تأثير مفيد من Thymelaea Hirsuta على تنكس جزيرة البنكرياس والتليف الكلوي وتلف الكبد

سناء عابد ، حسن المخفيفي ، عبد الرحيم زيات ، عبد الخالق ليجسير ، محمد عزيز ، ومحمد بنوحام

مختبر المصادر الحيوية ، التكنولوجيا الحيوية ، علم الأدوية العرقي والصحة ، قسم الأحياء ، كلية العلوم ،

جامعة محمد الأول ، ب.د: محمد السادس ، ص.ب: 717 ، وجدة 60000 ، المغرب

اتصال:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساب: 008618081934791

هدف. في المغرب ، بالإضافة إلى ymelaea hirsute (T. hirsute) (Thymelaeacea) هو نبات طبي يستخدم على نطاق واسع لعلاج مرض السكري والوقاية منه. هدفت الدراسة الحالية إلى تقييم التأثير المضاد لمرض السكر على المدى المتوسط ​​للمستخلص المائي (AqTh) وجزء أسيتات الإيثيل (EaTh) من Th ، والتحقيق في تأثيرهما الوقائي المفترض على تنكس جزيرة البنكرياس ، واعتلال الكلية السكري ، وتلف الكبد في الستربتوزوتوسين (STZ). - الفئران المصابة بمرض السكر. طُرق. تم إحداث داء السكري التجريبي في الفئران بحقنة واحدة داخل الصفاق مقدارها 50 ملغم / كغم من STZ. خلال فترة العلاج (4 أسابيع) ، تم إعطاء 200 مغ / كغ أكث و 50 مغ / كغ EaTh فموياً يومياً للفئران المصابة بمرض السكري. تمت دراسة مجموعة من المتغيرات تشمل صيام الجلوكوز في الدم ، المتغيرات البيوكيميائية ، وتثبيط الجلوكوزيداز المعوي. علاوة على ذلك ، فإن الدراسة النسيجية للبنكرياس ،الكلىوالكبد والشريان الأورطي. نتائج. في نهاية العلاج ، قام كل من AKTh و EaTh بتعديل مستوى الجلوكوز في الدم الصائم إلى 1.08 و 1.25 جم / لتر على التوالي. أكث قد خفض أيضا الكرياتينين البولي و HbAc1. أظهر EaTh نشاطًا مثبطًا ضد الجلوكوزيد المعوي ، بينما لم يكن لـ AkTh هذا التأثير المثبط. علاوة على ذلك ، أظهر تلطيخ البنكرياس الهيماتوكسيلين والأيوزين أن أكث أو إيث يمنع تنكس خلايا جزيرة البنكرياس. على النحو نفسهالكلى، أظهر تلطيخ ماسون ثلاثي الألوان منعًا كبيرًا منكلويتليف في الفئران المصابة بداء السكري التي عولجت أكث أو إيث. من ناحية أخرى ، أظهر تلطيخ هيماتوكسيلين الكبد والأيوزين أن أكث و إيث يمنعان تلف الكبد. استنتاج. نستنتج أن الإدارة متوسطة المدى لـ AqTh و EaTh لها تأثير كبير مضاد لفرط سكر الدم في الجرذان المصابة بداء السكري من نوع STZ ربما من خلال تثبيط الجلوكوزيداز المعوي والحماية من تلف خلايا جزيرة البنكرياس. علاوة على ذلك ، فإن علاج أكث و إيث يمنع اعتلال الكلية ومضاعفات الكبد في الجرذان المصابة بداء السكري.

سيستانش هيربايمكن أن يعالجتليف كلوي

مقدمة

داء السكري هو أكثر أمراض الغدد الصماء شيوعًا. يتزايد معدل الإصابة بهذا المرض بمعدل ينذر بالخطر (4-5 في المائة) [1]. يمكن أن يتسبب مرض السكري من النوع 2 غير المعالج أو غير الخاضع للرقابة (DM2) في العديد من المضاعفات مثل أمراض القلب والأوعية الدموية واعتلال الكلية السكري ، وقد يؤدي إلى الإصابة بداء السكري من النوع 1 المعتمد على الأنسولين (DM1).

يعد اعتلال الكلية السكري من المضاعفات المهمة لمرض السكري ، وهو السبب الرئيسي لزيادة عدد المرضى الذين وصلوا إلى المرحلة النهائية.كلويالمرض (الداء الكلوي بمراحله الأخيرة) [2] ، والتي تتطلبالكلىغسيل الكلى أو أالكلىزرع للمريض ليعيش.

لذلك ، أصبحت إدارة مرض السكري مهمة للغاية لتجنب نتائج التمثيل الغذائي الخطيرة مثل اعتلال الكلية.

في الوقت الحاضر ، يشمل علاج مرض السكري التحكم في النظام الغذائي وممارسة الرياضة واستخدام الأنسولين و / أو الأدوية الخافضة لسكر الدم ، وكذلك استخدام النباتات الطبية كدواء بديل تكميلي. أظهرت العديد من النباتات الطبية تأثيرًا حاسمًا مضادًا لفرط سكر الدم مع الحد الأدنى من الآثار الجانبية [3-5] ، ولهذا السبب ، وجهت منظمة الصحة العالمية (WHO) اهتمامًا كبيرًا للاستخدام الرشيد للأدوية التقليدية والطبيعية لعلاج مرض السكري [6].

في المغرب ، يتم استخدام أكثر من 100 نبات طبي لعلاج السكري والوقاية منه [7-10]. تم تأكيد النشاط الخافض لنسبة السكر في الدم ومضاد السكر للعديد من مستخلصات ومنتجات هذه النباتات (Ammi visnaga Lam. و Globularia alum و Nigella sativa و Olea europaea var.) [9].

T. hirsuta هو نبات طبي يستخدم تقليديًا للوقاية من مرض السكري ومعالجته ، في شمال شرق المغرب [8]. أظهرت الدراسات الدوائية السابقة التأثير الحاد الخافض لفرط سكر الدم لكل من أكث و إيث [11-13]. ومع ذلك ، لم يتم بعد تحديد التأثير المضاد لمرض السكر على المدى المتوسط ​​لهذين المستخلصين من T. hirsuta. لذلك ، فإن الهدف من هذه الدراسة هو التقييم لأول مرة النشاط المضاد لمرض السكر على المدى المتوسط ​​لـ AqTh و EaTh والتحقيق في تأثيرهما الوقائي المفترض على تنكس جزيرة البنكرياس ، واعتلال الكلية السكري ، والتنكس الدهني للكبد ، ومضاعفات الشريان الأورطي في STZ- الجرذان المصابة بداء السكري.

2. المواد والأساليب

2.1 المواد الكيميائية والكواشف.

تم شراء Glucose Autokit من BioSystems (إسبانيا). تم شراء STZ من Sigma Aldrich (الصين). تم الحصول على Acarbose (Glucor 50) من Bayer Schering Pharma (الدار البيضاء ، المغرب). تم شراء السكروز من Prolabo (مجموعة Rhone-Poulenc) (EEC). تم الحصول على Pentobarbital من CEVA Sante Animale (LaBallasti`ere). تم شراء Anthrone (C14H10O) من جميع المنتجات العضوية. تم شراء شمع البارافيفين من FlukaChemika (سويسرا). تم الحصول على Eosin (C20H6Br4Na2O5) من Riedel-de Haen (Seelze) ، وتم الحصول على الهيماتوكسيلين من BDH Chemicals Ltd. (Poole England). تم شراء حمض Fuchsin من Acros Organics (NewJersey ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، وتم شراء حمض الفوسفوموليبديك من Sigma-Aldrich (PF ، Steinheim) ، وتم شراء اللون الأخضر الفاتح من Sigma-Aldrich (MO ، الولايات المتحدة الأمريكية).

2.2. الحيوانات.

تم الحصول على فئران ويستار من كلا الجنسين ، التي يتراوح وزنها في البداية من 150 إلى 250 جرامًا ({2}} أسبوعًا) ، من بيت الحيوانات التابع لقسم الأحياء بكلية العلوم (وجدة ، المغرب). أجريت الدراسة على أساس "مبادئ رعاية الحيوان في المختبر" [14]. تم الحفاظ عليها في ظروف معملية قياسية (دورة فاتحة / مظلمة تبلغ 12/12 ساعة ودرجة حرارة 23 زائد 2 درجة مع 3 فئران لكل قفص مع إمكانية الوصول إلى الغذاء والماء. لجمع البول وتحديد كمية الماء والغذاء ، تم الحفاظ على الفئران في أقفاص التمثيل الغذائي.

2.3 تحريض مرض السكري.

بعد 14 ساعة من الصيام ، تم حقن الفئران داخل الصفاق بجرعة واحدة من STZ (5 0 مجم / كجم من وزن الجسم) ، محضرة في محلول سيترات الصوديوم الطازج والبارد (0. 1 مولار حامض الستريك و 0.1 مولار من سترات الصوديوم ثنائي هيدرات) عند PH4.5 للحث على مرض السكري [15]. بعد أسبوع واحد ، اعتبرت الفئران التي يبلغ معدل جلوكوز الدم فيها 1.26-2 جم / لتر مصابة بداء السكري من النوع 2 وتم تضمينها في الدراسة.

2.4 تحضير عينة النبات.

تم شراء T. hirsuta من سوق تقليدي في وجدة (المغرب الشرقي) وتم توثيقه من قبل عالم نبات في قسم الأحياء (كلية العلوم ، وجدة ، المغرب) ، وتم إيداع عينة قسيمة (HUMPOM137) في قسم النبات في جامعة المعشبة محمد رئيس وزراء وجدة ، المغرب (HUMPO).

تم أولاً تنظيف الأجزاء الهوائية من T. hirsuta وغسلها بالماء ثم تجفيفها عند 40 درجة طوال الليل في الفرن. لتحضير أكث ، تم نقع 140 جم من الأجزاء الهوائية من T. hirsuta في 2 لتر من الماء المقطر لمدة 3 ساعات. وبلغ العائد على أكث 4.53 في المئة. تم تحضير EaTh كما هو موضح في دراستنا السابقة [13].

2.5 تصميم تجريبي.

تم تقسيم الجرذان بشكل عشوائي إلى خمس مجموعات (5 أو 6 فئران لكل مجموعة): فئران تحكم عادية (تُعطى فقط بالماء المقطر) ، فئران تحكم بمرض السكري (تُعطى فقط بالماء المقطر) ، فئران مصابة بداء السكري عولجت بـ 1 0 ملغ / كغم من وزن الجسم من أكاربوز (عقار قياسي لخفض السكر في الدم) ، فئران مصابة بداء السكري عولجت بـ 50 ملغم / كغم من EaTh ، والجرذان المصابة بداء السكري التي عولجت بـ 200 ملغم / كغم من وزن الجسم من أكث. تم تحديد الجرعات المثلى بناءً على دراساتنا السابقة [13] ومن الاختبارات الأولية. تم علاج جميع الفئران مرة واحدة يوميا لمدة 4 أسابيع. تم تسجيل وزن الجسم كل يوم. تمت مراقبة كمية الماء والغذاء وحجم البول قبل وبعد العلاج ، وتم قياس نسبة السكر في الدم في نهاية العلاج. تم فحص جلوكوز الدم الصائم قبل العلاج (الأسبوع 0) وبعد 1 و 2 و 3 و 4 أسابيع من العلاج. تمت دراسة تثبيط الجلوكوزيداز ، في الجسم الحي ، في اليوم السابق للتضحية بالفئران. بعد 4 أسابيع من العلاج ، تم تخدير جميع الحيوانات بمقدار 50 ملجم / كجم من بنتوباربيتال ، بعد 14 ساعة من الصيام. بعد ذلك ، تم جمع الدم ، عن طريق ثقب في القلب ، وطرده على الفور عند 3000 جولة / دقيقة لمدة 10 دقائق. * تم تخزين المصل عند 20 درجة حتى التحليل الكيميائي الحيوي (الكوليسترول الكلي والدهون الثلاثية). الالكلىوالكبد والشريان الأورطي والقلب والبنكرياس تمت إزالتها وتوزينها (الكلىالكبد ، والقلب) ، ثم تثبيتها (الكلى ، الكبد ، الشريان الأورطي ، البنكرياس) في 10٪ فورمالين للدراسة النسيجية. تم تخزين عينة الكبد عند 20 درجة لفحص محتوى الجليكوجين.

cistacheإلى عن علىوظيفة الكلى

2.6. تقدير نسبة الجلوكوز في الدم أثناء الصيام.

خلال فترة العلاج ، تم قياس نسبة السكر في الدم أثناء الصيام أسبوعيًا. بعد 14 ساعة من الصيام ، تمت إزالة الدم من عروق الذيل ، تحت التخدير الخفيف بالإيثر ، باستخدام الشعيرات الدموية الدقيقة. بعد ذلك ، تم الطرد المركزي عند 5000 × جم لمدة 10 دقائق ، وتم تقدير نسبة السكر في الدم في المصل باستخدام مجموعة الجلوكوز التجارية (BioSystems ، إسبانيا) بناءً على طريقة الجلوكوز أوكسيديز بيروكسيداز [16].

2.7. - تثبيط الجلوكوزيداز ، دراسة في الجسم الحي.

في اليوم السابق للتضحية ، تم استخدام الفئران المحرومة من الطعام لمدة 14 ساعة لمراقبة تثبيط الجلوكوزيداز في الجسم الحي. 3 0 دقيقة قبل حمل السكروز الفموي (2 جم / كجم) ، تم إعطاء كل مجموعة بالجرعة المقابلة للعلاج. تم جمع الدم ، من الذيل ، من الوريد باستخدام microcapillaries ، قبل إعطاء جرعة الاختبار مباشرة (30 دقيقة) ، مباشرة قبل تحميل السكروز (0 دقيقة) ، وبعد 30 و 60 و 120 دقيقة بعد تحميل السكروز. بعد الطرد المركزي عند 5000 × جم / 10 دقيقة ، تم تحديد مستوى الجلوكوز في البلازما بطريقة الجلوكوز أوكسيديز بيروكسيديز [17].

2.8. استخراج وتحديد الجليكوجين الكبدي.

تم استخدام عينات موزونة من أنسجة الكبد ({0}. 3–0.5 جم) من جميع المجموعات لاستخراج الجليكوجين وفقًا لأونج وخو [18]. تم سحق عينات الكبد أولاً ، وتم تجانسها مع 2 مل من 30 بالمائة من هيدروكسيد البوتاسيوم (KOH) ، وغليها عند 100 درجة / 30 دقيقة. بعد ذلك ، لترسيب الجليكوجين ، تمت معالجة الخليط مرتين باستخدام 4 مل 95 بالمائة من الإيثانول ، وفي كل مرة ، تم تخزين الخليط عند 4 درجات / 30 دقيقة. بعد الطرد المركزي عند 3000 جولة / دقيقة / 15 دقيقة ، تم غسل الحبيبات بـ 8 مل من الإيثانول بنسبة 95 بالمائة ثم طردها بالطرد المركزي عند 3000 جولة / دقيقة / 15 دقيقة. تمت إذابة الجليكوجين الناتج في 1 مل من الماء المقطر. تمت مراقبة تركيز الجليكوجين باستخدام كاشف الأنثرون. تمت قراءة الكثافة البصرية عند 625 نانومتر.

2.9 فحوصات الكيمياء الحيوية

تم قياس بيلة سكرية من خلال Autokit تجارية (BioSystems ، إسبانيا) بناءً على طريقة الجلوكوز أوكسيديز بيروكسيديز. تم تقدير الهيموغلوبين الغليكوزيلاتي (HbA1c) باستخدام مجموعة تجارية (تشخيصات Cal-tech ، INC ، الولايات المتحدة الأمريكية) ، وتم تحديد الكوليسترول باستخدام مجموعات الفحص التجارية (SGM- Italia ، Roma ، Italy). تم تقدير الدهون الثلاثية والكرياتينين البولي باستخدام مجموعات المقايسة التجارية (Bio Sud Diagnostic SRL ، Ricerca ، إيطاليا).

2.10. علم التشريح المرضي.

بعد فترة 3 إلى 1 يوم من التثبيت في 10 بالمائة فورمالين ، البنكرياس ،الكلىتم غسل أنسجة الكبد والشريان الأورطي بالماء المقطر لمدة 20 دقيقة. بعد ذلك ، تم تجفيفهم بزيادة عنوان الإيثانول (30 بالمائة لمدة 30 دقيقة ، 70 بالمائة لمدة 30 دقيقة ، 95 بالمائة لمدة 30 دقيقة ، و 2 × 100 بالمائة لمدة 60 دقيقة ، على التوالي). بعد خطوة التنوير في التولوين (2 × 120 دقيقة) ، تم تضمين الأعضاء بواسطة خليط البارافينولوين (1 فولت / 1 فولت) لمدة 90 دقيقة ، ثم بالبارافين (2 × 120 دقيقة). أخيرًا ، تم دمج الأعضاء في البارافين قبل التقسيم عند 7 ميكرومتر (مشراح Leitz 1512). تم صبغ أقسام البنكرياس والكبد بالهيموكسيلين والأيوزين.الكلىوأقسام الشريان الأورطي كانت ملطخة بثلاث ألوان ماسون لإظهار الفيفيبروز / الكولاجين.

قبل تلطيخ الهيماتوكسيلين ويوزين ، تم إزالة الكافيين من المقاطع واحتضانها في التولوين (2 × 5 دقائق) ، ثم ترطيبها عن طريق تقليل عنوان الإيثانول (100 في المائة ، 95 في المائة ، و 70 في المائة على التوالي) لمدة 5 دقائق. بعد ذلك ، بالنسبة لتلطيخ الهيماتوكسيلين والأيوزين ، بعد 20 دقيقة من الغسيل ، تم تلوين نواة الخلية بغمرها في الهيماتوكسيلين لمدة 5 دقائق ، تليها 15 دقيقة من الغسيل بالماء. لتلوين السيتوبلازم ، تم غمر المقاطع في 1 في المائة من يوزين لمدة 5 دقائق ، ثم غسلها لمدة دقيقتين. بعد التلوين ، تم تجفيف المقاطع بنسبة 100 بالمائة من الإيثانول (2 × 1/2 دقيقة) والتولوين (2 × 2 دقيقة). تلطيخ ماسون ثلاثي الألوان ، بعد الترطيب ،الكلى، وتم إصلاح مقاطع الشريان الأورطي في محلول بوين لمدة ساعة واحدة / 56 درجة. بعد ذلك ، بعد 10 دقائق من الغسيل ، تم تلطيخ المقاطع بهيماتوكسيلين الحديد لـ Weigert لمدة دقيقتين. بعد 10 دقائق من الشطف ، تم غمر المقاطع في حمض الفوكسين لمدة 3 دقائق ، وبعد 10 دقائق من الغسيل ، تم تمييز حمض الفوسفوموليبديك لمدة 15 دقيقة. لتلطيخ الكولاجين ، تم نقل الأقسام مباشرة إلى اللون الأخضر الفاتح لمدة 15 دقيقة. بعد 2 دقيقة من التمايز في 1 في المائة من حمض الأسيتيك ، تم تجفيف المقاطع من خلال 95 في المائة و 100 في المائة من الإيثانول لمدة دقيقة واحدة لكل منهما ثم تم تنقيتها في التولوين (2 × 1 دقيقة) [19-21].

أخيرًا ، تم تركيب المقاطع الملطخة على الرقائق. بعد التجفيف ، تم إجراء الملاحظة المجهرية باستخدام المجهر الضوئي 40x من أوليمبوس طوكيو (اليابان).

لتحديد تأثير الدواء على أنسجة البنكرياس ، تم حساب عدد خلايا جزيرة البنكرياس وقطرها. لتحديد كمية الكولاجين فيالكلىأقسام ، تم تسجيل النتائج من صفر إلى ثلاثة (0: بدون كولاجين ، 1: كولاجين ضعيف ، 2: كولاجين معتدل ، و 3: كولاجين قوي) [22]. تم تقييم تأثير العلاج على الشريان الأورطي عن طريق قياس قطر الشريان الأورطي ، وتم توضيح تلف الكبد من خلال تطوير قطرات الدهون.

2.11. تحليل احصائي.

تم التعبير عن جميع القيم على أنها تعني ± SEM. تم إجراء التحليل الإحصائي ومقارنة الوسائل باستخدام اختبار الطالب غير المقارن لمقارنة متوسطات مجموعتين واختبار الطالب المقترن لمقارنة وسيلتين داخل نفس المجموعة. لتحديد تأثير الدواء الوقائي علىالكلىوالكبد ، تم استخدام اختبار خي مربع. قيم p<0.05 were="" considered="">

3. النتائج

3.1. تأثير العلاج الدوائي على صيام جلوكوز الدم في STZ-

استحثاث الجرذان المصابة بمرض السكر. لوحظ ارتفاع ملحوظ في نسبة الجلوكوز في الدم في الفئران غير المعالجة مقارنة بالفئران العادية. أدى العلاج بـ 2 0 0 mg / kg AqTh إلى انخفاض مستوى الجلوكوز في الدم من الأسبوع الأول من الإعطاء ، وكان هذا التأثير كبيرًا في اليوم الثالث (p <0. 001)="" والرابع="" أسبوع="" (p=""><0.05) مقارنة="" بالفئران="" المصابة="" بداء="" السكري="" غير="" المعالجة.="" أدى="" العلاج="" بـ="" 50="" مجم="" كجم="" eath="" إلى="" تقليل="" ارتفاع="" السكر="" في="" الدم="" من="" الأسبوع="" الثاني="" ،="" وكان="" هذا="" التأثير="" معنويًا="" (p=""><0.05) في="" الأسبوعين="" الثالث="" والرابع.="" في="" الأسبوع="" الثاني="" والثالث="" والرابع="" ،="" كان="" تأثير="" ea="" *="" مشابهًا="" إحصائيًا="" لتأثير="" 10="" مجم="" كجم="" أكاربوز="" (الشكل="">

3.2 تأثير الأدوية على نشاط الجلوكوزيداز ، دراسة في الجسم الحي.

في فئران التحكم العادية ، ارتفع مستوى السكر في الدم إلى 1.48 جم / لتر 3 0 دقيقة بعد تحميل السكروز ثم عاد إلى قيمته الطبيعية عند 12 0 دقيقة ، بينما في الفئران المصابة بداء السكري غير المعالجة ، كان سكر الدم زاد إلى 2.76 جم / لتر عند 30 دقيقة من تحميل السكروز لتحقيق 2.85 جم / لتر عند 120 دقيقة. 50 مغ / كغ EaTh منع بشكل ملحوظ (p <0.05) ارتفاع="" السكر="" في="" الدم="" الناجم="" عن="" تحميل="" السكروز="" في="" 30="" و="" 60="" دقيقة="" مقارنة="" مع="" الفئران="" المصابة="" بداء="" السكري.="" في="" المجموعة="" 200="" ملغم="" كغم="" من="" أكث="" ،="" ظهر="" تأثير="" مضاد="" لفرط="" سكر="" الدم.="" وصلت="" مستويات="" السكر="" في="" الدم="" إلى="" 2.63="" جم="" لتر="" و="" 2.70="" جم="" لتر="" عند="" 30="" و="" 60="" دقيقة="" على="" التوالي="" ،="" وانخفضت="" إلى="" 2.21="" جم="" لتر="" عند="" 120="" دقيقة.="" 10="" مغ="" كغ="" أكاربوز="" منع="" بشكل="" ملحوظ="" (p=""><0.01) من="" ارتفاع="" السكر="" في="" الدم="" الناجم="" عن="" تحميل="" السكروز="" عند="" 30="" و="" 60="" و="" 120="" دقيقة="" مقارنة="" بمكافحة="" السكري.="" كان="" تأثير="" الأكاربوز="" مشابهًا="" إحصائيًا="" لـ="" eaththeffffect="" (الشكل="">

3.3 تأثير المخدرات

العلاج على وزن الجسم والغذاء والماء. كان زيادة وزن الجسم عن طريق الفئران المصابة بداء السكري غير المعالجة انخفاضًا ملحوظًا (p <{0}}. 0="" 5)="" مقارنة="" بالفئران="" العادية.="" يمنع="" aqth="" بشكل="" كبير="" (p=""><0. 0="" 5)="" انخفاض="" وزن="" الجسم="" مقارنة="" بالفئران="" المصابة="" بداء="" السكري.="" لم="" تغير="" الجرذان="" المعالجة="" بـ="" eath="" و="" acarbose="" بشكل="" كبير="" (p=""> 0. 0 5) زيادة وزن الجسم مقارنة بالفئران غير المعالجة المصابة بداء السكري. في نهاية العلاج ، لم يتغير تناول الماء في الفئران المصابة بداء السكري ، ومجموعة أكث ، وإيت ، وأكاربوز مقارنة بالبيانات قبل العلاج ، بينما زاد تناول الطعام بشكل كبير في الجرذان المصابة بداء السكري والفئران المعالجة بأكث ، وإيث ، وأكاربوز. (p <0.05 ،="" p=""><0.05 ،="" p=""><0.05 ،="" dp=""><0.01 ،="" على="" التوالي)="" مقارنة="" قبل="" تناول="" الدواء="" (الجدول="">

3.4. تأثير العلاج من تعاطي المخدرات على البارامترات البولية.

بعد فترة العلاج التي تبلغ {0} أسبوعًا ، تمت زيادة الكرياتينين البولي وبيلة ​​سكرية بشكل ملحوظ (p <0. 0="" 5="" andp=""><0.001 ،="" على="" التوالي)="" في="" الفئران="" المصابة="" بداء="" السكري="" غير="" المعالجة="" بالمقارنة="" مع="" الفئران="" العادية.="" انخفض="" تناول="" عقار="" أكث="" عن="" طريق="" الفم="" بشكل="" ملحوظ="" (p=""><0.05) الكرياتينين="" البولي="" مقارنة="" بالفئران="" المصابة="" بداء="" السكري="" غير="" المعالجة="" ،="" ولكن="" لم="" يلاحظ="" أي="" فرق="" معنوي="" في="" بيلة="" سكرية="" عند="" مقارنتها="" بالفئران="" المصابة="" بداء="" السكري="" غير="" المعالجة.="" منع="" العلاج="" eath="" زيادة="" الكرياتينين="" البولي="" مقارنة="" بالفئران="" العادية="" ؛="" ومع="" ذلك="" ،="" لم="" يتغير="" eath="" بشكل="" ملحوظ="" بيلة="" سكرية.="" من="" ناحية="" أخرى="" ،="" كان="" تأثير="" aqth="" و="" eath="" على="" الكرياتينين="" البولي="" وبيلة="" ​​سكرية="" مشابهًا="" إحصائيًا="" لتأثير="" 10="" ملجم="" كجم="" أكاربوز.="" أخيرًا="" ،="" لم="" يكن="" هناك="" فرق="" كبير="" في="" حجم="" البول="" عند="" مقارنة="" البيانات="" قبل="" وبعد="" العلاج="" بـ="" aqth="" أو="" eath="" أو="" أكاربوز="" (الجدول="">

3.5 تأثير العلاج الدوائي على المعلمات البيوكيميائية.

بعد فترة العلاج التي استمرت {0} أسبوعًا ، زاد HbA1c بشكل ملحوظ (p <0. 05)="" ،="" في="" الجرذان="" غير="" المعالجة="" بمرض="" السكري="" ،="" مقارنة="" بالفئران="" العادية.="" منع="" تناول="" عقار="" أكث="" عن="" طريق="" الفم="" من="" ارتفاع="" نسبة="" الهيموجلوبين="" السكري="" مقارنة="" بالفئران="" العادية.="" في="" نهاية="" فترة="" العلاج="" ،="" انخفضت="" كمية="" الجليكوجين="" في="" الكبد="" بشكل="" ملحوظ="" (p=""><0.05) في="" الفئران="" المصابة="" بداء="" السكري="" غير="" المعالجة="" مقارنة="" بالفئران="" العادية.="" لم="" تظهر="" علاجات="" aq="" *="" و="" ea="" *="" أي="" تأثير="" معنوي="" على="" الجليكوجين="" في="" الكبد="" مقارنة="" بالفئران="" المصابة="" بداء="" السكري="" غير="" المعالجة="" بينما="" لم="" يغير="" علاج="" الأكاربوز="" كمية="" الجليكوجين="" في="" الكبد="" مقارنة="" بالفئران="" العادية.="" أخيرًا="" ،="" تُظهر="" نتائج="" الكوليسترول="" الكلي="" والدهون="" الثلاثية="" أنه="" لا="" يوجد="" تغيير="" كبير="" بعد="" علاج="" أكث="" ،="" أو="" إيث="" ،="" أو="" أكاربوز="" مقارنة="" بالفئران="" العادية="" المصابة="" بداء="" السكري="" (الجدول="">

3.6 تأثير العلاج من تعاطي المخدرات على وزن الأعضاء.

يوضح الجدول 4 الكبد ،الكلىووزن القلب في نهاية فترة العلاج. النتائج تشير إلى ذلكالكلىزاد الوزن بشكل ملحوظ في الفئران المصابة بداء السكري غير المعالجة مقارنة بالفئران العادية. لم يغير العلاج بـ 200 ملغم / كغم من أكثروبوس أو 50 ملغم / كغم من وزن الكبد والكلى والقلب بالمقارنة مع الفئران المصابة بداء السكري غير المعالجة بينما هناك ارتفاع كبير في وزن الكبد والقلب للفئران المعالجة بالأكاربوز مقارنة بالفئران المصابة بداء السكري غير المعالجة. .

3.7 مراقبة الأنسجة

3.7.1. تغييرات البنكرياس.

تظهر الملاحظة المجهرية الخفيفة لخلايا جزيرة البنكرياس من الفئران العادية مظهرًا نسجيًا طبيعيًا بقطر كبير وكثافة تحبيب عالية (الشكل 3). في الفئران المصابة بداء السكري غير المعالجة ، يحدث انخفاض ملحوظ في القطر وعدد خلايا الجزيرة (p <0. 0="" 0="" 1="" و="" p=""><0. 0="" 1="" ،="" على="" التوالي="" )="" لوحظ.="" تعامل="" مع="" 2="" 0="" 0="" ملجم="" كجم="" من="" أكث="" بشكل="" ملحوظ="" دون="" تقليل="" قطر="" وعدد="" خلايا="" جزيرة="" لانجرهانز="" (p=""><0.01 و="" p=""><0.05 ،="" على="" التوالي).="" في="" الوقت="" نفسه="" ،="" فإن="" 50="" مجم="" كجم="" من="" eath="" لها="" قطر="" محمي="" بشكل="" كبير="" (p=""><0.05) ورقم="" الخلية="" ضد="" الاختزال.="" منع="" العلاج="" بـ="" 10="" مجم="" كجم="" من="" الأكاربوز="" بشكل="" كبير="" (p=""><0.05) من="" تقليل="" عدد="" خلايا="">

3.7.2. تغييرات الكلى.

علامات تلطيخ ماسون في ألياف الكولاجين الزرقاء / الخضراء ، في النوى البنية ، في سيتوبلازم ألياف العضلات الحمراء ، وفي خلايا الدم البرتقالية. لوحظ الحد الأدنى من الكولاجين الأنبوبي الخلالي في المجموعة العادية (الشكل 4). تم الكشف عن زيادة ملحوظة (p <0. 0="" 1)="" في="" الكولاجين="" tubulointerstitial="" في="" الفئران="" المصابة="" بداء="" السكري="" غير="" المعالجة.="" العلاج="" بـ="" 2="" 0="" {{1="" 0}}="" ملجم="" كجم="" منع="" أكث="" و="" 50="" مجم="" كجم="" eath="" بشكل="" كبير="" (p=""><0.001 و="" p=""><0.05 ،="" على="" التوالي)="" من="" الكولاجين="" الأنبوبي="" الخلالي="" مقارنة="" بالفئران="" المصابة="" بداء="" السكري="" غير="" المعالجة="" ،="" ولكن="" 10="" مجم="" كجم="" من="" علاج="" أكاربوز="" لم="" يتغير="" بشكل="" كبير="" (p=""> 0.05) هذا الكولاجين الأنبوبي الخلالي. من ناحية أخرى ، لوحظ وجود كولاجين الكبيبات في 33.3 في المائة من الفئران العادية. في الفئران المصابة بداء السكري ، تم اكتشاف كولاجين الكبيبات في جميع الفئران (100 في المائة). أدى العلاج بـ 200 مجم / كجم من AqTh إلى انخفاض كبير (P <0.05) من="" الكولاجين="" الكبيبي="" إلى="" 40="" في="" المائة="" ،="" لكن="" ea="" *="" و="" acarbose="" لم="" يحدثا="" (الشكل="">

3.7.3. تغييرات الكبد.

أظهر فحص المقاطع الملطخة بالهيموكسيلين والأيوزين أن الفئران الطبيعية كان لها مظهر نسجي طبيعي. في الفئران المصابة بداء السكري غير المعالجة ، لوحظ تغير تنكسي مهم في أنسجة الكبد. ظهرت قطرات الدهون في جميع الفئران (1 0 0 بالمائة). العلاج بـ 200 ملجم / كجم أكث و 50 ملجم / كجم EaTh أدى بشكل جيد (p <0.05) إلى="" تخفيف="" هذا="" التأثير.="" كانت="" نسبة="" الحماية="" 60="" و="" 50="" في="" المائة="" على="" التوالي.="" ومع="" ذلك="" ،="" لم="" يخفف="" علاج="" الأكاربوز="" 10="" ملغم="" كغم="" من="" تلف="" الكبد="" هذا="" (الشكل="">

3.7.4. تغييرات الشريان الأورطي.

تظهر الملاحظة المجهرية الضوئية أن الفئران المصابة بداء السكري غير المعالجة كان لها قطر الشريان الأورطي الطبيعي مقارنة بالفئران العادية. لم يغير العلاج بـ 200 ملغم / كغم أكث ، 50 ملغم / كغم EaTh ، أو 10 ملغم / كغم من الأكاربوز بشكل كبير قطر الشريان الأورطي مقارنة بالفئران العادية المصابة بداء السكري (الشكل 6).

4. مناقشة

في هذه الدراسة ، أظهرنا لأول مرة التأثير المضاد لمرض السكر لإعطاء T. hirsuta على المدى المتوسط ​​(4 أسابيع) والوقاية منه.كلويومضاعفات الكبد في الجرذان المصابة بداء السكري.

أشارت نتائجنا إلى أن العلاج على المدى المتوسط ​​بـ 200 مجم / كجم أكث أو 50 مجم / كجم من EaTh يقلل بشكل ملحوظ من نسبة الجلوكوز في الدم الصائم في الجرذان المصابة بداء السكري التي عولجت بـ STZ مقارنة بالفئران المصابة بداء السكري غير المعالجة بـ STZ. أظهر EaTh نشاطًا مثبطًا للجلوكوزيداز عند مقارنته بـ 10 مجم / كجم من الأكاربوز ، لكن AkTh لم يثبط نشاط الجلوكوزيداز بعد تحميل السكروز. تشير هذه النتائج إلى أن التأثير الخافض لسكر الدم على المدى المتوسط ​​لـ Ea * مرتبط بتثبيط الجلوكوزيداز المعوي. لذلك ، تؤكد هذه النتيجة نتائجنا السابقة [13] بينما يبدو أن التأثير المضاد لمرض السكر لـ Aq * مرتبط بآلية أخرى غير مسار الجلوكوزيداز. بالإضافة إلى ذلك ، لاحظنا انخفاضًا في مستويات HbAc1 في الفئران المصابة بداء السكري المعالجة بـ Aq * بينما لم يغير علاج Ea * مستويات HbAc1 عند مقارنته بالفئران المصابة بداء السكري. وهذا ما يفسر سبب وصف مثبطات الجلوكوزيداز مع الأدوية الأخرى المضادة لمرض السكر في علاج مرض السكري.

أظهرت الدراسة النسيجية المرضية لأقسام البنكرياس أن إعطاء أكث و إيث لمدة 4 أسابيع يزيد بشكل ملحوظ من القطر وعدد الخلايا في جزر لانجرهانز. أثبتت دراسات مماثلة أن العديد من المستخلصات النباتية أعادت بشكل كبير قطر الجزر وعدد الخلايا في الفئران المصابة بداء السكري [23-25].

وبالتالي ، فإن الآلية المعقولة لعمل AQTh في التحكم في مستوى الجلوكوز في الدم قد تكون تعزيز إفراز الأنسولين من خلايا البنكرياس. كما هو الحال مع الآليات المحتملة الأخرى ، قد يقوم عقار أكث بتحسس مستقبل الأنسولين للأنسولين أو يحفز الخلايا الجذعية لجزر لانجرهانز في بنكرياس الجرذان المصابة بداء السكري التي يسببها STZ [25].

لذلك ، نستنتج أن المركبات الكيميائية المضادة لفرط سكر الدم الموجودة في أكث تختلف عن تلك الموجودة في EaTh.

أثبتت العديد من الدراسات أن المستقلبات الثانوية مثل الفلافونويد والعفص والتربينويدات لها تأثيرات مثبطة محتملة على ألفا جلوكوزيداز [26-28]. في دراسة سابقة قام بها فريقنا ، أظهر جزء غني بالبوليفينول من T. hirsuta تأثيرًا قويًا مضادًا لمرض السكري في الفئران المصابة بداء السكري [29]. وبالتالي ، فإن التأثير المثبط للجلوكوزيداز لـ EaTh يرجع على الأرجح إلى وجود مركبات الفلافونويد.

من المعروف أن مرض السكري مرتبط بمضاعفات الأوعية الدموية الكبيرة والأوعية الدموية الدقيقة مثل اعتلال الكلية. أظهرت الإحصائيات أنه من بين جميع مرضى غسيل الكلى ، يمثل مرضى السكر 20.6 في المائة في عام 2001 مقابل 13.1 في المائة في عام 1995 و 6.9 في المائة في عام 1989. ومعدل وفيات المرضى الذين يخضعون لغسيل الكلى أعلى بشكل ملحوظ في مرضى السكري عنه في غير السكري (241.4 / 1000 مقابل 153.99 / 1000) شخص سنة) [30]. يبلغ متوسط ​​البقاء على قيد الحياة لمرض السكري من النوع 2 عند دخول غسيل الكلى حوالي 3 سنوات [31 ، 32]. يتميز اعتلال الكلية السكري بتراكم بعض البروتينات مثل الكولاجين في الميزانغيوم الكبيبي وفي الحيز الخلالي الأنبوبي الذي يؤدي إلىكلويتليف وما إلى ذلككلويفشل [33-35]. في هذه الدراسة ، أظهرنا أن تناول 200 ملجم / كجم أكث أو 50 ملجم / كجم EaTh عن طريق الفم على المدى المتوسط ​​يمنع زيادة الكرياتينين في البول والكولاجين الكلوي الأنبوبي الخلالي مقارنة بالفئران المصابة بداء السكري غير المعالجة كما هو موضح فيالكلىنتائج الأنسجة. توضح هذه النتائج أن أكث و إيا يمكن أن يحميا من التليف الكلوي من خلال تثبيط تراكم بروتين المصفوفة خارج الخلية (ECM). هذه النتائج مماثلة للدراسات الإثنوغرافية الأخرى التي أظهرت أن الثوم و Sclerocaryabirrea يخففان من عملية التليف الكلوي في اعتلال الكلية السكري [36 ، 37]. يرجع التأثير الوقائي ضد تراكم بروتين ECM الكلوي إلى تثبيط هدف بروتين كيناز B / الثدييات لمسار إشارات الرابامايسين (PKB / mTOR) [38]. أظهرت الدراسات البحثية الحديثة أن تنشيط PKB يتسبب في تنشيط mTORC1 وبروتينه النهائي p70S6K ، وهما منظمان مهمان لنمو الخلايا وتكاثر الخلايا وتخليق البروتين [39 ، 40].

تأثيرcistancheتحسنوظائف الكلى

وبالتالي ، يمكن أن يكون لإدارة داء السكري مع مركبات AqTh و EaTh تأثيرات مفيدة علىكلويتعمل في مرضى السكري

تشير الدلائل إلى أنه في الفئران المصابة بداء السكري ، لوحظ تغير معقد في أنشطة إنزيمات مضادات الأكسدة [41]. يؤدي هذا التغيير إلى تلف الأنسجة ويلعب دورًا مهمًا في التسبب في مضاعفات مرض السكري. في هذه الدراسة ، أظهرت النتائج المرضية لأنسجة الكبد أن الفئران المصابة بداء السكري غير المعالجة تتطور إلى تنكس دهني في الكبد يتميز بقطرات دهنية. وجدت دراسات أخرى أن الكبد كان مصابًا بالنخر في الفئران المصابة بداء السكري التي يسببها STZ [42]. يعتبر STZ نموذجًا كلاسيكيًا لتحريض مرض السكري لأنه يثير السمية لخلايا البنكرياس والموت الخلوي [43] ، مما يؤدي إلى نقص أنسولين الدم وارتفاع السكر في الدم. يلعب الأنسولين دورًا هامًا في عملية التمثيل الغذائي حيث يعمل على تثبيط تحلل الدهون في الأنسجة الدهنية [44]. وبالتالي ، يؤدي نقص أنسولين الدم في مرض السكري إلى زيادة إفراز الأحماض الدهنية الحرة (FFAs) في مجرى الدم [45] وتدفق الأحماض إلى الكبد. يحدث تراكم الدهون الثلاثية داخل الكبد عندما يتجاوز تدفق الدهون إلى الكبد القدرة الكبدية على تصدير الدهون الثلاثية إلى مجرى الدم [45] مما يؤدي إلى تطور التنكس الدهني الكبدي باعتباره أحد مضاعفات السكري [46].

في هذه الدراسة ، تُظهر البيانات النسيجية المرضية أن تناول 200 مجم / كجم أكث أو 50 مجم / كجم EaTh عن طريق الفم يحمي بشكل ملحوظ الكبد تحت التنكس الدهني عن طريق تقليل تراكم قطرات الدهون. تم الإبلاغ عن نتائج مماثلة بواسطة Eliza et al. [47] حيث أدى القسط النوعي إلى انخفاض الاضطراب الكبدي. بالإضافة إلى ذلك ، أظهرت دراسات أخرى أن بذور كاميليا أوليفيرا تخفف من التنكس الدهني الكبدي عن طريق تنظيم FFA [48] ويقلل الكركمين من التهاب الكبد الدهني وترسب الدهون من خلال كونه مضادًا للأكسدة ومضادًا للالتهاب وكاسحًا للجذور الحرة في الأدوار [49]. ومع ذلك ، فإن علاج الأكاربوز لم يكن يتمتع بهذه الأهلية الوقائية للكبد. وهذا ما يؤكد التأثير الجانبي لهذا الدواء على الكبد [50].

علاوة على ذلك ، يحتوي T. hirsuta على ستيرول ، كومارين ، تربين ، تانينات ، كحول أليفاتي ، لاكتون ، ألكانات ، وألكانول [51]. ومن المثير للاهتمام ، أن التأثيرات المضادة لفرط سكر الدم ومضادات السكر قد تكون بسبب وجود هذه المواد الكيميائية النباتية أو غيرها من المركبات غير المعروفة.

5. الاستنتاجات

في الختام ، أظهرت دراستنا أن الإدارة متوسطة المدى لـ AqTh و EaTh من T. hirsuta لديها القدرة على خفض نسبة الجلوكوز في الدم في الفئران المصابة بداء السكري التي يسببها STZ. يمكن تفسير التأثير المضاد لفرط سكر الدم لـ EaTh جزئيًا عن طريق تثبيط نشاط الجلوكوزيداز المعوي. ويمكن أن يعزى نشاط أكثه الخافض لفرط سكر الدم إلى تحفيز إفراز الأنسولين من خلايا جزيرة البنكرياس. بالإضافة إلى ذلك ، أظهر كل من AqTh و EaTh تأثيرًا وقائيًا حاسمًا ضدكلويمضاعفات التليف والتنكس الدهني في الكبد. وبالتالي ، تشير هذه النتائج إلى أنه يمكن اعتبار AKTh و EaTh علاجًا فعالًا مضادًا لمرض السكر عن طريق الفم. حاليًا ، تركز دراساتنا على عزل وتحديد المركبات النشطة لـ EaTh و AqTh ، المسؤولة عن التأثير المضاد لمرض السكر لـ T. هيرسوتا.

الاختصارات

أكث: مستخلص مائي من إضافة يميليا هيرسوتا

DM1: مرض السكري من النوع 1

DM2: مرض السكري من النوع 2

EaTh: جزء خلات الإيثيل زائد ymelaea hirsuta

ECM: مصفوفة خارج الخلية

الداء الكلوي بمراحله الأخيرة: المرحلة النهائيةكلويمرض

FFA: الأحماض الدهنية الحرة

mTOR: هدف الثدييات من الرابامايسين

PKB: بروتين كيناز بي

STZ: الستربتوزوتوسين

T. Hirsuta: plus ymelaea hirsuta

UMPO: جامعة المعشبة محمد رئيس الوزراء

وجدة ، المغرب

منظمة الصحة العالمية: منظمة الصحة العالمية.

توافر البيانات

البيانات المستخدمة لدعم نتائج هذه الدراسة متاحة بناء على طلب من المؤلفين.

تضارب المصالح

يعلن المؤلفون أنه لا يوجد تضارب في المصالح.

شكر وتقدير

يود المؤلفون الإعراب عن تقديرهم لرامداوي كريم وبدراوي مصطفى لما قدموه من مساعدة تقنية.

cistanche bienfaitsإلى عن علىالكلى

من: 'التأثير المفيد لمرض Thymelaea hirsuta على تنكس جزيرة البنكرياس والتليف الكلوي وتلف الكبد'

--- مجلة العالم العلمية