التمهيدي في الجدول S1.
تحليل قاعدة البيانات على الانترنت
استخدمنا المورد عبر الإنترنت BioGPS (http://biogps.org) لتحليل التعبير الخاص بالأنسجة لـ Ythdf2. كانت مجموعات بيانات RNA-seqdata من GEO تحت رقم الانضمام. GSE106138، GSE113214، وGSE25672. تم تصدير البيانات الطبيعية من تحليلات RNA-seq، وتم تصور التعبير الجيني z-score باستخدام وظيفة Heatmap.2 داخل مكتبة gplots
إحصائيات
تم إجراء اختبارات t للطالب غير المقترن (ثنائي الذيل) باستخدام برنامج GraphPad Prism. تم إجراء ANOVA أحادي الاتجاه أو ثنائي الاتجاه عند مقارنة ثلاث مجموعات مستقلة أو أكثر. تم ضبط قيم P لإجراء مقارنات متعددة باستخدام إجراء Holm-Sˇ´ıdak. P < 0.05 تم اعتبارها مهمة. *, ف < {{10}}.05; **، ف < 0.01؛ و ***، ف < 0.001.
مواد تكميلية عبر الإنترنت
يوضح الشكل S1 مستويات البروتين لـ YTHDF2 في الخلايا المناعية، بما في ذلك الخلايا القاتلة الطبيعية استجابةً لتحفيز IL-15 وعدوى MCMV وتطور الورم؛ توليد الفئران مع حذف NKcell الخاص بـ Ythdf2. يوضح الشكل S2 التتر الفيروسي في الطحال والكبد من الفئران المصابة بفيروس MCMV والنسبة المئوية والعدد المطلق لخلايا Ly49H+ و/أو Ly49D+ NK في الفئران المصابة بفيروس MCMV. يوضح الشكل S3 تكاثر وبقاء ونضج والتعبير عن المستقبلات المنشطة والمثبطة لخلايا NK من الفئران Ythdf2WT وYthdf2ΔNK. يوضح الشكل S4 تنظيم تعبير YTHDF2 بواسطة إشارة IL-15- STAT5 والتعبير عن مكونات مستقبلات IL-15 ومسار PI3K – AKT ومسار MEK – ERK في خلايا NK من Ythdf2WT وYthdf2ΔNK الفئران. يُظهر الشكل S5 فحوصات RNA-seq وm6A-seq وRIP-seq على مستوى النسخ في خلايا NK. يسرد الجدول S1 الاشعال المستخدمة في الدراسة.
توافر البيانات
تم إيداع بيانات RNA-seq وm6A-seq وRIP-seq في المركز الوطني لمعلومات التكنولوجيا الحيوية (GEO) تحت رقم الانضمام. GSE174027. البيانات المتبقية التي تدعم نتائج هذه الدراسة متاحة من المؤلفين المقابلين عند الطلب.
شكر وتقدير
تم دعم هذا العمل من قبل المعاهد الوطنية للصحة (NS106170، AI129582، CA247550، CA163205، CA223400، CA068458، وCA210087)، وجمعية سرطان الدم والأورام اللمفاوية (1364-19)، ومعهد كاليفورنيا للطب التجديدي (DISC2COVID{{ 9}})، وجائزة المشروع الاستثنائي لعام 2021 من تحالف سرطان الثدي. تم أيضًا دعم هذا العمل جزئيًا بواسطة USDAaward (USDA/NIFA 2020-67017-30843).
مساهمات المؤلفين: قام S. Ma وJ. Yu وMA Caligiuri بتصميم وتصميم المشروع. إس ما، ج. يان، ج. تشانغ، وج. أجرى يو تجارب و/أو تحليلات للبيانات. ساهم Z. Chen وL.-S.Wang وJC Sun وJ. Chen بالكواشف والدعم المادي. قام S. Ma وJ. Yu وJ. Chen وMA Caligiuri بكتابة و/أو مراجعة و/أو مراجعة الورقة. ناقش جميع المؤلفين النتائج وعلقوا على المخطوطة.
الإفصاحات: أبلغ J. Chen عن "أخرى" من Genovel BiotechCorp. خارج العمل المقدم وهو المؤسس العلمي لشركة Genovel Biotech Corp. والمستشار العلمي لعلم الأورام العرقي. ولم يتم الإبلاغ عن أي إفصاحات أخرى.
مراجع
1. أراس، إتش، إس موكارسكي، إيه إي كامبل، إيه بي هيل، إل إل لانيير. 2002. التعرف المباشر على الفيروس المضخم للخلايا عن طريق تنشيط وتثبيط مستقبلات NKcell. علوم. 296:1323-1326.
2. أيالا، واي إم، وتي ميستيلي، وإف إي بارال. 2008. TDP-43 ينظم فسفرة بروتين الورم الأرومي الشبكي من خلال قمع تعبير كيناز 6 المعتمد على السيكلين. بروك. ناتل. أكاد. الخيال العلمي. الولايات المتحدة الأمريكية. 105:3785-3789.
3.Barbieri, I., K. Tzelepis, L. Pandolfini, J. Shi, G. Millan-Zambrano, SC Robson, ´D. أسبريس، V. ميجليوري، AJ بانيستر، N. هان، وآخرون. 2017. يحافظ METTL3 المرتبط بالمروج على سرطان الدم النخاعي عن طريق التحكم في الترجمة المعتمد على m6A. طبيعة. 552:126-131.
4.بيكنيل، ب.، وما كاليجيوري. 2005. إنترلوكين-2، إنترلوكين-15، ودورهما في الخلايا القاتلة الطبيعية البشرية. حال. إيمونول. 86:209–239.
5. بيرتولي، سي.، جي إم سكوتهايم، وآر دي بروين. 2013. التحكم في نسخ دورة الخلية خلال المرحلتين G1 وS. نات. القس مول. خلية بيول. 14: 518-528.
6.Bezman, NA, CC Kim, JC Sun, G. Min-Oo, DW Hendricks, Y. Kamimura,JA Best, AW Goldrath, وLL Lanier. اتحاد مشروع الجينوم المناعي. 2012. التعريف الجزيئي لهوية وتفعيل الخلايا القاتلة الطبيعية. نات. إيمونول. 13:1000-1009.
7.Carson, WE, J. Giri, MJ Lindemann, ML Linett, M. Ahdieh, R. Paxton, D.Anderson, J. Eisenmann, K. Grabstein, وMA كاليجيوري. 1994. إنترلوكين (IL) 15 هو سيتوكين جديد ينشط الخلايا القاتلة الطبيعية البشرية عبر مكونات مستقبل IL-2. جي إكسب. ميد. 180:1395-1403.
8.Carson, WE, TA Fehniger, S. Haldar, K. Eckhert, MJ Lindemann, CF Lai, CM Croce, H. Baumann, وMA Caligiuri. 1997. الدور المحتمل للإنترلوكين-15 في تنظيم بقاء الخلايا القاتلة الطبيعية البشرية. كلين. يستثمر. 99:937-943.
9. تشان، سي جيه، إم جي سميث، وإل مارتينيت. 2014. الآليات الجزيئية لتنشيط الخلايا القاتلة الطبيعية استجابةً للإجهاد الخلوي. اختلاف موت الخلية 21: 5-14.
10.Chen, X., J. Han, J. Chu, L. Zhang, J. Zhang, C. Chen, L. Chen, Y. Wang, H.Wang, L. Yi, وآخرون. 2016. العلاج المختلط لخلايا EGFR-CAR NK وفيروس الهربس البسيط 1 لعلاج النقائل الدماغية لسرطان الثدي.Oncotarget. 7:27764-27777.
For more information:1950477648nn@gmail.com
