جهة الاتصال: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 البريد الإلكتروني:audrey.hu@wecistanche.com

الرجاء النقر هنا للجزء 1

2.4 تأثير شروط الاستخراج على CAI

الكولاجين هو البروتين الأكثر وفرة في الثدييات والمكون الهيكلي الرئيسي للمصفوفة خارج الخلية مع وحدات تكرار gly-pro-hyp أطول من 14 0 0 من الأحماض الأمينية. الكولاجيناز هو إنزيم يكسر روابط الببتيد للكولاجين التي تشكل الجلد والعظام والأوتار والأربطة. يتحلل الكولاجين الموجود في الأدمة بواسطة كولاجيناز ، مما يسبب تجاعيد الجلد ويقلل من مرونة الجلد. ولذلك ، فمن الضروري الحد من نشاط الكولاجيناز لمنع تجاعيد الجلد [32،33]. تم إجراء تحسين حالة دولة الإمارات العربية المتحدة لتعظيم معدل CAI لمستخلص قشرة الفول السوداني. كانت هناك حاجة إلى ما مجموعه 17 عملية تشغيل لتحسين المتغيرات الفردية الثلاثة وكانت البيانات التجريبية لـ CAI التي تم الحصول عليها بموجب مجموعات تجريبية 25.2 بالمائة ~ 92.3 بالمائة (الجدول 2). بناءً على 17 عملية تجريبية ، من خلال تطبيق تحليل الانحدار المتعدد على البيانات التجريبية ، ارتبطت الاستجابة والمتغيرات المستقلة بمعادلة الانحدار التربيعي التالية من حيث المعلمات المشفرة الواردة في الجدول 3. ثم تم تطبيق ANOVA لتحديد معاملات الانحدار والدلالة الإحصائية والنماذج الرياضية. تم حساب متوسط ​​قيم التربيع بقسمة مجموع مربعات كل مصدر تباين على درجات الحرية ، وتم تطبيق مستوى ثقة 95 بالمائة (= 0. 0 5) لتحديد الإحصاء يمكن أن تكون ذات مغزى في تحليل النموذج التربيعي. كانت نتائج ANOVA تتضمن أن R2 من معادلة الانحدار التربيعي كانت 0. 8862 وأن القيمة p كانت 0.0134 ، وهو أقل من مستوى الإشارة (p <0.05) ،="" مما="" يشير="" إلى="" نموذج="" جيد="" من="" الإحصائيات="" والإحصائية="" القدرة="" على="" التنبؤ="" بقيم="" cai.="" في="" المصطلح="" الأساسي="" ،="" أظهر="" x2="" و="" x3="" تأثيرات="" مهمة="" وكانت="" شروط="" تأثير="" التفاعل="" مهمة="" في="" x1x2="" و="" x2x3="" (p=""><0.05). تم="" تأكيد="" تأثير="" الظروف="" الإماراتية="" على="" إنتاج="" cai="" بالترتيب="" التالي:="" درجة="" حرارة="" الاستخراج="" (ص="0." 0236)=""> تركيز الإيثانول (ص=0. 0240)> وقت الاستخراج (ص {{37}) }} 8505) ، مما يشير إلى أن تأثير درجة حرارة الاستخلاص وتركيز الإيثانول كان لهما تأثير كبير على CAI.

يوضح الشكل 1 ج مخطط اضطراب يتم فيه تحديد متغيرين متغيرين وتصور تأثير متغير واحد على CAI. تم إظهار تأثيرات جميع المتغيرات الثلاثة على CAI متشابهة ، وأظهرت المتغيرات الثلاثة تأثيرات مهمة وزادت ثم قللت من CAI مع زيادة كل متغير مستقل. في دراستنا ، تم تطوير منحنيات الاستجابة السطحية ثلاثية الأبعاد لتصور تفاعل متغيرين مستقلين في CAI باستخدام معادلات الانحدار التربيعي (الشكل 4). عندما تم تثبيت تركيز الإيثانول عند نقطة المركز ، تم تقييم تأثير وقت الاستخراج ودرجة الحرارة على CAI في الشكل 4A. مع تغير المتغيرين في وقت واحد ، ارتفع CAI إلى

33.4 دقيقة و 76.8 درجة مئوية وانخفضت مرة أخرى بعد الحد الأقصى لـ CAI بنسبة 92.8 في المائة. كما هو مبين في الشكل 4 ب ، ج ، CAI كان له أعلى قيمة عند تركيز الإيثانول بنسبة 64.3 في المائة ، مما يدل على اتجاه تنازلي تدريجي بعد ذلك ، مما يشير إلى أن المذيب الثنائي الذي يتكون من 64.3 في المائة من الإيثانول هو أكثر ملاءمة كمذيب استخلاص. تتوافق هذه النتيجة مع الأبحاث السابقة التي أفادت بأن المذيب الثنائي للماء والإيثانول أظهر مؤشرًا CAI أعلى من الماء في استخلاص المركبات النشطة بيولوجيًا من Orostachys japonica ، مما يشير إلى أن 50٪ من الإيثانول سيكون أكثر فائدة في استخلاصه.جلد-تبييض المكونات [34]. كان الحد الأقصى لـ CAI لمستخلص قشرة الفول السوداني الذي تنبأ به نموذج الانحدار التربيعي 94.5٪ ، والذي تم الحصول عليه في ظل ظروف وقت الاستخلاص 45.1 دقيقة ، ودرجة حرارة الاستخلاص 93.6 درجة مئوية ، وتركيز الإيثانول بنسبة 42.3٪. كان معدل CAI الذي تم الحصول عليه في دراستنا 94.5 بالمائة ، وهو أكثر من ضعف تأثير 39.4 بالمائة و 40.3 بالمائة من قيم CAI لمستخلصات الشاي الأخضر التي أبلغ عنها أوه وآخرون. [35].

الشكل 4. مخططات سطح الاستجابة لـ CAI لمستخلصات قشرة الفول السوداني وفقًا لوقت الاستخراج ودرجة حرارة الاستخراج وتركيز الإيثانول. CAI كدالة لدرجة حرارة الاستخراج ووقت الاستخراج (A) ، ووقت الاستخراج وتركيز الإيثانول (B) ، ودرجة حرارة الاستخراج وتركيز الإيثانول (C).

Cistanche لديهجلدتأثير التبييض

2.5 شروط الاستخراج المثلى

مضادات الأكسدة للبشرة-تبييضوالتأثيرات المضادة للتجاعيد كلها وظائف مهمة لمستحضرات التجميل ومن الضروري استنباط الظروف التي يمكنها تعظيم هذه الوظائف الثلاث في وقت واحد لتحسين ظروف الإمارات العربية المتحدة. يوضح الشكل 5 إجراء تحسين يمكنه في الوقت نفسه زيادة RSA (Y1) و TAI (Y2) و CAI (Y3) عن طريق تداخل كل حالة مثالية للرسم البياني الكنتوري المشتق من خلال معادلة الانحدار التربيعي. اقتصرت نطاقات المتغيرات المستقلة لتحسين ثلاثة متغيرات على وقت الاستخراج 5. 0 ~ 55. 0 دقيقة ، درجة حرارة الاستخراج 26. {{1 0}} ~ 94. 0 .C ، وتركيز الإيثانول بنسبة 0. 0 بالمائة ~ 99.5 بالمائة (الجدول 5). وفقًا لظروف الاستخراج المثلى الفردية ، كانت الظروف المثلى في الإمارات العربية المتحدة 31.2 دقيقة من وقت الاستخراج ، و 36.6 درجة مئوية من درجة حرارة الاستخراج ، و 93.2 في المائة من تركيز الإيثانول ، وفي ظل الظروف المذكورة أعلاه ، RSA 74.9 في المائة ، TAI 50.6 في المائة ، و CAI من { {28}}. تم ​​توقع 8 بالمائة. عندما تمت مقارنة قيم RSA و TAI و CAI المتوقعة مع تلك التي تم الحصول عليها من تجربة التحقق ، كانت القيم من اختبار التحقق مماثلة لتلك الخاصة بالقيم المتوقعة ، حيث كانت القيم 78.2 بالمائة و 52.3 بالمائة و 87.7 بالمائة ، على التوالى.

الشكل 5. تركيب خريطة كفافية لتحقيق أمثلية متزامنة لثلاثة متغيرات لتعظيم RSA (بالمائة) ، TAI (بالمائة) ، و CAI (بالمائة). تم تثبيت تركيز الإيثانول عند المستوى الأمثل بنسبة 93.2 في المائة.

الجدول 5. مقارنة بين RSA و TAI و CAI لمستخلص قشرة الفول السوداني التي تم الحصول عليها عن طريق استخراج Soxhlet (SE) والاستخراج بمساعدة الموجات فوق الصوتية (الإمارات العربية المتحدة) في ظروف استخراج مختلفة.

1 استخراج قشرة الفول السوداني بمساعدة الموجات فوق الصوتية تحت النقطة المركزية لـ CCD (التشغيل رقم 15 ، 16 ، 17) ؛ 2 استخراج قشرة الفول السوداني بمساعدة الموجات فوق الصوتية في ظل ظروف الاستخراج المثلى.

2.6. مقارنة بين SE والإمارات

لتأكيد فعالية الاستخراج في الإمارات العربية المتحدة ، قمنا بمقارنة RSA و TAI و CAI لمستخلص قشرة الفول السوداني المنتج باستخدام تقنيات الاستخراج الإماراتية و Soxhlet (SE). عندما تم إجراء SE في ظل ظروف SE العامة باستخدام 99.5 بالمائة من الإيثانول عند 7 0 .C لمدة 4 ساعات من وقت الاستخراج ، وجد أن RSA و TAI و CAI 75.5 بالمائة و 60.2 بالمائة و 74.4 بالمائة ، والتي لم تختلف كثيرًا عن النتائج التي تم الحصول عليها في ظل الحالة المثلى لدولة الإمارات العربية المتحدة. ومع ذلك ، عندما تم تعيين شروط SE مساوية للظروف المثلى لدولة الإمارات العربية المتحدة البالغة 31.2 دقيقة و 93.2 بالمائة من الإيثانول ، انخفض RSA و TAI و CAI بنسبة 62.0 و 28.3 و 45.6 بالمائة على التوالي ، مقارنة بالإمارات العربية المتحدة في ظل الظروف المثلى. تم تقييم ميزة الموجات فوق الصوتية في إنتاج مواد مفيدة من قشور الفول السوداني كعملية مناسبة للإنتاجية العالية والتصنيع بسبب انخفاض استهلاك المذيبات ووقت الاستخراج القصير.

2.7. تعبير mRNA عن MMP -3 و TRP -1

في الخلايا الصباغية للثدييات ، يتم التحكم في تكوين الميلانين والتحلل المائي للكولاجين بواسطة جينات TRP و MMP ، على التوالي ، ويُعرف TRP {0} و MMP -3 بالجينات الرئيسية لتنظيم تكون الميلانين والتحلل المائي للكولاجين ؛ لذلك ، تم إجراء تحليل RT-PCR على الخلايا الكاملة للخلايا B 16- F 0 وتأثير مستخلص قشرة الفول السوداني المنتج من الإمارات العربية المتحدة في ظل الظروف المثلى (31.2 دقيقة ، 36.6 درجة مئوية ، 93.2 بالمائة) تمت دراسة تعبير mRNA عن MMP -3 و TRP -1. كما يوضح الشكل 6 ، قلل مستخلص قشرة الفول السوداني بشكل كبير من تنظيم تعبير MMP -3 و TRP -1 في الخلايا B 16- F 0 عند إجراء تجارب التعبير الجيني باستخدام الفول السوداني يتراوح تركيز مستخلص القشرة من 0 ~ 1 مجم / مل. قلل مستخلص قشرة الفول السوداني بشكل ملحوظ تعبير MMP -3 و TRP -1 بمقدار 6. 1- أضعاف و 8. 7- أضعاف ، على التوالي ، عند 1. 0 ملجم / مل. تشير هذه النتائج إلى أن مستخلص قشرة الفول السوداني يمنع تدهور الكولاجين في خلايا B16F0 عن طريق تعطيل MMP -3 لتعطيل MMP -1 والتدخل في تعاون MMP -9 [36]. أظهرت الدراسات الحالية أن العلاج بالمستخلصات النباتية يحول دون التعبير عن عامل النسخ المرتبط بالميكروفيلم (MITF) عن طريق فسفرة بروتين كيناز خارج الخلية الذي ينظم الإشارات (ERK). وبالتالي ، فإن التأثير التثبيطي لإنتاج الميلانين عن طريق مستخلص قشرة الفول السوداني يُعزى إلى تثبيط نشاط التيروزيناز من خلال تثبيط التعبير عن ERK و MITF [37]. وبالتالي ، قللت مستخلصات قشر الفول السوداني من مستويات التعبير mRNA لـ TRP -1 و MMP -3 ، مما يشير إلى أن مستخلص قشر الفول السوداني يمتلك أنشطة تثبيط قوية لتحلل الكولاجين وتكوين الميلانين مما يجعله مادة تجميلية ممتازة مع الجلد-تبييضوتأثيرات مضادة للتجاعيد.

الشكل 6. تأثير مستخلص قشرة الفول السوداني على تعبير TRP -1 و MMP -3 mRNA. تمت معالجة الخلايا B 16- F 0 بتركيزات مختلفة من مستخلص قشر الفول السوداني لمدة 24 ساعة. تم قياس مستويات mRNA لـ MMP -9 و TRP -1 باستخدام RT-PCR (a). تم تقدير شدة النطاق باستخدام برنامج Quantity One وتم تطبيعها إلى -actin (* p <0. 05).="" يتم="" التعبير="" عن="" جميع="" البيانات="" على="" أنها="" متوسط="" ​​sd="" لثلاث="" تجارب="" منفصلة="" أجريت="" في="" ثلاث="" نسخ.="" nt="عينة" غير="" معالجة="" ،="" الكمي="" لـ="" trp="" -1="" تعبير="" mrna="" (a)="" ،="" الكمي="" لتعبير="" mmp="" -3="" mrna="">

cistanche phelypaes تفيد البشرة

3. المواد والطرق

3.1. المواد والكواشف

تم شراء قشور الفول السوداني من Nonghyup mart (Gochang ، Jeonbuk ، كوريا) في 2 مارس 0 19 وتم تجفيف القذائف عند 60 درجة مئوية باستخدام فرن جاف (FC 49 ، Lab House ، سيول ، كوريا) لمدة 24 ساعة حتى ظل الوزن الجاف ثابتًا. تم سحق قشر الفول السوداني المجفف باستخدام محضر الطعام (Hanil HMF -3800 ، سيول ، كوريا) ثم تم تمريره عبر منخل 600 ميكرومتر. تم شراء الإيثانول من Samchun Chemical (95.0 بالمائة v / v ، سيول ، كوريا). تم شراء كاشف Folin-Ciocalteu وحمض الغال (97٪) والكيرسيتين من Merck (Kenilworth ، NJ ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم شراء 2 ، 2- Diphenyl -1- picrylhydrazyl (DPPH) ، وحمض الأسكوربيك ، و 3 ، 4- dihydroxy-L-phenylalanine (L-DOPA) من Sigma-Aldrich (St. MO ، الولايات المتحدة الأمريكية). كانت جميع المواد الكيميائية الأخرى المستخدمة في هذه التجربة من الدرجة التحليلية وتم شراؤها من Sigma-Aldrich. تم تحضير جميع محاليل المخزون عن طريق المياه المنقاة منزوعة الأيونات باستخدام نظام تنقية Milli-Q (Millipore ، Burlington ، VT ، الولايات المتحدة الأمريكية).

3.2 الاستخراج بمساعدة الموجات فوق الصوتية واستخراج Soxhlet

تم وضع قذيفة الفول السوداني المسحوق (1 جم) في وعاء استخراج ، ولكل منها 1 0 مل من المذيبات ومختلطة باستخدام خلاط دوامة (VM -10 ، Daihan Scienti e e e e e e e e e e e. لمدة 1 دقيقة. تم تنفيذ الاستخراج عن طريق تداول المياه في المستخرج بالموجات فوق الصوتية (250 واط ، SD-D250H ، Daihan Scienti ، Ltd. ، Wonju ، كوريا) باستخدام تدورات حمام خارجي مبرد (CDRC8 ، Daihancientip Co. ، Ltd. ، Wonju ، كوريا) مع جهاز توقيت رقمي وجهاز تحكم في درجة الحرارة. تم إجراء الاستخراج بجهاز فوق صوتي مزود بمؤقت رقمي وجهاز تحكم في درجة الحرارة. تم صوت العينة لفترات تجريبية مختلفة ودرجات حرارة بتردد عمل يبلغ 40 كيلو هرتز. بعد ذلك ، تم الطرد المركزي للمستخلص بسرعة 10 ، 000 دورة في الدقيقة لمدة 10 دقائق (236R ، لابوجين ، سيول ، كوريا). بعد الطرد المركزي ، تم تكوين أحجام العينة حتى 5 مل وترشيحها من خلال غشاء 0.2 ميكرومتر قبل التحليل. لاستخراج Soxhlet ، تم استخلاص قشرة الفول السوداني المسحوق (5 جم) بشكل مستمر مع 100 مل باستخدام 99.5 بالمائة من الإيثانول لمدة 4 ساعات (8 دورات) عند درجة حرارة قصوى تبلغ 70 درجة مئوية في جهاز Soxhlet. أظهرت تقنية الاستخلاص بمساعدة الموجات فوق الصوتية أنها فعالة جدًا في استخلاص الزيت من بذور العنب ، وميزة الموجات فوق الصوتية ، مقارنة بطرق الاستخراج التقليدية لكل من الزيت والبوليفينول ، كانت متشابهة نظرًا لأن إنتاج الزيت / البوليفينول الذي تم الحصول عليه باستخدام مذيب أقل الاستهلاك ووقت استخراج أقصر.

استخراج سيستانش tubolosa

3.3 تصميم تجريبي

تم تنفيذ التصميم التجريبي باستخدام CCD ، وهو نوع من RSM لتقليل عدد الأشواط التجريبية ودراسة التفاعل بين العوامل. تم استخدام برنامج Design-Expert® 8. 0 (State-Ease، City، MN، USA) لتصميم التجارب وتحليل البيانات وتحسين ظروف الاستخراج لتعظيم استخراج المركبات النشطة بيولوجيًا التي لها مضادات الأكسدة للبشرة-تبييض، والتأثيرات المضادة للتجاعيد من قشرة الفول السوداني. تم تصميم التجارب وفقًا لـ CCD ، واستند النطاق وقيم النقطة المركزية لثلاثة متغيرات مستقلة تم تقديمها إلى نتائج التجارب الأولية (الجدول 1). تم تطبيق CCD للتنبؤ بالظروف المثلى لدولة الإمارات العربية المتحدة لتعظيم الاستجابات بما في ذلك RSA و TAI و CAI من قشور الفول السوداني. كمتغيرات مستقلة ، كانت المتغيرات الثلاثة المختارة هي وقت الاستخراج (X1) ، ودرجة حرارة الاستخراج (X2) ، وتركيز الإيثانول (X3). تم إنشاء ما مجموعه 17 عملية تجريبية مع ثلاث مكررات في النقاط المركزية لتقدير قابلية التكاثر. تم استخدام نموذج الانحدار التربيعي في البيانات التجريبية وتم تطبيقه للتنبؤ بمتغيرات الاستجابة ، كما هو موضح في المعادلة (1):

ص= 0 زائد 1X1 زائد 2X2 زائد 3X3 زائد 11X12 زائد 22X22 زائد 33X32 زائد 12X1X2 زائد 13X1X3 زائد 23X2X3 (1)

حيث Y هي الاستجابة المتوقعة ؛ 0 هو الثابت (التقاطع) ؛ 1 و 2 و 3 هي معاملات الانحدار لمصطلحات التأثير الخطي ؛ 11 و 22 و 33 هي مصطلحات التأثير التربيعي ؛ و 12 و 13 و 23 هي مصطلحات تأثير التفاعل ، على التوالي. تم استخدام تحليل سطح الاستجابة و ANOVA لتحديد معاملات الانحدار والأهمية الإحصائية لمصطلحات النموذج وللنماذج الرياضية للتجربة [38].

3.4. نشاط الكسح الجذري DPPH (RSA)

تم وصف RSA لمستخلص قشرة الفول السوداني بواسطة Pereira-Caro et al. [39]. تم تحضير محلول 0. 0 1 ملي مولار من DPPH في ميثانول (95 بالمائة) وأضيف 1.25 مل إلى 0.25 مل من المستخلص المخفف. تم تحديد RSA لقياس الامتصاصية عند 517 نانومتر باستخدام مقياس الطيف الضوئي UV-Vis (UV1650PC ، Shimadzu ، كيوتو ، اليابان) بعد 20 دقيقة من الحضانة. تم تحضير الفراغ باستخدام الماء المقطر وتم حساب RSA وفقًا لما يلي.

(المعادلة (2)):

3.5 تثبيط نشاط التيروزيناز (TAI)

تم إجراء TAI وفقًا للطريقة المعدلة باستخدام L-DOPA كركيزة بواسطة Jo et al. [40]. تم خلط العينات مع 200 ميكرولتر L-DOPA و 200 ميكرولتر من محلول فوسفات البوتاسيوم (الرقم الهيدروجيني 6.8) وأضيف 200 ميكرولتر من التيروزيناز (125 وحدة / مل) في أنبوب الاختبار وحضنت عند 37 درجة مئوية لمدة 20 دقيقة. تم قياس امتصاص العينة عند 475 نانومتر باستخدام مقياس الطيف الضوئي UV-Vis وتمت مقارنة النتائج مع المجموعة الضابطة. لكل تركيز ، تم حساب نشاط الإنزيم كنسبة مئوية مقارنةً بالمقايسة باستخدام محلول منظم بدون أي مثبط ، وتم حساب TAI بناءً على الصيغة التالية. (المعادلة (3)):

حيث Abs (التحكم) هو امتصاص عازلة زائد كولاجيناز ؛ Abs (عينة) هو امتصاص عازلة زائد كولاجيناز زائد عينة / قياسية.

3.6 تثبيط نشاط الكولاجيناز (CAI)

تم إجراء قياس CAI للمستخلصات عن طريق تعديل طرق Wünsch و Heindrich [41]. تم إذابة الركيزة ، 4- phenylazobezyloxylcarbonyl-Pro-Leu-Gly- Pro-Arg (FALGPA) ، في محلول مؤقت 1 0 مل إلى 1.2 مجم / مل ثم تمت إضافة 125 ميكرولتر من المحلول واحتضانها من أجل 60 دقيقة عند 37 درجة مئوية. تم إذابة كولاجيناز في المخزن المؤقت إلى 0.4 مجم / مل ، وأضيف 75 ميكرولتر من محلول الإنزيم إلى محلول منظم. تم تحضين خليط الركيزة الإنزيمية في حمام مائي عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة وتوقف التفاعل بإضافة 75 ميكرولتر من 20 بالمائة من حمض الستريك (وزن / حجم). بعد إضافة 1.5 مل من أسيتات الإيثيل ، تم فصل طبقة أسيتات الإيثيل وقياس الامتصاص عند 320 نانومتر. تم حساب نسبة التثبيط وفقًا للصيغة التالية.

w

حيث Abs (التحكم) هو امتصاص عازلة زائد كولاجيناز ؛ Abs (عينة) هو امتصاص عازلة زائد كولاجيناز زائد عينة / قياسية.

3.7 صيانة واستنبات خطوط الخلايا

تم الحصول على خلية سرطان الجلد B 16- F 0 المنتجة للميلانين من Korea Cell Line Bank (KCLB، Chongno، Seoul، Korea) وتم تربيتها في وسط Dulbecco النموذجي النسر (DMEM، Sigma-Aldrich، St. Louis ، MO ، USA) مكمل بمصل بقري جنيني (FBS ، 10٪ ، Welgene ، Gyeongsan ، كوريا) ومحلول مضاد حيوي من البنسلين الستربتومايسين (Sigma-Aldrich ، سانت لويس ، MO ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم استخدام Trypsin-EDTA (Gibco ، Grand Island ، NY ، الولايات المتحدة الأمريكية) لتريبسين الخلايا. جميع المواد المستخدمة كانت من درجة زراعة الخلايا.

3.8 تفاعل البوليميراز المتسلسل للنسخ العكسي (RT-PCR)

تم إجراء RT-PCR لقياس التغييرات في مستويات التعبير الجيني MMP -3 و TRP -1 المرتبطة بـتبييضوالتأثيرات المضادة للتجاعيد ، تمت زراعة الخلايا B 16- F 0 في 24- صفيحة جيدة تمت معالجتها بتركيزات مختلفة من مستخلص قشر الفول السوداني في DMEM الخالي من المصل ، وحضنت لمدة 24 ساعة . تم الحفاظ على التحكم في الخلية غير المعالجة تحت

نفس شروط المجموعة المختبرة أثناء التجربة. تم إجراء عزل الحمض النووي الريبي من الخلايا باستخدام AccuPrep® Universal RNA Extraction Kit (Bioneer ، Daejeon ، كوريا). تم تصنيع الحمض النووي التكميلي باستخدام Am - Riert Platinum cDNA Synthesis Master Mix (GenDEPOT ، Barker ، TX ، USA). تم إجراء تحليل RT-PCR باستخدام نظام CFX 96 touch PCR (Bio-Rad ، Hercules ، CA ، الولايات المتحدة الأمريكية) لتحديد مستويات mRNA. كانت البادئات المستخدمة على النحو التالي: MMP -3 بمعنى ، 5 / -AGTTTGTGTCGCGGAGCAC -3 / ومضاد المعنى ، 5 / - TACATGAGCGCTTCCGGCAC -3 / ؛ و TRP {{1 {32}}} بمعنى ، 5 / -GCTGCAGGAGCCTTCTTTCTC - 3 / ومضاد المعنى ، 5 / -AAGACGCTGCACTGCTGGTCT -3 /. تم استخدام مجموعة مناسبة من البادئات المذكورة أعلاه لتضخيم الجينات المعنية باستخدام ظروف ركوب الدراجات التالية: 94 درجة مئوية لمدة 5 دقائق ، تليها 25 دورة عند 95 درجة مئوية لمدة 5 ثوان ، و 60 درجة مئوية لمدة 30 ثانية (لـ MMP -3 ) ، و 60 درجة مئوية لمدة 30 ثانية (لـ TRP -1) ، و 72 درجة مئوية لمدة 30 ثانية. تم فصل منتجات PCR بالكهرباء على هلام agarose بنسبة 1 في المائة ، وملطخة ببروميد الإيثيديوم ، وتم تصورها باستخدام برنامج Gel Doc TM XR plus System and Quantity One 2.0 (Bio-Rad ، Hercules ، CA ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم استخدام بروتين التدبير المنزلي ، -actin ، كعنصر تحكم في التحميل مع افتراض أن مستويات التعبير عن هذه البروتينات تظل ثابتة.

cistanche الصحراءتبييضوتأثيرات مضادة للتجاعيد

4 - نتائج

في هذه الدراسة ، تم استخدام النهج التكميلي لاستعادة واستخدام المواد النشطة بيولوجيًا من المنتجات الثانوية الزراعية لقشور الفول السوداني لتطوير مكونات ذات قيمة مضافة ذات استخدامات متعددة. بادئ ذي بدء ، حاولنا زيادة كفاءة استخلاص المركبات النشطة بيولوجيًا مع مضادات الأكسدة والجلد-تبييض، والتأثيرات المضادة للتجاعيد من خلال تحسين العملية الإماراتية. لذلك ، استخدمت هذه الدراسة الإمارات العربية المتحدة من أجل الإنتاج الفعال للمركبات النشطة بيولوجيًا مع الجلد-تبييضوالتأثيرات المضادة للتجاعيد من قشور الفول السوداني والتحسين المستند إلى الإحصاء المطبق لتعظيم RSA و TAI و CAI في وقت واحد. تم تحسين ظروف دولة الإمارات العربية المتحدة باستخدام CCD وتم التأكيد على أن اختيار المذيب والتركيز يجب أن يؤخذ في الاعتبار عند استخلاص المركبات النشطة بيولوجيًا من قشور الفول السوداني. من خلال تداخل أسطح الاستجابة ، تم تحديد منحنيات لثلاثة متغيرات تابعة ، ووقت استخراج قدره 31.2 دقيقة ، ودرجة حرارة الاستخراج 36.6 درجة مئوية ، وتركيز الإيثانول بنسبة 93.2 في المائة لتكون الظروف المثلى لدولة الإمارات العربية المتحدة. لقد تم التأكيد على أن نسبة RSA لمستخلصات قشر الفول السوداني مرتفعة جدًا ويمكن توقع زيادة في TAI و CAI ، وهي مؤشرات على الجلد-تبييضوالآثار المضادة للتجاعيد ، على التوالي. أدى تحسين ظروف دولة الإمارات العربية المتحدة إلى زيادة إنتاج المواد النشطة بيولوجيًا في قشور الفول السوداني ، وتبييضوالأنشطة المضادة للتجاعيد لمستخلص قشور الفول السوداني من خلال التنظيمات الخافضة لنشاط التيروزيناز والكولاجيناز. بناءً على ذلك ، تم تقييم تأثير قشور الفول السوداني على مستويات التعبير عن MMP و TRP لتقييم ما إذا كان لديهمتبييضوالتأثيرات المضادة للتجاعيد على مستوى التعبير الجيني.تبييضوالتأثيرات المضادة للتجاعيد لمستخلصات قشور الفول السوداني تم تأكيدها من خلال تقليل تنظيم تعبيرات الرنا المرسال وكذلك تثبيط تعبيرات البروتين لـ MMP -3 و TRP -1. لذلك ، فقد ثبت أن مستخلص قشر الفول السوداني فعال فيتبييضوتحسين التجاعيد في التعبير البروتيني ومستويات الجينات. يحتوي مستخلص قشر الفول السوداني ، باستخدام الإمارات العربية المتحدة ، على نشاط مضاد للأكسدة عالي وبشرة ممتازة.تبييضومضاد للتجاعيد ، مما يمنح قشرة الفول السوداني إمكانات كبيرة كمستحضرات تجميل طبيعية ومكون غذائي. علاوة على ذلك ، يُعتقد أن إنتاج المركبات النشطة بيولوجيًا باستخدام الإمارات العربية المتحدة يمكن تطبيقه على عملية التسويق لإنتاج مستحضرات التجميل والمواد الغذائية والمواد الصيدلانية ، نظرًا لارتفاع إنتاجية الإنتاج وانخفاض تكاليف المعالجة مقارنة بالعمليات التقليدية.

مساهمات المؤلفين: المساهمات الفردية للمؤلفين محددة على النحو التالي: الكتابة - إعداد المسودة الأصلية ، اكتساب التمويل ، الإشراف ، الكتابة ، التحرير ، JWK ؛ التحقق من الصحة ، التحليل ، المنهجية ، DHG ؛ التحقيق ، المنهجية ، معالجة البيانات ، التحرير ، JWH ؛ التحليل ، المنهجية ، المراجعة ، JHK ؛ قرأ جميع المؤلفين النسخة المنشورة من المخطوطة ووافقوا عليها.

التمويل: لم يتلق هذا البحث أي تمويل خارجي.

بيان مجلس المراجعة المؤسسية: لا ينطبق.

بيان الموافقة المستنيرة: لا ينطبق.

بيان توافر البيانات: لم يتم إنشاء أو تحليل بيانات جديدة في هذه الدراسة. مشاركة البيانات لا تنطبق على هذه المقالة.

تضارب المصالح: يعلن المؤلفون عدم وجود تضارب في المصالح.

توافر العينة: لا تتوفر عينات من المركبات من المؤلفين.