يخفف Cistanche Rb1 ضعف الأوعية الدموية المرتبط بالعمر عن طريق تعديل مسار الغاز 6

النتائج Rb1 يخفف الشيخوخة في الشريان الأورطي للفئران المسنة

لتحديد التأثير المضاد لـ Rb1 ، قمنا أولاً بالتحقيق في الشيخوخة الخلوية ، والتي تتميز بالتعبير عن البروتينات المشاركة في تثبيط دورة الخلية وتوقف النمو الذي لا رجعة فيه (Yang et al. 2019). نظرًا لأن نتائج الكيمياء الهيستولوجية المناعية موضحة في الشكل 1 (أ ، ب) ، مقارنةً بتلك الموجودة في المجموعة الصغيرة ، أظهرت فئران مجموعة المركبات القديمة أن الشيخوخة سرعت من انتظام p21Cip1 و p16INK4a في خلايا الشريان الأورطي الصدري. ومع ذلك ، خفف علاج Rb1 من الشيخوخة الخلوية في الأوعية الدموية ، وخاصة في مجموعة Old þ Rb 1-20. بالإضافة إلى ذلك ، كانت نتائج اللطخة الغربية متوافقة معنتائج الكيمياء المناعية. كما هو مبين في الشكل 1 (ج) ، زاد التعبير البروتيني عن p21Cip1 و p16INK4a بشكل ملحوظ بنحو 2- ضعف في الشريان الأورطي الصدري للفئران المسنة مقارنة بالفئران الصغيرة. بعد العلاج بـ 20 مجم / كجم من Rb1 ، زادت مستويات البروتين لكل من p21Cip1 و p16INK4a بنسبة 41.92٪ و 37.52٪ مقارنة بمجموعة Young ، والتي كانت أقل بكثير من تلك الخاصة بمجموعة Old plus Vehicle. بالإضافة إلى ذلك ، لم يكن هناك فرق كبير في التعبير عن p21Cip1 أو p16INK4a بين الفئران الصغيرة مع وبدون علاج Rb1.

الشكل 1. تأثير Rb1 على شيخوخة الأبهر الصدري. صور للتلوين الكيميائي المناعي (4 0 0) لـ p21Cip1 (A) و p16INK4a (B) في المقاطع العرضية للشريان الأورطي الصدري للفأر. (C) تحليل لطخة غربية لتعبير p21Cip1 و p16INK4a الصدري للفأر. يتم التعبير عن البيانات على أنها متوسط ​​± SD. ف <0.01 مقابل مجموعة يونغ ؛ # p <0.05 مقابل مجموعة المركبات القديمة.

Rb1 يحسن تفاعل الأوعية الدموية في الفئران المسنة

تم استخدام تجربة حلقة الأوعية الدموية لتقييم توسع الأوعية المعتمد على البطانة. كما هو مبين في الشكل 2 ، في جميع حلقات الأبهر الصدري للفأر ، أدى إعطاء Ach إلى توسع الأوعية. عند التركيزات القصوى (10-5 مول / لتر) ، تسبب Ach في حدوث حوالي 88.84 في المائة ± 1.20 في المائة و 58.35 في المائة ± 2.50 في المائة في توسع الأوعية في مجموعة يونغ ومجموعة السيارات القديمة ، على التوالي ، مما يدل على أن الشيخوخة مرتبطة بضعف تفاعل الأوعية الدموية. ومع ذلك ، أدى العلاج بـ 10 و 20 مجم / كجم من Rb1 إلى استرخاء 70.48 بالمائة ± 2.20 بالمائة و 80.90 بالمائة ± 3.24 بالمائة ، على التوالي ، في حلقات الأبهر الصدري للفأر المتقادمة استجابةً لـ 10 5 مول / لتر Ach.

انقر هنا للحصول على سيستانش لمكافحة الشيخوخة

Rb1 قلل من تعبير جزيء الالتصاق الخلوي في الشريان الأورطي الصدري للفئران المسنة

قمنا بفحص التعبير البروتيني لبعض جزيئات التصاق الخلايا لتحديدالتهاباتوتأثيرات مضادة للالتهاباتRb1 على الفئران المسنة. أظهرت النتائج أن التعبير البروتيني لـ ICAM -1 و VCAM -1 و PAI -1 قد زاد بشكل ملحوظ بنحو 2-4 ضعف في الشريان الأورطي الصدري للفئران المسنة مقارنة بتلك في مجموعة الشباب (الشكل 3). في المقابل ، أدى علاج Rb1 إلى تثبيط هذه التغييرات بشكل كبير في الأبهر الصدري للفأر المسن ولكن لم يكن له أي تأثير على مجموعات الفئران الصغيرة. أشار التحليل الكمي إلى أن معالجة 20 مجم / كجم Rb1 أدت إلى تقليل 36.58 بالمائة تقريبًا و 46.66 بالمائة و 49.34 بالمائة من التعبير البروتيني لـ ICAM -1 و VCAM -1 و PAI -1 على التوالي ، في أنسجة الأبهر الصدري المسنة ، مقارنة بتلك الموجودة في فئران المجموعة القديمة بالإضافة إلى المركبات.

Rb1 يثبط تكلس الأوعية الدموية وتليفها المرتبط بالعمر

أجرينا تلطيخ HE وتلطيخ alizarin red S لتقييم بنية أنسجة الأبهر والتكلس الإنسي الوعائي في فئران الشيخوخة على التوالي. أظهر تلطيخ HE أن الجدران السميكة الناتجة عن الشيخوخة في الشريان الأورطي الصدري وعدم تنظيم المصفوفة خارج الخلية ، يمكن تخفيفها عن طريق علاج Rb1 (الشكل 4 (أ)). كما هو مبين في الشكل 4 (ب) ، طورت الفئران المسنة تكلسًا وسطيًا أكثر شدة (منطقة ملطخة باللون الأحمر) من الفئران الصغيرة ، بينما قلل تدخل Rb1 هذا التغيير المرضي. بعد ذلك ، قمنا بفحص المقاطع العرضية للشريان الأورطي الصدري بواسطة تلطيخ ماسون ثلاثي الألوان لتقييم التليف الإنسي الوعائي في الفئران المسنة. أظهرت النتائج أن هناك زيادة ملحوظة في ترسب الكولاجين (المنطقة الملطخة باللون الأزرق) في مجموعة المركبات القديمة مقارنة بالمجموعة الصغيرة (الشكل 4 (ج)) ، وقد تم تثبيط هذا التأثير بشكل كبير من خلال تدخل Rb1. علاوة على ذلك ، أظهر النشاف الغربي أن تعبير الكولاجين 1 والكولاجين 3 زاد بشكل ملحوظ بمقدار 4. 34- و 2. 62- ضعف في مجموعة الفئران القديمة مقارنة بالفئران الصغيرة ؛ ومع ذلك ، قلل علاج Rb1 من التعبير عن الكولاجين الأول والكولاجين الثالث في الفئران المسنة (الشكل 4 (د)). علاوة على ذلك ، لم يكن للعلاج بـ Rb1 أي تأثير على درجات تكلس الشريان الأورطي الصدري والتليف في الفئران الصغيرة (الشكل 4 (A-D)).

ينظم Rb1 مسار إشارات الغاز 6

لقد بحثنا أيضًا فيما إذا كان Rb1 يعمل من خلال مسار إشارات Gas6 / Axl لتخفيف ضعف الشريان الأورطي الصدري المرتبط بالعمر في الفئران. تم إلغاء تنظيم التعبير عن بروتين Gas6 بنسبة 41.72 في المائة وتعبير الرنا المرسال بنسبة 52.73 في المائة في الفئران المسنة مقارنة بالفئران الصغيرة بواسطة علاج Rb1 (الشكل 5 (أ ، ب)). حددنا أيضًا التعبير البروتيني لـ Axl بواسطة النشاف الغربي. ومن المثير للاهتمام ، أنه لم يكن هناك فرق كبير في تعبير بروتين Axl بين المجموعات التجريبية الخمس (الشكل 5 (أ)). لم نكتشف أيضًا اختلافًا كبيرًا في مستويات الرنا المرسال لـ Axl بين المجموعات (الشكل 5 (ب)).

الشكل 2. العلاج Rb1 يخفف ضعف التوسيع الوعائي المعتمد على البطانة المرتبط بالعمر في حلقات الأوعية الدموية في الشريان الأورطي الصدري. أرقام توضح نتائج التحليل. يتم التعبير عن البيانات على أنها متوسط ​​± SD. ف <0. 0 5 ، ف <0. 0 1 مقابل مجموعة يونغ ؛ # p <0.05 ، ## p <0.01 مقابل مجموعة المركبات القديمة.

الشكل 3. خفض Rb1 التعبير عن جزيء الالتصاق الخلوي في الأبهر الصدري للفأر. تحليل اللطخة الغربية لتعبير ICAM -1 و VCAM -1 و PAI -1 في أنسجة الشريان الأورطي الصدري. يتم التعبير عن البيانات على أنها متوسط ​​± SD. p <0. 0 1 مقابل مجموعة يونغ ؛ # p <0. 05، ## p <0.01 مقابل مجموعة المركبات القديمة.

مناقشة

في هذه الدراسة ، أظهرنا أن Rb1 تحسنضعف الأوعية الدموية المرتبط بالعمرعن طريق قمع التكلس والتليف من خلال تنظيم تعبير Gas6 وليس تعبير Axl ، والذي يوفر استراتيجية علاجية محتملة للوقاية من أمراض الأوعية الدموية المرتبطة بالعمر. من المقبول جيدًا أن شيخوخة الخلايا الوعائية ، التي تتميز بخلل وظيفي في البطانة والانتقال المظهري لخلايا العضلات الملساء ، يمكن أن يؤدي إلى زيادة تصلب الأوعية الدموية وزيادة سمك جدران الأوعية الدموية (Liu et al. 2019). شيخوخة الخلايا الوعائية هي سمة شائعة للعديد من الأمراض المعقدة والمتعلقة بالعمر ، وخاصة أمراض القلب والأوعية الدموية (O'Rourke et al. 2010). مع تطور شيخوخة الخلايا الوعائية ، تضعف وظيفة الأوعية الدموية (Gong et al. 2014). يتجلى ضعف الأوعية الدموية المرتبط بالعمر في التغيرات الفيزيولوجية المرضية ، بما في ذلك الانخفاض التدريجي في توسع الأوعية المعتمد على الليوم (Herrera et al. 2010 ؛ Gong et al. 2014). في دراستنا ، أكدنا شيخوخة الخلايا في الشريان الأورطي الصدري للفئران المسنة ، والذي تمت الإشارة إليه من خلال زيادة التعبير عن البروتينات المرتبطة بالعمر p21Cip1 و p16INK4a ، وكذلك انخفاض في توسع الأوعية المعتمد على البطانة. يشير اتساق نتائجنا مع الدراسات المذكورة أعلاه إلى وجود بعض الآليات الجزيئية المهمة المرتبطة بالتغيرات في الفيزيولوجيا المرضية لخلايا الأوعية الدموية أثناء الشيخوخة. العوامل التي تعمل على هذه الآليات من المحتمل أن تقلل بشكل كبير من شيخوخة الخلايا الوعائية وتأخيرها.

الشكل 4. علاج Rb1 يحسن التكلس والتليف الوعائي الناجم عن الشيخوخة. (أ) تلطيخ الهيماتوكسيلين والأيوزين (HE) (4 0 0) ​​، (ب) تلطيخ Alizarin red S (4 0 0) ، و (C) تلوين Masson ثلاثي الألوان (400 ) من أقسام الشريان الأورطي الصدري التمثيلية في كل مجموعة. (د) تحليل لطخة غربية لتعبيرات الكولاجين الأول والكولاجين الثالث في أنسجة الشريان الأورطي الصدري. يتم التعبير عن البيانات على أنها متوسط ​​± SD. ف <0.01 مقابل مجموعة يونغ ؛ # p <0.05 ، ## p <0.01 مقابل مجموعة السيارات القديمة

الشكل 5. تأثير Rb1 على مسار إشارات Gas6 / Axl. (أ) تم إجراء النشاف الغربي لفحص تعبير البروتين عن Gas6 و Axl. (ب) تم إجراء qPCR لفحص تعبير mRNA للغاز 6 و Axl. يتم التعبير عن البيانات على أنها متوسط ​​± SD. ف <0. 0 5 ، ف <0. 01 مقابل مجموعة يونج ؛ # p <0.05 مقابل مجموعة المركبات القديمة.

كشفت الأدلة المتراكمة أن Rb1 يعتبر عقارًا واعدًا للوقاية من تلف الأوعية الدموية (Zhou et al. 2017، 2019a، 2019b؛ Zheng et al. 2020). كشفت الدراسات السابقة أن Rb1 يمنع شيخوخة الخلايا الوعائية ويمنع تكلس الأوعية الدموية (Nanao-Hamai et al. 2019 ؛ Zhou et al. 2019b ؛ Zheng et al. 2020). ومع ذلك ، لا يزال من غير المؤكد ما إذا كان Rb1 يمكنه حماية وظائف الشرايين ضد الشيخوخة والآلية الجزيئية ذات الصلة. هنا ، وجدنا أن Rb1 يقلل وتأخر شيخوخة الشرايين في الفئران المسنة ، كما يتضح من انخفاض التعبير عن البروتينات ذات الصلة وتحسين توسع الأوعية الدموية ، مما يشير إلى أن Rb1 يمكن أن يمنع الشيخوخة المفرطة بكفاءة في الشريان الأورطي الصدري للفأر المسن ويمكن استخدامه كعامل فعال ل علاج أو منع ضعف الشرايين المرتبط بالعمر.

أثبتت الأدلة السابقة تراكم الالتهاب الشرياني المزمن منخفض الدرجة مع تقدم العمر ، مما يساهم في التغيرات الهيكلية والوظيفية المرتبطة بالعمر (Wang et al. 2014). أشارت دراسات إضافية إلى أن البيئة المكروية المخصبة في الملامح الالتهابية تؤدي إلى تحول النمط الظاهري في VSMCs من النوع المقلص إلى النوع الاصطناعي. يتميز هذا التحول في النمط الظاهري بالتعبير الضعيف للبروتينات الانقباضية الخاصة بـ SMC وإفراز السيتوكينات الإضافية المسببة للالتهابات ، والكيموكينات ، وبروتينات ECM ، وجزيئات التصاق الخلايا ، مثل الكولاجين ، و ICAM -1 ، و VCAM -1 و PAI -1 (Wang et al. 2011؛ ​​Lacolley et al. 2018). علاوة على ذلك ، تساهم جزيئات الالتصاق في إعادة تشكيل الشرايين التي يسببها الالتهاب ، لا سيما عن طريق إعادة تنظيم تفاعلات ECM-VSMC والتأثير على تعديل النمط الظاهري لـ VSMCs (Intengan et al. 1999). علاوة على ذلك ، أظهرت الدراسات أن Rb1 له تأثيرات مضادة للالتهابات في الجسم الحي وفي المختبر (Miao et al. 2017 ؛ Zhou et al. 2017). في هذه الدراسة ، وجدنا أن علاج Rb1 يمكن أن يقلل بشكل كبير من مستويات التعبير عن جزيئات التصاق الخلايا المرتبطة بالعمليات الالتهابية في الفئران المسنة ، مما يشير إلى أن Rb1 قد يعمل كدواء مضاد للالتهابات ويحمي الأوعية الدموية أثناء الشيخوخة.

بالإضافة إلى الأضرار الالتهابية، إعادة تشكيل جدار الشرايين الذي يتميز بالتكلس والتليف هو التغير المرضي الرئيسي الآخر في التغيرات اللاوعائية المرتبطة بالعمر ويسبب تصلب الأوعية الدموية الذي يساهم في انخفاض توسع الأوعية (McEniery et al.2005؛ Iyemere et al.2006؛ Kovacic et al. 2011). أظهرت الدراسات واسعة النطاق أن تكلس تصلب الشرايين التاجية يزداد مع تقدم العمر (Tesauro et al. 2017). أظهرت أبحاث أخرى أيضًا وجود تكلس متزايد مع تقدم العمر في منطقة الشريان السباتي (Wendorff وآخرون 2015). وبالمثل ، أشارت نتائجنا إلى أن الفئران المتقدمة في العمر طورت تكلسًا وسطيًا للأوعية الدموية أكثر شدة من الفئران الصغيرة. أدى تدخل Rb1 إلى تثبيط هذه التغييرات بشكل كبير. تشير هذه النتيجة إلى أن إدارة Rb1 خففت من درجة تكلس الأوعية الدموية المرتبط بالعمر في الجسم الحي. أظهرت أدلة كافية أن تكلس الأوعية الدموية ينطوي على مجموعة متنوعة من العمليات البيولوجية المرضية بدلاً من الترسب البسيط للكالسيوم ، ومن بينها يلعب تحويل VSMC إلى خلايا تشبه بانيات العظم دورًا حاسمًا (Zhou et al. 2019b). يتمثل أحد قيود دراستنا في أنه ، على الرغم من الكشف عن أن تدخل Rb1 قد منع بشكل كبير تكلس الأوعية الدموية في الفئران المتقدمة في السن ، وعلامات VSMC المقلصة (مثل أكتين العضلات الملساء والكالبونين) وعلامات VSMC العظمية (مثل عامل النسخ المرتبط بالجريان 2 ) تتطلب مزيدًا من الاستكشاف.

علاوة على ذلك ، في الدراسة الحالية ، لاحظنا أيضًا انخفاض مستويات الكولاجين الخلالي وانخفاض تعبير البروتين المرتبط في الفئران المسنة المعالجة بـ Rb 1- مقارنة بالفئران المسنة التي عولجت بالمركبات ، مما يشير إلى أن Rb1 قد يكون له تأثير مفيد على وظيفة الأوعية الدموية في الشريان الأورطي الصدري عن طريق تخفيف التليف الوعائي الناجم عن التقدم في السن. هارفي وآخرون. (2016) أن تصلب الشرايين الناجم عن التليف المفرط وزيادة ترسب الكولاجين يمكن أن يؤدي إلى زيادة النغمة الحركية الوعائية وتغيير نضح الأنسجة. تعتبر العوامل التي تخفف من التليف أنها تحمي من أمراض الأوعية الدموية المرتبطة بالعمر (Kim et al. 2018).

يمكن الاستدلال على ذلكضعف الأوعية الدموية المرتبط بالعمرهي عملية معقدة تنطوي على تغيرات غير طبيعية مختلفة ، بما في ذلك الالتهاب والتكلس والتليف. والأهم من ذلك ، وجدنا أن Rb1 كان قادرًا على تثبيط هذه التغيرات غير الطبيعية المعروفة في الشريان الأورطي الصدري للفئران المسنة. ومع ذلك ، فإن الآلية الأساسية لا تزال غير معروفة. تم تحديد Gas6 باعتباره lig ولعائلة مستقبلات TAM ، وخاصة مستقبلات Axl tyrosine kinase (Rothlin et al. 2015). أظهرت دراسة سابقة دور Gas6 / Axl في تنظيم الوظائف الخلوية المتعددة (Chen et al. 2019). اقترحت دراسة حديثة أن Gas6 / Axl لعب دورًا حاسمًا في تكلس الأوعية الدموية (Son et al. 2010 ؛ Kaesler et al. 2016 ؛ Nanao-Hamai et al. 2019) وقد يشارك أيضًا في تقليل التنظيم الناجم عن العلاج لتخليق الكولاجين في VSMCs وأنسجة القلب المسنة (Chen et al. 2016 ؛ 2019). علاوة على ذلك ، كشفت الدراسات السابقة أن Rb1 قام بتنشيط نسخ Gas6 في موقع ARE المحدد في منطقة المروج (Son et al. 2010 ؛ Nanao-Hamai et al. 2019). هنا ، أوضحنا أن تعبير بروتين Gas6 قد تم تقليله في الفئران المسنة ولكن تم عكسه بواسطة علاج Rb1 ، مما يشير إلى أن Gas6 قد يشارك في تنظيم Rb 1- بوساطة ضعف الشرايين في الفئران المسنة. ومع ذلك ، تظهر نتائجنا أنه لم يكن هناك أي تغيير في تعبير بروتين Axl و mRNA ، وهو ما كان غير متسق مع دراسة سابقة (Chen et al. 2019). تشتمل عائلة مستقبلات TAM على Tyro3 و Axl و MerTK. على الرغم من أن Gas6 يُظهر أقوى تقارب لـ Axl بين الأعضاء الثلاثة (Rothlin et al. 2015) ، Sun et al. وجد (2019) أن تنشيط الغاز 6 خفف من الإصابة الالتهابية والاستماتة في الفئران ، ولكن لم تحدث تغييرات في تنشيط Axl بين المجموعات التجريبية. اقترح بحث آخر أن تعبير Axl ، الذي يمنع موت الخلايا المبرمج وبالتالي تكلس الأوعية الدموية ، لم يتغير أيضًا في Gas6 - / - الفئران (Kaesler et al. 2016). أشارت نتائجنا بوضوح إلى أن Rb1 يخفف على وجه التحديد من تنظيم الغاز 6 المرتبط بالعمر ولكن لم يكن له أي تأثير على التعبير عن Axl ، والذي تم الإبلاغ عن أنه الحدث الأساسي المسؤول عن تكلس الأوعية الدموية والتليف ، لتحسين التهاب الأوعية الدموية المرتبط بالعمر وتوسع الأوعية المعتمد على البطانة . قد ينتج التعبير المستقر لـ Axl عن كمية كافية قبل تنشيط Gas6 أو يشير إلى أن Gas6 يعمل من خلال مستقبلات أخرى. هناك حاجة إلى مزيد من التحقيق لاستكشاف آثار Rb1 على TAMs الأخرى التي يمكن أيضًا تنشيطها بواسطة Gas6 ، مثل Tyro3 و MerTK.

الاستنتاجات

في هذه الدراسة ، أكدنا أن Rb1 يثبط تكلس الأوعية الدموية والتليف ويقلل من التعبير عن جزيئات الالتصاق الخلوي ، وكلها لاحقًا حسنت توسع الأوعية الدموية المرتبط بالعمر المرتبط بالعمر المعتمد على البطانة الوعائية على الأقل جزئيًا عن طريق تنظيم تعبير Gas6 ولكن ليس تعبير Axl. مع تقدم العمر الذي لا يمكن السيطرة عليه ، فإن إيجاد العوامل التي يمكن أن تمنع أو تعالج ضعف الخلايا الوعائية المرتبط بالعمر له أهمية كبيرة. توفر دراستنا دليلًا يثبت صحة تأثيرات Rb1 على إصابة الأوعية الدموية في فئة amelio في الفئران المسنة.

بيان الإفصاح عن المعلومات

لم يتم الإبلاغ عن أي تضارب محتمل في المصالح من قبل المؤلف (المؤلفين).

التمويل تم دعم هذا العمل من خلال المنح المقدمة من المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين [81370447] ، ومشروع التخطيط العلمي والتكنولوجي لمقاطعة قوانغدونغ الصينية [2016A050502014] ، وصندوق إنشاء الانضباط الطبي الرئيسي في Shenzhen [SZXK002] ، والبحث العلمي الطبي تأسيس مقاطعة قوانغدونغ الصينية [A2019079].

بيان توافر البيانات

البيانات والمواد متوفرة عند الطلب إلى المؤلف المراسل.

الكاتب الاشتراكات

ساهمت SYK و DHL و XXQ في تصور وتصميم هذا العمل. ساهمت LW و GYS و MW في تحليل البيانات. كتب SYK و LW و JMZ المخطوطة. كل المؤلفين قرأوا ووافقوا على النسخة الأخيرة.

مراجع

Acosta JC و O'Loghlen A و Banito A و Guijarro MV و Augert A و Raguz S و Fumagalli M و Da Costa M و Brown C و Popov N وآخرون. 2008. إشارات Chemokine عبر مستقبل CXCR2 تعزز الشيخوخة. خلية. 133 (6): 1006-1018.

Brandes RP، Fleming I، Busse R. 2005. الشيخوخة البطانية. Cardiovasc Res. 66 (2): 286-294.

Chen FF و Song FQ و Chen YQ و Wang ZH و Li YH و Liu MH و Li Y و Song M و Zhang W و Zhao J وآخرون. 2019. التستوستيرون الخارجي يخفف من التليف القلبي والاستماتة عبر مسار Gas6 / Axl في الفئران الشائخة. أكسب جيرونتول. 119: 128-137.

Chen YQ، Zhao J، Jin CW، Li YH، Tang MX، Wang ZH، Zhang W، Zhang Y، Li L، Zhong M. 2016. يؤخر التستوستيرون شيخوخة خلايا العضلات الملساء الوعائية ويمنع تخليق الكولاجين عبر مسار إشارات Gas6 / Axl . عمر. 38 (3): 60.

فريدل يو ، فيلا جي ، عطار إي سي ، ليو إي تي. 1998. GAS6 يستحث الانجذاب الكيميائي بوساطة Axl لخلايا العضلات الملساء الوعائية. J بيول كيم. 273 (12): 7123-7126.

Gong X، Ma Y، Ruan Y، Fu G، Wu S. 2014. أتورفاستاتين طويل الأمد يحسن الخلل البطاني المرتبط بالعمر عن طريق تخفيف الإجهاد التأكسدي وتطبيع خلل eNOS / iNOS في الشريان الأورطي للفئران. أكسب جيرونتول. 52: 9-17.

هارفي أ ، مونتيزانو إيه سي ، لوبيز را ، ريوس إف ، تويز آر إم. 2016. تليف الأوعية الدموية في الشيخوخة وارتفاع ضغط الدم: الآليات الجزيئية والآثار السريرية. هل يمكن أن ياء كارديول. 32 (5): 659-668.

Herrera MD، Mingorance C، Rodriguez-Rodriguez R، Alvarez de Sotomayor M. 2010. الخلل البطاني والشيخوخة: تحديث. الشيخوخة الدقة القس 9 (2): 142-152.

Hsu JJ و Lu J و Umar S و Lee JT و Kulkarni RP و Ding Y و Chang CC و Hsiai TK و Hokugo A و Gkoffeeis I و Tetradis S وآخرون. 2018. آثار teriparatide على مورفولوجيا تكلس الأبهر في الفئران التي تعاني من فرط شحميات الدم. Am J Physiol قلب سيرك Physiol. 314 (6): H1203 – H1213.

Hurtado B، Abasolo N، Munoz X، Garcia N، Benavente Y، Rubio F، Garcia de Frutos P، Krupinski J، Sala N. 2010. دراسة مشتركة بين تعدد الأشكال في GAS 6- جينات TAM وتصلب الشرايين السباتي. ثرومب هايموست. 104 (3): 592-598.

Intengan HD، Thibault G، Li JS، Schiffrin EL. 1999. ميكانيكا شريان المقاومة وبنيتها ومكوناتها خارج الخلية في الفئران التي تعاني من ارتفاع ضغط الدم تلقائيًا: تأثيرات عداء مستقبلات الأنجيوتنسين وتحويل تثبيط الإنزيم. الدوران. 100 (22): 2267 - 2275.

Iyemere VP، Proudfoot D، Weissberg PL، Shanahan CM. 2006. اللدونة المظهرية لخلايا العضلات الملساء الوعائية وتنظيم تكلس الأوعية الدموية. J متدرب ميد. 260 (3): 192-210.

Kaesler N ، Immendorf S ، Ouyang C ، Herfs M ، Drummen N ، Carmeliet P ، Vermeer C ، Floege J ، Kruger T ، Schlieper G. 2016. Gas6 protein: دوره في تكلس القلب والأوعية الدموية. BMC نيفرول. 17 (1): 52. Kim EN و Kim MY و Lim JH و Kim Y و Shin SJ و Park CW و Kim YS و Chang YS و Yoon HE و Choi BS. 2018. التأثير الوقائي للريسفيراترول على شيخوخة الأوعية الدموية عن طريق تعديل نظام الرينين أنجيوتنسين. تصلب الشرايين. 270: 123-131. Korshunov VA، Mohan AM، Georger MA، Berk BC. 2006. أكسل ، مستقبلات التيروزين كيناز ، يتوسط في إعادة تشكيل الأوعية الدموية المستحثة بالتدفق. سيرك الدقة. 98 (11): 1446-1452.