الآثار المضادة لفرط سكر الدم ونقص شحميات الدم من Cistanche Tubulosa

جهة الاتصال: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 البريد الإلكتروني:audrey.hu@wecistanche.com

التأثيرات المضادة لفرط سكر الدم ونقص شحميات الدم لفئران Cistanche tubulosain من النوع 2 السكري ديسيبل / ديسيبل

وين تينغ شيونغ وآخرون

الملخص

أهمية الإثنوفارماكولوجي:الجذعية النضرة المجففةسيستانشتوبولوسا (شينك) ر. وايت هو أحد مكونات وصفات الطب الصيني التقليدي لمرض السكري. ومع ذلك ، كانت هناك تقارير علمية حديثة لتأكيد هذا الادعاء التقليدي لأنواع Cistanche حتى الآن. وهكذا ، حققنا في آثارسيستانشتوبولوساعلى توازن الجلوكوز ودهون المصل في ذكور BKS.Cg-Dock7m þ / þ Leprdb / J (db / db) الفئران ، نموذج لمرض السكري من النوع 2.

المواد والأساليب:محتويات فيرباسكوسايد وإشنكوسايدسيستانشتوبولوساتم تقييم المسحوق باستخدام HPLC. المحتوى الفينولي الكلي ومحتوى السكاريد والنشاط المضاد للأكسدة لـسيستانشتوبولوساكما تم تقييم المسحوق. ثم جرعات مختلفة منسيستانش توبولوسا(ما يعادل 120.9 أو 72.6 أو 24.2 مجم فيرباسكوسايد / كجم) تم تناوله عن طريق الفم مرة واحدة يوميًا لمدة 45 يومًا للذكور ديسيبل / ديسيبل. تم استخدام الفئران ديسيبل / المتطابقة مع العمر كعناصر تحكم عادية. تم قياس وزن الجسم ، وجلوكوز الدم الصائم ، وجلوكوز الدم بعد الأكل ، وتحمل الأنسولين خلال التجربة. في وقت التضحية ، تم جمع الدم لقياس مستوى الأنسولين وتقييم نموذج التماثل الساكن لمقاومة الأنسولين (HOMA-IR) ومستويات الكوليسترول الكلي والدهون الثلاثية و HDL-c و LDL-c و VLDL-c ؛ تم حصاد الكبد والعضلات لقياس مستويات الجليكوجين.

نتائج: سيستانشتوبولوساقمع بشكل كبير ارتفاع مستوى الجلوكوز في الدم أثناء الصيام ومستويات الجلوكوز في الدم بعد الأكل ، وتحسين مقاومة الأنسولين وعسر شحميات الدم ، وفقدان وزن الجسم في الفئران indb / db. لكن،سيستانشتوبولوسالم تؤثر بشكل كبير على مستويات الأنسولين في الدم أو مستويات الجليكوجين في الكبد والعضلات.

استنتاج:تقدم هذه الدراسة أدلة علمية على الاستخدام التقليدي لـسيستانشتوبولوسالعلاج مرض السكري ، مما يشير إلى ذلكسيستانشتوبولوسالديه القدرة على التطور إلى مكوِّن غذائي وظيفي أو دواء للوقاية من ارتفاع السكر في الدم وعلاج فرط شحميات الدم.

الكلمات الدالة:سيستانشتوبولوسا، داء السكري من النوع 2،تأثير مضاد لفرط سكر الدم ، تأثير نقص شحميات الدم

1 المقدمة

داء السكري (DM) هو اضطراب استقلابي تقدمي ومعقد يتميز بشكل أساسي بارتفاع مستويات السكر في الدم بشكل غير طبيعي (ارتفاع السكر في الدم) (Tiwari and Rao ، 2002 ؛ Stumvollet al. ، 2005 ؛ Nathan et al. ، 2009). ما يقرب من 90 في المائة من 347 مليون مريض بالسكري في جميع أنحاء العالم لديهم النوع 2 (غير المعتمد على الأنسولين) DM (Danaei et al. ، 2011). تساهم ثلاثة عيوب استقلابية رئيسية باستمرار في ارتفاع السكر في الدم لدى مرضى النوع 2 DM: نقص إفراز الأنسولين ، وارتفاع نسبة الجلوكوز في الكبد ، ومقاومة الأنسولين (Bavenholm et al. ، 2001). النوع 2 DM يمكن أن يقصر متوسط ​​العمر المتوقع ويمثل عبئًا طبيًا واقتصاديًا كبيرًا (Gakidou et al.، 2011)

التسبب في النوع 2 DM متعدد العوامل وقد تم ربطه بالعوامل الوراثية وعوامل نمط الحياة (Stumvoll et al. ، 2005).مضاد-ارتفاع السكر في الدمالأدوية هي الطريقة النموذجية لإدارة النوع 2 DM. الأدوية الفمويةمضاد-ارتفاع السكر في الدمالتأثير إما عن طريق تخفيف ثلاثة عيوب استقلابية رئيسية تسبب ارتفاع السكر في الدم أو عن طريق تقليل الزيادة بعد الأكل في مستويات السكر في الدم من خلال إعاقة هضم وامتصاص الكربوهيدرات في القناة الهضمية.

على الرغم من أن فئات متعددة من الأدوية الفعالة أصبحت اختيارات معروفة للعلاج الطبي في معظم مرضى النوع الثاني من DM يرتبط بزيادة خطر الإصابة بالسرطان وحتى الموت بعد الاستخدام طويل الأمد (Nissen and Wolski ، 2007 ؛ Zhang et al. ، 2007 ؛ Home et al. ، 2009). لذلك ، هناك حاجة ماسة لاكتشاف العوامل البديلة التي من شأنها أن تمارس نشاطًا خافضًا لنسبة السكر في الدم ولكن لها آثار جانبية أقل. مقارنة بالمواد الكيميائية الاصطناعية ، المشتقة بشكل طبيعيمكافحة ارتفاع السكر في الدمالعوامل ، مثل الأعشاب والأدوية التقليدية ، لها تاريخ طويل من الاستخدام وقد تمثل بشكل عام مصادر محتملة وآمنة للجديدةمكافحة ارتفاع السكر في الدمالأدوية (Yeh et al. ، 2003).

يستخدم Cistanche ، وهو جنس من النباتات الطفيلية التي تنتمي إلى عائلة Orobanchaceae ، كدواء تقليدي للاضطرابات الكلوية والعقم ، وفقًا لدستور الأدوية الصيني (هيئة الأدوية الصينية ، 2010). كما هو مسجل في كتب الطب الصيني مثل BenCao TuJing و Nature ofDrug ، تم أيضًا غلي جنس Cistanche مع لحم الضأن أو البطاطس أو الأرز لإنتاج طعام منشط لعلاج الضعف الناجم عن الإجهاد المفرط لمئات السنين ، مما يشير إلى أن جنس Cistanche آمن تأخذ شفويا.

في الطب الصيني التقليدي ، يشار إلى DM باسم "Xiao Ke" ، وقد تم علاجه لعدة قرون باستخدام الأعشاب الصينية. يتم استخدام الساق النضرة المجففة لأنواع Cistanche تقليديًا كمكون من تسع وصفات طبية لمكافحة مرض السكري ("Xiao Ke Fang") في كتاب الطب الصيني التقليدي Sengji Zonglu. ومع ذلك ، حتى الآن ، لم تكن هناك تقارير علمية حديثة لتأكيد هذا الادعاء التقليدي لأنواع Cistanchespecies.

سيستانشتوبولوسا(Schenk) R. Wight ، وهو نوع من أنواع Cistanche يزيل جذور نبات Tamarix - الذي يُزرع بشكل أساسي حول صحراء Taklamakan - وقد استخدم مؤخرًا لإنتاج الشاي الفوري لاستخدامه كغذاء وظيفي (DaZhongWeiShengBao ، 2010 ؛ Baidu Pedia ، 2011) .

سيستانشتوبولوسايحتوي على كميات ملحوظة من جليكوسيدات فينيل إيثانويد (PhGs) ، إيريديويد ، قشور ، ألديتول ، سكريات قليلة السكاريد ، عديد السكاريد ، ومركبات متطايرة مثل حمض البالمتيك وحمض اللينوليك (Song et al. ، 2000 ؛ Jiang and Tu ، 2009). يُعتقد أن المكونات النشطة الرئيسية لأنواع Cistanche هي PhGs (Xie et al. ، 2006 ؛ Jiang and Tu ، 2009).سيستانشتوبولوساومكوناته ، مثل PhGs ، والسكريات المتعددة ، والبوليفينول ، تم الإبلاغ عن أنها تعرض مضادات أكسدة جيدة (Denget al. ، 2004 ؛ Pellati et al. ، 2004 ؛ Frum et al. ، 2007 ؛ Sui et al. ، 2011 ؛ Wang et al. ، 2011) ، وتأثيرات مضادة لارتفاع ضغط الدم (Ahmad et al. ، 1995) ونقص الكوليسترول (Shimoda et al. ، 2009). أشارت العديد من التقارير إلى أن مادة PhGs و polysaccharides و polyphenols تمارسمكافحة ارتفاع السكر في الدمالتأثيرات أو يكون لها تأثير مفيد في النوع 2 DM من خلال مسح الجذور الحرة وتعديل الإجهاد التأكسدي الناجم عن الجلوكوز (Pinto et al. ، 2010 ؛ Saltiel ، 2001 ؛ Gulati et al. ، 2012). هذه المكونات والنشاطات الحيويةسيستانشتوبولوساتشير إلى أنه يمكن استخدامه لعلاج النوع 2 DM. بسبب عدم وجود تقارير تصف آثارسيستانشتوبولوسافي علاج مرض السكري ، هل من المفيد التحقيق في النشاط المضاد لمرض السكريسيستانشتوبولوسا. وهكذا ، قمنا بفحص آثارسيستانشتوبولوساعلى ارتفاع السكر في الدم وخلل شحوم الدم في الفئران BKSdb / db (BKS.Cg-Dock7m þ / þ Leprdb / J ، مخزون مختبر جاكسون رقم 00642) ، نموذج من النوع 2 DM يعرض العديد من خصائص DM البشرية بما في ذلك ارتفاع السكر في الدم التدريجي ومقاومة الأنسولين والسمنة (Hummel وآخرون ، 1966 ؛ نيشينا وآخرون ، 1994 ؛ أوشيدا وآخرون ، 2005 ؛ سرينيفاسان وراماراو ، 2007).

2. المواد والأساليب

2.1. مواد كيميائية

تم شراء Verbascoside (نقاء 493 في المائة) وإشنكوسايد (نقاء 493 في المائة) من المعاهد الوطنية لمراقبة الأغذية والأدوية (بكين ، الصين). تم شراء الميثانول من فئة HPLC من شركة Sigma-Aldrich (سانت لويس ، ميزوري ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم شراء Acarbose من Bayer (West Haven ، CT ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم إنتاج المياه النقية باستخدام نظام Millipore Milli-Q Integral 3 ونظام Q-POD Milli-Q (بيدفورد ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية).

2.2. تحضير مسحوق Cistanche tubulosa

السيقان النضرة المجففةسيستانشتوبولوسا(رمز العينة 109092 ، المزروعة في Hetian ، شينجيانغ ، الصين) تم شراؤها من Xinjiang Guru Biology Co. Ltd. (Hetian ، شينجيانغ ، الصين). تم سحق الجذور المجففة إلى مسحوق ، ومنخل من خلال 200- غربال شبكي ، مختلط محكم الغلق في عبوات صغيرة لعزل المسحوق عن الضوء والرطوبة وتخزينه في 4 1 درجة مئوية.

2.3 تحديد Cistanche tubulosa

تم تحديد الساق النضرة المجففة للعينة 109092 من خصائصها المورفولوجية من قبل البروفيسور DeXiang Gu والبروفيسور Xin Liu ، وهما خبراء في أنواع Cistanche. تم تحديد العينات بشكل أكبر من خلال تسلسل الحمض النووي. تم عزل الحمض النووي الجيني الكلي من عينة 109،092 باستخدام مجموعة DNA AxyPrep ™ MultisourceGenomic (Axygen ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم تضخيم منطقة ITS التي تحتوي على جزء rDNA 5.8S باستخدام تسلسلات أولية لـ ITS1 / ITS 2 5 ′ CGT AAC AAG GTT TCC GTA GAA 3 ′ و 5 TTA TTG ATA TGCTTA AAC TCA GCG GG 3 ′ (BGI Genomics ، Shenzhen ، الصين) ، بالطريقة التي وصفها Schneeweiss et al. (شنيويس وآخرون ، 2004). تم تسلسل الحمض النووي المتضخم بواسطة BGI (BGI Genomics ، Shenzhen ، الصين) ، وتمت مقارنة النتيجة معسيستانشتوبولوسا5.8s تسلسل rDNA على GenBank.

2.4 تحليل HPLC

تم استخدام اثنين من PhGs ، echinacoside و verbascoside ، كمعايير الجودة لسيستانشتوبولوسا، وفقًا لدستور الأدوية الصيني (هيئة دستور الأدوية الصينية ، 2010). HPLC هو الأكثر استخدامًا لنوعية وكمية PhGs. وهكذا ، فإن محتويات فيرباسكوسايد وإشنكوسايدسيستانشتوبولوساتم تحديدها باتباع طريقة HPLC التي تم نشرها مسبقًا (Zhao et al. ، 2 0 11). باختصار ، 0.1 جمسيستانشتوبولوساتمت إضافة المسحوق إلى 1 {{1 0} مل من المياه النقية وتم تقليبها بشكل مكثف باستخدام دوامة على شاكر مداري (Vortex-Genie 2، Scientific Industries، Bohemia، New York، USA) لمدة 1 0 دقيقة في درجة حرارة الغرفة. تمت إعادة استخلاص المادة الصلبة مرتين في نفس الظروف. تم دمج المستخلصات ، وضبطها إلى 50 مل ، وطردها عند 12 ، 000 جم لمدة 5 دقائق. تم ترشيح المادة الطافية من خلال مرشح حقنة متعدد رباعي فلورو الإيثيلين (PTFE) 0.45 ميكرومتر (Pall ، آن أربور ، ميتشيغن ، الولايات المتحدة الأمريكية). بعد ذلك ، تم حقن 20 ميكرولتر من المادة الطافية في نظام HPLC (مضخة HPLC الثنائية 1525 ، كاشف الانكسار 2414 ، كاشف الصفيف الضوئي 2996 ؛ ووترز ، ميلفورد ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية) والتي تضمنت عمود تناظر C18 (4.6 مم 250 مم ، 5 ميكرون ؛ المياه) وعمود الحرس (3.9 مم 20 مم ، 5 مم ؛ المياه) ؛ تم التحكم في النظام باستخدام برنامج EmpowerPros (ووترز ، ميلفورد ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية) بمعدل تدفق 1 مل / دقيقة عند 30 1 درجة مئوية. تم إجراء الطور المتحرك بخلط المذيب أ (0.5 بالمائة (V / V) محلول مائي لحمض أسيتيك) والمذيب ب (ميثانول) لتكوين تدرج خطي من 25-40 بالمائة ب في 0-10 دقائق. كانت أزمنة شبكية إشنكوسايد وفيرباسكوسايد 10.4 دقيقة و 13.6 دقيقة ، بأقصى امتصاص للأشعة فوق البنفسجية يبلغ 330 نانومتر.

2.5 تحليل المحتوى الفينولي الكلي ومحتوى السكاريد والنشاط المضاد للأكسدة لـ Cistanche tubulosa

2.5.1. إعداد عينة

سيستانشتوبولوساتم تحضير المستخلص بالماء النقي باستخدام طريقتنا المنشورة سابقًا (Zhao et al. ، 2011) مع تعديلات طفيفة ، لتقدير المحتوى الفينولي الكلي ومحتوى السكريات ونشاط مضادات الأكسدة (الشكل 1). باختصار ، 1 غرامسيستانشتوبولوساتمت إضافة المسحوق إلى 15 مل ماء منقى عند درجة حرارة الغرفة ، مع التقليب الدوامي المكثف باستخدام شاكر مداري لمدة 5 دقائق ، وتم استعادة المادة الطافية بالطرد المركزي عند 3 0 00 جم لمدة 15 دقيقة. تمت إعادة استخراج الترسيب مرتين تحت نفس الحالة. تم تعديل المادة الطافية المدمجة إلى 50 مل بالماء النقي وتمريرها من خلال مرشح حقنة PTFE 0.45 ميكرومتر (Pall) قبل التحليل.

2.5.2. تحليل محتوى الفينول الكلي

تم تحديد إجمالي محتوى الفينول باستخدام Folin – Ciocalteureagent وحمض الغال كمركب مرجعي ، كما وصفه Singleton و Rossi (Dubois et al. ، 1956 ؛ Singleton and Rossi ، 1965) مع تعديلات طفيفة. باختصار ، 0. 1 مل منسيستانشتوبولوساتم خلط المستخلص مع {0}}. 9 مل من الماء النقي و 5 مل من كاشف Folin-Ciocalteu (المخفف سابقًا 10- أضعاف بالماء المقطر) ، يُسمح له بالوقوف عند 25 1 درجة مئوية من أجل تمت إضافة 3.5 دقيقة ، ثم 4 مل من محلول بيكربونات الصوديوم (7.5 بالمائة وزن / حجم) إلى الخليط واحتضانه عند درجة حرارة {{1 0} مئوية لمدة 60 دقيقة. تم قياس الامتصاصية عند 765 نانومتر باستخدام مقياس الطيف الضوئي (Perkin Elmer 25 UV – visualized، Waltham، MA، USA). تم تحديد إجمالي محتوى الفينول باستخدام منحنى قياسي تم إنشاؤه باستخدام حمض الغال (0-0.6 مجم / مل) كمعيار. تم حساب النتائج كمكافئات مليغرام حمض الغاليك (GAE) / 1 جمسيستانشتوبولوسامسحوق خام. تم تكرار جميع الاختبارات أربع مرات.

2.5.3. تحليل محتوى السكريات

محتوى السكاريد منسيستانشتوبولوساباستخدام طريقة حمض الفينول والكبريتيك (Dubois et al.، 1951؛ Duboiset al.، 1956). باختصار ، تم وضع 1 مل من مستخلص Cistanchetubulosa المخفف بشكل مناسب و 0 .5 مل من محلول الفينول بفتحة لولبية ، والتي تم تغطيتها وتحريكها بالدوامة. بعد ذلك ، تمت إضافة 2.5 مل من حمض الكبريتيك المركز مباشرة إلى السطح السائل خلال 5 ثوانٍ. تم إغلاق الأنابيب بعد ذلك ، وتقليب الدوامة لمدة 5 ثوانٍ ، واحتضانها لمدة دقيقتين عند 100 1 درجة مئوية ، والسماح لها بالتباطؤ إلى درجة حرارة الغرفة قبل التحليل. تم قياس الامتصاصية عند 49 0 نانومتر باستخدام مقياس الطيف الضوئي (Perkin Elmer λ25 UV – مرئية) مقابل 70٪ ميثانول فارغ. تم تحديد محتوى السكريات باستخدام منحنى قياسي تم إنشاؤه باستخدام الجلوكوز (0-100 مجم / مل) كمعيار. تم حساب النتائج كنسبة مئوية من عديد السكاريد /سيستانشتوبولوسامسحوق خام. تم تكرار جميع الاختبارات ثلاث مرات.

2.5.4. تحليل النشاط الكلي لمضادات الأكسدة

النشاط المضاد للأكسدةسيستانشتوبولوساتم تحديد المستخلص ، والأكاربوز ، والروسيجليتازون عن طريق مقايسة قدرة مضادات الأكسدة (Fe3þ) التي تقلل من قدرة مضادات الأكسدة (2- حمض إيثيل بنزوثيازولين سلفونيك -6) FRAP) باستخدام الأدوات التجارية (بيوتايم ، هيمن ، الصين). باستخدام المؤكسدات المناسبة ، يمكن أكسدة ABTS إلى ABTS الأخضر ؛ مضادات الأكسدة يمكن أن تمنع هذه العملية. يمكن أن ينعكس إجمالي النشاط المضاد للأكسدة لمضادات الأكسدة من خلال امتصاص ABTS عند 734 نانومتر. تم قياس الامتصاص عند 734 نانومتر (ABTS) باستخدام رأس صغير (Epoch ، Bio-Tek ، Richmond ، VT ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، مع Trolox (ABTS) معيار مضادات الأكسدة أسان. تم حساب نتائج اختبار ABTS كمضاد أكسدة مكافئ مم ترولوكس (TEAC) / مسحوق 1 جم.

في ظل الظروف الحمضية ، يمكن لمضادات الأكسدة أن تعيد ferrictripyridyltriazine (Fe3þ-TPTZ) إلى Fe2þ-TPTZ الأزرق. يمكن أن ينعكس إجمالي نشاط مضادات الأكسدة لمضادات الأكسدة عن طريق امتصاص Fe2þ-TPTZ عند 593 نانومتر. تم قياس الامتصاصية عند 593 نانومتر (FRAP) باستخدام قارئ الصفيحة الدقيقة (Epoch) ، مع FeSO4 (FRAP) كمعيار مضاد للأكسدة. تم حساب نتائج اختبار FRAP على أنها مم FeSO4 قدرة مضادات الأكسدة المكافئة (FEAC) / مسحوق 1 جم. تم تكرار جميع الاختبارات أربع مرات.

2.6. آثار Cistanche tubulosa على ارتفاع السكر في الدم في الفئران ديسيبل / ديسيبل

2.6.1. الحيوانات ومجموعات العلاج

ذكر BKS.Cg-Dock 7 م þ / Leprdb / J (ديسيبل / ديسيبل) الفئران وزملائهم المتغاير الزيجوت غير المتجانسة غير المصابة بالسكري (db /) تم تقديمهم بشكل لطيف في عمر 5-6 أسابيع من قبل National ResourceCenter for Mutant Mice Model مركز أبحاث الحيوان بجامعة نانجينغ (نانجينغ ، الصين). تمت الموافقة على رعاية الحيوان والإجراءات التجريبية من قبل لجنة أخلاقيات حيوانات المختبر التابعة لكلية علوم الحياة بجامعة صن يات صن (رمز الموافقة 0046500) ، وتم إجراؤها وفقًا لقواعد التجارب على الحيوانات في الصين. تم تسكين الحيوانات في غرفة من الدرجة 2272 1 خالية من مسببات الأمراض (SPF) بدرجة رطوبة تبلغ 6075 في المائة في دورة مظلمة فاتحة مدتها 12 ساعة ، وتم إطعامها نظام غذائي مُنقى -93 من نوع G (علف حيواني غذائي عالي- tech Co.، Ltd. ، نانتونج ، الصين) وقدمت المياه النقية الإعلانية بالشهرة.

بعد سبعة أيام من الوصول ، تم إعطاء الفئران غير المصابة بمرض السكري db / مياه نقية (مركبة) كمجموعة تحكم طبيعية لمجموعات مرضى السكري (n¼7) ، بينما تم وزن الفئران المصابة بمرض السكري db / db وتقسيمها عشوائيًا إلى 6 مجموعات (n¼8) للتحقيق آثار السيستانشتوبولوسافي الفئران المصابة بداء السكري من النوع 2 ديسيبل / ديسيبل (الجدول 1). تم إعطاء Thedb / þ الفئران عن طريق الفم للسيارة ، و db / db micewere عن طريق الفم ، rosiglitazone (0. 52 مجم / كجم / يوم) ، أكاربوز (19.5 مجم / كجم / يوم) ، أو ثلاث جرعات منسيستانشتوبولوسا(ما يعادل 120.9 أو 72.6 أو 24.2 مجم فيرباسكوسايد / كجم / يوم ويشار إليه بـ CT120.9 أو CT72.6 أو CT24.2 على التوالي) لمدة 45 يومًا. جرعاتسيستانشتوبولوساتم ضبطها وفقًا لجرعة المسحوق الخام التي أوصت بها دستور الأدوية لجمهورية الصين الشعبية (PPRC) ؛سيستانشتوبولوساجرعات 120.9 و 72.6 و 24.2 مجم فيرباسكوسايد / كجم / يوم تتوافق مع تخفيفات الطية 5- و 3- أضعاف و 1- أضعاف جرعة المسحوق الموصى بها من قبل PPRC. تم إذابة جميع عينات الاختبار للإعطاء عن طريق الفم في الماء النقي بتركيزات مناسبة من أجل إعطاء أحجام مماثلة من عينات الاختبار للفئران التي لها نفس وزن الجسم. كانت الأحجام الإجمالية التي تم إعطاؤها أقل من 1 مل ، وتم إعطاء عينات الاختبار عن طريق الفم لكل مجموعة من الفئران كل يوم بين الساعة 16:30 والساعة 17:30 لمدة 45 يومًا. تم رصد وزن الجسم ومستويات السكر في الدم طوال فترة التجربة. في نهاية التجربة (اليوم 50) ، صامت الفئران لمدة 14 ساعة ، وتم جمع عينات الدم من الوريد العيني ، وحضنت في درجة حرارة الغرفة لمدة 30 دقيقة ، وطردها مركزيًا ، وتم تخزين عينات المصل عند 70 1 درجة مئوية لمدة مزيد من الفحص. في وقت لاحق ، تم قتل الفئران. تم حصاد الكبد والعضلات الهيكلية ، وغسلها في محلول ملحي بالثلج لإزالة الدم ، وتجميدها في النيتروجين السائل ، وتخزينها في 70 1 درجة مئوية لمزيد من الفحص.

2.6.2. فحص مستوى الجلوكوز في الدم أثناء الصيام (FBG) ، واختبار تحمل الأنسولين البريتوني (ITT) ، ومستوى الأنسولين في الدم أثناء الصيام (FINS)

تم قياس مستويات الجلوكوز في الدم أثناء الصوم بعد 14 ساعة قبل بدء التجربة على الحيوانات (0 يوم) ، في اليوم الأول {{1 0} وكل 5 أيام خلال الأيام 20-45 من التجربة باستخدام نظام مراقبة نسبة السكر في الدم (ACCU-CHEK Active ، Roche DiagnosticsGmbH ، مانهايم ، ألمانيا). تم حساب النسبة المئوية للزيادات في قيم FBG (قيم زيادة نسبة FBG: نسبة زيادة FBG) في اليوم x (اليوم 20-45) باستخدام (BGday x BGday 0) / BG0 اليوم 100 ، لتمثيل الزيادات في قيم FBG لكل منها مجموعة مقارنة بقيمها FBG الأولية. تم تحديد مستويات السكر في الدم بعد الأكل بعد 120 دقيقة من تناول الجلوكوز عن طريق الفم (2 جم / كجم من وزن الجسم) في اليوم 40.

تم إجراء اختبار ITT في اليوم 45 من التجربة ، وصيام الليل (14 ساعة). تم قياس مستويات الجلوكوز في الدم في دم وريد الذيل قبل حقن الأنسولين (0 دقيقة) وعند 3 0 دقيقة ، 60 دقيقة بعد الحقن البريتوني للأنسولين (0.1 وحدة دولية / كجم من وزن الجسم). تم التعبير عن ITT كمناطق متكاملة تحت منحنيات الأنسولين (AUCinsulin) ، محسوبة باستخدام شبه المنحرف (Vishwakarma et al. ، 2003). في نهاية التجربة ، تم تحليل مستويات الأنسولين في مصل الصيام باستخدام مجموعة ELISA للفئران / الفأر من ميليبور (بيدفورد ، ماساتشوستس ، الولايات المتحدة الأمريكية) ؛ تم تحضير عينات الأمصال باتباع تعليمات المجموعة. تم حساب تقييم النموذج المثلي لمؤشر مقاومة الأنسولين (HOMA-IR) باستخدام الصيغة التالية: HOMA-IR - الأنسولين الصائم (نانوغرام / مل) جلوكوز الدم الصائم (مليمول / لتر) / 22.5 (ماثيوز وآخرون ، 1985).

2.6.3. فحص مستويات الدهون في الدم

تم تحديد تركيزات الكوليسترول الكلي في الدم (TC) وكوليسترول البروتين الدهني عالي الكثافة (HDL-c) والدهون الثلاثية (TG) باستخدام مجموعات الأنزيمية التجارية (Biosino Biotechnology & Science Inc. ، بكين ، الصين). تم حساب مستويات كوليسترول البروتين الدهني منخفض الكثافة (LDL-c) على أنها TC-TG / 5 - HDL-c ، بينما تم حساب مستويات كوليسترول البروتين الدهني منخفض الكثافة (VLDL-c) على أنها TG / 5 ، وفقًا لمعادلة Friedewald (Friedewald) وآخرون ، 1972) تم حساب مؤشر تصلب الشرايين على أنه (TC HDL-c) / HDL-c.

2.6.4. فحص مستويات الجليكوجين في الكبد والهيكل العظمي

تمت معالجة الكبد والعضلات الهيكلية المجمدة لتحليل الجليكوجين فور إزالتها من مجمدات 70 1 سي. تم قياس محتويات الجليكوجين في الكبد والعضلات الهيكلية باستخدام مجموعة الجليكوجين التجارية (جيانتشينغ ، نانجينغ ، الصين) على أساس طريقة كيبلر وديكر (كيبلر وديكر ، 1974). تم قياس امتصاص العينات عند 505 نانومتر بعد تبريد الأنابيب إلى درجة حرارة الغرفة. تم التعبير عن كمية الجليكوجين في كل عينة من الأنسجة على أنها مجم جلوكوز لكل جرام من الأنسجة.

2.7. تحليل احصائي

يتم التعبير عن جميع النتائج على أنها متوسط ​​7SEM وتم تحليلها باستخدام ANOVA للحزم الإحصائية لبرامج العلوم الاجتماعية (SPSS 16. 0 ، شيكاغو ، إلينوي ، الولايات المتحدة الأمريكية) أو GraphPad Prism 5 (لا جولا ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم أيضًا تقييم فهارس HOMA-IR باستخدام اختبار t المستقل المكون من عينتين بعد التحويل اللوغاريتمي. تم حساب قيم AUC باستخدام GraphPad Prism 5. قيم P أقل من 0. تم ​​اعتبار 05 للإشارة إلى اختلافات ذات دلالة إحصائية.

3. النتائج

3.1. تحديد عينة Cistanche

تشير نتائج محاذاة التسلسل إلى أن التسلسل المضخم هو نفسه معسيستانش توبولوساالجينات لتسلسل 5.8S rDNA الجزئي والكامل (614 نيوكليوتيدات ؛ رقم انضمام البنك العام AB217871). على أساس خصائصها المورفولوجية وتسلسل الجينات rDNA 5.8S ، تم تحديد العينة 109،092 على أنهاسيستانشتوبولوسا.

3.2 التحديد الكمي لمحتوى فيرباسكوزيد ومحتوى شيناكوسايد من سيستانش توبولوسا

محتويات فيرباسكوسايد وإشنكوسايد فيسيستانشتوبولوساتم قياسها باستخدام المعايير المناسبة. محتويات Theverbascoside و echinacoside منسيستانشتوبولوساكانت 2.66 في المائة و 11.59 في المائة على التوالي. كروماتوجرام HPLC منسيستانشتوبولوسامقتطف مبين في الشكل 2.

3.3 إجمالي المحتوى الفينولي ، ومحتوى السكاريد ، والنشاط المضاد للأكسدة في Cistanche tubulosa

إجمالي محتوى الفينولسيستانشتوبولوساكان 66.2970.44 مجم GA / جم. محتوى السكاريد منكانت أنابيب Cistanche10.1570.26 في المائة. أشارت فحوصات ABTS و FRAP إلى أن أنشطة الأكسدة كانت 1.3970.06 ملي مولار TEAC / جم و 1.6170.04 ملي مولار FEAC / g لـسيستانشتوبولوسا، {0}. 157 0. 0 1 ملم TEAC / gand 0.1270.01 ملم FEAC / g للأكاربوز ، و 0.1670.01 ملي مولار / غرام و 0.1370.01 ملم FEAC / g لـ rosiglitazone ، على التوالي.

3.4. التأثيرات المضادة لفرط سكر الدم لـ Cistanche tubulosa في الفئران ديسيبل / ديسيبل

أظهرت نتائجنا ذلكسيستانش توبولوسايمكن أن يثبط مستويات الجلوكوز في الدم الصيام المرتفع ومستويات الجلوكوز المرتفعة بعد الأكل ، ويزيد من حساسية الأنسولين ، ويخفف من وزن الجسم (BW) للفئران المصابة بمرض السكري ديسيبل / ديسيبل. عمومًا،سيستانشتوبولوساكان أكثر فاعلية في تقليل فرط سكر الدم أثناء التجربة ، وعلاوة على ذلك ، كان Cistanche tubulosa متفوقًا على أكاربوز لتحسين مقاومة الأنسولين (القيم p موضحة أدناه).

3.4.1. آثار Cistanche tubulosa على وزن الجسم والكبد

في مجموعة التحكم في مرض السكري ، زاد وزن وزن الجسم باستمرار في أول 25 يومًا. ومع ذلك ، مع تطور مرض السكري ، انخفض وزن الجسم بالنسبة لفئران التحكم في مرض السكري بشكل طفيف بحلول اليوم 30 (الجدول التكميلي 1). في السيستانشتوبولوساالمجموعات ، كل ثلاثة مجموعات منسيستانشتوبولوساخفض معدل فقدان الوزن مقارنة بفئران التحكم في مرض السكري (بدون أهمية ، الجدول التكميلي 1). في المجموعة الضابطة الإيجابية ، أدى الروزيجليتازون إلى زيادة ملحوظة في وزن الجسم اعتبارًا من اليوم الثاني 0 مقارنة بمجموعة التحكم في مرض السكري (ص 0. 05). في المقابل ، أبطأ أكاربوز من معدل فقدان الوزن مقارنة بمجموعة التحكم في مرض السكري. في المجموعة الضابطة العادية ، زاد وزن الجسم باستمرار أثناء التجربة وكان أقل بشكل ملحوظ من مجموعة التحكم في مرض السكري (P <>

في نهاية التجربة ، زاد وزن الكبد ونسبة الكبد / وزن الجسم بشكل ملحوظ فقط في مجموعة روزيجليتازون (po {0}}. 001) مقارنة بمجموعة التحكم في مرض السكري.

3.4.2. تأثير Cistanche tubulosa على مستويات السكر في الدم

سيستانشتوبولوساعرضمكافحة ارتفاع السكر في الدمتأثيرات indb / db الفئران بعد 2 0 يوم من تناوله عن طريق الفم ويمكن أن تتحكم في مستوى FBG وقيمة نسبة زيادة FBG لفترة طويلة من الوقت على db / dbmice بطريقة تعتمد على الجرعة ، كما هو موضح من خلال الصيام المتناقص بشكل ملحوظ وبعد الأكل مستويات السكر في الدم (الشكل 3 ، الجدول 2). في مجموعة التحكم في مرض السكري ، زاد مستوى FBG باستمرار أثناء التجربة وكان أعلى بحوالي 6 مرات من مجموعة التحكم العادية في اليوم 45 (28.3071.027 مليمول / لتر مقابل 4.6670.350 مليمول / لتر ؛ P <0.001). جميع="" الجرعات="">سيستانشتوبولوسامنع بشكل ملحوظ ميل FBG إلى الزيادة في ميكرو ديسيبل / ديسيبل خلال التجربة بأكملها ، حيث أظهر CT12 0. 9 أقوى تأثير سكر الدم (اليوم 2 0 ، و 35 ، و 45: po {{1 {{ 16}}}}. 0 0 1 ؛ اليوم الرابع 0: po 0. 0 5 مقابل السيطرة على مرض السكري). في المجموعات الضابطة الإيجابية ، قام الروزيجليتازون (0. 52 مجم / كجم) والأكاربوز (19.5 مجم / كجم) أيضًا بإعاقة بشكل كبير ميل FBG إلى الزيادة في الفئران ديسيبل / ديسيبل أثناء التجربة بأكملها (اليوم 2 {{41} } إلى 45: po 0. 0 01، day 10: po0.05، rosiglitazonevs. 05 ، أكاربوز مقابل السيطرة على مرض السكري). ومع ذلك ، كان أكاربوز (19.5 مجم / كجم) أقل فعالية من روزيجليتازون (اليوم 20: ص 0.05 ؛ اليوم 30: ص 0.01 ؛ اليوم 35-45: ص 0.001) و CT120.9 (اليوم 45: ص 0.001) . في المجموعة الضابطة العادية ، ظل مستوى FBG ثابتًا خلال التجربة بأكملها وكان أقل بكثير من مستوى مجموعة التحكم في مرض السكري (P <>

بعد تناوله لمدة 20 يومًا ،سيستانش توبولوساتثبط بشكل ملحوظ الزيادة في مستويات الجلوكوز في الدم في الفئران ديسيبل / ديسيبل (الشكل 3). زادت قيم نسبة زيادة FBG لمجموعة التحكم في مرض السكري ومجموعة الأكاربوز (19.5 مجم / كجم من وزن الجسم) خلال التجربة. قيم نسبة الزيادة في FBG للثلاثةسيستانشتوبولوسازادت المجموعات بشكل طفيف فقط في اليوم 30. ظلت قيم نسبة الزيادة في FBG لمجموعة CT120.9 ثابتة بين اليوم 30 واليوم 45 ، بينما زادت CT72.6 و CT24.2 بشكل ضئيل (ص 40.05) بحلول اليوم 45. بنهاية التجربة ، الجرعات الثلاث منسيستانشتوبولوسا(CT12 0. 9 و CT72.6 و CT24.2) كبحت بشكل ملحوظ الزيادة في قيم النسبة المئوية للزيادة في FBG بنسبة 181.5 بالمائة و 151.72 بالمائة و 123.58 بالمائة مقارنة بمجموعة التحكم في مرض السكري (PO {{ 24}}. 001) ، على التوالي. من اليوم 20 إلى اليوم 40 ، كانت قيم نسبة الزيادة في FBG لمجموعات Cistanche tubulosa الثلاثة أقل أو مشابهة لمجموعة أكاربوز (ص 40.05). في اليوم 45 ، كانت نسبة زيادة FBG لمجموعة CT120.9 أقل بكثير من مجموعة الأكاربوز (P <>

سيستانشتوبولوساعرض تأثيرات سكر الدم المعتمدة على الجرعة (الجدول 2). في نهاية التجربة ، كانت مستويات FBG لمجموعة CT120.9 أقل بكثير من مجموعة التحكم في مرض السكري ، والأكاربوز ، واثنين آخرينسيستانشتوبولوساالمجموعات (CT12 0. 9 مقابل أكاربوز ، و CT72.6 ، و CT24.2 ، ص 0. 01 ؛ CT120.9 مقابل التحكم في مرض السكري ، ص 0.001 ؛ الجدول 2). بنهاية التجربة ، مستويات FBG الثلاثةسيستانشتوبولوسازادت المجموعات (CT120.9 و CT72.6 و CT24.2) بنسبة 53.41 بالمائة و 83.19 بالمائة و 111.33 بالمائة على التوالي ، مقارنة بمستويات FBG الأولية ، بينما زادت مستويات FBG لمجموعة التحكم في مرض السكري ومجموعة الأكاربوز بمقدار 234.91 في المئة و 150.76 في المئة. من بين الجرعات الثلاث التي تم اختبارها من Cistanche tubulosa ، أدى CT120.9 فقط إلى خفض مستويات FBG باستمرار خلال التجربة بأكملها. كان CT72.6 و CT24.2 أقل فعالية في تقليل مستوى FBG من CT120.9 (الجدول 2 ، الشكل التكميلي 1). زادت مستويات FBG لمجموعة CT120.9 من اليوم 30 ، بينما زادت مستويات FBG في الاثنين الآخرينسيستانشتوبولوساالمجموعات ومجموعة أكاربوز زادت بسرعة أكبر. من يوم 10 إلى 40 ، مستويات FBG الثلاثةسيستانشتوبولوساكانت المجموعات أقل أو مشابهة لمجموعة الكربوز (19.5 مجم / كجم من وزن الجسم) ؛ لم تكن هذه الفروق ذات دلالة إحصائية (ص 40.05).

في اليوم الرابع 0 ، CT12 0 .9 قمع بشكل ملحوظ الارتفاع في مستوى الجلوكوز في الدم بعد الأكل (P <0.05 ،="" الجدول="" 2)="" بعد="" ساعتين="" من="" تناول="" جرعة="" واحدة="" من="" الجلوكوز="" عن="" طريق="" الفم="" (2="" جم="" كجم).="" كان="" تأثير="" ct120.9="" على="" مستوى="" الجلوكوز="" في="" الدم="" بعد="" الأكل="" في="" الفئران="" ديسيبل="" ديسيبل="" قابلاً="" للمقارنة="" مع="" 19.5="" مجم="" كجم="" أكاربوز="" (ص="" 40.05).="" كان="" تأثير="" ct72.9="" و="" ct24.2="" أقل="" فعالية="" من="" روزيجليتازون="" (p=""><>

3.4.3. تأثير Cistanche tubulosa على صيام مستوى الأنسولين في الدم وتحمل الأنسولين بين الصفاق

أظهرت نتائج FINS أنه بعد تناوله عن طريق الفم لمدة 45 يومًا ، أدى CT12 0 .9 إلى رفع مستوى الأنسولين في الدم بشكل طفيف (ص 40.05) في الفئران ديسيبل / ديسيبل بنسبة 40.73 في المائة ، في حين رفع روزيجليتازون بشكل ملحوظ مستوى الأنسولين في الدم بنسبة 58.90 في المئة (P <0.05 مقابل السيطرة على السكري ؛ الجدول 3).

تم حساب مؤشر HOMA-IR للتقييم الكمي لمساهمات مقاومة الأنسولين ووظيفة الخلية الناقصة في فرط سكر الدم أثناء الصيام. مقارنة بمجموعة التحكم في مرض السكري ، فإن CT12 0. 9 حسن بشكل غير ملحوظ مؤشر حساسية الأنسولين الجهازي HOMA-IR بنسبة 15.30 بالمائة (ص 40.05) ، في حين حسّن روزيجليتازون بشكل ملحوظ مؤشر HOMA-IR بنسبة 35.30 بالمائة (PO0.001 مقابل. السيطرة على مرض السكري ، الجدول 3). تم استخدام ITT لتقييم تأثيرسيستانشتوبولوساعلى حساسية الأنسولين بعد حقن الأنسولين الخارجي. أظهرت النتائج أن CT12 0 .9 يحسن استجابة الأنسولين في الفئران المصابة بمرض السكري ديسيبل / ديسيبل. كان تأثير CT12 0. 9 قابلًا للمقارنة مع rosiglitazone وكان أفضل من acarbose.CT12 {{1 {14}}}}. خفض 9 و rosiglitazone مستويات الجلوكوز في الدم بشكل كبير عند 0 دقيقة (قبل الأنسولين الحقن ، رقم 0. 0 0 1 مقابل التحكم في السكري) و 3 0 دقيقة (رقم 0. 01 لـ CT120.9 ، po0.001 لـ روزيجليتازون) بعد حقن الأنسولين (الشكل 4). خفض CT120.9 و rosiglitazone من AUCinsulin بنسبة 27.92 في المئة و 43.89 في المئة مقارنة مع السيطرة على مرض السكري. لم يكن هناك فرق كبير بين مستويات جلوكوز الدم في مجموعات CT120.9 و rosiglitazone في أي وقت خلال ITT. كانت مستويات الجلوكوز في الدم لمجموعة CT120.9 أقل بكثير من أكاربوز عند 0 دقيقة (قبل حقن الأنسولين ، P <0.01: ct120.9="" مقابل="" أكاربوز)="" ،="" 30="" دقيقة="" (p=""><0.01: ct120.9="" مقابل="" أكاربوز)="" ،="" و="" 60="" دقيقة="" (ص="" 0.05:="" ct120.9="" مقابل="" أكاربوز)="" بعد="" حقن="" الأنسولين="" (الشكل="" 4).="" خفض="" ct120.9="" من="" aucinsulin="" بنسبة="" 28.79="" في="" المئة="" مقارنة="" مع="" أكاربوز.="" لم="" يكن="" لـ="" acarbose="" و="" ct72.6="" و="" ct24.2="" تأثيرات="" كبيرة="" على="" مستويات="" aucinsulin="" أو="" الجلوكوز="" في="" الدم="" في="" أي="" نقطة="" زمنية="" من="" itt.="" كانت="" كل="" من="" نتائج="" fin="" و="" itt="" لمجموعة="" التحكم="" العادية="" أقل="" بكثير="" من="" تلك="" الخاصة="" بمجموعة="" التحكم="" في="" مرض="" السكري="" (p0.05:="" fin="" ؛="" po0.001:="">

3.4.4. تأثير Cistanche tubulosa على مستويات الكبد والعضلات الهيكلية

مستويات الجليكوجين في الأنسجة المختلفة هي انعكاس مباشر لحساسية الأنسولين ، حيث يعزز الأنسولين ترسب الجليكوجين داخل الخلايا. خفض روزيجليتازون بشكل ملحوظ مستوى الجليكوجين في الكبد بنسبة 59.61 في المائة (مؤشر 0. 0 0 1) ، وزاد مستوى الجليكوجين في العضلات بنسبة 33.93 في المائة (Po0.05 مقابل السيطرة على مرض السكري). خفض CT24.2 مستوى الجليكوجين في الكبد بنسبة 30.41 في المائة (P <0.05 مقابل="" السيطرة="" على="" مرض="" السكري).="" لم="" يكن="" للجرعات="" الأقل="" من="" cistanche="" tubulosa="" أي="" تأثير="" كبير="" على="" مستويات="" الجليكوجين="" في="" الكبد="" أو="" العضلات="">

3.5 آثار نقص شحميات الدم من Cistanche tubulosa في الفئران ديسيبل / ديسيبل

لتقييم آثارسيستانشتوبولوساعلى دسليبيدميا ، حددنا مستويات الكوليسترول الكلي ، TG ، HDL-c ، LDL-c ، و VLDL-c في الفئران ديسيبل / ديسيبل. نتائجنا تثبت ذلكسيستانشتوبولوسايمكن أن يحسن عسر شحميات الدم عن طريق زيادة مستويات HDL-c ، وخفض مستويات TG و LDL-c و VLDL-c بالإضافة إلى تقليل مستويات الكوليسترول في الفئران ديسيبل / ديسيبل. أدى كل من CT12 0. 9 (po 0. 0 5) و CT24.2 (po 0. 001) إلى انخفاض كبير في مستوى TC في db / dbmice السكري (الجدول 3 ) مقارنة بمكافحة السكري. من بين جميع المجموعات التجريبية ، أدى CT24.2 فقط إلى انخفاض معنوي في مستويات TG (po0.05) و VLDL-c (po0.05) مقارنة بمكافحة السكري. كل ثلاث جرعات منسيستانشتوبولوساخفض LDL-clevel بشكل ملحوظ (po 0. 0 1 لـ CT12 0. 9 ، po0.05 لـ CT72.6 ، po0.001 لـCT24.2 ، مقابل السيطرة على مرض السكري) . جميع الجرعات الثلاثسيستانشتوبولوسا(CT120.9 و CT72.6 و CT24.2) رفعت بشكل ضئيل مستوى HDL-clevel بنسبة 9.78 في المائة و 7.32 في المائة و 7.78 في المائة (ص 40.05 مقابل السيطرة على مرض السكري).

من بين هذه المعلمات الدهنية ، يعد انخفاض HDL-c / TC عامل الخطر المستقل الأكثر أهمية لمرض الشريان التاجي. CT12 0. 9 (po 0. 05) و CT24.2 (po0.001 مقابل السيطرة على مرض السكري) رفع مستوى HDL-c / TC بشكل ملحوظ. انخفض مؤشر تصلب الشرايين ، وهو عامل خطر للإصابة بمرض الشريان التاجي ، بمقدار ثلاث جرعات منسيستانشتوبولوسا(رقم {0}. 001 لـ CT120.9 و CT24.2 ، po0.01 لـ CT72.6 مقابل التحكم في مرض السكري).

في المجموعة الضابطة الإيجابية ، رفع روزيجليتازون بشكل ملحوظ مستويات TC (po {0}}. 0 01) و LDL-c (po0.01) مقارنة بمراقبة السكري. قام Rosiglitazone أيضًا برفع مستوى HDL c بشكل ملحوظ بنسبة 57.32 بالمائة (P <0.001) ولكن="" لم="" يكن="" له="" تأثير="" مفيد="" على="" مستوى="" hdl-c="" tc="" أو="" مؤشر="" تصلب="" الشرايين.="" لم="" يكن="" لأكاربوز="" أي="" تأثير="" معنوي="" على="" فهارس="" الدهون="" في="" الدم="" في="" الفئران="" ديسيبل="">

4. مناقشة

صممت الدراسة الحالية للتحقيق في النشاط المحتمل لفرط سكر الدم ونقص شحميات الدمسيستانشتوبولوسا.

نتائج الفحص في المختبر أوضحت ذلكسيستانشتوبولوسايحتوي على كمية كبيرة من الفينول والسكريات ، ويعرض نشاطًا جيدًا مضادًا للأكسدة. إجمالي المحتوى الفينوليسيستانش توبولوساأقل من إجمالي المحتوى الفينولي للشاي (Ankolekar وآخرون ، 2011) والقهوة (Chu et al. ، 2011) ، وأعلى من العديد من الأنواع الأخرىارتفاع السكر في الدمأعشاب مثل التوت البري (Pinto et al. ، 2010) ، والأعشاب البحرية (Nwosu et al. ، 2011) ، والحمص (Sreerama et al. ، 2012) وبعض النباتات الطبية التقليدية المستخدمة في إدارة النوع 2 DM (Gulatiet al. ، 2012). محتوى السكاريد في Cistanche tubulosa هو أقل من محتوى السكاريد في Panax ginseng (Wanget al. ، 2011) والشاي (Chu et al. ، 2011) ، وأعلى من العديد من الأنواع الأخرىمكافحة ارتفاع السكر في الدمالأعشاب مثل Aloe vera L. (Hu et al.، 2003) و jujuba (Sun et al.، 2011) و Polyporus umbellatus (Tian et al.، 2007) و Rheum palmatum (Ni et al.، 2007) وبعض من النباتات الطبية التقليدية المستخدمة في إدارة النوع 2 DM (Gulatiet al. ، 2012). النباتات التي تحتوي على نسبة عالية من مضادات الأكسدة ، مثل الأسبوليفينول وجليكوسيدات فينيل إيثانويد (PhGs) ، يتم التعرف عليها بشكل متكرر على أنها تمتلك نشاطًا مضادًا لمرض السكري ، والذي يرجع جزئيًا على الأقل إلى قدرتها على تقليل الإجهاد التأكسدي (Pinto et al. ، 2010 ؛ Saltiel ، 2001 ؛ جولاتي وآخرون ، 2012). تتوافق نتائج مقايسة مضادات الأكسدة الخاصة بنا مع التقارير السابقة (آرثر وآخرون ، 2011 ؛مضاد-Baoet al. ، 2010 ؛ Funes et al. ، 2009) الذي أشار إلى ذلكسيستانشتوبولوسايمتلك خصائص مضادة للأكسدة. كانت قيمة TEAC وقيمة FRAP لـ Cistanche tubulosa أعلى من الكرنب الأخضر والجزر والخيار والخس الأخضر والكرفس (Pellegrini et al. ، 2003) ، وبعض النباتات الأخرى ذات التأثيرات الجيدة المضادة للأكسدة التي تستخدم لعلاج مرض السكري (Rahimi et al. ، 2005) ، وكان أعلى بكثير من الأكاربوز والروزيجليتازون. أظهرت التجارب السريرية السابقة أن حمض الليبويك (Konrad et al. ، 1999) أو مضادات الأكسدة الأخرى (Paolisso et al. ، 1992) يمكن أن يحسن حساسية الأنسولين في مرضى مقاومة الأنسولين و / أو مرضى السكري. وبالتالي ، فإن Cistanchetubulosa هو مصدر لمضادات الأكسدة التي قد تمارس تأثيرات وقائية ضد مرض السكري ومضاعفات مرض السكري طويلة الأجل.

تم استخدام أنواع Cistanche كطعام منشط أو دواء لمئات السنين ، مما يشير إلى أنها آمنة لتناولها عن طريق الفم. أظهر تقرير سابق من اختبار السمية الحادة لمدة 14 يومًاسيستانشتوبولوساينتمي المستخلص إلى مادة غير سامة فعلية: الجرعة القصوى المسموح بها (MTD) منسيستانشتوبولوساتم العثور على خلاصة لتكون 410 جم / كجم في الفئران. لم يتم تسجيل أي وفيات خلال 14 يومًا من المراقبة ، ولم تظهر الفئران المختبرة من كل مجموعة أي علامات سمية خلال 24 ساعة و 14 يومًا من الملاحظة (Zhang et al. ، 2012). أعلى جرعة في تجربتنا ، 5.084 جم CTAE / كجم من وزن الجسم / يوم ، أي ما يعادل 9.10 جم من المسحوق الخام / كجم في الفئران ، أقل بكثير من MTD. وبالتالي ، فإن الجرعة آمنة في تجربتنا.

يعد النوع 2 DM أحد أكثر أمراض التمثيل الغذائي انتشارًا وخطورة في العالم ويتميز بشكل أساسي بفرط سكر الدم. في هذه الدراسة ، اعتمدنا BKS.Cg-Dock7m þ / Leprdb / J (db / db) الفئران كنموذج من النوع 2 DM للتحقيق في آثارسيستانشتوبولوساعلى استقلاب الجلوكوز والدهون في الجسم الحي. db / dbmice هو نموذج جيني للقوارض مقبول جيدًا لأمراض التمثيل الغذائي المرتبطة بنمط الحياة ، وهو مفيد بشكل خاص لتقييم العوامل المضادة لمرض السكري والسمنة. تحمل هذه السلالة من الفئران طفرة في جين مستقبل اللبتين ، وتعرض ارتفاع السكر في الدم ، وفرط شحميات الدم ، ومقاومة الأنسولين ، والسمنة بنسبة 6-7 أسابيع من العمر (Hummel et al. ، 1966 ؛ Nishina et al. ، 1994 ؛ Uchida et al. ، 2005 ؛ سرينيفاسان وراماراو ، 2007).

مع تطور مرض السكري ، قد يؤدي الانخفاض الطفيف في وزن الجسم لمجموعة التحكم في مرض السكري (الجدول التكميلي 1) إلى انخفاض مستوى الأنسولين في البلازما الذي يحدث في الفئران المصابة بداء السكري / ديسيبل الذين تتراوح أعمارهم بين 10-12 أسبوعًا (Hummel et al. ، 1966) و زيادة كفاءة التمثيل الغذائي في الفئران المصابة بمرض السكري ديسيبل / ديسيبل (Trayhurn ، 1979). تم تقليل معدل فقدان الوزن في جميع الجرعات الثلاثنبيبات Cistancheقد يكون راجعا إلى حقيقة أنسيستانشتوبولوساأيضًا ارتفاع مستويات الأنسولين في الدم (الجدول 3) ، وهو أمر مفيد لمرض السكري. أدى Rosiglitazone إلى زيادة كبيرة في وزن الجسم ، وهو أحد الآثار الجانبية المعروفة لـ rosiglitazone. أشارت الزيادة الكبيرة في وزن الكبد ونسبة الكبد / وزن الجسم في مجموعة روزيجليتازون (ص 0. 001) إلى أن الروزيجليتازون قد يحفز تراكم الدهون وتغيرات وظيفية في الكبد.

وأظهرت نتائج الفحص في الجسم الحي أنيمكن لأنابيب Cistancheقمع مستويات الجلوكوز المرتفعة في الدم أثناء الصيام ومستويات الجلوكوز المرتفعة بعد الأكل ، وزيادة حساسية الأنسولين لدى الفئران ديسيبل / ديسيبل. عمومًا،سيستانشتوبولوساكان أكثر فاعلية في تقليل ارتفاع السكر في الدم وخلل شحوم الدم وتحسين مقاومة الأنسولين مقارنة بالأكاربوز أثناء التجربة.

بعد 20 يومًا من تناوله عن طريق الفم ،سيستانشتوبولوسامنع بشكل كبير الميول المتزايدة لمستوى FBG وقيمة FBG - زيادة النسبة المئوية على الفئران ديسيبل / ديسيبل باستمرار. في نهاية التجربة ،سيستانشتوبولوساأظهر لهامكافحة ارتفاع السكر في الدمتأثير بطريقة تعتمد على الجرعة. هذه النتائج تشير إلى ذلكسيستانشتوبولوسايمكن أن يعمل كعامل محتمل لخفض نسبة الجلوكوز في الدم عند تناوله بالجرعة المناسبة. يحدث معظم التخلص من الجلوكوز في العضلات الهيكلية بعد الوجبة ، حيث يتم تحديد مستويات FBG بشكل أساسي عن طريق إخراج الجلوكوز في الكبد. أظهرت نتائج FBG ذلكسيستانشتوبولوساتحسن بشكل كبير من إنتاج الجلوكوز الكبدي للفئران ديسيبل / ديسيبل ؛ يُعد إنتاج الجلوكوز الضعيف في الكبد أحد العيوب الأيضية الرئيسية الثلاثة في النوع 2 DM التي تساهم في ارتفاع السكر في الدم (Bavenholm et al.، 2 0 0 1). في اليوم الثالث 0 ، كانت قيم نسبة زيادة FBG لمجموعة التحكم في مرض السكري أقل من المستويات المتوقعة ، مما قد يفسر حقيقة أن CT72.6 (po0.01) و acarbose (po0.05) و androsiglitazone ( P <0.001) أدى="" إلى="" انخفاض="" معنوي="" في="" الزيادة="" في="" نسبة="" السكر="" في="" الدم="" مقارنة="" بمجموعة="" التحكم="" في="" مرض="">

بشكل جماعي ، النتائج في الجدول 2 تشير إلى ذلكسيستانشتوبولوساتحكم بشكل فعال في مستوى الجلوكوز في الدم المرتفع بعد الأكل بعد تحميل الجلوكوز ، مما يشير إلى أن Cistanche tubulosa هو عامل مرشح للتخفيف من ارتفاع السكر في الدم بعد الأكل. يعد ارتفاع مستوى السكر في الدم بعد الأكل عامل خطر مستقل لمضاعفات القلب والأوعية الدموية المرتبطة بالنوع 2 DM (Ceriello، 2005؛ Blaak et al.، 2012). قمع CT120.9 بشكل كبير من الارتفاع في مستوى الجلوكوز في الدم بعد الأكل ، مما يشير إلى أن CT120.9 أدى إلى تحسين تحمل الجلوكوز الضعيف لمرض السكري ديسيبل / ديسيبل ، وكان التأثير مشابهًا لـ 19.5 مجم / كجم أكاربوز. 9 كان أقل كثافة من روزيجليتازون.

يعد إفراز الأنسولين الناقص ومقاومة الأنسولين اثنين من ثلاثة عيوب استقلابية رئيسية في النوع 2 DM والتي تساهم في ارتفاع السكر في الدم (Bavenholm et al. ، 2001). أظهرت نتيجة تحليلنا لـ FINS أن جرعة عالية منسيستانشتوبولوسااستعادة إفراز الأنسولين الناقص في الفئران ديسيبل / ديسيبل إلى حد ما. لذلك ، قمع Cistanchetubulosa بشكل فعال ارتفاع مستويات الجلوكوز في الدم بعد الأكل والصيام (الجدول 2) جزئيًا عن طريق تحفيز إفراز الأنسولين. يؤدي ارتفاع السكر في الدم وفرط شحميات الدم إلى زيادة الأكسدة على خلايا بيتا والميتوكوندريا بالإضافة إلى مسببات مرض السكري الأولية. هناك أدلة في المختبر وفي الجسم الحي على أن التعرض المزمن لمستويات عالية من الجلوكوز والدهون في الدم هي خلايا توبيتا ضارة ، مما يتسبب في نقص إفراز الأنسولين ، وضعف التعبير الجيني للأنسولين ، وتحريض موت الخلايا عن طريق موت الخلايا المبرمج (Pitocco et al. ، 2010). نظرًا لأن مضادات الأكسدة يمكن أن تحمي خطوط خلايا بيتا والجزر المعزولة من الآثار الضارة الناتجة عن التعرض لتركيزات عالية من الجلوكوز (Kaneto et al. ، 1996 ، Tajiri et al. ، 1997) ، فقد يحسن Cistanche tubulosa إفراز الأنسولين من خلال تأثيره المضاد للأكسدة.

أكد ضعف تحمل الأنسولين الشديد لدى مجموعة التحكم في مرض السكري حالة مقاومة الأنسولين لدى الفئران ديسيبل / ديسيبل. أظهرت نتائج TheITT أن الجرعة العالية منسيستانشتوبولوساتحسين مقاومة الأنسولين في الفئران ديسيبل / ديسيبل ، والتي كانت قابلة للمقارنة مع روزيجليتازون ومتفوقة على أكاربوز ، مما يشير إلى أنسيستانشتوبولوسايمتلك خصائص فعالة في تحسس الأنسولين.

يتم تنظيم توازن الجلوكوز بشكل أساسي عن طريق الكبد والعضلات الهيكلية. يحدث معظم التخلص من الجلوكوز في الكبد والعضلات الهيكلية ، مع الجليكوجين باعتباره الشكل الأساسي للجلوكوز القابل للتخزين داخل الخلايا (Saltiel ، 2001). مستويات الجليكوجين في الأنسجة المختلفة هي انعكاس مباشر لحساسية الأنسولين ، حيث يعزز الأنسولين ترسب الجليكوجين داخل الخلايا. ينخفض ​​محتوى الجليكوجين المحفّز بالأنسولين بشكل ملحوظ في الحيوانات ذات مقاومة الأنسولين ، بما يتناسب مع درجة نقص الأنسولين (Chandramohan et al. ، 2008).سيستانشتوبولوسالم يكن له أي آثار مفيدة على تخزين الجليكوجين في الكبد أو عضلات الهيكل العظمي.

يتميز المظهر الأيضي للنوع 2 DM بضعف أيض الجلوكوز ومقاومة الأنسولين ، وغالبًا ما يتم دمجه مع اضطراب شحميات الدم (Cha et al. ، 2005). عسر شحميات الدم هو أحد عوامل الخطر الرئيسية لأمراض القلب والأوعية الدموية في مرض السكري. السمات المميزة لخلل شحوم الدم السكري هي ارتفاع تركيز الدهون الثلاثية في البلازما (TG) ، وانخفاض تركيز كوليسترول البروتين الدهني عالي الكثافة (HDL-c) ، وزيادة تركيز كوليسترول البروتين الدهني منخفض الكثافة (LDL-c) ، وزيادة البروتين الدهني منخفض الكثافة للغاية تركيز الكوليسترول (VLDL-c) (مراديان ، 2009). بعد العلاجسيستانشتوبولوسالمدة 45 يومًا ، انخفضت مستويات الكوليسترول الكلي ، TG ، LDL-c ، و VLDL-c في الفئران ديسيبل / ديسيبل بينما زادت مستويات HDL-c ، مما يشير إلى أنسيستانشتوبولوساكان له تأثير مفيد على عسر شحميات الدم ، وقد يقلل بشكل فعال من خطر الإصابة بتصلب الشرايين وأمراض القلب التاجية ومضاعفات مرض السكري (الجدول 3). أدى Cistanche tubulosa إلى انخفاض كبير في مستوى TC ، وهو ما يتوافق مع تقرير سابق (Shimoda et al. ، 2009). قد تكون الآلية التي يعمل بها Cistanche tubulosa على تحسين dyslipidemiamiams ذات صلة بوساطة تعبير mRNA الكبدي المرتبط بنقل الكوليسترول والتمثيل الغذائي (Shimoda et al. . الفهرس ، وهي عوامل خطر للإصابة بمرض الشريان التاجي ، مما يشير إلى أن Cistanche tubulosa مفيد لإدارة كل من مرض السكري وأمراض القلب والأوعية الدموية. أدى عقار التحكم الإيجابي روزيجليتازون (rosiglitazone) إلى رفع مستوى TClevel بشكل ملحوظ ، والذي يرتبط بزيادة خطر الإصابة بمرض السكري وأمراض القلب والأوعية الدموية.

5. الخلاصة

في الختام ، نقدم أول عرض لمضادات ارتفاع السكر في الدم ونقص شحميات الدمتأثيراتمنسيستانشتوبولوساالفئران intype 2 السكري ديسيبل / ديسيبل.سيستانشتوبولوسااستعاد ارتفاع السكر في الدم الطبيعي حساسية الأنسولين وخفض عسر شحميات الدم.سيستانشتوبولوساتحسين جميع العيوب الاستقلابية الكبرى الثلاثة التي تساهم في ارتفاع السكر في الدم في النوع 2 DM.سيستانشتوبولوساأظهر إمكانات عالية لمنع تطور النوع 2 DM وتقليل خطر الإصابة بتصلب الشرايين وأمراض القلب التاجية ومضاعفات مرض السكري. وكطعام صيني تقليدي وطعام منشط ، يمكن تطوير Cistanchetubulosa إلى أدوية أو أغذية صيدلانية أو مكملات غذائية في مستقبل. ومع ذلك ، هناك حاجة إلى مزيد من البحث لتحديد المكون النشط بيولوجيًا وتوضيح الآليات المسؤولة عن مكافحة ارتفاع السكر في الدمنقص شحميات الدمتأثيراتمنسيستانشتوبولوسا.

شكر وتقدير

تم دعم هذا العمل من خلال المنح المقدمة من برنامج البحث والتطوير في KeyTechnology الوطني في الخطة الخمسية الحادية عشرة للصين (2007BAI32B06) ومكتب المجموعة الرائدة لمجلس الدولة للتخفيف من حدة الفقر والتنمية (2008-3 أ).

الملحق أ. مواد تكميلية

يمكن العثور على البيانات التكميلية المرتبطة بهذه المقالة في النسخة عبر الإنترنت على http://dx.doi.org/10.1016/j.jep.2013.09.027.

من: "التأثيرات المضادة لفرط سكر الدم ونقص شحميات الدم من Cistanche tubulosa"وين تينغ شيونغ وآخرون

---دبليو- ت. شيونغ وآخرون. / مجلة علم الأدوية الإثنية 150 (2013) 935-945