مقارنة بين الجرعات الفردية والمتكررة للخلايا اللحمية اللحمية للحبل السري البشري المضادة للالتهابات في نموذج فأر للإنتان متعدد الميكروبات

ملخص

تعمل الخلايا اللحمية الوسيطة (MSCs) على تحسين تعفن الدم قبل الإكلينيكي وإصابة الكلى الحادة المرتبطة بالإنتان (SAAKI) ولكن التجارب السريرية للجرعة الواحدة من MSCs لم تشر إلى فعالية قوية. بحثت هذه الدراسة في التأثيرات المعدلة للمناعة لمنتج MSC جديد (اختار القرص المضغوط 362- MSCs المشتق من الحبل السري البشري [hUC-MSCs]) في التسمم الداخلي للفأر ونماذج الإنتان متعدد الميكروبات. في البداية ، تلقت الفئران عديدات السكاريد الدهنية داخل البريتوني (IP) متبوعة بجرعات IP مفردة من hUC-MSCs أو مركبة. بعد ذلك ، خضعت الفئران لربط وثقب سيكل (CLP) متبوعًا بجرعات وريدية (4) من hUC-MSCs في 4 ساعات أو 4 و 28 ساعة. تضمنت التحليلات فحوصات المصل / البلازما للمؤشرات البيوكيميائية ، والوسطاء الالتهابيين ، والعلامة الحيوية AKI NGAL ؛ قياس التدفق الخلوي متعدد الألوان من الضامة البريتونية (LPS) والمجموعات السكانية الفرعية للخلايا المناعية داخل الكلى (CLP) والأنسجة / الكيمياء الهيستولوجية المناعية للكلى (CLP). في 72 ساعة من الحقن بعد LPS ، قللت hUC-MSCs وسطاء التهابات المصل ونسبة الضامة البريتونية M1 / ​​M2. أدت الجرعات المتكررة ، ولكن ليست مفردة ، hUC-MSC التي تم إعطاؤها في 48 ساعة بعد CLP إلى انخفاض تركيزات المصل من الوسطاء الالتهابيين ، وانخفاض NGAL في البلازما وعكس استنفاد الإنتان المرتبط بالخلية التائية داخل الكلى ومجموعات الخلايا النخاعية. أظهر تحليل المجموعات الهرمي لجميع تحليلات المصل / البلازما 48- تجميعًا مشتركًا جزئيًا لحيوانات hUC-MSC CLP ذات الجرعات المتكررة مع مجموعة شام ولكنه لم يكشف عن توقيع مميز للاستجابة للعلاج. تم استنتاج أن الجرعات المتكررة من CD 362- المختارة hUC-MSCs مطلوبة لتعديل الأحداث المناعية / الالتهابية الجهازية والمحلية في الإنتان متعدد الميكروبات و SA-AKI. التباين بين الأفراد وعدم وجود تأثير لإدارة جرعة واحدة من MSC في نموذج CLP متوافقة مع الملاحظات حتى الآن من التجارب السريرية في المراحل المبكرة.

الكلمات الدالة

إصابة الكلى الحادة - الخلايا اللحمية الوسيطة - الطب التجديدي - الإنتان - الالتهاب - العلاج بالخلايا

انقر هنا لشراء ملحق Cistanche

مقدمة

يتميز الإنتان بخلل وظيفي يهدد الحياة بسبب استجابة مضيفة غير منظمة للعدوى التي تسببها مسببات الأمراض البكتيرية والفطرية والفيروسية والطفيلية [1]. كل عام ، يؤثر الإنتان على ما يقرب من 50 مليون شخص في جميع أنحاء العالم ، مما يؤدي في كثير من الأحيان إلى عواقب جهازية وخيمة وإصابات في الأعضاء ، بما في ذلك إصابة الكلى الحادة (AKI) ، مما يؤدي إلى ما يقرب من 11 مليون حالة وفاة [2 ، 3]. الخلايا اللحمية الوسيطة (MSC) هي خلايا متعددة القدرات ذات خصائص تعديل مناعية واسعة النطاق يمكن عزلها من الأنسجة المختلفة [4]. من المعروف جيدًا الآن أن MSC يقدم علاجًا محتملًا لتعديل المرض للإنتان والتسمم المرتبط بـ AKI (SA-AKI) [5 ، 6]. أظهرت العديد من الدراسات الحديثة التي تستخدم ربط وثقب الفأر والجرذان (CLP) أو عديدات السكاريد الدهنية (LPS) أو نماذج التهاب الصفاق البرازي أن الإعطاء الجهازي لـ MSC لديه القدرة على تقليل الالتهاب ومقاومة العدوى البكتيرية وتحسين إصلاح الأنسجة المصابة في تعفن الدم [7-11] ، بما في ذلك SA-AKI ، [10 ، 12-15] عن طريق تعديل التوازن بين الحالات المؤيدة للالتهابات والمضادة للالتهابات.

أكدت تجربة حديثة أجريت على البالغين الأصحاء أن العلاج الوقائي في الوريد (4) مع 4 × 106 MSC / kg ينتج تأثيرات مناعية مبكرة على استجابة المضيف لـ LPS [16]. علاوة على ذلك ، أظهر إعطاء MSC الخيفي للمرضى الذين يعانون من الصدمة الإنتانية (NCT01849237 ، NCT02421484 ، و NCT02328612) ومتلازمة الضائقة التنفسية الحادة المرتبطة بالإنتان (NCT01775774) أمانًا وتحملًا جيدًا في المرحلة الأولى من التجارب السريرية [16-19]. على الرغم من هذه النتائج المشجعة ، Galstyan et al. ذكرت أيضًا أن جرعة واحدة من MSC الوريدية لم تمنع الوفاة بسبب اختلال وظائف الأعضاء المرتبطة بالإنتان ، مما يزيد من احتمال أن تكون الجرعات الإضافية ضرورية للحصول على فائدة سريرية ذات مغزى [17]. أخفقت تجربة المرحلة الثانية غير الإنتان (NCT01602328) والتي تم فيها إعطاء جرعات مفردة من MSC الخيفي داخل الدوامة للمرضى الذين يعانون من أمراض القصور الكلوي الحاد بعد جراحة المجازة القلبية الرئوية التي أخفقت أيضًا في إظهار تأثير مفيد على اختلال وظائف الأعضاء وبقاء المريض على الرغم من الوعود. نتائج التجارب قبل السريرية والمرحلة 1 [20]. ما إذا كانت الجرعات المتكررة خلال الدورة المبكرة للإنتان والمتلازمات الالتهابية الحادة الأخرى يمكن أن تزيد أو تزيد من تأثيرات تعديل المرض لـ MSC لا تزال قيد التحقيق نسبيًا على مستويات ما قبل السريرية والترجمة. علاوة على ذلك ، فإن المعرفة غير الكاملة لآلية العمل والاستجابة للجرعة والمؤشرات السريرية المثلى لإدارة MSC في تعفن الدم تحد من إمكانية تصميم التجارب الناجحة [5 ، 21 ، 22].

في الدراسة الحالية ، أجرينا تحقيقًا قبل السريري للتأثيرات المضادة للالتهابات للقرص المضغوط 362- المختار MSC المشتق من الحبل السري البشري (hUC-MSC) في نماذج الفئران للإنتان. يعد hUC-MSC الذي تم اختياره بواسطة الواسم منتجًا علاجيًا جديدًا أظهر دليلًا على الفعالية في نماذج الفئران للالتهاب الرئوي الجرثومي والإنتان عند تناوله مبكرًا بعد ظهور المرض [23 ، 24]. بصفته منتجًا طبيًا تجريبيًا من الدرجة السريرية (IMP) ، يخضع hUC-MSC حاليًا للمرحلة الأولى / الثانية من التجربة في المرضى الذين يعانون من متلازمة الضائقة التنفسية الحادة المتوسطة إلى الشديدة (ARDS) بسبب COVID -19 (NCT03042143) ومتعددة أمراض التهابات المناعة الذاتية (الاستقطاب). لقد هدفنا إلى إثبات الإمكانات المضادة للالتهابات لجرعات مفردة من hUC-MSC في نماذج الفئران من LPS- و CL أدى مسار المرض المبكر إلى تأثيرات مفيدة أكبر أو أكثر تواترًا على الالتهاب الجهازي والإصابة الخاصة بالأعضاء ، على سبيل المثال SA-AKI.

سيستانش توبولوسا

المواد والطرق

1. الخلايا

تم زراعة Anti-CD362 plus -selected hUC-MSC من أنسجة الحبل السري البشري من مصادر أخلاقية والتي تم الحصول عليها من Tissue Solutions Ltd. (غلاسكو ، المملكة المتحدة). تم إجراء ثقافات العزلة والتوسع الأولية لـ CD362 بالإضافة إلى hUC-MSC كما هو موضح سابقًا [19 ، 23 ، 27]. تم إذابة القوارير المحفوظة بالتبريد (1 × 107 في 1 مل) من hUC-MSC المضاد لـ CD362 زائد المختار ونقلها إلى 9 مل من محلول ملحي مخزّن بالفوسفات (PBS). بعد التحليل الحي / الميت إما عن طريق صبغة التريبان الزرقاء أو عداد الخلايا الآلي (NucleoCounter® NC -200 ™ ، Chemometec A / S ، الدنمارك) ، تم تكوير الأعداد المطلوبة من الخلايا عن طريق الطرد المركزي بمعدل 400 × جم لمدة 5 دقائق و تم إعادة تعليق الخلايا في 100 ميكرولتر من محلول ملحي معقم للحقن داخل الصفاق (ip) أو الحقن الوريدي.

2. إجراءات الحيوان

تم تنفيذ جميع الإجراءات المتعلقة بالحيوانات بموجب ترخيص (رقم 255/17) من اللجنة الأخلاقية للتجارب على الحيوانات ، جامعة برشلونة ، وبموجب ترخيص (AE19125 / P082 و AE19125 / P066) من هيئة تنظيم المنتجات الصحية ، أيرلندا ، وتمت الموافقة عليها من قبل لجنة أخلاقيات أبحاث رعاية الحيوان في NUI Galway. تم تنفيذ جميع الإجراءات في مرافق الحيوانات المرخصة في NUI Galway وجامعة برشلونة.

بالنسبة لنموذج LPS للتسمم الداخلي ، تم استخدام 10-12 فئران C57BL / 6 من الذكور بعمر أسبوع من Charles River Ltd. ، كينت ، المملكة المتحدة. حُقنت الفئران بـ IP بـ 5 ميكروغرام / غرام LPS (LPS 0111: B4 ، كتالوج رقم L2630 ، Sigma Aldrich ، المملكة المتحدة) في 100 ميكرولتر من محلول ملحي معقم. تم إيواء الفئران في مجموعات من 3-5 الفئران / القفص أثناء الدراسة في أقفاص مهواة بشكل فردي. تم إعطاء حقن IP واحدة من 2.5 × 105 hUC-MSC أو أحجام متساوية من السيارة (محلول ملحي معقم) بعد 4 ساعات من حقن LPS. تمت مراقبة الحيوانات كل 4 ساعات حتى نهاية الدراسة باستخدام ورقة درجة الاستغاثة وتدابير الدعم وفقًا لبروتوكول محدد مسبقًا. تم إجراء القتل الرحيم الإنساني عند نقطة النهاية التجريبية المحددة أو في وقت سابق إذا تجاوزت الحيوانات عتبة درجة الشدة المحددة مسبقًا. في وقت القتل الرحيم ، تم جمع الإفرازات البريتونية لتحليل التدفق الخلوي عن طريق صيد 5 مل من PBS المعقم داخل وخارج التجويف البريتوني.

تم إجراء ربط وثقب سيكل (CLP) على {0} فئران عمرها أسبوع ، ذكر C57BL / 6 (Charles River Ltd. ، المملكة المتحدة). تلقت الفئران مادة البوبرينورفين {{1 {{2 0}}}. 1 مجم / كجم (Richter Pharma AG ، النمسا) تحت الجلد 25-30 دقيقة قبل الإجراء وتم تخديرها بـ1. {8 }} بالمائة من الأيزوفلورين (بتدفق O2 بمقدار 0.5 لتر / دقيقة) في NUI Galway أو مع Anesketin (100 مجم / مل ؛ Dechra Veterinary Products SLU ، إسبانيا) و Rampun (20 مجم / مل ؛ Bayer ، ألمانيا) في جامعة برشلونة. تم حلق النصف السفلي من البطن وتنظيفه بنسبة 4 في المائة من الكلورهيكسيدين أو البوفيدون - اليود وشق 1 سم عموديًا على طول خط الوسط. تم تخريج الأعور وتم ربط 50 بالمائة البعيدة باستخدام 4. 0- 6. 0 خيوط جراحية. تم إطلاق مادة الأعور من خلال ثقب "من خلال" باستخدام إبرة قياس 21- وقطرة من مادة البراز قبل إعادة الأعور إلى التجويف البريتوني وخياطة العضلات والجلد مغلقًا. خضعت الفئران التي تم تشغيلها بالشام لإجراء مماثل ، بما في ذلك فتح الصفاق وكشف الأمعاء ، ولكن بدون ربط وثقب في الأعور. تلقت الفئران 0.5 مل من Gelofusine (Braun Melsungen AG ، ألمانيا) عن طريق تقطير IP قبل إغلاق الجرح. يتكون الدعم بعد الجراحة من البوبرينورفين المخفف تحت الجلد (sc) كل 8-12 ساعة حتى نقاط النهاية المحددة مسبقًا (48 أو 72 ساعة للتجارب الفردية). تم إجراء 1 × 106 hUC-MSC أو أحجام مكافئة من السيارة (محلول ملحي معقم) عبر الوريد الذيل في 4 ساعات أو 4 و 28 ساعة بعد CLP. تم إجراء المراقبة والدعم بشكل متكرر وفقًا لبروتوكول معتمد أخلاقياً. تم إجراء القتل الرحيم الإنساني عند نقطة النهاية التجريبية المحددة أو قبل ذلك إذا تجاوزت الحيوانات حد درجة الخطورة المحدد مسبقًا.

تم اختيار جرعات الخلايا للنموذجين الحيوانيين المستخدمين للدراسة بناءً على تقارير سابقة عن التأثيرات المضادة للالتهابات البشرية MSC في نماذج مماثلة [9 ، 13 ، 14 ، 28 ، 29]. تم اختيار أحجام المجموعات لدراسة LPS بشكل تجريبي بناءً على التقارير السابقة ذات الصلة لهذا النموذج [30 ، 31]. تم تحديد أحجام المجموعات لدراسة CLP للنتيجة الأولية للبلازما NGAL في 24 ساعة بعد الجراحة. باستخدام بيانات من تجربة تجريبية ، تم حساب حجم عينة من 9 حيوانات لكل مجموعة لتوفير 90 في المائة من الطاقة بافتراض مستوى أهمية بنسبة 5 في المائة واختبار من جانبين (http://www.3rs-reduction.co.uk/html) /6__القوة_و_مثال_size.html). تم تطبيق معدل تناقص متوقع قدره 10 بالمائة لتحديد حجم المجموعة النهائي لـ n =10.

مستخلص سيستانش

3. أخذ عينات الدم وشراء الأنسجة

تم سحب عينات الدم الوريدي بحجم أقصى 20 ميكرولتر بشكل متقطع من أوردة الذيل والوجه باستخدام تقنية معقمة باستخدام 25-21 إبر قياس وتم جمعها في أنابيب تحتوي على الهيبارين (VWR International ، دبلن ، أيرلندا). تم سحب عينة دم نهائية عن طريق ثقب القلب في وقت القتل الرحيم. تم جمع المصل في أنابيب دقيقة مع هلام المصل ومنشط التخثر (سارستيدت ، ويكسفورد ، أيرلندا). تم تحضير عينات البلازما والمصل بالطرد المركزي عند 10 ، 000 × جم لمدة 10 دقائق. تم تخزين عينات المصل عند -80 درجة وتم تحليلها لاحقًا للمعلمات الكيميائية الحيوية بواسطة مختبرات NationWide (لانكشاير ، المملكة المتحدة). تم تشريح الطحال والرئتين والكلى والكبد مباشرة بعد القتل الرحيم.

4. المقايسات المناعية

تم تحديد كمية تركيز ليبوكالين (NGAL) المرتبط بالجيلاتيناز في البلازما باستخدام الماوس Lipocalin -2 / NGAL Duo-Set ELISA Development kit (R&D Systems ، Minneapolis ، MI ، USA) وفقًا للبروتوكول المقترح من الشركة المصنعة (التفاصيل في الطرق التكميلية ). لتقدير تعدد إرسال السيتوكينات والكيموكينات في مصل الدم ، تم استخدام مقايسة السيتوكينات القياسية للماوس Bio-Plex Pro 23- (Bio-Rad ، Accuscience) وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة. تم تحليل العينات على نظام ELISA متعدد الإرسال Bioplex 200 (BioRad ، Accuscience).

5. التسجيل شبه الكمي لأقسام أنسجة الكلى

تم تحليل الأجزاء الملطخة من الكلى بطريقة أعمى بواسطة المجهر الضوئي بتكبير 40X باستخدام مجهر المجال الساطع Olympus BX43 (أوليمبوس ، سنتر فالي ، PA) ومع برنامج IS TCapture (شركة Tucsen Photonics Co. ، فوجيان ، الصين). لكل كلية ، تم التقاط عشرين حقلاً غير متداخلة من قسم ملطخ ، وتم تسجيل المنطقة الملطخة بشكل إيجابي بواسطة مراقب أعمى من أجل (A) توسع أنبوبي ، صب ، ونخر (PAS) و (B) تعبير NGAL [32] تم إجراء التسجيل على مقياس تسجيل نصف كمي 0-4 (التفاصيل في الطرق التكميلية). تم حساب متوسط ​​الدرجات لكل كلية ، وتم التعبير عن النتائج النهائية كمجموعة تعني ± SD.

مسحوق Cistanche

مناقشة

يعد الإنتان ومضاعفاته المتكررة SA-AKI من التحديات الرئيسية للصحة العامة بسبب استمرار نقص العلاجات الفعالة والنتائج المخيبة للآمال من التجارب السريرية في المراحل المتأخرة [2 ، 3]. أبلغت العديد من الدراسات السابقة السريرية الحديثة عن نتائج تشير إلى أن MSC من مصادر مختلفة ومنتجاتها لها تأثيرات إيجابية على شدة المرض والبقاء على قيد الحياة في نماذج الإنتان و AKI [7 ، 8 ، 11-15]. ومع ذلك ، فإن الفوائد السريرية لـ MSC في تعفن الدم و SA-AKI لا تزال غير مثبتة مع بيانات محدودة فقط متاحة من المرضى البشريين [5]. حتى الآن ، وثقت التجارب السريرية أن جرعة وحيدة من التسريب الوريدي MSC في مكان إعطاء LPS ، والإنتان ، ومتلازمة الضائقة التنفسية الحادة (ARDS) آمن وممكن ، [16-19] ولكنه لا يقلل بشكل علني من الوفيات الناجمة عن فشل الأعضاء المرتبط بالإنتان [17]. . في هذه الدراسة ، قارنا تأثيرات إعطاء جرعة مفردة ومزدوجة من الوريد لمنتج علاجي MSC بشري مميز (CD 362- تم اختيار hUC-MSC) في نموذج CLP الفأري للإنتان متعدد الميكروبات. في البداية ، تمشيا مع النتائج التي تم الإبلاغ عنها مؤخرًا لمنتج MSC نفسه في نماذج الفئران من الالتهاب الرئوي الجرثومي والإنتان [23 ، 24] ، أكدنا إمكانية الإدارة المبكرة لـ hUC-MSC لتعديل الالتهاب الجهازي الناجم عن LPS في الفئران. في نموذج CLP للماوس للإنتان متعدد الميكروبات ، ومع ذلك ، أشارت نتائجنا إلى أن الجرعات المفردة من hUC-MSC المعطاة في 4 ساعات بعد تحريض التهاب الصفاق البرازي لم تمارس أي تأثير مفيد واضح على الالتهاب الجهازي أو إصابة الأنسجة (الكلوية) الخاصة بالأعضاء. في المقابل ، أدى إعطاء جرعة وريدية ثانية من hUC-MSC 24 ساعة لاحقًا إلى إشارات متعددة للالتهاب المحسن والإصابة الكلوية بمقدار 48 ساعة بعد ظهور الإنتان. على الرغم من ذلك ، لم يتم إثبات فائدة البقاء على قيد الحياة لنظام الجرعة المزدوجة. تسلط نتائجنا الضوء على أهمية إجراء دراسات في الجسم الحي للمنتجات العلاجية لـ MSC في نماذج متعددة والإبلاغ عن كل من النتائج الإيجابية والسلبية قبل السريرية لإعلام الترجمة السريرية وتصميم التجارب بشكل أفضل. مجتمعة ، تقدم نتائجنا أيضًا دليلًا على أن الفائدة المحدودة أو الغائبة لأنظمة الجرعة المفردة المبكرة من منتجات MSC المضادة للالتهابات في تجارب الإنتان قد يتم التغلب عليها جزئيًا على الأقل عن طريق الجرعات المتكررة.

في نموذج LPS للماوس ، جرعة واحدة مبكرة من المستويات النظامية المعدلة hUCMSC لكل من وسطاء الالتهاب الفطري والتكيفي لمدة 72 ساعة على الأقل ، وإن كان ذلك بدون تأثير علني على درجات الشدة والبقاء على قيد الحياة. قدم تحليل النمط الظاهري للخلايا الضامة البريتونية دليلًا على أن إدارة hUC-MSC كانت مرتبطة بتأثير تعديل مناعي محلي متوقع - انحراف الضامة نحو استقطاب M2 ، والذي تم ربطه بحل الإصابة الالتهابية وتعزيز إصلاح الأنسجة [29 ، 35] و من المحتمل أن يتم التوسط من خلال حديث MSC المتقاطع مع الخلايا النخاعية المقيمة [36]. في الواقع ، أفادت الدراسات الحديثة أن التعديل المناعي العلاجي بواسطة MSC في حالة الإنتان قد يعتمد على البلعمة بواسطة الخلايا النخاعية (الخلايا البلعمية وحيدة النواة) والتي تخضع بعد ذلك لتنشيط بديل يؤدي إلى إنتاج IL -10 ومضادات أخرى للباراكرين وسطاء التهابات [7 ، 27 ، 37]. على الرغم من أنه كان من المهم تحديد ما إذا كانت فوائد هذا التعديل المناعي قد تم تعزيزها عن طريق الجرعات المتكررة من hUC-MSCs بعد إعطاء LPS ، فقد استنتجنا أن النموذج التجريبي الذي يعكس بشكل أفضل تعفن الدم المتطور سيكون له صلة سريرية أكثر. وهكذا ، بعد تأكيد النشاط البيولوجي hUC-MSC في الفئران باستخدام إدارة LPS ، تم استخدام نموذج CLP للماوس لتوصيف التأثيرات المضادة للالتهابات المتعلقة بالجرعات المتكررة والقياس الكمي للتأثيرات الخاصة بالكلى لـ hUC-MSC في وضع الإنتان متعدد الميكروبات و SA-AKI. في أيدينا ، ارتبط هذا النموذج بإنتان شديد إلى حد ما (حوالي 70 بالمائة و 50 بالمائة و 40 بالمائة على قيد الحياة عند 48 و 96 و 168 ساعة على التوالي في الحيوانات غير المعالجة) دون فشل واضح في الكبد والكلى. تتوافق ملاحظاتنا الخاصة بالنموذج ، بما في ذلك معدلات الوفيات والاتجاهات في بارامترات الكبد في الدم والألبومين ، مع التنميط الشامل جدًا لـ CLP الماوس الذي أبلغ عنه Li et al. [38] ، والتي توثق أيضًا انخفاض درجة حرارة الجسم وضغط الدم ومعدل ضربات القلب خلال أول 48 ساعة بعد CLP. ومن المثير للاهتمام ، في حين أن Li et al. موثقة زيادة الكرياتينين في الدم ونيتروجين اليوريا في الدم في 8 و 16 ساعة بعد CLP ، تشير نتائجهم إلى أن هذه المؤشرات الحيوية الوظيفية الكلوية قد انخفضت إلى المستويات الطبيعية (أو أقل من الطبيعي) بمقدار 48 ساعة - ربما تعكس التأثيرات المتطورة لعملية التمثيل الغذائي المتغيرة / كتلة العضلات على هذه المؤشرات الحيوية مع تقدم النموذج [38]. تمشيا مع هذا ، أشار تحليل المصل / البلازما وأنسجة الكلى في 48 ساعة إلى وجود التهاب جهازي كبير واستجابة إصابة كلوية دون دليل صريح على حدوث تلف / نخر إقفاري. قدمت هذه التحليلات الأخيرة أوضح دليل على وجود تأثير معدل لنظام hUCMSC ذي الجرعة المزدوجة على شدة الإنتان متعدد الميكروبات عند مقارنته بالإعطاء بجرعة وحيدة والتي ، على عكس النتائج التي تم الإبلاغ عنها مؤخرًا في نموذج CLP الفئران ، لا يمكن تمييزها من مجموعة CLP المعالجة بمحلول ملحي عبر جميع المؤشرات التي تم فحصها. على وجه الخصوص ، أثبت المرقم الحيوي AKI ذو الصلة سريريًا ، NGAL ، أنه عامل تمييز قيم لشدة الإنتان وتأثير العلاج في هذا النموذج وقد يكون علامة حيوية مهمة للتجارب السريرية المستقبلية للعلاجات الخلوية في الإنتان و SA-AKI [33 ، 39 ].

تتناقض نتائجنا لتأثير مرض MSC الوريدي على البقاء على قيد الحياة في نماذج حيوانية صغيرة للإنتان مع بعض التقارير الأخرى [28 ، 40] ولكن ، بشكل ملحوظ ، يتماشى مع الآثار المرصودة للخلايا الجذعية الوسيطة الخيفية في التجارب السريرية البشرية [5 ، 16] 18 ، 41]. في هذا الصدد ، نود أن نسلط الضوء على الدور المحتمل لتحيز النشر - على وجه التحديد ، النشر الانتقائي للنتائج التي تعكس التأثيرات الإيجابية - كمحرك مهم للتوقعات غير الواقعية لفعالية أنظمة MSC أحادية الجرعة والعلاجات المتقدمة الأخرى في المراحل الأولى من السريرية ترجمة [42]. في الواقع ، اكتشف صن وآخرون ، في تحليل تلوي حديث لـ 29 دراسة حيوانية حول فعالية علاجات MSC في تعفن الدم ، تحيزًا كبيرًا في النشر وعدم وضوح فيما يتعلق بجرعة الخلية المثلى بين هذه التقارير قبل السريرية [43]. ومع ذلك ، فإننا نبلغ أيضًا عن نتائج إيجابية مميزة قد تساعد في تعزيز الأهداف المترجمة لـ UC-MSCs في تعفن الدم أو غيره من الأمراض الالتهابية الجهازية والخاصة بالأعضاء ، مثل أمراض القصور الكلوي الحاد أو الكبد أو أمراض الجهاز التنفسي. في كلا النموذجين ، تشير هذه التغييرات الجزيئية إلى تفاعلات معقدة لـ hUC-MSC مع الاستجابة المناعية Th1 و Th2. قد تلعب مثل هذه التأثيرات على تنشيط خلايا المستجيب التائي وتوازن النمط الظاهري التائي دورًا رئيسيًا في تعديل المرحلة الحادة من الإنتان كتنشيط عشوائي وغير منظم للمؤثرات المناعية مما يؤدي إلى مستويات عالية من السيتوكينات المتداولة تساهم في فشل أعضاء متعددة [44] وفي حالة الخلايا التائية ، قد يتبعها موت الخلايا المبرمج على نطاق واسع ونقص المناعة اللاحقة [45]. وقد ثبت أيضًا أن إدارة MSC قد تقلل من التهاب الأنسجة الموضعي عن طريق تنظيم التوازن الخلوي وتقليل حركة مرور الخلايا المناعية إلى الأعضاء [44]. تمشيا مع هذا ، كشف تحليلنا الكمي لمجموعة من مجموعات الخلايا المناعية داخل الكلى على مدار 48 ساعة بعد الإنتان الناجم عن CLP عن أوجه قصور يسببها الإنتان تؤثر على كل من المؤثرات الفطرية والتكيفية ، بما في ذلك فقدان الخلايا التائية المزدوجة السلبية التي تم الإبلاغ عنها مؤخرًا أن يكونوا من أوائل المستجيبين لـ AKI [46]. والجدير بالذكر ، بالنسبة للحيوانات المعالجة بجرعة مزدوجة ولكن ليس جرعة واحدة من hUC-MSC ، كان هناك دليل على ارتداد استنفاد الخلايا المناعية داخل الكلى. كما لوحظت اتجاهات مماثلة أيضًا في الرئتين والطحال ، تشير نتائجنا إلى إمكانية الجرعات الوريدية المتكررة من MSC لتخفيف استنفاد الخلايا المناعية على نطاق واسع من الأعضاء غير اللمفاوية والأعضاء اللمفاوية - أحد جوانب الإنتان الذي تم ربطه بالوفيات اللاحقة بسبب العدوى الثانوية [47 ، 48]. استنادًا إلى الملاحظة الإضافية لزيادة موت الخلايا بين خلايا CD45 plus داخل الخلايا في حيوانات CLP غير المعالجة ، فمن المعقول أن هذا يعكس التأثيرات المباشرة أو غير المباشرة لـ hUC-MSC لتقليل الخلل الوظيفي في الميتوكوندريا والإشارات المؤيدة للاستماتة [49-51]. ومع ذلك ، ستكون هناك حاجة إلى تجارب أكثر تركيزًا لتوضيح الآليات التي من خلالها تحافظ إدارة MSC النظامية على أرقام الخلايا النخاعية و / أو اللمفاوية في تعفن الدم ولتحديد ما إذا كان يمكن استغلالها علاجيًا.

كبسولات Cistanche

نظرًا للتباين المتأصل ، نلاحظ نحن وآخرون النتائج الفردية لنموذج CLP الماوس ، افترضنا أن تحليل المجموعات الهرمية للقراءات الكمية لمجموعة من الوسطاء المتصلين بالالتهاب المنتشر في 48 ساعة سيساعد على تحديد "توقيع المستجيب" المميز بشكل أفضل بين الحيوانات المعالجة بـ MSC. على الرغم من أن 60 في المائة من مجموعة الجرعة المزدوجة تتجمع في نمط يفصلهم عن غالبية المجموعات ذات الجرعة الواحدة والمجموعات غير المعالجة وكان أقرب إلى المجموعة الوهمية ، إلا أنه لا يمكن تحديد ملف تعريف متعدد التحليلات واضح للغاية لتعديل المرض. أسفر نهج تحليل المكون الرئيسي (PCA) عن استنتاج مماثل (البيانات غير معروضة). يجب الاعتراف بأن البيانات من الحيوانات التي فشلت في البقاء على قيد الحياة حتى 48 ساعة لا يمكن الحصول عليها ومن الممكن أن توفر التحليلات في نقطة زمنية أو أكثر في وقت سابق فصلًا أكثر تميزًا بين المستجيبين / غير المستجيبين. ومع ذلك ، يسلط هذا التحليل الضوء على تعقيد التباين بين الأفراد المتأصل في النماذج الحيوانية للإنتان والعلاجات الخلوية حتى مع الاهتمام الوثيق بمبادئ التصميم التجريبي الجيد [52 ، 53] ، وهذا يعكس التحديات المماثلة التي تواجه التطبيق السريري لـ علاجات جديدة للإنتان [18 ، 20 ، 41 ، 54 ، 55].

يجب الاعتراف ببعض قيود الدراسة. في المقام الأول ، ركزنا على التحقيق في التأثيرات في الجسم الحي للقرص المضغوط 362- المحدد hUC-MSC حيث يخضع منتج الخلية هذا لتجارب سريرية للأمراض الأخرى التي يسببها الالتهاب بما في ذلك COVID -19- المرتبط بـ ARDS. منع تصميم هذه الدراسة من اكتساب المزيد من التبصر في التأثيرات المقارنة ، في الإنتان و SA-AKI ، لمنتج الخلية الذي تم اختباره مع تلك الخاصة بـ hUC-MSC غير المختار أو باستخدام MSC المشتق من نخاع العظام أو الأنسجة الأخرى. ثانيًا ، نظرًا لأنه تم اختيار جرعات الخلايا المستخدمة بناءً على دراسات سابقة لتأثيرات MSC المضادة للالتهابات البشرية في الفئران ، فلا يمكن تحديد ما إذا كانت الإدارات المتعددة لأعداد الخلايا الأعلى أو المنخفضة توفر فائدة أكبر. أخيرًا ، نظرًا لأن أحجام المجموعات لتجارب نموذج CLP تم دعمها لمعالجة تأثيرات hUC-MSC على العلامات الحيوية الالتهابية الجهازية لشدة الإنتان / SA-AKI ، فمن الممكن أن تكون أحجام المجموعات الأكبر قد حددت بشكل أكثر وضوحًا تأثيرات الجرعات المتكررة على نجاة. بينما تؤكد هذه القضايا بشكل أكبر على الحاجة إلى تجارب ما قبل السريرية متسلسلة تلتزم قدر الإمكان بالمعلمات الرئيسية المطلوبة لتصميم التجارب السريرية الأمثل ، فإن النتائج التي نقدمها هنا تدعم التركيز المستمر على نظم الجرعات المتعددة من MSC المضادة للالتهابات في تعفن الدم و SA-AKI.

مراجع

1. Singer، M.، Deutschman، CS، Seymour، CW، Shankar-Hari، M.، Annane، D.، Bauer، M.، Bellomo، R.، Bernard، GR، Chiche، JD، Coopersmith، CM، Hotchkiss ، RS، Levy، MM، Marshall، JC، Martin، GS، Opal، SM، Rubenfeld، GD، van der Poll، T.، Vincent، JL، & Angus، DC (2016). تعريف الإجماع الدولي الثالث للإنتان والصدمة الإنتانية (تعفن الدم -3). مجلة الجمعية الطبية الأمريكية ، 315 (8) ، 801-810. https://doi.org/10.1001/jama.2016.0287

2. Hoste، EA، Bagshaw، SM، Bellomo، R.، Cely، CM، Colman، R.، Cruz، DN، Edipidis، K.، Forni، LG، Gomersall، CD، Govil، D.، Honore، PM، جوانيس بوياو ، O. ، Joannidis ، M. ، Korhonen ، AM ، Lavrentieva ، A. ، Mehta ، RL ، Palevsky ، P. ، Roessler ، E. ، Ronco ، C. ، et al. (2015). علم الأوبئة لإصابة الكلى الحادة في المرضى المصابين بأمراض خطيرة: دراسة AKI-EPI متعددة الجنسيات. طب العناية المركزة ، 41 (8) ، 1411-1423. https://doi.org/ 10.1007 / s 00134-015-3934-7

3. Rudd، KE، Johnson، SC، Agesa، KM، Shackelford، KA، Tsoi، D.، Kievlan، DR، Colombara، DV، Ikuta، KS، Kissoon، N.، Finfer، S.، Fleischmann-Struzek، C . و Machado و FR و Reinhart و KK و Rowan و K. و Seymour و CW و Watson و RS و West و TE و Marinho و F. و Hay و SI وآخرون. (2020). معدل وفيات الإنتان العالمي والإقليمي والوطني ، 1990-2017: تحليل العبء العالمي لدراسة المرض. لانسيت، 395 (10219) ، 200-211. https: // دوى. org / 10.1016 / S 0140-6736 (19) 32989-7

4. Arutyunyan، I.، Elchaninov، A.، Makarov، A.، & Fatkhudinov، T. (2016). الحبل السري كمصدر محتمل للعلاج القائم على الخلايا الجذعية اللحمية. المنظمة الدولية للخلايا الجذعية ، 2016 ، 6901286. https://doi.org/10.1155/2016/6901286

5. Fazekas، B.، & Grifn، MD (2020). العلاجات القائمة على الخلايا اللحمية اللحمية المتوسطة لإصابة الكلى الحادة: تقدم في العقد الماضي. Kidney International، 97 (6) ، 1130-1140. https://doi.org/10. 1016 / j.kint.2019.12.019

6. هيكسون ، إل جيه ، هيرمان ، إس إم ، مكنيكولاس ، بكالوريوس ، وجريفن ، دكتوراه في الطب (2021). التقدم نحو التطبيق السريري للخلايا اللحمية اللحمية الوسيطة وغيرها من العلاجات التجديدية المعدلة للمرض: أمثلة من مجال طب الكلى. الكلى 360 ، 2 (3) ، 542-557. https://doi.org/10.34067/kid.0005692020

7. Weiss، ARR، Lee، O.، Eggenhofer، E.، Geissler، E.، Korevaar، SS، Soeder، Y.، Schlitt، HJ، Geissler، EK، Hoogduijn، MJ، & Dahlke، MH (2020). التأثيرات التفاضلية للماجستير المعطل بالحرارة والنقص في الإفراز وماجستير النشط الأيضي في الإنتان وزرع القلب الخيفي. الخلايا الجذعية ، 38 (6) ، 797-807. https://doi.org/10.1002/stem.3165

8. Jerkic، M.، Gagnon، S.، Rabani، R.، Ward-Able، T.، Masterson، C.، Otulakowski، G.، Curley، GF، Marshall، J.، Kavanagh، BP، & Lafey، جي جي (2020). تعمل الخلايا اللحمية اللحمية الوسيطة للحبل السري البشري على إضعاف الإنتان الجهازي جزئيًا عن طريق تعزيز قتل البكتيريا الضامة البريتونية عن طريق تحريض الأكسجين الهيم -1 في الفئران. التخدير ، 132 (1) ، 140-154. https://doi.org/10.1097/ ALN.0000000000003018

9. Wu، KH، Wu، HP، Chao، WR، Lo، WY، Tseng، PC، Lee، CJ، Peng، CT، Lee، MS، & Chao، YH (2016). التعبير المتسلسل الزمني عن إشارات المستقبل الشبيه بالرقم 4 في الفئران الإنتانية المعالجة بالخلايا الجذعية الوسيطة. الصدمة، 45 (6) ، 634–640. https: // دوى. org / 10.1097 / SHK.0000000000000546

10. Chang و CL و Leu و S. و Sung و HC و Zhen و YY و Cho و CL و Chen و A. و Tsai و TH و Chung و SY و Chai و HT و Sun و CK و Yen و CH و Yip ، هونج كونج (2012). تأثير الخلايا الجذعية الوسيطة المشتقة من الخلايا الدهنية على التخفيف من تلف الأعضاء وتقليل الوفيات في متلازمة تعفن الفئران الناجم عن ثقب الأعور والربط. مجلة الطب الانتقالي ، 10 ، 244. https: // doi. org / 10.1186 / 1479-5876-10-244

11. Hall، SR، Tsoyi، K.، Ith، B.، Padera Jr.، RF، Lederer، JA، Wang، Z.، Liu، X.، & Perrella، MA (2013). تعمل الخلايا اللحمية الوسيطة على تحسين البقاء على قيد الحياة أثناء تعفن الدم في غياب الأكسجين الهيم -1: أهمية العدلات. الخلايا الجذعية ، 31 (2) ، 397-407. https://doi.org/10.1002/stem.1270

12. Zhang، G.، Zou، X.، Huang، Y.، Wang، F.، Miao، S.، Liu، G.، Chen، M.، & Zhu، Y. (2016). تحمي الحويصلات خارج الخلايا اللحمية اللحمية المتوسطة من إصابة الكلى الحادة من خلال مضادات الأكسدة عن طريق تعزيز nrf2 / يتم تنشيطه في الجرذان. أبحاث الكلى وضغط الدم ، 41 (2) ، 119-128. https://doi.org/10. 1159/000443413

13. Luo، CJ، Zhang، FJ، Zhang، L.، Geng، YQ، Li، QG، Hong، Q.، Fu، B.، Zhu، F.، Cui، SY، Feng، Z.، Sun، XF ، & تشين ، XM (2014). تعمل الخلايا الجذعية الوسيطة على تحسين إصابة الكلى الحادة المرتبطة بالإنتان في الفئران. الصدمة ، 41 (2) ، 123-129. https: // دوى. أورغ / 10.1097 / SHK.0000000000000080

14. Condor، JM، Rodrigues، CE، Sousa Moreira، R.، Canale، D.، Volpini، RA، Shimizu، MH، Camara، NO، Noronha Ide، L.، & Andrade، L. (2016). العلاج بالخلايا الجذعية المشتقة من الهلام من وارتون يخفف من إصابة الكلى التي يسببها الإنتان ، وإصابة الكبد ، والخلل البطاني. الخلايا الجذعية الطب الانتقالي ، 5 (8) ، 1048-1057. https://doi.org/10.5966/sctm. 2015-0138

15. Zullo، JA، Nadel، EP، Rabadi، MM، Baskind، MJ، Rajdev، MA، Demaree، CM، Vasko، R.، Chugh، SS، Lamba، R.، Goligorsky، MS، & Ratliff، BB (2015 ). يرشد إفراز الخلايا الجذعية البطانية المتضمنة هيدروجين والخلايا الجذعية الوسيطة لاستقطاب البلاعم في التسمم الداخلي. الخلايا الجذعية الطب الانتقالي ، 4 (7) ، 852 - 861. https://doi.org/10. 5966 / sctm. 2014-0111

16. Perlee، D.، van Vught، LA، Scicluna، BP، Maag، A.، Lutter، R.، Kemper، EM، van 't Veer، C.، Punchard، MA، Gonzalez، J.، Richard، MP ، Dalemans ، W. ، Lombardo ، E. ، de Vos ، AF ، & van der Poll ، T. (2018). يعمل التسريب الوريدي للخلايا الجذعية الدهنية اللحمية البشرية على تعديل استجابة المضيف لعديد السكاريد الدهني في البشر: تجربة عشوائية ، مفردة التعمية ، متوازية المجموعة ، مضبوطة بالغفل. الخلايا الجذعية ، 36 (11) ، 1778-1788. https: // doi.org/10.1002/stem.2891

17. Gennadiy Galstyan، PM، Parovichnikova، E.، Kuzmina، L.، Troitskaya، V.، Gemdzhian، E.، & Savchenko، V. (2018). نتائج التجربة السريرية الروسية العشوائية التجريبية أحادية المركز لخلايا اللحمة اللحمية المتوسطة في المرضى المصابين بقلة العدلات الشديدة المصابين بالصدمة الإنتانية (RUMCESS). المجلة الدولية لأبحاث الدم واضطرابات الدم ، 5 (1) ، 33. https://doi.org/10.23937/2469-5696/1410033

18. McIntyre، LA، Stewart، DJ، Mei، SHJ، Courtman، D.، Watpool، I.، Granton، J.، Marshall، J.، Dos Santos، C.، Walley، KR، Winston، BW، Schlosser، K. ، Fergusson ، DA ، والمجموعة الكندية لتجارب الرعاية الحرجة ، ومجموعة البيولوجيا التحويلية للرعاية الحرجة الكندية. (2018). العلاج المناعي الخلوي للصدمة الإنتانية. المرحلة الأولى من التجارب السريرية. المجلة الأمريكية لطب الجهاز التنفسي والعناية المركزة ، 197 (3) ، 337-347. https://doi.org/10. 1164 / rccm. 201705-1006 OC

19. ماتاي ، ماساتشوستس ، كالفي ، سي إس ، زهو ، إتش ، تومسون ، بي تي ، ويلسون ، جي جي ، ليفيت ، جي إي ، روجرز ، إيه جيه ، جوتس ، جي إي ، وينر كرونيش ، جي بي ، باجوا ، إي كيه ، دوناهو ، إم بي ، ماكفيري ، BJ ، Ortiz ، LA ، Exline ، M. ، Christman ، JW ، Abbott ، J. ، Delucchi ، KL ، Caballero ، L. ، McMillan ، M. ، et al. (2019). العلاج بالخلايا اللحمية اللحمية الخيفية لمتلازمة الضائقة التنفسية الحادة المتوسطة إلى الشديدة (دراسة ستارت): تجربة عشوائية من المرحلة 2 أ للسلامة. طب الجهاز التنفسي لانسيت ، 7 (2) ، 154-162. https://doi.org/10. 1016 / جنوب 2213-2600 (18) 30418-1

20. Swaminathan، M.، Staford-Smith، M.، Chertow، GM، Warnock، DG، Paragamian، V.، Brenner، RM، Lellouche، F.، FoxRobichaud، A.، Atta، MG، Melby، S.، Mehta ، RL ، Wald ، R. ، Verma ، S. ، Mazer ، CD ، والمحققون ، A.-A. (2018). الخلايا الجذعية اللحمية الخيفية لعلاج القصور الكلوي الحاد بعد جراحة القلب. مجلة الجمعية الأمريكية لأمراض الكلى ، 29 (1) ، 260-267. https://doi.org/10.1681/ASN.2016101150

21. Gotts، JE، & Matthay، MA (2018). العلاج القائم على الخلايا في تعفن الدم. خطوة أقرب. المجلة الأمريكية لطب الجهاز التنفسي والعناية المركزة ، 197 (3) ، 280-281. https://doi.org/10.1164/rccm. 201710-2068 ED

22. Griffin، MD، & Swaminathan، S. (2020). الافتتاحية: المستحضرات الدوائية الحيوية والأدوية المبتكرة لاستهداف التهاب الكلى. الحدود في علم الأدوية ، 11 ، 38. https://doi.org/10.3389/fphar.2020.00038

23. Horie، S.، Masterson، C.، Brady، J.، Loftus، P.، Horan، E.، O'Flynn، L.، Elliman، S.، Barry، F.، O'Brien، T. ، Lafey ، JG ، & O'Toole ، D. (2020). الخلايا اللحمية الوسيطة المشتقة من الحبل السري CD362 (زائد) من أجل e. coli pneumonia: تأثير نظام الجرعات ، والمرور ، والحفظ بالتبريد ، والعلاج بالمضادات الحيوية. أبحاث وعلاج الخلايا الجذعية ، 11 (1) ، 116. https://doi.org/10.1186/s13287-020-01624-8

24. Gonzalez، H.، Keane، C.، Masterson، CH، Horie، S.، Elliman، SJ، Higgins، BD، Scully، M.، Lafey، JG، & O'Toole، D. (2020). تخفف الخلايا اللحمية الوسيطة المشتقة من الحبل السري CD362 (زائد) من الإنتان متعدد الميكروبات الناجم عن ربط وثقب الأعور. المجلة الدولية للعلوم الجزيئية، 21 (21). https://doi.org/10.3390/ijms21218270

25. Lewis، AJ، Seymour، CW، & Rosengart، MR (2016). نماذج الفئران الحالية للإنتان. الالتهابات الجراحية ، 17 (4) ، 385-393. https://doi.org/10.1089/sur.2016.021

26. Remick، DG، & Ward، PA (2005). تقييم نماذج الذيفان الداخلي لدراسة الإنتان. الصدمة، 24 (ملحق 1) ، 7-11. https: // doi.org/10.1097/01.shk.0000191384.34066.85

27. de Witte، SFH، Luk، F.، Sierra Parraga، JM، Gargesha، M.، Merino، A.، Korevaar، SS، Shankar، AS، O'Flynn، L.، Elliman، SJ، Roy، D. ، Betjes ، MGH ، Newsome ، PN ، Baan ، CC ، & Hoogduijn ، MJ (2018). يتم تحفيز التحوير المناعي بواسطة الخلايا اللحمية اللحمية العلاجية (MSC) من خلال البلعمة من الخلايا أحادية الخلية. الخلايا الجذعية ، 36 (4) ، 602-615. https: // doi.org/10.1002/stem.2779

28. Zhao، X.، Liu، D.، Gong، W.، Zhao، G.، Liu، L.، Yang، L.، & Hou، Y. (2014). يحسن المستقبِل 3 الذي يشبه رسوم المرور ، بولي (I: C) ، الوظيفة المثبطة للمناعة والتأثير العلاجي للخلايا الجذعية الوسيطة على تعفن الدم عن طريق تثبيط المير -143. الخلايا الجذعية ، 32 (2) ، 521-533. https://doi.org/10.1002/stem.1543

29. Nemeth، K.، Leelahavanichkul، A.، Yuen، PS، Mayer، B.، Parmelee، A.، Doi، K.، Robey، PG، Leelahavanichkul، K.، Koller، BH، Brown، JM، Hu، X. ، Jelinek ، I. ، Star ، RA ، & Mezey ، E. (2009). تخفف خلايا انسجة نخاع العظم من الإنتان عبر البروستاغلاندين E (2) - إعادة البرمجة المعتمدة للبلاعم المضيفة لزيادة إنتاجها من الإنترلوكين -10. طب الطبيعة ، 15 (1) ، 42-49. https://doi.org/10.1038/nm.1905

30. Fletcher، AL، Elman، JS، Astarita، J.، Murray، R.، Saeidi، N.، D'Rozario، J.، Knoblich، K.، Brown، FD، Schildberg، FA، Nieves، JM، Heng ، TS، Boyd، RL، Turley، SJ، & Parekkadan، B. (2014). تُظهر عمليات زرع الخلايا الشبكية الليفية من العقدة الليمفاوية فعالية علاجية قوية في تعفن الفئران عالي الوفيات. Science Translational Medicine، 6 (249) ، 249ra109. https: // doi.org/10.1126/scitranslmed.3009377

31. جونزاليس ري ، إي ، أندرسون ، بي ، جونزاليس ، ماساتشوستس ، ريكو ، إل ، بوشر ، دي ، ديلجادو ، إم (2009). الخلايا الجذعية البشرية البالغة المشتقة من الأنسجة الدهنية تحمي من التهاب القولون التجريبي والإنتان. جوت ، 58 (7) ، 929-939. https://doi.org/10.1136/gut.2008. 168534

32. Kaucsar، T.، Godo، M.، Revesz، C.، Kovacs، M.، Mocsai، A.، Kiss، N.، Albert، M.، Krenacs، T.، Szenasi، G.، & Hamar، ص (2016). نسبة الليبوكالين المرتبطة بالجيلاتيناز في البول / البلازما هي علامة حساسة ومحددة لإصابة الكلى الحادة تحت الإكلينيكية في الفئران. بلوس واحد، 11 (1) ، e0148043. https://doi.org/10.1371/journ al.pone.0148043

33. Park، HK، Kim، S.، Lee، S.-S.، Kim، H.-J.، Ahn، H.-S.، Song، JY، Um، T.-H.، Cho، C . -R. ، Jung ، H. ، Koo ، H.-K. ، Sim ، YS ، Song ، J.-U. ، & Park ، J.-H. (2015). هل يساعد البلازما NGAL في التنبؤ بإصابة الكلى الحادة لدى مرضى الإنتان؟: مراجعة منهجية وتحليل تلوي. المجلة الأوروبية للجهاز التنفسي، 46 (ملحق 59) ، PA2148. https://doi.org/10.1183/13993003.congr ess -2015. PA2148

34. Koeze، J.، van der Horst، ICC، Keus، F.، Wiersema، R.، Dieperink، W.، Kootstra-Ros، JE، Zijlstra، JG، & van Meurs، M. (2020). الليبوكسين المرتبط بالجيلاتيناز في البلازما في القبول بوحدة العناية المركزة كمتنبئ لتطور إصابة الكلى الحادة. مجلة الكلى السريرية ، 13 (6) ، 994-1002. https: // دوى. org / 10.1093 / ckj / sfaa002

35. Lee ، KY (2019). استقطاب M1 و M2 للبلاعم: مراجعة مصغرة. العلوم والهندسة البيولوجية الطبية ، 2 (1) ، 1-5. https://doi.org/10.30579/mbse.2019.2.1.1

36. Eggenhofer، E.، Luk، F.، Dahlke، MH، & Hoogduijn، MJ (2014). حياة ومصير الخلايا الجذعية اللحمية. الحدود في علم المناعة ، 5 ، 148. https://doi.org/10.3389/fmmu.2014.00148

37. Luk، F.، de Witte، SF، Korevaar، SS، Roemeling-van Rhijn، M.، Franquesa، M.، Strini، T.، van den Engel، S.، Gargesha، M.، Roy، D. ، Dor، FJ، Horwitz، EM، de Bruin، RW، Betjes، MG، Baan، CC، & Hoogduijn، MJ (2016). تحافظ الخلايا الجذعية الوسيطة المعطلة على القدرة على تعديل المناعة. الخلايا الجذعية والتنمية ، 25 (18) ، 1342–1354. https://doi.org/10.1089/scd. 2016.0068

38. Li، JL، Li، G.، Jing، XZ، Li، YF، Ye، QY، Jia، HH، Liu، SH، Li، XJ، Li، H.، Huang، R.، Zhang، Y. & وانج ، هـ. (2018). تقييم المؤشرات الحيوية المرتبطة بالإنتان السريري في نموذج الفأر الإنتاني. مجلة البحوث الطبية الدولية، 46 (6) ، 2410-2422. https://doi.org/10.1177/0300060518764717

39. Cai، L.، Rubin، J.، Han، W.، Venge، P.، & Xu، S. (2010). أصل الأشكال الجزيئية المتعددة في بول HNL / NGAL. المجلة السريرية للجمعية الأمريكية لأمراض الكلى ، 5 (12) ، 2229-2235. https://doi.org/10.2215/CJN.00980110

40. Capcha، JMC، Rodrigues، CE، Moreira، RS، Silveira، MD، Dourado، P.، Dos Santos، F.، Irigoyen، MC، Jensen، L.، Garnica، MR، Noronha، IL، Andrade، L. ، & Gomes، SA (2020).

41. Schlosser، K.، Wang، JP، Dos Santos، C.، Walley، KR، Marshall، J.، Fergusson، DA، Winston، BW، Granton، J.، Watpool، I.، Stewart، DJ، McIntyre، LA ، Mei ، SHJ ، وتجارب الرعاية الحرجة الكندية ، G. ، والبيولوجيا التحويلية للرعاية الحرجة الكندية ، G. (2019). آثار علاج الخلايا الجذعية الوسيطة على مستويات السيتوكينات الجهازية في المرحلة الأولى من تجربة سلامة تصعيد الجرعة لمرضى الصدمة الإنتانية. طب الرعاية الحرجة ، 47 (7) ، 918-925. https://doi.org/10.1097/CCM.0000000000003657

42. van Rhijn-Brouwer، FCC، Gremmels، H.، Fledderus، JO، & Verhaar، MC (2018). خصائص الخلايا اللحمية الوسيطة والقدرة على التجدد في أمراض القلب والأوعية الدموية: الآثار المترتبة على العلاج الخلوي. زرع الخلايا، 27 (5) ، 765-785. https: // doi.org/10.1177/0963689717738257

43. Sun، XY، Ding، XF، Liang، HY، Zhang، XJ، Liu، SH، Bing، H.، Duan، XG، & Sun، TW (2020). فعالية العلاج بالخلايا الجذعية الوسيطة للإنتان: التحليل التلوي للدراسات قبل السريرية. أبحاث وعلاج الخلايا الجذعية ، 11 (1) ، 214. https://doi.org/ 10.1186 / s 13287-020-01730-7

44. Laroye، C.، Gibot، S.، Reppel، L.، & Bensoussan، D. (2017). مراجعة موجزة: انسجة اللحمة المتوسطة / الخلايا الجذعية: علاج جديد للإنتان والصدمة الإنتانية؟ الخلايا الجذعية ، 35 (12) ، 2331-2339. https: // doi.org/10.1002/stem.2695

45. Brady، J.، Horie، S.، & Lafey، JG (2020). دور الاستجابة المناعية التكيفية في تعفن الدم. تجريبي لطب العناية المركزة ، 8 (ملحق 1) ، 20. https://doi.org/10.1186/s40635-020-00309-z

46. ​​Martina، MN، Noel، S.، Saxena، A.، Bandapalle، S.، Majithia، R.، Jie، C.، Arend، LJ، Allaf، ME، Rabb، H.، & Hamad، AR (2016 ). الخلايا التائية ألفا بيتا السلبية المزدوجة هي المستجيبون الأوائل لآكي وتوجد في الكلى البشرية. مجلة الجمعية الأمريكية لأمراض الكلى ، 27 (4) ، 1113-1123. https://doi.org/10.1681/ ASN.2014121214

47. Hotchkiss، RS، Tinsley، KW، Swanson، PE، Schmieg Jr.، RE، Hui، JJ، Chang، KC، Osborne، DF، Freeman، BD، Cobb، JP، Buchman، TG، & Karl، IE (2001 ). يتسبب موت الخلايا المبرمج الناجم عن الإنتان في استنفاد تدريجي عميق للخلايا الليمفاوية B و CD4 بالإضافة إلى التائية في البشر. مجلة علم المناعة ، 166 (11) ، 6952-6963. https://doi.org/10.4049/jimmunol.166.11.6952

48. Condotta، SA، Cabrera-Perez، J.، Badovinac، VP، & Grifth، TS (2013). مناعة الخلايا التائية ودور TRAIL في كبت المناعة الناجم عن الإنتان. مراجعات نقدية في علم المناعة ، 33 (1) ، 23-40. https://doi.org/10.1615/critrevimmunol.20130 06721

49. خسروجردي ، أ ، سعودي ، س ، حسيني ، أريزونا ، أشغي ، ف ، شافعي ، أ ، هاشمي ، إس إم (2021). التأثيرات المناعية والعلاجية للخلايا الجذعية الوسيطة على اختلال وظائف الأعضاء في تعفن الدم. الصدمة ، 55 (4) ، 423-440. https://doi.org/10.1097/SHK.0000000000 001644

50. Nie، P.، Bai، X.، Lou، Y.، Zhu، Y.، Jiang، S.، Zhang، L.، Tian، N.، Luo، P.، & Li، B. (2021) . تقلل الخلايا الجذعية الوسيطة للحبل السري البشري الضرر التأكسدي وموت الخلايا المبرمج في اعتلال الكلية السكري عن طريق تنشيط Nrf2. أبحاث وعلاج الخلايا الجذعية ، 12 (1) ، 450. https://doi.org/10.1186/s13287-021-02447-x

51. dos Santos، CC، Murthy، S.، Hu، P.، Shan، Y.، Haitsma، JJ، Mei، SH، Stewart، DJ، & Liles، WC (2012). تحليل شبكة الاستجابات النسخية الناتجة عن علاج الخلايا الجذعية الوسيطة للإنتان التجريبي. المجلة الأمريكية لعلم الأمراض ، 181 (5) ، 1681–1692. https://doi.org/10.1016/j.ajpath.2012.08.009

52. von Kortzfeisch، VT، Karp، NA، Palme، R.، Kaiser، S.، Sachser، N.، & Richter، SH (2020). تحسين التكاثر في البحوث الحيوانية عن طريق تقسيم مجتمع الدراسة إلى عدة "تجارب مصغرة". تقارير ساينتيفك ، 10 (1) ، 16579. https://doi.org/10. 1038 / ثانية 41598-020-73503-4

53. Tanavde، V.، Vaz، C.، Rao، MS، Vemuri، MC، & Pochampally، RR (2015). البحث باستخدام الخلايا الجذعية اللحمية / اللحمية: مقياس الجودة نحو تطوير مادة مرجعية. العلاج بالخلايا، 17 (9) ، 1169-1177. https://doi.org/10.1016/j.jcyt.2015. 07.008

54. Pickkers، P.، Heemskerk، S.، Schouten، J.، Laterre، PF، Vincent، JL، Beishuizen، A.، Jorens، PG، Spapen، H.، Bulitta، M.، Peters، WH، & van دير هوفين ، جيه جي (2012). الفوسفاتاز القلوي لعلاج إصابات الكلى الحادة التي يسببها الإنتان: تجربة عشوائية مزدوجة التعمية محكومة بالغفل. العناية الحرجة، 16 (1)، R14. https://doi.org/10.1186/cc11159

55. Pickkers، P.، Mehta، RL، Murray، PT، Joannidis، M.، Molitoris، BA، Kellum، JA، Bachler، M.، Hoste، EAJ، Hoiting، O.، Krell، K.، Ostermann، M . ، Rozendaal ، W. ، Valkonen ، M. ، Brealey ، D. ، Beishuizen ، A. ، Meziani ، F. ، Murugan ، R. ، de Geus ، H. ، Payen ، D. ، et al. (2018). تأثير الفوسفاتيز القلوي البشري المؤتلف على 7- تصفية الكرياتينين في المرضى الذين يعانون من إصابات الكلى الحادة المرتبطة بالإنتان: تجربة سريرية عشوائية. مجلة الجمعية الطبية الأمريكية ، 320 (19) ، 1998-2009. https://doi.org/10.1001/jama.2018.14283

Barbara Fazekas1 · Senthilkumar Alagesan2 · Luke Watson2 · Olivia Ng1،2 · Callum M. Conroy1،2 · Cristina Català3 · Maria Velascode Andres3 · Neema Negi1 · Jared Q. Gerlach4 · Sean O. Hynes5،6 · Francisco Lozano3،7،8 · ستيفن ج. إليمان 2 · ماثيو دي جريفن 1،9،10

1 معهد الطب التجديدي في مركز CÚRAM للبحوث في الأجهزة الطبية ، كلية الطب ، جامعة أيرلندا الوطنية في غالواي ، غالواي ، أيرلندا

2 Orbsen Therapeutics Ltd. ، غالواي ، أيرلندا

3 Institut d'Investigacions Biomèdiques August Pi i Sunyer ، برشلونة ، إسبانيا

4 Glycoscience Group، National Center for Biomedical Engineering Science، National University of Ireland Galway، Galway، Ireland

5 تخصص علم الأمراض ، كلية الطب ، جامعة أيرلندا الوطنية في غالواي ، غالواي ، أيرلندا

6 قسم التشريح المرضي ، مستشفيات جامعة غالواي ، غالواي ، أيرلندا

7 Servei d'Immunologia ، مستشفى كلينيك دي برشلونة ، برشلونة ، إسبانيا

8 قسم الطب الحيوي ، جامعة برشلونة ، برشلونة ، إسبانيا

9 قسم أمراض الكلى ، مجموعة الرعاية الصحية بجامعة سولتا ، مستشفيات جامعة غالواي ، غالواي ، أيرلندا

10 جامعة أيرلندا الوطنية في غالواي ، ريميدي ، العلوم الطبية الحيوية ، قرية كوريب ، دانغان ، غالواي H91 TK33 ، أيرلندا