خلاصة:يتسبب التعرض للأشعة فوق البنفسجية (UV) في شيخوخة الجلد مما يؤدي إلى تجعد الجلد وترهله من خلال إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS). لهذا السبب ، تعتبر الحماية من الشيخوخة ميزة مهمة في مستحضرات التجميل والأمراض الجلدية. المواد الحيوية المشتقة من المنتجات الطبيعية مرغوبة للغاية كمكونات محتملة في المستقبل لأن هذه المواد الحيوية غالبًا ما تكون آمنة وفعالة. في هذه الدراسة ، هدفنا إلى توصيف النشاط الوقائي للجلد في Pradosia multisite ، والذي يستخدم تقليديًا لعلاج حروق الشمس والحمامي. لقد حددنا تأثيرات إزالة الجذور الحرة ، ومضادات الميلانين ، وتأثيرات الترطيب لمستخلص الميثانول من Pradosia multisite (Pm-ME) في الخلايا الكيراتينية (خلايا HaCaT) ، والخلايا الصباغية (خلايا B16F10) ، والأرومات الليفية (الخلايا الليفية الجلدية البشرية (HDFs)) في تركيزات غير سامة للخلايا. يحتوي مستخلص الميثانول متعدد المواقع من Pradosia على حمض الكوماريك كمكوِّن رئيسي ، وأظهر المستخلص نشاطًا وقائيًا ضد السمية الخلوية التي يسببها UVB و H2O 2-. أدى هذا المستخلص أيضًا إلى منع التعبير عن البروتينات المعدنية (MMPs) وانزيمات الأكسدة الحلقية (COX) -2 في خلايا HaCaT. تم استرداد تقليل تعبير Sirt -1 تحت ظروف معالجة UVB و H2O 2- في خلايا HaCaT بواسطة Pm-ME. أظهر هذا المستخلص نشاطًا مهمًا في إزالة الجذور الحرة وفقًا للمقايسة 2 ، 20 - casino-bis (3- ethylbenzothiazoline -6- sulphonic acid) (ABTS). قام Pm-ME أيضًا بتنظيم مستويات التعبير عن سينثاس حمض الهيالورونيك (HAS) و transglutaminase -1 (TGM -1) في خلايا HaCaT ، مما يشير إلى نشاط ترطيب مفترض. ومن المثير للاهتمام ، أن التعبير عن جين نوع الكولاجين 1 (Col1A1) ونشاطه المحفز ، كما تم تقييمه بواسطة اختبار الجينات المراسل ، وجد أنه يزداد في خلايا HDF و HEK293. وبالمثل ، ساعد Pm-ME في استعادة مستويات الكولاجين بعد علاج UVB و H2O2 في HDFs وكذلك قلل من تخليق وإفراز الميلانين من خلايا سرطان الجلد B16F10 ، مما قد يشير إلى قيمة تجميلية تبييض مفيدة. قام المانع p38 SB203580 ومثبط JNK SP600125 بإيقاف تعبير MMP -9 وتعبير COX -2 في H2O 2- خلايا HaCaT المعالجة. وبالمثل ، فإن مثبط ERK U0126 يثبط HAS -2 في خلايا Pm-ME / H2O 2- المعالجة HaCaT. تشير هذه النتائج إلى أن تثبيط JNK و p38 وتفعيل ERK يمكن استهدافه بواسطة Pm-ME. لذلك ، قد يمارس Pm-ME خصائص مضادة للشيخوخة الضوئية ومضادة للميلانين من خلال تنظيم بروتين كيناز المنشط بالميتوجين ، والذي يمكن أن يكون مفيدًا في صناعة مستحضرات التجميل.

وفقًا للدراسات ذات الصلة ،cistancheهو شائععشبالتي تعرف باسم "عشب معجزة يطيل الحياة". مكونه الرئيسي هوالسيستانوسيد، والتي لها تأثيرات مختلفة مثلمضادات الأكسدة, مضاد التهاب، وتعزيز وظيفة المناعة. الآلية بين cistanche وتفتيح البشرةيكمن في التأثير المضاد للأكسدة من cistanche glycosides. يتم إنتاج الميلانين في جلد الإنسان بواسطةأكسدةمن التيروزين المحفز بواسطةالتيروزيناز، ويتطلب تفاعل الأكسدة مشاركة الأكسجين ، لذلك تصبح الجذور الخالية من الأكسجين في الجسم عاملاً مهمًا يؤثر علىالميلانينإنتاج. يحتوي Cistanche على cistanoside ، وهو مضاد للأكسدة ويمكن أن يقلل من توليدالشوارد الحرةفي الجسم ، وبالتالي تثبيط إنتاج الميلانين.

انقر فوق ملحق Cistanche Tubulosa للتبييض

يطلب المزيد:

david.deng@wecistanche.com WhatApp: 86 13632399501

1 المقدمة

الجلد هو أكبر عضو في الجسم ، والذي يعمل كحاجز بين الكائن الحي والبيئة ، وهو مسؤول عن الحفاظ على توازن الجلد وفي النهاية تحديد بقاء الكائن الحي [1]. يتم تنظيم الجلد مع الأدمة ، والأدمة مع هياكل adnexal ، والدهون تحت الجلد [2]. بالإضافة إلى ذلك ، يعد الجلد مهمًا للتواصل المستمر مع أجهزة المناعة والعصبية والغدد الصماء [3] ، فهو يوفر في الغالب الحماية ضد مسببات الأمراض والمواد الكيميائية والإصابات الجسدية والإشعاع فوق البنفسجي [4]. تنقسم أطياف الأشعة فوق البنفسجية إلى ثلاث مناطق ، UVC (200 إلى 280 نانومتر) ، UVB (280 إلى 320 نانومتر) ، و UVA (320 إلى 400 نانومتر) [5]. من بين هؤلاء ، يتم امتصاص الأشعة فوق البنفسجية في الغالب عن طريق الطبقات العليا من البشرة وكذلك الأدمة الحليمية ، بينما تخترق الأشعة فوق البنفسجية الطويلة الأدمة الشبكية بكفاءة أقل 1000 مرة في إحداث تأثيرات بيولوجية مختلفة ، مقارنة بالأشعة فوق البنفسجية المتوسطة [5]. على الرغم من أن الأشعة فوق البنفسجية شديدة التفاعل وتمتصها الطبقة القرنية ، إلا أنها تتم إزالتها في الغالب بواسطة طبقة الأوزون والجو. كمصدر رئيسي للإشعاع فوق البنفسجي ، يمكن أن تؤدي الأشعة فوق البنفسجية إلى إنتاج أنواع الأكسجين التفاعلية (ROS) مثل بيروكسيد الهيدروجين (H2O2) عن طريق تنشيط الإنزيمات المولدة لـ ROS بما في ذلك NADPH أوكسيديز ، وأكسيداز الزانثين ، وأكسيداز الأحماض الأمينية D [6- 8] والحث على شيخوخة الجلد التي تؤدي إلى تجعد الجلد وترهله [9،10]. بالإضافة إلى ذلك ، تم الإبلاغ عن استجابة الإجهاد التأكسدي للحث على تلف المكونات الخلوية المختلفة مثل دهون الغشاء الخلوي والبروتينات والأحماض النووية [11]. يمكن لخلايا الجلد التالفة أن تبدأ استجابات التهابية تؤدي في نهاية المطاف إلى تلف يظهر في الجلد المعرض بشكل مزمن [12].

يؤدي الإجهاد التأكسدي إلى تنشيط عوامل النسخ الالتهابية والحساسة للأكسدة والاختزال ، والعامل النووي (NF) -B والبروتين المنشط (AP) -1 ، وإنزيمات الإشارات الأولية بما في ذلك كينازات البروتين المنشط للميتوجين (MAPKs) مثل خارج الخلية كيناز منظم بالإشارة (ERK) ، p38 ، و c-Jun-N-terminal kinase (JNK) في مسار AP -1 ، أو كمثبط لـ κB (IκB) ، و IκB كيناز (IKK /) ، و يرتبط AKT في مسار NF-B بتحريض الالتهاب وتشكيل التجاعيد [13]. يتوسط الكيناز الذي ينظم الإشارة خارج الخلية عادة الاستجابات الخلوية المتعلقة بعوامل النمو ، JNK ، و p 38- الاستجابات الخلوية الوسيطة المتعلقة بالسيتوكينات والضغط البدني [14]. يمكن أن تحفز كينازات البروتين المنشط بالميتوجين أيضًا إنتاج البروتينات المعدنية المصفوفة المحللة للبروتين (MMPs) ، والتي تحفز تدهور الكولاجين وبالتالي تقلل مرونة الجلد [16]. فيما يتعلق بهذه المكونات ، المكونات أو المستخلصات المضادة للأكسدة مثل الجينسنوسيد ، الكركمين ، الإبيكاتشين ، الأسياتيكوسيد ، زيوجليكوزيد 1 ، ماغنولول ، حمض الغاليك ، هيدروكسي شافيكول ، أحماض هيدروكسي سيناميك ، حمض الجليسيرريزيك ، مانجيفيرين ، ميركو ، حمض روزيجينيك 1 ، تيكتور تم استخدام المستخلص المائي الكحولي لأتباع Spartium junceum L. لتطوير منتجات مقاومة شيخوخة الجلد [17-21]. لأن الإجهاد التأكسدي معروف بأنه سبب رئيسي للأمراض التي تصيب الإنسان وعملية الشيخوخة التي تؤثر على طول العمر ، فإن المستقلبات الثانوية النشطة بيولوجيًا في النظم الغذائية البشرية معaخصائص ntioxidativeتعتبر مكونات قيمة [22،23].

تشمل الجينات الأخرى المرتبطة بالتشيخ الضوئي انزيمات الأكسدة الحلقية -2 (COX -2) و Sirt -1. عادة ما يتم إفراز انزيمات الأكسدة الحلقية -2 بشكل مفرط في الآفات الجلدية التي تسببها الأشعة فوق البنفسجية قبل السرطان [24] ، ويمكن أن يؤدي تثبيطها إلى تقليل التحول الخبيث في البشرة [25]. يمكن أن يمنع تعبير Sirt -1 موت الخلايا المبرمج ويزيد من بقاء الخلية [26]. آلية أخرى للحماية من الأشعة فوق البنفسجية هي إنتاج الميلانين ، وهو صبغة يتم تصنيعها في الخلايا الصباغية ويتم إفرازها بشكل أكبر إلى الخلايا الكيراتينية في طبقة البشرة [1]. ينتج الميلانين عن طريق أكسدة L-tyrosine وتحويله التالي إلى L-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) [6] عن طريق التحفيز باستخدام إنزيم التيروزيناز المعتمد على النحاس [27]. على الرغم من وظيفته الوقائية ، فإن الإفراط في إنتاج الميلانين يمكن أن يؤدي إلى ظهور البقع العمرية [28] والميليسما وفرط تصبغ [29]. بسبب الاتجاه الحالي الذي يعتبر البشرة الفاتحة معيارًا للجمال ، أصبحت مستحضرات تبييض البشرة التي تحقق إما تبييض الآفات المفرطة التصبغ أو تبييض البشرة مرغوبة للغاية في الصناعات الدوائية والتجميلية [29]. وهكذا ، تم توجيه جهود كبيرة نحو تطوير المستحضرات التي تقلل من تخليق الميلانين [30]. نظرًا لأن شيخوخة الجلد مرتبطة بفقدان رطوبة الجلد ، فإن الترطيب الكافي هو أحد الاعتبارات الهامة للحفاظ على بشرة صحية [31]. حمض الهيالورونيك (HA) ، غليكوزامينوجليكان ذو وزن جزيئي مرتفع مع خصائص محبة للماء ، يساهم في ترطيب الجلد وخواصه البلاستيكية عن طريق تنظيم التعبير عن تركيبات حمض الهيالورونيك (HASs) [32]. الجين الآخر المهم في الجلد هو الكولاجين ، الذي يوفر الدعم لبنية البشرة [33] ، وبالتالي فهو مسؤول عن قوة ومرونة الجلد [34] والذي يؤدي تدهوره إلى ترهل الجلد والتجاعيد. بالإضافة إلى ذلك ، فإن إنزيم ترانسجلوتاميناز -1 (TGM -1) هو إنزيم معبر عن البشرة بشكل أساسي يحفز تكوين غلاف خلايا البشرة المتقرنة ، مما يساعد على منع فقدان الماء [35،36].

تتوزع عائلة Sapotaceae بشكل رئيسي في المناطق الاستوائية وشبه الاستوائية في آسيا وأمريكا الوسطى. تنتج العديد من أنواع عائلة Sapotaceae ثمارًا صالحة للأكل ذات قيمة اقتصادية عالية. تم استخدام هذه الفاكهة للأغراض الطبية. على وجه الخصوص ، البذور غنية بالعناصر الغذائية والدهون النباتية والبروتينات والمركبات المفيدة الأخرى. على سبيل المثال ، تم استخدام زيت المامي تقليديا في العناية بالبشرة ، لعلاج حروق الشمس والحمامي [37]. موسيقى Pradosia هي عضو في عائلة Sapotaceae التي يستخدم زيتها تقليديا لعلاج ندبات الجلد [38]. ومع ذلك ، فإن خصائصه لم تثبت علميًا بعد. لذلك كان الهدف من هذا البحث هو تحديد القيمة المحتملة لـ P. mutisii في العناية بالبشرة والتجميل وعلم الأدوية.

2. النتائج

2.1. توصيف Pm-ME وتأثيره على حيوية الخلية

لم يحظر Pm-ME صلاحية تصل إلى 100 ميكروغرام / مل ، ولكنه قلل قليلاً من الصلاحية عند 200 ميكروغرام / مل في خلايا HaCaT و B16F10 وخلايا الخلايا الليفية الجلدية البشرية (HDF) ، وفقًا لـ 3- (4 ، {{ 7}} ثنائي ميثيل ثيازول -2- يل) -2 ، 5- مقايسة ثنائي فينيل تيترازوليوم بروميد (MTT) (الشكل 1 أ-ج). باستخدام اللوني السائل عالي الضغط (UHPLC) والكروماتوجرافيا السائلة (LC) / قياس الطيف الكتلي ، تم العثور على مركب رئيسي في Pm-ME ليكون حمض الكوماريك عند 4.27 دقيقة (الشكل 1 د).

2.2. التأثير الوقائي لـ Pm-ME ضد أضرار UVB و H2O2

لتحديد ما إذا كان Pm-ME يحمي خلايا HaCaT من التلف الذي تسببه الأشعة فوق البنفسجية B و H2O 2- الناتج عن الشيخوخة الضوئية ، تمت معالجة الخلايا مسبقًا بتركيزات مختلفة من Pm-ME (0 - 100 ميكروغرام / مل) قبل التعرض ل UVB أو H2O2. يوضح الشكل 2 أ أن إشعاع UVB قلل من عدد خلايا HaCaT الملتصقة ، بينما زاد Pm-ME من التصاق الخلايا. بالإضافة إلى ذلك ، تم استرداد الضرر الخلوي الناجم عن H2O2 بواسطة Pm-ME عند 100 ميكروغرام / مل (الشكل 2 ب). لتوضيح ما إذا كان Pm-ME يخفف من تشكيل التجاعيد بالأشعة فوق البنفسجية B و H2O 2- ، تم قياس مستويات التعبير عن MMP -1 و MMP -9 بعد معالجة UVB أو H2O2 في وجود أو عدم وجود PM-ME. منع Pm-ME التعبير عن MMP -1 و MMP -9 في كلتا الحالتين (الشكل 2 ج ، د). درسنا بعد ذلك ما إذا كان Pm-ME يثبط الاستجابات الالتهابية الناتجة عن الجذور الحرة عن طريق قياس مستويات الرنا المرسال من COX -2. في ظل ظروف معالجة UVB أو H2O 2- ، تم قمع مستويات mRNA من COX -2 بشدة بواسطة Pm-ME عند 100 ميكروغرام / مل (الشكل 2 هـ ، و). ثم قمنا بقياس مستويات mRNA للجين المضاد للشيخوخة ، Sirt -1 ، لتحديد تأثيره على التشيخ الضوئي. خفض كل من UVB و H2O2 تعبير Sirt -1 ، بينما استعاد Pm-ME تعبيره بشكل ملحوظ عند 50 و 100 ميكروغرام / مل (الشكل 2g ، h). نظرًا لأن Pm-ME قمع بعض الاستجابات الجزيئية والخلوية في خلايا HaCaT المعالجة بـ UVB أو H2O2 ، قمنا بعد ذلك بفحص ما إذا كان لهذا المستخلص نشاط مضاد للأكسدة مباشر باستخدام 2،2′-casino-bis (3- ethylbenzothiazoline {{57) }} حمض السلفونيك) اختبار ABTS ، حيث أظهر Pm-ME نشاط كسح الجذور الحرة المعتمد على الجرعة (الشكل 2i).

2.3 آثار ترطيب وزيادة الكولاجين من Pm-ME

عزز Pm-ME التعبير عن الجينات المرتبطة بالترطيب مثل HAS -2 و TGM -1 في خلايا HaCaT (الشكل 3 أ). لتحديد ما إذا كان Pm-ME يمكن أن يعزز التعبير عن جين الكولاجين (Col1A1) ، قمنا أولاً بمعالجة خلايا HDF باستخدام Pm-ME (0 - 100 ميكروغرام / مل) ثم حددنا مستوى تعبير Col1A1. كما يوضح الشكل 3 ب ، لوحظ زيادة في التعبير عن جين Col1A1 تحت ظروف علاج Pm-ME اعتمادًا على الجرعة. تم تأكيد هذه النتائج بشكل أكبر باستخدام اختبار الجينات المراسل مع بناء Col1A 1- Luc المنقول في خلايا HEK293 وخلايا HDF. من المتوقع ، زاد Pm-ME من نشاط المروج لجين Col1A1 بطريقة تعتمد على الجرعة في كلتا الخليتين (الشكل 3 ج ، د). بالإضافة إلى ذلك ، تم العثور على Pm-ME لاستعادة مستويات جينات الكولاجين التي انخفضت تحت كل من الأشعة فوق البنفسجية وظروف علاج H2O2 (الشكل 3 هـ ، و).

2.4 تأثير مضاد للميلانين من Pm-ME

نظرًا لأن تركيزنا المستهدف يتوافق مع 1 0 0 ميكروغرام / مل ، فقد حددنا ما إذا كان Pm-ME قادرًا على قمع إفراز الميلانين ومحتوياته الخلوية. لتحديد ذلك ، تم تحفيز خلايا الورم الميلانيني B16F10 بواسطة هرمون تحفيز الخلايا الصباغية (-MSH) في وجود أو عدم وجود Pm-ME أو arbutin (تحكم إيجابي). ثم تم قياس مستويات الميلانين. قلل Pm-ME إفراز الميلانين بنسبة تصل إلى 75 في المائة عند 100 ميكروغرام / مل (الشكل 4 أ ، ب). خفض Pm-ME أيضًا محتويات الميلانين في خلايا B16F10 المعالجة بـ MSH بنسبة تصل إلى 30 في المائة عند 100 ميكروغرام / مل ، في حين لم يتم تقليل محتوى الميلانين عند 50 ميكروغرام / مل بشكل ملحوظ ، مقارنةً بالتحكم الإيجابي (-MSH) (الشكل 4 ج) . أخيرًا ، لتحديد تأثير Pm-ME على نشاط الإنزيمات المنتجة للميلانين ، أجرينا فحص إنزيم التيروزيناز. ومن المثير للاهتمام ، أن Pm-ME (0-400 ميكروغرام / مل) قلل بشكل كبير من نشاط التيروزيناز بتركيزات أعلى من 200 ميكروغرام / مل ، في حين أن حمض كوجيك (KA) ، وهو دواء خاضع للرقابة ، قلل بشدة من نشاط التيروزيناز (الشكل 4 د).

2.5 الآليات الجزيئية لمضادات التصوير وتأثيرات الترطيب بوساطة Pm-ME

3. مناقشة

بسبب غناها بالعناصر الغذائية والفيتامينات ، تم استخدام أنواع مختلفة من عائلة Sapotaceae في الطب التقليدي [39]. ومع ذلك ، فإن الاستخدام المحتمل لـ P. mutisii في صناعات مستحضرات التجميل والأدوية لم يتم استكشافه بعد. لهذا السبب ، درسنا النشاط الوقائي للجلد لـ P. mutisii في الخلايا الكيراتينية والأرومات الليفية في ظل ظروف ضارة بالجلد. قمنا أيضًا بتقييم مدى ملاءمتها للمستحضرات التجميلية. نظرًا لأن اختبار السمية لتحديد المخاطر المحتملة على البشر يعد خطوة ضرورية وحاسمة في كل من صناعات الأدوية ومستحضرات التجميل [40] ، فقد تم اختبار السمية الخلوية لـ P. mutisii في خلايا HaCaT و B16F10 و HDF. أظهر Pradosia mutisii سمية منخفضة حتى 200 ميكروغرام / مل ولا توجد سمية عند 100 ميكروغرام / مل في خلايا HaCaT و B16F10 (الشكل 1 أ ، ب) ، وخلايا HDF (الشكل 3 ج). باستخدام تحليل UHPLC / MS (الشكل 1 ج) ، تبين أن Pm-ME يحتوي على تركيز عالٍ من حمض الكوماريك ، وهو حمض الفينول [41،42]. البوليفينول عبارة عن مستقلبات ثانوية للنباتات وتشارك بشكل عام في الدفاعات ضد الأشعة فوق البنفسجية أو العدوى بمسببات الأمراض. في جسم الإنسان ، ثبت أن مادة البوليفينول تحمي من تطور السرطان وأمراض القلب والأوعية الدموية والسكري وهشاشة العظام والأمراض التنكسية العصبية [1]. ثبت أن حمض الكوماريك له خصائص مضادة للأكسدة ومضادة للالتهابات [43].

يعتبر التشعيع فوق البنفسجي أحد الأسباب الرئيسية لإنتاج الجذور الحرة (مثل ROS) في الجلد. يمكن أن تؤدي الجذور الحرة إلى شيخوخة الجلد والسرطان إذا تراكمت على مدى فترات طويلة [44]. من المعروف أن الإجهاد التأكسدي الناتج عن الجذور الحرة والضرر يمكن أن يضر ببقاء الخلية وانتشارها وتمايزها والتمثيل الغذائي [45 ، 46]. تمشيا مع التقارير السابقة [47،48] ، وجدنا أيضًا أن التلف الخلوي الناجم عن الإشعاع فوق البنفسجي في خلايا HaCaT. شمل الضرر انخفاض الانتشار ، وزيادة موت الخلايا المبرمج ، والاستجابات الجزيئية بما في ذلك التعبير عن الجينات المرتبطة بالالتهاب ، وتشكيل التجاعيد ، والشيخوخة (الشكلان 2 و 3). نظرًا لأن الجذور التي تسببها الأشعة فوق البنفسجية من العوامل الرئيسية التي تلحق الضرر بالخلايا والأنسجة والأعضاء ، فقد وجد أن بعض المركبات الذاتية مثل الميلاتونين ومستقلبه [49-52] والبيليروبين [53] تشارك في إزالة الجذور السامة من خلال إظهار مضادات الأكسدة ، خصائص الحماية من الضوء ، ومكافحة الشيخوخة في أجسامنا. حتى الآن ، تم تطوير هذه المركبات أيضًا كمواد حيوية عالية القيمة يمكن تطبيقها على أجسامنا عن طريق الصناعات الدوائية [54]. ومع ذلك ، أصبح فيتامين C ، والإنزيم المساعد Q10 ، و -tocopherol من أفضل منتجات المبيعات العالمية لصحة الإنسان بسبب خصائصها المضادة للأكسدة الهامة. تستمر مختبرات الأبحاث في شركات الأدوية ومستحضرات التجميل في التركيز بشكل كبير على تحديد وتطوير الأدوية والمركبات الطبيعية المضادة للأكسدة الفعالة. في دراستنا ، لاحظنا أن Pm-ME كان له نشاط قوي مضاد للأكسدة عند اختباره باستخدام مقايسة ABTS (الشكل 2i). وبالمثل ، عكس Pm-ME القمع الناجم عن الجذور الحرة لالتزام الخلية ، وتحريض الضرر النووي ، والتعبير المتغير للجينات مثل MMP -1 و MMP -9 و COX {{27} } تحت ظروف UVB و H2O2 بطريقة تعتمد على الجرعة (الشكل 2 أ-و). والجدير بالذكر أن Pm-ME استعاد مستويات من جين Sirt -1 (الشكل 2g ، h) ، الذي يشارك في منع موت الخلايا المبرمج وزيادة بقاء الخلية في ظل ظروف الإجهاد التأكسدي [26]. تشير هذه النتائج بقوة إلى أن شيخوخة الخلايا مرتبطة بالإجهاد التأكسدي من خلال تقليل تنظيم تعبير Sirt1. سمحت الخصائص المضادة للأكسدة لـ Pm-ME باستعادة تعبير Sirt1. قد يؤدي هذا إلى الحماية من تلف الجلد والشيخوخة في ظل ظروف التشعيع الطبيعي للأشعة فوق البنفسجية في الجسم الحي. بالإضافة إلى ذلك ، هناك احتمال أن يكون Pm-ME قادرًا أيضًا على حماية الاستجابات الخلوية التي تسببها الأشعة فوق البنفسجية نظرًا لأن ظروف التشعيع فوق البنفسجي لدينا قد تكون ملوثة بـ UVC ، على الرغم من أننا استخدمنا نظام تصفية لإزالة جميع الأطوال الموجية التي تقل عن 290 نانومتر. إن المفهوم القائل بأن المواد الحيوية المضادة للأكسدة يمكنها تحسين الضرر الخلوي والجزيئي في ظل ظروف الإجهاد التأكسدي دفع الإنتاج التجاري لمنتجات مختلفة مثل BIOGF1K و ginsenoside Ro و EGCG ومستخلص Fraxinus chinensis وبعض مضادات الأكسدة الاصطناعية. تم الإبلاغ عن التأثيرات المضادة للتجاعيد والتشيخ الضوئي للمواد الحيوية في هذه المنتجات وغيرها على نطاق واسع في صناعة مستحضرات التجميل [48،55،56].

يعتبر الحفاظ على ترطيب مناسب للبشرة [31] وتوليد كولاجين جديد [57] عمليتين مهمتين لبشرة صحية. تم زيادة التعبير عن جينات الترطيب (HAS2 و TGM -1) (الشكل 3 أ) وجينات الكولاجين (Col1A1) بشكل ملحوظ بواسطة Pm-ME (الشكل 3 ب-د) ، وساعدت على استعادة مستويات الكولاجين بعد التعرض للأشعة فوق البنفسجية B وعلاج H2O2 (الشكل 3 هـ ، و). لذلك ، يشير هذا إلى أن Pm-ME يمكن أن يكون مكونًا فعالًا في الحفاظ على صحة الجلد. قمع الميلانين بواسطة Pm-ME مفيد أيضًا لاستخدامه في مستحضرات التجميل. على الرغم من أهمية الميلانين في حماية البشرة من الأشعة فوق البنفسجية ، لأن العديد من النساء يفضلن تفتيح بشرتهن ، فإن التبييض عن طريق النشاط المضاد للميلانين يعد ميزة مفيدة في مواد التجميل [29]. أظهر Pm-ME (100 ميكروغرام / مل) نشاطًا مثبطًا قويًا أثناء تكوين الميلانين ، كما تم تقييمه من خلال تحديد مستويات الميلانين من الوسط المفرز والنقص الموضح في مستويات إفراز الميلانين (الشكل 4 أ-ج). علاوة على ذلك ، قام Pm-ME (200 ميكروغرام / مل) بقمع نشاط إنزيم التيروزيناز بشكل كبير (الشكل 4 د) ، مما يعني أن التركيز العالي فعال بشكل مباشر لقمع نشاط الإنزيم ، بينما يشارك التركيز المنخفض في تنظيم إفراز الميلانين. لذلك ، نظرًا لأنشطته المضادة للأكسدة ، ومكافحة الشيخوخة الضوئية ، والمضادة للتجاعيد ، والمرطبة ، والمضادة لتكوين الميلانين ، يمكن اعتبار Pm-ME مرشحًا جيدًا لمستحضرات التجميل. لمزيد من استكشاف هذا الاحتمال ، نخطط لتقييم فعاليته السريرية في الدراسات المستقبلية.

أجرينا دراسات لتحديد الآليات الجزيئية التي من خلالها يمارس Pm-ME مضادات الأكسدة والترطيب في الخلايا الكيراتينية. ركزنا على الإنزيمات المرتبطة بـ MAPK (ERK و JNK و p38) ، لأن هذه الإنزيمات تلعب دورًا مهمًا في شيخوخة الخلايا الكيراتينية والخلايا الصباغية في الجلد وتكوين الميلانين [58،59]. على سبيل المثال ، يتوسط مسار ERK الاستجابات الخلوية لتحويل عامل النمو - 1 عن طريق زيادة مسارات توليف الكولاجين [60] و HA في الخلايا الكيراتينية [61]. يلعب JNK دورًا رئيسيًا في موت الخلايا المبرمج للكيراتين الناتج عن الإجهاد التأكسدي [62]. الإنزيم p38 مهم في الحفاظ على توازن جلد الإنسان [63]. يتوسط كلا المسارين JNK و p38 الاستجابات الخلوية للسيتوكينات والضغط البدني [14]. يتم تنشيط هذه المسارات عن طريق الضغوط التي يسببها UVB و ROS. يمكن أن تزيد هذه المسارات من إنتاج الجينات المحللة للبروتين MMP و COX -2 [15] ، والتي ترتبط بتدهور الكولاجين والتهاب الجلد على التوالي [64]. والجدير بالذكر أن الإجهاد التأكسدي منع فسفرة ERK ، بينما تمت فسفرة p38 و JNK عند معالجتهما بـ H O (الشكل 5 أ). في المقابل ، زاد Pm-ME فسفرة ERK وقلل من فسفرة p38 و JNK (الشكل 5 أ) ، مما يعني أن هذه الإنزيمات يمكن أن تشارك بشكل مختلف في الأنشطة الدوائية بوساطة Pm-ME. لفهم الدور الوظيفي لـ MAPK في التأثيرات المضادة للشيخوخة الضوئية والمضادة للميلانين والمضادة للالتهابات لـ Pm-ME في الخلايا الكيراتينية المشعة بالأشعة فوق البنفسجية B و H2O 2- ، تم استخدام مثبطات محددة لـ MAPK. اقترحت نتائج الشكل 5 ب بقوة أن تثبيط p38 و JNK بواسطة Pm-ME أدى إلى تأثيرات مضادة للتجاعيد ومضادة للالتهابات ، لأن مثبط p38 (SB203580) ومثبط JNK (SP600125) منع التعبير عن MMP {{45 }} و COX -2 على التوالي. علاوة على ذلك ، تسبب فسفرة ERK التي تسببها Pm-ME في التعبير عن الجينات المرتبطة بالترطيب لأن علاج Pm-ME أثار التعبير عن HAS -2 ، بينما قام U0126 بقمعه (الشكل 5 ج). تشير هذه النتائج إلى أن الإنزيمات المرتبطة بـ MAPK ساهمت في أنشطة مكافحة الشيخوخة والتجاعيد والالتهابات بوساطة PM-ME. من المعروف أن تشعيع UVB يزيد من شلالات الإشارات الأخرى ، مثل تلك المرتبطة بـ NF-B و STAT3 [65،66]. لا يزال يتعين التحقيق فيما إذا كان Pm-ME يمكنه تنظيم مسارات الإشارات هذه.

في الختام ، وجدنا أن Pm-ME الغني بحمض الكوماريك أظهر نشاطًا مضادًا للأكسدة ومضادًا للتجاعيد ومحفزًا للترطيب ومضادًا لتكوين الميلانين في خلايا الجلد المشعة بواسطة UVB أو المعالجة بـ H2O2. زاد Pm-ME من فسفرة ERK بطريقة تعتمد على الجرعة ولكنه انخفض الفسفرة لـ p38 و JNK (الشكل 6). تشير نتائجنا بقوة إلى أن Pm-ME قد يكون مادة حيوية فعالة لحماية الجلد. نظرًا لأن Pm-ME أظهر أنشطة واعدة جدًا في كل من خلايا الجلد السرطانية (خلايا HaCaT و B16F10) والخلايا الكيراتينية البشرية الطبيعية أثناء ظروف الإجهاد التأكسدي ، فإننا نقترح الأدوار المفيدة لاستخدام Pm-ME في مستحضرات التجميل. ومع ذلك ، فإن خلايا الورم الميلانيني لها سمات غير طبيعية مثل التحكم في دورة الخلية المعطلة ، وأنماط التعبير الجيني الشاذة ، وقدرات التمايز المحدودة [67] ، والعمل الإضافي مع الخلايا الصباغية الأولية يجب اتباعه لفهم النشاط المضاد لتكوين الميلانين لـ Pm-ME و الآلية الجزيئية. علاوة على ذلك ، سيتم اختبار النباتات من نفس العائلة (Sapotaceae) أو جنس (Pradosia spp.) لأنشطة حماية الجلد المماثلة.

اطلب المزيد: david.deng@wecistanche.com WhatApp: 86 13632399501