آثار Cistanche Deserticola على إصابة الرئة الحادة في الجرذان المصابة بالإنتان
Mar 09, 2022
جهة الاتصال: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 البريد الإلكتروني:audrey.hu@wecistanche.com
[الملخص]الهدف: دراسة تأثيرCistanche Deserticolaعلى الحادةإصابة الرئة(علي) في الفئران المصابة بالتسمم. الطرق: تم صنع نموذج الإنتان بربط الأعور والثقب. تم إجراء الفحوصات النسيجية المرضية وقياس العلامات البيولوجية لـ ALI. النتائج: تحت المجهر الضوئي في المجموعة المالحة كان هناك وذمةبين الرئة، وعدد كبير من كريات الدم الحمراء والعدلات ، وبروتين البلازما في التجاويف السنخية. الرئةوزاد الوزن الرطب / الجاف ، ومعدل العدلات ، ومحتوى البروتين في سائل غسيل الأسناخ الرئوي ، ونفاذية الأوعية الدموية الرئوية ونفاذية السنخية الرئوية ، و MDA ، و SOD ، وكذلك MPO ، بشكل كبير. في المجموعة معCistanche Deserticolaكانت مؤشرات ALI أقل بكثير من تلك الموجودة في المجموعة التي تحتوي على محلول ملحي.
استنتاج: Cistanche Deserticolaله تأثيرات كبيرة على ALI في الفئران المصابة بالإنتان. ربما تكون الآلية العلاجية من خلال تثبيط العدلات والجذور الحرة المؤكسدة.
【الكلمات الدالة】الإنتان. إصابة الرئة الحادة؛ Cistanche Deserticola
الإنتان هو حالة طوارئ سريرية ومرض خطير ، وكان البحث عن أدوية علاجية فعالة دائمًا مشكلة رئيسية في الأبحاث السريرية والأساسية. التسبب في أمراض الطب الصيني التقليدي للإنتان هو نقص البر ووفرة الشر. يعد العلاج المهاجم للازدهار الشرير للجسم أحد تدابير العلاج الفعالة.سيستانشهو الطب الصيني التقليدي منشط. أكدت الدراسات الدوائية أن لها وظائف وقائية مثل تعزيز معدل تخليق الحمض النووي الخلوي ومقاومة الجذور الخالية من الأكسجين. يلاحظ المؤلف بشكل تجريبي تأثيرCistanche على تلف مشكلة الرئةفي تعفن الدم ، من أجل توفير استكشاف فعال لعلاج الإنتان.
Cistanche Echinacoside يعالج أمراض الرئة
1 المواد والأساليب
1. 1 حيوانالصحة 40 ذكور جرذان خماسية الأبعاد ، وزنها 200 ~ 250 جم ، مقدمة من مركز الحيوانات التجريبية بجامعة Huazhong للعلوم والتكنولوجيا ، رقم فحص الجودة: TJLA-2008–1670 تم تقسيمها عشوائيًا إلى 3 مجموعات: 8 مجموعة ملحية عادية ، Ig / كانت هناك 12 جرذًا في مجموعة معجون الباذنجان مل و 12 جرذًا في 5 جم / ملسيستانشمجموعة. أعطيت حيوانات التجربة الأدوية المقابلة بالتزقيم الروتيني لمدة 15 يومًا ، مرتين في اليوم (سيستانشتم توفير مستخلص الصحراء من قبل غرفة تحضير الطب الصيني التقليدي في هذا المستشفى) ، وتم استخدام جرعة 200 مجم / كجم في حيوانات التجارب وفقًا لطريقة الأدب U] بعد 12 دقيقة من ربط الأعور والانثقاب. جمع العينات.
1.2 الفحص النسيجي لرئة الفئران.خذ كمية صغيرة من الفص الأيسر للحيوانرئةمن كل مجموعة ، قم بإصلاحه بنسبة 10 في المائة من الفورمالديهايد ، والبارافين المضمن في القسم ، وبقع HE ، ويلاحظ باستخدام مجهر ضوئي عادي ، وعلى هذا الأساس ، خذرئةمشكلة لصنع 1 مم 3 لـ 25 تم تثبيتها في محلول جلوتارالدهيد في المائة ، ثم تم تثبيتها في محلول رباعي أكسيد بنسبة 1 في المائة ، مجففة بالإيثانول والأسيتون ، مضمن في Epon 81 ، محضرة شرائح رفيعة للغاية ، ملطخة برصاص اليورانيوم ، وتم ملاحظتها بواسطة إلكترون الإرسال مجهر.
1.3 تحديد نسبة الوزن الرطب / الجاف لمشكلة رئة الجرذان ، ونسبة عدد الخلايا في سائل غسيل الأسناخ ، ونسبة وزن محتوى البروتين.خضعت مجموعة أخرى من الفئران لغسل السنخ بعد بضع الصدر ، وخضع سائل الغسل إلى عدد الخلايا وتصنيف الخلايا تحت المجهر. تستخدم طريقة كوماسي الزرقاء الرائعة لتحديد محتوى البروتين وحسابهرئةمؤشر النفاذية (بروتين سائل الغسيل السنخي / بروتين البلازما ، LPI).
1.4 التغييرات في نفاذية الأوعية الدموية الرئوية (PVP) في الفئرانوفقًا للطريقة التي قدمها Zhou et al. (2) ، بعد الإعطاء ، كانت الحيوانات في كل مجموعة تخضع لربط وثقب الأعور ، وتم استخدام حقن الوريد الفخذي بمقدار 50 مجم / كجم من اللانثانم لفتح الصدر وإزالة الرئتين. إزالة المشاكل المحيطة ، نقعرئتينفي محلول الفورماميد (كمية الفورماميد 20 مجم / 100 جم من وزن الجسم) ، المحتضنة في 45-50 حاضنة T لمدة 72 ساعة ، انتظر حتى يتم ترشيح كل الأصباغ الموجودة في المشاكل ، قم بإزالة المشاكل ، جهاز الطرد المركزي ، المادة الطافية ، استخدم مقياس الطيف الضوئي فوق البنفسجي لأداء قياس الألوان عند 620 نانومتر ، واحسب محتوى الإيثانول وفقًا للمنحنى القياسي لتحديد تغيير PVP.
1.5 تحديد malondialdehyde (MDA) في مشكلة رئة الفئرانتم استخدام طريقة حمض الثيوباربيتوريك (TBA) لتحديد نشاط MDA. أضف 4 مل 1.67 مول / لتر حامض الكبريتيك. 0. 541 بالمائة من حمض الفوسفونيك إلى عينة اختبار 50 مل ، امزج جيدًا ، وطرد مركزي عند 3000r / دقيقة لمدة 10 دقائق ، وقم بمعالجة الترسيب مرة أخرى على النحو الوارد أعلاه ، ثم أضف 1 مل من الماء المقطر المزدوج ، 1 مل محلول TBA ، 95 بالمائة لا مائي حمام لمدة 60 دقيقة ، استخلاص مع 5 مل n- بيوتانول ، رباعي إيثوكسي بروبان كمعيار ، التركيز النهائي لـ lnmol / L ، مقياس الطيف الضوئي الفلوري عند 532 نانومتر لقياس الامتصاص.
1.6 تحديد ديسموتاز الأكسيد الفائق (SOD) في مشاكل رئة الجرذوفقًا للطريقة الموجودة في الأدبيات [4] ، تم تحديد نشاط SOD بواسطة طريقة Huangpuyin أوكسيديز (تم شراء مجموعة من معهد Nanjing Jiancheng للهندسة البيولوجية).
1.7 تحديد الميلوبيروكسيديز (MPO) في الفئرانرئةمشكلة.خذ مشكلة الرئة لغسل الدم المتبقي قدر الإمكان في محلول ملحي متساوي التوتر ، وضعه في محلول فوسفات يحتوي على {{0}}. 5٪ سيتيل تراي ميثيل بروميد (PH6. 0) اصنع 5 بالمائة من المتجانس ، وتعمل وفقًا لتعليمات المجموعة.
1.8 أساليب إحصائيةاستخدم البرنامج الإحصائي SPSS ، وقم بقياس البيانات بصيغة (x ± s) ، باستخدام اختبار t واختبار X2.
سيستانش
2 النتائج
2.1 مقارنة نسبة الوزن الرطب / الجاف منرئةالمشاكل ، ونسبة عدد الخلايا ، ومحتوى البروتين في سائل غسيل السنخية في كل مجموعة موضحة في الجدول 1.رئةكانت نسبة الوزن الرطب / الجاف في المجموعة المالحة أعلى بكثير من تلك فيسيستانشمجموعة (ص<0.05 or="" 0.01).="" the="" cell="" count="" ratio="" and="" protein="" content="" in="" the="" alveolar="" lavage="" fluid="" of="" the="">سيستانشكانت المجموعة أقل بكثير من تلك الموجودة في المجموعة المالحة (P.<0.05 or="" 0.01).="" 0.="" 01),="" and="" with="" the="" increase="" of="" the="" dose="" concentration,="" it="" shows="" a="" significant="">
الجدول 1 مقارنة بين نسبة الوزن الرطب / الجاف لمشكلة الرئة ونسبة عدد الخلايا ومحتوى البروتين في سائل الغسل السنخي للفئران في كل مجموعة (X ± S)
مقارنة مع مجموعة المحلول الملحي العادي ، ف<0.><001. below="" is="" the="">
2.2 مقارنة التغيرات المورفولوجية لمشاكل الرئة لدى الفئران في كل مجموعة. ملاحظة عامة:رئتينفي المجموعة المالحة كانت متضخمة بشكل ملحوظ ولونها أحمر غامق ، مع درجات متفاوتة من الاحتقان والوذمة على السطح ، وعدد كبير من احتشاءات الرئة عند الحافة ؛ الرئتين فيسيستانشكانت المجموعة حمراء فاتحة مع احتقان خفيف ووذمة ، ولا يوجد احتشاء رئوي واضح. أظهرت الملاحظة بالميكروسكوب الضوئي أنه في المجموعة المالحة كان هناك احتقان خلالي سنخي ورئوي ووذمة ، وعدد كبير من ارتشاح العدلات المنتشر في التجويف السنخي ، وتشكيل بعض الخراج ، ودرجات متفاوتة من انخماص ، ونخر ، وانتفاخ الرئة التعويضي. ، الجلطة وتشكيل غشاء شفاف مماثل. تم تقليل الآفات المذكورة أعلاه في مجموعة Cistanche بشكل ملحوظ. في المجموعة المالحة ، انتفخت الخلايا الظهارية السنخية ، وأفرغت الجسيمات الصفائحية بشكل واضح ، وتشكلت فجوات كبيرة ، وتورم الخلايا البطانية الشعرية ، وأصيبت الخلايا البطانية باستمرار ، واتسعت المساحة بين الخلايا ، وكانت الشعيرات الدموية والأغشية القاعدية السنخية فضفاضة ومتسعة. سماكة غير منتظمة ، سماكة غير متساوية. في مجموعة Cistanche ، لم تكن الخلايا الظهارية السنخية منتفخة ، وتم تقليل إفراغ الكريات الصفائحية ، وكان عدد الفجوات المتكونة صغيرًا ، وكان الاتصال بين الخلايا البطانية الشعرية قريبًا من الطبيعي ، وكان الغشاء القاعدي فضفاضًا قليلاً وغير متسمك بشكل غير منتظم. بالمقارنة مع مجموعة Ig / niL cistanche ، كان لمجموعة cistanche 5g / mL نطاق أصغر من التغيرات المورفولوجية لمشكلة الرئة ، وكانت درجة إصابة الرئة أخف.
2.3 مقارنة بين LPI و PVP للجرذان في كل مجموعة مبينة في الجدول 2. كان LPI و PVP للمجموعة المالحة أعلى بكثير من تلك الخاصة بمجموعة Cistanche (PV 0. 0 5 أو 0.01 ). كان LPI و PVP لمجموعة Cistanche أقل ، وكان لهما علاقة كبيرة بالجرعة والتأثير.
2.4 مقارنة نشاط MDA.SOD.MPO فيرئةمشاكل الفئران في كل مجموعة مبينة في الجدول 3. محتوى MDA فيرئةكانت مشكلة المجموعة المالحة أعلى بكثير من مشكلةسيستانشالمجموعة ، بينما زاد نشاط SOD ونشاط MPO في مشكلة الرئة لمجموعة Cistanche بشكل كبير (F<0.05 or="">
3 مناقشة
يعد فشل الأعضاء المتعددة هو السبب الجذري للحالة التي لا رجعة فيها ومعدل الوفيات المرتفع في المرحلة المتأخرة من الإنتان (5). حماية وظائف الأعضاء لها أهمية كبيرة في تقليل معدل الوفيات السريرية المرتفع للإنتان. الرئة هي أول عضو يعاني من فشل أعضاء متعددة. ثلث مرضى الإنتان يموتون من إصابات الرئة الحادة (ALI) ومتلازمة الضائقة التنفسية الحادة (ARDS). تتمثل الآلية الفيزيولوجية المرضية الرئيسية لـ ALI في تراكم عدد كبير من العدلات في مشكلة الرئة وتنشط الخلايا البطانية الوعائية وتلتزم بها. في الوقت نفسه ، يزداد تركيز الإنزيم المساعد أوكسيديز المختزل الذي ينقل الإلكترونات المفردة ، مما يتسبب في انفجارات في الجهاز التنفسي ، ويولد كمية كبيرة من الجذور الحرة للأكسجين ، ويتسبب في تلف ووظيفة أغشية الخلايا وهياكل الأغشية من خلال الأكسدة القوية. العقبات⑹. يعكس بيروكسيد الدهون تغير الجذور الحرة للأكسجين في المشكلة ويرتبط ارتباطًا مباشرًا بدرجة إصابة الرئة (7). في نظام الأكسدة الأنزيمي وغير الأنزيمي المضاد للجذور في الجسم ، يحافظ نشاط SOD على علاقة جيدة مع درجة تلف المشكلة ⑺. مقارنة مع المجموعة الفسيولوجية المالحة ، أظهرت أنشطة MDA و SOD لمجموعة Cistanche فروق ذات دلالة إحصائية. Cistanche له وظائف تعزيز وظيفة المناعة ، ومكافحة الشيخوخة ، وتعزيز معدل تخليق الحمض النووي للخلية. أظهرت النتائج التجريبية انخفاض معنوي في معامل الرئة ، PLT ، نسبة العدلات في سائل غسيل الحويصلات الهوائية ، ونفاذية الأوعية الدموية الرئوية لمجموعة Cistanche ، وانخفض نشاط MDA لمشكلة الرئة ، وزيادة SOD بشكل ملحوظ ، وانخفض نشاط MPO. في الوقت نفسه ، أظهرت الملاحظة المورفولوجية أن درجة تلف مشكلة الرئة قد انخفضت بشكل كبير ، وانخفض تسلل العدلات ، وكانت مجموعة Cistanche 5g / mL أقل إصابة في الرئة من مجموعة Ig / mL Cistanche ، وكان هناك تأثير جيد. العلاقة بين الجرعة والتأثير. يقترح أن Cistanche له تأثير وقائي كبير على ALI. قد تكون الآلية: (1) تمنع انتقال الخلايا الالتهابية فيرئتين، تقليل الجذور الحرة للأكسجين التي تنتجها العدلات والخلايا المنشطة الأخرى بحيث تتم حماية الأغشية الحيوية الرقيقة ؛ (2) تعزيز تخليق الحمض النووي والبروتين ، وحماية ضد تأثير إصابة الرئة ؛ (3) تعزيز الوظيفة المناعية للبلعمات وتقليلهارئةالضرر الناتج عن السموم الداخلية. توفر النتائج التجريبية أساسًا تجريبيًا لعلاج إصابة الرئة الحادة في الإنتان السريري عن طريق تقوية الجسم وتقوية النقص.
المراجع
[1] جين هويمينغ. نموذج الإنتان بعد ربط الأعور والانثقاب [J]. المجلة الصينية للفيزيولوجيا المرضية "990 ، 6 (2): 126 ~ 127.
[2] Zhou WG ، Mc Collum MO ، Levine BA ، وآخرون. دور عامل تنشيط الصفائح الدموية في التهاب البنكرياس المصاحب لإصابة الرئة الحادة في الجرذ [J]. آم جيه باتول ، 1992 ، 140: 971 -979.
[3] وانغ تشيان ، تشو شياو فنغ ، تشاو شيلونغ. الأساليب التجريبية للطب الحديث [م]. بكين: دار النشر الطبية الشعبية ، 2007: 508.
[4] Zhang Xiuming ، Li Jianzhai ، Wei Mingjing. علم المختبرات البيوكيميائية السريرية الحديثة [م]. بكين: المطبعة الطبية العسكرية الشعبية ، 2008: 896.
[5] لوه تشنجياو. دراسات الصدمة [م]. تيانجين: مطبعة تيانجين للعلوم والتكنولوجيا ، 2008: 345.
[6] Xanthous CA ، Hall JB. Samsel RW. الذيفان الداخلي في الأمراض التي تصيب الإنسان ، الجزء 2 التأثير البيولوجي والتقييم السريري للعلاجات المضادة للسموم الداخلية [J]