خلاصة:زيت بذور اليقطين منتج ثانوي ، وفير في العناصر الغذائية والمكونات النشطة بيولوجيا التي تعزز العديد من الفوائد الصحية. هدفت هذه الدراسة إلى مقارنة التركيبات الكيميائية ومضادات الأكسدة والأنشطة الدوائية لزيوت بذور اليقطين المستخرجة من Cucurbita moschata Duch. السابق بوار. (PSO1) و Cucurbita moschata (القرع الياباني) (PSO2) عن طريق الاستخراج الأنزيمي المائي. تم استخدام خليط إنزيم يتكون من البكتيناز والسليولاز والبروتياز (1: 1: 1) في عملية الاستخراج الأنزيمية. تم تحديد تركيبة الأحماض الدهنية للزيوت باستخدام إستر ميثيل الأحماض الدهنية / مطياف الكتلة الكروماتوجرافي الغازي. تم قياس مقايسات نشاط مضادات الأكسدة باستخدام ثنائي فينيل بيكريل هيدرازيل ثابت الجذور الحرة ، وراديكاليون 2 ، 20 - أزينوبيس - (3- إيثيل بنزوثيازولين -6- سلفونات ، قدرة الحديد المختزل / مضادات الأكسدة ، ومقايسة ثيوسيانات الحديد. تثبيط تم فحص الإنزيمات التي تنطوي على شيخوخة الجلد وعملية التبييض ، وكان حمض اللينوليك مكونًا رئيسيًا لجميع زيوت بذور اليقطين. بالإضافة إلى ذلك ، تم اكتشاف كمية كبيرة من حمض الأوليك ، وحمض البالمتيك ، وحمض دهني. يمتلك PSO2 أعلى نشاط مضاد للأكسدة مقارنةً بزيوت بذور اليقطين. PSO1 وزيوت بذور اليقطين التجارية (COM1 و COM2). أظهر كل من PSO1 و PSO2 تأثيرًا مثبطًا أعلى على الهيالورونيداز والكولاجيناز والتيروزيناز من الإعلانات التجارية. لذلك ، يمكن أن ينتج عن الاستخراج الأنزيمي المائي زيوت بذور اليقطين مع مضادات أكسدة أعلى ومضادة للشيخوخة و أنشطة التبييض: هذا مفيد لمزيد من الدراسات الدوائية ويمكن استخدامه كغذاء وظيفي لفوائد الجلد.

وفقًا للدراسات ذات الصلة ،cistancheهو عشب شائع يعرف باسم "عشب معجزة يطيل الحياة". مكونه الرئيسي هوالسيستانوسيد، والتي لها تأثيرات مختلفة مثلمضادات الأكسدة, مضاد التهاب، وتعزيز وظيفة المناعة. الآلية بين cistanche وجلد تبييضيكمن في التأثير المضاد للأكسدة من cistancheجليكوسيدات. ينتج الميلانين في جلد الإنسان عن طريق أكسدة التيروزين المحفزالتيروزيناز، ويتطلب تفاعل الأكسدة مشاركة الأكسجين ، لذلك تصبح الجذور الخالية من الأكسجين في الجسم عاملاً مهمًا يؤثر على إنتاج الميلانين. يحتوي Cistanche على السيستانوزيد ، وهو مضاد للأكسدة ويمكن أن يقلل من توليد الجذور الحرة في الجسم ، وبالتاليتثبيط إنتاج الميلانين.

انقر فوق ملحق Cistanche Tubulosa

لمزيد من المعلومات:

david.deng@wecistanche.com WhatApp: 86 13632399501

1 المقدمة

ينتمي اليقطين إلى جنس Cucurbita وعائلة Cucurbitaceae ، وهو نبات شائع ومشهور تم زراعته في شمال المكسيك وانتشر في أوروبا وأمريكا الغربية وآسيا [1]. يعتبر اليقطين غذاءً وظيفيًا يحتوي على عناصر غذائية وفيرة مثل البروتين والكربوهيدرات والدهون والألياف وما إلى ذلك ، جنبًا إلى جنب مع المركبات الكيميائية النباتية مثل توكوفيرولس ، كاروتينات ، وسيتوستيرول [2]. تم العثور على المغذيات النباتية من أجزاء مختلفة من اليقطين الأنشطة الدوائية [2]. أظهر مستخلص قشر اليقطين آثارًا مفيدة لجرح الحروق في النماذج الحيوانية [3]. أظهر لب اليقطين نشاطًا مضادًا للأكسدة ومضادًا للالتهابات ومضادًا لتكوين الأوعية [2] ، بالإضافة إلى نشاط مضاد للتعب في الفئران [4]. بالإضافة إلى ذلك ، تعد بذور اليقطين مصدرًا طبيعيًا جيدًا للأحماض الدهنية الأساسية والفيتوسترولس التي تقلل من خطر الوفيات القلبية الوعائية [5،6]. زيت بذور اليقطين هو منتج ثانوي لمعالجة بذور اليقطين ، وهي غنية بمختلف الأحماض الدهنية والمركبات النشطة بيولوجيًا مثل -كاروتين ، -توكوفيرول ، فيتامين ب ، لوتين ، فيتوستيرول ، ومعادن أخرى [7،8]. يمارس الزيت تأثيرًا مضادًا للأكسدة ومضادًا للالتهابات ومضادًا للبكتيريا وللتئام الجروح [١.٩]. علاوة على ذلك ، له العديد من الفوائد الصحية ضد الأمراض ، مثل ارتفاع ضغط الدم والسكري والسرطان [8،10].

تم تطوير طرق مختلفة لاستخراج زيت البذور ، بما في ذلك الطرق الميكانيكية مثل الضغط على البارد [11] والاستخراج بالضغط العالي [12]. كما تم توثيق الاستخلاص بالمذيبات لزيت البذور باستخدام المذيبات العضوية مثل الهكسان ، وخلات الإيثيل ، والأسيتون ، والميثانول [13 ، 14]. الاستخراج بمساعدة الإنزيم هو طريقة بديلة لصناعة الزيوت النباتية لأنها تقنية صديقة للبيئة وآمنة. الآلية الرئيسية للاستخراج الأنزيمي المائي هي التحلل المائي وكسر جدران الخلايا للمواد النباتية ، مما يؤدي إلى مزيد من النفاذية وإطلاق المكونات النشطة بيولوجيًا ، بما في ذلك المرحلة الزيتية [15]. تتكون مخاليط الإنزيمات المختلفة المطبقة في هذا الاستخراج من البكتينازات ، السليلاز ، الهيميسليلاز ، الأرابينوز ، الجلوكانيز ، والزيلانيز [16 ، 17]. كما أن الظروف المُحسّنة لخليط الإنزيم ، على سبيل المثال ، درجة الحرارة ، ودرجة الحموضة ، ووقت التفاعل ، وحجم الجسيمات ، وتركيز الإنزيم ، عززت أيضًا نشاط الإنزيم [16]. في الوقت الحاضر ، تُستخدم هذه الطريقة على نطاق واسع لاستخراج الزيت من العديد من الفواكه وبذور النباتات [18 ، 19]. أظهرت بعض الدراسات السابقة الحالة المثلى لزيت بذور اليقطين للحصول على إنتاجية عالية وأنشطة دوائية فعالة [20 ، 21].

حاليًا ، يستهلك الناس زيت بذور اليقطين في الحلويات أو تتبيلات السلطة ، وهو أيضًا عنصر شائع في مستحضرات التجميل. شيخوخة الجلد هي عملية بيولوجية معقدة تتميز بالتجعد ، وفقدان المرونة ، وفقدان الرطوبة ، والملمس الخشن الناجم عن الإجهاد التأكسدي ، وتلف الحمض النووي ، وتراكم المنتج النهائي للجليكيشن المتقدم [22]. يمكن أن يتحلل حمض الهيالورونيك والكولاجين والإيلاستين ، وهي مكونات مهمة للبشرة ، عن طريق إنزيمات الهيالورونيداز والكولاجيناز والإيلاستاز ، على التوالي ، مما يؤدي إلى شيخوخة الجلد. تم استخدام العديد من الزيوت النباتية ، مثل زيت الزيتون وزيت بذور عباد الشمس وزيت بذور العنب وزيت الجوجوبا لخصائص مستحضرات تجميل الجلد للاحتفاظ بالرطوبة وتحسين وظيفة حاجز الجلد ومنع شيخوخة الجلد [23]. بالإضافة إلى ذلك ، فإن تصبغ الجلد هو نمط ظاهري متغير وملحوظ في البشر يتضمن تكوين الميلانين وينظمه إنزيم التيروزيناز [24]. في الوقت الحاضر ، تم اختبار مستخلصات نباتية مختلفة لمستحضرات التجميل والمستحضرات الصيدلانية لتقليل إنتاج الميلانين ، وتعمل كعوامل مبيضة [25 ، 26].

2. المواد والأساليب

2.1. المواد النباتية

2.2. المواد الكيميائية والكواشف 

2.3 الاستخراج الأنزيمي المائي

زيوت بذور اليقطين من كل من C. moschata Duch. تم استخلاص Ex Poir و C. moschata (القرع الياباني) بطريقة الاستخلاص الأنزيمي المائي باستخدام معاملات التحلل المائي الأنزيمية من دراسة سابقة قام بها Kanopka et al. (2 0 16) ، بما في ذلك تركيز الإنزيم ونسبة الإنزيم إلى الركيزة ودرجة حرارة التفاعل ودرجة الحموضة ووقت التفاعل [21]. تم الجمع بين ثلاثة أنواع مختلفة من الإنزيمات ، بما في ذلك البكتيناز والسليولاز والبروتياز ، في نسبة وزن 1: 1: 1 لتوليد مزيج مركّز من الإنزيمات. بعد ذلك ، تم تخفيف خليط التركيز الناتج في ماء DI لتوليد 2 في المائة وزن / وزن خليط إنزيمي مائي. ثم تمت إضافة بذور اليقطين الخالية من القشور إلى الخليط الأنزيمي المائي الناتج بنسبة وزن 1: 1. تم بعد ذلك طحن الخليط جيدًا باستخدام خلاط Moulinex DB81 في درجة حرارة الغرفة حتى التجانس. تم تعديل الرقم الهيدروجيني للملاط الناتج بعد ذلك إلى 4.7 باستخدام 0.1 مولار من حمض الهيدروكلوريك واحتضانه عند 54 درجة مئوية لمدة 15 ساعة. بعد تبريد الملاط إلى درجة حرارة الغرفة ، تم الطرد المركزي عند 11500 × جم لمدة 10 دقائق. تم جمع الطبقة العليا من المواد الطافية والتي كانت مرحلة الزيت. لم يتم استحلاب الكريم المنتج أثناء عملية الاستخراج ولكن تمت إزالته عن طريق الشفط باستخدام الماصة الدقيقة. تمت إزالة بقايا بذور اليقطين بالترشيح من خلال ورق الترشيح Whatman رقم 1 تحت فراغ [21]. زيت بذور اليقطين من C. moschata Duch. تم الاحتفاظ بـ Ex Poir (PSO1) و C. moschata (القرع الياباني) (PSO2) في حاويات محكمة الإغلاق ومقاومة للضوء في درجة حرارة الغرفة حتى مزيد من التجارب.

2.4 تحديد التركيب الكيميائي لزيت بذور اليقطين باستخدام الأحماض الدهنية ميثيل استر / طريقة قياس الطيف الكتلي للغاز (FAME / GC / MS)

2.5 تحديد الأنشطة المضادة للأكسدة

2.5.1. 2 ، 2- ثنائي فينيل -1- بيكريلهيدرازيل (DPPH) مقايسة الكسح الجذري

تم تحديد نشاط الكسح الجذري لـ DPPH (DPPH •) باستخدام الطريقة التي وضعها Chaiyana et al. (2017) [27]. باختصار ، تم خلط 20 ميكرولتر من عينات الزيت (PSO1 ، PSO2 ، COM1 ، COM2) وحمض اللينوليك المذاب في DMSO مع 180 ميكرولتر من 167 ميكرومتر من محلول إيثانولي DPPH في 96- صفيحة بئر ثم حضنت لمدة 30 دقيقة في درجة حرارة الغرفة في الظلام. تم استخدام حمض الأسكوربيك (1 مجم / مل) كعنصر تحكم إيجابي. تم قياس الكثافة الضوئية (OD) عند 520 نانومتر باستخدام قارئ صفيحة ميكروسكوبية (قارئات Microplate EZ Read 2000 ، Biochrome ، إنجلترا). أجريت التجارب في ثلاث نسخ وأجريت في ثلاثة مستقلين. تم حساب النسبة المئوية لتثبيط DPPH باستخدام المعادلة (1):

تثبيط DPPH (النسبة المئوية)={[(ODA - ODB) - (ODC - ODD)] / (ODA - ODB)} × 100، (1)

2.5.2. 2 ، 20 - Azino-Bis -3- Ethylbenzthiazoline -6- Sulphonic Acid (ABTS) Assay

تم قياس نشاط الكسح الجذري الموجب ABTS (ABTS • plus) بطريقة القياس اللوني وفقًا لـ Chaiyana et al. (2 0 17) و Paradee وآخرون. (2 0 19) [27،28] مع تعديل طفيف. تم إنشاء ABTS • plus بإضافة 2 مل من 7 ملي مولار من كبريتات البوتاسيوم مع 3 مل من 2.45 ملي بيرسلفات البوتاسيوم وحضنت لمدة 16-24 ساعة في درجة حرارة الغرفة في الظلام. تم تخفيف ABTS plus الناتج لاحقًا باستخدام الإيثانول للحصول على OD بمقدار 0.7 ± 0.1 عند 750 نانومتر. باختصار ، تم خلط 20 ميكرولتر من عينات الزيت (PSO1 ، PSO2 ، COM1 ، COM2) وحمض اللينوليك المذاب في DMSO مع 180 ميكرولتر من ABTS • بالإضافة إلى محلول إيثانولي في لوحة بئر 96- وحضنت لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة . تم قياس OD عند 750 نانومتر باستخدام قارئ صفيحة ميكروسكوبية (قارئات Microplate EZ Read 2000 ، Biochrome ، إنجلترا). تم استخدام حمض الأسكوربيك (1 مجم / مل) كعنصر تحكم إيجابي. تم إنتاج المنحنى القياسي عن طريق رسم الامتصاص عند 750 نانومتر مقابل تركيزات مختلفة من Trolox تتراوح من 2.5 - 30 ميكروغرام / مل. تم حساب ABTS بالإضافة إلى نشاط الكسح من منحنى ترولوكس القياسي (R 2=0. 9922) وتم التعبير عنه على أنه سعة مضادات الأكسدة المكافئة لـ Trolox (TEAC). أجريت التجارب في ثلاث نسخ وأجريت في ثلاثة مستقلين.

2.5.3. مقايسة القدرة المضادة للأكسدة الحديديك (FRAP)

تم تحديد قوة مضادات الأكسدة الحديديك (FRAP) لكل عينة باستخدام مقايسة FRAP كما هو موضح في دراسة سابقة بواسطة Chaiyana et al. (2 0 17) التي تم تعديلها قليلاً من Saeio et al. (2 0 11) [27،29]. تم إنشاء كاشف FRAP حديثًا عن طريق خلط محلول أسيتات 300 ملي مولار (الرقم الهيدروجيني 3.6) ، 10 ملي مولار 2،4،6 ثلاثيريديل- s- تريازين (TPTZ) في 40 ملي مولار حمض الهيدروكلوريك ، و 20 ملي مولار FeCl3 بنسبة 10: 1: 1. في هذه الدراسة ، تم خلط 20 ميكرولتر من عينات الزيت (PSO1 ، PSO2 ، COM1 ، COM2) وحمض اللينوليك مع 180 ميكرولتر من كاشف FRAP في صفيحة بئر 96- وحضنت لمدة 5 دقائق عند درجة حرارة الغرفة في الظلام. تم قياس OD عند 595 نانومتر باستخدام قارئ صفيحة ميكروسكوبية (قارئات Microplate EZ Read 2000 ، Biochrome ، إنجلترا). تم استخدام حمض الأسكوربيك (1 مجم / مل) كعنصر تحكم إيجابي. تم إنتاج المنحنى القياسي عن طريق رسم الامتصاص عند 595 نانومتر مقابل تركيزات مختلفة من كبريتات الحديديك (FeSO4) تتراوح من 0.003 - 0.5 ملي مولار. تم حساب قيمة FRAP من منحنى FeSO4 القياسي (R 2=0. 9965) وتم التعبير عنها كسعة مكافئة (EC1). أجريت التجارب في ثلاث نسخ وأجريت في ثلاثة مستقلين.

2.5.4. فحص ثيوسيانات الحديديك (FTC)

2.6. تحديد أنشطة مكافحة الشيخوخة

2.6.1. نشاط مضاد الهيالورونيداز

تم إجراء قياس نشاط مضادات الهيالورونيداز كما هو موضح سابقًا بواسطة Chaiyana et al. (2 0 2 0) [31]. أولاً ، تم خلط 2 0 ميكرولتر من عينات الزيت (PSO1 ، PSO2 ، COM1 ، COM2) مع 100 ميكرولتر من 15 U / مل من محلول هيالورونيداز وحضنت عند 37 درجة مئوية لمدة 10 دقائق. بعد الحضانة ، تمت إضافة 100 ميكرولتر من 0.03٪ وزن / حجم من حمض الهيالورونيك المذاب في محلول فوسفات 20 ملي مولار (الرقم الهيدروجيني 5.35) ، ثم حضنت عند 37 درجة مئوية لمدة 45 دقيقة. بعد ذلك ، تمت إضافة 1 مل من 0.1 بالمائة من الألبومين المصل البقري وحضنت في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. تم تحديد OD عند 600 نانومتر باستخدام كاشف متعدد الأوضاع (Beckman Coulter DTX880 ، Fullerton ، CA ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم استخدام حمض الأولينوليك (0.25 بالمائة وزن / حجم) كعنصر تحكم إيجابي. أجريت التجارب في ثلاث نسخ وأجريت في ثلاثة مستقلين. تم حساب النسبة المئوية لتثبيط الهيالورونيداز باستخدام المعادلة (3):

2.6.2. نشاط مضاد للكولاجين

تم إجراء قياس النشاط المضاد للكولاجين وفقًا للعملية التي أنشأها Chaiyana et al. (2 0 19) و Thring et al. (2009) مع تعديلات طفيفة [32،33]. باختصار ، تم خلط 20 ميكرولتر من عينات الزيت (PSO1 ، PSO2 ، COM1 ، COM2) مع 20 ميكرولتر من محلول كولاجيناز 0.1 U / مل من Clostridium histolyticum وحضنت عند 37 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة. بعد الحضانة ، 80 ميكرولتر من المخزن المؤقت tricine 50 ملي (400 ملي كلوريد الصوديوم و 10 ملي كلوريد الصوديوم ، ودرجة الحموضة 7.5) و 40 ميكرولتر من N - [3- (2- furyl) أكريلويل] -Leu-Gly- تمت إضافة محلول الركيزة Pro-Ala (FALGPA). تم اكتشاف OD على الفور عند 340 نانومتر ثم تم قياسه بشكل مستمر لمدة 20 دقيقة باستخدام قارئ صفيحة ميكروسكوبية (قارئات Microplate EZ Read 2000 ، Biochrome ، إنجلترا). تم استخدام حمض الأولينوليك (1 في المائة وزن / حجم) كعنصر تحكم إيجابي. أجريت التجارب في ثلاث نسخ وأجريت في ثلاثة مستقلين. تم حساب النسبة المئوية لتثبيط الكولاجيناز باستخدام المعادلة (4):

2.6.3. نشاط مكافحة Elastase

تم إجراء قياس نشاط مضاد الإيلاستاز وفقًا للعملية التي أنشأها Chaiyana et al. (2 0 19) و Thring et al. (2 0 0 9) مع تعديلات طفيفة [32،33]. باختصار ، تم خلط 10 ميكرولتر من عينات الزيت (PSO1 ، PSO2 ، COM1 ، COM2) مع 40 ميكرولتر من محلول الإيلاستاز 0.03 وحدة / مل من بنكرياس الخنازير ، ثم 50 ميكرولتر من 200 ملي من محلول Tris-HCL المؤقت (درجة الحموضة 8.0) و 100 ميكرولتر من تمت إضافة 0.8 ملي مولار من محلول الركيزة N-Succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide (AAAPVN). تم اكتشاف OD على الفور عند 410 نانومتر ثم تم قياسه بشكل مستمر لمدة 20 دقيقة باستخدام قارئ صفيحة ميكروسكوبية (قارئات Microplate EZ Read 2000 ، Biochrome ، إنجلترا). تم استخدام حمض الأولينوليك (1 في المائة وزن / حجم) كعنصر تحكم إيجابي. أجريت التجارب في ثلاث نسخ وأجريت في ثلاثة مستقلين. تم حساب النسبة المئوية لتثبيط الإيلاستاز باستخدام المعادلة (5):

2.7. تحديد أنشطة مضادات التيروزيناز

تم تحديد تأثير التبييض لمستخلص طبيعي عن طريق قياس نشاط مضاد التيروزيناز الذي تم إجراؤه وفقًا لـ Saeio et al. (2011) و Laosirisathian et al. (2020) [29،34]. كانت L-tyrosine و L-DOPA ركائز إنزيم التيروزيناز في هذه الدراسة. باختصار ، تم خلط 10 ميكرولتر من عينات الزيت (PSO1 ، PSO2 ، COM1 ، COM2) مع 30 ميكرولتر من التيروزيناز في صفيحة بئر 96- ، ثم حضنت في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. بعد الحضانة ، تمت إضافة 100 ميكرولتر من الركيزة ، وهي 2.5 ملي مولار من L-tyrosine أو L-DOPA ، واحتضانها لمدة 30 دقيقة. تم تحديد OD عند 450 نانومتر باستخدام قارئ صفيحة ميكروسكوبية (قارئات Microplate EZ Read 2000 ، Biochrome ، إنجلترا). تم استخدام حمض كوجيك (20 ميكروغرام / مل) كعنصر تحكم إيجابي. أجريت التجارب في ثلاث نسخ وأجريت في ثلاثة مستقلين. تم حساب النسبة المئوية لتثبيط التيروزيناز باستخدام المعادلة (6):

2.8 تحليل احصائي

تم عرض جميع البيانات على أنها متوسط ​​± الانحراف المعياري (SD). تم تحليل الدلالة الإحصائية باستخدام تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA) متبوعًا باختبار Tukey اللاحق باستخدام GraphPad Prism (الإصدار 8. 0 ، برنامج GraphPad) ، و p <0. 05 تم اعتباره ذات دلالة إحصائية.

3. النتائج والمناقشة

3.1. شخصية زيت بذور اليقطين

في هذه الدراسة ، استخدمنا الاستخلاص الأنزيمي المائي بدلاً من الاستخلاص بالمذيبات العضوية لاستخراج زيت بذور اليقطين من C. moschata Duch. Ex Poir (PSO1) و C. moschata (PSO2) لأنها عملية بسيطة وفعالة ومنتجة [15 ، 21]. كان PSO1 سائل بني داكن مع لزوجة منخفضة ، بينما كان PSO2 سائل بني مخضر ولزوجة منخفضة. كلا زيت بذور اليقطين لهما رائحة مميزة. كانت عائدات PSO1 و PSO2 17.7 بالمائة v / w و 15.6 بالمائة v / w على التوالي. بصرف النظر عن الزيت ، تم الإبلاغ عن احتواء بذور اليقطين على مجموعة متنوعة من المركبات الغذائية. كانت التركيبات التقريبية لـ C. moschata أساسًا كربوهيدرات (39.51٪) ، تليها دهون (28.49٪) ، بروتين (19.23٪) ، ماء (7.67٪) ، ورماد (5.18٪) ، على التوالي [35]. ومع ذلك ، بالمقارنة مع الدراسات السابقة باستخدام المذيبات والضغط الميكانيكي ، أظهرت الدراسة الحالية انخفاض إنتاجية زيت C. moschata. على الرغم من وصف الاستخلاص بالمذيبات بأنه أكثر طرق استخلاص الزيت فاعلية ، حيث يتم استخراج ما يصل إلى 98 بالمائة من الزيوت من البذور ، إلا أن هناك بعض المشكلات المتعلقة بمخلفات المذيبات ونقاوة الزيت المنتج [36]. بالإضافة إلى ذلك ، أثر المذيب المستخدم في عملية الاستخراج على محصول الزيت المتولد. نتج عن الاستخلاص باستخدام الهكسان ، والإيثر البترولي ، والبنزين البترولي ، والهكسان الحلقي ، والإيثر الأيزوبروبيل ، وخلات الإيثيل ، ورباعي الهيدروفلوران ، والبروبان -2- الأول ، والأسيتون 43.4 - 64.4 في المائة [37،38]. لذلك ، كان الضغط على البارد مفضلًا على الاستخلاص بالمذيبات. ومع ذلك ، فإن الضغط على البارد قد يسبب بعض التعقيدات في المرحلة الأولى من استخدام مكبس لولبي [39]. لذلك ، يمكن أن يكون الاستخلاص الأنزيمي المائي طريقة استخلاص بديلة لأنه ينتج عنه محتوى أعلى من زيت بذور اليقطين (36. 0 بالمائة) مقارنة بالزيت المعصور على البارد (33.5 بالمائة) [21]. على الرغم من أن عملية الاستخراج الأنزيمي المائي كانت أكثر تعقيدًا من الضغط البارد ، إلا أنها تشتمل على تكلفة استثمارية أرخص نسبيًا ، وانخفاض مستمر في تكلفة مستحضرات الإنزيم التجارية ، وإمكانية عزل مكونات كيميائية نباتية فريدة وقيمة في نفس الوقت ، بالإضافة إلى معالجة الرغبة الواسعة في تطبيق التقنيات الخضراء [21]. وصفت الدراسات الأولية أن العديد من الإنزيمات مثل السليلاز ، البكتينازات ، الهيميسليلاز ، والبروتياز ، غالبًا ما تستخدم لتدمير بنية جدار الخلية النباتية لتعزيز الاستخراج الحيوي من النباتات [16 ، 17]. لذلك ، قمنا بتصميم هذه الدراسة لاستخراج زيت البذور باستخدام خليط إنزيمي يحتوي على البكتيناز والسليولاز والبروتياز (1: 1: 1) كما تم وصفه سابقًا بواسطة Kanopka et al. (2016) ، الذي قام بتحسين ظروف التحلل المائي الأنزيمي للحصول على أعلى عائد من زيت بذور اليقطين [21]. علاوة على ذلك ، تُظهر هذه الطريقة بدائل أكثر أمانًا واستدامة بيئيًا لاستخراج المذيبات ، ويطلق عليها هنا "الاستخراج الأخضر".

3.2 التركيب الكيميائي لزيت بذور اليقطين

لتحليل تكوين الأحماض الدهنية ، تمت مقارنة وتحليل زيت بذور اليقطين باستخدام الاستخلاص الأنزيمي المائي (PSO1 و PSO2) مع زيت بذور اليقطين التجاري (COM1 و COM2) المنتج عن طريق الاستخلاص بالضغط على البارد. تركيبات الأحماض الدهنية لـ PSO1 و PSO2 و COM1 و COM2 موضحة في الجدول 1. تتكون جميع عينات زيت بذور اليقطين من متعدد غير مشبع (PUFA) وأحماض دهنية أحادية غير مشبعة (MUFA) وأحماض دهنية مشبعة. كان حمض Cis-linoleic (C18: 2) المكون الرئيسي في جميع عينات الزيت. احتوى COM2 على أعلى محتوى من الأحماض الدهنية (51.74 بالمائة) ، يليه COM1 (48. 00 بالمائة) ، PSO1 (39. 0 9 بالمائة) ، PSO2 (37.63 بالمائة) ، على التوالي. وبالمثل ، كان حمض الأوليك cis (C18: 1) موجودًا بنسبة عالية ، خاصة في PSO2 (37.45 بالمائة) ، يليه COM1 (33.39 بالمائة) ، PSO1 (31.22 بالمائة) ، و COM2 (28.64 بالمائة). تم العثور على الأحماض الدهنية المشبعة مثل حمض البالمتيك (C16: 0) وحمض دهني (C18: 0) بكميات صغيرة فقط في كل عينة من عينات الزيت. كما تم ملاحظة وتحديد كميات ضئيلة من الأحماض الدهنية المشبعة PUFA و MUFA الأخرى.

في الأدبيات ، يُعرف حمض اللينوليك أيضًا باسم أوميغا -6 ، وهو حمض دهني أساسي لا يمكن لجسم الإنسان تصنيعه ، ولا يتم تناوله إلا عن طريق الاستهلاك الغذائي. حمض اللينوليك هو عنصر غذائي مهم للوظائف الصحية في الإنسان ، بما في ذلك مادة السيراميد التي تعد مكونًا رئيسيًا في الأغشية الخلوية وفيتامين د ومجموعة متنوعة من الهرمونات [40،41]. أظهرت الدراسات التي أجريت على الحيوانات أن نقص حمض اللينوليك يمكن أن يسبب تقشر وحكة في الجلد [23]. بالإضافة إلى ذلك ، ساعد حمض اللينوليك من الزيت النباتي في التئام جروح الجلد ، إلى جانب منع التهاب الجلد وحب الشباب [23]. علاوة على ذلك ، فإن حمض الأوليك ، أو أوميغا -9 ، كان مفيدًا في الوقاية من السرطان ، وأمراض المناعة الذاتية والالتهابات [42]. في الواقع ، قلل حمض الأوليك بشكل كبير من إنتاج أكسيد النيتريك في موقع الجرح ، مما أدى إلى إغلاق أسرع للجرح [43]. تدعم هذه البيانات أن زيت بذور اليقطين ، الذي يثري حمض اللينوليك (أوميغا -6) ​​وحمض الأوليك (أوميغا -9) ، يعرض فوائد صحية محتملة.

من النتائج التي توصلنا إليها ، يتألف زيت بذور اليقطين (PSO1 و PSO2 و COM1 و COM2) من العديد من الأحماض الدهنية بما في ذلك حمض اللينوليك (C18: 2) وحمض الأوليك (C18: 2) وحمض البالمتيك (C16: {9}}) وحمض دهني (C18: 0) وهي مكونات شائعة موجودة في زيت بذور اليقطين [44]. كان حمض اللينوليك (أوميغا -6) وأحماض الأوليك (أوميغا -9) سائدين في جميع عينات الزيت. كانت أعلى كمية من حمض اللينوليك هي COM2 ، تليها COM1 و PSO1 و PSO2 على التوالي. أيضًا ، كانت أعلى كمية من حمض الأوليك هي PSO2 ، تليها COM1 ، PSO1 ، و COM2. توضح هذه النتائج أن الاستخلاص الأنزيمي المائي لزيت بذور اليقطين يحتوي على حمض اللينوليك أقل قليلاً ، ولكن ليس حمض الأوليك من استخلاص الضغط البارد. يرجع سبب انخفاض محتوى حمض اللينوليك في بذور اليقطين من الاستخلاص الأنزيمي المائي عنه في عينات الزيت التجارية إلى الاختلاف في عملية الاستخلاص. وجدت الدراسات السابقة تناقضات في كمية الأحماض الدهنية غير المشبعة ، وخاصة حمض الأوليك وحمض اللينوليك ، في زيوت بذور اليقطين من مستخلصات متميزة [39]. تراوح محتوى حمض الأوليك من 28.19 بالمائة في زيت بذور اليقطين المعصور على البارد إلى 30.56 بالمائة في زيت بذور اليقطين المستخرج بواسطة البنتان ، بينما تراوح محتوى حمض اللينوليك من 43. 86 بالمائة في زيت بذور اليقطين المستخرج بواسطة البنتان إلى 46.67 في المائة في زيت بذور اليقطين المعصور على البارد [39]. بصرف النظر عن طرق الاستخراج المختلفة ، فإن المذيبات المستخدمة في عملية الاستخراج ودرجة الحرارة أثناء نضج البذور أثرت أيضًا على محتوى حمض اللينوليك في بذور النبات. أبرزت دراسة سابقة أن الإيثر البترولي أنتج زيت بذر الكتان بمحتوى منخفض من اللينوليك (26.2٪) ، بينما أعطى n-hexane نتائج متناقضة مع محتوى حمض اللينوليك بنسبة 46.5٪ [45]. بالإضافة إلى ذلك ، يتناسب حمض اللينوليك عكسياً مع درجة الحرارة أثناء نضوج بذور عباد الشمس [46].

بالإضافة إلى ذلك ، اكتشفت دراسة نسبية أن التركيب الكيميائي من حيث تكوين الأحماض الدهنية أوضحت أن أحماض اللينوليك والأوليك كانت موجودة بنسبة 47.45 في المائة و 35 في المائة على التوالي في زيت بذور اليقطين (C. maxima) المستخلص باستخدام ثنائي إيثيل الإيثر [47] . وفقًا لـ Akin et al. (2018) ، تراوح محتوى حمض اللينوليك من 53.19 في المائة إلى 53.27 في المائة ، يليه حمض الأوليك ، والذي كان موجودًا أيضًا بكميات عالية تتراوح من 27.52 في المائة إلى 27.59 في المائة في استخراج زيت بذور C. pepo L. المعصور على البارد [48) ]. لذلك ، حصل الاستخراج الأنزيمي المائي في هذه الدراسة أيضًا على إنتاجية أقل من الأحماض الدهنية مقارنة باستخلاص المذيبات واستخراج الضغط البارد المذكورة في الدراسات السابقة. في مقارنة الصنف ، وجدنا أن PSO1 (C. moschata Duch. Ex Poir) أظهر كمية أعلى من حمض اللينوليك مقارنة بـ PSO2 (C. moschata ، أو ، اليقطين الياباني). بشكل متنوع ، قدم PSO2 كمية أعلى من حمض الأوليك من PSO1. الأهم من ذلك ، كانت الاختلافات في ملامح الأحماض الدهنية وكميات زيت بذور اليقطين تعتمد على أصل أصناف معينة ، والظروف المناخية ، وإدارة ما بعد الحصاد [49]. بصرف النظر عن الاختلافات في ملامح الأحماض الدهنية لزيوت بذور اليقطين التي تم الحصول عليها من طرق الاستخراج المختلفة ، تم الإبلاغ عن أن الزيوت المستخرجة من التكنولوجيا الأنزيمية المائية غنية بفيتوستيرول وتوكوفيرول [50]. لذلك ، تم اقتراح PSO1 و PSO2 ، اللذين تم إنتاجهما من طريقة الاستخراج الخضراء ، كزيوت بديلة لبذور اليقطين لمزيد من التطبيقات.

لمزيد من المعلومات: david.deng@wecistanche.com WhatApp: 86 13632399501