طرق مراقبة جودة Cistanche deserticola

لمزيد من المعلومات: ali.ma@wecistanche.com

شي زيي ، وو يون ، تشو يويمي وآخرون.

الطب الصيني التقليديسيستانشهو الجذع النضرة منCistanche DeserticolaYC Ma أو Cisanche tubulosa (Schenk) يتسم بأوراق قشرية جافة. له وظائف تنغيم الكلى يانغ ، جوهر التغذية والدم ، ترطيب الأمعاء والملينات ، إلخ. وهو يستخدم في الغالب لنقص الكلى يانغ ، ونقص الجوهر والدم ، والعجز الجنسي والعقم ، وجع وضعف الخصر والركبتين ، والضعف من العضلات والعظام وجفاف الأمعاء والإمساك. تظهر الأبحاث الدوائية الحديثة ذلكسيستانشله العديد من الوظائف مثل تحسين الوظيفة الجنسية ، ومقاومة مرض الزهايمر ومرض باركنسون ، وتحسين القدرة على التعلم والذاكرة ، ومكافحة الشيخوخة ، ومكافحة التعب ، وحماية الكبد ، والملين [4]. أكد عدد كبير من الدراسات أن جليكوسيدات الفينيثانويد فيCistanche Deserticolaلها تأثيرات واضحة على تحسين القدرة على التعلم والذاكرة ، ومقاومة مرض الزهايمر ومرض باركنسون (4 ، السكريات القليلة والبوليولات لها تأثير ملين وملين 64). يقيس "دستور الأدوية لجمهورية الصين الشعبية" فقط محتوى جليكوسيدات فينيل إيثانويد إكيناكوسيد وفيرباسكوسايد فيسيستانشالصحراء، ولكنها لا تقيس المكونات النشطة لتأثيرها الملين ، لذلك من الصعب إجراء تحليل شامل للمواد الطبية منسيستانشالصحراء. رقابة جودة. من أجل التغلب على هذا القيد وإنشاء نظام تقييم جودة متعدد المؤشرات المتعلقة بالوظائف والمؤشرات الرئيسيةسيستانشالصحراء، استخدمت هذه الدراسة HPLCELSDP4 لإنشاء طريقة التحليل الكمي للبيتين والمانيتول والفركتوز والجلوكوز والسكروز في المواد الطبية منسيستانشالصحراء. بالإضافة إلى ذلك ، 58 دفعة منسيستانشالصحراءمواد طبية من أصول مختلفة و 10 دفعات من المواد الطبية منسيستانشفي منطقة خوتان في شينجيانغ ، والتي يمكن أن توفر مرجعا لمراقبة الجودة الشاملة وتقييم المواد الطبية منسيستانشالصحراءفى المستقبل.

انقر لاستخراج فوائد المنتجات

1 الصك والكواشف

1.1 الأدوات

ميزان سارتوريوس الإلكتروني BT25 S ، BS 124 S (شركة Beijing Sartorius Balance Co.، Ltd.) ؛ Agilent 1100 كروماتوغرافيا سائلة عالية الأداء ؛ كاشف تشتت الضوء التبخيري ALLTECH 2000ES (EISD) ؛ منظف ​​بالموجات فوق الصوتية KQ 250 (Kunshan Ultrasonic Instrument Ltd). 1.2 الكواشف

مادة التحكم: البيتين (دفعة: {0}} ، نقاء: 99.2 في المائة) ، مانيتول (دفعة: 10053-201304 ، نقاء: 99.0 في المائة) ، د-فروكتوز (دفعة: 111504-201703 ، نقاء: 99.8 بالمائة) ، د - الجلوكوز اللامائي (رقم الدفعة: 110833-201506 ، نقاء: 99.9 بالمائة) ، السكروز (رقم الدُفعة: 111507-201303 ، النقاء: 99.8 بالمائة) ، جميعها مشتراة من المعهد الوطني الصيني لرقابة الغذاء والدواء.

المواد الطبية منسيستانشالصحراءتم جمعها في منغوليا الداخلية وشينجيانغ وقانسو وأماكن أخرى بإجمالي 58 دفعة. تم التعرف عليها من قبل البروفيسور تو بينجفي من كلية الصيدلة بجامعة بكين باعتبارها السيقان اللحمية المجففةسيستانشالصحراءYCMa من نبات Lidangaceae ، كما هو موضح في الجدول 3.

المواد الطبية منسيستانشالصحراءتم جمعها في منطقة خوتان ، شينجيانغ ، في ما مجموعه 10 دفعات. تم التعرف عليها من قبل الأستاذ Tu Pengfei من كلية الصيدلة في جامعة بكين حيث أن السيقان اللحمية المجففة ذات الأوراق المتقشرة من Cistanche tubulosa (Schenk) Wight من نبات Liedangaceae ، كما هو موضح في الجدول 4.

1.3 الكواشف

الأسيتونيتريل نقي كروماتوجرافي (Tianjin Boshiqi Technology Development Co.، Ltd.) ، الميثانول كروماتوجرافي (Tianjin Saifu Century Technology Development Co.، Ltd.) ، والماء ماء عالى النقاء.

2 الطرق والنتائج

2.1 الظروف الكروماتوغرافية

كان العمود الكروماتوغرافي عبارة عن عمود جل بوليمر ShodexAshaipak NH2P -50 4 (25 0 مم × 4.6 مم ، 5 ميكرومتر) ؛ كان الطور المتحرك عبارة عن ماء أسيتونيتريل (77 - 23) ؛ كان معدل التدفق 0.7 مل · دقيقة -1 ؛ كانت درجة حرارة العمود 25 درجة ؛ كاشف تشتت الضوء (ELSD): كانت درجة حرارة أنبوب الانجراف 100 درجة ، ومعدل تدفق الغاز الحامل 3 لترات دقيقة -1.

2.2 إعداد الحل المرجعي

خذ كمية مناسبة من مادة مرجعية للبيتين ، والمانيتول ، والفركتوز ، والجلوكوز ، والسكروز ، وقم بوزنها بدقة ، وأضف الماء لعمل محلول مختلط يحتوي على 0. 25 مجم من البيتين ، والمانيتول ، والفركتوز ، والجلوكوز ، والسكروز لكل 1 مل ، رجه جيدا ، واحصل على.

2.3 تحضير محلول الاختبار

خذ حوالي 1. 0 غسيستانشمسحوق طبي (يمر عبر غربال رقم 4) ، يزنه بدقة ، وضعه في دورق حجمي بني بسعة 1 0 0 مل ، أضف 50 مل من الميثانول بنسبة 50 في المائة بدقة ، وقم بتوصيله بإحكام ، ثم قم برجه ، ووزنه نقعها لمدة 30 دقيقة ، ثم باستخدام الموجات فوق الصوتية (الطاقة 250 واط ، التردد 35 كيلو هرتز) لمدة 40 دقيقة ، أخرجها ، اتركها تبرد ، قم بوزنها مرة أخرى ، أضف 50 في المائة من الميثانول لتقليل الكتلة ، ورجها جيدًا ، واتركها انها تقف. نضح بدقة 5 مل من المادة الطافية ، وضعها في دورق حجمي 25 مل ، قم بالتخفيف إلى العلامة باستخدام ميثانول بنسبة 50 بالمائة ، ثم رجها جيدًا ، ثم قم بالتصفية من خلال غشاء مسامي 0.2 ميكرومتر.

2.4 طريقة التحديد

ارسم بدقة 5 و 10 ميكرولتر من المحلول المرجعي و 5 ميكرولتر من محلول الاختبار على التوالي ، وحقنها في الكروماتوغراف السائل ، وسجل منطقة الذروة ، واحسبها وفقًا للمعادلة اللوغاريتمية للطريقة القياسية الخارجية المكونة من نقطتين.

2.5 اختبار ملاءمة النظام

وفقًا للشروط الكروماتوغرافية الواردة في البند 2.1 ، ارسم بدقة 5 ميكرومتر من المحلول المرجعي ومحلول الاختبار ، على التوالي ، وحقنها في الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء ، وقم بقياس وتسجيل مخطط الكروماتوغرافي ، كما هو موضح في الشكل 1. من عينة الاختبار أظهرت نفس وقت الاحتفاظ مثل قمم الكروماتوغرافيا المرجعية للمادة ، وكان القرار جيدًا ، وكانت الظروف الكروماتوجرافية ممكنة.

ملاحظة: أ. مادة المراقبة. ب.سيستانشرقم 49 عينة ؛ 1. بيتايمي ؛ 2. fnuckese. 3. مانيبول. 4. الجلوكوز. 5. سوكريف

الشكل 1 لمحات HPLC للمادة المرجعية وعينة Cistanche رقم 49

2.6 فحص العلاقات الخطية

خذ كميات مناسبة من البيتين ، المانيتول ، الفركتوز ، الجلوكوز ، والسكروز كمواد مرجعية ، وزنها بدقة ، وأضف الماء لجعل كل 1 مل يحتوي على البيتين 0. 496 0 ملغ ، مانيتول {{3} }. 994 0 مجم ، فاكهة 1. 0 126 مجم ، جلوكوز 1. 0 882 مجم ، وسكروز 0 .9922 مجم. 0. 0 992 ، 0. 248 0 ، 0. 496 0 ، 0.9920 ، 1.9840 ، 2.9760 ميكرومتر ، مانيتول 0.1988 ، 0.4970 ، 0.9940، 1.9880، 3.9760، 5.9640 μ، سكر الفواكه 0.5063، 1. 012 6. 2 - 025 2. 4. 050 4. 5. 063 0. تم حقن واكتشاف الظروف الكروماتوجرافية ، وتم تسجيل منطقة الذروة ؛ ثم تم استخدام قيمة اللوغاريتم X (ug) لكل كمية حقن مادة مرجعية على أنها الإحداثي ، وكانت القيمة اللوغاريتمية Y لمنطقة الذروة هي الإحداثي ، وتم رسم المنحنى القياسي. النتائج موضحة في الجدول 1.

الجدول 1 نتائج التحقيق في العلاقة الخطية

2.7 اختبار الدقة

ارسم محلول الاختبار بدقة (العينة رقم 49) ، في ظل الظروف الكروماتوغرافية المذكورة أعلاه ، وحقن 6 مرات باستمرار ، وقياس منطقة الذروة لكل ذروة كروماتوغرافية ، واحسب قيمة RSD الخاصة بها. النتائج: كانت تحديد حالة تحديد مكان الذروة لمناطق ذروة البيتين ، والمانيتول ، والفركتوز ، والجلوكوز ، والسكروز 0. 84 بالمائة ، 2.56 بالمائة ، 1.27 بالمائة ، 2.62 بالمائة و 1.52 بالمائة ، على التوالي ، مما يشير إلى دقة الأداة المستخدمة في كانت هذه الدراسة جيدة. 2.8 اختبار التكرار

خذ 6 عينات منسيستانشالصحراء(العينة رقم 49) ، قم بإعداد حل الاختبار وفقًا للطريقة الواردة في البند 2.3 ، وقياس منطقة الذروة لكل ذروة كروماتوغرافية ، وحساب المحتوى المقابل. النتائج بلغ متوسط ​​محتويات البيتين ، والمانيتول ، والفركتوز ، والجلوكوز ، والسكروز (ن =6) 7.93 في المائة ، 7.27 في المائة ، 8.74 في المائة ، 2.75 في المائة و 4.81 في المائة ، وكان تحديد وضع اللاجئ 2.83 في المائة ، 1.94 في المائة ، {{ 18}} 97 بالمائة و 2.60 على التوالي. في المئة ، 1.40 في المئة ، مما يشير إلى أن الطريقة جيدة التكرار. 2.9 اختبار الاستقرار

خذ محلول الاختبار (العينة رقم 49) ، وحقنه في 0 ، و 4 ، و 8 ، و 12 ، و 16 ، و 24 ساعة بعد التحضير للقياس ، واحسب قيمة RSD لكل ذروة كروماتوغرافية. النتائج: كانت RSDs للبيتين والمانيتول والفركتوز والجلوكوز والسكروز 0. 61 بالمائة و 1.92 بالمائة و 1.34 بالمائة و 2.83 بالمائة و 0. 69 بالمائة على التوالي ، مما يشير إلى أن محلول الاختبار كان جيدًا الاستقرار خلال 24 ساعة. 2.10 اختبار الاسترداد

خذ 6 عينات منسيستانشالصحراءمع المحتوى المعروف (نموذج رقم 49) ، تزن بدقة 0. 25 جم ، ضعها في دورق حجمي بني 5 0 مل ، واسحب بدقة 25 مل من المحلول المرجعي المختلط بتركيز 1: 1 (الذي يحتوي على {{1 0}}. 79 0 0 ملغ من البيتين). تمت إضافة مل- ، سكر الفواكه 0.7236 مجم "مل -1 ، مانيتول 0.8812 مجم · مل -1 ، جلوكوز 0.2708 مجم · مل -1 ، سكروز 0.4883 مجم'مل- ') إلى العينة ، وتم تحضير محلول الاختبار وفقًا للطريقة تحت 2.3 تم الكشف عنها وفقًا للظروف الكروماتوغرافية المذكورة أعلاه ، وحساب استعادتها ، وتظهر النتائج في الجدول 2 ، مما يشير إلى أن الطريقة بها دقة جيدة.

الجدول 2: نتائج قياس معدل استرداد العينة المكون من 5 مكونات ليتم اختبارها (n =6)

3 مناقشة

3.1 اختيار مكونات المؤشر

إجمالي السكريات قليلة السكاريدسيستانشهي الأجزاء الفعالة منسيستانشللملينات. قام المؤلف بتحليل التركيب الكيميائي لهذا الجزء بواسطة LC-MS والمادة المرجعية ، وقرر أن هذا الجزء يتكون أساسًا من البيتين والمانيتول والفركتوز والجلوكوز والسكروز. لذلك ، تم اختيار هذه المكونات الخمسة كمكونات مؤشر لـسيستانشالصحراء، وتم إنشاء طريقة تحديد المحتوى.

3.2 اختيار الأعمدة الكروماتوغرافية

المكونات الخمسة التي سيتم اختبارها ، البيتين ، المانيتول ، الفركتوز ، الجلوكوز والسكروز ، قطبية نسبيًا ولا يمكن الاحتفاظ بها في عمود Cn ذي الطور المعكوس. بشكل عام ، تظهر القمم خلال 1-2 دقيقة ، ولا يمكن فصل المكونات. الأعمدة الأمينية Waters Bonoapar NH ، (300 مم × 4.6 مم ، 10 ميكرومتر) و Phenomenex Bondclone 10 NH ، (300 مم × 3.9 مم ، 10 ميكرومتر) لفصل السكر والبوليول ، والأعمدة الأمينية القائمة على البوليمر تسود الكربوهيدرات ES (250 مم × 4.6 مم ، 5 ميكرومتر) ، ShodexAshaipak NH2P -50 4 شرق (250 مم × 4.6 مم ، 5 ميكرومتر). أظهرت النتائج أن العمود الأميني لمصفوفة البوليمر يمكنه فصل هذه المكونات الخمسة بشكل فعال.

3.3 اختيار الكاشف

لا تحتوي المكونات الخمسة التي سيتم اختبارها على امتصاص واضح للأشعة فوق البنفسجية ، ولا يمكن تحديد محتوى كاشف الأشعة فوق البنفسجية بشكل مباشر. لذلك ، أسست هذه الورقة طريقة التحليل الكمي لمكونات كحول السكرسيستانشالصحراءباستخدام HPLC-EISD. بينت النتائج أن الأسلوب ذو حساسية عالية وتكرار جيد ودقة عالية ويمكن استخدامه لمراقبة الجودةسيستانشالصحراءوالمواد الطبية الأخرى التي تحتوي على كحول البيتين والسكر.

3.4 التحقيق في طريقة تحضير محلول الاختبار

تمت مقارنة مذيبات الاستخلاص المختلفة بما في ذلك الماء ، 30 بالمائة ميثانول ، 50 بالمائة ميثانول ، 70 بالمائة ميثانول ، ميثانول ، إلخ على التوالي. أظهرت النتائج أنه باستثناء معدل الاستخلاص المنخفض قليلاً بنسبة 70 في المائة من مذيب الميثانول والميثانول ، لم يكن هناك فرق معنوي في المذيبات الأخرى ، لذلك تم إجراء الاختيار المباشر. تم استخدام 50 بالمائة من الميثانول كمذيب تحت بند "تحديد المحتوى"سيستانشفي دستور الأدوية لجمهورية الصين الشعبية ، وتم تحضيره وفقًا لطريقة التحضير لمحلول الاختبار ذي الصلة ، ثم تم تخفيفه 5 مرات لتحديد مكونات كحول السكر.

3.5 كشف وتحليل العينات بقواعد مختلفة

في هذه الدراسة ، محتويات 5 مكونات في 58 دفعة منسيستانشالصحراءو 10 دفعات منسيستانشالصحراءتم تحديد المواد الطبية. الكسور الكتلية من البيتين والمانيتول والفركتوز والجلوكوز والسكروز في 58 دفعة منسيستانشالصحراءالعينات كانت 2.73 بالمائة -17. 65 بالمائة ، 2.46 بالمائة -16. 34 بالمائة ، 2.52 بالمائة {{1 {12}}}. 74 بالمائة ، 0.97 بالمائة -14. 06 بالمائة ، 3.15 بالمائة -27. 16 بالمائة ؛ كان المانيتول والفركتوز والجلوكوز 1. 00 بالمائة -13. 04 بالمائة ، 2.98 بالمائة -8. 85 بالمائة ، 1.09 بالمائة -5. 33 بالمائة في 10 دفعات منسيستانشلم يتم الكشف عن العينات ، على التوالي ، والبيتين والسكروز. تختلف محتويات المواد الطبية اختلافًا كبيرًا بين الدُفعات ، ولا توجد قاعدة يجب اتباعها ، مما يشير إلى ضرورة إنشاء معيار تحديد المحتوى للتحكم في جودة المواد الطبية. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن لهذه الطريقة أن تميز بشكل فعال نوعين منسيستانشالنباتات الأساسية ، وهيسيستانشلا يحتوي على البيتين والسكروز ، بينما محتوى هذين المكونين أعلى فيCistanche Deserticola. يوفر هذا أيضًا أساسًا لتحليل الاختلافات في الملمس والموئل بين المادتين الطبيتينCistanche Deserticola. مقارنة بالمواد الطبية لـCistanche Deserticola، الملمس أكثر ليونة ، وهو معروف محليًا باسم "سوفت دايون" ، بينماسيستانشيسمى "تشاي دايون" لاحتوائه على السكروز (3.15 في المائة ~ 27.16 في المائة). ).Cistanche Deserticolaيتم توزيعها بشكل رئيسي في Alxa في منغوليا الداخلية ، بينماسيستانشيتم توزيعها بشكل رئيسي في منطقة هوتان في شينجيانغ ، حيث تكون درجة الحرارة أعلى من تلك الموجودة في منطقة ألكسا ، وغالبًا ما يتم استخدام الري بالتنقيط في المنطقة المحلية ، ولكن بمجرد انخفاض درجة الحرارة ،سيستانشستعاني من أضرار جسيمة. أضرار التجميد ، من ناحية ، لها علاقة معينة بمحتواها المائي العالي ، ومن ناحية أخرى ، لها علاقة بالمكونات التي تحتويها. البيتين 243 هو مادة تعديل تناضحي مهمة ، والتي تلعب دورًا مهمًا في تعزيز مقاومة الإجهاد للنباتات ، مثل مقاومة الملوحة والجفاف ودرجات الحرارة المنخفضة والضوء القوي. إنه على وجه التحديد بسبب المحتوى العالي من البيتين الموجود فيCistanche Deserticolaأن لديها مقاومة أفضل للملح والقلويات والجفاف وأضرار التجميد منسيستانش، ولها توزيع واسع نسبيًا.

3.6 تحليلسيستانشالصحراءعينات من أصول مختلفة

من بين 58 دفعة صحراويةcistancheعينات المواد الطبية ، تم إنتاج 45 دفعة من Alxa League ، منغوليا الداخلية ، 3 دفعات من Wangyedi (مقاطعة Dengkou) ، منغوليا الداخلية ، ودفعة واحدة غير معروفة. تحتوي جميع دفعات المواد الطبية البالغ عددها 49 على محتويات مختلفة من 5 مكونات. ومع ذلك ، لا يوجد فرق كبير. قد يكون سبب التحليل هو أن المواد الطبية يتم إنتاجها جميعًا في نفس المنطقة الصحراوية ، وأن البيئة والبيئة الجغرافية متشابهة ، وأن جودة المنتج موحدة ومستقرة نسبيًا. هناك 3 دفعات منتجة في مقاطعة Minqin و Gansu و 6 دفعات من Xinjiang. وفقًا للتحليل في الشكل 2 ، مقارنة بالمواد الطبية المنتجة في منغوليا الداخلية ، ينعكس الاختلاف الرئيسي في محتوى الفركتوز والسكروز. كان محتوى السكروز في المواد الطبية أعلى نسبيًا ، ولكن نظرًا لقلة العينات من الأصلين ، يجب التحقق من هذا الاستنتاج من خلال جمع المزيد من العينات. 3.7 ملخص

في هذه الدراسة ، تم إنشاء HPLC Wang ISD من أجل التحديد المتزامن لـ 5 مكونات نشطة من المسهلات ، والتي قدمت طريقة أكثر ملاءمة وفعالية ودقة لمراقبة جودةCistanche Deserticola، وقدمت أساسًا لتحسين معايير الجودة ومواصلة تطويرسيستانشالصحراء. إشارة ذات مغزى.

مراجع

【1】 لجنة دستور الأدوية الحكومية. دستور الأدوية في جمهورية الصين الشعبية: A 【M】. بكين: مطبعة الصين للعلوم الصيدلانية والتكنولوجيا ، 2015 ؛ 135.

【2】 Song Zhihong، Lei Li، Tu Pengfei. تقدم البحث في النشاط الدوائي لـسيستانشمعرض. طب الأعشاب الصيني، 2003 ، 34 (9) ؛ 113415.

【3】 شيويه هايان. جياو دانيوان ، ياو يونيو. حالة البحث عن التأثيرات الدوائية للجلوكوزيدات الكلية في الكزبرة [J]. المجلة الصينية لعلم الصيدلة السريرية ، 2018 ، 34 (4): 486-488.

【4】 آن تشونا ، تشانغ هونغ نينغ ، بو شياو بينغ. تقدم البحث في علم الأدوية العصبيةCistanche Deserticolaمعرض [J]. المجلة الصينية للصيدلة ، 2011 ، 46 (12): 887-890.

【5】 جاو يوهونغ ، كي زونجي. تقدم البحث في التأثيرات الدوائية لـCistanche Deserticolaفي علاج مرض الزهايمر []. مجلة شنغهاي للطب الصيني التقليدي ، 2018 ، 52 (1): 109-112.

【6】 Zhang Baishun و Zhao Xuewen و Chen Shuanghou وآخرون. تأثير ملين للأجزاء المعزولة منCistanche Deserticolaالبحث التجريبي □. المجلة الصينية للطب الصيني التقليدي ، 2003 ، 10 (1I1): 31-32.

【7】 Zhang Baishun و Chen Shuanghou و Zhao Xuewen وآخرون.Cistanche Deserticolaاستخراج galactitol دراسة الاستجابة للجرعة على عمل البراز [J]. المجلة الصينية للطب الصيني التقليدي ، 2003 ، 10 (12): 28-29.

【8 ، جاو يونجيا ، جيانغ يونغ ، داي فانغ ، وآخرون. بحث عن المواد الطبيةCistanche Deserticolaلبحوث المسهلات [J]. الطب الصيني الحديث في الصين ، 2015 ، 17 (4): 307-311.

【9 ، باو تشونغ ، كاي هونغ ، جيانغ يونغ ، وآخرون. ثلاثة أنشطةCistanche Deserticolaتحت عوامل مؤثرة مختلفة التحليل الكمي للمكونات J. الصينية طب الأعشاب ، 2013 ، 44 (22): 32233230.

【10】 باو تشونغ ، كاي هونغ ، جيانغ يونغ ، وآخرون. تحديدCistanche Deserticolaبواسطة HPLCEISD Content of Galactitol.Journal of Pharmaceutical Analysis، 2007، 27 (7): 1004-1006.

11】 Zhao Kuijun و Liang Lijuan و Bi Dan وآخرون. تحديد HPLCELSDسيستانشوأنبوب محتوى الجالاكتيتول فيسيستانش[J]. المجلة الصينية للطب الصيني التقليدي ، 2012 ، 19 (8): 52-54.

【12】 وانغ جويبينج ، وشويه شياومين ، ولو تشاو ، وآخرون. تأثير البيتين على تحسين مقاومة الإجهاد النباتي وآلية عملها. Jiangxi Agricultural Journal، 2014 ، 26 (8): 2226.

【13】 وانغ كينجي ، وانغ لي. مراجعة لبحوث جينات مقاومة البرد في النبات. الاقتصاد الريفي والتكنولوجيا ، 2018 ، 29 (8): 23-25.