آثار Cistanche Deserticola Deserticola و Kaempferol على تطور خلايا حبيبات في حويصلات الدجاج المجمعة مسبقًا

خلاصة:لاستكشاف آثار Cistanche deserticola و Kaempferol على نمو حويصلات الدجاج ، قامت التجربة بتحليل تأثيرات تركيزات مختلفة من Cistanche deserticola و Kaempferol على نشاط خلايا حبيبية الدجاج المصنفة مسبقًا بطريقة MTT وحددت التركيز الأمثل. تم استخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي الفلوري في الوقت الحقيقي للكشف عن تأثيرات Cistanche تأثير تعبير الرنا المرسال ؛ تم تحليل تأثيرات Cistanche deserticola و kaempferol على نمو حويصلات المبيض بواسطة مزرعة أنسجة المبيض في المختبر. وأظهرت النتائج أن كلا من Cistanche deserticola و Kaempferol بتركيز 1 × عند 10-4 مول / لتر ، يمكن أن يعزز بشكل كبير تكاثر الخلايا الحبيبية ، مع تعزيز أيضًا PCNA و FSHR و ER في تعبير mRNA للخلايا الحبيبية (P<0.01); Cistanche deserticola and Kaempferol significantly increased the number of follicles in ovarian tissue, and granulosa cells proliferated from monolayer to multilayer. Studies have shown that Cistanche deserticola and Kaempferol can promote the proliferation of aggregate granulosa cells, and promote FSHR and ER α MRNA expression promoting the development of pre-grade follicles towards grade follicles.

الكلمات المفتاحية: Cistanche deserticola؛ كايمبفيرول. فرخة؛ الخلايا الحبيبية قبل الصف ؛ أنسجة المبيض

cistanche الأعشاب الصينية

بالنسبة لمزارع الدجاج البياض واسعة النطاق ، يؤثر مستوى معدل إنتاج البيض على فوائدها الاقتصادية ، ويؤثر تطور بصيلات المبيض بشكل مباشر على الأداء الإنتاجي للدجاج البياض. تنقسم البصيلات إلى ثلاث مراحل وفقًا لحالتها الوظيفية: البصيلات الأولية والثانوية والبصيلات الناضجة [1]. كل يوم ، يتم اختيار الجريب لينضج ، ويتم طرد البويضة في قناة فالوب ، مروراً بالقمع ، والتضخم ، والبرزخ ، والرحم ، والمهبل ، وتشكل بنية تشبه البويضة [2-3]. يرتبط بدء الجريبات البدائية بتطور الخلايا الحبيبية المسامية. يرتبط الهرمون المنبه للجريب (FSH) بمستقبلات الهرمون المنبه للجريب (FSHR) على الخلايا الحبيبية ، مما يحفز تكوين مستقبلات الهرمون اللوتيني (LHR) ويحفز تخليق هرمونات الستيرويد [4-6]. يعمل هرمون FSH والهرمون اللوتيني (LH) بشكل تآزري على الخلايا الحبيبية لتعزيز نمو الجريبات ونضجها ، والمشاركة في اختيار البصيلات المهيمنة. وجدت الأبحاث أنه على الرغم من تنشيط الجريبات البدائية التي تفتقر إلى الخلايا الحبيبية ، فإنها في النهاية تتطور إلى رتق [7]. أثناء التطور الجريبي ، يمكن للإستروجين أن يعزز تكاثر الخلايا الحبيبية المبيضية ، بينما يتعاون مع FSH و LH لتعزيز تكاثر الخلايا الحبيبية المبيضية وتمايزها. عندما يزداد محتوى هرمون الاستروجين في البلازما ، سيتم إعادته إلى منطقة ما تحت المهاد بشكل سلبي من خلال نظام الدوران المحيطي ، مما يثبط إفراز هرمون إفراز الغدد التناسلية (GnRH) من منطقة ما تحت المهاد. يمكن لـ GnRH تحفيز الغدة النخامية لتخليق وإفراز FSH و LH لتعزيز نمو بصيلات المبيض. عندما يكون إفراز GnRH منخفضًا ، يمكن أن يثبط إفراز FSH و LH ، مما يؤدي في النهاية إلى تثبيط نمو الجريب [8-9].

وجدت الدراسات السابقة أن Cistanche deserticola و Cuscuta chinensis كان لهما تأثير إصلاح جيد على قنوات البيض الضامرة وقنوات البيض التالفة بعد الشفاء ، ويمكن أن يحسن معدل وضع الدجاج البياض المنخفض [10]. في إنتاج تربية الحيوانات ، يمكن أن يؤدي استخدام مركبات الفلافونويد إلى تحسين أداء الإنتاج الحيواني بشكل كبير ، وتحسين مقاومة الأمراض الحيوانية ، وتحسين وظيفة المناعة الحيوانية.

الأدوية الصينية مثل الجينسنغ ، و Cistanche deserticola ، و astragalus

يمكن لمركبات الفلافونويد الإجمالية في Cistanche deserticola أن تعزز بشكل كبير تكاثر الخلايا الحبيبية الحبيبية الصفية والدرجة للدجاج في المختبر ، ومستوى النسخ من البروتين التنظيمي السريع الستيرويدي (StAR) ، وإنزيم الكوليسترول ذي السلسلة الجانبية الجانبية (CYP11A1) mRNA ، والإفراز من البروجسترون. المكون التمثيلي لمجموع مركبات الفلافونويد في Cistanche deserticola هو Cistanche deserticola. وزنه الجزيئي صغير ، ويمتاز بالمرور عبر الحاجز الدموي الدماغي. في الوقت نفسه ، له تأثيرات مضادة للالتهابات ومضادة للأورام وشبيهة بالإستروجين [11]. المكون الكيميائي الرئيسي لـ Cuscuta chinensis هو إجمالي مركبات الفلافونويد في Cuscuta chinensis. في الوقت الحاضر ، تم عزل مجموعة متنوعة من مركبات الفلافونويد من Cuscuta chinensis ، وخاصة Quercetin و Kaempferol ، اللذان يحتويان على نشاط عالٍ من مضادات الأكسدة.

يُظهر تطبيق مستخلص بذور الفلافونويد الحامول في إناث الفئران نشاطًا استروجينًا ، والذي له تأثير معين على تعزيز وظيفة مستقبلات هرمون hCG / LH في المبيض ؛ له تأثير Gonadotropin على صغار الفئران ويمكن أن يعزز نمو الجهاز التناسلي [12-14].

في هذه التجربة ، اخترنا الخلايا الحبيبية المسامية للدجاج قبل الصف ، واستكشفنا التأثير المعزز لـ Cistanche deserticola و Kaempferol على تكاثر الخلايا الحبيبية الحبيبية للدجاج قبل الصف وتعبير المستقبلات ذات الصلة من خلال تأثير Cistanche deserticola و Kaempferol على نمو جريب الدجاج ، لتوفير مرجع نظري للبحث والتطوير لمضافات تغذية آمنة وفعالة وخالية من المخلفات لتحسين أداء إنتاج الطبقات.

آثار Cistanche-Tonifying الكلى

1 المواد والطرق

1.1 اختبار المواد

تم شراء Cistanche deserticola (نقاء أكبر من أو يساوي 98 بالمائة) من Shanghai Jizhi Biochemical Technology Co.، Ltd ؛ تم شراء Kaempferol (نقاء أكبر من أو يساوي 98 بالمائة) من Shanghai Aladdin Biochemical Technology Co.، Ltd.

1.2 الكواشف والأدوات الرئيسية

الكواشف الرئيسية: تم شراء النوع II Collagenase و DMEM من شركة Thermo Fisher Technology (China) Co.، Ltd؛ تم شراء DMSO من شركة Beijing Solebao Technology Co.، Ltd ؛ تم شراء مجموعة M5 Super qPCR RT المزودة بمجموعة النسخ العكسي لإزالة gDNA من شركة Beijing Jumei Biotechnology Co.، Ltd. الأداة الرئيسية: BCM -1300 طاولة عمل تنقية تم شراؤها من Shanghai Boxun Industrial Co.، Ltd. Medical Equipment Factory؛ تم شراء جهاز الطرد المركزي للتجميد عالي السرعة AXTGL20M من شركة Hunan Hexi Instrument Equipment Co.، Ltd ؛ تم شراء حاضنة درجة الحرارة الثابتة Heracell 150i GP من شركة Bingshan Songyang Biotechnology (Dalian) Co.، Ltd؛ LightCycle ® تم شراء جهاز PCR الكمي 96 نوعًا وأداة وضع العلامات على الإنزيمات من النوع DR -200 BS من شركة Bole Life Medical Products (Shanghai) Co.، Ltd.

1.3 عزل واستخراج الخلايا الحبيبية من البصيلات قبل تصنيف الدجاج

تم اختيار ثلاثين 150- دجاجة بياضة بنية سليمة عمرها {0} يومًا (مقدمة من شركة Hebei Baoding Dingnong) ، وقتلتها إراقة دماء في الشريان السباتي ، وتم إخراج مبيضها معقمًا (تم إجراء اختبارات أبحاث على الحيوانات في الجسم الحي وفقًا للإرشادات المعتمدة من قِبل لجنة أخلاقيات الحيوان بجامعة هيبي الزراعية). يمكن تقسيم بصيلات ما قبل الصف إلى بصيلات بيضاء صغيرة (SWF ،<2 mm), large white follicles (LWF, 3-5 mm), small yellow follicles (SYF, 6-8 mm), and large yellow follicles (LYF, 9-12 mm). Collect granulosa cells from pre-graded follicles with a diameter of 6-8 mm and prior stages. The grading of follicles (see Figure 1). 

ملاحظة: يمثل SWF بصيلات بيضاء صغيرة ، ويمثل LWF بصيلات بيضاء كبيرة ، ويمثل SYF بصيلات صفراء صغيرة ، ويمثل LYF بصيلات صفراء كبيرة ، ويمثل F1 و F2 و F3 و F4 و F5 خمس بصيلات ناضجة.

تم غسل البصيلات التي تم جمعها ثلاث مرات باستخدام 75٪ كحول ثم غسلت مرة واحدة باستخدام برنامج تلفزيوني. تم استخدام الإبرة المعقمة لتحرير سائل الصفار في PBS المحتوي على 3 في المائة من البنسلين والستربتومايسين ، وإزالة طبقة الخلايا الغشائية وفصل طبقة الخلايا الحبيبية. تم أخذ 15 مل من أنبوب EP لإضافة طبقة الخلايا الحبيبية المقطوعة للبصيلات و 4 مل من 0. تمت إضافة 1 بالمائة من النوع II Collagenase. تم اهتزازها في شاكر عند 37 درجة لمدة 3 دقائق. بعد اكتمال التذبذب ، أضف كمية متساوية من محلول المزرعة الذي يحتوي على 0. 5٪ FBS لإنهاء الهضم. مرشح مع منخل 200 شبكة ومنخل 400 شبكة ، على التوالي. طرد المرشح في درجة حرارة الغرفة عند 1200 ص / دقيقة لمدة 5 دقائق وكرر الطرد المركزي مرتين. تخلص من المادة الطافية ، وأضف وسط الاستزراع ، ونفخ ونضح بالتساوي ، وخفف تعليق الخلية إلى 5 × 10 قطعة / مل ، وأضف بالتساوي في طبق بتري بقطر 100 مم ، وزرعها عند 37 درجة و 5 في المائة من ثاني أكسيد الكربون .

1.4 تأثيرات Cistanche deserticola و Kaempferol على نشاط الخلايا الحبيبية

تم زراعة الخلايا الحبيبية بشكل روتيني في وسط DMEM يحتوي على 10 بالمائة من مصل بقري جنيني. تم أخذ الخلايا في مرحلة النمو اللوغاريتمي وهضمها باستخدام 2.5 جم / لتر من التربسين. تم توزيع الخلايا بالتساوي في 96 لوحة جيدة. تم تقسيم كل لوحة إلى 10 مجموعات مع 6 ثقوب متكررة في كل مجموعة. إضافة 200 إلى الثقوب حول لوحة الثقافة μ L PBS بمثابة ترطيب المسام. تم ضبط تركيز Cistanche deserticola على 1 × 10-4 مول / لتر ، 1 × 10-5 مول / لتر ، 1 × 10-6 مول / لتر ، 1 × 10-7 مول / لتر لتر ، 5 × 10-8 مول / لتر ، 1 × 10-8 مول / لتر ، 5 × 10-9 مول / لتر ، 1 × 10-9 مول / لتر ، 1 × {{ 24}} مول / لتر. قم بتعيين مجموعة تحكم فارغة. بعد الزراعة المشتركة للخلايا مع Cistanche شاكر درجة حرارة ثابتة عند 37 درجة. قياس الامتصاصية عند 450 نانومتر. تم تكرار التجربة ثلاث مرات ، وكانت عملية فحص الجرعة الآمنة المثلى من Kaempferol للخلايا الحبيبية هي نفسها المذكورة أعلاه.

الحياة الصحراوية cistanche-Tonifying الكلى

1.5 تأثيرات Cistanche

لوحظ تأثير تعبير mRNA في الخلايا الحبيبية لمرحلة النمو اللوغاريتمي ، التي تم تلقيحها في ثلاثة أطباق ثقافة بكثافة خلية 5 × 10 قطعة / مل. تم تقسيم أطباق بتري إلى مجموعة تحكم فارغة ؛ مجموعة Cistanche deserticola ، أي بعد 24 ساعة من زراعة الخلايا ، أضف 1 × 10-4 مول / لتر Cistanche deserticola ؛ في مجموعة Kaempferol ، أضف 1 بعد 24 ساعة من ثقافة الخلية × 10-4 مول / لتر Kaempferol ؛ مجموعة الأستروجين ، أضف 5 بعد 24 ساعة من زراعة الخلايا × تعامل مع 10 إلى 8 مول / لتر من الإستروجين. بعد 24 ساعة من الزراعة ، تخلص من كل وسط المزرعة ، اشطف مع PBS ، أضف 1 مل من إنزيم البنكرياس للهضم ، وبعد بضع دقائق ، أضف كمية متساوية من وسط المزرعة لإنهاء الهضم. الطرد المركزي تعليق الخلية عند 1000 دورة / دقيقة لمدة 5 دقائق ، وتجاهل المادة الطافية ، وإضافة كاشف Trizol في صندوق ثلج. بعد ذلك ، تمت إضافة الكلوروفورم ورجه بقوة ، ووضعه في صندوق ثلج لمدة 3 دقائق تقريبًا ، وطرده عند 4 درجات عند 12000 دورة / دقيقة لمدة 10 دقائق. انقل الحمض النووي الريبي إلى أنبوب EP جديد ، وأضف حجمًا متساويًا من الأيزوبروبانول ، واخلطه جيدًا برفق ، واتركه في صندوق ثلج لمدة 10 دقائق. بعد الطرد المركزي عند 4 درجة لمدة 10 دقائق عند 12 000 دورة / دقيقة ، تخلص من المادة الطافية واغسل الراسب بنسبة 80 بالمائة من الإيثانول. أجهزة الطرد المركزي عند 10 000 دورة / دقيقة و 4 درجات لمدة 5 دقائق ، وتخلص من الإيثانول ، وجفف بالهواء لمدة 5-10 دقيقة ، وأضف ماء DEPC للنفخ والشفط لإذابة الراسب. قياس تركيز الحمض النووي الريبي باستخدام مقياس الطيف الضوئي للأشعة فوق البنفسجية.

استخدم مجموعة M5 Super plus qPCR RT مع مجموعة إزالة gDNA للنسخ العكسي للحصول على (كدنا). الكشف عن المستضد النووي للخلايا المتكاثرة ، ومستقبل الهرمون المنبه للجريب ، ومستقبلات هرمون الاستروجين في الخلايا الحبيبية عن طريق مستوى النسخ النسبي الكمي للـ PCR MRNA في الوقت الحقيقي. يتم عرض معلومات التمهيدي في الجدول 1 ، وتم تصميم البادئات وتوليفها بواسطة Shenggong Biotechnology (Shanghai) Co.، Ltd. مجموعة مرجعية داخلية - Actin ، يتم تحديد مستوى النسخ النسبي لـ mRNA لكل جين بواسطة 2- ΔΔ محسوبة بواسطة Ct.

الجدول 1 معلومات التمهيدي

1.6 الثقافة في المختبر والمراقبة المورفولوجية لأنسجة المبيض

خذ أنسجة مبيض 30 40- دجاجة بياضة بنية عمرها يوم واحد واشطفها ثلاث مرات بنسبة 75 بالمائة من الكحول. قطع أنسجة المبيض إلى قطع صغيرة من 1-2 مم 3 في طاولة فائقة النظافة ، بمعدل 500 لكل بئر ميكرولتر مضافًا إلى DMEM ووسط ITS (10 ميكروغرام / مل من الأنسولين ، 5 ميكروغرام / مل ترانسولين ، و 30 نانومول / لتر سيلينيت الصوديوم). بعد 72 ساعة من الزراعة في الحاضنة ، تعامل وفقًا لحالة التجمع. تم تقسيم أنسجة المبيض إلى مجموعة ضابطة فارغة ومجموعة Cistanche deserticola ومجموعة Kaempferol ومجموعة هرمون الاستروجين. بعد 72 ساعة من الزراعة ، تم إصلاح نسيج المبيض بنسبة 4 في المائة من الفورمالديهايد ، وتم تحضير أقسام الأنسجة بشكل روتيني للمراقبة تحت المجهر البصري.

1.7 الإحصاء والتحليل

تم تحليل بيانات qPCR باستخدام برنامج Biorad CFX Manager 2. 0 وبرنامج Microsoft Excel ، و SPSS 21. 0 تم استخدام برنامج ANOVA أحادي الاتجاه. تم استخدام طريقة Duncan لمقارنات متعددة. يتم تمثيل النتائج على أنها "متوسط ​​± الانحراف المعياري" ويتم رسمها باستخدام برنامج GraphPad Prism 5. 0. ص<0.05 indicates significant differences, while P<0.01 indicates extremely significant differences.

2 النتائج والتحليل

2.1 تأثيرات Cistanche deserticola و Kaempferol على تكاثر الخلايا الحبيبية

يمكن أن نرى من الشكلين 2 و 3 أن كلا من Cistanche deserticola و Kaempferol يمكن أن يعززوا تكاثر الخلايا الحبيبية. عند 1 × 10-4 ~ 1 × ضمن تدرج تركيز قدره 10-10 مول / لتر ، مقارنة بمجموعة التحكم الفارغة ، يكون التركيز 1 × 10-4 مول / لتر ، 1 × {{ 9}} مول / لتر ، 1 × 10-6 مول / لتر ، 1 × عند 10-7 مول / لتر ، كان الاختلاف كبيرًا للغاية (P<0.01), with a concentration of 5 × The difference was significant at 10-8 mol/L (P<0.05).

ملاحظة: تشير "* *" إلى اختلاف كبير مقارنة بمجموعة التحكم الفارغة (P<0.01), and "*" indicates a significant difference compared to the blank control group (P<0.05), the same below.

الشكل 2: قيم الامتصاص للخلايا الحبيبية المعرضة لـ Cistanche deserticola بتركيزات مختلفة لمدة 24 ساعة

الشكل 3: قيم الامتصاص للخلايا الحبيبية المعرضة لـ Kaempferol بتركيزات مختلفة لمدة 24 ساعة

2.2 تأثيرات Cistanche

يمكن أن نرى من الجدول 2 أن مجموعتي Cistanche المجموعة الضابطة ومجموعة الإستروجين (ص<0.05 or P<0.01), and the follicle-stimulating hormone receptor and estrogen receptor of chicken pre aggregate cells in the Kaempferol group α The transcription level of mRNA is the highest (P<0.01).

الجدول 2 آثار Cistanche

2.3 الملاحظة النسيجية للمبايض

يمكن أن نرى من الشكل 4 أنه بالمقارنة مع مجموعة التحكم ، زاد عدد البصيلات في أنسجة المبيض المعالجة بـ Cistanche deserticola و Kaempferol بشكل ملحوظ ، وتكاثرت الخلايا الحبيبية من أحادية الطبقة إلى متعددة الطبقات. بالمقارنة مع مجموعة الإستروجين ، تتمتع مجموعة Cistanche deserticola ومجموعة Kaempferol بقدرة أكثر وضوحًا على تعزيز نضج نسيج المبيض وتطوره ، وللمجموعة Cistanche deserticola ومجموعة Kaempferol تأثير أكثر وضوحًا من مجموعة Kaempferol.

3 مناقشة

3.1 تأثير Cistanche deserticola و Kaempferol

تترافق عملية التطور الجرابي بأكملها مع تكاثر الخلايا الحبيبية ، والتي لها أهمية كبيرة لتطور المسام. يشرعون في نمو الجريبات البدائية عن طريق بناء بيئات جزيئية دقيقة مواتية. أثناء التطور الجريبي ، يلعب موت الخلايا المبرمج للخلايا الحبيبية دورًا مهمًا في تنظيم نمو الجريبات ، ونضج خلايا البويضات ، وإفراز هرمون الاستروجين [15-16]. Cistanche deserticola ، دواء عشبي صيني ، له تأثير شبيه بالهرمونات الجنسية ، والذي يمكن أن يعزز نمو بصيلات الحيوانات وإنتاج الحيوانات المنوية ، وتعزيز الوصول الطبيعي للشبق ، وتحسين وظيفة المبيض ونشاطه ، وتحسين الوظيفة الإنجابية. Cuscuta chinensis ، باعتباره الطب الصيني التقليدي لتنشيط الكلى ، له تأثيرات مضادة للأكسدة ، وإنجابية ، ومضادة للشيخوخة كمكون فعال للفلافونويد. أظهرت الدراسات أن جرعة معينة من الفلافونويد من Cuscuta chinensis لها تأثير تكاثري على الخلايا الخلالية لخصية الفأر [17-18]. في هذه التجربة ، تم اختيار Cistanche deserticola و Kaempferol ، بوصفهما المكونات الرئيسية للأدوية التقليدية الصينية Cistanche deserticola و dodder ، لدراسة تأثيرهما على القدرة على التعبير للخلايا الحبيبية الحبيبية للدجاج والمستقبلات ذات الصلة ، وأنسجة المبيض ، لتأكيد التأثيرات. من Cistanche deserticola و Kaempferol حول تطوير الجهاز التناسلي للدواجن.

آثار Cistanche-Tonifying الكلى

انقر هنا لعرض Cistanche لمنتجات أمراض الكلى

【اطلب المزيد】 البريد الإلكتروني: cindy.xue@wecistanche.com / تطبيق Whats: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

3.2 مستضد الخلايا النووية المتكاثرة ، مستقبلات الهرمون المنبه للجريب ، ومستقبلات هرمون الاستروجين دور

PCNA هو مستضد نووي خلوي متكاثر ، والذي يلعب دورًا مهمًا في بدء تكاثر الخلايا وهو مؤشر جيد لتكاثر الخلايا. لذلك ، أكدت زيادة PCNA في نتائج الاختبار أن Cistanche deserticola و Kaempferol يعززان تكاثر الخلايا عندما يعملان على الخلايا الحبيبية. FSH هو الهرمون الرئيسي الذي يعزز نمو الجريبات [19] ، ويتركز موقع التعبير لمستقبل الهرمون المنبه للجريب (FSHR) بشكل أساسي في المبيض والبصيلات. الطريقة الرئيسية لمشاركة FSH في الأنشطة الإنجابية للدجاج هي تنظيم نمو البصيلات. عندما يزيد إفراز FSH ، يمكن أن يعزز زيادة FSHR في الخلايا الحبيبية ، ويمكن أن يؤدي الجمع بين الاثنين إلى تحفيز تخليق LHR عن طريق تنشيط Aromatase. يمكن للدجاج أن يحفز الإباضة تحت التأثير التآزري لـ FSH و LH [20-22]. قبل اختيار الجريب ، تعبر الخلايا الحبيبية فقط عن المستويات القاعدية من FSHR ، والتي تُستخدم لتلقي إشارات FSH وإنتاج مستويات منخفضة من فوسفات الأدينوزين الدوري للحفاظ على نشاط الخلية. عندما يتم تنظيم تعبير FSHR بشكل كبير في الخلايا الحبيبية لبصيلة ما قبل الدرجة ، فإنه يشير إلى أنه سيتم اختيار الجريب لتصبح بصيلة متدرجة [23-24]. في هذه الدراسة ، مقارنة بمجموعة التحكم ، تمت زيادة تعبير FSHR mRNA في مجموعات Cistanche deserticola و Kaempferol بشكل كبير ، مما يشير إلى أن Cistanche deserticola و Kaempferol يمكنهما تعزيز نسخ FSHR mRNA وزيادة إفراز FSH وتعزيز الاختيار من البصيلات كبصيلات الصف. E2 هو نوع من هرمون الستيرويد الذي تفرزه خلايا theca. وتتمثل مهمتها في تعزيز النضج الجنسي لإناث الحيوانات وإظهار الخاصية الجنسية الثانية. تحت تأثير FSH ، يحول الأروماتاز ​​الذي تنتجه الخلايا الحبيبية المبيضية الأندروجين إلى E2 ، والذي ينظمه اثنان من مستقبلات الاستروجين (ER و ER） له تأثيرات على أعضاء مختلفة من إناث الحيوانات ويلعب دورًا مهمًا في التكاثر الحيواني ، وخاصة في الفسيولوجية. أنشطة مثل تطور الجريبات. أثناء النمو الجريبي ، يعد الإستروجين جزيءًا تنظيميًا رئيسيًا داخل الخلايا يعمل على تسريع تكاثر الخلايا الحبيبية ويعزز تأثيرات FSH و LH على تكاثر خلايا المبيض وتمايزها. ER التعديل الرئيسي هو التغذية المرتدة السلبية ، ER يتم تنظيم نمو الحويصلات من خلال كل من المسارات الداخلية والخارجية للمبيض [26]. يتم التعبير عنها بشكل رئيسي في الأنسجة والأعضاء مثل الغدة الثديية والرحم والمهبل للحيوانات ، بينما يتم التعبير عنها بشكل أساسي في الخصيتين والمبيض والبروستاتا وما تحت المهاد [27].

في هذه الدراسة ، تم تنظيم مستويات التعبير عن Cistanche deserticola و Kaempferol بشكل كبير في مجموعتي Cistanche deserticola و Kaempferol ، مما يشير إلى أن cistanche و kaempferol لهما آثار إيجابية على تطور ونضج وإباضة مبيض الدجاج. وجدت نتائج هذه الدراسة أنه تم قياس ER. مستوى التعبير منخفض نسبيًا. هذا يتوافق مع نتائج بحث Guo Miao [28] التي تفيد بأن مبيض الدجاج المبكر في التطور الجنيني للدجاج لها مواقع ارتباط محددة لـ ER. في البصيلات البيضاء والبصيلات الصفراء والخلايا الحبيبية للدجاج ، يكون التعبير ER أعلى بكثير من ER. فلافونويد فول الصويا ، باعتباره هرمون الاستروجين النباتي ، يمكن أن يزيد من معدل إنتاج البيض عند الدجاج البياض عند إضافته إلى النظام الغذائي [29] ، مما يشير إلى وجود علاقة مباشرة بين مستويات هرمون الاستروجين ومعدل إنتاج البيض.

الشكل 4 أنسجة المبيض بعد تلطيخ HE (10 ×）

3.3 آثار Cistanche deserticola و Kaempferol على أنسجة المبيض

في هذه التجربة ، من خلال الزراعة المشتركة لـ Cistanche deserticola و Kaempferol مع أنسجة المبيض على التوالي ، وجد أن عدد البصيلات في أنسجة المبيض المتأثرة بـ Cistanche deserticola و Kaempferol قد زاد بشكل ملحوظ ، وتكاثرت الخلايا الحبيبية من طبقة أحادية إلى متعددة الطبقات. هذا يثبت كذلك أن Cistanche deserticola و Kaempferol يمكن أن يعزز نمو المبيض من منظور نسيجى. تم قياس مستضد الخلية المتكاثر ، ومستقبل الهرمون المنبه للجريب ، ومستقبلات هرمون الاستروجين في نتائج هذه التجربة. أكدت التغييرات في المؤشرات أن Cistanche deserticola و Kaempferol لهما تأثيرات شبيهة بالإستروجين ، مما يوفر أساسًا تجريبيًا لاستكشاف الهدف من المكونات الرئيسية من Cistanche Deserticola والحامول.

4. الخلاصة

أكدت هذه الدراسة أن Cistanche deserticola و Kaempferol يمكنهما تعزيز تكاثر الخلايا الحبيبية مسبقة التحضير للدجاج وزيادة PCNA و FSHR و ER.

مرجع:

［1］ Yang Pengyun و Song Beibei و Ma Jinrui وآخرون دور الخلايا الحبيبية في تكوين البيض [J] Poultry Science، 2021 (11): 50-54

［2］ HUO SY و LI YR و GUO Y وآخرون. تحسين تأثيرات Epimedi⁃ um flavonoids على السمات التناسلية المختارة في الدجاج البياض بعد طرح الريش القسري ［J］. علم الدواجن ، 2020،99 （5: 2757-2765.

［3 ، HUO SY ، LI YR ، ZHANG S ، وآخرون. وظائف Epimedium على قناة البيض المتراجعة وبصيلات طبقة الدجاج المنزوع القوة ［J］. مجلة أبحاث الدواجن العالمية ، 2020،10 2）: 326- 335.

［4 ، راجو GR ، شافان آر ، ديناديال إم ، وآخرون. التآزر بين الهرمون اللوتيني والهرمون المنبه للجريب: مراجعة للدور في التحفيز المفرط للمبيض الخاضع للرقابة ［J］. مجلة الإنجاب البشري ، 2013،6 （4）: 227-234.

［5］ SCHMIDT D. عامل النسخ الحلزوني المجنح الفأري Foxl2 مطلوب لتمايز الخلايا الحبيبية وصيانة المبيض ［J］. التنمية ، 2004131 （4）: 933-942.

［6 ، سوليفان ميغاواط ، ستيوارت أكيرز أ ، كراسنو جي إس ، وآخرون. استجابات المبيض لدى النساء لهرمون منشط الجريب المؤتلف والهرمون اللوتيني （LH: دور لـ LH في المراحل النهائية من النضج الجرابي ［J］. مجلة طب الغدد الصماء والتمثيل الغذائي ، 1999،84 （1）: 228-232.

［7］ GUO Y و LI YR و ZHANG S وآخرون. تأثير الفلافونويد الكلي للإبيميديوم على تطور الخلايا الحبيبية في الدجاج البياض ［J］. علم الدواجن ، 2020،99 9: 4598-4606.

［8 ، ZHANG WD ، LI N ، DU ZR ، وآخرون. يشارك مستقبل IGF -1 في التأثيرات التنظيمية لـ icariin و icaritin في الخلايا النجمية un⁃ der الحالات القاعدية وبعد تحدي التهابي ［J］. المجلة الأوروبية لعلم العقاقير ، 2021906 5: 174269- 174278.

［9 ، FREDERIQUE RZ ، MIGUEL F ، GE Y ، وآخرون. التكتل التنظيمي لخلية الغدد التناسلية L T2 الكامنة وراء الاستجابة لهرمون إفراز الغدد التناسلية ［J］. الحدود في علم الغدد الصماء ، 2018 ، 9:34.

［10］ Huo Shuying ، Kang Jingmin ، Li Yurong ، وآخرون تأثير "مسحوق Yimu" على إصلاح قناتي فالوب والأداء البياض في الدجاج البياض [J] الدواجن الصينية ، 2018 ، 40 (19): 4

［11］ WANG S و WANG Q و WANG H وآخرون. يساهم تحريض ROS والشيخوخة المعتمدة على تلف الحمض النووي بواسطة icaritin في نشاطه المضاد للأورام في خلايا سرطان الخلايا الكبدية ［J］. البيولوجيا الصيدلانية ، 2019،57 （1）: 424-431.

［12］ Wang Jianhong ، Wang Minzhang ، Wu Qinghua ، et al. تأثير مركبات الفلافونويد من Cuscuta chinensis على وظيفة الغدد الصماء في المبيض في الفئران المجهدة [J] الطب العشبي الصيني ، 2002 (12): 46-48

［13］ Miao Jiangxia تقدم في البحث حول المكونات النشطة وآلية عمل بذور الحامول في تنظيم التكاثر // وقائع المؤتمر الأكاديمي حول الكيمياء النباتية الصيدلانية والتنمية المستدامة لموارد الطب الصيني التقليدي (1) ، 2009: 323-325

［14 ، TAO CC ، WU Y ، GAO X ، وآخرون. ترتبط التأثيرات المضادة للورم لـ Icari القصدير ضد سرطان الثدي بمستقبلات هرمون الاستروجين ［J］. الطب الجزيئي الحالي ، 2020،21 （1）: 73-85.

15 مونيوكس ، دانييل. قيادة عملية تكوين الجريبات من خلال حوار الخلايا الجسدية الخلوية: دروس من النماذج الجينية ［J］. The⁃ riogenology ، 2016 ، 86 （1）: 41-53.

［16］ تاكاشي شيميزو أ ، ناوميتشي كوساكا أ ، شياكيمو راياما أ ، وآخرون. تعبير مستقبلات Apelin و APJ في الخلايا الحبيبية وخلايا theca خلال مراحل مختلفة من التطور الجريبي في المبيض البقري: تورط في موت الخلايا المبرمج والتنظيم الهرموني- علم مباشر ［J］. علم التكاثر الحيواني ، 2009116 （1-2）: 28-37.

［17］ Lin Siwen ، Chen Shaobo ، Yin Changchang ، وآخرون التأثير الاستروجين لمجموع مركبات الفلافونويد من Cistanche deserticola deserticola على تعزيز التمايز العظمي ［J］ بحث وتطوير المنتجات الطبيعية ، 2020 ، 32 (3): 373-378

［18］ تاو جين ليانغ ، وانغ شياو ، وي يوان يوان ، وآخرون التأثير الوقائي للفلافونيدات من Cuscuta chinensis على إفراز BPA غير الطبيعي للهرمونات الذكرية في الخلايا الخلالية لخصية الفأر [J] التقدم في طب الحيوان 2019 ، 40 (5): { {4}}

［19］ Wang Peng و Hou Deyu و Shi Liguang وآخرون Danzhou Chicken FSH دراسة حول تعدد أشكال الجين أحادي النوكليوتيدات ［J］ Heilongjiang تربية الحيوانات والطب البيطري ، 2018 ، 10 (19): 19-22

［20］ ZHANG M ، SHI H ، SEGALOFF DL ، وآخرون. التعبير عن مستقبلات الهرمون اللوتيني في الجهاز التناسلي الأنثوي للفأر وإزالته ［J］. بيولوجيا التكاثر ، 2001 ، 64 1）: 179-187.

［21］ Li Qin ، Wang Qigui TGF- تقدم البحث وآفاق أفراد الأسرة الذين ينظمون تطور الجريبات في الدواجن ［J］ Chinese Poultry، 2019 ، 41 (19): 1-5

［22］ Guan Hongbin، Li Qingzhang تقدم أبحاث حول هرمون تحفيز الجريب [J] Journal of Northeast Agricultural University، 2002 ، 8 (3): 306-311

［23］ Wu Xinpei ، Wang Shuying Immunohistochemical Localization of FSHR و LHR في مبايض Laiwu Black Goat ［J］ Life Science Research، 2006 ، 25 (4): 367-371

［24］ TISCHKAU SA ، HOWELL RE ، HICKOK JR ، وآخرون. ينظم تدفق الهرمون اللطيف عرض الجينات على مدار الساعة البيولوجية في مبيض الدجاج ［J］. Chronobiology international، 2011،28 （1）: 10-20.

［25］ Tang Haifei ، و Wang Zhiwen ، و Zheng Xuesong ، وآخرون ، التقدم في أبحاث وظائف الإستروجين [J] التكاثر ومنع الحمل ، 2019 ، 39 (4): 334-340

［26 تأثير Liu Lingbin لضوء الإشعاع أحادي اللون على مستقبلات هرمون الاستروجين (ER ، ER） ، تأثير تعبير مستقبل البروجسترون (PR-A ، PR-B) في أنسجة المبيض Ya'an: Sichuan Agricultural University، 2013

［27］ COUSE JF و LINDZEY J و GRANDIEN K وآخرون توزيع الأنسجة والتحليل الكمي لمستقبلات هرمون الاستروجين ألفا （ERal⁃ pha ومستقبلات الاستروجين بيتا （ERbeta مرسال ribonucle⁃ حامض في النوع البري والفأرة ERalpha-knockout ［J］. En⁃ docrinology، 1997،138 （11）: 4613-4621.

［28］ Guo Miao ER في أنسجة المبيض للدجاج البياض تنظيم واضح للتغيرات الديناميكية وفحص الجين المنظم Tai'an: Shandong Agricultural University، 2017. [تقدم بحث Zhao Biqian في تطبيق daidzein في إنتاج الدجاج البياض [J ] موجز جوانجدونج ، 2017 ، 26 (8): 31-33