تطبيق خلاصة أوراق الكركديه كانابينوس L. (kenaf) كعناصر مبيضة للبشرة ومضادة للشيخوخة في النموذج التجميلي الطبيعي.

جهة الاتصال: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 البريد الإلكتروني:audrey.hu@wecistanche.com

يان يي سيم وكار لين نيام

نبذة مختصرة

في ماليزيا ، النفايات الصناعية منالكركديه كانابينوستتسبب صناعة التناف ، وخاصة الإجازة ، في تحديات في الاستدامة. تم الإبلاغ عن النشاط البيولوجي لأوراق التيل من خلال عدد قليل من الدراسات السابقة ، لذلك من الممكن تصديق أن مستخلص أوراق التيل (KLE) يمكن استخدامه كعنصر وظيفي في التركيبات التجميلية. وبالتالي ، كان الهدف من هذه الدراسة هو تطوير تركيبة مستحضرات تجميل طبيعية تحتوي على KLE وتقييم خصائصها الفيزيائية والكيميائية ، وخصائصها الميكروبيولوجية ، واستقرار التخزين ، والأنشطة البيولوجية (مضادات الأكسدة ، ومضادات الأكسدة ، ومكافحة الشيخوخة) ، السمية الخلوية في المختبر (على الخلايا الليفية الجلدية البشرية الطبيعية وخلايا الورم الميلانيني B16F1 0) ومقايسة تكوين الميلانين (نشاط التيروزينات داخل الخلايا وتقليل إنتاج الميلانين). أظهرت النتائج أن غسول KLE (KLEL) المحضر بنسبة 15 بالمائة من زيت بذور التين (KSO) (F2) مع 0. 1 بالمائة وزن / وزن KLE يعطي أفضل استقرار فيزيائي وميكروبيولوجي ، مع عدم وجود سمية على الخلايا البشرية. قدم KLEL أيضًا محتوى مضادًا للأكسدة يصل إلى 1.84 ± 0. 0 7 ملغ من مكافئ حمض الكافيين (CAE) / جم و 21.62 ± 0.76 مجم مكافئ هيدرات كاتشين (CHE) / جم لإجمالي المحتوى الفينولي (TPC) ) ومحتوى الفلافونويد الكلي (TFC) ، على التوالي. بالإضافة إلى ذلك ، قدم KLEL قدرة antityrosinase على تثبيط تكوين mycophenolate (30.28 ± 3.90 بالمائة) وثنائي الفينول (11.40 ± 0.29 بالمائة) ، وكشف لأول مرة ،مكافحة الشيخوخةعن طريق تثبيط نشاط الكولاجيناز (36.41 ± 0. 54 بالمائة) والإيلاستاز (23.13 ± 1.56 بالمائة). فيما يتعلق بالنشاط المثبط لتكوين الميلانين ، قدم KLEL فعالية عالية في قمع نشاط التيروزيناز الخلوي ومحتوى الميلانين على خلايا B16F10. بشكل عام ، تعد نتائج هذه الدراسة واعدة جدًا نحو تطوير نماذج تجميلية طبيعية باستخدام أوراق التيل.

أعشاب التنين الصحراوية: لمكافحة الشيخوخة

1 المقدمة

في الآونة الأخيرة ، اكتسب النموذج الاقتصادي الدائري الذي يمكن أن يعزز استدامة إدارة النفايات من خلال تقليل إنتاج النفايات والحفاظ على القيمة طويلة الأجل ، مع تقليل الآثار السلبية لندرة الموارد والتدهور البيئي اهتمامًا عامًا (Morseletto ، 2020). بشكل عام ، تنتج صناعات المحاصيل الصناعية كمية كبيرة من المنتجات الثانوية ذات القيمة الاقتصادية المنخفضة كل عام.الكركديه كانابينوسL. KR9 (kenaf) ، هي أحد القطاعات الزراعية التي تساهم في الناتج المحلي الإجمالي لماليزيا (الناتج المحلي الإجمالي) حيث زاد وزن إنتاج جذع التيل الجاف من 7.1 (000 طن) في عام 2013 إلى 7.6 ({{7} } طن) في عام 2014 ، ومن المتوقع أن يتجاوز سوق التيل العالمي 854 مليون دولار أمريكي بحلول عام 2025 (Abdelrhman et al.، 2016). ومع ذلك ، يتم إنتاج كميات كبيرة من المنتجات الثانوية ، مثل بذور وأوراق التيل ، مما يساهم في مشاكل الاستدامة.

أوراق التيل ، التي تمثل كمية كبيرة من إجمالي المنتجات الثانوية ، هي الأقل تميزًا وقيمتها من بين جميع المنتجات الثانوية المتولدة. بسبب النهج الدائري ، من المهم إعادة استخدام أوراق التيل أو استعادتها في منتجات ذات قيمة مضافة لأنها توفر فوائد متعددة في المجالات الاقتصادية والبيئية والاجتماعية (Coderoni and Perito ، 2019). تتكون أوراق التيل من مصادر غنية بالمركبات النشطة بيولوجيًا مثل حمض الكلوروجينيك ، ومساعدات الكافيين ، والكامبفيرول ، وهيدرات الكاتشين كما ثبت من خلال الدراسات التي أجراها Kho et al. (2019) ؛ Sim and Nyam (2019) و Haw et al. (2020). ومع ذلك ، عادة ما يتم توجيهها لإنتاج منتجات ذات قيمة اقتصادية منخفضة: الألياف الغذائية وأعلاف الحيوانات (ليم وآخرون ، 2020).

تم استخدام مصطلح "العودة إلى الطبيعة" على نطاق واسع في أبحاث وتطوير صناعة مستحضرات التجميل ، حيث أدى استخدام المستخلصات من أصل نباتي إلى قبول جيد من قبل المستهلكين. وفقًا للدراسة التي أجراها Sim et al. (2019) ، أظهر مستخلص أوراق التيل (KLE) خصائص واعدة في مضادات الأكسدة ومضادات التيروزيناز ، وكان من الممكن استخدامه كمكونات ذات قيمة مضافة في تطوير منتجات مستحضرات التجميل. من المهم تطوير تركيبات مستقرة وآمنة تحتوي على KLE لأنها تحتوي على الكثير من مركبات البوليفينول التي أظهرت الجلدتبييضومكافحة الشيخوخةالخصائص. هناك العديد من المتطلبات التي يجب مراعاتها عند تطوير تركيبات مستحضرات التجميل الجديدة ، مثل نوع المستحضر ، ونية الاستخدام ، والتفاعل المحتمل بين المكونات المستخدمة في التركيبات ، والتي تساهم بشكل عام في الحاجة إلى دراسات الاستقرار والسلامة. (جاربوسا ومايا كامبوس ، 2016).

تعد دراسات الثبات ، والتي تشمل دراسة الخصائص الفيزيائية والكيميائية والميكروبية ، ضرورية لتركيبات مستحضرات التجميل بعد عملية التطوير. بالإضافة إلى ذلك ، لمنع أي تأثير ضار أو رد فعل تحسسي ، يجب أيضًا اختبار مستحضرات التجميل باستخدام مقايسة السمية الخلوية في المختبر على خط خلايا الجلد البشري الطبيعي. وبالتالي ، فإن الهدف من هذا العمل هو تطوير تركيبة مستحضرات تجميل طبيعية تحتوي على KLE (KLE lotion- KLEL). بعد ذلك ، تم تقييم KLEL لخصائصه الفيزيائية والكيميائية ، وخصائصه الميكروبيولوجية ، واستقرار التخزين ، والسمية الخلوية في المختبر (على الخلايا الليفية الجلدية البشرية الطبيعية وخلايا سرطان الجلد B16F10) ، ومقايسة تكون الميلانين (نشاط التيروزيناز داخل الخلايا وتقليل إنتاج الميلانين). سمحت لنا هذه الدراسة أيضًا بتحديد ، وللمرة الأولى ، ليس فقط نشاط مضادات الأكسدة ومضاد التيروزيناز لـ KLEL ولكن أيضًا نشاطها المثبط على الكولاجيناز والإيلاستاز.

فائدة cistanche: مكافحة الشيخوخة

2. المواد والأساليب

2.1. المواد والكيماويات النباتية

طازجالكركديه كانابينوسL. KR9 (التيل) يترك بعد 90 يومًا من البذر وتم الحصول على البذور من Lembaga Kenaf & Tembakau Negara (LKTN ، ماليزيا). تم شراء Span 20 و Tween 80 من Sigma Aldrich (ميونيخ ، ألمانيا) ، وتم الحصول على Cosmedia® ACE و Iscaguard® PEG و Emulgade® SE-PF من BASF (ماليزيا) ، وتم شراء الجلسرين من Croda International Plc. (المملكة المتحدة). تم الحصول على خط خلايا الخلايا الليفية الجلدية البشرية الطبيعية (NHDF) من Lonza (بازل ، سويسرا) وتم شراء سرطان الجلد (B16F10) من ATCC (ماناساس ، فيرجينيا ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم شراء Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) من Nacalai Tesque (اليابان). جميع المواد الكيميائية الأخرى المستخدمة كانت من درجة كاشف تحليلي (بلجيكا ، ألمانيا ، ماليزيا). تم استخدام الماء شديد النقاء (ميليبور ، الولايات المتحدة الأمريكية) طوال فترة التحليل.

2.2. طُرق

2.2.1. تجفيف أوراق التيل

تم تنظيف أوراق التيل بماء فائق النقاوة وتجفيفها ثم حفظها في درجة حرارة - 8 0 م بين عشية وضحاها. بعد ذلك ، تم تجفيف العينة في مجفف بالتجميد (Christ ، ألمانيا) ، تحت 0.0004 بار لمدة 48 ساعة ، مطحون ، معبأ بالفراغ ، وتخزينه عند - 20 درجة.

2.2.2. تحضير مستخلص أوراق التيل المنقى جزئياً (KLE)

تم إجراء الاستخراج النبضي بمساعدة الموجات فوق الصوتية (PUAE) لـ KLE وفقًا لـ Sim et al. (2019). تم وزن العينات بمذيبات الاستخلاص (الإيثانول) بنسبة 1:10. بعد ذلك ، تم تعريض الخليط إلى الاستخلاص النبضي بمساعدة الموجات فوق الصوتية (سارتوريوس ، ألمانيا) بسعة صوتنة بنسبة 50 في المائة ، وفترة نبضة مدتها دقيقة واحدة ، وفترة نبضة مدتها دقيقة واحدة مع الحفاظ على درجة الحرارة عند 18-22 ± 3 درجة (ثلاث دورات ). بعد ذلك ، تم ترشيح المستخلص وتركيزه في مبخر دوراني مفرغ (بوتشي ، سويسرا). تم إجراء التنقية الجزئية لـ KLE وفقًا لـ Seabra et al. (2010) مع تعديل طفيف. تم وضع المستخلص الخام على عمود مملوء بهلام السيليكا وتمت التصفية التتابعية باستخدام مذيب متدرج من n-hexane- ethyl acetate (1 00: 00 ، 90:10 ، 80:20 ، 50:50 ، 20:80، 10:90، 00: 1 00) وإيثيل أسيتات الميثانول (100: 00 ، 90:10 ، 80:20 ، 50:50 ، 20:80 ، 10:90 ، 00: 100). تم تركيز KLE المنقى جزئياً حتى التجفيف باستخدام مبخر دوار وتخزينه عند درجة 20- للاستخدام المستقبلي.

2.2.3. الاستخلاص بالمذيبات من زيت بذور التيلف (KSO)

تم استخراج KSO وفقًا لـ Chew et al. (2015). تم طحن بذور التيل إلى مسحوق ناعم باستخدام مطحنة (باناسونيك ، اليابان) وإضافتها مع الهكسان بنسبة 1: 5. تم استخلاص الزيوت باستخدام مستخرج Soxhlet عند 60 درجة مئوية لمدة 3 ساعات ، وتمت إزالة الهكسان باستخدام مبخر دوار. بعد التنظيف بالنيتروجين ، تم تخزين KSO عند - 20 درجة للاستخدام المستقبلي (Chew et al. ، 2015).

2.2.4. التطوير التجريبي لمستحضر يحتوي على KLE

في البداية ، تم تحسين تركيبة أساس المستحضر (بدون KLE) باستخدام 4 تركيزات مختلفة من زيت بذور التيل (KSO) (1 0 بالمائة و 15 بالمائة و 2 0 بالمائة و 25 بالمائة). تم بعد ذلك تقييم قاعدة المستحضر نسبيًا للعديد من العوامل: المظاهر الفيزيائية ، والرائحة ، والتجانس ، ودرجة الحموضة ، واللزوجة ، والطرد المركزي ، وتقييم ذوبان الجليد ، لاختيار أفضل تركيبة أساس لوشن لمزيد من الدراسة. فيما يتعلق بالنتائج من المعلمات المذكورة أعلاه ، تم اختيار أنسب تركيبة أساس المستحضر (15 بالمائة KSO) للتكامل مع KLE (0. 1 بالمائة وزن / وزن) (KLEL). باختصار ، تم تسخين مكونات المرحلة غير القطبية (Emulgade® SE PF و Span 20 و KSO) والمرحلة القطبية (الماء ، Tween 80 ، والجلسرين) حتى 75 ± 2 درجة. بعد ذلك ، تمت إضافة المرحلة غير القطبية قطرة تلو الأخرى إلى المرحلة القطبية مع التحريك السريع باستخدام محرك مغناطيسي (Thermo Fisher Scientific ، الولايات المتحدة الأمريكية) عند 350 دورة في الدقيقة لتشكيل مستحلب أولي ، متبوعًا بالتجانس عالي القص باستخدام IKA T25 الرقمي ULTRA - TURRAX® (IKA Laboratory Equipment ، ألمانيا) عند 3200 دورة في الدقيقة لمدة 3 دقائق والتجانس بالموجات فوق الصوتية بسعة 40 بالمائة لمدة 3 دقائق. تمت إضافة Cosmedia® ACE و Iscaguard® PEG و KLE وخلطها في مستحلب O / W في درجة حرارة الغرفة. تعمل قاعدة غسول KSO بدون KLE كعنصر تحكم (KSOL). في حين أن قاعدة المستحضر المضافة بحمض الكوجيك (0.1 بالمائة وزن / وزن) (KAL) عملت كعنصر تحكم إيجابي لنشاط مضاد التيروزيناز ومقايسة تكون الميلانين. قاعدة المستحضر المضافة مع هيدرات الكاتيكين (0.1 بالمائة وزن / وزن) (CHL) كانت بمثابة عنصر تحكم إيجابي لنشاط مضاد الكولاجيناز ومضاد الأيلاستاز.

2.2.5. التحليل الفيزيائي الكيميائي

2.2.5.1. المظاهر والرائحة والتجانس.

وفقًا لـ Hanifah and Jufri (2018) ، تم فحص تركيبات المستحضر من حيث اللون والرائحة والتجانس والفصل المرحلي.

2.2.5.2. الرقم الهيدروجيني. تم استخدام الحلول القياسية لمعايرة قطب مقياس الأس الهيدروجيني قبل القياس.

تم تحديد الرقم الهيدروجيني للعينات بمقياس الأس الهيدروجيني (Mettler Toledo ، سويسرا) في درجة حرارة الغرفة.

2.2.5.3. لون.

سيتم تقييم اللون باستخدام مقياس الألوان (Hunter Lab ، الولايات المتحدة). سيتم التعبير عن النتائج وفقًا لمساحة اللون L * (الإضاءة) ، و * (أخضر) ، و * (أصفر) ، وفرق اللون الكلي (ΔE). تم حساب فرق اللون الكلي (ΔE) لجميع العينات باستخدام المعادلة على النحو التالي: ΔE = ̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅̅ (L ∗ - L ∗ 0) 2 زائد (أ ∗ - أ ∗ 0) 2 زائد (ب ∗ - ب ∗ 0) 2√

2.2.5.4. اللزوجة.

تم تقييم لزوجة العينات في مقياس اللزوجة بمجال Brook باستخدام مغزل LV -64 وفقًا لـ Gyawali et al. (2016) مع تعديل طفيف. تم غمر العينة مباشرة في المغزل بمعدل دوران 100 دورة في الدقيقة وتم قياس اللزوجة (cP).

2.2.5.5. الانتشار.

تم تحديد قابلية انتشار العينات بطريقة اللوحة المتوازية (Gyawali et al. ، 2016). تم وزن العينة بدقة (1 جم) ووضعت فوق إحدى الشرائح الزجاجية (20 × 20 سم 2). بعد ذلك ، تم وضع الشريحة الأخرى على الجزء العلوي من العينة ووضع وزن 100 جرام على الشريحة العلوية ، لضمان ضغط العينة بالتساوي. بعد دقيقة واحدة ، تمت إزالة الوزن وقياس قطر الانتشار (سم).

2.2.5.6. تقييم الطرد المركزي.

تم تحميل العينة في أنبوب طرد مركزي ثم طردها عند 3750 دورة في الدقيقة لمدة 30 دقيقة (إيبندورف 5417R ، الولايات المتحدة الأمريكية). يحدد اختبار الطرد المركزي هذا (الذي يساوي 1- جاذبية العام) ثبات العينة (Hiola et al.، 2018).

2.2.5.7. تقييم تجميد الذوبان.

تم إجراء دراسات تجميد الذوبان وفقًا للطرق السابقة مع بعض التعديلات (Krongrawa et al. ، 2018). تم حفظ كل عينة بالتناوب عند درجة حرارة باردة ، 4 ± 1 درجة مئوية (24 ساعة) ودرجة حرارة ساخنة ، 45 ± 1 درجة مئوية (24 ساعة) مع 75 بالمائة ± 2 بالمائة رطوبة نسبية (رطوبة نسبية) لمدة 6 دورات في حاويات زجاجية محكمة الإغلاق. تم تحديد لزوجة العينات بعد دورة الإجهاد الحراري.

2.2.6. محدد لمحتوى مضادات الأكسدة

2.2.6.1. إجمالي المحتوى الفينولي (TPC).

تم تحديد إجمالي محتوى الفينول وفقًا لـ Lim et al. (2007). تم خلط العينة (10 مجم / مل) مع 10 بالمائة من كاشف Folin-Ciocalteu و 7.5 بالمائة (وزن / وزن) Na2CO3 ، تليها حضانة لمدة 30 دقيقة في الظلام. تم أخذ الامتصاص عند 765 نانومتر باستخدام مقياس الطيف الضوئي UV-vis (Secoman ، فرنسا). كانت معادلة المعايرة لحمض الكافيين هي y=0. 0269 زائد 9.69x (r 2=0. 999) (Sim et al.، 2019). تم التعبير عن النتائج على شكل مجم من مكافئ حمض الكافيين (CAE) / جم عينة.

2.2.6.2. إجمالي محتوى الفلافونويد (TFC).

تم تقييم إجمالي محتوى الفلافونويد وفقًا لـ Ogbunugafo et al. (2 0 11). بشكل عام ، تم خلط العينة (1 0 مجم / مل) مع 15 بالمائة NaNO2 و 10 بالمائة محلول AlCl3 وماء فائق النقاء و 1 مولار هيدروكسيد الصوديوم. تم قياس الامتصاصية على الفور عند 510 نانومتر مقارنة بالمعيار المحضر باستخدام هيدرات الكاتشين (0.02 × 0.1 مجم / مل). كانت معادلة المعايرة لهيدرات الكاتيكين y=0 .004 زائد 3.1x (ص 2=0 .999) (سيم وآخرون ، 2019). تم التعبير عن المحتوى الكلي للفلافونويد (TFC) بالملليغرام من مكافئات هيدرات الكاتشين (CHE) / جم عينة.

فوائد استخراج cistanche: مكافحة الشيخوخة

2.2.7. نشاط أنتيكولاجيناز

نشاط مضاد الكولاجين الذي يعتمد على التحلل البروتيني بين الكولاجيناز والركيزة الاصطناعية (FALGPA- N - (3- [2- Furyl] - acryloyl) -Leu-Gly-Pro-Ala) عند 345 نانومتر في تم إجراء وجود مثبطات الكولاجيناز وفقًا لبارانتس وغينيا (2 0 03) مع بعض التعديلات. تم السماح لـ 0.25 وحدة / مل كولاجيناز (40 ميكرولتر) المشتق من Clostridium histolyticum بالتفاعل مع 10 عينات اختبار ميكرولتر و 20 ميكرولتر من محلول ثلاثي التريسين 50 ملي مولار (درجة الحموضة 7.5 ، مع 100 ملي كلوريد الكالسيوم و 5 ملي كلوريد الصوديوم) في الظلام لمدة 15 دقيقة. بعد الحضانة المسبقة ، تمت إضافة كمية 40 ميكرولتر من محلول FALGPA سعة 2 مم لكل بئر. كانت كل عينة مصحوبة بفارغ يحتوي على جميع المكونات باستثناء FALGPA وتم تحديد الامتصاصية بعد الحضانة لمدة 20 دقيقة.

2.2.8. تحليل العمر الافتراضي البكتريولوجي لـ KLEL

تم تعديل الطرق المستخدمة لإجمالي عدد الميكروبات الهوائية (TAMC) وإجمالي عدد الخمائر والقوالب (TYMC) لـ KLEL من دليل التحليل البكتريولوجي FDA (BAM) (Huang et al. ، 2017). تم خلط العينة (1 جم) مع 1 مل معقم توين 80 وتم تعديل الحجم مع ماء الببتون المعقم للحصول على سلسلة تخفيف كاملة من 10 إلى 10 درجة مئوية. بالنسبة لـ TAMC ، تم تلقيح العينات على أجار المغذيات باستخدام طريقة لوحة الانتشار ، ثم تم تحضين الألواح عند 30 ± 2 درجة مئوية لمدة 48 ساعة. في حالة TYMC ، تم تلقيح العينات على أطباق أجار دكستروز البطاطس باستخدام طريقة لوحة الانتشار ، وتم تحضين الألواح في وقت لاحق عند 30 ± 2 درجة مئوية لمدة 7 أيام. تم فحص الصفائح لنمو الميكروبات بعد فترة الحضانة.

2.3 تحليل احصائي

تم تحليل جميع النتائج باستخدام حزمة إحصائية Minitab 16.2.1 (Minitab Inc. ، بنسلفانيا ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، تم إجراء تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA) ، متبوعًا باختبار Tukey لتحديد الفرق الكبير (p <0 .05).="" يعني="" ±="" الانحراف="" المعياري="" (sd)="" (ن="3)" تم="" تقديمه="" لتحليل="">

3. النتائج والمناقشات

3.1. تحسين تركيبة أساس المستحضر

وفقًا لـ Hiola et al. (2018) ، تحسين قاعدة المستحضر (ما قبل الصياغة) له دور مهم في الحصول على تركيبة جيدة ومستقرة. لذلك ، تم تحسين قاعدة المستحضر باستخدام 4 نسب مختلفة من KSO كما هو موضح في الجدول 1. تم تقييمها من خلال المظهر والرائحة والتجانس والاستقرار المادي ودرجة الحموضة وقابلية الانتشار واللزوجة وتحليل تجميد الذوبان (المواد التكميلية- S1 و S2). جميع تركيبات قاعدة المستحضر المحضرة باستخدام KSO لها لون أصفر حليبي فاتح إلى أصفر حليبي ، مع رائحة طيبة (Chu and Nyam ، 2020). بناءً على النتائج التي تم الحصول عليها ، كانت جميع قيم الأس الهيدروجيني لمستحضرات أساس المستحضر في نطاق درجة حموضة الجلد (4-6) ، وهذا مهم لتقليل رد الفعل التحسسي وضمان ثبات تركيبة مستحضرات التجميل على مدار فترة التخزين (Chu و Nyam ، 2020). أظهرت جميع تركيبات أساس المستحضر انخفاضًا في اللزوجة بعد تحليل ذوبان التجميد ، ولكن لا تزال ضمن النطاق المخصص للغسول الجيد (500-5000 سنتي بواز) (كوسوما وآخرون ، 2017). لقابلية الانتشار ، كلما زاد تركيز KSO ، قل قطر قابلية الانتشار بسبب اللزوجة العالية. كلما زادت قابلية الانتشار ، كان من الأسهل تطبيق التركيبة التجميلية على سطح الجلد. بالنسبة لاختبار الثبات عن طريق مقاومة الطرد المركزي ، أظهر F2 و F3 عدم فصل الطور ، مما يشير إلى أن كلا الصيغتين كانتا مستقرتين لمدة عام واحد. ومع ذلك ، لا يمكن سكب F3 بسهولة ويعطي مظهرًا مشابهًا لتحضير القشدة نظرًا لأنه يحتوي على لزوجة أعلى من F2. لذلك ، تم اختيار F2 كقاعدة لوشن مُحسَّنة لدمجها مع KLE.

ما هو الكستانش المستخدم في: مكافحة الشيخوخة

3.2 تقييم تركيبة غسول KLE (KLEL)

3.2.1. التحليل الفيزيائي الكيميائي

بناءً على النتائج الواردة في الجدول 2 ، أظهرت قاعدة المستحضر المضافة باستخدام KLE لونًا حليبيًا فاتحًا برائحة لطيفة ولم يلاحظ أي فصل طوري. أظهر KLEL قيمة pH أعلى من المجموعة الضابطة ، مما يشير إلى أن إضافة KLE في تركيبة مستحضرات التجميل قد تؤدي إلى زيادة قيمة الرقم الهيدروجيني. كانت قيم الأس الهيدروجيني للعينات متوافقة مع نطاق الأس الهيدروجيني للجلد وآمنة للبشرة. لم تكن هناك فروق ذات دلالة إحصائية في اللزوجة وقابلية الانتشار بين KLEL والتحكم ، مما يشير إلى أن إضافة KLE في المستحلب لم يؤثر على اللزوجة وقابلية الانتشار. لوحظت تغيرات معنوية في قيم L * و a * و b * من KLEL مقارنة مع المجموعة الضابطة التي أثبتت أن لون المستحضر قد تأثر باللون الأخضر الطبيعي لأوراق التيل. تتمتع KLEL باللون الأخضر لقيمة * (-2. 24 ± 0. 0 3) والأصفر لقيمة b * (15.54 ± 0. {{13} } 1). كان الفرق اللوني الكلي (ΔE) لـ KLEL مقارنة مع عنصر التحكم ذو دلالة إحصائية p 0.05 ، بقيمة 6.82 ± 0.04 لـ KLEL. اعتبرت الدراسات السابقة ΔE=2 كحد أدنى للتمييز البصري (Zhou et al. ، 2009). وهكذا أثبتت نتائج ΔE أن إضافة KLE يمكن أن تؤثر على لون تركيبة مستحضرات التجميل.

3.2.2. تحليل محتوى مضادات الأكسدة

يعرض الجدول 3 مقدار إجمالي محتوى الفينول (TPC) ومحتوى الفلافونويد (TFC). أشارت النتائج التي تم الحصول عليها إلى أن أساس المستحضر المركب مع KLE يحتوي على TPC أعلى بكثير (1.84 ± 0. 0 7 mgCAE / g) من المجموعة الضابطة (1.64 ± 0. 0 6 مجم CAE / جم). بينما ، بالنسبة لـ TFC ، أظهر KLEL أيضًا ارتفاعًا ملحوظًا في TFC (21.62 ± 0.76 ملغ / جم) مقارنةً بالتحكم (19.42 ± 0.27 ملغ / جم). في نفس المجموعة من بعض المنتجات الثانوية النباتية ، لا يزال إدراج KLE على أساس الأمراض الجلدية يعرض محتويات عالية من مضادات الأكسدة ، مما يسلط الضوء على مصدره المحتمل لمركبات البوليفينول في صناعة مستحضرات التجميل (Adhikari et al. ، 2019 ؛ Rodrigues et al. ، 2014 ). وفقًا للدراسة التي أجراها Haw et al. (2020) ، أوراق التيل غنية بأنواع مختلفة من مركبات البوليفينول مثل حمض الكافيك وحمض التانيك والكاتشين وحمض الكلوروجينيك.

3.2.3. تحليل نشاط مضادات الأكسدة

تم فحص قدرات إزالة الجذور الحرة للمستحضرات باستخدام مقايسة DPPH و ABTS. يشير الجدول 3 إلى أن KLEL أظهر DPPH أعلى (1.16 ± 0. 18 مجمTEAC / جم) و ABTS (0. 5 0 ± 0. 0 4 mgTEAC / g) نشاط الكسح الجذري مقارنةً بمجموعة التحكم. أظهرت نتائج اختبار DPPH و ABTS أنماطًا متشابهة كما في TPC و TFC ، حيث يمكنها تحسين نشاط مضادات الأكسدة بشكل كبير عن طريق إضافة KLE إلى قاعدة المستحضر ، وقد اقترحت هذه النتائج أن KLE تحتوي على كاسحات للجذور الحرة والتي عند تطبيقها في تركيبات مستحضرات التجميل ، دور هام كمضاد أكسدة أساسي في قمع الجذور الحرة التي تسبب شيخوخة الجلد. بالإضافة إلى ذلك ، أظهر KLEL (0. 69 ± 0. 20 mgTEAC / g) أيضًا أعلى مستوى في قدرة تقليل أيون الحديديك مقارنةً بالتحكم (0.46 ± 0.09 mgTEAC / g) ، بالاتفاق مع DPPH و ABTS. هناك حاجة إلى إمداد مستمر من المركبات المضادة للأكسدة من مصادر خارجية مثل مستحضرات التجميل لاستعادة نظام الدفاع الفردي المضاد للأكسدة ضد أنواع الأكسجين التي تسبب شيخوخة الجلد (Działo et al. ، 2016). بالإضافة إلى ذلك ، يمكن استخدام تركيبات المستحضر التي تحتوي على نشاط تنظيف جذري وقوة مخفضة كجلدتبييضعامل من خلال تقليل إنتاج الميلانين المستحث بالأشعة فوق البنفسجية (Działo et al. ، 2016).

3.2.4. النشاط المثبط للإنزيم

تم اختبار المستحضرات ضد التيروزيناز ، وهو إنزيم البروتين المعدني المحتوي على النحاس والمشترك في تخليق الميلانين الحيوي ، لتقييم نشاط أنتيروزيناز في المختبر. يوضح الجدول 5 أن KLEL (3 {14}}. 28 ± 3.9 0 بالمائة) لم تظهر أي اختلافات كبيرة في نشاط مضاد التيروزيناز مع التحكم الإيجابي (34.05 ± 4.60 بالمائة) عند استخدام L-tyrosine كركيزة . ومع ذلك ، أظهر ALL (11.40 ± 0.29 بالمائة) نشاطًا مضادًا للإنزيم أقل من عنصر التحكم الإيجابي (15.01 ± 0.84 بالمائة) ، عند استخدام L-DOPA كركيزة. أظهر هذا أن KLEL يثبط بشكل رئيسي mycophenolate بدلاً من diphenols. في المختبرمكافحة الشيخوخةتم تقييم الخواص من خلال النشاط المثبط للكولاجيناز والإيلاستاز. يمكن أن يؤدي إنزيم مثل كولاجيناز وإيلاستاز إلى تحلل الكولاجين والإيلاستين ، وهما المسؤولان عن سلامة الجلد ومرونته (Jesumani وآخرون ، 2 0 19). لذلك ، فإن تثبيط نشاط الإيلاستاز والكولاجيناز من شأنه أن يقلل من تدهور الإيلاستين والكولاجين وبالتالي يمنع تكوين التجاعيد ، وهي إحدى العلامات الرئيسية للشيخوخة. كما هو مبين في الجدول 5 ، أظهر KLEL نشاطًا رائعًا مضادًا للكولاجيناز (36.41 ± 0. 54 بالمائة) ومضاد للإيلاستاز (23.13 ± 1.56 بالمائة) مقارنةً بالتحكم الإيجابي (CHL). أظهر KSOL أيضًا antityrosinase (18.82 ± 0. 17 بالمائة (L-tyrosine كركيزة) ؛ 8.48 ± 0. 29 بالمائة (L-DOPA كركيزة) ، مضاد كولاجيناز (18.84 ± {{26) }}. 63 في المائة) ونشاط مضاد للإيلاستاز (5.78 ± 0.59 في المائة) ، ولكن أقل من ALL. قد يشير هذا إلى أن الجمع بين KLE و KSO أظهر تأثيرًا تآزريًا مع نشاط مثبط أفضل للإنزيم. وهذا تدعمه الدراسات التي أجرتها Pascoal et al. (2015) و Chew et al. (2016) ، حيث يكون KSO غنيًا بتوكوفيرولس ، بينما KLE غني بمشتقات كيرسيتين وكايمبفيرول. أظهرت هذه المركبات الجلدتبييضومكافحة الشيخوخةمع الاهتمام بتقليل فرط تصبغ الجلد وإنتاج التجاعيد (Lin et al. ، 2007 ؛ Keen and Hassan ، 2016).

3.2.5. في فحص تكوين الميلانين في المختبر

لمزيد من استكشاف الجلدتبييضخصائص KLEL ، تم استخدام نموذج خلية سرطان الجلد B16F10 لدراسة التأثير المثبط على تكوين الميلانين. بالنسبة لنشاط التيروزيناز الخلوي ، كما هو مبين في الشكل 5 أ ، أظهر KLEL (32.35 بالمائة) عند 500 ميكروغرام / مل تثبيط أقوى بكثير على نشاط التيروزيناز الخلوي من KAL (14.85 بالمائة) و ​​KSOL (13.64 بالمائة) ، عند مقارنته بـ MSH خلية التحكم المعالجة. بالنسبة لمحتوى الميلانين خارج الخلية وداخل الخلايا ، قلل KLEL بشكل يعتمد على الجرعة محتوى الميلانين في خلايا B16F10 (الشكل 5 ب و ج). وجد أن ALL (500 ميكروغرام / مل) لها تأثير مثبط مشابه على محتوى الميلانين خارج الخلية (56.13 بالمائة) (مقارنة بخلية التحكم المعالجة بـ MSH) مع KAL (54.53 بالمائة). بالإضافة إلى ذلك ، أظهر KLEL (36.52 بالمائة) أيضًا تأثيرًا مثبطًا أقوى على محتوى الميلانين داخل الخلايا من KAL (7.98 بالمائة). بينما أظهر KSOL أيضًا تأثيرًا مثبطًا على محتوى الميلانين خارج الخلية (17.73 بالمائة) ، ولكن لم يكن له تأثير على محتوى الميلانين داخل الخلايا. بالمقارنة مع KAL ، يمكن توضيح التأثير المثبط الأقوى لـ KLEL على تثبيط تكون الميلانين من خلال النشاط التآزري بين KSO و KLE ، والذي يمكن أن يعزز خصائص تبييض البشرة KLE في قاعدة المستحضر. أثبتت هذه النتائج أيضًا أنه يمكن استخدام KLE كعامل فعال لتبييض البشرة في النموذج الأولي لمستحضرات التجميل الطبيعية.

3.2.6. فحص السمية الخلوية في المختبر

من خلال تقييم التوافق الحيوي لتحليل KLEL (تحليل MTT) ، تم الحفاظ على صلاحية خلايا NHEF (بعد 24 ، 48 ، 72 ساعة) في وجود تركيزات مختلفة من KLEL (0. 125− 2 مجم / مل) تم الحفاظ عليها أعلاه 95 بالمائة (الشكل 4 أ). أظهر هذا أن KLEL لن يسبب سمية للإنسان. بينما تستخدم خلايا سرطان الجلد B1610 على نطاق واسع في دراسات الجلدتبييضالوكلاء (Chatatikun et al.، 2019؛ Lee et al.، 2019). قبل قياس قدرة KLEL على قمع تكون الميلانين في خلايا سرطان الجلد B16F10 ، تم تقييم السمية الخلوية لـ KLEL. كما هو مبين في الشكل 4 ب ، تم التأكيد على أن KLEL لم يكن سامًا لخلايا سرطان الجلد B16F10 بتركيز أقل من 500 ميكروغرام / مل. على هذا النحو ، تم استخدام 32.5 × 500 ميكروغرام / مل من KLEL في التجارب التالية.

4. الخلاصة

أثبتت هذه الدراسة أنها ذات أهمية كبيرة في النموذج الاقتصادي الدائري المنجز ، حيث تقدم تطبيقات جديدة ممكنة لأوراق التيل كمكونات ذات قيمة مضافة عالية مع خصائص العناية بالبشرة لصناعة مستحضرات التجميل ، وهي مضادات الأكسدة ،مكافحة الشيخوخة، وأنشطة مكافحة تكون الميلانين. أشارت النتائج المقدمة في الدراسة أيضًا إلى أن تركيبة المستحضر المحضرة بنسبة 15 بالمائة KSO (F2) مع 0. 1 بالمائة KLE تعطي أفضل استقرار فيزيائي وميكروبيولوجي ، مع عدم وجود سمية على الخلايا البشرية. استمرارًا لذلك ، يجب أن تركز المزيد من الدراسات أيضًا على اختبار التحدي الميكروبي KLEL والفعالية السريرية.

ملحق cistanche