يعمل المستخلص الإيثانولي من بذور القرع بيبو L.

1 قسم العلوم الأساسية ، كلية الطب ، جامعة الأميرة نورة بنت عبد الرحمن ، الرياض ، المملكة العربية السعودية ،

2 قسم الأنسجة الطبية وبيولوجيا الخلية ، كلية الطب ، جامعة المنصورة ، المنصورة ، مصر ،

3 قسم التشريح ، كلية الطب ، جامعة المنوفية ، شبين الكوم ، مصر ،

4 قسم العلوم الطبية الأساسية ، كلية الطب والعلوم الطبية بعنيزة ، جامعة القصيم ، بريدة ، المملكة العربية السعودية ،

5 قسم علوم الأحياء ، كلية العلوم ، جامعة الملك عبد العزيز ، جدة ، المملكة العربية السعودية ،

6 قسم تقنية المختبرات الطبية ، كلية العلوم الطبية التطبيقية ، جامعة تبوك ، تبوك ، المملكة العربية السعودية ،

7 قسم الكيمياء الحيوية ، كلية العلوم ، جامعة الملك عبد العزيز ، جدة ، المملكة العربية السعودية ،

8 قسم علم الأنسجة وبيولوجيا الخلية ، كلية الطب ، جامعة أسيوط ، أسيوط ، مصر ،

9- يوسف عبد اللطيف جميل كرسي التطبيقات الطبية النبوية (YAJCPMA) ، كلية الطب ، جامعة الملك عبد العزيز ، جدة ، المملكة العربية السعودية ،

10 قسم أمراض الدم / أورام الأطفال ، مستشفى جامعة الملك عبد العزيز ، كلية الطب ، جامعة الملك عبد العزيز ، جدة ، المملكة العربية السعودية ،

11 قسم الأنسجة الطبية ، كلية الطب ، جامعة دمياط ، دمياط ، مصر

لمزيد من المعلومات: ali.ma@wecistanche.com

خلفية:تم وصف القرع (Cucurbita pepo L.) بأنه يحتوي على تأثيرات مضادة للأكسدة ومضادة للالتهابات ومضادة للتعب وتشبه مضادات الاكتئاب. الالغدة الكظريةهو عضو مهم يستجيب للضغط ويحافظ على التوازن أثناء الإجهاد.

أهداف:هدفت هذه الدراسة إلى تقييم فعالية إدارة القرعpepo L. (CP) في التخفيف من التغيرات السلوكية والكيميائية الحيوية والهيكلية فيالغدة الكظريةالناجم عن التعرض لضغط معتدل مزمن لا يمكن التنبؤ به (CUMS) واستكشاف الآلية الكامنة وراء هذا التأثير. المواد والطرق: تم تقسيم أربعين ذكرًا من الجرذان البيضاء إلى 4 مجموعات (ن -10): مجموعة التحكم ، CUMS ، ومجموعات المعالجة بالفلوكستين ، ومجموعات المعالجة بالـ CP. تم تقييم التغيرات السلوكية ، ومستوى الكورتيكوستيرون ، والسيتوكينات المؤيدة للالتهابات TNF- و IL -6 ، والملامح المؤكسدة / المضادة للأكسدة في المصل في نهاية التجربة.مجاور للكليةتمت معالجة الغدد من أجل التقييم النسيجي المرضي والكيميائي المناعي. تم تقييم التعبير الجيني لـ caspase -3 و Ki67 وبروتين الصدمة الحرارية 70 (HSP70) في الغدد الكظرية باستخدام RT-PCR.

نتائج:قلل مستخلص CP بشكل كبير من مستوى الكورتيكوستيرون (p <0. 001) ،وقت عدم الحركة (p <0. 001)="" ،="" والتغيرات="" الالتهابية="" والتأكسدية="" المرتبطة="" بالاكتئاب="" الناجم="" عن="" cums="" مقارنة="" بالمجموعة="" غير="" المعالجة.="" خفف="" مستخلص="" cp="" الناجم="" عن="">مجاور للكليةالتغيرات النسيجية المرضية وانخفاض كبير في موت الخلايا المبرمج (p <0. 001) ومستويات عالية من مضادات الأكسدة في مصل الدم.

الكلمات الدالة:اليقطين ، الإجهاد ، الاكتئاب ، كاسباس -3 ، ki67 ، Hsp70 ، موت الخلايا المبرمج

انقر فوق cistanche tubulosa جرعة الغدة الكظرية

المقدمة

أكثر من 264 مليون شخص من جميع الأعمار يعانون من الاكتئاب في جميع أنحاء العالم (منظمة الصحة العالمية ، 2020). أداء الشخص المصاب بالاكتئاب ضعيف بشكل عام في المدرسة والعمل والأسرة. قد يؤدي الاكتئاب إلى الانتحار. لذلك ، يُعد السبب الرئيسي الثاني للوفاة في 15- إلى 29- عامًا (منظمة الصحة العالمية ، 2020). يمكن للثدييات أن تنجو من الأحداث المجهدة عن طريق تنشيط الاستجابات الفسيولوجية المناسبة لهذه الأحداث. الغدة الكظرية هي جزء من محور ما تحت المهاد - الغدة النخامية - قشر الكظر (HPA) ومحور التعاطف - الغدة الكظرية الذي يحافظ على التوازن أثناء الإجهاد (Ulrich-Lai et al.، 2006). تم الإبلاغ عن أن التعرض للإجهاد الحراري يؤدي إلى التعبير السريع عن HSP70 في قشرة الغدة الكظرية (Huang et al. ، 2001). تشترك هذه البروتينات في الاتجار داخل الخلايا ، وعرض المستضد ، وموت الخلايا المبرمج ، والعديد من الإجراءات الأخرى (خار وآخرون ، 2001). تم وصف أن الهرمونات الخارجية أو التداخل مع الهرمونات الداخلية ، خلال فترات التطور الحرجة ، يمكن أن يكون لها تأثيرات دائمة على المسارات الفسيولوجية والسلوكية التي تنظمها دوائر الغدد الصماء العصبية تحت المهاد (Gore and Patisaul ، 2010). تم وصف اضطراب الغدد الصماء أيضًا لتوسيع مفهوم اضطراب الغدد الصماء ليشمل النطاق الكامل لعلم وظائف الأعضاء التكاملي ؛ لذلك ، فهو أكثر من مجرد اضطراب هرموني (Waye and Trudeau ، 2011). تعتبر التغييرات في تنظيم الغدد الصم العصبية ، والتمثيل الغذائي ، والنظام الغذائي / الجراثيم من العوامل المسببة للالتهاب والاستعداد للإصابة بالاكتئاب (Huang et al. ، 2019). تم افتراض أن الاكتئاب - أحد الاضطرابات العصبية والنفسية - والالتهاب لهما علاقة ثنائية الاتجاه. في حين أن الاكتئاب يعزز التفاعلات الالتهابية ، فإن الالتهاب يعزز الاضطرابات العصبية والنفسية بما في ذلك الاكتئاب (Bauer and Teixeira ، 2019). يعتبر فلوكستين ، أحد مضادات الاكتئاب الكلاسيكية ، من بين الأدوية المتوفرة في السوق لعلاج الاكتئاب. يعتبر الآن من مسببات اضطراب الغدد الصماء العصبية الناشئة.

هذا التأثير للفلوكستين هو أحد الآثار الجانبية ، وليس الهدف العلاجي الرئيسي في الثدييات (León-Olea et al. ، 2014). لذلك ، هناك حاجة إلى مضادات اكتئاب أكثر أمانًا مع عدم وجود آثار جانبية على حالة الغدد الصم العصبية. القرع (Cucurbita pepo L.) من الأنواع المهمة اقتصاديًا المزروعة في جميع أنحاء العالم. لها فوائد غذائية وصحية لأنها غنية بالفينولات والفلافونويد والأحماض الأمينية والكربوهيدرات والفيتامينات (وانج وآخرون ، 2002). كشفت العديد من الدراسات البحثية أن القرع له أنشطة بيولوجية واسعة النطاق ، مثل مضادات السكر ، ومضادات السرطان ، ومضادات الأكسدة ، ومضادة للالتهابات ، ومضادة للتعب ، وتأثيرات شبيهة بمضادات الاكتئاب (Wang et al. ، 2012 ؛ Zhang et al. ، 2012 ؛ Nawirska-Olszańska et آل ، 2013 ؛ Kim Nr وآخرون ، 2016). استخدم الطب التقليدي بشكل رئيسي أنظمة الأيورفيدا والطب الصيني أجزاء مختلفة من اليقطين ، بما في ذلك لحم الثمار والبذور (بيريز جوتيريز ، 2016). تم اختبار الفعالية المضادة للاكتئاب لـ Sweetme Sweet Pumpkin (SSP) و Cucurbita moschata Duch سابقًا في دراسة في الجسم الحي باستخدام اختبار سباحة قسري (FST) - نموذج حيواني للاكتئاب وقورنت مع فلوكستين (Kim Nr وآخرون ، 2016) . لخصت إحدى المراجعات الحديثة نسبيًا أن الأطعمة المضادة للاكتئاب ، مثل بذور اليقطين ، تم وصفها بأنها تحتوي على درجة غذائية مضادة للاكتئاب بنسبة 47 في المائة ، مما يوفر تأثيرًا شبيهًا بمضادات الاكتئاب (لاشانس ورامزي ، 2018). في الآونة الأخيرة ، أيد Dotto و Chacha إجراء المزيد من الدراسات البحثية القائمة على التجارب الحيوانية والسريرية من أجل تأكيد التأثير التحسيني لبذور اليقطين على الاكتئاب (Dotto and Chacha ، 2020). كانت هذه التقارير مشجعة لاختبار فعالية القرع في تخفيف تأثير الضغط المزمن على الغدد الكظرية. لذلك ، تم إجراء هذه الدراسة لتقييم تأثير تناول مستخلص Cucurbita pepo L. (CP) عن طريق الفم على تخفيف الإجهاد الخفيف المزمن غير المتوقع (CUMS) الناجم عن البنية السلوكية والكيميائية الحيوية والغدة الكظرية واستكشاف الآلية الكامنة وراء هذا التأثير. .

المواد والأساليب

استخراج وجرعة اليقطين

تم شراء Cucurbita pepo L. (عينة قسيمة: AQJ _95) من السوق المحلي في جدة بالمملكة العربية السعودية. تم التعرف عليها في معشبة جامعة الملك عبد العزيز باستخدام عينات من الأعشاب ونباتات المملكة العربية السعودية (تشودري ، 2001). تم إيداع عينات القسائم في المعشبة. تم التعرف على CP من قبل المؤلفين وتم التحقق منه من قبل عالم نبات من كلية العلوم جامعة الملك عبد العزيز. تم استخراج CP وفقًا للدراسات السابقة (Wang et al. ، 2012). تم تقطيع الثمار النيئة مع القشر باستخدام آلة تقطيع وتجفيفها باستخدام مجفف بالتجميد (FD5508؛ ilShinBioBase Co.، Ltd.، كوريا) ثم سحقها باستخدام آلة طحن كهربائية. تم تمرير المسحوق عبر منخل شبكي 40- للحصول على مسحوق ناعم وتخزينه في حاوية محكمة الإغلاق. تم خلط المسحوق المجفف (50 جم) مع 450 مل من الإيثانول بنسبة 80 بالمائة وتركه لمدة يوم واحد عند 37 درجة مئوية في شاكر (JSSI -100 T؛ JS Research Inc.، Compact Shaking Incubator. ، كوريا) و ثم تم ترشيحه بالقطن وورق الترشيح في اليوم الثاني. تكررت عملية الاستخراج هذه مرتين عند 37 درجة للحصول على مستخلص الإيثانول.

تحديد مكونات الإنتاج الأنظف

تم تحليل التركيب الكيميائي لـ PE باستخدام كروماتوجرافيا الغاز النزرة GC-TSQ Evo 8 0 {6}} 0 مطياف الكتلة (Thermo Scientific ، أوستن ، تكساس ، الولايات المتحدة) مع عمود شعري مباشر TG – 5MS ( 30 م × 0.25 مم × 0.25 ميكرون سمك الفيلم). تم ضبط درجة حرارة فرن العمود مبدئيًا على 50 درجة ثم زادت بمقدار 5 درجات مئوية / دقيقة إلى 250 درجة مئوية واحتفظ بها لمدة دقيقتين ثم زادت إلى درجة حرارة نهائية قدرها 300 درجة بمقدار 25 درجة / دقيقة واحتفظ بها لمدة دقيقتين. تم الاحتفاظ بدرجات حرارة خط نقل الحاقن و MS عند 270 و 260 درجة مئوية ، على التوالي ؛ تم استخدام الهيليوم كغاز حامل بمعدل تدفق ثابت قدره 1 مل / دقيقة. كان تأخير المذيب 4 دقائق ، وتم حقن عينات مخففة من 3 ميكرولتر تلقائيًا باستخدام جهاز أخذ العينات التلقائي AS1300 مقترنًا بـ GC في الوضع بدون انقسام في حاقن PTV. تم جمع أطياف الكتلة EI عند 70 جهد تأين فولت على مدى m / z 50-650 في وضع المسح الكامل. تم ضبط درجة حرارة مصدر الأيونات على 250 درجة. تم تحديد المكونات من خلال مقارنة أطيافها الكتلية مع أطيافها الكتلية WILEY 09 و NIST 14 التي تستخدم لتحديد ودراسة التركيب الكيميائي لمكونات غير معروفة في أي مستخلص (Wiley ، 2006 ؛ Mikaia et al. ، 2014). تم إجراء التحليل بنوع نوعي باستخدام برنامج Thermo Scientifific ™ Xcalibur ™ 2.2 ، وتم الإبلاغ عن جميع القيم بالنسبة المئوية (عبد الكريم وآخرون ، 2016).

تصميم تجريبي

تمت الموافقة على هذه الدراسة من قبل لجنة أخلاقيات البحوث الطبية الحيوية بكلية الطب ، جامعة الملك عبد العزيز ، جدة ، المملكة العربية السعودية (الرقم المرجعي {0}}). في هذه الدراسة ، تم الحصول على أربعين ذكور جرذ ألبينو بوزن 15 0 - 200 جرام وتتراوح أعمارهم بين 2-3 شهور من مركز الملك فهد للبحوث الطبية (KFMRC). قبل بدء التجربة ، تُركت الفئران للتأقلم مع ظروف المختبر لمدة أسبوع. تم تعيين عشرة فئران كمجموعة تحكم تركت دون تعريض لـ CUMS. تعرضت الفئران الثلاثين الأخرى لعملية CUMS لمدة 4 أسابيع والتي تضمنت أنواعًا مختلفة من الضغوطات في أوقات مختلفة خلال اليوم من أجل منع التعود على الإجهاد. تم وصف إجراء CUMS بالكامل في الأعمال السابقة (Ayuob et al. ، 2016 ؛ Ali et al. ، 2017) وتم عرضه في الجدول 1. تم تقسيم الفئران المعرضة لـ CUMS إلى 3 مجموعات (ن 10). تلقت المجموعة غير المعالجة (CUMS) السيارة 0.03 في المائة كاربوكسي ميثيل السليلوز (CMC-Na) بالتزقيم لمدة أسبوعين. تلقت المجموعة المعالجة بـ FLU (شركة دار الدواء للصناعات الدوائية ، المحدودة ، عمان ، الأردن) ، وهو مضاد للاكتئاب يستخدم للتحقق من الصحة الدوائية ، مذابًا في CMC-Na بنسبة 0.03 بالمائة بجرعة 20 مجم / كجم عن طريق تزقيم المعدة (Li وآخرون ، 2014). تلقت المجموعة المعالجة بـ CP مستخلص CP مذاب في الماء المقطر بجرعة 100 مجم / كجم بالتزقيم لمدة أسبوعين وفقًا لـ Wang et al. (2012).

تقييم التغيرات السلوكية

تم إجراء FST بعد 4 أسابيع لتأكيد تأثير CUMS على الفئران (علي وآخرون ، 2017). خلال هذا الاختبار ، تم وضع كل فأر في وعاء أسطواني زجاجي (ارتفاع 20 سم ، قطر 14 سم) مع 15 سم من الماء عند 25 ± 2 درجة مئوية.تم تصوير الجرذ بالفيديو لمدة 6 دقائق باستخدام برنامج السلوك (Noldus Information Technology ، EthoVision XT®) ، وتم قياس إجمالي الوقت الذي يقضيه غير متحرك خلال 6 دقائق بواسطة فني أعمى عن المجموعات التجريبية. تم تحديد الوقت الإجمالي ، بالثواني ، الذي تقضيه الفئران دون حركة الأطراف ، باستثناء الحركة البسيطة اللازمة لإبقاء الفأر طافيًا ، تم تحديد "وقت عدم الحركة" خلال 6 دقائق.

تقنيات الكيمياء الحيوية

بعد أربع وعشرين ساعة من الانتهاء من اختبار السلوك ، تم أخذ عينات الدم من الجيوب الحجاجية للفئران بعد تخديرها بنسبة 4 في المائة من الأيزوفلورين (شركة سيديكو للأدوية ، القاهرة ، مصر) في أكسجين بنسبة 100 في المائة. بعد ذلك ، تم قتل الفئران من خلال خلع عنق الرحم. تم طرد عينات الدم عند 3 ، {5}} دورة في الدقيقة لمدة 15 دقيقة عند 4 درجات مئوية للحصول على المصل وتم حفظها عند -18 درجة مئوية للتقييم الكيميائي الحيوي. تم تقييم مستوى الكورتيكوستيرون (ALPCO Diagnostics ، Orangeburg ، NY ، الولايات المتحدة) باستخدام مجموعات مقايسة الممتز المناعي المرتبطة بالإنزيم وفقًا لتعليمات الشركة الصانعة. وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة ، تم تقييم TNF- و IL -6 (نظام Quantakin R&D ، USA Kit) باستخدام مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم. تم تحديد الكثافة الضوئية لكل عينة في نسختين باستخدام قارئ ELISA ذي الصفيحة الدقيقة مضبوطًا على 450 نانومتر. تم استخدام مجموعة فحص المواد المتفاعلة لحمض الثيوباربيتوريك (TBARS) (التشخيص البيولوجي ، مصر) لقياس مستوى الطيف الضوئي مالونديالديهيد (MDA) عند 535 نانومتر (Gamal et al. ، 2018). تم قياس مستوى ديسموتاز الفائق (SOD) باستخدام مجموعة مقايسة SOD (تشخيص حيوي ، مصر) (Packer ، 2002). تم إجراء تقييم مستوى الجلوتاثيون بيروكسيديز (GPX) باستخدام مجموعة GPX (Randox Labs ، Crumlin ، المملكة المتحدة). لتقدير نشاط الكاتلاز (CAT) ، تم إنشاء منحنى معايرة للمقايسة وجميع العينات ، باستخدام مجموعات الفحص (التشخيص البيولوجي ، مصر). تم وصف الطريقة مسبقًا (جمال وآخرون ، 2018).

الوقت الحقيقي الكمي PCR

تم استخلاص الحمض النووي الريبي من عينات الأنسجة باستخدام كاشف TriFast ™ (PeqLab ، ألمانيا ، رقم القط: {0}}) ، كما هو موضح في بروتوكول الشركة المصنعة. تم تقدير تركيز الحمض النووي الريبي المنقى باستخدام مقياس الطيف الضوئي NanoDrop 2 0 0 0 c (Thermo Scientific ، الولايات المتحدة). تم نسخ الحمض النووي الريبي المستخرج من كل عينة عكسيًا باستخدام مجموعة توليف SensiFAST ™ (كدنا) لـ RT-qPCR (Bioline USA Inc. ، الولايات المتحدة ، رقم القط: BIO -65053) ، باتباع تعليمات الشركة المصنعة. تم تخزين (كدنا) المركب بدرجة -80 حتى يتم الاستفادة من qRT-PCR. تم إجراء تفاعلات qRT-PCR باستخدام مجموعة SensiFAST ™ SYBR Lo-ROX (Bioline USA Inc. ، الولايات المتحدة ، رقم القط: BIO -94002) ​​على نظام اكتشاف تفاعل البوليميراز المتسلسل (تقنية الحياة) Applied Biosystems 7500 ، الولايات المتحدة). تم تصميم الاشعال الخاصة بالجينات للجرذان ، المستخدمة في هذه الدراسة ، بواسطة برنامج Primer3 (الإصدار 4.0.4) ، وتم التحقق من خصوصيتها باستخدام برنامج NCBI / Primer-BLAST. ثم تم شراء المواد الأولية من Willowfort ™ (المملكة المتحدة). كانت البادئات GAPDH (5′-TGCACCACCAACTGCTTAGC -3 ′ ، 5′-GGC ATGGACTGTGGTCATGAG -3 ′) ، caspase -3 (موجه 5- TGT ATGCTTACTCTACCGCACCCG -3 ، عكس 5- GCGCAAAGT GACTGGATGAACC -3) ، HSP70 (5′-ACGAGGTCTCAAGG GCAAG -3 ′ ، 5′-CTCTTTCTCAGCCAGCGTGTAG -3 ′). Ki67 (للأمام 5- AGAAGAGCCCACAGCACAGAGAA -3 ، عكس 5- AGAAGAGCCCACAGCACAGAGAA 3). تم تحضير خليط PCR على النحو التالي: 10 ميكرولتر من مزيج SensiFAST TM SYBR Lo-ROX ، و 0.8 ميكرولتر من التمهيدي الأمامي ، و 0.8 ميكرولتر من التمهيدي العكسي ، و 2 ميكرولتر من قالب cDNA ، و 6.4 ميكرولتر من الماء الخالي من نوكلياز. تم نقل خليط التفاعل إلى دوار حراري تمت برمجته مسبقًا ليثبت عند 95 درجة لمدة دقيقتين ، تليها 40 دورة 95 درجة لمدة 15 ثانية ، ثم 60 درجة لمدة 30 ثانية. تم تشغيل تفاعل تحكم سلبي لا يحتوي على قالب في كل تجربة. تم إجراء تحليل منحنى الذوبان لإثبات خصوصية منتجات PCR ، وتم الحصول على قيمة Ct لكل تفاعل من مخططات التضخيم. تم حساب التقدير الكمي النسبي لكل تعبير جيني في عينات الأنسجة باستخدام طريقة العتبة المقارنة (Ct) مع GAPDH باعتباره جين التحكم الداخلي. بالنسبة للتغيير الكلي في الطية ، تم حسابها وخطيها باستخدام الصيغة الحسابية 2 − Ct.

تقنيات النسيج

في نهاية التجربة وبعد تخدير الفئران ، تم فتح البطن وتشريح الغدة الكظرية اليمنى. للحصول على كتل البارافين ، تم إجراء تثبيت للغدة الكظرية بنسبة 1 0 في المائة من الفورمالين المحايد المخزن مؤقتًا وإجراء مزيد من العمليات. تم تحضير مقاطع البارافين بسماكة 4- ميكرومتر وصبغها بالهيماتوكسيلين ويوزين (H&E). علاوة على ذلك ، كانت أقسام البارافين الأخرى ملطخة من الناحية المناعية باستخدام تقنية الستربتافيدين - البيوتين - البيروكسيديز. تم تحضين الشرائح طوال الليل عند 4 درجات ، ثم تم تحضينها بمضاد أحادي النسيلة Ki67 (داكو سيتوميشن ، الولايات المتحدة ، بتخفيف 1: 1 ، 000) ​​لإثبات تكاثر الخلايا. بالإضافة إلى ذلك ، تم استخدام الجسم المضاد متعدد النسيلة المضاد للكاسبيز -3 (Santa Cruz Biotechnology ، الولايات المتحدة ، عند التخفيف 1: 1 ، 000) لاكتشاف موت الخلايا المبرمج. تم أيضًا استخدام جسم مضاد متعدد النسيلة ضد بروتين الصدمة الحرارية -70 (HSP70) (داكو ، كاربينتريا ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة ، بتخفيف 1: 1 ، 000). تم استخدام جسم مضاد ثانوي مترافق معزز حيويًا من نظام تلوين داكو. تم استخدام الشرائح الملطخة بالجسم المضاد الثانوي فقط كعناصر تحكم سلبية. تمت مواجهة النوى بهيماتوكسيلين. اعتبر تلطيخ السيتوبلازم البني رد فعل إيجابي. تم فحص المقاطع الملطخة وتصويرها باستخدام أوليمبوس ميكروسكوب BX -51 (أوليمبوس) المتصل بكاميرا رقمية وجهاز كمبيوتر. تم إجراء التحليل شبه الكمي للنشاط المناعي للأجسام المضادة بواسطة برنامج تحليل الصور Pro Plus. تم تقييم المساحة المئوية للتفاعل المناعي في 30 حقلاً عند التكبير × 400. تم حساب الخلايا الإيجابية لكل 1.0 مم 2 من المساحة ، كما وصفها Zhou et al. (2016). تم فحص خمسة حقول على الأقل من كل شريحة ، وتم حساب المتوسط ​​لكل حيوان. للتحليل المورفومتري ، تم فحص أربعة أقسام في كل حيوان (تكبير × 100). تم قياس سمك مناطق مختلفة من الغدة الكظرية بالميكرومتر. تم الحصول على سمك قشرة الغدة الكظرية عن طريق قياس المسافة بين النخاع وكبسولة الغدة الكظرية في خط مستقيم ، ويتم أخذ قياس واحد في كل ربع من قشرة الغدة الكظرية.

تحليل احصائي

النتائج

النتائج السلوكية

نتائج تحليل مستخلص CP باستخدام GC-MS

التقييم البيوكيميائي

مستوى الكورتيكوستيرون في المصل

زاد مستوى الكورتيكوستيرون بشكل كبير (p <{0}. 001) في الفئران غير المعالجة التي تعرضت لـ CUMS مقارنةً بالمستوى الموجود في الجرذان الضابطة ، بينما أظهرت تلك التي عولجت بـ FLU و CP انخفاضًا كبيرًا (p <0.001) في مستوى الكورتيكوستيرون في الدم.

مستويات TNF- و IL -6 في المصل

مستويات MDA و SOD و GPX و CAT في المصل

التعبير الجيني لـ Ki67 و Caspase -3 و HSP70

كشف RT-PCR عن تعبير جيني مرتفع بشكل ضئيل Ki67 في الغدد الكظرية لمجموعة CUMS مقارنة بمجموعة التحكم ، بينما أظهرت المجموعات المعالجة بـ FLU و CP تعبيرًا مرتفعًا بشكل ملحوظ مقارنةً بالمجموعة المعرضة لـ CUMS (الشكل 3E) . فيما يتعلق بـ caspase -3 ، فقد زاد تعبيره الجيني بشكل ملحوظ (p <0. 0="" 01)="" في="" الغدد="" الكظرية="" لمجموعة="" cums="" مقارنة="" بالمجموعة="" الضابطة="" ،="" في="" حين="" أن="" التعبير="" الجيني="" flu-="" و="" أظهرت="" المجموعات="" المعالجة="" بـ="" cp="" انخفاضًا="" ملحوظًا="" مقارنةً="" بالمجموعة="" المعرضة="" لـ="" cums="" (الشكل="" 3f="" عندما="" يتعلق="" الأمر="" بالتعبير="" الجيني="" hsp70="" ،="" فقد="" سجلت="" مستويات="" أعلى="" بشكل="" ملحوظ="" (p=""><0.001) في="" الغدد="" الكظرية="" لمجموعة="" cums="" عنها="" في="" المجموعة.="" المجموعة="" الضابطة="" ،="" بينما="" أظهرت="" المجموعات="" المعالجة="" بـ="" flu="" و="" cp="" انخفاضًا="" ضئيلًا="" مقارنةً="" بالمجموعة="" المعرضة="" لـ="" cums="" (الشكل="">

تقييم الأنسجة

نقاش

من الواضح أن المجتمع الحديث مليء بالإجهاد الذي قد ينشأ عن المشاكل اليومية والرعاية الصحية والقضايا المتعلقة بالوظيفة. قد تسبب هذه الضغوطات ما يسمى بالاضطرابات المرتبطة بالإجهاد (Clayton and Mccance ، 2014). في هذه الدراسة ، تم استخدام المستخلص الإيثانولي من لحم وقشر Cucurbita pepo L. للتحقيق في إمكاناته في التخفيف من السلوك الاكتئابي الناجم عن CUMS وتأثيره على الغدة الكظرية. تم إثبات ذلك من خلال أ

زيادة كبيرة في مستوى الكورتيكوستيرون في الدم والتحقق من ذلك من خلال فترة طويلة من الجمود أثناء FST. كانت هذه النتائج متوافقة مع تلك التي تم الإبلاغ عنها سابقًا (Tang et al. ، 2015). تم الإبلاغ عن اشتراك كل من TNF- و IL -6 في التسبب في الاكتئاب (Taraz وآخرون ، 2015 ؛ Pedraz-Petrozzi وآخرون ، 2020). تم الإبلاغ عن أن الفئران التي تعاني من نقص في مستقبلات IL -6 أو TNF- تقاوم السلوكيات الاكتئابية (Viana et al. ، 2010). لذلك ، تم تقييمهم في هذه الدراسة ، ولوحظ أن كل من TNF- و IL -6 قد زاد بشكل كبير في مصل الفئران المعرضة لـ CUMS لمدة 4 أسابيع ، مما يشير إلى أنهم كانوا مكتئبين. تم دعم هذه النتيجة من قبل Numakawa et al. (2014) في الفئران المصابة باليأس السلوكي وبواسطة Taraz et al. (2015) في مرضى الاكتئاب. في هذه الدراسة ، ارتبط تناول مستخلص اليقطين بتحسين السلوك الاكتئابي ، وهو ما يتضح من الانخفاض الكبير في وقت عدم الحركة في FST وتأكد من خلال الانخفاض الكبير في الكورتيكوستيرون والسيتوكينات الالتهابية TNF- و IL -6 في المصل. تم دعم هذه النتائج من قبل Kim Nr et al. (2016) الذي ذكر أن SSP لمدة 28 يومًا قلل من مستوى السيتوكينات الالتهابية في الفئران المكتئبة.

يمكن أن يُعزى نشاط اليقطين المضاد للالتهاب إلى المركبات النشطة في اليقطين مثل أحماض الأوليك والبالمتيك والإستراديول. تم وصف تقليل تنظيم حمض الأوليك وحمض البالمتيك وحمض اللينوليك في حالة الاكتئاب (Conklin et al. ، 2010 ؛ Martín et al. ، 2010). تم الإبلاغ عن أن الحماية العصبية بوساطة حمض الأوليك مرتبطة بتأثيرها المضاد للالتهابات بوساطة تنشيط مستقبلات جاما (PPAR-) المنشط للبيروكسيسوم (Song et al. ، 2019). بالإضافة إلى ذلك ، تم الإبلاغ عن أن حمض البالمتيك يثبط فسفوليباز أ (2) ، وبالتالي يعتبر مركبًا مضادًا للالتهاب (أبارنا وآخرون ، 2012). كان استراديول أحد مركبات اليقطين التي تم اكتشافها في هذه الدراسة. تم الإبلاغ عن استراديول للحث على تأثير مضاد للالتهابات وبالتالي يخفف من السلوك الاكتئابي (Xu et al. ، 2015). آلية أخرى يمكن من خلالها أن يحفز الاستراديول تأثيرًا مضادًا للاكتئاب وهي زيادة تنظيم التعبير عن عامل التغذية العصبية المشتق من الدماغ (BDNF) وفسفرة ERK عن طريق تنشيط ER- في الدماغ (Yang et al. ، 2010). في هذه الدراسة ، تم زيادة مستوى مصل MDA ، بينما انخفضت مستويات SOD و GPX و CAT في الفئران المعرضة لـ CUMS. تم توثيق تغييرات مماثلة بعد التعرض لـ CUMS في الدراسات السابقة ، وأضافوا أن هذه التغييرات البيوكيميائية أدت إلى الإجهاد التأكسدي وإضعاف HPA (Nabavi et al. ، 2015). ليو ت وآخرون. (2015) ذكر أيضًا أن تطور الاكتئاب قد يُعزى إلى انخفاض محتوى مضادات الأكسدة في الجسم.

تم الإبلاغ عن الخصائص المضادة للأكسدة لمستخلص فاكهة اليقطين بشكل متكرر (Bahramsoltani et al. ، 2017). بالإضافة إلى ذلك ، تم الإبلاغ عن أن لحم وقشر Cucurbita pepo L. يعالج نشاطًا مضادًا للأكسدة أعلى من الأجزاء الأخرى ، على سبيل المثال ، البذور (Oyeleke et al. ، 2019). أدت إدارة مستخلص اليقطين ، في العديد من الدراسات السابقة ، إلى زيادة كبيرة في مستويات SOD و GPX وخفض MDA في مصل الفئران (Guo-Hua et al. ، 2000 ؛ Dang ، 2004) ، وقد تم توثيق هذا التأثير أيضًا في هذه الدراسة. لذلك ، فإن النشاط المضاد للأكسدة في القرع يمكن أن يكون وراء تأثيره المضاد للاكتئاب الواضح في هذه الدراسة. هذا يتماشى مع ملاحظات Kim Nr et al. (2016). تم الإبلاغ عن أن المنتجات الطبيعية ذات التأثيرات المضادة للالتهابات ومضادات الأكسدة ومضادة للتعب لها أيضًا تأثير شبيه بمضادات الاكتئاب (Jeong et al. ، 2015). تم إثبات كل هذه الأنشطة السابقة في القرع. قد تُعزى زيادة التجويف السيتوبلازمي للخلايا القشرية الكظرية ، التي لوحظت في مجموعة CUMS في هذه الدراسة ، إلى زيادة الطلب على الدهون ، والتي تشكل حجر الزاوية لتخليق الكورتيزول. Cigankova et al. (2005) لاحظ أن فرط الديناميكية التجريبية الطويلة الأمد أدت إلى اندماج قطرات دهنية هيولي متعددة للخلايا القشرية. تحتوي هذه القطرات الدهنية على الكوليسترول ، والذي يعد بمثابة مقدمة رئيسية في تخليق هرمونات الستيرويد.

ومع ذلك ، أفاد Koldysheva و Lushnikova (2008) أن الإجهاد أدى إلى انخفاض كبير في قطرات الدهون في خلايا قشرة الغدة الكظرية ، وخاصة ZF (Koldysheva and Lushnikova ، 2008). تم وصف أنه عند التعرض للإجهاد البدني ، تنتقل محفزات الألم إلى منطقة ما تحت المهاد ، مما يؤدي إلى إفراز الهرمون CRH في نظام البوابة تحت الغدة النخامية ، مما يزيد من إفراز ACTH ويحفز مستقبلاته في ZF و ZR لزيادة إفراز الكورتيزول (Patti et al. ، 2018). تم الإبلاغ سابقًا عن الكبسولة الكظرية السميكة والتربيق التي لوحظت في الفئران المعرضة لـ CUMS (الدسوقي وآخرون ، 2011 ؛ الطيب وسالم ، 2017) نتيجة لزيادة تخليق الكولاجين بواسطة الخلايا الليفية عند التعرض لضغط التثبيت. أظهرت العديد من الخلايا في الغدد الكظرية للفئران المعرضة لـ CUMS نوى ملطخة بعمق ، مما يشير إلى أنها خضعت لموت الخلايا المبرمج الذي تم تأكيده عن طريق تلطيخ الكاسباس -3 المناعي الكيميائي. تم الإبلاغ عن ملاحظة مماثلة من قبل الطيب وسالم ، (2017) ، أثناء دراستهم لتأثير إجهاد الشلل على الغدد الكظرية للفئران. ليو كيو وآخرون. (2015) أن الإجهاد التأكسدي المفرط ، الواضح بعد التعرض لـ CUMS في هذه الدراسة ، يعدل مستويات التعبير عن "الجينات المرتبطة بالاستماتة" ويحفز موت الخلايا المبرمج والانحطاط من خلال مسارات إشارات Bcl -2 و Bax و caspase -3. تم تأكيد هذه الآلية في هذه الدراسة بواسطة RT-PCR التي كشفت عن زيادة كبيرة في تنظيم التعبير الجيني لـ caspase -3.

عند مراجعة الأدبيات ، لم يكن هناك تأثير مباشر لـ Cucurbita pepo على caspase -3 - موت الخلايا المبرمج في الأنسجة المختلفة. يبدو أن الانخفاض في الكاسباس -3 - الخلايا المبرمجة الإيجابية المكتشفة في الغدد الكظرية يُعزى إلى التأثير المضاد للأكسدة لـ Cucurbita pepo الموثق في هذه الدراسة. يدعم ذلك العديد من الدراسات السابقة التي أجريت على النباتات والأعشاب الأخرى ذات الأنشطة المضادة للأكسدة (Banagozar محمدي وآخرون ، 2019 ؛ غازيزاده وآخرون ، 2020). أظهرت هذه الدراسة أن التعرض لـ CUMS أدى إلى زيادة 67- الخلايا الإيجابية في قشرة الغدة الكظرية والتي كانت واضحة بشكل كبير في ZF ، مما يشير إلى زيادة عدد الخلايا المتكاثرة ، ونتيجة لذلك ، زاد سمك هذه الطبقة بشكل ملحوظ. من ناحية أخرى ، انخفض عدد خلايا التكاثر الإيجابية Ki 67- بشكل ضئيل في النخاع استجابةً لـ CUMS. كانت هذه الملاحظات متماشية مع ملاحظات Ulrich-Lai et al. (2006) الذي أبلغ عن زيادة في نواة الخلية الموجبة Ki 67- فقط في ZF الخارجي بعد التعرض للإجهاد المتغير المزمن ، بينما أظهر النخاع تضخمًا خلويًا وليس تضخمًا. علاوة على ذلك ، أبلغ لابوري وآخرون (2003) عن زيادة عامة في وظيفة النخاع بعد التعرض للإجهاد المزمن ،

مما يشير إلى أن الإجهاد المزمن قد يؤدي إلى تضخم النخاع. في هذه الدراسة ، أدى تناول مستخلص اليقطين إلى زيادة تكاثر الخلايا بشكل كبير ، ويتضح ذلك من خلال تنظيم الجين Ki67 والتعبير المناعي في جميع المناطق تقريبًا ولب الغدة الكظرية مقارنةً بـ CUMS. هذا يفسر زيادة سمك مناطق الغدة المسجلة في هذه الدراسة. قد يعوض أيضًا عن تأثير موت الخلايا المبرمج الناجم عن التعرض لـ CUMS. هذه النتيجة مدعومة من قبل Kim Hy et al. (2016) الذي أبلغ عن تنظيم كبير لتعبير mRNA لـ Ki67 وانتشار الخلايا الطحالية المعزولة من طحال الفئران BALB / c المعالجة بـ SSP ، المتدفقة ، و Cucurbita moschata Duch ومكونه الرئيسي ، كاروتين. في هذه الدراسة ، أدى التعرض لـ CUMS إلى زيادة كبيرة في التعبير الجيني والتعبير المناعي لـ HSP70 في جميع مناطق الغدة الكظرية. بالتوافق مع ذلك ، زينج وآخرون. (2008) أثبت أيضًا أن زيادة تعبير HSP70 بعد التعرض لظروف مرهقة يعدل الاستجابات الالتهابية عن طريق تثبيط تنشيط عامل النسخ الالتهابي ، العامل النووي كابا ب (NF-kappaB). بالإضافة إلى ذلك ، قد يتداخل HSP70 بشكل مباشر مع موت الخلايا المبرمج والنخر (Yenari et al. ، 2005). في الآونة الأخيرة ، Li et al. (2019) أبلغ عن زيادة في التعبير عن HSP70 في أنسجة الغدة الكظرية الخنازير بعد التعرض للإجهاد الحراري ، مما يشير إلى دور HSP70 في إصابة الغدة الكظرية ويؤكد علاقته بالاستجابات الالتهابية.

يعتبر الحث السريع لـ HSP70 استجابة للإجهاد ضروريًا لعملية الحماية الخلوية. في دراستنا ، ارتبط علاج الفئران المعرضة لـ CUMS بالقرع بانخفاض طفيف في تعبير HSP70 الذي ارتبط بانخفاض موت الخلايا المبرمج والاستجابات الالتهابية. قد يشير هذا إلى التأثير المفيد للمستوى المرتفع نسبيًا من HSP70 الناجم عن كل من FLU و CP لأنه أدى إلى تقليل موت الخلايا المبرمج بوساطة كاسباس -3 وإطلاق السيتوكينات الالتهابية. على الرغم من أن تأثير القرع على عائلة بروتين الصدمة الحرارية لم يتم وصفه سابقًا ، إلا أن حمض الأوليك ، الذي يمثل المكونات الرئيسية للقرع المستخدم في هذه الدراسة ، قد تم وصفه لتقليل التعبير عن HSP60 في خط الخلايا اللمفاوية التائية البشرية (Martins De Lima). وآخرون ، 2004) ، وهو ما يدعم نتائج دراستنا. تم تلخيص الآلية المقترحة لعمل Cucurbita pepo كمادة شبيهة بمضادات الاكتئاب في الشكل 7. ومن بين قيود هذه الدراسة عدم القدرة على إجراء مزيد من التحقيق في الآلية المتعمقة للتأثير المضاد للاكتئاب للـ CP ، وبالتالي ، فإن مزيدًا من الدراسة هي شجع على القيام بذلك. في الختام ، تقدم هذه الدراسة دليلاً علميًا على فعالية مستخلص Cucurbita pepo L. للتخفيف من التغيرات السلوكية والكيميائية الحيوية التي يسببها CUMS وكذلك التأثير المرضي للنسيج على الغدد الكظرية. كانت هذه التأثيرات واضحة من خلال تقليل تنظيم موت الخلايا المبرمج وتعبير HSP70 ويبدو أنه تم التوسط من خلال التأثير المضاد للأكسدة والمضاد للالتهابات لمستخلص Cucurbita pepo L.. على الرغم من أن هذه الدراسة وبعض الدراسات الحديثة الأخرى قد وثقت التأثير الشبيه بمضادات الاكتئاب لـ Cucurbita pepo واستكشفت آليتها ، إلا أن هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات بما في ذلك الدراسات السريرية لتأكيد هذا التأثير على البشر.

هذا هو منتجنا لمكافحة التعب! انقر على الصورة لمزيد من المعلومات!

المراجع

عبد الكريم ، MSMA ، ربيح ، MAEF ، سليم ، ETM ، الشربيني ، EAE-M. ، والخطيب ، AY (2016). تطبيق GC / EIMS مع الحسابات شبه التجريبية لتحديد وفحص بعض المكونات المتطايرة في زيت الريحان العطري.

الطيب ، ز ، وسالم ، م. (2017). دراسة مجهرية ضوئية وإلكترونية حول تأثير إجهاد التثبيت على قشرة الغدة الكظرية للجرذان البالغة والدور التحسيني المحتمل لفيتامين EJ Med. علم الأنسجة 1 ، 44-56.

Aparna ، V. ، Dileep ، KV ، Mandal ، PK ، Karthe ، P. ، Sadasivan ، C. ، and Haridas ، M. (2012). خاصية مضادة للالتهاب لحمض N-Hexadecanoic: الأدلة الهيكلية والتقييم الحركي. تشيم. بيول. ديس المخدرات. 80 ، 434-439.

بهرامسولتاني ، ر. ، فرزائي ، م ، عبد الغفاري ، أ. (2017). تقييم المواد الكيميائية النباتية ومضادات الأكسدة وأنشطة التئام الجروح من Cucurbita Moschata Duchesne Fruit Peel. إيران J. Basic Med. علوم. 20 ، 798-805. دوى: 10.22038 / IJBMS.2017.9015

Banagozar محمدي ، A. ، Torbati ، M. ، Farajdokht ، F. ، Sadigh-Eteghad ، S. ، Fazljou ، SMB ، Vatandoust ، SM ، et al. (2019). يخفف سيريسين من ضبط النفس الناجم عن الإجهاد والسلوكيات الشبيهة بالقلق من خلال تعديل الإجهاد التأكسدي والتهاب الأعصاب وموت الخلايا المبرمج في قشرة الفص الجبهي والحصين.

Bauer، ME، and Teixeira، AL (2019). الالتهاب في الاضطرابات النفسية: ما الذي يأتي أولاً؟ آن. N. Y Acad. علوم. 1437 ، 57-67.

تشودري ، س. (2001). نباتات المملكة العربية السعودية: الرياض المصورة: وزارة الزراعة والمياه ، المعشبة الوطنية ، المركز الوطني لبحوث الزراعة والمياه ، 2. الرياض: علم التشريح والتشكيل.

سيغانكوفا ، ف ، زيبرين ، م ، بود أ ، ك ، وهولوفسكا ، ك. (2005). تأثير Hypodynamy التجريبية طويلة الأجل على الغدد الكظرية من السمان الياباني: ودراسة البنية التحتية. معهد البوليتن البيطري بولوي 49، 449.

كلايتون ، م ، وماكانس ، ك. (2014). "الإجهاد والمرض" في الفيزيولوجيا المرضية الأساس البيولوجي للمرض عند البالغين والأطفال. المحررين K. Mccance ، S. Huether ، V. Brashers ، و N. Rote. الطبعة السابعة. (الولايات المتحدة الأمريكية: كندا إلسفير).

Conklin، SM، Runyan، CA، Leonard، S.، Reddy، RD، Muldoon، MF، and Yao، JK (2010). التغييرات المرتبطة بالعمر لـ N -3 و N -6 الأحماض الدهنية المتعددة غير المشبعة في القشرة الحزامية الأمامية للأفراد المصابين باضطراب اكتئابي كبير. البروستاجلاندين ليكوت. الجوهر. الأحماض الدهنية 82 ، 111-119.

دورون ، آر ، لوتان ، دي ، فيرسانو ، زي ، بيناتاف ، إل ، فرانكو ، إم ، أرموزا ، إس ، وآخرون. (2014). Escitalopram أو علاجات الخلطات العشبية الجديدة أثناء أو بعد التعرض للإجهاد تقلل من السلوك الشبيه بالقلق من خلال تعديلات Corticosterone و BDNF.

Dotto و JM و Chacha ، JS (2020). إمكانات بذور اليقطين كمكوِّن غذائي وظيفي: مراجعة. العلمية Afr. 10 ، e00575.

ديوك ، جا (1992). كتيب المكونات الكيميائية النباتية لأعشاب GRAS والنباتات الاقتصادية الأخرى. [متصل]. بوكا راتون: FL: CRC Press.

الدسوقي ، ن. ، الرفاعي ، ع ، عبد العظيم ، هـ ، والبلي ، محمد (2011). الدراسات النسيجية والبنية التحتية لتأثير التثبيت

الضغط على قشرة الغدة الكظرية من الجرذ ألبينو والدور التحسيني للديازيبام. J. مصر. جير. شركة زول 62 ، 25-45. جمال ، محمد ، معوض ، ج. ، راشد ، ل. ، مرقص ، م أ ، والشعراوي ، ن. (2018).

التورط المحتمل لـ Tetrahydrobiopterin في اضطراب استتباب الأكسدة والاختزال في الإنتان - ضعف الدماغ الناجم. Res الدماغ. 1685 ، 19-28.

جور ، إيه سي ، وباتيسول ، إتش بي (2010). اضطراب الغدد الصم العصبية: الجذور التاريخية ، التقدم الحالي ، أسئلة للمستقبل. أمامي. نيوروندوكرينول. 31 ، 395-399.

Guo-Hua، X.، Zhi-Hong، H.، and Yong-Fangl، W. (2000). دراسة التأثير المحتمل المضاد للورم وكفاءة المناعة في اليقطين متعدد السكاريد. ووهان البروفيسور ميد. كول. 28 ، 1-4.

هيما ، ر. ، كومارافيل ، س ، وألاغوسوندارام ، ك. (2011). تقدير GC / MS للمكونات النشطة بيولوجيًا لمورايا كونيجي. جيه. علوم. 7 ، 80-83. Huang، L.، Mivechi، NF، and Moskophidis، D. (2001). نظرة ثاقبة لتنظيم ووظيفة جزيئي Hsp70 الناجم عن الإجهاد

Chaperone In Vivo: تحليل الفئران مع تعطيل الجينات المستهدفة لجين hsp70.1 أو hsp70.3. مول. سل ، بيول. 21 ، 8575-8591.

Huang، Q.، Liu، H.، Suzuki، K.، Ma، S.، and Liu، C. (2019). ربط ما نأكله بمزاجنا: مراجعة للنظام الغذائي ومضادات الأكسدة الغذائية والاكتئاب. مضادات الأكسدة 8 ، 376. دوى: 10.3390 / مضادات الأكسدة 8090376

Jeong و HJ و Kim و JH و Kim و NR و Yoou و MS و Nam و SY و Kim و KY وآخرون. (2015). التأثير المضاد للاكتئاب من ستيلن. قوس. فارم. الدقة. 38 ، 1223-1231.

Jonnalagadda، SC، Suman، P.، Morgan، DC، and Seay، JN (2017). "الفصل 2 - التطورات الأخيرة في تركيب وتطبيقات مشتقات البتيولين وحمض البتيولينك كوكلاء علاجي ،" في دراسات في كيمياء المنتجات الطبيعية. محرر R. Atta Ur (Elsevier). Khar، A.، Ali، AM، Pardhasaradhi، BY، Varalakshmi، CH، Anjum، R.، and Kumari، AL (2001). تحريض استجابة الإجهاد يجعل خلية الورم البشرية

الخطوط المقاومة لموت الخلايا المبرمج بوساطة الكركمين: دور وسيطة الأكسجين التفاعلية. مرافق الإجهاد الخلوي 6 ، 368-376. دوى: 10.1379 / 1466-1268 (2001) 006<0368:iosrrh>2. 0. co؛ 2 Kikuchi، T.، Ando، H.، Maekawa، KI، Arie، H.، Yamada، T.، and Tanaka، R. (2015). نوعان جديدان من Diterpene Glycosides من نوع Ent-kaurane من بذور الكوسة (Cucurbita Pepo L.). فيتوتيرابيا 107 ، 69-76. دوى: 10.1016 / j.fifitote.2015.09.019 Kim، HY، Nam، SY، Yang، SY، Kim، HM، and Jeong، HJ (2016a). القرع

موشاتا دوتش. ومكونه النشط ، -كاروتين يعزز بشكل فعال الاستجابات المناعية من خلال تنشيط الخلايا الطحالية والضامة. إمونوفارماكول. السمية المناعية. 38 ، 319-326.

Koldysheva، EV، and Lushnikova، EL (2008). إعادة تنظيم البنية التحتية لقشرة الفئران الكظرية بعد ارتفاع حرارة الجسم بالكامل. ثور. إكسب. بيول. ميد. 145 ، 650-655.

ينظم استنفاد الجلوكوكورتيكويد الذي يسببه الميتررابون التيروزين هيدروكسيلاز وفينيل إيثانولامين إن-ميثيل ترانسفيراز الجيني في الغدة الكظرية عند الجرذ عن طريق تنشيط غير كوليني عبر المشبكي. J. نيوروندوكرينول. 15 ، 15-23.

لاشانس ، إل آر ، ورامسي ، د. (2018). الأطعمة المضادة للاكتئاب: نظام التنميط الغذائي القائم على الأدلة للاكتئاب. العالم J. الطب النفسي 8 ، 97-104.