المتغيرات الجينية المانحة في إنترلوكين ‑ 6 وإنترلوكين 6 مستقبلات مرتبطة بالخزعة ثبت الرفض بعد زراعة الكلى
Feb 26, 2022
منذ أول نجاحزرع الكلىفي عام 1954زرع الكلىأصبح العلاج المفضل لمرضى المرحلة النهائيةمرض كلوي(ESKD) 1. ما وراء التطورات الجراحية في الأداءالكلىزرع ، كانت إضافة الأدوية المثبطة للمناعة بعد الزرع التي حسنت بقاءطعم الكلىمن شهور إلى سنوات. ومع ذلك ، فإن متلقي الزرع يصبحون دائمًا حساسين لعملية الزرع الخاصة بهم ، مما يؤدي إلى ضعف البقاء على قيد الحياة على المدى الطويلطعم الكلى2،3. في حين أن مثبطات المناعة التقليدية فعالة في إلغاء الاستجابات المناعية الحادة ، إلا أنها تعالج جزئيًا فقط التحسس - مما يسمح للمناعة الخلطية بالتشكل والتعجيل بفشل الطعم الخيفي على المدى الطويل. لمنع الرفضعمليات زرع الكلىلذلك من الضروري تطوير علاجات جديدة يمكن أن تعرقل تكوين التحسس 4. من خلال الجهود العلمية على مدار الخمسين عامًا الماضية ، تم إثبات أن الرفض الحاد والمزمن للطعم الخيفي ينجم عن مجموعة معقدة وديناميكية من الاستجابات المناعية الخيفية. تعتبر البروتينات المعدلة للمناعة المعروفة باسم السيتوكينات مهمة بشكل خاص في تنظيم كل من أذرع المناعة المؤيدة والمضادة للالتهابات. من بين جميع عائلات السيتوكين الفائقة ، يمكن القول إن الإنترلوكين 6 (IL -6) وأفراد عائلته يظهرون أعلى درجة من تعدد وظائف السيتوكين الوظيفي (الإجراءات البيولوجية المتعددة) والتكرار الخلوي (الإجراءات البيولوجية المشتركة) ، مع الأدوار الفسيولوجية والمرضية التي تتراوح من B تمايز الخلايا التائية والمناعة في المرحلة الحادة ، لتشكيل الدم وتكوين الأورام ، وإعادة تشكيل الأنسجة والعظام وتجديدها ، وحتى التطور المبكر للأنظمة العصبية والقلب والأوعية الدموية 5-8. على هذا النحو ، فإن نشاط IL {8}} الشاذ متورط في أمراض بما في ذلك متلازمة الاستجابة الالتهابية الجهازية ، واضطرابات المناعة المزمنة مثل التهاب كبيبات الكلى الهلالي ، ورفض الزرع ، ومرض الكسب غير المشروع مقابل المضيف ، والأمراض الروماتيزمية بما في ذلك التهاب المفاصل الروماتويدي والتهاب المفاصل مجهول السبب عند الأحداث ، وظروف التكاثر اللمفاوي مثل مرض كاسلمان 4 ،
سيحسن الكستانش الكلية / الكلية
حددت البيانات الناشئة دورًا رئيسيًا لـ IL -6 في الرفض بعد ذلكزرع الكلى4. من أجل تقدير دور IL -6 في إرسال الإشاراتطعم خيفي كلويالرفض ، من المفيد وضع سياق لتسلسل الإشارات أولاً حيث يمكن لـ IL -6 الإشارة من خلال ثلاثة مسارات منفصلة وتأثيرات متباينة بناءً على السياق والمسار أثناء اللعب (الشكل 1) 5،6،10. يُعرف الوضع الأول للإشارة بالإشارة الكلاسيكية (الشكل 1 أ) ، حيث يرتبط IL -6 بمستقبل IL -6 المرتبط بالغشاء (mIL -6 R) متبوعًا بتشكيل معقد مع بروتين سكري مرتبط بالغشاء 130 (gp130) لتحفيز نقل الإشارات في اتجاه مجرى النهر والتعبير الجيني. تحدث إشارة التحويل (الشكل 1 ب) بدلاً من ذلك عندما ينشطر IL -6 R من غشاء الخلية 10 ، بينما يلتقط IL -6 R (sIL -6 R) القابل للذوبان IL {{ 18}} ، معقد مع gp130 مرتبط بالغشاء ، و phosphorylates محولات الإشارة داخل الخلايا. نظرًا لأن gp130 المرتبط بالغشاء يتم التعبير عنه في كل مكان ولكن لا يتم التعبير عن mIL -6 R ، يمكن للإشارات العابرة أن تسهل استجابة IL -6 في الخلايا التي لا تستجيب عادةً لـ IL -6 عبر IL {{26} } / sIL -6 مجمعات R ، تعمل على توسيع الوظائف الفسيولوجية والمرضية لـ IL -6 7. الأهم من ذلك ، أن الشكل القابل للذوبان من gp130 موجود بشكل طبيعي في التداول مع تقارب مماثل لمركب IL -6 / sIL -6 R مثل gp130 المرتبط بالغشاء ويمكن أن يعمل كمثبط محدد لمسار الإشارة العابرة ( الشكل 1 ب) 11. الشكل الثالث والأخير من إشارات IL -6 هو العرض التقديمي العابر حيث يلتقط mIL -6 R على خلية واحدة IL -6 ويرتبط بـ gp130 المرتبط بالغشاء على خلية أخرى (الشكل 1C). في جميع أوضاع الإشارة هذه ، تعد فسفرة الرسل الثانوي خاصةً Janus kinase (JAK) ومحول إشارة ومنشط عائلات النسخ (STAT) أمرًا بالغ الأهمية لتفعيل التأثيرات التابعة لـ IL -6- 9،1
هنا ، استخدمنا علم الوراثة البشرية للتحقق مما إذا كان الحصار المفروض على تفاعل IL -6 / IL -6 R قد يمنح فائدة علاجية فيزرع الكلى. إن الأشكال المتعددة الأشكال للنيوكليوتيدات المفردة ذات الصلة بـ IL -6- (SNPs) التي درسناها هنا هي تعدد الأشكال A> C في IL6R (rs2228145 ؛ الشكل 1D) وتعدد الأشكال G> C في IL6 (rs1800795 ؛ الشكل 1E). يتسبب IL6R SNP في تعدد الأشكال الخطأ مما يؤدي إلى زيادة تركيزات sIL -6 R في الدورة الدموية (تثبيط مسار الإشارة العابرة) ، بينما يتسبب IL6 SNP في مستويات مرتفعة من تعبير IL -6 بسبب موقعه في منطقة المروج (الترويج لإشارات IL -6 عبر المسارات الثلاثة جميعها) 12. قيمت دراسات أخرى سابقًا دور متغيرات IL6 هذه فيزرع الكلى ،إيجاد ارتباطات بين متغيرات IL6 ونتائج الزرع 13،14. ومع ذلك ، فإن هذه الدراسات في الغالب بأثر رجعي ، ومحدودة في أساليبها الإحصائية ، وغير محسومة وبالتالي غير حاسمة بسبب العدد المحدود لعينات المرضى المدرجة في التحليلات. في هذه الدراسة ، نقدم إجابة حاسمة حول تأثير تعدد الأشكال في زراعة الكلى.
الكلمات الدالة:زرع الكلى مرض كلوي؛ طعم الكلى. كلوي. امراض الكلى
نتائج
محددات الخزعة - ثبت الرفض بعد زراعة الكلى.ما مجموعه 1271زرع الكلىتم تضمين أزواج المتبرع والمتلقي في هذه الدراسة مع خصائص المتبرع والمتلقي المدرجة في الجدول. كان متوسط المتابعة بعد الزرع 5.2 سنوات ± 5. 0 مع فترة متابعة قصوى تبلغ 16.7 عامًا. أثناء المتابعة ، طور 33.8 في المائة من المتلقين رفضًا مثبتًا بالخزعة. في السنة الأولى ، طور 390 متلقيًا رفضًا حادًا للخزعة ، في حين قدم 40 متلقيًا رفضًا مثبتًا بالخزعة بعد ذلك. من بين جميع الخصائص التي تم تقييمها ، ارتبط ما يلي بشكل كبير برفض الخزعة المثبت (الجدول 1) ؛ عمر المتلقي ، والجنس المتلقي ، ووقت نقص التروية الدافئ ، والعدد الإجمالي لعدم تطابق HLA ، وحدوث وظيفة الكسب غير المشروع المتأخرة (DGF).
يحمي المتغير الجيني الشائع في مستقبلات الإنترلوكين ‑ 6 من رفض الطعم الخيفي الكلوي.لتحديد المؤشرات الحيوية الجينية ذات الصلة في سياق الرفض ، اكتشفنا ما إذا كان متغير Asp358Ala في IL6R (rs2228145 A> C ، سابقًا rs8192284) مرتبطًا برفض الخزعة المثبت. ترددات النمط الجيني الملحوظ في المستلمين (n=1270 ؛ AA ، 34.3 بالمائة ؛ AC ، 51.4 بالمائة ؛ CC ، 14.2 بالمائة) والمتبرعين (n=1269 ؛ AA ، 35.6 بالمائة ؛ AC ، 5 {{23 }}. 6 في المائة ؛ CC ، 13.6 في المائة) كانت قابلة للمقارنة (P=0. 75). ومع ذلك ، كانت ترددات تعدد الأشكال IL6R في كل من المستلمين والمتبرعين أعلى بكثير مما تم الإبلاغ عنه بواسطة مشروع الجينومات 0 0 0 (P <0.0001) ،="" ولكن="" ليس="" عند="" مقارنتها="" مع="" المجموعة="" الأوروبية="" (p="0." 09)="" 15.="" أظهرت="" تحليلات="" البقاء="" على="" قيد="" الحياة="" في="" كابلان="" ماير="" أن="" تعدد="" الأشكال="" il6r="" في="" المتبرع="" كان="" مرتبطًا="" بشكل="" كبير="" بانخفاض="" خطر="" الرفض="" الحاد="" أثناء="" المتابعة="" (الشكل="" 2="" أ="" ،="" التصنيف="" اللوغاريتمي="" p="0" 003).="" بعد="" المتابعة="" الكاملة="" ،="" كان="" حدوث="" رفض="" الخزعة="" المثبت="" 38.9="" في="" المائة="" في="" مجموعة="" النمط="" الجيني="" المرجعي="" aa="" ،="" و="" 32.8="" في="" المائة="" في="" مجموعة="" النمط="" الوراثي="" ac="" متغاير="" الزيجوت="" ،="" و="" 24.9="" في="" المائة="" في="" مجموعة="" النمط="" الجيني="" cc="" متماثل="" الزيجوت="" ،="" على="" التوالي.="" في="" التحليل="" أحادي="" المتغير="" ،="" ارتبط="" il6r="" snp="" في="" المتبرع="" بمعدل="" خطر="" قدره="" 0.78="" لكل="" أليل="" c="" (95="" بالمائة="" -ci="" 0.67-0.90="" ؛="" p="0" 001)="" لرفض="" الخزعة="" المثبت.="" تم="" إعادة="" تقدير="" تحليلات="" البقاء="" على="" قيد="" الحياة="" لكابلان="" ماير="" لتعدد="" الأشكال="" il6r="" في="" المتبرع="" للمرضى="" الذين="" تم="" زرعهم="" في="" التسعينيات="" والألفينيات="" حيث="" تطور="" كبت="" المناعة="" بمرور="" الوقت="" وقد="" يؤثر="" ذلك="" على="" خطر="" الرفض.="" في="" هذه="" المجموعات="" الفرعية="" ،="" تم="" الحفاظ="" على="" الأهمية="" في="" المرضى="" الذين="" تم="" زرعهم="" في="" التسعينيات="" (الشكل="" s1="" ؛="" p="0." 016)="" ،="">
الشكل 1. رسم توضيحي لمسارات إشارات IL -6 وفحص تعدد الأشكال المتعلقة بـ IL -6-. يمكن أن تحدث إشارات IL -6 بثلاث طرق مختلفة. (للأغراض التخطيطية ، يتم عرض واحد فقط من كل مستقبل IL -6 وجزيء gp130.) (أ) تحدث إشارات IL الكلاسيكية -6 عندما يتفاعل IL -6 مباشرة مع IL المرتبط بالغشاء -6 R (mIL -6 R) و gp130 المرتبط بالغشاء (mgp130) إلى رسل ثانوي محدد gp داخل الهيولى فسفوريلات gp 130-. (B) IL -6 تحدث الإشارات العابرة بدلاً من ذلك عندما يلتقط IL -6 R (sIL -6 R) المنحل IL -6 ويشكل معقدًا مع mgp130 لتعجيل الإشارات الثانوية داخل الهيولى. والجدير بالذكر أن هذا الوضع من الإشارة يمكن تثبيطه بواسطة gp130 المنحل (sgp130) ، والذي له تقارب فقط لمركب IL -6 / sIL -6 R ويحيده عن طريق منع ارتباطه بـ mgp130. (ج) أخيرًا ، يحدث العرض التقديمي العابر لـ IL -6 عندما تلتقط خلية ثانوية تحمل mIL -6 R IL -6 وتقدمها إلى mgp130 على خلية مستهدفة لتحفيز الإشارات الثانوية داخل الهيولى في الخلية المستهدفة. لتقدير الدور المحتمل لـ IL -6- SNPs ذات الصلة فيزرع الكلىالمتلقين وزرع المتبرعينالكلىقمنا بتقييم العلاقة بين نتائج بقاء الزرع و (D) IL6R SNP rs2228145 A> C و (E) و IL6 SNP rs1800795 G> C ، على التوالي. يتسبب IL6R SNP في حدوث طفرة خاطئة في IL -6 R ، بينما IL6 SNP في منطقة المروج ويسبب متغيرًا داخليًا.
شوهد الاتجاه في المرضى الذين تم زرعهم في العقد الأول من القرن الحادي والعشرين (الشكل S1 ؛ P=0. 067). ومع ذلك ، وفقًا لنتائجنا السابقة ، ظل الأليل C لـ IL6R SNP في المتبرع وقائيًا ضد رفض الخزعة المثبت. في المستلمين ، كشفت تحليلات بقاء Kaplan-Meier عن عدم وجود ارتباطات بين IL6R SNP والرفض أثناء المتابعة (الشكل 2B ؛ رتبة السجل P=0. 15). لم يغير تحليل المجموعة الفرعية لجنس المتلقي أو نوع المتبرع هذه النتائج. لتقييم ما إذا كان عدم تطابق المتبرع والمتلقي مع IL6R SNP يزيد من خطر رفض الخزعة المثبت ،زرع الكلىتم تقسيم الأزواج إلى أربع مجموعات وفقًا لوجود أو عدم وجود الأليل C في المتبرع والمتلقي. على الرغم من أن تحليلات بقاء Kaplan-Meier كشفت عن اختلاف كبير في بقاء الكسب غير المشروع بين المجموعات الأربع ، إلا أن الأليل C لـ IL6R SNP في المتبرع ظل مرتبطًا بانخفاض خطر الإصابة بـ BPAR (الشكل S2 ، P=0. 004) . ومع ذلك ، فإن تأثير الأليل C في المتبرع كان أكبر في المتلقين الذين لم يمتلكوا هذا الأليل.
تم إجراء تحليل متعدد المتغيرات لضبط الإرباكات المحتملة (الجدول 2) ، بما في ذلك خصائص المتبرع (النموذج 2) ، وخصائص المتلقي (النموذج 3) ، ومتغيرات الزرع (النموذج 4). في تحليل انحدار كوكس ، ظل IL6R SNP في المتبرع مرتبطًا بشكل كبير برفض الخزعة المثبت بشكل مستقل عن المربكات المحتملة. أخيرًا ، أجرينا تحليلًا متعدد المتغيرات باستخدام إجراء اختيار متدرج للأمام باستخدام جميع المتغيرات المرتبطة بالرفض في التحليل أحادي المتغير (الجدول 3). في النموذج النهائي ، تم تضمين IL6R SNP في المتبرع ، وعمر المتلقي والجنس ، والعدد الإجمالي لعدم تطابق HLA ، و DGF. بعد التعديل ، ارتبط IL6R SNP في المتبرع بالرفض بنسبة خطر تبلغ 0. 73 لكل C-allele (95 بالمائة - CI 0. 62 - 0. {{ 17}} ، P <0. 001).="" ومن="" ثم="" ،="" فإن="" هذه="" النتائج="" تُظهر="" إجمالاً="" أن="" متغيرًا="" وظيفيًا="" شائعًا="" في="" جين="" il6r="" في="" المتبرع="" يرتبط="" بانخفاض="" معدل="" الرفض="" الحاد="" الذي="" أثبتته="" الخزعة="">زرع الكلى.
المتغير الجيني الشائع في الإنترلوكين ‑ 6 هو عامل خطر لرفض الطعم الخيفي الكلوي.بعد ذلك ، اكتشفنا ما إذا كان IL6 SNP في الموضع -174 في المروج (rs1800795 G> C) يؤثر على حدوث الخزعة-
الشكل 3. منحنيات كابلان ماير للبقاء الخالي من الرفض لـطعم الكلىوفقًا لوجود المتغير الجيني للإنترلوكين -6 في المتبرع أو المتلقي. البقاء على قيد الحياة خالية من الرفض التراكميالطعوم الكلويةوفقًا لوجود -6 تعدد الأشكال (IL6) في الموضع -174 في المروج (rs1800795 G> C) في (أ) المتبرع و (ب) المتلقي. تم إجراء تحليل مجموعة فرعية لجنس المتبرع وتم عرض البقاء على قيد الحياة التراكمي الخالي من الرفض وفقًا لوجود IL6 SNP في المتبرعين الذكور (C) و (D) الإناث المتبرعات. تم استخدام اختبار لوغاريتم رتبة لمقارنة حدوث الرفض المثبت الخزعة بين المجموعات.
الشكل 4. مخطط فين للحالة الوراثية IL6 و IL6R للمتبرع والمتلقي والأزواج. 1271 متبرع - متلقيزرع الكلىتم تحليل أزواج من أجل وجود تعدد الأشكال في إنترلوكين -6 (IL6) عندالموضع -174 في المروج (rs1800795 G> C) ومتغير Asp358Ala في مستقبل IL -6 (IL6R ، rs2228145 A> C ، سابقًا rs8192284). يصور مخطط Venn عددزرع الكلىأزواج بناءً على التركيب الوراثي (A) IL6R أو (B) IL6. بالإضافة إلى ذلك ، تم وصف النمط الجيني المشترك لـ IL6 و IL6R في (C) المتبرع و (D) المتلقي.ثبت الرفض. ترددات النمط الجيني الملحوظة في المستلمين (n {0}}: GG ، 37.8 بالمائة ؛ GC ، 47.0 بالمائة ؛ CC ، 14.9 بالمائة) والمتبرعين (n=1260: GG ، 33.1 بالمائة ؛ AC ، 49.3 بالمائة ؛ CC ، 16.8 بالمائة) تختلف اختلافًا كبيرًا (P=0. 049). بشكل أكثر تحديدًا ، يبدو أن الأليل C لـ IL6 SNP أكثر انتشارًا فيالكلىالمتبرعين. لم تختلف ترددات IL6 SNP في كل من المستلمين والمتبرعين بشكل كبير عن تلك التي أبلغت عنها المجموعة الأوروبية لمشروع 1000 جينوم (P=0. 09 و P=0. 19 ، على التوالي) 15 . أظهر تحليل Kaplan-Meier أنه لا IL6 SNP في المتبرع يؤثر على خطر الرفض (الشكل 3A ، P=0. 58) ولا IL6 SNP في المستلم (الشكل 3 ب ، ف=0 .70). في تحليل إضافي ، لم يكن IL6 SNP في المتلقي مرتبطًا بخطر رفض الخزعة المثبت خلال العام الأول أيضًا (P=0. 19). علاوة على ذلك ، قمنا بتقييم ما إذا كان عدم تطابق المتبرع والمتلقي مع تعدد الأشكال IL6 قد أثر على خطر BPAR.زرع الكلىتم تقسيم الأزواج إلى أربع مجموعات وفقًا لوجود أو عدم وجود أليل C لـ IL6 SNP في المتبرع والمتلقي. كشفت تحليلات بقاء Kaplan-Meier عن عدم وجود فرق كبير في البقاء على قيد الحياة بدون رفضطعم الكلىبين المجموعات الأربع (الشكل S2 ؛ P=0. 24). أجرينا بعد ذلك تحليلًا لمجموعة فرعية للجنس ، حيث من المعروف أن الجنس يؤثر على المناعة ،امراض الكلىوكذلك نتيجة الزرع 16،17. كشفت منحنيات Kaplan-Meier عن ارتباط كبير بين IL6 SNP والرفض لدى المتبرعين الذكور (الشكل 3C ، P=0. 015). بعد المتابعة الكاملة ، كان معدل حدوث رفض الخزعة المثبت 27.1 بالمائة في مجموعة النمط الجيني GG المرجعي ، و 37.3 بالمائة في مجموعة النمط الوراثي GC متغاير الزيجوت ، و 40.7 بالمائة في مجموعة النمط الوراثي CC متماثل الزيجوت ، على التوالي. لم يلاحظ أي ارتباط بين IL6 SNP والرفض في المتبرعات الإناث (الشكل 3D ، P=0. 33).كشف التحليل أحادي المتغير أن IL6 SNP في المتبرعين الذكور كان مرتبطًا بنسبة خطر تبلغ 1.31 لكل أليل C (95 بالمائة -CI 1.08-1.58 ؛ P=0. 006) لرفض الخزعة المثبت. تم إجراء تحليل متعدد المتغيرات للتكيف مع عوامل الإرباك المحتملة (الجدول 2) ، بما في ذلك خصائص المتبرع (النموذج 2) ، وخصائص المتلقي
الشكل 5. نسب المخاطر بالنسبة لدرجة المخاطر الوراثية IL -6 / IL -6 R بين المجموعات الفرعية. مخطط الغابة للتحليلات الفرعية لدرجة المخاطر الوراثية IL -6 / IL -6 R ، مما يدل على أن نسب الخطر لرفض الخزعة المثبت كانتمتسقة في مجموعات فرعية مختلفة. كان الاستثناء الوحيد هو أصول المانحين لـطعم الكلى.لم يتم ملاحظة الارتباط بين نتيجة المخاطر الوراثية في IL -6 / IL -6 R والرفض فيعمليات زرع الكلىمن المتبرعين الأحياء. لم يلاحظ أي تفاعل كبير بين درجة المخاطر الوراثية IL -6 / IL -6 R والمتغيرات السريرية المختلفة للمجموعات الفرعية. (نموذج 3) ومتغيرات الزرع (نموذج 4). في تحليل انحدار كوكس ، ظل IL6 SNP في المتبرعين الذكور مرتبطًا بشكل كبير برفض الخزعة المثبت بشكل مستقل عن المربكات المحتملة. وبالتالي ، يبدو أن المتغير الوظيفي في IL6 لدى المتبرعين الذكور يرتبط بارتفاع معدل رفض الخزعة المثبت بعدزرع الكلى.
توقع الخزعة - ثبت الرفض.كان الوجود المشترك لـ IL6 و IL6R SNP شائعًا (الشكل 4 أ ، ب) ، بالإضافة إلى وجود نفس SNP في المتبرع والمتلقي لزوج الزرع (الشكل 4 ج ، د). لذلك ، توقعنا أن تقييم الوجود المشترك لتعدد الأشكال ، في درجة المخاطر الجينية ، في أزواج المتبرع والمتلقي يمكن أن ينتج عنه معلومات أكثر من فحص الأشكال المتعددة بشكل فردي. لاستكشاف مزيج IL6 و IL6R SNPs كمتنبئين لرفض الخزعة المثبت ، أنشأنا درجة مخاطر وراثية للمتغيرين في كل من المتبرعين والمتلقين. تمت إضافة الوزن إلى كل SNP وفقًا لنسبة المخاطر الخاصة بهم ، مما أدى إلى إنشاء درجة سلبية لتعدد الأشكال الوقائي ودرجة إيجابية للأشكال الخطرة. بشكل عام ، تشير درجة المخاطر الجينية فوق الصفر إلى وجود تعدد الأشكال الأكثر خطورة في المتبرع المتلقي
تشير درجات المخاطر الزوجية والوراثية التي تقل عن الصفر إلى وجود المزيد من النيوكلوتايد (SNPs) الوقائي في زوج المتبرع والمتلقي. لتقييم التطبيقات السريرية لدرجة المخاطر الوراثية IL -6 / IL -6 R ، درسنا القيمة التنبؤية لهذا التنميط الجيني بمزيد من التفصيل. ارتبطت درجة المخاطر الجينية بشكل كبير برفض الخزعة المثبت في كل من النموذج الخام (HR ، 1.24 ؛ 95 بالمائة -CI 1.12-1.36 ؛ P <0. 001="" لكل="" زيادة="" sd)="" وبعد="" التعديل="" وفقًا="" لخصائص="" المتبرع="" ،="" خصائص="" المتلقي="" ومتغيرات="" الزرع="" (الجدول="">
علاوة على ذلك ، كانت نسبة الخطر في درجة المخاطر الوراثية IL {0} / IL -6 R متسقة في تحليلات المجموعات الفرعية وظلت كبيرة (الشكل 5) ، باستثناء المتبرعين الأحياء بعد التقسيم الطبقي للمتبرعين اكتب (P=0. 22). أظهرت فترات الثقة لجميع المجموعات الفرعية تداخلًا كبيرًا مع نسبة المخاطر الإجمالية في الجزء العلوي ، مما يدل على اتساق النتائج عبر المجموعات الفرعية. بعد ذلك ، اختبرنا ما إذا كانت درجة المخاطر الجينية IL -6 / IL -6 R مؤشرًا أفضل للرفض من IL6R SNP في المتبرع عن طريق الانحدار متعدد المتغيرات مع اختيار تدريجي للأمام (الجدول) 5). في النموذج النهائي ، تم تضمين درجة المخاطر الوراثية IL {{1 0} / IL -6 R بينما لم يتم تضمين IL6R SNP في المتبرع. بعد التعديل ، ارتبطت درجة المخاطر الجينية في المتبرع برفض الخزعة المثبت مع نسبة خطر تبلغ 1.27 لكل زيادة SD (الشكل 6 ، 95 بالمائة -CI 1.14-1.42 ؛ P <0. {{34)="" }}="" 0="" 1).="" تم="" أيضًا="" تقييم="" أداء="" il="" -6="" il="" -6="" درجة="" المخاطر="" الجينية="" للتنبؤ="" بالرفض="" (الجدول="" 6).="" درجة="" المخاطر="" الجينية="" وحدها="" حصلت="" على="" درجة="" c="" في="" harrell="" تبلغ="" 0.="" 57="" (95="" بالمائة="" -ci="" 0.="" 54="" -="" 0.="" 6="" 0).="" علاوة="" على="" ذلك="" ،="" عند="" إضافته="" إلى="" نموذج="" il6r="" snp="" في="" المتبرع="" (إحصاء="" c="" ،="" 0.="" 51="" ؛="" 95="" بالمائة="" -ci="" 0.488–0.539)="" ،="" فإن="" il="" -6="" il="" -6="" زادت="" درجة="" المخاطر="" الوراثية="" r="" بشكل="" كبير="" من="" قيم="" harrell="" c="" (زيادة="" إحصائية="" c="" ،="" 0.054="" ؛="" 95="" بالمائة="" -ci="" 0.023-0.086="" ؛="" p="0." 001).="" بعد="" ذلك="" ،="" تم="" تضمين="" متغيرات="" إضافية="" وتحسين="" الدقة="" التمييزية="" للتنبؤ="" بخسارة="" الكسب="" غير="" المشروع="" للنموذج.="" تم="" تحسين="" نموذج="" harrell's="" c="" للنماذج="" ذات="" خصائص="" المتبرع="" ومتغيرات="" الزرع="" بشكل="" ملحوظ="" مع="" إضافة="" درجة="" المخاطر="" الجينية="" ،="" بينما="" شوهد="" اتجاه="" فقط="" في="" النموذج="" بخصائص="" المتلقي.="" بالإضافة="" إلى="" ذلك="" ،="" أدت="" درجة="" المخاطر="" الجينية="" il="" -6="" il="" -6="" r="" إلى="" تحسن="" كبير="" في="" القيمة="" التنبؤية="" للنماذج="" وفقًا="" لمؤشر="" تحسين="" التمييز="" المتكامل="" (idi).="" حتى="" في="" النماذج="" المعدلة="" بالكامل="" ،="" كانت="" قيمة="" idi=""> 1 في المائة ، مما يشير إلى أن IL -6 / IL -6 R أدى إلى تحسن كبير في التنبؤ بالمخاطر للرفض بشكل ملحوظ بما يتجاوز العلامات السريرية المستخدمة حاليًا.
مناقشة
الرفض بعدزرع الكلىيظل سببًا مهمًا لفشل الطعم الخيفي الذي يؤثر بشكل كبير على معدلات الاعتلال 18-20. يعد استخدام علاجات جديدة لتقليل التحسس أمرًا حيويًا ، ولكن تطوير دواء جديد لهالكلىالزرع محدود 21 ، مما يستلزم إعادة استخدام العقاقير الحالية المضادة للالتهابات المعتمدة لمؤشرات أخرى. من بينها علاجات منع الإنترلوكين -6- ، والتي تمت الموافقة عليها بالفعل لعلاج أمراض المناعة الذاتية 22. توفر الجينات البشرية فرصة للتحقق من صحة الهدف. علاوة على ذلك ، فإن الأهداف الدوائية المستندة إلى الأدلة الجينية البشرية تزيد احتمالية أن تؤدي إلى علاجات معتمدة بأكثر من الضعف. تتمثل النتيجة الرئيسية لدراستنا في وجود ارتباط كبير بين تعدد الأشكال الوظيفية الشائعة لـ IL6 و IL6R في المتبرع وخطر رفض الخزعة الذي تم إثباته بعد ذلك.زرع الكلى.لتوسيع هذه النتائج ، تبين أن درجة المخاطر الجينية القائمة على كل من تعدد الأشكال في المتبرع والمتلقي هي المحدد الرئيسي لرفض الخزعة المثبت. علاوة على ذلك ، فإن درجة المخاطر الوراثية IL -6 / IL -6 R هذه حسنت بشكل كبير من التنبؤ بالمخاطر للرفض بما يتجاوز عوامل الخطر السريرية المستخدمة حاليًا. في الختام ، تقدم دراستنا دليلًا وراثيًا على الفعالية المحتملة لاستهداف مسار IL -6 فيزرع الكلىويشجع على دراسة مثبطات مستقبلات IL -6 فيالكلىالمتبرعين في تجارب معشاة ذات شواهد.
على حد علمنا ، دراستنا هي الأولى التي توضح أن تعدد أشكال IL6R في المتبرع يؤثر على خطر الرفض بعدزرع الكلى. باختصار ، وجدنا أنه لكل نسخة من الأليل C في المتبرع ، انخفض الخطر النسبي للرفض الحاد المثبت الخزعة بنسبة 27 بالمائة (90 بالمائة -CI 14–38 بالمائة). وفقًا لنتائجنا ، تم ربط الأليل نفسه (rs 2228145- C) بانخفاض مخاطر الإصابة بالتهاب المفاصل الروماتويدي ومرض القلب التاجي 25،26. وجدت دراسة حديثة أجراها Bovijn وزملاؤه أن متغير IL6R هذا كان مرتبطًا أيضًا بانخفاض خطر الإصابة بعدوى SARS-CoV -2 ، فضلاً عن انخفاض خطر الاستشفاء بسبب COVID -19 27. ساعدت الدراسات حول النتائج الوظيفية لهذا المتغير في فهم الآليات الجزيئية التي من خلالها يحمي هذا النمط الجيني IL6R من طيف واسع من الأمراض 28-30. يمثل تعدد الأشكال غير المرادف هذا أكثر من 50 بالمائة من التباين الكلي في مستويات SIL -6 R وكل نسخة من الأليل C تزيد من مستويات البلازما لـ sIL - 6 R. على الرغم من أن تأثيرات متغير IL6R هذا على مستويات sIL -6 R قد تبدو متناقضة ، إلا أن المزيد من التحقيقات كشفت أن الأليل C يقلل في نفس الوقت IL -6 المرتبط بالغشاء على الخلايا الوحيدة و CD4 بالإضافة إلى الخلايا التائية (حتى تخفيض بنسبة 28٪ لكل أليل C) 30. الأهم من ذلك ، أن التعبير السطحي المنخفض لـ IL -6 R على الكريات البيض أدى إلى تقلص تقبل IL -6 ، كما لوحظ من خلال انخفاض الفسفرة لعوامل النسخ الرئيسية STAT1 و STAT3 بعد التحفيز باستخدام IL -6 30 . تم إثبات دليل إضافي في الجسم الحي للتأثيرات المضادة للالتهابات لمتغير IL6R من خلال الارتباط بمستويات أقل من البروتين التفاعلي C ، والفيبرينوجين ، و IL -8 ، و TNF- في دراسات مختلفة 26-28 ، 31. يُظهر تحليلنا بشكل مقنع أن متغير IL6R مرتبط بخطر أقلطعم خيفي كلويالرفض. نفترض أن هذا الانخفاض في معدل الرفض يرجع إلى تضخيم sIL -6 R جنبًا إلى جنب مع gp130 المتجول ، الداخلي ، القابل للذوبان الذي يعمل كمخزن مؤقت لتحييد IL -6 (الشكل 1 ب) ، وبالتالي قمع الالتهاب بالإضافة إلى تقليل التحسس ، مما يقلل دائمًا من خطر رفض الطعم الخيفي.
سيحسن الكستانش الفشل الكلوي / الفشل الكلوي
سبق التحقيق في تأثير تعدد الأشكال IL6 ~ 174G / C (rs1800795) على خطر الرفض بين مرضى الزرع من خلال العديد من الدراسات 13،32-36. خلص تحليل ميتاني حديث لسبع دراسات بما في ذلك 369 حالة و 679 عنصر تحكم إلى أن النمط الجيني IL6 المتلقي لم يكن مرتبطًا بشكل كبير بالرفض ، في حين لوحظ وجود اتجاه للأنماط الجينية للمتبرع IL6 14. في مجموعة الزرع لدينا المكونة من 1271 مريضًا ، لم نجد مثل هذا الارتباط مع النمط الجيني للمستلم IL6 أيضًا. ومع ذلك ، عندما أجرينا تحليلًا للمجموعة الفرعية لجنس المتبرع ، لاحظنا وجود ارتباط كبير بين IL6 SNP والرفض لدى المتبرعين الذكور. قد يفسر هذا الاختلاف المرتبط بالجنس أيضًا النتائج المتضاربة من خلال الدراسات السابقة. على غرار ملاحظاتنا ، أبلغ آخرون عن ازدواج الشكل الجنساني الواضح في ارتباط تعدد الأشكال IL6 هذا مع القابلية للإصابة بالأمراض 37-39. بشكل عام ، كانت الارتباطات مع هذا البديل IL6 أقوى ووجدت في الغالب في الرجال. لذلك ، تسلط دراستنا الضوء على أن الجنس يجب أن يؤخذ في الاعتبار في عمليات الزرع وكذلك في العلاجات التي تستهدف السيتوكين. علاوة على ذلك ، وفقًا لنتائجنا ، ارتبط الأليل C لـ IL6 SNP هذا أيضًا بزيادة مخاطر التهاب المفاصل الروماتويدي وأمراض القلب والأوعية الدموية في التحليلات التلوية الأخيرة 40-42. بالنسبة لـ rs1800795 ، قيل في البداية أن أليل G يزيد من مستويات IL -6 ، ومع ذلك ، كشفت الأعمال الحديثة أن الأليل C لهذا SNP يؤدي إلى تعبير IL -6 أعلى في الأرومات الليفية ولكن ليس في الكريات البيض 43 . برليت آل. وجدت ملفات تعريف حركية مختلفة لـ IL -6 تزداد بعد الجراحة بناءً على الأنماط الجينية IL6 ، والتي يمكن أن تفسر النتائج المتضاربة السابقة 44. ومع ذلك ، فإن الزيادة الإجمالية في IL -6 كانت أكثر عمقًا في CC متجانسة الزيجوت. تم توضيح المزيد من الأدلة في الجسم الحي عن التأثيرات المؤيدة للالتهابات للأليل C من خلال الارتباط بمستويات مصل أعلى من IL -6 والبروتين التفاعلي C والفيبرينوجين في دراسات متعددة 45-47. إجمالاً ، تضيف دراستنا إلى مجموعة متزايدة من الأدلة التي تربط الإنتاج المحلي من IL -6 بتحسس المستلمين إلىالطعوم الكلوية48,49
تم تقييم Tocilizumab ، وهو جسم مضاد وحيد النسيلة متوافق مع البشر يستهدف IL -6 R ، لعلاج الرفض الحاد ، والتهاب الكبد المزمن ABMR المزمن ، واعتلال كبيبات الزرع بعدزرع الكلى50-52. في البداية ، تم إجراء تجربة المرحلة الأولى / الثانية على 10 مرضى قبلزرع الكلىالتي كانت لا تستجيب لإزالة التحسس عن طريق الحقن الوريدي Ig و rituximab 50. أدى توسيليزوماب ، إلى جانب Ig في الوريد ، إلى انخفاض كبير في مستويات DSA وبدا آمنًا. تم زرع خمسة مرضى وأظهرت خزعات البروتوكول لمدة ستة أشهر عدم وجود رفض حاد أو اعتلال كبيبات زرع. بعد ذلك ، تم إجراء تجربة مركز واحد مفتوح التسمية في 36 مريضًا يعانون من ABMR المزمن الذين لم يستجيبوا للحقن الوريدي Ig وريتوكسيماب 51. المريض وطعم خيفي كلويكان البقاء على قيد الحياة 91 في المائة و 80 في المائة في 6 سنوات ، على التوالي ، ووجد أن هذا يتفوق على الضوابط التاريخية. علاوة على ذلك ، استقراروظيفة الكلىشوهد بعد عامين. أخيرًا ، تم فحص عقار tocilizumab لعلاج الرفض الحاد في دراسة قائمة على الملاحظة 7زرع الكلىالمتلقين 52.وظيفة الكلىاستقرت أو تحسنت في جميع المرضى ، ولكن كان لدى مريض واحد رد فعل محتمل لفرط الحساسية ، ومريض آخر أصيب بالتهاب المريء بالفيروس المضخم للخلايا. تجري حاليًا تجربة معشاة ذات شواهد متعددة المراكز 53. بالنظر إلى أن مثبطات IL -6 يتم اختبارها بالفعل في التجارب السريرية ، فما هو دور الدراسات الجينية هنا؟ تقدم نتائج دراستنا اعتبارات مهمة لتصميم هذه التجارب السريرية من خلال تحديد المشكلات الرئيسية التالية لاستهداف IL -6 فيكلويزرع: (1) موقع العمل ؛ (2) اختلاف الجنس ؛ و (3) اختيار المريض. وجدنا أن الأشكال الجينية المتعددة لمسار إشارات IL -6 في المتبرعين ، ولكن ليس المتلقين ، كانت مرتبطة بخطر رفض الخزعة المثبت بعدزرع الكلى. تشير هذه النتائج إلى أنه لا يتم تعميم IL -6 في المستلم ولكن IL -6 تعبير R و IL -6 من قبل المتبرعالكلىهي الدوافع الرئيسية للمناعة الخيفية لعملية زرع الكلى. من المحتمل أن يشير هذا إلى أن العلاجات التي تهدف إلى منع تفاعلات IL -6 / IL -6 R يجب أن تركز على المتبرعالكلىكموقع للعمل. أخيرًا ، في هذه الدراسة ، أنشأنا درجة المخاطر الوراثية IL -6 / IL -6 R استنادًا إلى تعدد أشكال SNPs في المتبرع والمتلقي. من منظور تنبؤي ، قد تكون درجة المخاطر الجينية ذات أهمية لتحديد المرضى المعرضين لخطر رفض الطعم الخيفي. علاوة على ذلك ، قد يكون من المفيد تحديد درجة المخاطر الجينيةزرع الكلىالأزواج التي قد تستفيد من العلاج المضاد -6. ومع ذلك ، بالنظر إلى الأداء التمييزي لنموذج التنبؤ الخاص بنا ، يجب إضافة عوامل إضافية (مثل الأنماط الفردانية IL6 و IL6R) لزيادة الأداء التنبئي قبل استخدامه في الممارسة السريرية.
سيحسن القسطرة من أمراض الكلى / الكلى
عدة قيود على دراستنا تتطلب النظر. أولاً ، من المتوقع أن تكون الارتباطات الموجودة في هذه الدراسة سببية. ومع ذلك ، نظرًا لأن دراستنا مستقبلية ، ولكنها ذات طبيعة رصدية ، فلا يمكن إثباتها من خلال نتائجنا. ثانيًا ، أجرينا فقط تحليلًا للنماذج الفردية الوظيفية الفردية وليس للأنماط الفردانية IL6 و IL6R. ثالثًا ، لم يتم إجراء قياسات IL -6 و sIL -6 R في مجموعتنا بسبب نقص عينات المصل ، وبالتالي لا يمكن ربط الأنماط الجينية بالمستويات الجهازية. رابعًا ، لم نتمكن من التحقق مما إذا كان الارتباط بين متغيرات IL6 و IL6R يختلف بالنسبة لـ TCR أو ABMR ، نظرًا لعدم وجود اختبار معياري على مر السنين لتحديد DSA. أخيرًا ، تم استخدام تصنيف Banff 2007 للتشخيص المرضي ، وهو إصدار أقدم. خضع تصنيف بانف لعدة مراجعات منذ عام 2007 ، تتعلق في الغالب بمعايير ABMR. لقد أثر إدخال ABMR السلبي C4d في تصنيف بانف 2013 بشكل كبير على عدد تشخيصات ABMR بشكل عام 54. وفقًا لذلك ، تفتقر مجموعتنا إلى الحالات السلبية C4d لـ ABMR. من ناحية أخرى ، تتمثل نقاط القوة الرئيسية في دراستنا في حجم العينة الكبير ، والتحليل الإحصائي القوي (بما في ذلك تحليل المجموعة الفرعية) ، ونقطة النهاية الصعبة وذات الصلة سريريًا ، أي رفض الخزعة المثبت. في الختام ، وجدنا أن متغيرات IL6 و IL6R في المتبرع ترتبط بخطر تطوير الخزعة - الرفض المؤكد بعدزرع الكلى.تشير هذه النتائج إلى الفعالية المحتملة لاستهداف إشارات IL -6 فيزرع الكلى. يلزم إجراء تجارب عشوائية مضبوطة مستمرة مع مثبطات IL -6 أو IL -6 R لتحديد أفضل الإعدادات ، بما في ذلك توقيت التدخل واختيار المريض ، حيث قد تكون هذه العوامل فعالة.
