التحديات والصعوبات المصادفة في تطبيق العلاج بالخلايا التائية ذات مستقبلات مستقبلات المستضدات الوهمية

اتصال:joanna.jia@wecistanche.com/ واتساب: 008618081934791

إن العلاج المناعي لخلايا T المستضدية الكيميرية (الخلية التائية لمستقبل المستضد الوهمي ، CAR-T) هو هندسة الخلايا التائية المعزولة وراثيًا من المرضى أو المتبرعين الخيفيين للتعبير عن مستقبل المستضد الكيميري (مستقبل المستضد الخيمري). مستقبلات ، CAR) ، وهو علاج بالخلايا بالتبني يتعرف على الخلايا السرطانية ويقتلها على وجه التحديد. يعد CAR-T أحد الإنجازات الرئيسية في مجال العلاج المناعي للسرطان في السنوات الأخيرة. له مزايا كبيرة في علاج الأورام الدموية الخبيثة وله آفاق تطور واسعة. في الوقت الحاضر ، يواجه العلاج بالخلايا التائية ذات مستقبلات المستضدات الوهمية أيضًا تحديات ضخمة. سيأخذك المحتوى التالي إلى فهم التحديات التي يواجهها العلاج بالخلايا التائية ذات مستقبلات المستضدات الوهمية ، وتحديد الآليات التي تؤدي إلى القيود والتغلب على هذه العقبات ، حتى تتمكن خلايا CAR-T من ممارسة إمكاناتها بشكل أفضل ، وتحسين استراتيجيات العلاج وتحسين نتائج المرضى. العديد من العوامل الرئيسية التي وجد أنها تؤثر على فعالية العلاج بالخلايا التائية CAR-T تشمل تصنيع خلايا CAR-T ، وإدارة الآثار الجانبية السامة ، وتكرار مقاومة الأدوية.

الأعشاب المضادة للورم:المنتجات العشبية Cistanche &مستقبلات المستضد الكيمري T خلية

1 مشكلة في تصنيع خلايا CAR-T

تتضمن التحديات التي يواجهها تصنيع خلايا CAR-T روابط متعددة مثل اكتساب الخلايا التائية ، والعزل والفحص ، والانتقال ، وتوسيع الثقافة ، واختيار النمط الظاهري للخلايا التائية الأولية. من خلال تحسين الطرق في كل رابط ، يمكن تحقيق منتجات الخلايا التائية ذات مستقبلات المستضدات الوهمية بأعلى فعالية إكلينيكية وآثار جانبية أقل سمية. في الوقت الحالي ، تعد خلايا CAR-T المعتمدة من قِبل إدارة الأغذية والعقاقير ذاتية المنشأ ، ولا يوجد خطر الرفض الخيفي ومرض الطعم مقابل المضيف (GVHD) ، ولكن يصعب الحصول عليها ، وغالبًا ما تكون جودة الخلية غير متاحة . أؤكد. يعد استخدام خلايا من متبرعين أصحاء لإنتاج منتجات CAR-T أحد الحلول لمشكلة مصادر الخلايا التائية منخفضة الجودة من نوع CAR-T. أظهرت الدراسات السريرية المبكرة جدوى استخدام خلايا CAR-T المشتقة من المتبرعين في المرضى الذين يعانون من انتكاس المرض بعد الزرع الخيفي مع انخفاض مخاطر الإصابة بـ GVHD. بالإضافة إلى ذلك ، تسهل الخلايا التائية المشتقة من المانحين تطوير منتجات CAR-T العالمية ، وهو أمر ذو أهمية كبيرة للتغلب على المشاكل الحالية المتمثلة في عدم كفاية مصادر الخلايا التائية CAR-T ، والجودة الرديئة ، ودورات الإنتاج الطويلة ، ولكن يلزم إجراء تعديلات وراثية إضافية لتقليل خطر الرفض المناعي و GVHD. بالإضافة إلى ذلك ، غالبًا ما تحتوي هياكل CAR على متواليات خارجية. نظرًا لصعوبة التحضير ، فإن معظم scFvs لخلايا CAR-T من أصل الفئران وهي مناعية. تم الكشف عن الأجسام المضادة البشرية المضادة للفأر ضد scFv في المرضى المعالجين.

أظهرت الدراسات أن النمط الظاهري للخلايا التائية الأولية لمنتجات الخلايا التائية ذات مستقبلات المستضدات الوهمية يلعب دورًا مهمًا في الاستجابات السريرية اللاحقة. قد تعمل أنماط ظاهرية محددة للخلايا التائية ، مثل خلايا الذاكرة المركزية التائية وخلايا الذاكرة الشبيهة بالجذعية والخلايا التائية السليفة ، على تحسين قدرة التمدد واستمرارية الخلايا التائية CAR-T. وجدت دراسة أجريت على CD 19- العلاج بخلايا CAR-T المستهدفة في مرضى CLL أن مجموعة خلايا CAR-T من المستجيبين لديهم تعبير جيني مرتبط بالخلايا التائية في الذاكرة مقارنةً بغير المستجيبين. قام فريق بحث آخر بتحفيز بروتين CAR للدخول إلى حالة هادئة عن طريق إجبار التنظيم الخافض لبروتين CAR من خلال نظام تنظيم دوائي أو dasatinib ، وبالتالي الحصول على نمط ظاهري يشبه الذاكرة ، وعكس بنجاح النمط الظاهري وخصائص النسخ للخلايا المستنفدة CAR-T ، ثم استعادة وظيفة أنتيتومور لخلايا CAR-T.

بالإضافة إلى ذلك ، فإن توقيت ضخ الخلايا التائية CAR-T له أيضًا تأثير مهم على استجابة العلاج. من خلال تقصير دورة إنتاج خلايا CAR-T من خلال التحسين التكنولوجي ، من المتوقع تقليل تأخير مرض المرضى وإفادة المزيد من المرضى. بالإضافة إلى ذلك ، عادةً ما يتم نقل الجينات التي ترميز هياكل CAR إلى الخلايا التائية عن طريق الفيروسات القهقرية أو الفيروس البطيء ، ولكن مع تطور أنظمة الينقولات ، يكون استخدام الينقولات بدلاً من النواقل الفيروسية لإنتاج خلايا CAR-T أكثر اقتصادا. في الوقت الحاضر ، تم تطبيق نظام ترانسبوسون النائم لتصنيع 19- خلايا CAR-T المستهدفة.

مضاد الأورام: العلاج بالخلايا التائية ذات مستقبلات المستضدات الوهميةcistanche tubulosa

2 الآثار السامة والجانبية للعلاج بالخلايا التائية ذات مستقبلات المستضدات الوهمية

تقريبًا جميع المرضى الذين عولجوا بخلايا CD {0} المستهدفة من CAR-T ظهرت عليهم آثار جانبية سامة بدرجات متفاوتة ، بما في ذلك متلازمة إطلاق السيتوكين (CRS) ومتلازمة السمية العصبية المرتبطة بالمؤثرات المناعية ، وما إلى ذلك ، والمعروف أيضًا باسم السمية العصبية آثار جانبية. قامت الجمعية الأمريكية للزراعة والعلاج الخلوي (ASTCT) بتطوير ونشر توصيات تصنيف معيارية لـ CRS و ICANS ، والتي لها أهمية إرشادية لإدارة وعلاج سمية CAR-T.

غالبًا ما تبدأ الأعراض السريرية لـ CRS بالحمى ، ويمكن أن تؤدي الحالات الشديدة إلى استجابة التهابية جهازية وانخفاض ضغط الدم ونقص الأكسجة وفشل الأعضاء. يتجلى ICANS بشكل أساسي على أنه اعتلال دماغي سام ، ويمكن أن تؤدي الحالات الشديدة إلى نوبات ووذمة دماغية وغيبوبة. كان لدى معظم المرضى الذين يعانون من ICANS تاريخ من CRS ، مما يشير إلى أن CRS قد تعمل كعامل بدء أو عامل معزز لـ ICANS. إذا كان من الممكن اكتشاف الأعراض المبكرة لـ CRS و ICANS والتدخل بشكل فعال ، فإن المسار السريري لكليهما يمكن عكسه ، لكن CRS و ICANS الشديدة يمكن أن تكون قاتلة. إن فهم الآليات الفيزيولوجية المرضية لـ CRS و ICANS مفيد في تطوير الأدوية المستهدفة لقمع سمية خلايا CAR-T على أساس الاحتفاظ بالنشاط المضاد للورم لخلايا CAR-T قدر الإمكان. يرتبط CRS بمستويات مرتفعة من السيتوكينات المختلفة ، من بينها IL -6 هو جزيء مناعي مهم يتوسط CRS. Tocilizumab ، الذي يحجب مستقبل IL -6 ، هو العلاج الرئيسي حاليًا لـ CRS. أظهرت التجارب قبل السريرية أن CRS يتم تشغيله بواسطة شبكة متعددة الخلايا من خلايا CAR-T والخلايا المضيفة ، حيث يلعب نظام البلاعم الوحيدات دورًا مركزيًا في عملية التنشيط. IL -1 هو أحد منتجات السيتوكينات الرئيسية لنظام البلاعم الوحيدات ، وقد يكون متورطًا في رابط القيادة لـ CRS ، وحظر هذا الهدف فعال في تخفيف CRS. TNF ، و interferon- (IFN-) ، وعامل تحفيز مستعمرة الخلايا المحببة / البلاعم (GM-CSF) وغيرها من السيتوكينات المؤيدة للالتهابات تشارك أيضًا في عملية CRS ، والتي قد تكون هدفًا محتملاً. حاليًا ، يتم علاج CRS منخفض الدرجة بشكل أساسي بعلاج خافض للحرارة وداعم ، ويتم منع المضاعفات الأخرى التي قد تؤدي إلى الحمى ، مثل العدوى ، بشكل فعال. بالنسبة لـ CRS المتوسطة إلى الشديدة ، يتم استخدام tocilizumab بشكل عام ، ويتم استخدام الستيرويدات بشكل انتقائي كعلاج مساعد وفقًا لحالة المريض ، ويكون التأثير أكثر أهمية. بالنسبة لمرضى CRS الشديدة ، تستخدم الستيرويدات بشكل عام لمنع تكاثر وإفراز السيتوكين للخلايا التائية CAR-T والخلايا الأخرى "المارة". وتجدر الإشارة إلى أنه لا يمكن استخدام الستيرويدات بجرعات كبيرة ، كما أن تأثيرها المثبط على جهاز المناعة سيؤدي إلى انخفاض فعالية CAR-T. يمكن لبعض مثبطات الجزيئات الصغيرة مثل ruxolitinib و ibrutinib أن تمنع بشكل كبير إنتاج ونقل الإشارات من السيتوكينات المختلفة ويمكن أن ترتبط بأهداف متعددة ، وبالتالي تنظم الوظيفة المناعية لخلايا CAR-T وتقليل الآثار الجانبية.

قد تكون آلية ICANS مرتبطة بتراكم خلايا CAR-T والسيتوكينات المؤيدة للالتهابات في الجهاز العصبي المركزي. لاحظت الدراسات قبل السريرية وجود علاقة بين عدد خلايا CAR-T في السائل النخاعي ومستوى السيتوكينات وشدة ICANS. معدل حدوث ICANS في CD 19- علاج CAR-T المستهدف أعلى من ذلك في CD 22- العلاج بخلايا CAR-T المستهدفة ، والذي قد يكون بسبب التعبير CD19 في الخلايا الجدارية الإنسي للدماغ البشري. طريقة العلاج السريري لمرضى ICANS هي إعطاء المنشطات ، ويجب أن تكون الجرعة هي الأقل لتجنب التأثير على فعالية CAR-T وتثبيط المناعة الخطير. حقق Tocilizumab نتائج جيدة في علاج CRS ، لكن تأثيره على ICANS محدود للغاية ، والذي قد يكون مرتبطًا بصعوبة المرور عبر الحاجز الدموي الدماغي.

تعد الآثار الجانبية السامة حاليًا عاملاً مهمًا يحد من فعالية CAR-T ، مما يعيق تعزيز التأثير المضاد للورم لخلايا CAR-T عن طريق زيادة جرعة خلايا CAR-T أو تعزيز نشاط المستجيب. يُعتقد أن عبء الورم المرتفع ، والتقدم في العمر ، والتكيفات المسبقة عالية الكثافة لاستنفاد اللمفاوية مرتبطة بحدوث آثار جانبية سامة للمناعة. مع زيادة حالات العلاج وإطالة وقت المتابعة ، ظهرت المزيد من الآثار السامة والجانبية ، مثل كثرة الخلايا الليمفاوية بالبلعمة / سمية تشبه متلازمة تنشيط البلاعم ، والخلل المناعي المرتبط بفقر الدم اللاتنسجي للخلايا البائية. الوذمة الدماغية ، وما إلى ذلك ، وجدت الدراسات الحالية أن إضافة جينات الانتحار ، مثل الكاسبيز المحرض -9 أو فيروس الهربس البسيط ثيميدين كيناز ، إلى CAR هي طريقة ممكنة لتقليل الآثار الجانبية السامة للخلايا لـ CAR-T ، ولكنها ستفعل ذلك. تسبب إزالة لا رجعة فيها للخلايا التائية CAR-T وتقليل المقاومة. فعالية الورم.

آثار العلاج بالخلايا التائية ذات مستقبلات المستضدات الوهمية ومكملات العلاج الوقائي: علاج السرطان والأورام

3 انتكاس مقاومة الأدوية بعد العلاج بالخلايا التائية ذات مستقبلات المستضدات الوهمية

على الرغم من أن خلايا CAR-T حققت اختراقات كبيرة في علاج الأورام الخبيثة الدموية ، فمن بين المرضى الذين يتلقون علاجًا مستهدفًا بخلايا CAR-T CD 19- ، فإن معدل انتكاس مقاومة الأدوية يصل إلى 30 بالمائة إلى 50 بالمائة ، ومعظم من الانتكاسات تحدث بعد 12 سنة من العلاج. خلال شهر. ومع ذلك ، فإن هذا النوع من الانتكاس لا يقتصر فقط على الهدف CD19 ، وقد أثبتت الدراسات ذات الصلة على أهداف أخرى مثل CD22 و BCMA أيضًا أن الانتكاس المقاوم للأدوية يمثل تحديًا كبيرًا يواجهه العلاج بالخلايا التائية ذات مستقبلات المستضدات الوهمية. في الوقت الحاضر ، عادة ما تنقسم أحداث الانتكاس إلى انتكاس سلبي للمستضد وانتكاس إيجابي للمستضد.

الآلية الأساسية للانتكاس السلبي للمستضد هي فقدان المستضد. تتضمن الآليات المعترف بها حاليًا لفقدان المستضد طفرات التضفير ، والتغيرات الخفية في الحاتمة ، وتغييرات نسب الخلية بسبب فقدان الحاتمات المستهدفة. ومع ذلك ، حتى إذا لم يتم فقد المستضد تمامًا ، فإن تقليل التعبير عن المستضد أو كثافته من خلال التعديل المناعي كافٍ للسماح لخلايا الورم بالهروب. في تجربة سريرية باستخدام CD 22- استهدفت خلايا CAR-T لعلاج مرضى اللوكيميا ، وجد أن مرضى سرطان الدم الذين لديهم مستضدات إيجابية قد انتكسوا ، مما يشير إلى أن الحفاظ على نشاط الخلايا التائية CAR-T يحتاج إلى الوصول إلى الحد الأدنى من التعبير عن المستضد . من المتوقع أن تتغلب خلايا CAR-T المدمجة متعددة الجزيئات المستهدفة على هروب الخلايا السرطانية من فقدان المستضد أو آليات تقليل التنظيم. بالنسبة للمرضى الذين يعانون من الانتكاس بعد العلاج بخلايا CRA-T المستهدفة للقرص المضغوط 19- ، يعد CD22 هدفًا مثاليًا لأن معظم المرضى السلبيين للقرص المضغوط 19- يظلون إيجابيين لتعبير CD22. في التجارب السريرية ، كانت خلايا CAR-T التي تستهدف CD22 فعالة في علاج المرضى الذين يعانون من سرطان الغدد الليمفاوية B-cell السلبي 19- وسرطان الدم الانتكاس ، ولكن في عملية العلاج المناعي المتسلسل ، انتكاس مقاومة الأدوية الناجم عن التنظيم السلبي لـ تم العثور أيضًا على تعبير CD22 بواسطة الخلايا السرطانية. لذلك ، قد يكون لتطوير خلايا CAR-T التي تستهدف CD19 و CD22 في نفس الوقت إمكانات أكبر في التغلب على مقاومة الأدوية. بالإضافة إلى اختيار المستضدات المستهدفة ، من الضروري أيضًا الانتباه إلى الآلية الدقيقة لـ CAR-T في تكوين المشابك المناعية وقتل الخلايا المستهدفة. يمكن أن تتعرف TCRs الطبيعية على المستضدات عند مستويات منخفضة الكثافة ، ومن المتوقع أن تؤدي الاختلافات الهيكلية بين CARs و TCRs الطبيعية إلى اختلافات في متطلبات كثافة التعرف على المستضد.

وتجدر الإشارة إلى أنه ليس كل المرضى المنكسين سلبيين لـ CD19 ، مما يدل أيضًا على أنه بالإضافة إلى فقدان المستضد وهروب الخلايا السرطانية ، هناك عوامل أخرى تؤدي إلى مقاومة CAR-T. السبب الرئيسي لانتكاس إيجابي للمستضد هو استنفاد الخلايا التائية CAR-T ، مما يؤدي إلى تدهور الوظيفة الذاتية بسبب التعرض طويل الأمد لمستويات عالية من المستضد. من المعتقد عمومًا أن نقل الإشارات المستقل عن المستضد لخلايا CAR-T يرتبط ارتباطًا وثيقًا باستنفاد الخلايا ، كما أن عبء الورم المرتفع هو أيضًا عامل مهم يؤدي إلى الإرهاق. إن تقنية حصار نقاط التفتيش المناعي جنبًا إلى جنب مع خلايا CAR-T تبشر بالخير في التغلب على الإرهاق وتعزيز المستجيب واستمرارية خلايا CAR-T. يمكن أن يؤدي التعبير المشترك لمستقبل IL -7 مع CAR إلى تجنب تحفيز الخلايا "المتفرجة" وتحسين القدرة التكاثرية والنشاط المضاد للأورام واستمرارية خلايا CAR-T. يحتوي هيكل CAR لخلايا CAR-T على مكونات غير ذاتية ، وهي مناعية وقد تحفز مناعة خلطية وخلوية مضادة لـ CAR ، مما يحد من الفعالية ويؤثر على القدرة التكاثرية واستمرارية خلايا CAR-T. أظهرت الدراسات أن 5 بالمائة من مرضى DLBCL و 36.7 بالمائة من مرضى B-ALL قد زادوا من مستويات الأجسام المضادة لـ CAR بعد ضخ خلايا CAR-T. تعتبر المعالجة المسبقة لسيكلوفوسفاميد أو فلودارابين عاملاً مهمًا في تقليل درجة المناعة الخلوية المضادة لـ CAR. يعد تطوير منتجات CAR-T المتوافقة مع البشر وسيلة فعالة لحل هذه المشكلة ، والتي أظهرت فعالية دائمة في B-ALL الانتكاس / المقاوم للحرارة في التجارب السريرية. يؤثر مجال التحفيز المشترك في بنية CAR أيضًا على استمرار الخلايا التائية CAR-T. من المعتقد عمومًا أنه بالمقارنة مع 4-1 مجال تكلفة BB ، فإن CAR المستمدة من القرص المضغوط 28- أقل ديمومة وأكثر عرضة للإرهاق ؛ بينما تحتوي خلايا CAR-T التي تحتوي على 4-1 مجال تكلفة BB على مستويات أعلى من البروتينات المضادة للاستماتة BCL -2 و BCL-XL ، وقد تكون هناك آلية لتعزيز تكوين النمط الظاهري للخلايا التائية للذاكرة. تشمل التحسينات في التجارب السريرية حاليًا استخدام خلايا تقديم مستضد اصطناعي لتنشيط خلايا CAR-T ، وتنظيم الأنماط الظاهرية لـ CAR-T ، والتثبيط المشترك لجزيئات نقطة التفتيش المناعية. النتائج تستحق التطلع إليها.

يمكن أن يمنع Cistanche الورم والسرطان بشكل فعال