اتصال:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساب: 008618081934791

المتغير الجيني MicroRNA ‑ 499a (rs3746444A / G) والقابلية للإصابة بالنوع الثاني من مرض السكري المرتبط بمرض الكلى في نهاية المرحلة

منال س فوزي وآخرون

الملخص

اعتلال الكلية السكري (DN) هو عامل خطر رئيسي للمرحلة النهائيةكلويمرض(الداء الكلوي بمراحله الأخيرة). قد تكون MicroRNAs (miRNAs / miRs) ومتغيراتها متورطة في الصحة والمرض ، بما في ذلك DN. هدفت الدراسة الحالية إلى التحقيق في ارتباط الجين ميرنا ‑ 499a (MIR499A) A / G لمتغير منطقة البذور (rs3746444) مع الداء الكلوي بمراحله الأخيرة المرتبط بـ DN(المرحلة النهائيةكلويمرض)القابلية للإصابة في مرضى السكري وتحديد ما إذا كان هناك ارتباط بين الأنماط الجينية المختلفة والمختبر والبيانات السريرية للمرضى. أجريت دراسة تجريبية لحالة وضوابط على 180 مريضًا بالغًا مصابًا بداء السكري من النوع 2. ما مجموعه 90 مريضا مع الداء الكلوي بمراحله الأخيرة (الداء الكلوي بمراحله الأخيرة) (المرحلة النهائيةكلويمرض)على غسيل الكلى المنتظم تم اعتباره كحالات ، واعتبر مرضى السكري البالغون 90 عامًا ، والجنس ، والعرق ، المصابون بالبول الزلالي الطبيعي كضوابط. تم إجراء التنميط الجيني MIR499A باستخدام مقايسة تمييز الأليل TaqMan Real-Time. أظهرت النتائج أن متغير MIR499A rs3746444 * G يمنح القابلية لتطوير الداء الكلوي بمراحله الأخيرة تحت السيطرة المشتركة [(نسبة الأرجحية (فاصل الثقة 95 بالمائة): 2.49 (1.41-3.89) و 2.41 (1.61-6.68) للمقارنة متغايرة الزيجوت ومتماثلة اللواقح ، على التوالي] ، السائدة [2.30 (1.18‑3.90)] والنماذج الأليلية [1.82 (1.17‑2.83)] لم تظهر الأنماط الجينية المختلفة للمتغير المحدد ارتباطات معنوية مع العيادة البيانات المختبرية للمرضى الخاضعين للدراسة أو miR‑ المنتشر 499a مستويات البلازما.في الختام ، اقترحت نتائج الدراسة الحالية أن MIR499A rs3746444 قد يكون متغير حساسية لـ DN المرتبط بـ ESRD في مجتمع الدراسة ، ومع ذلك ، هناك ما يبرر دراسات حجم العينة الأكبر مع الأعراق المختلفة للتحقق من هذه النتائج.

يمكن علاج القسطرةكلويمرض

مقدمة

اعتلال الكلية السكري (DN) - المرحلة النهائية المصاحبةكلويمرض(الداء الكلوي بمراحله الأخيرة) هو مصدر قلق متزايد للصحة العامة في جميع أنحاء العالم (1). على مدى العقود الثلاثة الماضية ، الداء الكلوي بمراحله الأخيرة المرتبط بـ DN(المرحلة النهائيةكلويمرض) has been identified as a major cause for dialysis in several countries, including Saudi Arabia, in which type 2 diabetes mellitus (T2DM) accounts for >33 في المائة من جميع حالات الداء الكلوي بمراحله الأخيرة (1،2). حددت العديد من الدراسات الواعدة الجينات المرتبطة بحدوث وتطور DN ، بما في ذلك الجينات المرتبطة بـ microRNAs (miRNAs / miRs) (3،4). هذه العائلة من RNAs غير المشفرة محفوظة بشكل كبير ، خاصة بالأنسجة ، وقصيرة الطول (20-24 نيوكليوتيدات). تلعب miRNAs أدوارًا رئيسية في العديد من الحالات الفسيولوجية والمرضية في الأعضاء البشرية ، بما في ذلكالكلى. على سبيل المثال ، تنظيم miR ‑ 192 و miR ‑ 194 و miR ‑ 204 و miR ‑ 215 و miR ‑ 216 وتقليل تنظيم miR ‑ 133a و miR ‑ 133b و miR ‑ 1d و miR ‑ 296 و miR ‑ 1a و miR وقد لوحظ ‑122 و miR ‑ 124a في الإنسانالكلى(5). أيضًا ، تم الإبلاغ عن أن miR ‑ 192 أعلى بمقدار 20 ضعفًا في القشريةالكلىالأنسجة مقارنة بالنخاعالكلىالنسيج ، حيث يكون متورطًا في تنظيم نقل الصوديوم ؛ بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أن يقمع miR ‑ 155 التعبير عن مستقبل الأنجيوتنسين 2 من النوع 1 ، مما قد يؤثر على ضغط الدم (5،6). من خلال الارتباط بأهداف mRNA ، تتمتع miRNAs بالقدرة على التسبب في قمع متعدية ، وزعزعة استقرار mRNA ، و / أو تدهور (7). قد تتأثر الديناميكا الحرارية للتفاعلات المستهدفة لـ miRNA-mRNA بتعدد أشكال النوكليوتيدات المفردة (SNPs) التي تحدث في السلائف ‑ miRNA (قبل ‑ miRNAs) ، مما يؤدي إلى خلل في التنظيم الجيني المستهدف وبالتالي اختلافات النمط الظاهري أو القابلية للمرض (8). يقع جين miRNA ‑ 499a (MIR499A) في جين عضلة القلب 7B الميوسين البشري ثقيل السلسلة على كروموسوم 20q11. 22 34990376 - 34990497 (زائد) ويتكون من إكسون واحد يشفر نسخة واحدة (MI0003183). يبلغ طوله 122 زوجًا قاعديًا وقد تم الإبلاغ عن كونه علامة على إصابة خلايا عضلة القلب (9). على الرغم من أن عدد الدراسات التي تركز على الدور الدقيق لـ miR ‑ 499a في التسبب في المرض وتطور الداء الكلوي بمراحله الأخيرة بسبب DN محدود ، فقد تم اقتراح miR ‑ 499a للتأثير على العديد من العمليات البيولوجية ، مثل الشيخوخة الخلوية والالتهاب وموت الخلايا المبرمج والمناعة. الاستجابة (10) ، التي قد تلعب أدوارًا في التولد الحيوي للدخول الكلوي بمراحله الأخيرة (الجدول SI) (11-14). علاوة على ذلك ، تم الإبلاغ سابقًا عن أن تنظيم miR ‑ 499a قد ينظم مقاومة الأنسولين وتكوين السكر وتعديل إشارات الأنسولين عن طريق تثبيط تجانس الفوسفاتيز والتنسين (15).

متغير شائع (rs3746444) ، والذي يقع داخل منطقة البذور miR ‑ 499a ‑ 3p AC (A / G) UCAC في الموضع 20: 34،990،448 (GRCh38) ، تم الإبلاغ عن ارتباطه بالعديد من الأمراض ، لا سيما في الشرق الأوسط السكان ، مثل أمراض القلب والأوعية الدموية (9) وأمراض المناعة الذاتية (16) والسرطان (17). في دراستنا السابقة ، تم تحديد عدم انتظام كبير في تعميم مستويات miR ‑ 499a في الداء الكلوي بمراحله الأخيرة المرتبط بـ DM(المرحلة النهائيةكلويمرض)الفوج (18). لذلك ، هدفت الدراسة الحالية إلى استكشاف الارتباط بين متغير منطقة البذور MIR499A (A / G) (rs3746444) مع حساسية الداء الكلوي بمراحله الأخيرة المرتبطة بـ DN في المرضى الذين يعانون من T2DM وتحديد ما إذا كان هناك ارتباط بين الأنماط الجينية المختلفة والمرضى. العيادة ‑ بيانات المختبر. على حد علمنا ، هذه هي الدراسة الأولى التي تبحث في الارتباط المحتمل للمتغير المحدد مع حساسية الداء الكلوي بمراحله الأخيرة في عينة مريض من الشرق الأوسط.

المواد والأساليب

دراسة السكان.

ما مجموعه 90 مريضا على التوالي مع الداء الكلوي بمراحله الأخيرة المرتبطة T2DM(المرحلة النهائيةكلويمرض)على غسيل الكلى المنتظم (ثلاث مرات / أسبوع) تم تجنيدهم كمجموعة مرضى الدراسة الحالية. كان المرضى يحضرون إلى مركز أمراض الكلى التابع لمحمد بن سعود الكبير لغسيل الكلى في مستشفى عرعر المركزي (عرعر ، المملكة العربية السعودية). تم وصف معايير التضمين / الاستبعاد لاختيار مجموعة مرضى الداء الكلوي بمراحله الأخيرة بالتفصيل في عملنا السابق على نفس الداء الكلوي بمراحله الأخيرة(المرحلة النهائيةكلويمرض)مجموعة المرضى (18). المرضى الذين يعانون من أي مرض مزمن واضطرابات المناعة الذاتية والسرطانات وكلويمرضبخلاف اعتلال الكلية المصاحب لمرض السكري (يتم تشخيصه عن طريق خزعة الكلى وفقًا للبروتوكولات القياسية المحلية المعتمدة من المعايير الدولية لتشخيص غير المصابين بالسكريكلويمرض) (19) مستبعدة. نظرًا لأنه من المحتمل جدًا ، في النهاية ، أن يصاب جزء كبير من المرضى الذين تم تشخيص إصابتهم بالسكري مبكرًا بالداء الكلوي بمراحله الأخيرة(المرحلة النهائيةكلويمرض)، المرضى الذين يعانون من T2DM مع مدة مطابقة لمرض السكري وبيلة ​​الألبومين الطبيعية (نسبة الألبومين البولي / الكرياتينين ،<30 µg/mg)="" (20,21)="" were="" considered="" as="" the="" control="" group.="" all="" biomedical="" research="" involving="" human="" participants="" conformed="" to="" the="" guidelines="" of="" the="" helsinki="" declaration.="" the="" protocol="" of="" the="" present="" study="" was="" approved="" by="" the="" research="" ethics="" committees="" of="" northern="" border="" university="" (approval="" no.="" 6/340/h),="" and="" written="" informed="" consent="" was="" obtained="" from="" all="">

يمكن علاج القسطرةكلويمرض

التحليل المختبري.

تم جمع عينات وريدية صائمة على أنابيب مفرغة وحمض إيثيلين أمينيتراسيتيك قبل جلسة غسيل الكلى الثانية المحددة للمرضى الذين يعانون من الداء الكلوي بمراحله الأخيرة(المرحلة النهائيةكلويمرض). تم فصل المصل بالطرد المركزي لمدة 12 دقيقة عند 1300 x جم عند درجة حرارة الغرفة ، مباشرة من الأنبوب السابق للتحليل الكيميائي الحيوي باستخدام مجموعات متاحة تجارياً للجلوكوز (القط رقم 44044831190) ،الكلىاختبارات الوظائف [كريتي ‑ تسعة (القط رقم 4810716190) واليوريا (القط رقم 4460715190)] وتنميط الدهون [الكوليسترول الكلي (القط. رقم 3039773190) ، ثلاثي الجلسرين (القط. رقم 20767107322) c (cat. no. 7528566190) and LDL-c (cat. no. 7005717190)] على محلل Cobas Integra Biochemical (جميع Roche Diagnostics GmbH).

التنميط الجيني لـ MIR499A (rs3746444). تم استخراج الحمض النووي الجينومي من الدم الكامل باستخدام مجموعة أدوات Wizard Genomic DNA Purification (القط رقم A1120 ؛ Promega Corporation) وفقًا لبروتوكول الشركة المصنعة ، متبوعًا بتركيز الحمض النووي وتقييم النقاء باستخدام مقياس الطيف الضوئي NanoDrop ND ‑ 1000 (تقنيات NanoDrop ؛ Thermo Fisher Scientific، Inc.) و agarose gel (2٪) الكهربائي لتقييم سلامة الحمض النووي. تم تخزين العينات في وقت لاحق عند -20 درجة مئوية حتى وقت التنميط الجيني. تم إجراء اختبار تعدد الأشكال MIR499A (rs3746444 ، معرف الفحص: C _2142612_30) ​​باستخدام PCR في الوقت الحقيقي لتمييز أليل TaqMan مع مقاييس الجودة كما هو موضح سابقًا (16). باختصار ، تم تشغيل PCR في حجم تفاعل 25 ميكرولتر يحتوي على gDNA (20 نانوغرام) مخفف إلى 11.25 ميكرولتر مع nucleases ‑ ماء خال ، و 12.5 ميكرولتر TaqMan Universal PCR Master Mix (2X) و 1.25 ميكرولتر 20 × TaqMan SNP Assay المقدم من نفس المورد. تم تشغيل عينات من إنزيم no-template و no-polymerase في كل مرة مع عينات الدراسة كعناصر تحكم سلبية. تم إجراء التنميط الجيني بطريقة أعمى حالة الحالة / التحكم. تم إجراء تضخيم PCR على نظام StepOne Real-Time PCR (النظم الحيوية التطبيقية ؛ Thermo Fisher Scientific ، Inc.) ، باستخدام الشروط التالية: تعليق أولي على مرحلتين (دقيقتان عند 50 درجة مئوية ، و 10 دقائق عند 95 درجة مئوية) ، متبوعًا بدورة 40 من خطوتين PCR (تمسخ لمدة 15 ثانية عند 95 درجة مئوية والصلب / التمديد لمدة دقيقة واحدة عند 60 درجة مئوية). تم تحديد التمييز الأليلي من خلال تحليل ملفات بيانات التألق من كل عملية تشغيل باستخدام برنامج استدعاء الأليل الآلي (SDS الإصدار 1.3.1 ؛ النظم الحيوية التطبيقية ؛ Thermo Fisher Scientific ، Inc. ؛ الشكل S1). كان معدل استدعاء النمط الجيني الإجمالي 100 بالمائة.

تحليل احصائي.

أظهرت حسابات حجم العينة والطاقة باستخدام برنامج G power ‑ 3 (http://www.gpower.hhu.de/) أنه مع تصميم الدراسة المحدد ، ومعدلات الخطأ المسموح بها ، والخطأ =0. 05 ، تأثير متوسط الحجم =0. 5 ، وحجم عينة 90 / مجموعة ، قد ينتج عنه قوة الدراسة بنسبة 91 بالمائة. تم تقييم توزيع البيانات وتجانس التباين من خلال اختبار شابيرو-ويلك واختبار ليفين ، على التوالي. يتم التعبير عن البيانات المستمرة على أنها المتوسط ​​± الانحراف المعياري ، ويتم تقديم المتغيرات الفئوية كأعداد تردد. تمت مقارنة البيانات باستخدام اختبار χ2 ، بينما تم تطبيق اختبار الطالب غير المزاوج أو اختبار ANOVA أحادي الاتجاه أو Kruskal-Wallis لمقارنة المتغيرات المستمرة. تم تحليل الانحراف في توزيع النمط الجيني المرصود عن توازن هاردي واينبرغ باستخدام χ2 goodness ‑ of fit باستخدام الموسوعة عبر الإنترنت لعلم الأوبئة الجينية (http://www.oege.org/). تم حساب نسب الأرجحية المعدلة الخاصة بالنمط الجيني (ORs) وفواصل الثقة 95 بالمائة (CIs) للنماذج الجينية المختلفة. تم تعديل متغيرات الدراسة بما في ذلك العمر والجنس وعدد جلسات غسيل الكلى ووجود ارتفاع ضغط الدم ومدة المرض. ص<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="" difference.="" spss="" version="" 23="" (ibm="" corp.)="" was="" used="" for="" the="" statistical="">

متغير MIR499A (rs3746444) في تحليل السيليكو.

متغير MIR499A (rs3746444) في تحليل السيليكو. تم إجراء التحليل الهيكلي والوظيفي للجينات باستخدام قاعدة بيانات Ensembl Genomic (ensembl.org) و miRBase.org ؛ تم إجراء التنبؤ المستهدف باستخدام DIANA ‑ micro T ‑ CDS v5. 0 (http: //diana.imis.athenaovation.gr/DianaTools/index.php؟r=microT_ CDS / index) و miRBase (http://www.mirbase.org/) و DIANA ‑ TarBase v7. 0 خوارزمية (http://diana.imis.athena‑innovation.gr/DianaTools/index.php ؟ r=tarbase / index)؛ وتجميع التعليقات التوضيحية وتحليل إثراء المسار باستخدام miRPath v3. 0 (http://www.microrna.gr/miRPathv3) وتم تفصيلها جميعًا على نطاق واسع في دراساتنا السابقة (8 ، 12). تمت مقارنة أهداف miR ‑ 499a المتوقعة مع وجود أليلين A و G باستخدام برنامج miR2Go (//compbio.uthsc.edu/miR2GO) بمستوى ترشيح هرمي متوسط ​​(P<>

نتائج

خصائص مجتمع الدراسة.

يتم تلخيص الخصائص الأساسية لموضوعات الدراسة في الجدول الأول. متوسط ​​عمر المرضى الذين يعانون من الداء الكلوي بمراحله الأخيرة(المرحلة النهائيةكلويمرض)كان 46.6 ± 12.3 عامًا للرجال و 47. 0 ± 14.7 عامًا للنساء. كان متوسط ​​مدة غسيل الكلى قابلة للمقارنة لكلا الجنسين في المشاركين في الدراسة. لم تكن هناك فروق خاصة بالجنس في الخصائص السريرية والكيميائية الحيوية للمشاركين ، باستثناء تلك المرتبطة بمعلمات ملف تعريف الدهون ، والتي كانت أسوأ في المرضى الإناث مقارنة مع الرجال (الجدول 1).

متغير MIR499A (rs3746444) في مجتمع الدراسة.

في مجتمع الدراسة ، اتبعت ترددات النمط الجيني MIR499A (rs3746444) SNP توازن هاردي واينبرغ (P =0. 149 في الضوابط و P =0. 398 مريض داخلي). ترددات الأليل الصغرى لـ rs3746444 * G كانت 0. 28 و 0. 42 في مجموعة التحكم والمرضى الذين يعانون من الداء الكلوي بمراحله الأخيرة(المرحلة النهائيةكلويمرض)، على التوالى. لوحظ اختلاف كبير في الأنماط الجينية MIR499A بين مجموعات الدراسة. كان تواتر النمط الجيني GG 11.1 في المائة في الضوابط ، مقارنة بـ 20 في المائة في مرضى الداء الكلوي بمراحله الأخيرة(المرحلة النهائيةكلويمرض)(ص =0. 030). حمل أليل rs3746444 * G منح ما يقرب من 2 أضعاف زيادة في القابلية لتطور الداء الكلوي بمراحله الأخيرة(المرحلة النهائيةكلويمرض)، مع OR (95 بالمائة CI) 1.82 (1.17‑2.83) تحت نموذج الارتباط الجيني الأليلي. بشكل ثابت ، كان الأفراد متماثلين الزيجوت / متغاير الزيجوت (rs3746444 * GG / AG) أكثر عرضة لتطوير الداء الكلوي بمراحله الأخيرة في إطار المقارنة متماثلة اللواقح / متغايرة الزيجوت والنماذج السائدة [GG مقابل AA: OR =2. 41 ، 95 بالمائة CI: 1.61‑6.68 ؛ AG مقابل AA: أو =2. 49 ، 95 بالمائة CI: 1.41‑3.89 ؛ (AG plus GG) مقابل AA: OR =2. 30 ، 95 بالمائة CI: 1.18‑3.90 ؛ الجدول الثاني].

البديل MIR499A (rs3746444) والعيادة الخصائص المختبرية للمرضى الذين يعانون من الداء الكلوي بمراحله الأخيرة(المرحلة النهائيةكلويمرض). عند التحقيق في الارتباط بين الأنماط الجينية المختلفة للمتغير المحدد والخصائص السريرية والكيميائية الحيوية لمجموعة المرضى ، لم يتم إظهار أي ارتباطات مهمة ، كما هو موضح في الجدول 3.

تأثير MIR499A (rs3746444) على بنية الجينات ووظيفتها.

على الرغم من أن miR ‑ 499a تشكل حلقة شعر ثانوية مع تسلسلات تكميلية في هيكلها (الشكل S2) ، فقد تم التنبؤ باستهداف جينات مختلفة بواسطة كلا الشكلين الناضجين اللذين تم تصنيعهما من أي ذراع. تم توقع تأثر ما مجموعه 1890 جينًا بـ miR ‑ 499a (919 جينًا بنسبة 3p ، و 810 × 5p ، و 161 جينًا لكليهما) ، كما هو مفصل سابقًا (8). أهم مسارات موسوعة كيوتو للجينات والجينوم (KEGG) المرتبطة بأهداف miR ‑ 499a التي قد تكون متورطة في تطور DN إلى الداء الكلوي بمراحله الأخيرة(المرحلة النهائيةكلويمرض)ملخصة في الجدول الرابع.

قد يؤدي وجود rs3746444 SNP داخل منطقة البذور من حبلا miR ‑ 499a للركاب إلى تعطيل الأهداف وإنشاء مجموعة مختلفة من الجينات (8،16). أيضا ، قد تقصر بنية الحلقة الجذعية ؛ وبالتالي ، يؤثر على معالجة ميرنا بأكمله.

أبلغت دراستنا السابقة عن خلل في تنظيم مستويات الدورة الدموية لـ miR ‑ 499a في نفس مجموعة المرضى (18) ؛ لذلك ، ركزت الدراسة الحالية على تحديد ما إذا كانت مستويات الدورة الدموية هذه قد أظهرت اختلافات كبيرة بين الأنماط الجينية المختلفة لنفس الجين. ومع ذلك ، لم تكشف النتائج عن ارتباطات مهمة بين الأنماط الجينية المختلفة لـ MIR499A (rs3746444) ومستويات البلازما miR ‑ 499a المتداولة التي تم اكتشافها مسبقًا باستخدام طريقة Livak (22) (P =0. 173 ؛ الشكل 1) .

يمكن علاج القسطرةكلويمرض

مناقشة

تم الإبلاغ عن تعدد الأشكال الأكثر شيوعًا للتنوع الجيني المرتبط بالتنوع السكاني ، وقابلية المرض ، والاستجابات العلاجية الفردية (23). قد تؤثر SNPs على تعبير miRNA و / أو النضج على مستوى نسخ النسخة الأولية ، أو المعالجة اللاحقة للنسخ النصية للنصوص الأولية أو ما قبل miRNAs ، أو تؤثر على تفاعلات miRNA-mRNA (24).

أظهرت الدراسة الحالية أن حمل أليل rs3746444 * G يمنح القابلية للإصابة بالداء الكلوي بمراحله الأخيرة.(المرحلة النهائيةكلويمرض)in patients with DM compared with non‑carriers under the allelic, co‑dominant, and dominant genetic association models. Results of our previous study demonstrated that the rs3746444 polymorphism results in an A>عدم تطابق G في منطقة جذع السلائف miR ‑ 499a (تقع مقابل التسلسل الناضج) ، مما يؤثر على منطقة البذور الناضجة miR ‑ 499a ‑ 3p المتورطة في ربط miRNA ‑ mRNA الصحيح ، مع الاضطراب اللاحق وإنشاء عدة أهداف (8). تنتج ناقلات الأنماط الجينية متماثلة الزيجوت (AA أو GG) شكلين ناضجين ، miR ‑ 499a ‑ 5p و miR ‑ 499a ‑ 3p * A أو * G ، على التوالي ، مع كل لوحة خاصة به من الجينات المستهدفة. بالمقارنة ، تنتج ناقلات الزيجوت غير المتجانسة ثلاثة أشكال ناضجة ، miR ‑ 499a ‑ 5p و ‑3p * A و ‑3p * G ، مع ثلاث مجموعات فرعية من الجينات المستهدفة. كشفت تحليلات السيليكون لهذه الدراسة أن وجود هذه الأليلات المختلفة قد يعطل ويخلق 667 و 744 هدفًا جينيًا ، على التوالي. من بين أهداف الجينات التي تم التحقق منها والتي تم التحقق منها هي البروتين النووي 4 ، البروتين المتفاعل للمستقبل النووي ‑ 1 ، البروتين المشابه لـ Bcl 2 14 ، الكيموكين (C ‑ C motif) ligand 8 ، والمنطقة المحددة للجنس Y ‑ box 4 (20) . على حد علمنا ، هذه هي الدراسة الأولى للتحقيق في متغير MIR499A rs3746444 لقابلية الداء الكلوي بمراحله الأخيرة في المرضى الذين يعانون من مرض السكري في عينة من سكان الشرق الأوسط. تمشيا مع نتائج الدراسة الحالية ، أفاد Misra et al (25) أن الأنماط الجينية متغايرة الزيجوت والمتماثلة اللواقح من MIR ‑ 499A rs3746444 تمنح خطر تطور الداء الكلوي بمراحله الأخيرة ، والذي تسببه اضطرابات أخرى بصرف النظر عن DN ، وقد يكون مرتبطًا بـ ما يقرب من 3 أضعاف زيادة خطر رفض الطعم الخيفي الحاد في سكان شمال الهند (25).

بالنظر إلى أن SNPs في ما قبل miRNAs قد تغير معالجة و / أو تعبير miRNA ، عند تحليل ارتباط تعدد الأشكال MIR499A مع مستويات البلازما المتداولة miR ‑ 499a وخصائص المختبر العيادة المختلفة للمرضى ، لم يلاحظ أي ارتباطات مهمة ، كما هو موضح سابقًا. يُفترض أن وجود متغير miR ‑ 499a قد يؤثر على الديناميكا الحرارية لتفاعلات RNA-RNA وتقارب هذه الميرنا من خلال التداخل مع الارتباط الأمثل لاستهداف mRNAs ، مما يؤدي إلى خلل تنظيم الجينات المستهدفة التي تتوسط قابلية المرض للإصابة بالمرض. الداء الكلوي بمراحله الأخيرة(المرحلة النهائيةكلويمرض)دون التأثير على التعبير النسبي و / أو النمط الظاهري للمرض (22). كشفت تحليلات السيليكو لهذه الدراسة عن بعض أهم مسارات KEGG التي تتضمن أهداف miR ‑ 499a والتي قد تكون متورطة في تطور DN إلى الداء الكلوي بمراحله الأخيرة (26-32). على سبيل المثال ، كان مسار (TGF‑ 1) متورطًا في أمراض مسببات DN (26،28). ينشط مسار TGF‑ 1 مسارات الإشارات الرئيسية ، بما في ذلك مسار PI3K / AKT الذي يتوسط الفسفرة وتعطيل FOXO النسخي ، مما يؤدي إلى الإجهاد المؤكسد ، وتوسع الخلية ميسانجي ، وتراكم بروتينات المصفوفة خارج الخلية ، والمكونات الرئيسية لـ DN المرتبطة المزمنةالكلىمرض (26). يعد تنظيم نشاط مستقبل عامل نمو البشرة (ErbB) مهمًا للتيروزين كيناز في التوسط في العديد من مضاعفات مرض السكري ، بما في ذلك أمراض الكلى والتليف القلبي والخلل في الأوعية الدموية (29). علاوة على ذلك ، كان دور مسار TNF في تطور DN في الفئران المصابة بداء السكري ونماذج الجرذان واضحًا. على سبيل المثال ، تم الإبلاغ عن استخدام بروتين الاندماج ‑ 2 لمستقبل TNF القابل للذوبان لتحسين المرحلة المبكرة من DN في نموذج DM لفأر KK ‑ Ay (30). أيضًا ، تم العثور على مثبط TNFR ‑ Fc TNF لتخفيف تضخم الكلى دون التأثير على ملف التمثيل الغذائي في الفئران المصابة بداء السكري المستحث (31). وقد تورط mTOR في الحفاظ على وظيفة الخلايا الكبيبية نشوئها ؛ ساهم زيادة النشاط في تضخم الكبيبات وفرط الترشيح المرتبط بـ DN التدريجي (32).

بشكل ملحوظ ، تم استهداف المسارات المذكورة أعلاه في العديد من التحقيقات التجريبية للتحقق من صحة تأثيرها العلاجي في DN (29،30،33،34). أبلغ زيادة وآخرون (33) عن تحسن في معدلات الترشيح الكبيبي الناجم عن الأجسام المضادة أحادية النسيلة المضادة لـ TGF‑ في الفئران المصابة بداء السكري ديسيبل / ديسيبل (33). علاوة على ذلك ، تم الإبلاغ عن العلاج طويل الأمد للفئران المصابة بداء السكري الناجم عن الستربتوزوتوسين باستخدام AG825 ، وهو مثبط محدد لمستقبلات التيروزين ‑ بروتين كيناز ErbB 2 ، لتصحيح فرط نشاط السرير الوعائي المساريقي المروي إلى النوربينفرين والاستجابة الموهنة لـ كرباكول (29). أدى تثبيط TNF‑ مع بروتين الاندماج (TNFR) 2 القابل للذوبان ، etanercept ، إلى تحسين تقدم المرحلة المبكرة من DN في نموذج السكري الذي تم إنشاؤه في فأر KK ‑ A (y) ، وذلك بشكل أساسي من خلال تثبيط مضاد الالتهاب. عمل مسار TNF‑ ‑TNFR2 الكلوي (30). علاوة على ذلك ، فإن الراباميسين ، المركب الأول الذي تم الإبلاغ عنه لتثبيط mTOR ، يثبط الفسفرة المستحثة بالجلوكوز لـ p70S6 كيناز وركائزته ، بروتين الريبوسوم S6 ، في الخلايا المسراق ، مما يخفف الاضطرابات المورفولوجية والوظيفية لمرضى السكري.الكلىفي نموذج الماوس T2DM (34).

تمشيا مع نتائج الدراسة الحالية ، كشف Ciccacci وآخرون (35) عن تورط miR ‑ 499a في حساسية DN في مجموعة T2DM الإيطالية (35). كشفت نتائج الدراسة المذكورة أعلاه أن هذا الارتباط كان بسبب تأثير miR ‑ 499a على اثنين من اللاعبين الأبوطوتيك ، كالسينيورين والبروتين المرتبط بالدينامين ، والذي تسبب في خلل التنظيم miR ‑ 499a في خلل في الميتوكوندريا وموت الخلايا المبرمج ، مما قد يكون قد ساهم في التعرض للمرض. (33). والجدير بالذكر أن العمليات الأخيرة قد تورطت في DN (36،37) ، والتي قد تدعم جزئيًا ارتباط متغير miR ‑ 499a مع الداء الكلوي بمراحله الأخيرة(المرحلة النهائيةكلويمرض)القابلية للتأثر في الفوج الحالي. ومع ذلك ، هناك حاجة لعدد متزايد من الدراسات التي تنطوي على أفواج مستقلة أكبر مع أعراق مختلفة لتأكيد نتائج الدراسة الحالية

في الختام ، على حد علمنا ، كانت الدراسة الحالية هي الأولى التي تقترح تأثير متغير منطقة البذور MIR499A A / G (rs3746444) على الداء الكلوي بمراحله الأخيرة المرتبط بـ DN(المرحلة النهائيةكلويمرض)قابلية. قد يتم تضمينه في قائمة جينات القابلية الجزيئية التي قد تدعم التقسيم الطبقي لخطر المريض وتطبيقات القياس الوقائي المبكر. ومع ذلك ، تجدر الإشارة إلى أنه لا يمكن استبعاد الآثار الضمنية المحتملة الأخرى بشكل قاطع ، مثل التعرض لعوامل بيئية مختلفة (مثل نوع العلاج أو التغذية) والعوامل الوراثية الإضافية. هناك ما يبرر مزيدًا من حجم العينة الأكبر ودراسات التكرار طويلة المدى للمتابعة ، خاصة في المجموعات السكانية ذات الأعراق المختلفة. هناك حاجة أيضًا إلى دراسات وظيفية للتحقق من دور miR ‑ 499a في الداء الكلوي بمراحله الأخيرة المرتبط بمرض الداء الكلوي بمراحله الأخيرة.

يمكن علاج القسطرةكلويمرض

مراجع:

1. Sattar A و Argyropoulos C و Weissfeld L و Younas N و Fried L و Kellum JA و Unruh M: جميع أسباب الوفيات المحددة المرتبطة بمرض السكري في مرضى غسيل الكلى السائد. BMC Nephrol 13: 130 ، 2012.
2. السياري أ. أ. شاهين: نهاية المرحلة المزمنةالكلىالمرض في المملكة العربية السعودية. مشهد سريع التغير. سعودي ميد ج 32: 339-346 ، 2011.
3. Mooyaart AL: الارتباطات الجينية في اعتلال الكلية السكري. كلين إكسب نيفرول 18: 197-200 ، 2014.
4. Lu Z و Liu N و Wang F: اللوائح اللاجينية في اعتلال الكلية السكري. J مرض السكري 2017: 7805058 ، 2017.
5. Schena FP و Serino G و Sallustio F: MicroRNAs inالكلىالأمراض: مؤشرات حيوية جديدة واعدة للتشخيص والرصد. زرع الكلى 29: 755-763 ، 2014.
6. Felekkis K و Touvana E و Stefanou Ch و Deltas C: MicroRNAs: فئة موصوفة حديثًا من الجزيئات المشفرة التي تلعب دورًا في الصحة والمرض. Hippokratia 14: 236-240 ، 2010.
7. Mashayekhi S و Saeidi Saedi H و Salehi Z و Soltanipour S و Mirzajani E: تأثيرات تعدد الأشكال miR ‑ 27a و miR ‑ 196a2 و miR ‑ 146a على خطر الإصابة بسرطان الثدي. Br J Biomed Sci 75: 76-81 ، 2018.

8. Toraih EA ، و Hussein MH ، و Al Ageeli E ، و Riad E ، و Abdallah NB ، و Helal GM ، و Fawzy MS: التركيب والتأثير الوظيفي لمتغير منطقة البذور في عائلة MIR ‑ 499 الجينية في الربو القصبي. Respir Res 18: 169 ، 2017.

9. Fawzy MS، Toraih EA، Hamed EO، Hussein MH، and Ismail HM: جمعية التعبير MIR ‑ 499a ومتغير منطقة البذور (rs3746444) مع أمراض القلب والأوعية الدموية في المرضى المصريين. اكتا كارديول 73: 131-140 ، 2018.

10. Wang WJ و Cai GY و Chen XM: الشيخوخة الخلوية والنمط الظاهري الإفرازي المرتبط بالشيخوخة والمزمنالكلىمرض. Oncotarget 8: 64520-64533 ، 2017.
11. ينظم Sluijter JP و van Mil A و van Vliet P و Metz CH و Liu J و Doevendans PA و Goumans MJ: MicroRNA ‑ 1 و ‑499 التمايز والانتشار في الخلايا الأولية لخلايا عضلة القلب المشتقة من الإنسان. Arterioscler Thromb Vasc Biol 30: 859 - 868 ، 2010.
12. Ling TY و Wang XL و Chai Q و Lau TW و Koestler CM و Park SJ و Daly RC و Greason KL و Jen J و Wu LQ وآخرون: تنظيم قناة SK3 بواسطة microRNA ‑ 499 الدور المحتمل في الرجفان الأذيني . إيقاع القلب 10: 1001-1009 ، 2013.
13. Xu Z و Han Y و Liu J و Jiang F و Hu H و Wang Y و Liu Q و Gong Y و Li X: MiR ‑ 135b ‑ 5p و MiR ‑ 499a ‑ 3p يعزز تكاثر الخلايا والهجرة في تصلب الشرايين عن طريق مباشرة استهداف MEF2C. ممثل العلوم 5: 12276 ، 2015.
14. اتحاد علم الوجود الجيني: مورد علم الوجود الجيني: إثراء منجم GOld. الأحماض النووية الدقة 49: D325 D334، 2021.
15. Wang L ، Zhang N ، Pan HP ، Wang Z ، و Cao ZY: MiR ‑ 499‑5p يساهم في مقاومة الأنسولين الكبدي عن طريق قمع PTEN. خلية فيسيول بيوشيم 36: 2357-2365 ، 2015.
16. Toraih EA، Ismail NM، Toraih AA، Hussein MH، and Fawzy MS: السلائف miR ‑ 499a المتغير وليس miR ‑ 196a2 مرتبط بقابلية الإصابة بالتهاب المفاصل الروماتويدي في السكان المصريين. مول تشخيص ثير 20: 279-295 ، 2016.
17. Toraih EA، Fawz MS، Elgazzaz MG، Hussein MH، Shehata RH، and Daoud HG: تحليلات التركيب الوراثي المدمجة لسلائف المتغيرات miRNA196a2 و 499a مع قابلية الإصابة بسرطان الكبد والكلى دراسة أولية. Asian Pac J Cancer السابق 17: 3369‑3375 ، 2016.

18. Fawzy MS، Abu AlSel BT، Al Ageeli E، Al ‑ Qahtani SA، Abdel ‑ Daim MM، and Toraih EA: ملامح تعبير RNA MALAT1 و microRNA ‑ 499a طويلة غير مشفرة في مرضى الداء الكلوي بمراحله الأخيرة الذين يخضعون لغسيل الكلى: تقاطع أولي التحليل المقطعي. Arch Physiol Biochem 126: 172‑182 ، 2020.

19. غني أ. ، الوهيب ، الصحو أ ، وحسين ن: خزعة الكلى في مرضى السكري من النوع 2: دلالات وطبيعة الآفات. آن الطب السعودي 29: 450-453 ، 2009.

20. Nah EH و Cho S و Kim S و Cho HI: مقارنة نسبة الألبومين في البول إلى نسبة الكرياتينين (ACR) بين اختبار شريط ACR والاختبار الكمي في مقدمات السكري ومرض السكري. آن لاب ميد 37: 28-33 ، 2017.
21. فوزي MS و Beladi FIA: رابطة التعبير عن مستقبلات فيتامين د ، VDBP ، وفيتامين د المنتشرة مع شدة اعتلال الكلية السكري في مجموعة من مرضى السكري من النوع 2 السعوديين. مختبر كلين 64: 1623-1633 ، 2018.
22. Livak KJ و Schmittgen TD: تحليل بيانات التعبير الجيني النسبي باستخدام PCR الكمي في الوقت الحقيقي وطريقة 2 (‑Delta Delta C (T)). الطرق 25: 402-408 ، 2001.
23. Shastry BS: SNPs: التأثير على وظيفة الجين والنمط الظاهري. طرق Mol Biol 578: 3-22 ، 2009.
24. Hoffman AE و Zheng T و Yi C و Leaderer D و Weidhaas J و Slack F و Zhang Y و Paranjape T و Zhu Y: MicroRNA miR ‑ 196a ‑ 2 وسرطان الثدي: دراسة الارتباط الجيني والتخليقي والتحليل الوظيفي. الدقة السرطان 69: 5970-5977 ، 2009.
25. Misra MK و Pandey SK و Kapoor R و Sharma RK و Agrawal S: المتغيرات الجينية للجينات ذات الصلة بـ MicroRNA في القابلية للتأثر بالمرحلة النهائية والتنبؤ بهاكلويمرضونتائج الطعم الخيفي الكلوي بين الهنود الشماليين. علم الوراثة الدوائية 24: 442-450 ، 2014.
26. Kato M و Yuan H و Xu ZG و Lanting L و Li SL و Wang M و Hu MC و Reddy MA و Natarajan R: دور مسار Akt / FoxO3a TGF ‑ beta1 بوساطة خلل في الخلية ميسانجيل: آلية جديدة ذات صلة لمرضى السكرالكلىمرض. J Am Soc Nephrol 17: 3325-33335 ، 2006.
27. Qin G، Zhou Y، Guo F، Ren L، Wu L، Zhang Y، Ma X، and Wang Q: إن الإفراط في التعبير عن FoxO1 يخفف من خلل الخلايا المسراق في ذكور الجرذان المصابة بداء السكري. مول إندوكرينول 29: 1080-1091 ، 2015.
28. Chang AS و Hathaway CK و Smithies O و Kakoki M: تحويل عامل النمو 1 واعتلال الكلية السكري. أنا J Physiol Renal Physiol 310: F689 ‑ F696، 2016.
29. Akhtar S، Yousif MH، Dhaunsi GS، Sarkhouh F، Chandrasekhar B، Attur S and Benter IF: تنشيط ErbB2 والإشارات المصب عبر Rho kinases و ERK1 / 2 يساهم في ضعف الأوعية الدموية الناجم عن مرض السكري. PLoS One 8: e67813 ، 2013.

30. Omote K و Gohda T و Murakoshi M و Sasaki Y و Kazuno S و Fujimura T و Ishizaka M و Sonoda Y و Tomino Y: دور مسار TNF في تطور اعتلال الكلية السكري في الفئران KK ‑ A (y). Am J Physiol Renal Physiol 306: F1335 ‑ F1347، 2014.

31. Al Lamki RS و Mayadas TN: مستقبلات TNF: مسارات الإشارات والمساهمة في الخلل الكلوي.الكلىInt 87: 281-296 ، 2015.
32. Gödel M ، Hartleben B ، Herbach N ، Liu S ، Zschiedrich S ، Lu S ، Debreczeni ‑ Mór A ، Lindenmeyer MT ، Rastaldi MP ، Hartleben G ، et al: دور mTOR في وظيفة الخلايا البدائية واعتلال الكلية السكري في البشر والفئران . جي كلين إنفست 121: 2197-2209 ، 2011.

33. Ziyadeh FN و Hoffman BB و Han DC و Iglesias ‑ De La Cruz MC و Hong SW و Isono M و Chen S و McGowan TA و Sharma K: الوقاية طويلة الأمد من القصور الكلوي ، والتعبير الجيني الزائد عن طريق المصفوفة ، والمصفوفة الكبيبية. عن طريق العلاج بأجسام مضادة أحادية النسيلة مضادة للتحويل لعامل النمو بيتا في الفئران المصابة بداء السكري / ديسيبل. Proc Natl Acad Sci USA 97: 8015-8020 ، 2000.

34. Mori H و Inoki K و Masutani K و Wakabayashi Y و Komai K و Nakagawa R و Guan KL و Yoshimura A: يتم تنشيط مسار mTOR بشكل كبير في اعتلال الكلية السكري ولديه إمكانات علاجية قوية. Biochem Biophys Res Commun 384: 471-475 ، 2009.
35. Ciccacci C و Latini A و Greco C و Politi C و D'Amato C و Lauro D و Novelli G و Borgiani P و Spallone V: الارتباط بين تعدد الأشكال MIR499A والاعتلال العصبي السكري في مرض السكري من النوع 2. مضاعفات مرض السكري 32: 11-17 ، 2018.
36. Forbes JM and Thorburn DR: خلل الميتوكوندريا في مرضى السكريالكلىمرض. نات ريف نفرول 14: 291‑312 ، 2018.
37. Flemming NB و Gallo LA و Forbes JM: خلل في الميتوكوندريا وإشارات في مرضى السكريالكلىالمرض: الإجهاد التأكسدي وما بعده. سيمين نفرول 38: 101-110 ، 2018.