الاختلافات في التركيب والفعالية الطبية للمنتجات الخام ومنتجات النبيذ المعالجة بالبخار من Cistanches Herba

خلاصة:

موضوعيلمقارنة التغيرات في التركيب الكيميائي والفعالية الطبية لـ Roucongrong (Cistanches Herba) قبل وبعد المعالجة، وذلك لتوضيح مبدأ الطبخ مع النبيذ.

تم تطبيق طرق LC-MS لتحديد أنواع التركيب الكيميائي قبل وبعد تحضير Cistanches Herba، بالإضافة إلى التحليل الإحصائي متعدد المتغيرات للعثور على التباين في المكونات قبل وبعد الطهي بالنبيذ. تم إثبات اختلاف الفعالية من خلال نموذج الفئران لنقص يانغ الكورتيزون المهدرج.

نتائجتم التعرف على إجمالي 45 مكونًا كيميائيًا منهاعينات Cistanches Herba; ساهمت المركبات في حدوث الفروق بينCistanches Herba و Cistanches Herba المطبوخ بالنبيذنكونإشنكوسيد، فيرباسكوسيد، إيزواكتيوسايد و توبولوسيد ب؛ إن إجمالي مستخلص جليكوسيدات الفينيليثانويد من Cistanches Herba له تأثير أفضل على تحسين نموذج الفئران المصاب بنقص اليانغ الكلوي مقارنة بـ Cistanches Herba المطبوخ بالنبيذ. الاستنتاج: يتم تغيير تركيبة Cistanche بعد طبخها مع النبيذ، وقد تم تعزيز التأثير على نقص يانج الكلى. قد تكون مكونات التحول من Cistanches Herbato المطهية بالنبيذ Cistanches Herba مكونات نشطة تعزز الكلى وتدعم اليانغ.

الكلمات الرئيسية: سيستانشس هربا; مطهي النبيذ Cistanches Herba;نقص يانغ الكلى;echinacoside;com.verbascoside; إيزواكتيوسايد؛ توبولوسيد ب

عشب سيستانش عالي الجودة للبيع

الخدمة الداعمة لـ Wecistanche

البريد الإلكتروني:wallence.suen@wecistanche.com

واتساب/هاتف:+86 15292862950

يُعرف باسم "الجينسنغ" ويتم توزيعه بشكل رئيسي في منغوليا الداخلية ونينغشيا (أزوتشي) وقانسو (تشانغما) وشينجيانغ ومناطق أخرى [1]. Cistanche دافئ بطبيعته، حلو ومالح في الطعم، ويدخل في الكلى والأمعاء الغليظة. وله آثار تغذية الكبد والكلى، وينفع الجوهر والدم، ويرطب الأمعاء، ويخفف الإمساك. ويمكن استخدامه لنقص يانغ الكلى والعجز الجنسي والعقم وألم الخصر والركبتين وضعف العضلات والعظام وجفاف الأمعاء والإمساك [2]. تظهر الأبحاث الحديثة أن السيقان اللحمية ذات الأوراق القشرية لنبات السيستانش تحتوي بشكل رئيسي على مجموعة متنوعة من المكونات الكيميائية مثل جليكوسيدات فينيل إيثانول، وتربينات إيثر السيكلوبنتان وجليكوسيداتها، والقشور، والسكريات، وما إلى ذلك [3]، ولها تأثيرات دوائية متعددة مثل:مكافحة الشيخوخة,مضادات الأكسدة,مكافحة الخرف,مكافحة التعب، وترطيب الأمعاء وتخفيف الإمساك[٤].

بعد طهيه بالنبيذ، يتم تعزيز تأثير Cistanche على تقوية الكلى وتعزيز اليانغ. لم يتم شرح مبدأ المعالجة بشكل واضح. فان يانان وآخرون. [5-7] درس تأثيرات Cistanche على تغوط الفئران، ووظيفة المناعة، والناقلات العصبية المعوية والتعبيرات الجينية ذات الصلة قبل وبعد المعالجة. دا وآخرون. استخدم تأثير جليكوسيدات فينيل إيثانول قبل وبعد المعالجة لشرح مبدأ المعالجة؛ تشانغ تشاو وآخرون. [8] استخدم التغييرات في محتوى جليكوسيدات فينيل إيثانول قبل وبعد المعالجة لشرح مبدأ المعالجة؛ تشانغ شويون وآخرون. [9] استخدم التغييرات في محتوى البيتين قبل وبعد المعالجة لشرح تأثير المعالجة على Cistanche. تركز الأدبيات الموجودة حول معالجة Cistanche بشكل أساسي على علم الصيدلة، وتركز الأبحاث حول المكونات أيضًا على التغييرات في محتوى مكونات محددة، وتفتقر إلى دراسة منهجية لاختلافات المكونات. استخدمت هذه التجربة تقنية قياس الطيف الكتلي السائل (LC-MS) جنبًا إلى جنب مع التحليل الإحصائي متعدد المتغيرات لتحديد المكونات الكيميائية في السيستانش، للعثور على علامات الفرق بين السيستانش الخام والمنتجات المطهية بالنبيذ، ولدراسة الفرق في فعالية السيستانش. السيستانش الخام والمنتجات المطهية بالنبيذ من خلال نموذج الفئران لنقص يانغ الكلى الناجم عن الهيدروكورتيزون، وذلك لشرح الأساس المادي للCistanche في تنغيم الكلى وتعزيز اليانغومبدأ معالجة Cistanche المطبوخ بالنبيذ.

عشب سيستانش عالي الجودة للبيع

1 المواد

1.1 الأدوات

Ultimate 3000 UPLC-LTQ Orbitrap XL مصيدة أيون ترادفية للمجال الكهروستاتيكي عالية الدقة مطياف الكتلة (Thermo Fisher Scientific، الولايات المتحدة الأمريكية)، محطة عمل Theraio Xcaliber؛ ميزان إلكتروني BT125D 1/100000 (نظام أجهزة سارتوريوس، ألمانيا)؛ منظف ​​بالموجات فوق الصوتية KQ500DE CNC (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); جهاز تشتيت عالي السرعة XHF-D (Guangzhou Hu Ruiming Instrument Co., Ltd.)؛ قارئ الصفيحة الدقيقة Multiskan FC (Thermo Scientific)؛ HC -3518 جهاز طرد مركزي عالي السرعة (Anhui Zhongke Zhongjia Scientific Instrument Co., Ltd.) ؛ BW-YLS-1 مسجل النشاط التطوعي متعدد الوظائف للفئران (Shanghai Ruanlong Technology Development Co., Ltd.).

1.2 المخدرات

مقياس الطيف الكتلي للميثانول (فيشر) ؛ حمض الفورميك بدرجة قياس الطيف الكتلي (جزء الكتلة 99٪، سيجما الدريخ)؛ الماء (ماء واتسون المقطر) ؛ Jinkui Shenqi Pills (شركة بكين تونغرنتانغ لتطوير التكنولوجيا المحدودة، مصنع الأدوية، رقم الدفعة 1701653)؛ ملح هيدروكورتيزون سكسينات الصوديوم (Tianjin Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd.، رقم الدفعة 011705067)؛ تم شراء مجموعة ديسموتاز الفائق الأكسيد (SOD) (رقم الدفعة 20170115) ومجموعة malondialdehyde (MDA) (رقم الدفعة 20170117) من Nanjing Jiancheng Biotechnology Co., Ltd.؛ تم تحديد هرمون التستوستيرون (T) والإستراديول (E2) في مركز فحص الجودة في تشينغداو كيتشوانغ، وتم تحديد الكرياتينين (CREA) ونيتروجين اليوريا في الدم (BUN) في مركز التحليل والاختبار بجامعة منغوليا الداخلية الطبية.

1.3 الحيوانات

تم شراء 100 فأر SD ذكر، وزنها 180-200 جم، من مزرعة Xinglong Experimental Animal Farm في منطقة Haidian، بكين، رقم الترخيص: SCXK (Beijing) 2016-0003. تمت الموافقة على هذه التجربة الحيوانية من قبل لجنة الأخلاقيات بجامعة بكين للطب الصيني، رقم الأخلاق: BUCM -4-2022091301-3095.

1.4 العينات

تم تحديد ست دفعات من Cistanche deserticola على أنها أصلية من قبل البروفيسور Li Xiangri من كلية الطب الصيني، جامعة بكين للطب الصيني، وتم استخلاصها من السيقان اللحمية المجففة مع أوراق حراشف Cistanche deserticola YC Ma، نبات من عائلة Orobanchaceae. وترد معلومات مفصلة عن العينات في الجدول 1.

الجدول بالحجم الكامل: ورقة معلومات لعينات Cistanches Herba

2 طرق

2.1 تحضير العينة

2.1.1 تحضير المنتجات الخام خذ نبات Cistanche deserticola النظيف، ثم قم بتليينه وتقطيعه إلى شرائح سميكة وتجفيفه.

2.1.2 تحضير منتجات مطهية النبيذ

خذ 100 جرام من شرائح Cistanche deserticola، وأضف 30 مل من نبيذ الأرز، واخلط جيدًا، واتركه على نار هادئة حتى يمتص النبيذ. قم بغليها في الماء لمدة 12 ساعة، ثم أخرجها واتركها تبرد قليلاً، ثم جففها. انظر الشكل 1 للاطلاع على عينات Cistanche deserticola الخام وعينات Cistanche deserticola المطهية بالنبيذ.

2.2 دراسة الفرق بين مكونات Cistanche deserticola قبل وبعد طبخ النبيذ

2.2.1 تحضير المحلول

خذ حوالي {{0}}.2 جم من مسحوق العينة الجافة (تمر عبر منخل شبكي) ووزنه بدقة، ثم ضعه في دورق حجمي بني سعة 50 مل، وأضف 25 مل من 50% ميثانول محلول مائي، يغلق بإحكام، يزن الكتلة، ينقع لمدة 30 دقيقة، يعالج بالموجات فوق الصوتية لمدة 40 دقيقة (قوة 250 واط، تردد 35 كيلو هرتز)، يبرد، يزن مرة أخرى، يضاف 50٪ من محلول مائي من الميثانول لتعويض الكتلة المفقودة، يهز حسنًا، دعنا نقف، قم بتصفية المادة طافية من خلال غشاء مرشح صغير الحجم بقطر 0.22 ميكرومتر، ثم ضع المادة المرشحة في زجاجة طور سائلة بنية اللون للحصول على المحلول.

عشب سيستانش عالي الجودة للبيع

2.2.2 الظروف الكروماتوغرافية

عمود كروماتوجرافي Waters ACQUITY UPLCTM BEH C18 (100 مم × 2.1 مم، 1.7 ميكرومتر)، درجة حرارة العمود 35 درجة؛ درجة حرارة حجرة العينة 10 درجة، حجم حقن العينة 3 ميكرولتر، الميثانول (A)-0.1% محلول مائي لحمض الفورميك (B) كطور متحرك، شطف متدرج: 0-4 دقيقة، 10%{ {13}}% ميثانول؛ 4-18 دقيقة، 26%-40% ميثانول؛ 18-24 دقيقة، 40%-100% ميثانول؛ 24-28 دقيقة، 100% ميثانول. وكان معدل تدفق الحجم 0.3 مل / دقيقة، وكان الطول الموجي للكشف 330 نانومتر.

2.2.3 شروط قياس الطيف الكتلي

تم استخدام مصدر التأين بالرذاذ الكهربائي (ESI)، ومسح وضع الأيونات السالبة، وكانت درجة حرارة الشعيرات الدموية 350 درجة، وكان معدل تدفق حجم الغاز الغمد 30 باربًا، وكان معدل تدفق حجم الغاز المساعد 10 باربًا، وكان جهد الرش 3 باربًا.

KV ، كان الجهد الشعري −35 V ، وكان جهد العدسة الأنبوبية −110 V ، وكان نطاق المسح m / z 100-1 000 ، وكان نظام جمع البيانات Xcalibur 2.1.

2.2.4 تحليل المكونات الرئيسية (PCA)

بعد الحصول على المصفوفة ثنائية الأبعاد لأزواج بيانات وقت الاحتفاظ الشامل الدقيقة، ستعرض لوحة العدادات جميع معلومات وقت الاحتفاظ الدقيقة المستوردة تلقائيًا، وسيتم استخدام طريقة PCA لوحدة الإحصائيات الموسعة للتحليل.

2.2.5 التحليل التمييزي للمربعات الصغرى المتعامد (OPLS-DA) يجمع نظام LCMS بين الفصل العالي للكروماتوغرافيا السائلة والحساسية العالية لقياس الطيف الكتلي. البيانات التي تم جمعها كبيرة جدًا، ويلزم إجراء تحليل إحصائي متعدد المتغيرات لمعالجة البيانات. يقسم OPLS-DA البيانات إلى مجموعتين ويستخدم نموذجًا إحصائيًا خاضعًا للإشراف للحصول على عدد كبير من الأطياف المتعامدة، والتي تظهر بوضوح الاختلافات بين مجموعتي العينات. في الشكل الإضافي S-Plot، تمثل كل نقطة زوجًا دقيقًا من بيانات وقت الاحتفاظ بالكتلة، ويمثل المحور السيني المتغير، وكلما كانت نقطة البيانات أبعد عن نقطة الصفر، زادت مساهمة النقطة في فرق العينة ; يمثل المحور Y الارتباط بين العينات في نفس مجموعة العينات، وكلما كان زوج بيانات الكتلة ووقت الاحتفاظ الدقيق أبعد عن نقطة الصفر، كان الارتباط أقوى. ولذلك، فإن أزواج بيانات وقت الاحتفاظ الدقيقة بالكتلة عند طرفي المنحنى على شكل S تمثل الأيونات المميزة الأكثر موثوقية من كل مجموعة عينة.

عشب سيستانش عالي الجودة للبيع

2.2.6 تحليل هيكل قياس الطيف الكتلي

بعد الحصول على الأيونات المميزة، تم إجراء تكوين العنصر ومطابقة المركب عن طريق حساب الكتلة الجزيئية النسبية الدقيقة والجمع بين قاعدة البيانات الموجودة والأدبيات ذات الصلة لتحديد المكونات التفاضلية.

2.3 دراسة الفرق في الفعالية قبل وبعد الطبخ بالنبيذ

2.3.1 تحضير مستخلص نبات Cistanche deserticola

تم استخلاص Cistanche deserticola (رقم الدفعة 160901) ومسحوق Cistanche deserticola المقابل المطهي بالنبيذ وفقًا للشروط الواردة في "2.2.1"، وتم ترشيحه بعد المعالجة بالموجات فوق الصوتية، وتكراره مرتين، وتم دمج المرشح، وتركيزه بالتقطير الفراغي، والتجميد. المجففة.

2.3.2 تجميع التجارب على الحيوانات وإدارة الأدوية

الشكل 1: Cistanches Herba A وCistanches Herba B المطبوخة بالنبيذ

(1) التجمع: تم منح الفئران حرية الوصول إلى الماء والنظام الغذائي. بعد أسبوع واحد من التغذية التكيفية، تم تقسيمهم عشوائيًا إلى 5 مجموعات (الجدول 2)، مع 10 فئران في كل مجموعة، وهي المجموعة العادية، المجموعة النموذجية، مجموعة Cistanche deserticola الخام (PR)، مجموعة Cistanche deserticola المطهية بالنبيذ (PW) والسيطرة الإيجابية على مجموعة Jinkui Shenqi Pill (JK). (2) النمذجة: باستثناء المجموعة الطبيعية، تم حقن المجموعات الأربع الأخرى جميعها بحقن هيدروكورتيزون سكسينات الصوديوم في العضل، بجرعة 20 ملغم / كغم، لمدة 14 يومًا متتالية. تم حقن المجموعة الطبيعية بنفس الجرعة من المحلول الملحي الطبيعي. تمت ملاحظة الحالة العامة للفئران في كل مجموعة لتحديد ما إذا كانت تظهر عليها أعراض مثل الخوف من البرد، وتفضيل الدفء، والأطراف الباردة، والبول الصافي والطويل، والظهر الملتف والمقوس، والشعر الباهت والفوضوي، والاكتئاب العقلي. وفي الوقت نفسه، تم قياس وزن الجسم، وعدد الأنشطة العفوية، وتناول الطعام، وتناول الماء، وإنتاج البول وغيرها من المؤشرات للفئران في كل مجموعة.

(3) الإدارة: تم حساب جرعة الفئران بناءً على الجرعة السريرية لحبوب جينكوي شينكي وCistanche deserticola. كانت جرعة كل مجموعة Cistanche deserticola 1.80 جم/كجم من حيث كمية الدواء الخام. تظهر الجرعة المحددة في الجدول 2. تم تحضير كل مستخلص من Cistanche deserticola وJinkui Shenqi Pills في محاليل ذات تركيز معين باستخدام الماء منزوع الأيونات. يتم إعطاء المحلول داخل المعدة كل يوم بحجم داخل المعدة قدره 10 مل / كجم لمدة 30 يومًا متتاليًا. تم إعطاء المجموعة الطبيعية والمجموعة النموذجية داخل المعدة بكمية متساوية من الماء منزوع الأيونات كل يوم. تم قياس وزن الجسم أسبوعيًا، وتم تعديل الحجم داخل المعدة وفقًا لوزن جسم الفئران. بعد تناول الدواء، تم صيام الفئران لمدة 12 ساعة. بعد التخدير البنتوباربيتال، تم جمع الدم من الشريان الأورطي البطني للكشف عن مؤشر المصل. تمت إزالة الكلى والخصيتين والبربخ والحويصلات المنوية والبروستاتا للكشف عن المؤشر ذي الصلة.