يؤثر الصيام والإفراط في التغذية على التعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب في كبد الدواجن عن طريق الفيروس القهقري الداخلي

خلاصة

ومن المعروف أن التغذية والمناعة مرتبطان، لكن الآلية ليست واضحة تماما. تمثل الفيروسات القهقرية الداخلية (ERV) ما بين 8 إلى 10% من جينومات الإنسان والفأر، وتلعب دورًا مهمًا في بعض العمليات البيولوجية للحيوانات. تشير الدراسات الحديثة إلى أن تنشيط ERV يمكن أن يؤثر على التعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب، وأن أنشطة ERV تخضع لتنظيم العديد من العوامل بما في ذلك العوامل الغذائية. ولذلك، فإننا نفترض أن الحالة التغذوية يمكن أن تؤثر على التعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب عبر فيروس ERV. للتحقق من هذه الفرضية، تم تغيير الحالة التغذوية للحيوانات عن طريق الصيام أو الإفراط في التغذية، والتعبير عن ERV سليم (ERVK18P، ERVK25P) والجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب (DDX41، IFIH1، IFNG، IRF7، STAT3) في الكبد. تم تحديده بواسطة PCR الكمي، يليه الإفراط في التعبير عن ERVK25P في خلايا الكبد الأولية وتحديد التعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب. أظهرت البيانات أنه بالمقارنة مع المجموعة الضابطة (عدم الصيام)، فإن التعبير عن فيروس ERV والجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب زاد في كبد الدجاج الصائم لكنه انخفض في كبد الأوز الصائم. علاوة على ذلك، بالمقارنة مع المجموعة الضابطة (التي يتم تغذيتها بشكل روتيني)، فقد زاد التعبير عن فيروس ERV والجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب في كبد الإوز الذي تم تغذيته بشكل مفرط. بالإضافة إلى ذلك، فإن الإفراط في التعبير عن ERVK25P في خلايا الكبد الأولية يمكن أن يحفز التعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب. في الختام، تشير هذه النتائج إلى أن فيروس ERV يتوسط تأثيرات الصيام والإفراط في التغذية على التعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب، ويختلف التوسط باختلاف أنواع الدواجن، وقد يكون فيروس ERV والجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب متورطين في تطور الكبد الدهني للأوزة. توفر هذه الدراسة آلية محتملة للعلاقة بين التغذية والمناعة.

Cistanche deserticola أماه-المحافظة على الكبد

الكلمات المفتاحية: التغذية، المناعة، الدواجن، الكبد الدهني، الفيروس القهقري الداخلي

مقدمة

تعتبر الفيروسات القهقرية الداخلية (ERV) من بقايا الفيروسات القهقرية الخارجية (الفيروسات). تحتوي معظم هذه التسلسلات "الأحفورية" المتبقية على العديد من الطفرات التي تراكمت في عملية التطور طويلة المدى منذ اندماجها في الجينوم المضيف (Cañadas et al., 2018). وهي موجودة في جميع حيوانات الثدييات تقريبًا (مثل البشر والفئران والقطط والأغنام) والفقاريات الأخرى (مثل الدجاج) (ميلاني وناير، 2014؛ شو وآخرون، 2014). في الدجاج، يمثل فيروس ERV أكثر من 3% من جينوم الدجاج (هدى وآخرون، 2008). على الرغم من وفرة فيروسات النسخ العكسي في الجينومات الحيوانية، إلا أن العديد من فيروسات النسخ العكسي ليست سليمة. يشير فيروس ERV السليم إلى تلك التي لا يمكن تمييز بنيتها بسهولة عن الفيروسات القهقرية الخارجية. تحتوي فيروسات ERV هذه عادةً على تكرارين طرفيين طويلين (LTR) يحتويان على عناصر لتنظيم النسخ، وتسلسلات تشفير البروتينات الفيروسية (مستضد خاص بالمجموعة [Gag]، والنسخ العكسي [Pol]، وبروتين الغلاف [Env])، وتسلسل المسار متعدد البيورين. ، والتسلسلات الجينومية القصيرة المحيطة بالخلايا المضيفة (Jern and Coffin، 2008؛ Dolei et al.، 2015؛ K€ury et al.، 2018). حتى الآن، يوجد حوالي 500 فيروس ERV سليم نسبيًا تم العثور عليه في جينوم الدجاج (Bolisetty et al., 2012). بالإضافة إلى ERV السليم نسبيًا، هناك أنواع أخرى من ERV، بما في ذلك ERV "الرفيع" الذي يفتقر إلى واحد أو أكثر من جينات الترميز اللازمة للتكاثر الذاتي (عادةً جين Env) و ERV "solo LTR". ويبلغ عدد مركبات ERVs "المنفردة LTR" حوالي 60 ضعف عدد مركبات ERV السليمة نسبيًا (Bolisetty et al., 2012). يشير تحليل التطور الوراثي إلى أن الفيروسات القهقرية الطيورية (أي ERV) يمكن تصنيفها إلى الفئة الأولى (تشبه جاما)، والفئة الثانية (تشبه ألفا وبيتا)، والفئة الثالثة (تشبه السبومال عن بعد). يفوق عدد الفيروسات القهقرية الشبيهة بألفا عدد الفيروسات القهقرية الشبيهة ببيتا وغاما والأبجدية (Bolisetty et al.، 2012). بالمقارنة مع الفيروسات القهقرية الأولية للثدييات، فإن الفيروسات القهقرية الطيور أكثر غير متجانسة. لقد مرت الفيروسات القهقرية الاحترافية الشبيهة ببيتا بمرحلة انتقالية تطورية من الشبيهة ببيتا إلى الشبيهة بالأبجدية ومن ثم إلى الفيروسات القهقرية الاحترافية الشبيهة بألفا، مع فقدان تدريجي لعلامات الفيروس القهقري بيتا. الفيروسات القهقرية الأبجدية هي الوسيط بين الفيروسات القهقرية ألفا والبيتا، بما في ذلك بعض الفيروسات القهقرية الخاصة بالطيور التي تم التعرف عليها سابقًا. يبدو أن الفيروسات القهقرية الاحترافية من الفئة III هي الأقدم، تليها الفيروسات القهقرية الاحترافية الشبيهة ببيتا والشبيهة بغاما، في حين أن الفيروسات القهقرية الاحترافية الشبيهة بالأبجدية والألفا هي الأصغر سنًا. يتم دمج معظم الفيروسات القهقرية في الجينات المضيفة في الاتجاه الحسي (Bolisetty et al.، 2012).

فوائد cistanche tubulosa-المحافظة على الكبد

مثل الترانسبوزونات غير LTR (على سبيل المثال، العناصر النووية المتناثرة الطويلة أو القصيرة)، فإن ERVs هي عناصر متحركة يمكنها نقل نفسها في شكل تسلسلات DNA من موقع إلى آخر في الجينوم المضيف. يتم التوسط في هذا النقل بواسطة وسيط RNA. على الرغم من أن ERV باعتبارها نواقل رجعية تتمتع بقدرة قوية على النقل في المرحلة المبكرة من التطور، فقد فقد معظمها الآن هذه القدرة (Jern and Coffin، 2008). علاوة على ذلك، تشير دراسات التسلسل العميق إلى أن العديد من فيروسات النسخ العكسي تكون صامتة بشكل عام. على سبيل المثال، يتم نسخ حوالي 20% فقط من فيروس ERV في الخلايا الليفية لجنين الدجاج، كما يتم نسخ مجموعة فرعية منها أيضًا في الجسم الحي (Bolisetty et al., 2012). بالإضافة إلى ذلك، أظهرت الدراسات الحديثة أن بعض فيروسات ERV الصامتة يمكن تنشيطها والتعبير عنها في ظل ظروف معينة (Crichton et al., 2014)، ويتأثر تعبيرها بعدة عوامل، مثل نوع الخلية أو نوع الأنسجة (خاصة خلايا المشيمة والخلايا الجرثومية). وتمايز الخلايا وعملية الشيخوخة والسيتوكينات والعوامل التي تعطل الوظيفة الطبيعية للخلايا والعوامل الغذائية (Taruscio and Mantovani، 2004؛ Denner، 2016؛ Elaheh et al.، 2018). في العقود الأخيرة، تم الكشف تدريجيًا عن الوظائف البيولوجية لـ ERV: 1) قد يؤدي نقل ERV إلى زعزعة استقرار جينومات المضيف، لكن ERV باعتباره مادة وراثية أصلية يسمح للحيوانات المضيفة بزيادة التنوع بين الأنواع وداخلها، وتعزيز القدرة على التكيف مع البيئة، والحفاظ على استمرارية هذه الفيروسات. التطور (تشانغ وآخرون، 2008)؛ 2) يمكن للمروجين والمعززات في مناطق LTR لـ ERV أن يؤثروا على نسخ الجينات المجاورة لهم ويغيروا الحالة اللاجينية للمناطق المجاورة (مثل مثيلة الحمض النووي وتعديل الهستون) (طومسون وآخرون، 2016)؛ 3) من خلال ربط بروتينات Env بالمستقبلات المضيفة، يمكن لـ ERV منع ربط الفيروسات الخارجية بنفس المستقبلات، وبالتالي تزويد الخلايا المضيفة بالقدرة على مقاومة الفيروسات الخارجية (Nadeau et al., 2015)؛ 4) يمكن لنسخ ERV تنشيط الجهاز المناعي الفطري والحث على إنتاج السيتوكينات مثل IFN عبر مسار إشارات TLR3/MDA5 المعتمد على الحمض النووي الريبي (RNA) المزدوج، وبالتالي تثبيط الأورام (Chiappinelli et al., 2015)؛ و 5) يشارك فيروس ERV أيضًا في حدوث وتطور بعض الأمراض، مثل الشيخوخة والمناعة الذاتية والأمراض العصبية التنكسية (Mager and Stoye, 2015; Nadeau et al., 2015).

مجموعة الفيروسات القهقرية الداخلية K (ERVK) هي أحدث مجموعة فيروسات داخلية المنشأ بين مجموعات ERV المختلفة (ERVW، ERVH، ERVK، وما إلى ذلك). يحتوي على تسلسل ترميز للبروتينات الوظيفية، وبالتالي يعتبر مجموعة ERV الأكثر سلامة ونشاطًا بيولوجيًا (Hohn et al., 2013). ارتبط التعبير المنتظم لـ ERVK بالأمراض الالتهابية والأمراض العصبية وأمراض المناعة الذاتية وما إلى ذلك (Haraguchi et al.، 1992؛ Tolosa et al.، 2012). تظهر الدراسات الحديثة أن تنشيط ERVK بواسطة مثبط ناقلة ميثيل الحمض النووي، 5-aza-2-deoxycytidine، يمكن أن يعزز المناعة الفطرية الخلوية (Nogues et al., 2018). بالمقارنة مع ERVK البشري الذي يحتوي على العديد من الأعضاء، فإن ERVK لدى الطيور لديه عدة أعضاء فقط مشروحين في GenBank. أعضاء ERVK المشروحون الذين تشاركهم الدجاجة والإوزة هم فقط ERVK18P (LOC106029425) وERVK25P (LOC106046236). في الوقت الحاضر، لا يزال الدور البيولوجي أو المرضي للطيور ERVK غير معروف. تعد حالة التغذية والطاقة من العوامل المهمة التي تؤثر على نمو الحيوان وتكاثره ومناعته. كما ذكرنا سابقًا، قد تعمل العوامل الغذائية على تنشيط التعبير عن فيروس ERV، وقد ينظم فيروس ERV التعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب بطرق متعددة. ولذلك، فإننا نتوقع أن مستوى التغذية أو الطاقة يمكن أن يؤثر على التعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب عبر فيروس ERV. وللتحقق من هذه التخمينات، تم تغيير الحالة التغذوية عن طريق الصيام أو الإفراط في التغذية في الدجاج أو الإوز التجريبي، ثم تم تحديد التعبير عن فيروس ERV والجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب في الكبد. بالإضافة إلى ذلك، تم أيضًا إجراء الإفراط في التعبير عن ERVK25P في خلايا الكبد الأولية لمعالجة العلاقة بين ERV والجينات المرتبطة بالمناعة (أو الالتهاب). توفر هذه الدراسة نظرة جديدة لآلية العلاقة بين التغذية والمناعة.

cistanche tubulosa-تحسين الجهاز المناعي

انقر هنا لعرض منتجات Cistanche Enhance Immunity

【اطلب المزيد】 البريد الإلكتروني: cindy.xue@wecistanche.com / تطبيق Whats: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

المواد والأساليب

حيوانات تجريبية

كانت جميع البروتوكولات الخاصة بالحيوانات متوافقة مع المبادئ التوجيهية المؤسسية بشأن استخدام الحيوانات الزراعية في الأبحاث وتمت الموافقة عليها من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوان في جامعة يانغتشو في الصين.

تمت تربية صغار بوز جورونج سيجي من نفس دفعة الفقس على الأرض تحت الإضاءة الطبيعية وإدارة التربية التقليدية في مزرعة مالي التجريبية (جورونج، جيانغسو، الصين). في عمر 70 يومًا، تم تقسيم 16 إوزًا صحيًا بشكل عشوائي إلى مجموعتين: مجموعة الصيام (صام الإوز لمدة 24 ساعة مع حرية الوصول إلى الماء) والمجموعة الضابطة (بدون صيام، الوصول إلى العلف والماء بحرية). بعد 24 ساعة من الصيام، تم التضحية بجميع الأفراد التجريبيين، وتم جمع عينات الكبد، وتجميدها في النيتروجين السائل، ونقلها عند درجة حرارة 270 مئوية للتخزين. وبالمثل، تم التضحية بستة عشر دجاجًا من دجاج رود آيلاند الأحمر بعمر 20-أسبوعًا من أجل تجربة الصيام. على النقيض من الصيام، تم تقسيم إوز لاندز الصحي البالغ من العمر ستة عشر 70- يومًا (مقدم من شركة Licheng Animal and Poultry Co., Ltd.، Huaian، Jiangsu، China) بشكل عشوائي وبشكل متساوٍ إلى الإفراط في التغذية (24 يومًا من الإفراط في التغذية) والمجموعة الضابطة (التغذية بشكل روتيني). تم وصف بروتوكول الإفراط في التغذية مسبقًا بواسطة Geng et al., 2016a. في اليوم الرابع والعشرين من الإفراط في التغذية، تم جمع عينات الكبد من كل من مجموعتي المراقبة والتغذية الزائدة وتخزينها عند درجة حرارة 270 مئوية.

عزل وثقافة خلايا الكبد الأولية والإفراط في التعبير عن فيروس ERV

تم عزل خلايا الكبد الأولية وزراعتها من أجنة الإوز في اليوم الثاني والعشرين أو الثالث والعشرين من الفقس كما هو موضح سابقًا بواسطة عثمان وآخرون، 2016. ناقل التعبير الزائد المخصص لجين الإوز LOC106046236 (أو عضو ERVK 25 Pol الشبيه بالبروتين، ERVK25P) ) وتم شراء ناقلات فارغة من شركة Suzhou Jima Gene Co., Ltd. (سوتشو، الصين). تم إنشاء ناقل الإفراط في التعبير باستخدام ناقل pcDNA3.1 الذي يحتوي على مروج CMV وجزء الحمض النووي المدرج الذي كان بمثابة تسلسل الترميز لجين بوليميريز ERVK25. تم نقل ناقل الإفراط في التعبير والناقل الفارغ بشكل منفصل إلى خلايا الكبد الأولية للأوزة التي تم عزلها وزراعتها لمدة 24 ساعة باستخدام Lipofectamine 2000 (cat # 11، 668-019، Invitrogen، Co.، Ltd.، Camarillo). بعد 32 ساعة من ترنسفكأيشن، تم جمع الخلايا لتحليل التعبير الجيني بواسطة مضان كمي PCR. تم إجراء عملية ترنسفكأيشن كما هو موضح سابقًا بواسطة Geng et al.، 2013.

تنقية الحمض النووي الريبي وتوليف [كدنا].

تم عزل الحمض النووي الريبي (RNA) الكلي من عينات الكبد باستخدام مجموعة TRIzol (cat # DP424؛ Tiangen Biotech (Beijing) Co., Ltd.، Beijing، China). تم نسخ عينات الحمض النووي الريبي المنقى إلى [كدنا] باستخدام مجموعة النسخ العكسي HiS criptTM Q RTSuperMix (cat# R123-01؛ Vazyme Biotech Co., Ltd.، نانجينغ، الصين). تم إجراء النسخ العكسي وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة.

فوائد cistanche tubulosa-المحافظة على الكبد

التحليل الكمي PCR

استنادًا إلى التسلسل المرجعي لكل جين في GenBank، وبادئات PCR الكمية للجينات محل الاهتمام والجين المرجعي الداخلي، تم تصميم GAPDH باستخدام برنامج Primer 3.0 عبر الإنترنت (معهد وايتهيد للأبحاث الطبية الحيوية، كامبريدج)، و تم تأكيد خصوصية التسلسل باستخدام برنامج Primer-BLAST (المركز الوطني لمعلومات التكنولوجيا الحيوية، بيثيسدا) على موقع NCBI. تم إدراج تسلسلات التمهيدي في الجدول 1. وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة، تم إجراء PCR الكمي باستخدام مجموعة Vazyme AceQ qPCR SYBR Green Master Mix (cat# Q111-02/03; Vazyme Biotech Co., Ltd., Nanjing, الصين) وعينات [كدنا]. تم حساب التعبير النسبي للجينات محل الاهتمام باستخدام طريقة 22OOCT كما هو موضح سابقًا بواسطة Geng et al., 2016b.

التحليل المناعي

تم وضع عينات من أنسجة الكبد في مخزن مؤقت يحتوي على 5 0 مليمول تريس، درجة الحموضة 7.5، 12 0 مليمول كلوريد الصوديوم، 1 مليمول EDTA، 15 مليمول Na4P2O7، 2 0 مليمول NaF، 1٪ Nonidet ، 0.1% فينيل ميثيل سلففلورايد، ومثبطات الأنزيم البروتيني (0.08 مليمول أبروتينين، 0.02 مليمول ليوبيبتين، 0.04 مليمول بيستاتين، و 15 مليمول بيبستاتين). تم تحديد محتوى البروتين في كل محللة باستخدام مجموعة فحص البروتين Bio-Rad RC DC (رقم القط 500-0119؛ Bio-Rad، Hercules) وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة. تم فصل البروتينات (10 ملغ) من ليسات الأنسجة بواسطة SDS PAGE ثم نقلها إلى أغشية النيتروسليلوز، والتي تم تحضينها طوال الليل في حليب 5٪ في برنامج تلفزيوني يحتوي على 0.1٪ توين 20. تم تحضين الأغشية بعد ذلك بالأجسام المضادة الأولية طوال الليل عند 4 درجات مئوية. تم استخدام الأجسام المضادة التالية بتخفيف 1:1000 في هذه الدراسة: anti-STAT3 (رقم القط bs- 1141R؛ شركة Beijing Biosystems Biotechnology Co., Ltd.، بكين، الصين)، anti-IFIH1 (رقم القطة bs-18740R؛ شركة Beijing Biosystems Biotechnology Co., Ltd.، بكين، الصين)، مضاد الأكتين (رقم القطة bsm-33036M؛ شركة Beijing Biosystems Biotechnology Co., Ltd.، بكين، الصين)، ومكافحة GAPDH (رقم القط NB 300-221؛ Novus Biologicals Co., Ltd., CO). تم استخدام الأجسام المضادة الثانوية المترافقة مع بيروكسيداز فجل الحصان عند التخفيف بنسبة 1: 10000. تم اكتشاف البروتينات عن طريق التألق الكيميائي المعزز ونظام الكشف عن النشاف الغربي (Amersham Biosciences، Beijing، China).

تحليل احصائي

تم استخدام اختبار الطالب t لتحليل الأهمية الإحصائية للاختلاف في التعبير الجيني بين مجموعتي العلاج والسيطرة، وتم تعيين P,0.05 كمعيار للأهمية الإحصائية. يتم تقديم جميع البيانات على أنها تعني 6 SEM.

نتائج

الصيام يثبط ظهور فيروس ERV والجينات المرتبطة بالمناعة في كبد الإوز

تم تصميم الاشعال الكمي لـ PCR لجينات ERV (ERVK18P أو LOC1 {{1 0}} 6 0 29425 أو ERVK25P أو LOC106046236) بناءً على التسلسلات المرجعية في GenBank. أظهر تحليل PCR الكمي أن مستوى التعبير عن ERVK18P في كبد الإوزة كان مشابهًا لـ ERVK25P (الشكل 1A). بالمقارنة مع مجموعة التحكم (بدون صيام)، تم تثبيط التعبير عن ERVK18P وERVK25P بشكل كبير في كبد الأوز الذي صام لمدة 24 ساعة (P، 0.05 أو 0.01) (الشكل 1B). وفقًا لذلك، تم أيضًا تثبيط تعبير mRNA للجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب (DDX41، IFIH1، IFNG، IRF7، STAT3)، مع وصول الفرق في تعبير mRNA لـ DDX41 وIFNG بين الأوز الصائم والتحكم إلى مستوى ذي دلالة إحصائية. (ف، 0.05) (الشكل 1B). أظهر التحليل المناعي أن مستوى البروتين لـ IFIH1 في كبد الأوز الصائم يبدو أنه أقل من مستوى الأوز الضابط (الشكل التكميلي 1).

الجدول 1. قائمة متواليات التمهيدي لPCR الكمي.

الصيام يحث على ظهور فيروس ERV والجينات المرتبطة بالمناعة في كبد الدجاج

أظهر تحليل PCR الكمي أنه بالمقارنة مع المجموعة الضابطة (بدون صيام)، فإن تعبير mRNA الناجم عن الصيام لـ ERVK18P و ERVK25P في كبد الدجاج، ووصل الحث إلى مستوى ذي دلالة إحصائية (P، 0.{{5} }5 أو 0.01) (الشكل 2). وبالمثل، فإن الصيام يتسبب أيضًا في تعبير mRNA عن هذه الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب، مع اختلاف في تعبير mRNA لـ IFIH1 وIFNG وIRF7 وSTAT3 بين المجموعات التي تصل إلى مستوى ذي دلالة إحصائية (P، 0.05 أو 0.01) (الشكل 2). ). أظهر التحليل المناعي أن مستوى البروتين لـ IFIH1 في كبد الأوز الصائم يبدو أعلى من مستوى الأوز الضابط (الشكل التكميلي 1).

الإفراط في التغذية يؤدي إلى ظهور فيروس ERV والجينات المرتبطة بالمناعة في كبد الإوز

أظهر تحليل PCR الكمي أنه بالمقارنة مع مجموعة التحكم (التغذية بشكل روتيني)، تمت زيادة تعبير mRNA لـ ERVK18P و ERVK25 P في كبد الأوز الذي تم تغذيته بشكل مفرط لمدة 24 يومًا، مع وجود اختلاف في تعبير mRNA لـ ERVK18P بين الوصول إلى الإوز الضابط والإوز الذي تم تغذيته بشكل زائد. إلى مستوى ذي دلالة إحصائية (P، 0.05) (الشكل 3). وفقًا لذلك، تمت أيضًا زيادة تعبير mRNA للجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب في كبد الأوز الذي يعاني من الإفراط في التغذية، مع وصول الفرق في تعبير mRNA لـ IRF7 بين التحكم والإوز الذي يعاني من الإفراط في التغذية إلى مستوى ذي دلالة إحصائية (P، 0.05) ( الشكل 3). أظهر التحليل المناعي أن مستوى البروتين لـ IFIH1 في كبد الأوز المفرط يبدو أعلى من مستوى الأوز الضابط (الشكل التكميلي 1).

الشكل 1. تم تثبيط التعبير عن فيروس ERV والجينات المرتبطة بالمناعة في كبد الإوز عن طريق الصيام. تم تحديد التعبير النسبي لـ ERV والجينات المرتبطة بالمناعة بواسطة PCR الكمي. (أ) التعبير عن ERVK18P وERVK25P في كبد الإوز البالغ الطبيعي. (ب) يتم تقديم التعبير عن ERVK18P، وERVK25P، وDDX41، وIFIH1، وIFNG، وIRF7، وSTAT3 في كبد الأوز الصائم كتغيير الطية على عنصر التحكم (بدون صيام)، n 5 6. *،** تشير إلى P، 0.05، 0.01 مقابل التحكم، على التوالي. يتم عرض جميع البيانات على أنها تعني 6 SEM. اختصار: ERV، الفيروس الارتجاعي الداخلي.

أدى الإفراط في التعبير عن الفيروس القهقري الداخلي إلى التعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة

بعد 32 ساعة من ترنسفكأيشن من خلايا الكبد الأولية مع ناقلات فارغة أو ناقلات الإفراط في التعبير التي تحتوي على تسلسل الترميز لجين Pol من ERVK25P، كان تعبير mRNA لجين Pol في الخلايا المنقولة بواسطة ناقلات الإفراط في التعبير حوالي 97 مرة أكثر من ذلك في الخلايا المنقولة بواسطة ناقلات فارغة (P، 0.01) (الشكل 4). كما هو متوقع، تم تحفيز التعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب عن طريق الإفراط في التعبير عن ERVK25P، ووصل تحريض IFIH1 وIFNG وIRF7 وSTAT3 إلى مستوى ذي دلالة إحصائية (P، 0.05 أو 0.01). (الشكل 4).

مناقشة

تعد مستويات التغذية والطاقة من العوامل المهمة التي تؤثر على نمو الحيوان وتكاثره ومناعته. يعد التجويع (أو الصيام) والتغذية حالتين نموذجيتين تؤثران على مستويات التغذية أو الطاقة، وبالتالي غالبًا ما يتم استخدامهما كنموذج بحثي لتوضيح تنظيم التغذية أو الطاقة على الوظائف الفسيولوجية للحيوانات. على سبيل المثال، يمكن أن يؤثر الصيام أو التغذية على التعبير عن الجينات المرتبطة بالنمو والتكاثر والمناعة (Volkoff et al., 2016; Smati et al., 2020). ومع ذلك، فمن غير الواضح ما إذا كان الصيام أو التغذية يمكن أن ينشط فيروس ERV ويؤثر على التعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب عبر ERV. بالإضافة إلى ذلك، يمكن أن يؤدي الإفراط في التغذية على المدى القصير (3-4 أسابيع) إلى تكوين كبد الإوز الدهني (المعروف باسم كبد الأوز)، والذي يشبه مرض الكبد الدهني غير الكحولي (NAFLD) لدى البشر والقوارض (ناهوم وآخرون. ، 2010؛ وانغ وآخرون، 2019)، ولكن من غير المعروف ما إذا كان فيروس ERV قد تم تنشيطه عن طريق الإفراط في التغذية والمشاركة في تطور الكبد الدهني للأوز. في هذه الدراسة، تم تحديد التعبير عن فيروس ERV وبعض الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب في كبد الأوز أو الدجاج بعد تغيير تغذية الحيوان أو حالة الطاقة عن طريق الصيام أو الإفراط في التغذية، بحيث تظهر العلاقة بين حالة التغذية (أو الطاقة) وحالة الطاقة. يمكن توضيح التعبير عن فيروس ERV والجينات المرتبطة بالمناعة (أو الالتهاب). علاوة على ذلك، تم أيضًا إجراء فرط التعبير ERVK25P في خلايا الكبد الأولية للتحقق مما إذا كان التعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب قد تأثر بـ ERV. في الواقع، قدمت النتائج دليلًا قويًا يدعم فكرة أن حالة المغذيات أو الطاقة يمكن أن تنظم التعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب عبر فيروس ERV في الدواجن. ومن المثير للاهتمام أن تأثير الصيام على تعبير mRNA لـ ERV والجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب في الكبد اختلف باختلاف أنواع الدواجن، أي أن تعبير mRNA للجينات الموجودة في كبد الدجاج كان مخالفًا لذلك الموجود في كبد الإوز. . علاوة على ذلك، فإن تعبير mRNA للجينات الموجودة في كبد الإوز الصائم كان مخالفًا للإوز الذي أفرط في تغذيته. بالإضافة إلى ذلك، تشير البيانات إلى أن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب قد تتوسط في تنظيم فيروس ERV على تطور الكبد الدهني (أو كبد الأوز).

الشكل 2. تم تحفيز التعبير عن فيروس ERV والجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب في كبد الدجاج عن طريق الصيام. تم تحديد التعبير النسبي لـ ERV والجينات المرتبطة بالمناعة بواسطة PCR الكمي. يتم عرض مستويات التعبير عن ERVK18P، وERVK25P، وDDX41، وIFIH1، وIFNG، وIRF7، وSTAT3 في كبد الدجاج الصائم مع تغير الطية على عنصر التحكم (بدون صيام)، n {{10}} . *،** تشير إلى P، 0.05، 0.01 مقابل التحكم، على التوالي. يتم عرض جميع البيانات على أنها تعني 6 SEM. اختصار: ERV، الفيروس الارتجاعي الداخلي.

الشكل 3. تم تحفيز التعبير عن فيروس ERV والجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب في كبد الإوز عن طريق الإفراط في التغذية. تم تحديد التعبير النسبي لـ ERV والجينات المرتبطة بالمناعة بواسطة PCR الكمي. يتم عرض مستويات التعبير عن ERVK18P، وERVK25P، وDDX41، وIFIH1، وIFNG، وIRF7، وSTAT3 في كبد الأوز المفرط التغذية كتغيير الطية على عنصر التحكم (التغذية الروتينية)، n {{10}} . * يدل على P، 0.05 مقابل السيطرة. يتم عرض جميع البيانات على أنها تعني 6 SEM. اختصار: ERV، الفيروس الارتجاعي الداخلي.

الشكل 4. تم تحفيز التعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب عن طريق التعبير الزائد عن ERV في خلايا الكبد الأولية. تم تحديد التعبير النسبي لـ ERV والجينات المرتبطة بالمناعة بواسطة PCR الكمي. يتم تقديم التعبير عن ERVK25P و DDX41 و IFIH1 و IFNG و IRF7 و STAT3 في خلايا الكبد الأولية المنقولة بواسطة نواقل التعبير الزائد ERVK25P كتغيير الطية على عنصر التحكم (خلايا الكبد المنقولة بواسطة ناقلات فارغة)، n {{1{{11 }}}}. *،** تشير إلى P، 0.05، 0.01 مقابل التحكم، على التوالي. يتم عرض جميع البيانات على أنها تعني 6 SEM. اختصار: ERV، الفيروس الارتجاعي الداخلي.

وقد أظهرت الدراسات السابقة أن ERV يتم إسكاته بشكل عام من خلال مثيلة الحمض النووي في الخلايا المضيفة، ولكن يمكن تنشيط ERV بواسطة MER48 (Walsh et al.، 1998؛ Gibb et al.، 2015). ويظهر أيضًا تحفيز فيروس ERV في العديد من الأمراض، بما في ذلك بعض الأمراض الأيضية مثل التصلب المتعدد، حيث تتورط الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب (Perron et al., 2000). تشير الدراسات الآلية إلى أن الالتهاب يلعب دورًا مهمًا في التسبب في الأمراض الأيضية التي تنتج عادةً عن التغذية أو زيادة إمدادات الطاقة (Eo et al.، 2017). علاوة على ذلك، فقد وجد أن الصيام أو الإفراط في التغذية يمكن أن يغير مستوى مثيلة الحمض النووي لجينات مستقبلات البيروكسيسوم المنشطة (Jacobsen et al., 2014; Hjort et al., 2017). بناءً على هذه النتائج، من الممكن أن يؤدي التغيير الغذائي إلى تنشيط تعبير mRNA لـ ERV عبر التنظيم اللاجيني. من ناحية أخرى، يمكن أن يحفز التغيير الغذائي تعبير mRNA لبعض الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب (Smati et al., 2020). تمشيا مع هذه النتائج، أظهرت هذه الدراسة أن الصيام أو الإفراط في التغذية يؤثر على تعبير mRNA لـ ERV والجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب وأن تعبير mRNA لـ ERV يرتبط ارتباطًا وثيقًا بتعبير mRNA للفيروس المرتبط بالمناعة أو الالتهاب. الجينات.

فوائد سيستانش للرجال - تقوية جهاز المناعة

وبما أن فيروس ERV متوافر بكثرة في الجينومات الحيوانية، فإن دور فيروس ERV في تنظيم التغذية أو الطاقة المتعلقة بالمناعة أو الالتهاب يمكن الاستهانة به. تناولت هذه الدراسة بشكل أساسي ERVK18 وERVK25 للتوسط في تأثير الصيام أو الإفراط في التغذية على تعبير mRNA للجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب. إن جينات ERVK حاليًا هي فقط ERV سليمة نسبيًا والموضحة في كل من جينومات الإوز والدجاج. إلى جانب هذه الفيروسات ERV السليمة نسبيًا، يمكن تنشيط ERV "الرفيع" و ERV "المنفرد" عن طريق الصيام أو الإفراط في التغذية، وبالتالي يساهمان أيضًا في تأثير الصيام أو الإفراط في التغذية على تعبير mRNA للجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب. نظرًا لأن ERV "slender ERV" و"solo LTR" ERV عادة ما يكونان موجودين بالقرب من بعض الجينات المضيفة (Thompson et al., 2016)، فإن الصيام أو الإفراط في التغذية قد ينظم تعبير mRNA للجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب من خلال تأثير رابطة الدول المستقلة للجينات المرتبطة بالالتهاب. ERV المنشط. ومن وجهة النظر هذه، فإن الحفاظ على المناعة عند المستوى الأساسي قد يكون جزئيًا بسبب وجود جزء صغير من فيروس ERV النشط. وقد أظهرت الدراسات السابقة أن بعض فيروسات النسخ العكسي يتم نسخها بانتظام في كل من الخلايا الليفية الجنينية للدجاج (حوالي 20٪ من فيروسات النسخ العكسي) وفي الجسم الحي (بوليسيتي وآخرون، 2012). إن تنظيم الصيام أو الإفراط في التغذية على تعبير mRNA لـ ERV يكون على الأرجح من خلال التعديلات اللاجينية (على سبيل المثال، مثيلة الحمض النووي) كما ذكرنا سابقًا. لقد تم الإبلاغ عن أن AZA ، وهو مثبط DNA methyltransferase ، يمكن أن يحفز بشكل كبير تعبير mRNA لـ ERV في الخلية (Jaenisch et al.، 1985؛ Deborah and Bestor، 2004). تم تنظيم تعبير mRNA لـ ERV بشكل تفاضلي في كبد الدجاج مقابل كبد الإوز عن طريق الصيام، مما يشير إلى وجود درجة مختلفة من التعديل اللاجيني للتحكم في تعبير ERV بين الدجاج والإوز. يتم دعم هذا الاستدلال من خلال الأدلة التي توضح أن تعبير mRNA لـ ERV يعتمد على نوع الخلية (Nogues et al.، 2018). ومع ذلك، فإن كيفية تأثير الصيام أو الإفراط في التغذية على مثيلة الحمض النووي لـ ERV، لا يزال يتعين توضيحها. علاوة على ذلك، فإن الاختلافات الجينية بين الدجاج والإوز قد تساهم في الاختلاف في التعبير عن فيروس ERV بين النوعين، مثل الاستجابات المختلفة لعوامل النسخ للمحفزات الداخلية أو الخارجية. في الواقع، تظهر نتائجنا السابقة أن تعبير mRNA للعديد من الجينات في الكبد الدهني للأوز مقابل الكبد الطبيعي يتعارض مع ذلك لدى البشر الذين يعانون من NAFLD (أو الفأر) مقابل الكبد الطبيعي (Liu et al.، 2016). بالإضافة إلى ذلك، فإن العوامل البيئية وغيرها، مثل العمر والعلف والضوء وظروف التربية الأخرى، قد تكون أيضًا مسؤولة عن التعبير المختلف لـ ERV بين الدجاج والإوز.

في هذه الدراسة، أدى الإفراط في التعبير عن ERVK25P إلى زيادة التعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب، مما يوفر دليلًا قويًا يدعم فكرة أن الصيام أو الإفراط في التغذية ينظم تعبير mRNA للجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب في الكبد عبر ERV. هناك آليتان محتملتان يؤدي من خلالهما الإفراط في التعبير عن ERV السليم نسبيًا إلى زيادة تعبير mRNA للجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب: 1) يمكن للحمض النووي الريبي المزدوج المتكون داخل نسخ ERV أو عن طريق التهجين مع RNAs المضادة للفيروس تنشيط إشارة NFkB. المسار على الحمض النووي الريبي المزدوج تقطعت بهم السبل المرتبط بمستقبلاته (على سبيل المثال، TLR3) وبالتالي يحفز التعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب (Chiappinelli et al.، 2015)؛ 2) يمكن لـ ERV السليم نسبيًا أيضًا التعبير عن بروتيناته أو عديدات الببتيدات المشفرة، مما يؤدي إلى تنشيط مسارات الإشارات النهائية والتعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب. على الرغم من أن هذه الدراسة لم تتمكن من اكتشاف التعبير البروتيني لـ ERVK18P و ERVK25P بسبب نقص الأجسام المضادة المناسبة، فقد أظهرت الدراسات السابقة أن بعض ERV، وخاصة ERVK، يمكنها تصنيع بروتيناتها وتحفيز التعبير عن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب في الخلايا العصبية. الخلايا (مانغيرا وآخرون، 2015). قد يتم استشعار هذه البروتينات بواسطة مستقبلات حيوانية مثل RIG -1 وبروتين كيناز K وجزيء الجسم الالتهابي NLRP3 (Mitoma et al.، 2013؛ Mu et al.، 2016). لقد ظهر الارتباط بين التغذية (أو الطاقة) والمناعة (أو الالتهاب) في العديد من الاضطرابات المرتبطة بالتغذية أو الطاقة، خاصة في الأمراض المرتبطة بالسمنة بما في ذلك مرض السكري ومرض الكبد الدهني غير الكحولي (NAFLD). تعتبر السمنة التهابًا مزمنًا حيث يتم تحفيز العديد من الجينات المرتبطة بالالتهاب (على سبيل المثال، عامل نخر الورم السيتوكيني الالتهابي ألفا، MCP1، و IL6) في المرضى الذين يعانون من السمنة مقابل الأتراب الأصحاء (فيريرا وآخرون، 2016). يمكن أن تؤدي هذه السيتوكينات إلى مقاومة الأنسولين وبالتالي تدهور الاضطرابات الأيضية المرتبطة بالسمنة (Li et al., 2019). في هذه الدراسة، أظهرت البيانات أن فيروس ERV والجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب قد تم تحفيزها في الكبد الدهني مقابل الكبد الطبيعي. الكبد عضو معقد للغاية، ولا يلعب دورًا مركزيًا في تحويل المواد الغذائية والطاقة فحسب، بل له أيضًا وظائف إزالة السموم وتنظيم المناعة. يحتوي الكبد على عدد كبير من الخلايا المناعية، مثل خلايا كوبفر (الخلايا البلعمية المقيمة)، والخلايا القاتلة الطبيعية، والخلايا التائية القاتلة الطبيعية. يقوم الكبد أيضًا بتجميع المكونات التكميلية وعدد كبير من مستقبلات التعرف على مسببات الأمراض القابلة للذوبان (Keith et al.، 2007). لذلك، يعتبر الكبد حاليًا عضوًا مناعيًا مهمًا ويلعب دورًا في المناعة الفطرية (أو الالتهاب) (Xia et al., 2008; Trigger, 2010). قد يكون فيروس ERV وجيناته المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب ضرورية للوظائف الفسيولوجية للكبد ويعمل كحلقة وصل بين التمثيل الغذائي الغذائي والمناعة (أو الالتهاب). في هذه الدراسة، على الرغم من أن التغير في التغذية (أو الطاقة) قد حفز تعبير mRNA لـ ERV والجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب في الكبد الدهني مقابل الكبد الطبيعي، فمن الجدير بالذكر أن الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب الناجمة عن ERV قد تنظم التغذية الراجعة عملية التمثيل الغذائي (Volkman and Stetson، 2014؛ Cañadas et al.، 2018). لذلك، توفر هذه الدراسة بعض الأدلة التي تدعم فكرة أن فيروس ERV يشارك في تطور الكبد الدهني عن طريق الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب.

فوائد ملحق cistanche-كيفية تقوية جهاز المناعة

في هذه الدراسة، قمنا أيضًا بتحديد مستوى بروتين IFIH1 في كبد الأوز الصائم مقابل إوز التحكم، والدجاج الصائم مقابل دجاج التحكم، والإوز الذي تم تغذيته بشكل مفرط مقابل إوز التحكم. على الرغم من أن أنماط مستوى البروتين IFIH1 كانت مماثلة لتلك الموجودة في مستوى IFIH1 mRNA، إلا أن الفرق في مستوى البروتين بين العلاج ومجموعات المراقبة لم يكن واضحًا كما هو الحال في مستوى mRNA. تتضمن التفسيرات المحتملة أن مستوى البروتين في IFIH1 يمكن تنظيمه بعد النسخ. في الختام، تؤثر حالة التغذية أو الطاقة على التعبير عن بعض الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب عبر ERV، مما يوفر آلية محتملة تكمن وراء الارتباط بين التغذية (أو الطاقة) والمناعة (أو الالتهاب). قد تنظم حالة التغذية أو الطاقة التعبير عن ERV عبر مثيلة الحمض النووي. هناك اختلاف في هذا التنظيم اللاجيني بين أنواع الدواجن، والآلية المحددة تحتاج إلى مزيد من الدراسة. الجينات المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب والتي تتأثر بالتغذية أو حالة الطاقة قد لا تشارك فقط في الاستجابة المناعية الفطرية ولكنها تلعب أيضًا دورًا في الالتهاب ونمو الحيوان وموت الخلايا المبرمج وتنظيم التغذية أو استقلاب الطاقة. بالإضافة إلى ذلك، كشفت هذه الدراسة أيضًا لأول مرة أن فيروس ERV وجيناته المرتبطة بالمناعة أو الالتهاب كانت متورطة في تطور الكبد الدهني.

مراجع

بوليسيتي، م.، ج. بلومبرج، ف. بيناشينهو، ج. سبيربر، وك. بيمون. 2012. تنوع غير متوقع وتعبير عن الفيروسات القهقرية الداخلية للطيور. مبيو 3 ه00344-00312.

كانيداس، آي.، آر. ثومالابالي، جيه دبليو كيم، إس. كيتاجيما، آر دبليو جينكينز، سي إل كريستنسن، إم. كامبيسي، واي. كوانغ، واي. تشانغ، إي. جيني، جي. تشانغ، تي. تيان، دكتور سين، دي مياو، واي إيمامورا، تي تاي، بي بيل، إتش تيراي، آر عارف، تي هاغان، إس كوياما، إم واتانابي، إتش بابا، أي إي أديني، سي إيه ليدون، بي تامايو، زي. وي، إم. هيرلين، تي يو باربي، آر. أوبالوري، إل. 2018. المناعة الفطرية للورم معززة بفيروسات قهقرية داخلية محفزة بالإنترفيرون. نات. ميد. 24:1143-1150.

تشيابينيللي، كيه بي، بي إل ستريسل، دي ألكسيس، إتش إل لي، إتش كريستين، إيه بنجامين، إتش ألكساندر، إن إس روت، إل إم كوب، إس ألكسندرا، إم فلاديمير، بي سادنا، جي إس دينيس، دي دبليو جيد، MP Drew، WB Matthias، AZ Cynthia، M. Taha، AC Timothy، BB Stephen، and S. Reiner. 2015. يؤدي تثبيط مثيلة الحمض النووي إلى استجابة الإنترفيرون في السرطان عبر الرنا المزدوج الجديلة بما في ذلك الفيروسات القهقرية الذاتية. الخلية 162: 974-986.

كريشتون، جيه إتش، دي إس دونيكان، إم ماري، آر آر ميهان، وآي آر آدامز. 2014. الدفاع عن الجينوم من العدو ضمن آليات قمع الترانسبوزون في سلالة الفأر. خلية. مول. علوم الحياة. 71: 1581-1605.

ديبورا، BH، وTH بيستور. 2004. كارثة الانقسام الانتصافي وإعادة تنشيط النقل الرجعي في الخلايا الجرثومية الذكرية التي تفتقر إلى Dnmt3L. طبيعة 431: 96-99.

Denner، J. 2016. تعبير ووظيفة الفيروسات القهقرية الداخلية في المشيمة. APIS 124: 31-43.

Dolei, A., E. Uleri, G. Ibba, M. Caocci, C. Piu, and C. Serra. 2015. الكائنات الفضائية داخل الحمض النووي البشري: HERV-W/MSRV/sycytin-1 الفيروسات القهقرية الذاتية والتنكس العصبي. J. إصابة. ديف. عداد. 9: 577-587.

إلاه، ك.، ن. فرزانة، ب. ميرشوكراي، إس إي طباطبائي زاده، وه. دهقاني. 2018. التعبير عن الفيروسات القهقرية الذاتية في مراحل ما قبل زرع الجنين البقري. أعد إنتاجه. محلي. أنيم. 53:1405-1414.

إيو، إتش، جي إي بارك، واي جي جيون، وي. ليم. 2017. التأثير التحسيني لمستخلص بوليفينول الكافا الاستعماري على الالتهاب الكلوي المرتبط باستقلاب الطاقة الشاذة والإجهاد التأكسدي في الفئران السمينة الناجمة عن اتباع نظام غذائي عالي الدهون. جيه أجريك. الكيمياء الغذائية. 65:3811-3818

فيريرا، PS، إل سي سبوليدوريو، جي إيه مانثي، وتي بي سيزار. 2016. تمنع فلافانونات الحمضيات الالتهابات الجهازية وتخفف من الإجهاد التأكسدي في الفئران C57BL/6J التي تتغذى على نظام غذائي غني بالدهون. وظيفة الغذاء. 7: 2675-2681.

جينغ، تي واي، دبليو هو، إم إتش برودووتر، جي إم سنايدر، جيه بيلاوسكي، إس بي روسو، جي إتش شواكي، جيه روس، وإل إيه كاوارت. 2013. الأحماض الدهنية تنظم بشكل تفاضلي مقاومة الأنسولين من خلال تحريض الإجهاد في الشبكة الإندوبلازمية لـ tribbles Homolog 3: صلة محتملة بين تكوين الدهون الغذائية والنتائج الفيزيولوجية المرضية للسمنة. مرض السكري 56: 2078-2087.

جينغ، تي واي، بي يانغ، فاي لي، إل إل شيا، كيو وانغ، إكس تشاو، ودي كيو قونغ. 2016أ. تحديد المكونات الوقائية التي تمنع تفاقم الكبد الدهني للأوزة: توصيف مستقبلات الأديبونيكتين والتعبير عنها وتنظيمها. شركات. الكيمياء الحيوية. فيزيول. ب الكيمياء الحيوية. مول. بيول. 194: 32-38.

جينغ، تي واي، إكس تشاو، إل إل شيا، إل ليو، إف واي لي، بي يانغ، كيو وانغ، إس مونتغمري، إتش إم كوي، ودي كيو جونج. 2016ب. مكملات السكر الغذائي تعزز مقاومة الأنسولين في الشبكة الإندوبلازمية المستقلة عن الإجهاد والكبد الدهني في الإوزة. الكيمياء الحيوية. بيوفيس. الدقة. مشترك. 476:665-669.

جيب، إي، آر إل وارن، جي دبليو ويلسون، إس دي براون، جي إيه روبرتسون، جي بي مورين، ورا هولت. 2015. تفعيل الحمض النووي الريبي الطويل غير المشفر المرتبط بالفيروسات القهقرية في سرطان غدي بشري. الجينوم ميد. 7:22.

Haraguchi، S.، RA Good، GJ Cianciolo، و NK Day. 1992. الببتيد الاصطناعي المتماثل لبروتين الغلاف الفيروسي القهقري ينظم تعبير TNF-a وIFN-g mRNA. جيه ليوكوك. بيول. 52:469-472.

هجورت، إل.، إس دبليو يورجنسن، إل. جيلبرج، إي. هول، سي. برونز، جيه. فريستيك، إيه إيه فاج، وسي. لينج. 2017. يؤثر صيام الشباب لمدة 36 ساعة على مثيلة الحمض النووي للأنسجة الدهنية لـ LEP و ADIPOQ بطريقة تعتمد على الوزن عند الولادة. كلين. علم الوراثة 9:40.

هوهن، O.، K. هانكي، وN. بانرت. 2013. HERV-K (HML-2)، عائلة فيروسات HERV الأفضل حفظًا: التكاثر الداخلي، والتعبير، والآثار المترتبة على الصحة والمرض. أمام. أونكول. 3:246.

هدى، أ.، ن. بولافارابو، آي كيه جوردان، وجي إف ماكدونالد. 2008. الفيروسات القهقرية الذاتية لجينوم الدجاج. بيول. مباشر 3:9.

جاكوبسن، إس سي، إل. جيلبرج، جيه. بورك جنسن، آر. ريبيل مادسن، إي. لارا، في. كالفانيز، سي. لينج، إيه إف فرنانديز، إم إف فراغا، بي. بولسن، سي. برونز، وأ. فاج . 2014. يظهر الشباب ذوو الوزن المنخفض عند الولادة انخفاضًا في مرونة مثيلة الحمض النووي للعضلات على مستوى الجينوم بسبب الإفراط في التغذية بالدهون. مرض السكري 57: 1154-1158.

جانيش، آر، أ. شنيكي، وك. هاربرز. 1985. يؤدي علاج الفئران باستخدام 5- الآزاسيتيدين إلى تنشيط جينومات الفيروسات القهقرية الصامتة في الأنسجة المختلفة بكفاءة. بروك. ناتل. أكاد. الخيال العلمي. الولايات المتحدة الأمريكية 82: 1451-1455.

جيرن، P.، وجي إم كوفين. 2008. آثار الفيروسات القهقرية على وظيفة الجينوم المضيف. آنو. القس جينيه. 42:709-732.

كيث، إي جي، آر بي جونز، دي إيه ميكليجون، إن أنور، إل سي ندلوفو، جي إم تشابمان، آل إريكسون، إيه. أغراوال، جي. سبوتس، إف إم هيشت، إن إس راكوف، جيه. لينز، إم إيه أوستروفسكي، ودي إف نيكسون. 2007. استجابات الخلايا التائية للفيروسات القهقرية الذاتية البشرية في عدوى فيروس نقص المناعة البشرية -1. باثوج بلوس. 3:ه165.

K€ury, P., A. Nath, A. Creange, A. Dolei, P. Marche, J. Gold, G. Giovannoni, HP Hartung, and H. Perron. 2018. الفيروسات القهقرية الذاتية البشرية في الأمراض العصبية. اتجاهات مول. ميد. 24:379-394.

لي، جي واي، واي دي وانغ، إكس واي تشي، إل ران، تي هونغ، جي يانغ، بي يان، زي زد لياو، جي إتش ليو، وإكس إتش شياو. 2019. ترتفع مستويات مصل CCN3 في داء السكري من النوع 2 وترتبط بالسمنة ومقاومة الأنسولين والالتهابات. كلين. شيم. اكتا 494: 52-57.