إجمالي الجليكوسيدات من جذوع القسطرة Tubulosa تخفف من السلوكيات الشبيهة بالاكتئاب: تفاعل ثنائي الاتجاه بين المواد الكيميائية النباتية وميكروبات الأمعاء

لمزيد من المعلومات: ali.ma@wecistanche.com

لي فان وآخرون

نبذة مختصرة

خلفية: كأكثر الأعشاب المنغمة للكلى واليانغ استخدامًا في الطب الصيني التقليدي ، السيقان النضرة المجففةسيستانشتوبولوسا(Schenk) Wight (CT) أثبتت فعاليتها في علاج الاكتئاب. ومع ذلك ، لا تزال المكونات المضادة للاكتئاب والآلية الكامنة وراءها غير واضحة.

غاية: لاستكشاف المكونات النشطة للتصوير المقطعي المحوسب(سيستانشtubulosa)ضد الاكتئاب ، فضلا عن الآليات المحتملة. تصميم الدراسة وطرقها: تم استخدام اختبارات اليأس السلوكي لتقييم الأنشطة المضادة للاكتئاب لعديد السكاريد والسكريات قليلة السكاريد والكسور المختلفة المخصبة بالجليكوزيد المنفصلة عن التصوير المقطعي المحوسب ، بالإضافة إلى مستقلبات ميكروبيوتا الأمعاء النموذجية بما في ذلك 3- حمض الهيدروكسيفينيل بروبيونيك ({{2) }} HPP) وهيدروكسي إيروسول (HT). علاوة على ذلك ، تم استكشاف آثار الكسور النشطة بيولوجيًا والمستقلبات على نماذج الإجهاد الخفيف المزمن الذي لا يمكن التنبؤ به (CUMS) باستخدام الديناميكا الدوائية المتعددة والتحليلات الكيميائية الحيوية. لوحظت التغيرات في نسيج القولون والحاجز المعوي عن طريق التلوين والتحليل الكيميائي المناعي. تم استكشاف الميزات الميكروبية المعوية واستقلاب التربتوفان-كينورينين باستخدام تسلسل الرنا الريباسي 16S والنشاف الغربي ، على التوالي.

نتائج: المجموعجليكوسيدات(TG) خفف بشكل كبير من السلوكيات الشبيهة بالاكتئاب مقارنةً بالكسور المنفصلة المختلفة ، مما يعكس التأثيرات التآزرية للجليكوزيدات الفينيثانويد والقزحية على فرط نشاط المحور الوطائي - النخامي - الكظري (HPA) ، الالتهاب العصبي المحيطي الحاد ، وأوجه القصور في 5- هيدروكسي تريبتامين (5- HT) وعامل التغذية العصبية المشتق من الدماغ في الحُصين. علاوة على ذلك ، TG(مجموع الجليكوسيدات)يخفف الالتهاب منخفض الدرجة في القولون واضطراب الحاجز المعوي ، وترتبط وفرة العديد من الأجناس البكتيرية ارتباطًا وثيقًا بمحور HPA والالتهاب في فئران CUMS. باستمرار ، تم تقليل تعبير إندوليمين 2 ، 3- ديوكسجيناز 1 (IDO1) في القولون بشكل ملحوظ بعد TG(مجموع الجليكوسيدات)الإدارة ، مصحوبة بقمع استقلاب التربتوفان-كينورينين. من ناحية أخرى ، مارس HT أيضًا تأثيرًا ملحوظًا مضادًا للاكتئاب عن طريق تحسين وظيفة محور HPA ، وإطلاق السيتوكين المؤيد للالتهابات ، واستقلاب التربتوفان-كينورينين ، بينما كان غير قادر إلى حد كبير على ضبط ميكروبيوتا الأمعاء المضطربة بنفس طريقة TG. من المثير للدهشة أن متفوقًا على فلوكستين و TG و HT يمكن أن يزيد من تحسين الخلل الوظيفي في المحور الوطائي - النخامي - الغدد التناسلية والتمثيل الغذائي غير الطبيعي للنيوكليوتيدات الحلقية.

الكلمات الدالة: سيستانشتوبولوسا, مجموع الجليكوسيدات، هيدروكسي إيروسول ، والاكتئاب ، وميكروبات الأمعاء

انقر هنا لمشاهدة المنتج ديزيرسيكولا أماه

مقدمة

الاكتئاب هو اضطراب نفسي مزمن ومتكرر ومهدد للحياة ويصيب ما يصل إلى 20 في المائة من السكان في جميع أنحاء العالم (Nabavi et al. ، 2017). في الوقت الحالي ، على الرغم من الموافقة على العديد من مضادات الاكتئاب ، فإن الآثار الجانبية مثيرة للقلق. والجدير بالذكر أن العلاج طويل الأمد بمثبطات امتصاص السيروتونين الانتقائية (SSRIs) مثل فلوكستين ، العامل الدوائي الرئيسي للاكتئاب ، أدى إلى تفاقم المشاكل مثل العجز الجنسي المزمن (Bijlsma et al. ، 2014) ؛ أدى هذا إلى جذب الانتباه المتزايد لاكتشاف مضادات اكتئاب جديدة من الأعشاب الطبيعية (Wang et al. ، 2019). في نظرية الطب الصيني التقليدي (TCM) ، ينتج عن نقص الكلى واليانغ ميزة أداء مشابهة للأعراض السريرية للاكتئاب مثل الشعور بالإحباط في المقالب ، وفقدان الاهتمام ، والعاطفية (Yang et al. ، 2020) ، مما يعزز الأفكار. للتخفيف من السلوكيات الشبيهة بالاكتئاب عن طريق توحيد لون الكلى. من قبيل الصدفة ، تمتلك العديد من الأعشاب المنشطة للكلى واليانغ ميزة تحسين الوظيفة الجنسية (Wu et al. ، 2015). مثل هذه الدراسات تجعلنا ننتبه إلى التطبيق المحتمل لـسيستانشهيربا، وهو أكثر عشب مقوي للكلى واليانغ استخدامًا في الطب الصيني التقليدي وهو فعال في علاج الخلل الوظيفي الجنسي لدى الذكور (Wang et al. ، 2020) ، من حيث التطورات المضادة للاكتئاب.سيستانشهيربا، سجلت رسميًا على أنها السيقان النضرة المجففةسيستانشتوبولوسا(شرينك) وايت (CT) وسيستانشالصحراء(YC Ma) في دستور الأدوية الصيني (Wang et al. ، 2017) ، تم استخدامه في الصين ودول شرق آسيا الأخرى منذ القرن الخامس عشر لعلاج حالات مثل نقص الكلى واليانغ والعجز الجنسي وعقم النساء. تشير الدراسات الدوائية الحديثة إلى ذلكسيستانشيحتوي Herba على العديد من الأنشطة الحيوية ، مثل تعزيز المناعة ، والحماية العصبية ، ومضادات الأكسدة ، وتأثيرات مكافحة الشيخوخة ، ومضادات التعب (Wang et al. ، 2017). الخصائص الوقائية للأعصابسيستانشيقترح Herba إمكاناته العلاجية في الأمراض المرتبطة بالإدراك مثل السكتة الدماغية والاكتئاب ومرض الزهايمر (Wang et al. ، 2020). في دراستنا السابقة ، وجدنا أن التصوير المقطعي المحوسب(سيستانشtubulosa)المستخلص خفف من السلوكيات الشبيهة بالاكتئاب لجرذان الإجهاد الخفيف المزمن غير المتوقع (CUMS) (Li et al. ، 2018). حتى الآن ، التحليل الكيميائي للأشعة المقطعية(سيستانشtubulosa)أظهر أن مكوناته الرئيسية تشمل جليكوسيدات فينيلثانويد ، جليكوسيدات إيريدويد ، عديد السكاريد ، و oligosaccharides (Jiang and Tu ، 2009) ، ومع ذلك ، فإن نوع المركب الذي يلعب دورًا مهيمنًا في تأثيره المضاد للاكتئاب لا يزال غير واضح.

أكدت العديد من الدراسات أن العمل الفسيولوجي للأمعاء (خاصة الميكروبات المتعايشة) يلعب دورًا مهمًا في تطور الاكتئاب ويمكن أن ينظم الغدد الصم العصبية والجهاز العصبي اللاإرادي والجهاز المناعي (Yang et al. ، 2020). علاوة على ذلك ، جذبت العلاقة التي تربط استقلاب التربتوفان ، وميكروبات الأمعاء ، والاكتئاب الكثير من الاهتمام تدريجيًا. يمكن للميكروبات المعوية المعدلة تنشيط مسار التربتوفان-كينورينين ، وبالتالي تقليل توافر التربتوفان المحيطي والدماغي ، مما يؤدي إلى 5- نقص HT (Agus وآخرون ، 2018). أظهرت دراستنا السابقة أن جليكوسيدات الفينيثانويد في التصوير المقطعي المحوسب(سيستانشtubulosa)يؤدي عمومًا إلى توافر حيوي منخفض ، ويمكن استقلابه سريعًا إلى 3- حمض هيدروكسي فينيل بروبيونيك (3- HPP) وهيدروكسي إيروسول (HT) بواسطة ميكروبيوتا الأمعاء (Li et al.، 2016). بالإضافة إلى ذلك ، CT(سيستانشtubulosa)تم الإبلاغ عن المستخلص لاستعادة التوازن الميكروبي في الأمعاء في فئران CUMS (Li et al. ، 2018). بناءً على هذه الأبحاث ، استنتجنا أن التفاعل ثنائي الاتجاه للمواد الكيميائية النباتية وميكروبات الأمعاء قد يتحكم في التأثيرات المضادة للاكتئاب لمكونات معينة نشطة بيولوجيًا في التصوير المقطعي المحوسب.(سيستانشtubulosa). على وجه التحديد ، يمكن أن تتحول المركبات إلى نواتج أيضية قابلة للامتصاص (مثل 3- HPP و HT) في الجهاز الهضمي عن طريق ميكروبيوتا الأمعاء ، وبالتالي تمارس تأثيرات مضادة للاكتئاب. في المقابل ، يمكن للتعديلات الهيكلية لميكروبات الأمعاء التي يسببها المكون النشط بيولوجيًا أن تلعب في نفس الوقت دورًا حيويًا في النشاط المضاد للاكتئاب.

هنا في دراستنا ، استخدمنا اختبارات اليأس السلوكي لتقييم الأنشطة المضادة للاكتئاب لعديد السكاريد والسكريات قليلة السكاريد والكسور المتنوعة الغنية بالجليكوزيدات المنفصلة عن التصوير المقطعي المحوسب.(سيستانشtubulosa)المستخلص المائي (CTE) ، والمستقلبات النموذجية بواسطة ميكروبيوتا الأمعاء (بما في ذلك 3- HPP و HT) ، والتي أكدناها أيضًا في نموذج الإجهاد الخفيف المزمن الذي لا يمكن التنبؤ به (CUMS) مع الديناميكيات الدوائية المتعددة والتحليلات الكيميائية الحيوية. بعد ذلك ، قمنا بالتحقيق فيما إذا كانت آليته ضد الاكتئاب ذات صلة بالتفاعل ثنائي الاتجاه للمواد الكيميائية النباتية وميكروبات الأمعاء.

المواد والأساليب

المواد

تم شراء جميع المعايير المستخدمة في التحليل الكيميائي من Durst (Sichuan ، الصين). 3- تم شراء HPP و HT و fluoxetine و imipramine من Aladdin (شنغهاي ، الصين). تم شراء المجموعة الكمية البروتين BCA من Boster (ووهان ، الصين). قدم نانجينغ جيانتشنغ (نانجينغ ، الصين) 5- HT ، BDNF ، عامل نخر الورم ألفا (TNF-) ، إنترلوكين -1 بيتا (IL -1) ، و interferon-gamma (IFN- ) مجموعات مقايسة الممتز المناعي (ELISA) المرتبطة بالإنزيم. تم شراء مجموعات ELISA من الكورتيكوستيرون (CORT) وهرمون قشر الكظر (ACTH) وهرمون إطلاق الكورتيكوتروفين (CRH) من MultiSciences (هانغتشو ، الصين). تم شراء مجموعات ELISA أحادية الفوسفات (cAMP) والأدينوزين الحلقية (cGMP) والتستوستيرون (T) وهرمون إفراز الغدد التناسلية (GnRH) من التكنولوجيا الحيوية المرتبطة بالإنزيم (شنغهاي ، الصين). تم الحصول على مجموعات ELISA التربتوفان والكينورينين من الأجسام المضادة الجزيئية الصغيرة (بوردو ، فرنسا). تم شراء الأجسام المضادة الأولية / الثانوية بما في ذلك المنطقة 1 (ZO {13}}) و indoleamine 2 و 3- dioxygenase 1 (IDO1) و -actin و HRP الماعز المضاد للأرنب IgG (H plus L) من Proteintech (ووهان ، الصين). تم الحصول على جميع الكواشف الأخرى ذات الدرجة التحليلية أو درجة نقاء أعلى من الموردين التجاريين.

تحضير كسور مختلفة منفصلة عن الاعتلال الدماغي الرضحي المزمن(سيستانشاستخراج tubulosa)

CT(سيستانشtubulosa)تم جمعها في نوفمبر 2015 في هيتيان ، شينجيانغ ، الصين ، وتم التصديق عليها من قبل البروفيسور شياوبو لي. تم إيداع عينة القسيمة (20151108) في كلية الصيدلة بجامعة شنغهاي جياو تونغ.

تم استخراج العينات المكسرة ثلاث مرات بالماء المقطر (1:10 ، وزن / حجم) لمدة ساعتين عند 80 ~ 90 درجة مئوية للحصول على CTE(سيستانشاستخراج tubulosa)(كان العائد 57.1 بالمائة). تم إذابة CTE في ماء مقطر ثم تم تقليبها ببطء باستخدام الإيثانول (1: 4 ، حجم / حجم) ووضعها عند 4 درجة مئوية لمدة 24 ساعة. بعد ذلك ، تم جمع الراسب والطاف بالطرد المركزي عند 4000 دورة في الدقيقة لمدة 20 دقيقة. تم الحصول على عديد السكاريد الكلي (TP ؛ كان الناتج 5.7 بالمائة) عن طريق الغسيل بنسبة 80 بالمائة من الإيثانول ، ونزع البروتين باستخدام كاشف Savage ثلاث مرات من الراسب الذي تم جمعه. تم بعد ذلك إجراء تحليل كروماتوجرافي لما تبقى من المادة الطافية فوق عمود راتنج دقيق المسام D101 وتمت التصفية التتابعية باستخدام الماء المقطر و 40 بالمائة من الإيثانول. احتوت المياه المزالة وكسور الإيثانول بنسبة 40 في المائة على إجمالي السكريات قليلة السكاريد (كان المحصول 35.1 في المائة) والمجموعجليكوسيدات(تيراغرام ، كان العائد 12.1 في المائة) ، على التوالي. تيراغرام(مجموع الجليكوسيدات)تمت التصفية التتابعية أيضًا باستخدام الماء المقطر و 5 في المائة ، و 10 في المائة ، و 40 في المائة من الإيثانول من خلال راتنج D101 دقيق المسام مرة أخرى ، والكسور المزلقة البالغة 5 في المائة و 40 في المائة من الإيثانول كانت مجموع جليكوسيدات إيريدويد (TG-IrG ؛ كان العائد 2.7 في المائة) و إجمالي جليكوسيدات الفينيثانويد (TG-PhG ؛ كان العائد 8.7 في المائة) ، على التوالي.

تحليل كيميائي

أولاً ، تم فصل المكونات الكيميائية الرئيسية للكسور المختلفة عن CTE(سيستانشاستخراج tubulosa)تتميز بـ UPLC-QTOF-MS. ثانيًا ، تم تحديد المحتويات النسبية للكربوهيدرات الكلية والجليكوزيدات بطريقة UV-Vis. ثالثًا ، تم تحديد كمية المكونات الرئيسية (إشيناكوسيد ، فيرباسكوسايد ، فيرباسكوسايد ، 8- حمض الإيبيلوغانيك ، وحمض تينيبوسيد) بواسطة طريقة HPLC تم التحقق من صحتها. يتم عرض المعلمات التفصيلية والتحقق من صحة الأسلوب في المواد التكميلية.

التجارب على الحيوانات

جداول التجارب الحيوانية المحددة موضحة في الشكل 1. تم إيواء جميع حيوانات التجارب وتأقلمها لمدة أسبوع واحد قبل التجارب في مركز حيوانات المختبر بجامعة شنغهاي جياو تونغ (شنغهاي ، الصين) ، تحت درجات حرارة الغرفة الخاضعة للرقابة (25 ± 2) ◦C ؛ 55 ± 10 بالمائة رطوبة نسبية) مع دورة مظلمة فاتحة 12: 12 ساعة. تم إجراء هذا البحث وفقًا لإرشادات رعاية واستخدام حيوانات المختبر في SJTU. تمت الموافقة على المرافق والبروتوكولات الحيوانية من قبل لجنة أخلاقيات الحيوان في SJTU (رقم A2019008).

تم شراء مائة وخمسين فأرًا من ذكور الفئران (وزنها 18-20 جم ، عمرها 6 أسابيع) من شركة Shanghai Slack Biotechnology Company (شنغهاي ، الصين) وتم تقسيمها عشوائيًا إلى 10 مجموعات (n=15 / مجموعة). الموضوعات والجرعات لفئران اليأس السلوكي في كل مجموعة موضحة في الجدول 1. جرعات الاعتلال الدماغي الرضحي المزمن(سيستانشاستخراج tubulosa) تم حساب الكسور المنفصلة عن طريق الصيغة التالية: الجرعة=4. 55 جم / كجم / يوم. وزن الجسم × العائد ، والتي تم تحديدها وفقًا لثلاث حسابات بشرية للجرعة المكافئة بناءً على مساحة سطح الجسم. تم إعداد جرعات عقار إيميبرامين الإيجابي ومستقلبات ميكروبيوتا الأمعاء (3- HPP و HT) وفقًا للدراسات السابقة (Gupte et al.، 2016؛ Pablos et al.، 2019). بعد الإعطاء داخل المعدة مرة واحدة يوميًا لمدة 7 أيام ، تم إجراء اختبار المجال المفتوح (OFT) واختبار تعليق الذيل (TST) واختبار السباحة القسري (FST) في اليوم الثامن والتاسع والعاشر على التوالي. تم توضيح الطرق المحددة للاختبارات السلوكية في المواد التكميلية.

تم شراء اثنين وسبعين من ذكور جرذان Sprague-Dawley (وزنها 160-180 جم ، عمرها 6 أسابيع) من شركة Shanghai Slack Laboratory Animal Company (شنغهاي ، الصين). قبل التجارب الرسمية ، خضعت جميع الفئران لاختبار تفضيل السكروز (SPT) بعد التدريب المقابل. تم تقسيم الفئران إلى 8 مجموعات (ن=9 / مجموعة) وفقًا لتفضيل السكروز (الشكل التكميلي S1). يتم عرض الموضوعات والجرعات للفئران في كل مجموعة في الجدول 1. تم إعداد الجرعات وفقًا لمعامل التحويل بين الفئران والجرذان بناءً على جرعاتهم الفعالة في الفئران التي تعاني من اليأس السلوكي. وكانت جرعة عقار فلوكستين الموجب الضابطة متوافقة مع الدراسة السابقة (هو وآخرون ، 2017). تلقت جميع المجموعات سلسلة من الإجهاد الخفيف المزمن غير المتوقع (CUMS) باستثناء المجموعة الضابطة. تم تطبيق الضغوطات بشكل مستمر وعشوائي لمدة 4 أسابيع (انظر الجدول التكميلي S1 للحصول على التفاصيل). كان الطعام والماء متاحين مجانًا لفئران التحكم ، والتي ظلت غير مضطربة في غرفة أخرى ، باستثناء الاختبارات السلوكية. تم إعطاء الموضوعات داخل المعدة 1 ساعة قبل إجراء CUMS على مدار 4 أسابيع. بعد 28 يومًا من الضغوطات المستمرة وإعطاء الدواء ، تم إجراء OFT و SPT و FST في الأيام 29 و 31 و 33 على التوالي. يتم عرض الطرق المحددة للتجارب السلوكية في المواد التكميلية.

جمع العينات وتحليل الكيمياء الحيوية

بعد الفحوصات السلوكية تم تخدير الفئران الصائمة ببنتوباربيتال صوديوم وجمع الدم الكامل للحصول على عينات مصل الدم. بعد نضح القلب بمحلول ملحي ، تم جمع محتويات الحُصين والقولون والأعور وتخزينها في درجة حرارة -80 درجة مئوية. تمت إزالة أجزاء القولون البعيدة وتثبيتها في 4 في المائة بارافورمالدهيد. مستويات CORT و CRH و ACTH و TNF- و IL -1 و IFN- و cAMP و cGMP و T و GnRH و tryptophan و kynurenine في المصل 5- HT و BDNF و TNF- في الحصين ، و TNF- و IFN- في القولون تم قياسها وفقًا للتعليمات المقدمة مع مجموعات ELISA المقابلة.

علم الأنسجة والكيمياء المناعية والمقايسة الغربية النشاف

تم استخدام الهيماتوكسيلين والأيوزين (H&E) وتلطيخ Alcian ذو الحمض الأزرق الدوري (AB-PAS) لمراقبة التغيرات المرضية في أنسجة القولون. بالإضافة إلى ذلك ، تم إجراء تقييمات الكيمياء المناعية لهذه الأقسام لمراقبة تعبير البروتين ZO -1 في الخلايا الظهارية القولونية (Ding et al. ، 2020). التفاصيل المتعلقة بإعداد العينة ومقايسة النشاف الغربي لتحديد تعبير بروتين IDO1 في القولون والحصين موصوفة أيضًا في المواد التكميلية.

تحليل الملف الشخصي التركيبي لميكروبات الأمعاء

تم إجراء تسلسل عالي الإنتاجية 16S rRNA بواسطة شركة MajorBio المحدودة (شنغهاي ، الصين) ، وتظهر الطريقة التفصيلية ومعالجة البيانات في المواد التكميلية.

تحليل احصائي

يتم التعبير عن البيانات على أنها متوسط ​​± الخطأ المعياري للمتوسط ​​(SEM). تم استخدام تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA) لمقارنة مجموعات متعددة باستخدام برنامج SPSS 2 0. 0. تم اعتبار الاختلاف مهمًا عند p <0.05. تم="" تحليل="" الارتباطات="" بين="" ميكروبات="" الأمعاء="" وبعض="" العوامل="" الفسيولوجية="" المرتبطة="" بالاكتئاب="" باستخدام="" معامل="" ارتباط="" سبيرمان="" بناءً="" على="" تحليل="" خريطة="">

نتائج

التحليل الكيميائي لأجزاء مختلفة مفصولة عن CTE(سيستانشاستخراج tubulosa)

تم تمييز المكونات الرئيسية باستخدام UPLC-QTOF-MS (الجدول التكميلي S2 والشكل S2) ، وتم تحديد ما مجموعه 21 مكونًا ، بما في ذلك 16 مكونًا من جليكوسيدات الفينيثانويد ، ومكونان من جليكوسيدات الفينول في CTE(سيستانشاستخراج tubulosa)و TG و TG-PhG ؛ و 3 مكونات من جليكوسيدات إيريدويد في CTE(سيستانشاستخراج tubulosa)و TG و TG-IrG. بشكل عام ، كانت المحتويات النسبية لإجمالي الكربوهيدرات في TP و TO 60.3٪ و 80.8٪ على التوالي. المحتويات النسبية لـالمجموعجليكوسيداتفي TG كانت 87.7 في المئة. في المقابل ، شكّلت جليكوسيدات الفينيثانويد والقزحية 86. 7٪ و 53.4٪ من TG-PhG و TG-IrG ، على التوالي. محتويات إشنكوسايد ، فيرباسكوسايد ، فيرباسكوسايد ، 8- حمض ابيلوغانيك ، وحمض تينيبوزيد في كل جزء موضحة في الجدول 2 ، ويتم سرد كروماتوجرام HPLC وبيانات التحقق من صحة الأسلوب في الجدول التكميلي S3 والشكل S3.

تأثيرات الكسور المختلفة المنفصلة عن الاعتلال الدماغي الرضحي المزمن(سيستانشاستخراج tubulosa)والمستقلبات النموذجية بواسطة ميكروبيوتا الأمعاء في اختبارات اليأس السلوكي في الفئران

كما هو مبين في الشكل 2 ، مقارنة بمجموعة التحكم ، أظهرت الفئران التي خضعت لمدة 7 أيام من إعطاء إيميبرامين (التحكم الإيجابي) انخفاضًا كبيرًا في أوقات عدم الحركة في كل من FST و TST ولم تظهر أي تأثير كبير على المسافة الإجمالية المقطوعة في OFT. . كما لوحظت تغييرات مماثلة في الاعتلال الدماغي الرضحي المزمن(سيستانشاستخراج tubulosa)، TG ، و HT ، مما يشير إلى أن CTE ، TG(مجموع الجليكوسيدات)، و HT النشاط المضاد للاكتئاب ولم تكن التأثيرات مرتبطة بالاستثارة. ومن ثم ، TG(مجموع الجليكوسيدات)كان HT و HT الجزء السائد النشط بيولوجيًا المفصول عن CTE والمستقلبات النموذجية بواسطة ميكروبيوتا الأمعاء ، على التوالي. ومن المثير للاهتمام ، أنه لم تظهر أي تغييرات كبيرة في أوقات عدم الحركة في FST بعد إعطاء TG-PhG و TG-IrG مقارنةً بتلك الموجودة في عناصر التحكم ، أو في TST بعد إعطاء TG-PhG ، مما يشير إلى أن وجود جليكوسيدات الفينيليثانويد والقزحية قد أن يكون ضروريًا في النشاط المضاد للاكتئاب من الاعتلال الدماغي الرضحي المزمن.

التأثيرات الديناميكية الدوائية والتغيرات الكيميائية الحيوية للكسور المخصبة بالجليكوزيد المختلفة و HT على فئران CUMS

كما هو مبين في الجدول 3 ، أظهرت الفئران التي خضعت لـ 28 يومًا من نموذج CUMS تخفيضات كبيرة (p <0. 0="" 0="" 1)="" في="" تفضيل="" السكروز="" في="" spt="" ،="" إجمالي="" المسافة="" المقطوعة="" ،="" وعدد="" التربية="" في="" oft="" ،="" بالإضافة="" إلى="" زيادة="" ملحوظة="" (p=""><0.01) في="" إجمالي="" وقت="" الجمود="" في="" fst="" مقارنةً="" بالضوابط="" ،="" مما="" يشير="" إلى="" تحريض="" أنماط="" ظاهرية="" شبيهة="" بالاكتئاب="" في="" فئران="" cums.="" تم="" عكس="" الأداء="" الاكتئابي="" في="" مجموعة="" flx="" (التحكم="" الإيجابي).="" وبالمثل="" ،="" أدت="" معالجة="" cte="" و="" tg="" و="" tg-phg="" و="" tg-irg="" و="" ht="" إلى="" استعادة="" تفضيل="" السكروز="" إلى="" المستويات="" الطبيعية="" في="" فئران="" cums="" ،="" والتي="" كانت="" 102.7="" بالمائة="" و="" 94.1="" بالمائة="" و="" 89.8="" بالمائة="" و="" 91.9="" بالمائة="" و="" 94.3="" بالمائة="" من="" الضوابط="" ،="" على="" التوالي.="" بشكل="" ثابت="" في="" مجموعات="" fst="" و="" cte="" و="" tg="" أظهروا="" التأثيرات="" الأكثر="" وضوحًا="" ،="" ووصلت="" أوقات="" عدم="" الحركة="" إلى="" 103.3="" في="" المائة="" و="" 93.4="" في="" المائة="" من="" تلك="" الخاصة="" بمجموعة="" التحكم="" ،="" على="" التوالي="" ،="" في="" حين="" أن="" أوقات="" عدم="" الحركة="" لمجموعات="" tg-phg="" و="" tg-irg="" و="" ht="" وصلت="" لتوها="" إلى="" 62.1="" في="" المائة="" و="" 73.2="" في="" المائة="" و="" 69.9="" في="" المائة="" من="" المجموعة="" الضابطة.="" لوحظت="" زيادات="" كبيرة="" مماثلة="" (p=""><0.05) في="" إجمالي="" المسافة="" المقطوعة="" وعدد="" التربية="" في="" oft="" بعد="">(سيستانشاستخراج tubulosa)اتجهت إدارة TG و HT و TG-PhG و TG-IrG نحو مراجعة عدد التربية في فئران CUMS. أشارت النتائج إلى أن TG هو الجزء السائد من مضادات الاكتئاب النشطة بيولوجيًا والمنفصل عن CTE ، وأن جليكوسيدات الفينيثانويد والقزحية لا غنى عنها في ممارسة تأثيرها المضاد للاكتئاب. علاوة على ذلك ، تم إثبات أن HT هو أحد المستقلبات النشطة لـ TG في الجسم الحي.

باستمرار ، أدت المعاناة من CUMS إلى زيادة كبيرة في مستويات CORT و CRF و ACTH و TNF- و IL -1 و IFN- في المصل و TNF- في حصين الجرذان مقارنة بمستويات المجموعة الضابطة (p< 0.05),="" resulting="" in="" significant="" reductions="" (p="" <="" 0.05)="" in="" the="" levels="" of="" hippocampal="" 5-ht="" and="" bdnf="" (fig.="" 3).="" except="" for="" a="" non-significant="" difference="" in="" the="" level="" of="" hippocampal="" bdnf="" between="" flx="" and="" cums="" groups,="" the="" above-mentioned="" alterations="" in="" cums="" rats="" could="" be="" significantly="" reversed="" (p="" <="" 0.05)="" after="" administration="" of="" fluoxetine,="" cte="">(سيستانشاستخراج tubulosa)، TG ، و HT ، مما يشير إلى أن CTE ، TG(مجموع الجليكوسيدات)، و HT أظهرت تأثيرات محسنة على فرط تنشيط محور HPA ، والتهاب عصبي محيطي وخيم ، وأوجه قصور في {0}} HT و BDNF. وبالمثل ، أدى علاج TG-IrG و TG PhG إلى خفض مستويات CORT في المصل و TNF- و IFN- و hippocampal TNF- بشكل كبير ، وزيادة مستوى Hippocampal 5- HT في فئران CUMS (p <{{8}) }.="" 0="" 5).="" كما="" لوحظ="" انخفاض="" كبير="" (p=""><0. 05)="" في="" مستويات="" crf="" و="" acth="" في="" الدم="" في="" مجموعة="" tg-irg="" مقارنة="" مع="" مجموعة="" cums.="" ومن="" المثير="" للاهتمام="" أن="" مستويات="" cort="" و="" tnf-="" و="" acth="" و="" crf="" في="" مصل="" الدم="" في="" مجموعات="" tg-phg="" و="" tg-irg="" كانت="" أعلى="" بكثير="" من="" تلك="" الموجودة="" في="" مجموعة="" tg="" (p=""><0.05) ومستويات="" الحصين="" 5-="" ht="" أظهر="" و="" bdnf="" نمط="" التعبير="" المعاكس="" (p=""><0.05). أظهرت="" هذه="" النتائج="" أن="" تأثيرات="" tg-phg="" و="" tg-irg="" على="" فرط="" النشاط="" لمحور="" hpa="" ،="" والالتهاب="" المحيطي="" والعصبي="" ،="" ونقص="" ht="" 5-="" كانت="" أدنى="" من="" tg="" ،="" مما="" يشير="" إلى="" أن="" الفينيثانويد="" والجليكوسيدات="" القزحية="" قد="" تمارس="" التأثيرات="" التآزرية="" على="" الجوانب="" المتعددة="" المذكورة="">

ينظم TG و HT محور HPG وأيض النوكليوتيدات الدوري في فئران CUMS

تم قياس مستويات T و GnRH و cAMP و cGMP ونسبة cAMP و cGMP (cAMP / cGMP) في المصل الخاضع لـ CUMS ، وتظهر النتائج في الجدول 4. تركيزات T ، GnRH ، cAMP ، و cAMP / cGMP في المصل انخفض بشكل كبير ، وزاد مستوى cGMP بشكل كبير (p <0. 05)="" في="" مجموعة="" cums="" مقارنةً="" بعناصر="" التحكم="" ،="" مما="" يشير="" إلى="" أن="" التعرض="" لـ="" cums="" أدى="" إلى="" قمع="" محور="" hpg="" وخلل="" التمثيل="" الغذائي="" للنيوكليوتيدات="" الحلقية.="" بالمقارنة="" مع="" مجموعة="" cums="" ،="" لم="" تكن="" هناك="" تغييرات="" كبيرة="" في="" مجموعة="" flx.="" والمثير="" للدهشة="" ،="" بعد="">(مجموع الجليكوسيدات)و HT ، زيادات كبيرة (p <{0}. 05)="" تم="" عرضها="" في="" مستويات="" المصل="" t="" و="" gnrh="" و="" camp="" و="" camp="" cgmp="" ،="" بينما="" انخفض="" مستوى="" cgmp="" في="" الدم="" بشكل="" كبير="" (p=""><0.05). أشارت="" هذه="" النتائج="" إلى="" أن="">(مجموع الجليكوسيدات)ونظم HT محور HPG واستقلاب النوكليوتيدات الحلقية ، والذي كان متفوقًا بشكل واضح على التحكم الإيجابي في فلوكستين.

يخفف TG و HT الالتهاب منخفض الدرجة في القولون واضطراب الحاجز المعوي في فئران CUMS

تم استخدام تلطيخ H&E لتقييم الضرر المورفولوجي للقولون ، ولم يلاحظ وجود فروق ذات دلالة إحصائية في القولون بين المجموعات التجريبية (الشكل 4 أ). علاوة على ذلك ، تم أيضًا تحليل تأثيرات TG و HT على التهاب القولون واضطراب الحاجز المعوي (الشكل 4 ب-د). بالمقارنة مع تلك الخاصة بالمجموعة الضابطة ، تم تقليل عدد الخلايا الكأسية وسمك الطبقة المخاطية في مجموعة CUMS. باستمرار ، انخفض التعبير البروتيني لـ ZO -1 ومستويات IFN- و TNF- في القولون بشكل ملحوظ (p <0. 0="" 5)="" وزادت="" (p=""><0.05) )="" ،="" على="" التوالي="" ،="" مما="" يشير="" إلى="" أنه="" على="" الرغم="" من="" عدم="" حدوث="" ضرر="" نسيجي="" واضح="" ،="" إلا="" أن="" التعرض="" لـ="" cums="" أدى="" إلى="" التهاب="" منخفض="" الدرجة="" في="" القولون="" واضطراب="" حاجز="" الأمعاء.="" بعد="" فلوكستين="" ،="">(مجموع الجليكوسيدات)، ومعالجة HT ، تم زيادة عدد الخلايا الكأسية وسمك الطبقة المخاطية ، وانخفضت مستويات IFN- و TNF- القولون بشكل كبير (p <0. 0="" 5).="" بالإضافة="" إلى="" ذلك="" ،="" زاد="" tg="" و="" ht="" بشكل="" ملحوظ="" (p=""><0.05) من="" تعبير="" البروتين="" لـ="" zo="" -1="" إلى="" مستوى="" مشابه="" لمستوى="" المجموعة="" الضابطة.="" أظهرت="" هذه="" النتائج="" أن="">(مجموع الجليكوسيدات)و HT يمكن أن يخفف من الالتهاب منخفض الدرجة في القولون واضطراب الحاجز المعوي في فئران CUMS.

آثار TG و HT على تكوين ميكروبيوتا الأمعاء

بعد إزالة التسلسلات غير المؤهلة ، تم الحصول على إجمالي 1،874،721 قراءة فعالة. أظهرت نتائج تنوع ألفا (الشكل 5 أ) وتنوع بيتا (الشكل 5 ب) أنه على الرغم من أن ثراء (تشاو) والتنوع (شانون) لميكروبات الأمعاء في محتويات سيكل لم يختلف ، فإن الهيكل العام لميكروبات الأمعاء في أشارت مؤامرة تحليل الإحداثيات الرئيسية (PCoA) إلى وجود فرق صارخ بين مجموعات التحكم ومجموعات CUMS. علاوة على ذلك ، TG(مجموع الجليكوسيدات)أدى علاج HT و HT إلى زيادة كبيرة في الثراء البكتيري لجرذان CUMS وأحدث اختلافات ملحوظة في مؤامرة PCoA مقارنةً بجرذان CUMS ، مما يُظهر أوجه تشابه واضحة مع عناصر التحكم ، خاصةً عند TG(مجموع الجليكوسيدات)تم فحصه.

أكدت التغييرات التصنيفية في الكائنات الحية الدقيقة كذلك أن TG(مجموع الجليكوسيدات)كان له تأثير تنظيمي كبير على تكوين ميكروبيوتا الأمعاء. بعد TG(مجموع الجليكوسيدات)الإدارة ، تم عكس وفرة غالبية الأصناف المعدلة في فئران CUMS إلى مستوى مشابه لتلك الموجودة في المجموعة الضابطة. انخفاض كبير (14.2 بالمائة ، ف <0. 05)="" والتخصيب="" (53.6="" بالمائة="" ،="">< 0.05)="" in="" the="" abundances="" of="" the="" phylum="" firmicutes="" and="" bacteroidetes="" were="" observed="" in="" the="" tg="">(مجموع الجليكوسيدات)المجموعة مقارنة مع مجموعة CUMS (الشكل 5 ج) ، على التوالي. باستمرار ، على مستوى الأسرة (الجدول التكميلي S4) ، خفض TG وفرة Ruminococcaceae (phylum Firmicutes) و Peptococcaceae (phylum Firmicutes) بنسبة 33.9 في المائة و 82.9 في المائة ، على التوالي ، مقارنة بمجموعة CUMS (ف <0. {{1="" 0}}="" 5).="" على="" العكس="" من="" ذلك="" ،="" فإن="" التخصيب="" الكبير="" في="" وفرة="" عائلة="" erysipelotrichaceae="" (phylum="" firmicutes="" ،="" 78.4="" بالمائة="" ،="" p=""><0.05) و="" muribaculaceae="" (phylum="" bacteroidetes="" ،="" 77.3="" بالمائة="" ،="" p=""><0.05) موجودة="" في="" مجموعة="" tg.="" باستمرار="" على="" مستوى="" الجنس="" (الشكل="" 5="" د)="" ،="" وفرة="" anaerotruncus="" ،="" harryflintia="" ،="" ruminiclostri="" dium="" _9="" ،="" _="" f="" _="" ruminococcaceae="" (أفراد="" من="" عائلة="" rumino-coccaceae)="" ،="" و="" peptococcus="" (أحد="" أفراد="" عائلة="" peptococcaceae)="" انخفض="" بشكل="" ملحوظ="" في="" حين="" أن="" norank="" _="" f="" _="" erysipelotrichaceae="" ،="" allo="" baculum="" ،="" dubosiella="" (أفراد="" عائلة="" erysipelotrichaceae)="" و="" norank="" _="" f="" {{24}="" }="" أظهر="" muribaculaceae="" (أحد="" أفراد="" عائلة="" muribaculaceae)="" وفرة="" أعلى="" في="" مجموعة="" tg="" مقارنة="" بمجموعة="" cums="">< 0.05).="" in="" addition,="" tg="" decreased="" the="" abundances="" of="" tyzzerella_3,="" acetatifactor,="" and="" norank_f_lachnospiraceae="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae="" (p="" <="" 0.05),="" although="" the="" abundance="" of="" the="" family="" lachnospiraceae="" was="" similar="" across="" all="" experimental="" groups.="" unlike="" tg,="" ht="" decreased="" the="" abundances="" of="" partially="" altered="" taxa="" induced="" by="" cums,="" including="" the="" family="" ruminococcaceae,="" 3="" genera="" (anaerotruncus,="" harryflintia,="" and="" ruminiclostridium_9)="" assigned="" to="" the="" family="" ruminococcaceae="" and="" 2="" genera="" (tyzzerella_3,="" acetatifactor)="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae.="" additionally,="" converse="" variations="" were="" observed="" in="" the="" abundances="" of="" ruminococcaceae_ucg_013="" and="" streptococcus="" in="" the="" ht="" group.="" these="" results="" indicated="" that="" tg="" and="" ht="" exerted="" clear="" differences="" in="" the="" regulation="" of="" gut="" microbiota="" composition,="" and="" the="" effect="" of="" tg="" was="" superior="" to="" that="" of="" tg="" especially="" in="" altering="" the="" genera="" assigned="" to="" the="" family="" erysipelotrichaceae,="" peptococcaceae,="" and="">

تحليل الارتباط للأجناس الميكروبية المتغيرة المتأثرة بـ TG(مجموع الجليكوسيدات)و HT ، وهرمونات مرتبطة بمحور HPA ، والسيتوكينات المؤيدة للالتهابات ، 5- HT ، و BDNF

لتوضيح الارتباطات بين التغييرات في تكوين ميكروبيوتا الأمعاء المتأثرة بـ TG(مجموع الجليكوسيدات)و HT ، والسمات المقابلة المتعلقة بالاكتئاب ، تم إجراء تحليل ارتباط سبيرمان. كما هو مبين في الشكل 6 ، كانت مستويات 5- HT و BDNF في الحصين مرتبطة بشكل إيجابي فقط مع norank _ f _ Muribaculaceae. خلاف ذلك ، يمكن تحديد الارتباطات الواضحة بين الأجناس الميكروبية المتغيرة والهرمونات المرتبطة بمحور HPA. على وجه الخصوص ، كانت Dubosiella و norank _ f _ Muribaculaceae و norank _ f _ Erysipelotrichacea و Peptococcus مرتبطة ارتباطًا وثيقًا بوظيفة محور HPA. كان لدى Serum CORT و CRF و ACTH ارتباطات سلبية مع Dubosiella و norank _ f _ Muribaculaceae و norank _ f _ Erysipelotrichacea وارتباطات إيجابية مع Peptococcus. علاوة على ذلك ، أظهر كل من Dubosiella و norank _ f _ Erysipelotrichacea ارتباطات سلبية مع كل من IFN- و hippocampal TNF- ، بينما توجد علاقات مماثلة في Allobaculum و Harryfinita والمصل والحصين TNF- ، وكذلك في norank _ و _ Lachnospiracea ، ومصل IFN- و TNF-. في المقابل ، ارتبطت بكتيريا Peptococcus بشكل إيجابي مع عامل نخر الورم القولوني ومصل عامل نخر الورم. وبالمثل ، فإن norank _ f _ Muribaculaceae كانت مرتبطة بشكل إيجابي بمصل IFN- و TNF-. أشارت هذه النتائج إلى أن الأجناس الميكروبية المتغيرة ، وخاصة بعض الأجناس التي تنتمي إلى عائلة Erysipelotrichaceae و Peptococcaceae و Muribaculaceae ، والتي تأثرت بشكل خاص بـ TG ، أظهرت ارتباطات قوية مع الهرمونات المرتبطة بمحور HPA والسيتوكينات المؤيدة للالتهابات في وقت واحد ، مما يدل على الدور الحاسم. من الجراثيم المعوية في تنظيم وظيفة محور HPA والالتهابات.

تيراغرام(مجموع الجليكوسيدات)و HT تمنع استقلاب التربتوفان-كينورينين في فئران CUMS

آثار TG(مجموع الجليكوسيدات)و HT على مستويات التربتوفان و kynurenine في مصل الفئران ، وكذلك التعبير عن IDO1 في القولون والحصين ، تم تحديدها. كما هو مبين في الشكل 7 والشكل 8 ، مقارنة بمستوى المجموعة الضابطة ، انخفض مستوى التربتوفان في المصل بشكل كبير في مجموعة CUMS ، على عكس زيادة مستوى الكينورينين ونسبة الكينورينين إلى التربتوفان (Kyn). / TRP) وتعبير بروتين IDO1 في القولون والحصين. بالمقارنة مع مجموعة CUMS ، تم تقليل مصل Kyn / Trp في مجموعة FLX بشكل كبير (ص< 0.05).="" tg="">(مجموع الجليكوسيدات)وأدى العلاج بالـ HT إلى زيادة ملحوظة في مستوى التربتوفان في المصل في فئران CUMS (p <{{0}}. 0="" 5)="" ،="" وانخفاض="" مستويات="" كينورينين="" المصل="" و="" kyn="" trp="" (ف=""><0.05). بالإضافة="" إلى="" ذلك="" ،="" ثبطت="" tg="" بشكل="" كبير="" التعبير="" عن="" بروتين="" ido1="" في="" القولون="" من="" فئران="" cums="" (p=""><0.05) ،="" بينما="" لوحظ="" اختلاف="" غير="" مهم="" في="" التعبير="" عن="" بروتين="" ido1="" في="" الحصين="" بين="" مجموعات="" cums="" و="" tg.="" ومع="" ذلك="" ،="" فإن="" تأثير="" ht="" على="" التعبير="" عن="" بروتين="" ido1="" في="" القولون="" والحصين="" كان="" مخالفًا="" لتأثير="" tg="" ،="" مما="" يشير="" إلى="" أن="" tg="" و="" ht="" تمنع="" استقلاب="" التربتوفان-كينورينين="" عن="" طريق="" تقليل="" التعبير="" عن="" ido1="" في="" القولون="" والحصين="" من="" فئران="" cums="" ،="" على="" التوالي.="">

مناقشة

في هذه الدراسة ، تم استخدام نموذجين حيوانيين مختلفين لفحص المركبات النشطة بيولوجيًا في التصوير المقطعي المحوسب(سيستانشtubulosa)يخفف من السلوكيات الشبيهة بالاكتئاب لأول مرة. كان كل من TP و TO من المكونات غير الفعالة على الأرجح في CTE ، بينما كان TG(مجموع الجليكوسيدات)أظهروا أقصى إمكانات في علاج الاكتئاب. دراسات سابقة على التصوير المقطعي المحوسب(سيستانشtubulosa)، إلى جانبسيستانشالنباتات ، ركزت في الغالب على الأنشطة الحيوية لجليكوسيدات الفينيثانويد ذات المحتوى الأعلى وأهملت أهمية جليكوسيدات إيريدويد والمكونات الأخرى الأقل وفرة. ومن المثير للاهتمام ، أن دراستنا أظهرت أن جليكوسيدات الفينيثانويد والقزحية أظهرت تأثيرات تآزرية على فرط النشاط لمحور HPA ، والتهاب عصبي محيطي شديد ، ونقص في الحُصين 5- HT و BDNF ، والتي قد تكون السبب الحاسم لمضاد الاكتئاب المفيد تأثير TG(مجموع الجليكوسيدات). تشير هذه النتائج أيضًا إلى الخصائص المتعددة المكونات والعناصر المتعددة للأدوية العشبية وتذكرنا بأن المكونات ذات المستويات المنخفضة ، وحتى المكونات النادرة قد تلعب أيضًا دورًا رئيسيًا في التأثيرات الدوائية.

يؤدي الإجهاد المزمن إلى فرط النشاط لمحور HPA ، مما يعزز ظهور الاكتئاب ، وكذلك قمع محور HPG عن طريق انخفاض إطلاق GnRH و / أو حساسية الغدة النخامية لـ GnRH (كيربي وآخرون ، 2009). وفي الوقت نفسه ، يعد كل من cAMP و cGMP محاور وسيطة مهمة تعتمد على العديد من الناقلات العصبية والهرمونات لممارسة آثارها الفسيولوجية (Siawrys et al. ، 2002). أظهرت الدراسات الحديثة باستمرار أن حدوث نقص في الكلى واليانغ يرتبط ارتباطًا وثيقًا بخلل في محور الغدة النخامية المستهدفة (Zhang et al. ، 2019). في متلازمة نقص الكلى واليانغ ، لوحظ أيضًا انخفاض ملحوظ في مستويات cAMP في الدم و cAMP / cGMP. في هذه الدراسة ، وجدنا أن TG(مجموع الجليكوسيدات)يمكن أن يثبط مستويات CORT و CRF و ACTH في الدم ، ويزيد من محتويات T و GnRH في المصل في فئران CUMS ، مما يشير إلى استعادة HPA و HPG لخلل وظيفي بعد إعطاء TG. بالإضافة إلى ذلك ، TG(مجموع الجليكوسيدات)عكس انخفاضًا كبيرًا في مستوى cAMP / cGMP في المصل في الفئران المعرضة لـ CUMS. وبالتالي ، فإن الآلية الكامنة الكامنة وراء محتمل(سيستانشtubulosa) في علاج الاكتئاب ونقص الكلى واليانغ قد تكون متشابهة جزئيًا وتستحق المزيد من الاستكشاف. علاوة على ذلك ، فإن إنتاج الرغبة والسلوكيات الجنسية هو عملية منعكس عصبي معقدة. الهرمونات الجنسية هي المصادر الرئيسية للإثارة الجنسية المركزية ، ويمكن أن يتسبب نقص الهرمونات الجنسية في تقليل الرغبة الجنسية أو العجز الجنسي (هولواي وويلي ، 2015). على وجه الخصوص ، يمنع 5- HT المفرط إطلاق GnRH ، وهو سبب سائد لحدوث الخلل الوظيفي الجنسي المزمن بعد العلاج طويل الأمد باستخدام مثبطات استرداد السيروتونين الانتقائية (براساد وآخرون ، 2015). في دراستنا ، كان فلوكستين (ممثل SSRIs) غير فعال في ضعف محور HPG. ومع ذلك ، على الرغم من TG(مجموع الجليكوسيدات)أدى إلى تحسن كبير في مستوى 5- HT في الحصين ، كما لوحظت تغييرات مماثلة في مستويات T و GnRH في الدم ، وبالتالي خفف من قمع محور HPG. توضح هذه النتائج الميزة المميزة للتصوير المقطعي المحوسب(سيستانشtubulosa) في علاج الاكتئاب ، والآلية الجوهرية المسؤولة عن هذه الآثار بحاجة إلى مزيد من الدراسة.

أظهرت الأدلة المتزايدة أن القناة الهضمية هي هدف محتمل لعلاج الأمراض المزمنة باستخدام مركبات طبيعية منخفضة التوافر البيولوجي (Zhou et al. ، 2020). أشارت الأبحاث الحديثة (Wei et al. ، 2019) إلى أن علاج CUMS يؤدي إلى حدوث تغييرات في الميكروبيوم البرازي وعيوب حاجز الأمعاء ، مما يسهل الغزو البكتيري للغشاء المخاطي للقولون ويؤدي إلى تفاقم التفاعلات الالتهابية في القولون. تمشيا مع هذا التقرير ، أظهرت نتائجنا أن 4 أسابيع من التعرض لـ CUMS تسببت في استنفاد واسع النطاق لعدد خلايا الكأس وسمك الطبقة المخاطية في القولون الجرذ ، وكذلك بداية اضطراب الحاجز المعوي المتمثل في زيادة نفاذية الأمعاء ، والتي تم تحديدها بواسطة قياس بروتين ZO -1. بالإضافة إلى ذلك ، لوحظ زيادة تعبيرات العوامل المؤيدة للالتهابات (مثل TNF- و IFN-) في القولون. وفقًا لذلك ، أشارت هذه النتائج إلى أنه على الرغم من عدم حدوث أضرار نسيجية واضحة ، فإن علاج CUMS تسبب في التهاب القولون واضطراب الحاجز المعوي. أفادت الدراسات السابقة أن التصوير المقطعي المحوسب يمارس فعالية محسنة في الوقاية من التهاب القولون الناجم عن DSS في الفئران (Jia et al. ، 2014). غير متسق ، TG(مجموع الجليكوسيدات)كما ثبت أنه يخفف من الالتهاب منخفض الدرجة في القولون واضطراب الحاجز المعوي لجرذان CUMS ، مما يؤكد قدرته على علاج الأمراض المرتبطة بالتهاب القولون سريريًا.

أظهرت دراسات مستفيضة أيضًا أن العلاقة التي تربط ميكروبيوتا الأمعاء المتعايشة ، ومحور HPA ، والالتهاب معقدة وتلعب دورًا حاسمًا في تطور الاكتئاب (Misiak ، وآخرون ، 2020). قد تساهم التعديلات في تكوين ميكروبيوتا الأمعاء في تعزيز إطلاق السيتوكينات وتوليف الجزيئات النشطة بيولوجيًا الصغيرة (دو وآخرون ، 2020). قد تمر بعض السيتوكينات (مثل TNF-) عبر الحاجز الدموي الدماغي وتكون منشطة فعالة لمحور HPA (Misiak et al. ، 2020). بدوره ، يمكن أن يساهم فرط نشاط محور HPA في دسباقتوزيس مجهريات البقعة المعوية ، والتهاب مزمن في القولون ، ونفاذية الأمعاء المتغيرة (Misiak et al. ، 2020). تمشيا مع الدراسات السابقة ، من المحتمل أن يكون التعديل الطبي بواسطة TG لميكروبات الأمعاء مسؤولاً عن آثاره المخففة للاكتئاب. لاحظنا أن TG(مجموع الجليكوسيدات)عكس وفرة الأصناف الميكروبية على مستويات مختلفة في الفئران المعرضة لـ CUMS إلى مستوى مماثل لتلك الموجودة في الضوابط. على وجه الخصوص ، تم العثور على الأجناس المتغيرة الرئيسية التي تنتمي إلى عائلة Peptococcaceae و Erysipelotrichaceae و Muribaculaceae مرتبطة بشكل كبير بمحور HPA والالتهاب. تمشيا مع نتائجنا ، تم الإبلاغ عن أن عائلة Peptococcaceae و Erysipelotrichaceae و Muribaculaceae تلعب دورًا مهمًا في الحفاظ على سلامة الحاجز المخاطي وحدوث الالتهاب (Kankoush، 2015؛ Borton et al.، 2017؛ Zhang et al.، 2020). لذلك ، توقعنا أن TG يمكن أن يخفف من وفرة بعض الأجناس المخصصة لعائلة Erysipelotrichacea و Peptococcaceae و Muribaculaceae ، وبالتالي يخفف من الالتهاب المنخفض الدرجة في القولون ، وفرط النشاط لمحور HPA ، وتعطيل سلامة الحاجز المخاطي. ومن المثير للاهتمام ، في دراستنا ، أن جنسًا واحدًا فقط اسمه ولا ank _ f _ Muribaculaceae كان مرتبطًا بـ 5- HT و BDNF في الحصين. لا تزال الآلية المحددة للعلاقة غير واضحة وتحتاج إلى مزيد من التدقيق. بخلاف ذلك ، تشير النتائج أيضًا إلى أنه من الصعب للغاية بالنسبة لغالبية الأجناس المعدلة التي تسببها TG أن تؤثر بشكل مباشر على مستويات HT 5- في الحُصين. لشرح كيفية تأثير التغييرات في تكوين ميكروبيوتا الأمعاء على مستوى الحُصين 5- بعد علاج TG ، استحوذت العلاقة المعقدة التي تربط استقلاب التربتوفان ، ومحور HPA ، والسيتوكينات الالتهابية ، و HT 5- على انتباهنا. التربتوفان هو حمض أميني أساسي للبشر وأقل من 1 في المائة يستخدم في تخليق البروتين ، مع تحويل الغالبية (أكثر من 90 في المائة) بواسطة IDO1 و tryptophan 2 ، 3- ديوكسجيناز 2 (TDO2) إلى كينورينين ، وتقريباً 5 في المائة مدفوعة بتريبتوفان هيدروكسيلاز أسفل مسار السيروتونين (دوان ، وآخرون ، 2018). يعتمد مستوى 5- HT في الدماغ إلى حد كبير على توافر التربتوفان المحيطي ، بالنظر إلى أن التربتوفان ينتقل إلى الدماغ عبر ناقلات الأحماض الأمينية المحايدة (دوان وآخرون ، 2018). IDO1 ، إنزيم يحد من المعدل في الخطوة الأولى من مسار kynurenine ، يتم تحفيزه بشكل أساسي عن طريق IFN- ، والسيتوكينات الأخرى المسببة للالتهابات ، مثل IL -1 و TNF- (Kennedy et al. ، 2017) ، التي ثبت أنها مرتبطة بميكروبات الأمعاء في دراستنا. كما ورد ، يتم استقلاب المزيد من التربتوفان من خلال مسار الكينورينين ، مما يقلل بشكل تنافسي من تحويل التربتوفان إلى 5- HT ، ويربط بـ HT 5- المنخفض الموجود بشكل شائع في الاكتئاب (O'Mahony et al.، 2015). وبالتالي ، فإن مستويات التربتوفان المنخفضة ومستويات Kyn / Trp الأعلى شائعة وتتزامن مع زيادة خطر الإصابة بمزاج اكتئابي. بعد تناول TG ، تم تثبيط الإفراط في التعبير عن IDO1 في القولون ، مما أدى إلى زيادة مستويات التربتوفان في المصل وانخفاض في Kyn / Trp في المصل ، مما كشف الارتباط المحتمل بين ميكروبيوتا الأمعاء ومستوى Hippocampus 5- المتأثر بـ TG. وفي الوقت نفسه ، فإن BDNF ، أحد أفراد عائلة neurotrophin ، ضروري لتمايز الخلايا ، وبقاء الخلايا العصبية ، وتشكيل المشابك ، وعمليات المرونة العصبية في الاكتئاب (Greenberg et al. ، 2009). أظهرت الدراسات الحديثة أن BDNF وجد أنه مرتبط ارتباطًا وثيقًا بوظيفة الحاجز المخاطي المعوي وميكروبات الأمعاء (مقصود وستون ، 2016). بالإضافة إلى ذلك ، تم الإبلاغ عن أن التغييرات في ميكروبيوتا الأمعاء تمتلك القدرة على زيادة مستويات التعبير BDNF وبالتالي التأثير على تطور السلوكيات الشبيهة بالاكتئاب (Du et al. ، 2020). ومع ذلك ، على غرار 5- تباين HT ، كان من المستحيل للغاية بالنسبة لمعظم الأجناس المتغيرة التي تسببها TG في دراستنا أن تؤثر بشكل مباشر على مستويات BDNF في الحُصين ، وتحتاج الرابطة الجزيئية الجوهرية والآلية إلى مزيد من الفحص.

في المقابل ، HT ، مستقلب ميكروبيوتا الأمعاء من TG(مجموع الجليكوسيدات)، أظهر أيضًا تأثيرًا مضادًا للاكتئاب في هذه الدراسة ، وهو ما يتوافق مع نشاطه الوقائي العصبي (Hu et al. ، 2014). من الأمور المثيرة للقلق ، أن HT يمكن أيضًا أن تلطف السيتوكينات المؤيدة للالتهابات ، والهرمونات المرتبطة بمحور HPA و HPG ، وتركيزات Hippocampal 5- HT إلى مستوى مماثل لعناصر التحكم في فئران CUMS ، بينما أثرت معظم الأجناس الميكروبية المعدلة بواسطة HT ارتباطات ضعيفة مع الفهارس الفسيولوجية المذكورة أعلاه ، مما يشير إلى أن ميكروبيوتا الأمعاء قد لا تكون هدفًا للنشاط المضاد للاكتئاب لـ HT. علاوة على ذلك ، قام HT بقمع الإفراط في التعبير عن IDO1 في الحُصين ولكن ليس القولون ، مصحوبًا بزيادة مستويات التربتوفان في المصل. حدوث الفروق الظاهرة بين TG(مجموع الجليكوسيدات)قد يكون HT و HT بسبب الامتصاص الممتاز لـ HT في مجرى الدم وقدرة HT على عبور الحاجز الدموي الدماغي (Robles-Almazan et al. ، 2018) ، مما يشير أيضًا إلى أن القدرة الأيضية القوية لميكروبات الأمعاء هي مهم بشكل خاص في النشاط المضاد للاكتئاب لـ TG ، بالإضافة إلى وظائفه الفسيولوجية. ومن ثم ، فقد أثبتنا بشكل مبدئي أن التفاعل ثنائي الاتجاه للمواد الكيميائية النباتية وميكروبات الأمعاء يلعب دورًا مهمًا في علاج الاكتئاب باستخدام TG (كما هو موضح في الشكل 9).

استنتاج

باختصار ، TG(مجموع الجليكوسيدات)كان مسؤولاً بشكل أساسي عن النشاط المضاد للاكتئاب في التصوير المقطعي المحوسب(سيستانشtubulosa)، مما يعكس التأثيرات التآزرية للجليكوزيدات الفينيليثانويد والقزحية على فرط نشاط محور HPA ، والتهاب عصبي محيطي وخيم ، وأوجه قصور في 5- HT و BDNF في قرن آمون. علاوة على ذلك ، الآلية الجزيئية المحتملة للتأثير المضاد للاكتئاب لـ TG(مجموع الجليكوسيدات)تم تحقيقه من خلال التفاعل ثنائي الاتجاه للمواد الكيميائية النباتية وميكروبات الأمعاء. بالإضافة إلى ذلك ، تحسين محور HPG المكبوت وشذوذ النوكليوتيدات الحلقية بواسطة TG(مجموع الجليكوسيدات)و HT ، التي لم يتم تنظيمها عن طريق العلاج بـ SSRIs ممثلة بالفلوكستين ، أشارت إلى الميزة المميزة لـ CT في علاج الاكتئاب. تمثل هذه التعديلات استراتيجية واعدة لعلاج الاكتئاب باستخدام التصوير المقطعي المحوسب(سيستانشtubulosa) والأدوية العشبية التقليدية المماثلة.

الكاتب الاشتراكات

صممت XL و YP و LF التجارب وتحليل البيانات. أجرى LF و JW التجربة وقاموا بتحليل البيانات. صاغ LF و XL المخطوطة. ساهم PM في التجربة الحيوانية واختبار العينات ، وساهم LZ في تحليل تكوين ميكروبيوتا الأمعاء. تم إنشاء جميع البيانات داخليًا ، ولم يتم استخدام مصنع ورق. يوافق جميع المؤلفين على تحمل المسؤولية عن جميع جوانب العمل بما يضمن النزاهة والدقة.

إعلان تضارب المصالح

يعلن المؤلفون أنه لا يوجد تضارب في المصالح.

شكر وتقدير

تم دعم هذا العمل من خلال منح من المشروع الوطني للبحث والتطوير (2017YFC1702400).

المواد التكميلية

يمكن العثور على المواد التكميلية المرتبطة بهذه المقالة ، في النسخة عبر الإنترنت ، على doi: 10.1016 / j.phymed.2021.153471.

من: 'مجموع الجليكوسيدات من ينبعسيستانشتوبولوساالتخفيف من السلوكيات الشبيهة بالاكتئاب: التفاعل ثنائي الاتجاه للمواد الكيميائية النباتية وميكروبات الأمعاء عن طريقلي فان وآخرون

---طب النبات 83 (2021) 153471 / https://doi.org/10.1016/j.phymed.2021.153471