تحديد الأدوية المعززة للجنسين تمت إضافتها بشكل غير قانوني في منتجات الرعاية الصحية من قبل TLC-Niｒs التكنولوجيا المشتركة

خلاصة:لإنشاء نموذج الكشف عنالمخدرات تعزيز الجنستمت إضافتها بشكل غير قانوني بواسطة كروماتوجرافيا الطبقة الرقيقة (TLC) والطيفي القريب من الأشعة تحت الحمراء (NIｒ) مجتمعة ، من أجل التحليل النوعي والكمي السريع للعقاقير المضافة بشكل غير قانوني فيمنتجات الرعاية الصحية． مع الهـ محتوى الأدوية الكيميائيةيتم تحديد منتجات الرعاية الصحية بواسطة طريقة HPLC كقيمة مرجعية． تم استخدام TLC في الدراسة． تم استخدام هيدروكسيد الكحول ثلاثي كلورو ميثيل-ميثيل-1 0 ∶ 1 ∶ 0． 1) كمذيب نامي وتم اكتشاف اللوحة تحت مصباح فوق البنفسجي． تم جمع الطيف من بقع المكونات الكيميائية على TLC بواسطة Niｒs． تم إنشاء النموذج النوعي والكمي السريع للعقاقير الكيميائية باستخدام تحليل الانحدار الجزئي المربعات الصغرى (PLS) مع طريقة التحقق من صحة المتقاطع． والتحقق من صحة النموذج． أنشأت طريقة تحليل HPLC مع درجة فصلية أفضل ونطاق خطي واسع． أنشأت نماذج تحليل TLC-Niｒs من Sildenafil و Noracetildenafil مع نطاق خطي عريض ، والنتائج الأفضل والمتوقعة． كان معامل الارتباط (ｒ2) ، وخطأ متوسط ​​جذر التحقق من صحة المعايرة (ｒmsecv) وخطأ متوسط ​​الجذر للتنبؤ (ｒmsep) {{1 0}}． 984 ، 0． 0 85 و 0． 081 ؛ 0． 982،0． 098 و 0． 087 ، على التوالي． باستخدام نموذج TLC-Niｒs ، تم اكتشاف 9 دفعات من 10 دفعات من منتجات تعزيز الجنس لإضافة sildenafil ومعدل غير مؤهل قدره 90 ٪ ، وكان متوسط ​​الانحراف النسبي لمحتوى sildenafil و noracetildenafil من المتنبأ 1． 86 ٪ ، 1． 96 ٪ ، على التوالي． أظهرت النتائج أن نماذج تحليل TLC-Niｒs يمكن استخدامها للمكونات الكيميائية المذكورة أعلاه التحديد السريع في منتجات تعزيز الجنس． الطريقة مع محددة وبسيطة． التي وفرت أفكار التحديد السريع للعقاقير غير القانونية المضافة في منتجات الرعاية الصحية．

 

مكملات العشبية الطبيعية للأداء الجنسي

 

الكلمات الرئيسية: منتجات الرعاية الصحية؛ أضيفت بشكل غير قانوني. tlc-niｒs ؛ HPLC ؛ منتج تعزيز الجنس

 

مع زيادة وعي الجمهور بالرعاية الصحية ، ينمو الطلب على المنتجات الصحية ، وخاصة المنتجات الصحية المسمى الطب الصيني التقليدي. تعد المنتجات الصحية مصطلحًا شائعًا للأطعمة الصحية ، والتي تسمى المكملات الغذائية في الخارج. أنها ليست أدوية ولها وظيفة تنظيم الوظائف البشرية. يتم استخدامها من قبل مجموعات محددة من الناس ، ولكن لا تهدف إلى علاج الأمراض [1]. في مواجهة إغراء الأرباح المرتفعة ، يضيف البائعون غير الشرعيين جرعات مفرطة من المواد الخام الكيميائية الرخيصة مع آثار جانبية واضحة للمنتجات الصحية لتعزيز فعالية المنتجات. وقد أدى هذا إلى تعطيل سوق المنتجات الصحية في بلدي إلى حد كبير وتشكل تهديدًا خطيرًا لصحة الناس. على سبيل المثال ، في عام 2009 ، أضاف المنتج الصحي المساعد في منطقة شينجيانغ "كبسولة تانغزفينغ" جرعات مفرطة من جراب الأدوية الكيميائية المحظورة ، مما تسبب في العديد من الوفيات. في عام 2014 ، أضافت "كبسولة فقدان الوزن من شيانشي" في مقاطعة شانشي الأدوية الكيميائية المحظورة سيبثرامين وسيلدينافيل ، مما تسبب في الحصول على ردود فعل سلبية أو حتى يموت. في السنوات الأخيرة ، في الفحص العشوائي وتقييم المنتجات الصحية ، تبين أن الشركات المصنعة غير القانونية أضافوا جرعات مفرطة من السيلدينافيل إلى منتجات الصحة الجنسية والمستحضرات الصحية للطب الصيني التقليدي لخداع المستهلكين ، وتعرضوا للخطر بشكل خطير على صحة المستهلكين [2،3] ؛ ظواهر مماثلة مثل الجرعات المفرطة من الأدوية الكيميائية المحظورة مثل الفينافيل والبيغوانيدات والفوروسيميد والفينولفثالين في الصحة الجنسية ، ظهرت المنتجات الصحية نقص السكر في الدم وفقدان الوزن في تيار لا نهاية له ، وأصبح إخفاء الإضافة أعلى بشكل متزايد [4،5] ؛ مثل هذه الظواهر غالبا ما تحدث في الخارج [6]. تستحق هذه الأفعال غير القانونية ذات التأثير الواسع النطاق والأذى الكبير النظر العميق من قبل السلطات التنظيمية للمخدرات ، ومن المهم بشكل خاص تطوير أساليب أخذ العينات والكشف عن السوق السريعة.

حاليًا ، تشمل طرق الكشف المستخدمة للإضافة غير القانونية للأدوية الكيميائية في الأدوية الصينية التقليدية والمنتجات الصحية بشكل أساسي ، كروماتوجرافيا طبقة رقيقة (TLC) [7] ، كروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء (HPLC) [8] (روبية) [11].
من بين طرق الكشف المختلفة التي تم الإبلاغ عنها ، تمت دراسة LC-MS و GC-MS و IMS أكثر ، ولكن بسبب ارتفاع سعر الأدوات والعملية المعقدة ، ليس من السهل الترويج ويصعب تعميمها في المناطق الحضرية والجبال مع التنمية الاقتصادية المتخلفة نسبيًا. TLC هي واحدة من الطرق التقليدية الأربعة لتحديد المخدرات. إنه سريع وبسيط وله آثار فصل جيدة. يستخدم على نطاق واسع في تحديد النوعية والكمية للعقاقير. ومع ذلك ، فإن عيوبها هي أنه يجب أن يكون لها مواد مرجعية أو مواد طبية مرجعية [12 ، 13]. بالقرب من التحليل الطيفي للأشعة تحت الحمراء (NIRS) تم تطويره في السنوات الأخيرة. يجمع معلومات امتصاص الاهتزاز والدوران من CH ، OH ، SH ، NH ، C=C و C=o من المادة المكتشفة في الطيف الأشعة تحت الحمراء القريبة للتحليل النوعي والكمي للمواد. يستخدم على نطاق واسع في الزراعة والبترول والصناعة الكيميائية والتبغ والغذاء. في الوقت الحاضر ، تم تطبيقه تدريجياً على الصناعات الصيدلانية والإشراف على الأدوية. لديها إمكانات تطور كبيرة في الكشف النوعي والكمي السريع والكمي للأدوية [14 ، 15].

لذلك ، تستخدم هذه الورقة الأدوات الشعبية الحالية وطرق الاختبار لإنشاء تقنية TLC-NIRS مجتمعة. أخذ منتجات الصحة الجنسية كمثال ، يتم إنشاء نموذج للكشف عن النوعية والكمي للإضافة غير القانونية للأدوية الكيميائية للصحة الجنسية المحظورة. يمكن استخدامه بكفاءة وبسرعة وببساطة لفحص واكتشاف إضافة الأدوية الكيميائية المحظورة في المنتجات الصحية في السوق ، مما يقلل من تكلفة الكشف.

1 أدوات واختبار المخدرات

1.1 الأدوات

فورييه تحويل الموتر 37 niｒ (Bruker ، ألمانيا) ، Opus 5. 0 برنامج التحليل ؛ LC -20 في كروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء (Shimadzu ، Japan) ، LC Solution Chromatography Workstation ؛ BS224S التوازن التحليلي الإلكتروني (Sartorius ، ألمانيا) ؛ Silica Gel GF254 صفيحة طبقة رقيقة (شركة تشينغداو المحيط الحيوي ، المحدودة).

 

1.2 اختبار الأدوية

تم شراء Sildenafil (510068-201401 ، 99.9 ٪) و narodenafil (520039-201902 ، 96.5 ٪) من معهد أبحاث الغذاء والدواء في الصين ، وكانت الهياكل موضحة في الشكل 1. كانت الميثانول خالصًا من الناحية الكروماتوغرافية ، كانت المياه فائقة ، ومياه فسفورية. وكانت عينات صحية عينات السوق.

 

الشكل 1 هياكل الأدوية الكيميائية المعززة بالجنس

 

2 طرق ونتائج

2. 1 إعداد الحل المرجعي وحل العينة

تحضير الحل المرجعي: خذ ما يقرب من 25 ملغ من Sildenafil و Narendenafil على التوالي ، ووزنها بدقة ، ووضعها في قارورة حجمية 5 مل ، وحلها في الميثانول لإعداد محلول مخزون مرجعي مختلط يبلغ حوالي 5 ملغ/مل لكل منهما ؛ ثم خذ ما يقرب من 5 ملغ من Sildenafil و Narendenafil على التوالي ، ووزنها بدقة ، ووضعها في قارورة حجمية 5 مل ، وحلها في الميثانول لإعداد محلول مرجع تعريف واحد حوالي 1 ملغ/مل لكل منهما.

تحضير محلول العينة: خذ جرعة هذا المنتج مرة واحدة ، ضعه في قارورة حجمية 5 مل ، وأضف الميثانول والموجات فوق الصوتية لمدة 3 {6}} دقيقة (100 واط ، 56 كيلو هرتز) ، تبردها ، وأضف الميثانول إلى العلامة ، ومرشح للحصول على المرشح. عند تحديد المحتوى ، قم بقياس 1 مل بدقة من كل محلول عينة ، وحلها في المرحلة المتنقلة إلى 25 مل ، وتصفيةه مع غشاء مرشح 0.45 ميكرون. نظرًا لأن تركيزات الكتلة للمكونات المكتشفة في العينات الإيجابية (المنتجات الصحية ذات الأدوية الكيميائية المحظورة) تختلف اختلافًا كبيرًا ، يمكن زيادة حجم أخذ العينات بشكل مناسب أو يمكن تخفيف محلول العينة بشكل مناسب لإحداث تركيز الكتلة النهائي داخل النطاق الخطي.
تحضير محلول العينة الإيجابي: نظرًا لعدم رسم عينة إيجابية لـ Naringenfil ، عينة فارغة (كبسولة Huangjingbajitian ، تم أخذ بيولوجيا Luoyang Kangti ، كانت نتيجة الاختبار سلبية) مرة واحدة ، وتم إضافة محلول مرجعي لـ Naringenfil المخفف بشكل مناسب. تم تحضير محلول العينة الإيجابية وفقًا لطريقة التحضير تحت محلول العينة ، بحيث تم تحضير تركيزات الكتلة من naringenfil في محلول العينة الإيجابي حوالي 5 و 7.5 و 10 ملغ/مل ، على التوالي ، و 4 و 3 و 3 نسخ من كل تركيز الكتلة بالتوازي.

2. 2 الحالات الكروماتوغرافية والطيفية

2. 2. 1 ظروف كروماتوغرافية HPLC

تم استخدام Phenomenex ODS C18 (25 0 mm × 4. 6 مم ، 5μm) عمود كروماتوجرافي ؛ تم استخدام 45 ٪ من الميثانول (أ) -55 ٪ 0. 3 ٪ محلول مائي حمض الفوسفوريك (ب) كمرحلة متنقلة للطفولة لمدة 30 دقيقة ؛ كان معدل التدفق 1 مل/دقيقة ، وكان طول الموجة الكشف 290 نانومتر ؛ كانت درجة حرارة العمود 40 درجة. وكان حجم الحقن 10 ميكرولتر.

 

2. 2. 2 ظروف كروماتوغرافية TLC

تم استخدام لوحة كروماتوجرافيا طبقة رقيقة من السيليكا ، وتم استخدام الكلوروفورم-ميثانول الأمونيا (1 {4}}: 1: 0. 1) كمذيب نامي للتنمية والتبخر. بعد التجفيف في مجفف لمدة ساعة واحدة ، تم فحص العلامة تحت مصباح الأشعة فوق البنفسجية 254 نانومتر (انظر الشكل 2).

 

2. 2. 3 شروط الاستحواذ NIRS

تم استخدام مسبار الألياف الصلبة Bruker NIRS للقياس ، مع نطاق رقم الموجة 12 ، 000 إلى 4 ، 000 cm -1 ، 64 فحوصات ، دقة 16 سم -1 ، درجة حرارة من 10 إلى 30 درجة ، وثقة 35 ٪ ± 5 ٪. تم استخدام لوحة طبقة رقيقة من السيليكا GF254 الفارغة كمرجع ، وتم جمع الطيف بعد طرح الخلفية. تم قياس كل بقعة مكون كيميائي بالتوازي 5 مرات ، وتم حفظ معلومات NIRS.

 

2.3 إنشاء طريقة تحديد محتوى HPLC

2.3.1 التحقيق في العلاقة الخطية

2. 0 مل من محلول الأسهم المرجعية المختلطة (sildenafil 5.25 mg/ml ؛ narcolepsy 5.15 mg/ml) تم استنشاقه بدقة ومتخفى إلى 1 0 ml مع methanol ، ثم {9}}. 1. 0 ، 1.5 ، 2. {{2 0}} ، 2. 0 ، 2.5 ، 3. {{3 0} ، 3.5 ، 4. {34} ، 5. 7. {{4 0}} ، 8. 0 ، 9. 0 ، 1 0. 13. 0 ، 14. {{6 0}} ، 15. 0 ، 16. 0} ، 17. 0 ، 18. 2 0. 0 ، 21. {{8 {82}}} ، 22. 26. 0 ، 27. 0 ، 28. 0 ، 29. {{1 {{1 {1 {{1 0}} 36.0 ، 37.0 ، 38.0 ، 39.0 ، 40.0 ، 41.0 ، 42.0 ، 43.0 ، 44.0 ، 5 مل ، يذوب في المرحلة المتنقلة وتصل إلى 5 مل على التوالي ، هز جيدا.
وفقًا للظروف الكروماتوغرافية تحت "2.2.1" ، تم إجراء تحليل للعينة ، وتم تحديد مساحة الذروة ، وتم حساب معادلة خط الانحدار مع مساحة الذروة لكل مكون كإحداثي (y) وتركيز الكتلة للمادة المرجعية كـ abscissa (x): sildenafil هو y=3 {{}}=0. 9989 ، النطاق الخطي 0. 0525 ~ 1.05 ug ؛ naphthol هو y=1 × 106x -3 184. 4 ، r=0. 9999 ، النطاق الخطي 0.0515 ~ 1.03 ug. أظهرت النتائج أن المواد المرجعية أعلاه لديها خطية جيدة داخل النطاقات الخطية الخاصة بكل منها.

 

2.3. 2 الدقة والاستقرار والتكرار واختبار الاسترداد

خذ الحل المرجعي المختلط تحت "2.3.1" والعينة الفارغة (Huangjingbajitian Capsule ، Luoyang Kangti Biological ، نتيجة الاختبار سلبية) وإعداد 6 حلول عينة تحتوي على Sildenafil و Nardenafil بالتوازي وفقًا للطريقة "2.1". وفقًا للظروف الكروماتوغرافية تحت "2.2.1" ، تم حقن الحل المرجعي المختلط 6 مرات باستمرار للدقة ؛ تم حقن أحد حلول العينة في 0 و 3 و 6 و 9 و 12 و 24 ساعة للاستقرار ؛ تم تحضير 6 حلول عينة بالتوازي للتكرار والانتعاش ، وتم حقن كل عينة مرة واحدة. تم تحديد مناطق الذروة في Sildenafil و Nardenafil ، وتم حساب الاسترداد وقيمة RSD. النتائج كان متوسط ​​معدلات الاسترداد من Sildenafil و Nardenafil 100. 16 ٪ ، 100. 49 ٪ ؛ كانت قيم RSD جميعها أقل من 3 ٪ (N=6) ، مما يشير إلى أن الأداة كانت لها دقة جيدة ، وكان محلول العينة مستقرًا في غضون 24 ساعة ، وكانت الطريقة تعافي جيد وتكرار.

 

2.3.3 تحديد المحتوى

نضح بدقة كل حل عينة ، حقن وتحليل وفقًا لظروف الكروماتوغرافية تحت "2.2.1" ، قم بقياس 3 مرات لكل دفعة ، وتسجيل مساحة الذروة ، وحساب المحتوى. أظهرت النتائج أنه من بين الدُفعات العشرة لعينات الصحة الجنسية ، تم العثور على 9 دفعات تحتوي على Sildenafil المخدرات الكيميائية المحظورة ، وتنوعت الجرعة المضافة بشكل كبير. وكان معدل الكشف 90 ٪. وترد النتائج في الجدول 1 والشكل 3.

 

الجدول 1 نتائج تحديد المواد المضافة بشكل غير قانوني في 10 منتجات تعزيز الجنس (n=3)

 

عينة	الشركة المصنعة	عينة الوزن	المحتوى (ملغ/الوقت)
مستخلص زهرة الذهب	جامعة غرب الصين الزراعية	1 × 0.88 g	58.79 ± 1.03
طارد الحشرات	جامعة هونغ كونغ للعلوم والتكنولوجيا	2 × 0.50 g	73.62 ± 0.21
البابونج الألماني	هايون البيولوجية	2 × 0.50 g	22.47 ± 0.23
ندى الصباح الباكر	جامعة هونغ كونغ للعلوم والتكنولوجيا	2 × 0.50 g	8.90 ± 0.03
مرارة	الولايات المتحدة الأمريكية الموئل	2 × 0.50 g	61.83 ± 0.48
أ. النيجر	جامعة غرب الصين الزراعية	2 × 0.50 g	45.20 ± 0.04
موضوع الذهب	جامعة هونغ كونغ للعلوم والتكنولوجيا	2 × 0.50 g	لم يتم الكشف عنها

 

الشكل 3 HPLC من 10 منتجات تعزيز الجنس

 

2.4 إنشاء نموذج نوعي TLC-NIRS للأدوية الكيميائية للصحة الجنسية

2.4.1 جمع المعلومات الطيفية

وفقًا للشروط الواردة في "2.2.3" ، تم جمع NIRs للبقع المرجعية المحددة بعد التطوير على لوحة الطبقة الرقيقة TLC على التوالي. كانت أحجام المحلول المرجعية المختلطة هي 1 و 2 و 5 و 10 و 15 و 20 و 25 و 30 و 35 و 40 و 45 و 50 ميكرولتر ، وكانت أحجام محلول العينة 2 و 5 و 10 ميكرولتر ، على التوالي. تم جمع كل بقعة مرجعية من المرجع المختلط والعينة ذات الأحجام الموضعية المختلفة 5 مرات ، ويظهر مخطط تراكب NIRS في الشكل 4. في التجربة ، تم اختيار أطياف المرجع المختلط مع أحجام بقعة مختلفة كمجموعة من المعايرة ، وكانت أطياف العينات التي تحتوي على مجموعة مختلفة من مجموعة الأطياف.

الشكل 4 الأطياف الأصلي من الأدوية الكيميائية