بينما لا يبدو أن النسبة المئوية لـ TEX تزداد مع شدة المرض (الشكل التكميلي 6C) ، أو مع تقدم الحيوانات المعرضة لمرض الذئبة (6) ، فإن العدد الإجمالي للخلايا التائية المتسللة يزيد مع شدة المرض في هذه النماذج والمرضى من البشر. وبالتالي ، قد تكون هناك نقطة يمكن أن يتجاوزها الاستنفادلم يعد يسيطر على المرض. اقترح العمل السابق أن هؤلاء المرضى الذين لديهم دم محيطي CD8 بالإضافة إلى توقيع TEX كانوا أقل عرضة للتوهج مقارنة مع أولئك الذين يفتقرون إلى هذا التوقيع (52). ومع ذلك ، فإن ما يحدث على مستوى العضو المستهدف يظل سؤالًا عالقًا ، وسيكون من المثير للاهتمام ، في العمل المستقبلي ، تحديد ما إذا كان يمكن ربط نسبة الخلايا المنهكة في الخزعة بنتائج المرض.

وفقًا للدراسات ذات الصلة ، فإن cistanche هو عشب صيني تقليدي تم استخدامه لعدة قرون لعلاج الأمراض المختلفة. لقد ثبت علميًا أنه يمتلك خصائص مضادة للالتهابات ومضادة للشيخوخة ومضادة للأكسدة. أظهرت الدراسات أن الكستانش مفيد للمرضى الذين يعانون من أمراض الكلى. من المعروف أن المكونات النشطة للكيستانش تقلل الالتهاب وتحسن وظائف الكلى وتستعيد خلايا الكلى التالفة. وبالتالي ، فإن دمج الكستانش في خطة علاج أمراض الكلى يمكن أن يقدم فوائد كبيرة للمرضى في إدارة حالتهم. يساعد Cistanche على تقليل البيلة البروتينية ، ويقلل من مستويات BUN والكرياتينين ، ويقلل من خطر حدوث المزيد من تلف الكلى. بالإضافة إلى ذلك ، يساعد cistanche أيضًا في تقليل مستويات الكوليسترول والدهون الثلاثية التي يمكن أن تكون خطيرة على المرضى الذين يعانون من أمراض الكلى.

انقر فوق ملحق Cistanche Tubulosa

【لمزيد من المعلومات: david.deng@wecistanche.com / WhatApp: 86 13632399501】

سيكون من المهم تحديد الآليات التي يتم من خلالها تثبيط كل نوع من أنواع الخلايا والأحداث الضارة المحتملة بواسطة الكلى وكيف يمكن أن تؤثر العلاجات الحالية والجديدة عليها. من المأمول أن يسمح هذا العمل لنا وللآخرين باستهداف مجموعات الخلايا التائية المتغيرة هذه بشكل أكثر تحديدًا ، وبالتالي فتح طرق علاجية جديدة.

طُرق

الحيوانات. تم شراء الفئران C57BL / 6 من مختبر جاكسون. تم الحصول على الفئران MRL / lpr في البداية من مختبر جاكسون وتم الاحتفاظ بها في مختبرنا. تم الحصول على الفئران Fc R2B - / - Yaa من Silvia Bolland (المعهد الوطني للحساسية والأمراض المعدية ، المعاهد الوطنية للصحة ، روكفيل ، ماريلاند ، الولايات المتحدة الأمريكية) وتم الاحتفاظ بها في مختبرنا. كانت الفئران في العمر وتم قياس البيلة البروتينية قبل التضحية ، كما هو موثق في الجدول التكميلي 2.

عزل الخلايا التائية من الكلى والطحال. تم عزل الخلايا التائية كما هو موضح سابقًا (6). باختصار ، بعد التضحية ، تمت إزالة الطحال ، وتم إرواء الحيوانات بـ 4 0 مل من HBSS حتى حدث ابيضاض كامل للكبد والكلى. تم عزل مجموعات KIT باستخدام Octodissociator (Miltenyi Biotec) في وجود 1600 وحدة Kunitz / مل كولاجيناز D (Roche Diagnostics) و 0.2 مجم / مل DNAse IV (MilliporeSigma) لمدة 30 دقيقة عند 37 درجة. تم إجراء تحلل RBC ، وتم ترشيح الخلايا من خلال مصفاة خلية (100 ميكرومتر نايلون ؛ فالكون ، كورنينج). تم عزل الخلايا الطحالية باستخدام التفكك الميكانيكي بين شريحتين زجاجيتين متجمدتين وتم تصفيتهما من خلال مرشح شبكي 70 ميكرومتر بعد تحلل كرات الدم الحمراء.

تم تلوين الخلايا كما هو موضح سابقًا (6) باللوحة التالية: anti-CD8 (Lyt -2 / TIB -105 ، Pac-Blue ، منتج داخليًا) ، مضاد CD4 (GK {{9 }} .5 ، في PE ، تم شراؤه من BioLegend) ، ومكافحة CD90.2 (Thy1.2 / 30H12 ، Al488 ، تم إنتاجه داخليًا) لفئران MRL / lpr أو مضاد CD90.2 (Thy1.2 / 30H12 ، Al647 ، تم إنتاجه داخليًا) لـ Fc R2B - / -. تم استخدام Yaa Ghost BV510 (Tonbo) لاستبعاد الخلايا الميتة. بالنسبة لجميع الأجسام المضادة "الداخلية" ، تتوفر استنساخ الورم الهجين تجاريًا وتم تنقية الأجسام المضادة كما هو موصوف (6).

تم فرز الخلايا التائية باستخدام FACSAria (BD Biosciences). بعد الفرز ، تم غسل الخلايا مرتين بنسبة 2 في المائة من مساحة سطح الجسم في برنامج تلفزيوني. ثم تمت إضافة الكواشف المضادة لـ CD45 HTO بتخفيف 1:50 لكل عينة من العينات التي تم فرزها. تم استخدام Anti-CD45 TotalSeq-A 0096 30- F11 (BioLegend) لمجموعة Main-Seq ، وتم استخدام TotalSeq-C 0096 30- F11 (BioLegend) لكل من مجموعات TCR-Seq. بعد غسل خلايا تلطيخ HTO مرتين في 2 بالمائة من مساحة سطح الجسم في برنامج تلفزيوني.

إعداد المكتبة و RNA-Seq للخلايا التائية تم عد الخلايا وتحميلها في نظام كروم الجينوم 1 0 x وفقًا لتعليمات الشركة المصنعة. تم إنشاء التعبير الجيني ، و TCR ، و hashtag / مكتبات الرموز الشريطية للأجسام المضادة ، وتم تقييم جودتها من خلال Agilent TapeStation High Sensitivity D5 0 00 Screentape ، وتم تحديد كمياتها باستخدام مجموعة KAPA Library Quantification Kit لمنصات Illumina. بالنسبة لفوج Main-Seq ، تم استخدام مكتبة 3PrimeV2 ؛ تم إنشاء مكتبة الباركود الخاص بالميزات وفقًا لبروتوكول مركز جينوم نيويورك (56). بالنسبة إلى مجموعات TCR-Seq ، تم الحصول على مكتبات 5PrimeV1 من 10x Genomics. بالنسبة إلى الهاشتاج ، اتبعنا تعليمات "الرمز الشريطي للميزات" من الشركة المصنعة. تم تجميع المكتبات وتسلسلها على NovaSeq (Illumina Biosciences). تم إنشاء ملفات FASTQ ومواءمتها مع الجينوم المرجعي للماوس mm10 مع Cell Ranger 5.0.0 (10x Genomics) لإنتاج مصفوفة عدد الخلايا الجينية والأجسام المضادة للخلية.

معالجة البيانات scRNA-Seq. تم تفكيك البيانات الأولية 0 × من كل عينة ، وتم إنشاء ملفات FASTQ باستخدام خط أنابيب "سريع" Cell Ranger (الإصدار 5. 0. 0 ، 1 0 x علم الجينوم). تم استخدام "عدد" Cell Ranger لمحاذاة القراءات مع الجينوم المرجعي mm10 ، ونسخة mRNA ، وتم إنشاء جداول التحديد الكمي للمعرف الجزيئي الفريد HTO (UMI). تم استخدام ملفات مصفوفة الباركود الخام التي تم إنشاؤها من خط أنابيب Cell Ranger لتحليل المصب باستخدام حزمة Seurat (v4.0.0) (12) في R (v3.4.3).

مراقبة الجودة الأولية ومعالجتها. تم ترشيح الخلايا التي تعبر عن أقل من 200 جين ، أو مع أكثر من 10 في المائة من UMIs التي تم تعيينها إلى الحمض النووي للميتوكوندريا. تمت إضافة جداول HTO إلى مجموعة البيانات وتسويتها بواسطة طريقة نسبة السجل المركزي باستخدام وظيفة "NormalizeData". تم استخدام عدد HTO الطبيعي لتحديد ما إذا كانت كل حبة جل في مستحلب تحتوي على خلية واحدة باستخدام وظيفة Seurat "MULTIseqDemux" والتفتيش اليدوي للخلايا ، حيث تم اعتبار الخلية مفردة إذا كان التعبير عن HTO واحد يمثل أكثر أكثر من 70 بالمائة من إجمالي تعبير HTO في تلك الخلية ؛ خلاف ذلك ، اعتبرت الزنزانة مزدوجة وتمت إزالتها. تم تسوية قيم التعبير الجيني لكل خلية 2 - باستخدام وظيفة "NormalizeData" ، حيث تم تطبيع تعبير الجين إلى التعبير الكلي لجميع الجينات في تلك الخلية وقياسه بمعامل 10 ، {{8 }}. تم "تراجع" درجات المحتوى الجيني UMI ومحتوى الميتوكوندريا وجين الهيموجلوبولين وجين الريبوسوم باستخدام وظيفة "ScaleData" في Seurat.

تقليل الأبعاد والتكتل. تم اكتشاف الجينات المتغيرة باستخدام طريقة "mean.var.plot" في وظيفة "FindVariableFeatures" مع القطع الافتراضي ، والذي يحسب التعبير المتوسط ​​والتشتت (log [variance / mean]) لكل جين ، متبوعًا بتجميع البيانات في 20 حاوية بناءً على تعبيرهم المتوسط. ثم تم اختيار الجينات المتغيرة بناءً على تشتت z-scored داخل كل حاوية. تم استخدام هذه الجينات المتغيرة لتقليل الأبعاد بناءً على تحليل المكون الأساسي (PCA) باستخدام وظيفة "RunPCA". تم استخدام "ElbowPlot" لتقييم أول 50 مكونًا رئيسيًا ، وتم اختيار المكونات الرئيسية التي تمثل أكبر تباين في البيانات لمزيد من تقليل أبعاد UMAP وتحليل التجميع.

لتحديد مجموعات مختلفة من الخلايا ، تم إجراء التجميع غير الخاضع للإشراف باستخدام وظيفة "FindClusters" ، والتي تحسب أقرب جيران k وفقًا للتعبير الجيني المتغير في جميع الخلايا ، وبالتالي إنشاء رسم بياني قريب مشترك باستخدام خوارزمية Louvain. لتجنب الإفراط في التجميع ، اختبرنا معلمات دقة مختلفة ("الدقة") ، تتراوح من 0. 1 إلى 2 بزيادات من 0. 1 ، وتم تقييم تقدم المجموعات وتصور باستخدام "الكتلة "(الإصدار 0. 4.3) (57). تم تحديد الدقة المثلى بناءً على الفصل المستمر قبل "التجميع الزائد" كما لوحظ من خلال التقاطع المتزايد بين المجموعات. تم بعد ذلك تعريف التجميع منخفض الدقة على أنه تحليل لجميع الخلايا ضمن مجموعة كاملة ، بينما تم تعريف التجميع عالي الدقة على أنه تجميع على مجموعة سكانية فرعية محددة مسبقًا ، مثل خلايا CD4 plus أو CD8 plus أو Treg التي تم تحديدها مسبقًا في الدقة المنخفضة. تحليل. بناءً على هذه الملاحظات ، اخترنا الدقة 0. 9 و 1.4 و {{2 0}}. 6 و 0. 9 ، على التوالي ، لـ Main-Seq و CD4 plus ، CD4 بالإضافة إلى Treg sub ، و CD8 plus من المجموعة 1 والقرار 0.7 للفوج المدمج CD8 بالإضافة إلى الخلايا التائية. تم تصور مجموعات الخلايا باستخدام مخططات تخفيض أبعاد UMAP.

تم استخدام وظيفة "FindAllMarkers" مع الإعدادات الافتراضية للعثور على DEGs في كل مجموعة ، مقارنة بجميع المجموعات الأخرى ، باستخدام اختبار مجموع ترتيب Wilcoxon مع الجينات المكتشفة في 1 0 بالمائة على الأقل من الخلايا ، كحد أدنى من 0. 25 متوسط ​​تغيير طية السجل ، وقيمة P 0.01 معدلة من Bonferroni كحد أدنى.

تحليل الانسجام. بالنسبة لـ UMAP المدمج في الشكل 8 ، تم دمج المجموعات الثلاثة التي يتم تشغيلها بشكل مستقل باستخدام Harmony (58) مع إعدادات المعلمات الافتراضية.

تقييم دورة الخلية. تم استخدام وظيفة "CellCycleScoring" في Seurat لحساب درجة تعبير علامة المرحلة G1 و G2 / M و S في كل خلية باستخدام استراتيجية التسجيل الموصوفة سابقًا (59). تم حساب عدد الخلايا التي تم تحديدها في المرحلة G1 أو G2 / M أو S على أساس كل مجموعة ، وتم تقييم الانحراف عن التوزيع العام من خلال تحليل χ2.

GSEA ورسم خرائط التعبير. تم تحديد قيم P لـ GSEA باستخدام اختبار Wilcoxon لتوقيعات مجموعة الجينات المنشورة على النحو المحدد في الجدول التكميلي 1. باستخدام "ggplot2" في Seurat ، تم رسم قيم –log10 P على UMAPs.

تحليلات إضافية. تم إنشاء المخططات الشريطية والمخططات النقطية ومخططات PCA باستخدام ggplot2 في R. تم إنشاء خرائط الحرارة باستخدام وظيفة "خريطة الحرارة" في R.

تحليل بيانات TCR. تمت معالجة بيانات TCR باستخدام cell ranger vdj مع المرجع {0} refdata-cellranger-vdj-GRCm 38- alts-ensembl -3. 1.0 لتجميع TCR والسلاسل وتحديد الأنماط المستنسخة . تم الاحتفاظ بالخلايا التي تحتوي على 1 TCR مثمر (و) لمزيد من التحليل ، بينما تم استبعاد سلاسل TCR غير المنتجة. تم تعريف الخلايا التائية المستنسخة على أنها خلايا تعبر عن مستقبلات TCR و- مشتركة مع تسلسلات CDR3 متطابقة على مستوى النوكليوتيدات.

تحليل مسار الزمن الكاذب. تم إجراء تحليل المسار باستخدام تعداد الجينات المعالجة بـ Seurat باستخدام Monocle 3 (الإصدار 0. 1.3) لنمذجة تمايز الخلايا CD4 بالإضافة إلى الخلايا التائية. تم استخدام طريقة تضمين الرسم البياني العكسي DDRTree لتقليل الأبعاد ، وتم ترتيب الخلايا على طول المسار باستخدام وظيفة "ترتيب الخلايا" ، وتم تصور المسار في مساحة الأبعاد المصغرة.

لنمذجة تمايز الخلايا CD8 بالإضافة إلى T ، استخدمنا Slingshot مع تعيين "نوادي البداية" على أنها B6 / مجموعة ساذجة. تم ترتيب الخلايا حسب الوقت الزائف Slingshot وتم تجميعها في مجموعات Seurat لإبراز مسار العنقود. تم رسم نتيجة نسب مسار المقلاع على خلية CD8 بالإضافة إلى خلية Seurat UMAP.

تحليل شبكة تنظيم TF. تم استخدام سير عمل SCENIC v.1.1.2 في R لتحديد القواعد باستخدام عدد ومجموعات سورات التي تمت معالجتها وفقًا لدراسة سابقة (60). ثم تم إنشاء خرائط الحرارة كما هو موضح أعلاه.

التهديف النسيجي. تم إجراء إعداد أنسجة الكلى وتسجيلها كما هو محدد سابقًا (61).

توافر البيانات والمواد. تم إجراء جميع التحليلات والتصورات في R. تم تفصيل منهجية محددة وتحليل باستخدام برامج Seurat المنشورة في قسم الأساليب. يتم إيداع البيانات والبيانات الوصفية ومخرجات التحليل مثل تحديد المجموعة في National Center for Biotechnology Information's Gene Expression Omnibus (GSE197339).

إحصائيات. تم حساب الإحصائيات في R كما هو موضح في الأقسام الخاصة بالتحليل أو GraphPad Prism بواسطة 1- طريقة ANOVA مع اختبار Tukey للمقارنات المتعددة ، 2- طريقة ANOVA بمقاييس متكررة ، أو تحليل χ2 كما هو محدد في وسائل إيضاح الشكل ، بقيم P ممثلة كـ * P <0. 0 5 ، ** P <0. {{1 0} 1 ، *** P <0.001 ، **** P <0.0001. اعتبرت P <0.05 ذات دلالة إحصائية.

الموافقة على الدراسة. تمت الموافقة على جميع الأعمال إما من قبل لجنة رعاية واستخدام الحيوان المؤسسية بجامعة بيتسبرغ أو جامعة ييل.

الكاتب الاشتراكات

تصور JST و MJS الدراسة. طورت منهجية SS و MC و JST و MJS. تم التحقيق في JST و SS. بيانات JST و SS المرئية. حصلت JST و MJS على التمويل. قدمت JST و MJS إدارة المشروع. قدمت JST و MJS الإشراف. كتب JST و MJS المسودة الأصلية. قام كل من JST و MJS و SS و MC بمراجعة وتحرير المسودة.

شكر وتقدير

نود أن نشكر Minjung Kim على جهودها الدؤوبة في المختبر ، مما سمح بإنجاز هذا العمل ، ونشكر البصيرة الحاسمة للمشروع من Kevin Nickerson و Rachael Gordon و Peter Lipsky والمراجعة النقدية لهذا العمل بواسطة Fadi Lakkis و Warren شلومتشيك. بالإضافة إلى ذلك ، نود أن نشكر جامعة بيتسبرغ أحادية الخلية وعلى وجه التحديد تريسي طبيب ، الذين ساعدوا في استكمال إعداد المكتبة وتقنية 10x Genomics.

تم توفير التمويل من قبل Lupus Research Alliance ، Novel Research Grant (إلى JST) ؛ تمنح المعاهد الوطنية للصحة / المعهد الوطني لالتهاب المفاصل والجهاز العضلي الهيكلي وأمراض الجلد K08AR075056 (إلى JST) ؛ والمعاهد الوطنية للصحة / المعهد الوطني للحساسية والأمراض المعدية يمنحان R01 AI137132 (إلى MJS).

مراسلات العنوان إلى:Jeremy S. Tilstra، 3500 Terrace Street، BST S705A، Pittsburgh، Pennsylvania 15261، USA. الهاتف: 412.383.8861 ؛ أو إلى Mark J. Shlomchik، W1052 Biomedical Science Tower، 200 Lothrop Street، Pittsburgh، Pennsylvania 15261، USA. الهاتف: 412.648.8771.

1. Hope HC، Salmond RJ. استهداف البيئة الدقيقة للورم واستقلاب الخلايا التائية من أجل العلاج المناعي الفعال للسرطان. Eur J إمونول. 2019 ؛ 49 (8): 1147-1152.

2. جيانغ واي وآخرون. استنفاد الخلايا التائية في البيئة المكروية للورم. ديس موت الخلية. 2015 ؛ 6: e1792.

3. شاربينج ني وآخرون. إجهاد الميتوكوندريا الناجم عن التحفيز المستمر تحت نقص الأكسجة يؤدي بسرعة إلى استنفاد الخلايا التائية. نات إمونول. 2021 ؛ 22 (2): 205-215.

4. كلارك إم آر وآخرون. التسبب والآثار العلاجية للالتهاب النبيبي الخلالي في التهاب الكلية الذئبي البشري. سيمين نفرول. 2015 ؛ 35 (5): 455-464.

5. هسيه سي وآخرون. توقع نتائج التهاب الكلية الذئبي مع التهاب نبيبي خلالي وتندب. العناية بالتهاب المفاصل (هوبوكين). 2011 ؛ 63 (6): 865 - 874.

6. تيلسترا جي إس وآخرون. يتم استنفاد الخلايا التائية المتسللة إلى الكلى في التهاب الكلية الذئبي الفأري من الناحية الأيضية والوظيفية. ياء كلين إنفست. 2018 ؛ 128 (11): 4884-4897.

7. شميتز جي إي وآخرون. السيطرة على viremia في عدوى فيروس نقص المناعة عن طريق CD8 بالإضافة إلى الخلايا الليمفاوية. علوم. 1999 ؛ 283 (5403): 857 - 860.

8. بالي ما ، وآخرون. تتعاون المجموعات الفرعية السلفية والنهائية للخلايا التائية CD8 بالإضافة إلى احتواء العدوى الفيروسية المزمنة. علوم. 2012 ؛ 338 (6111): 1220-1225.

9. Lanata CM ، وآخرون. نهج النمط الظاهري والجينوميات في مجموعة متعددة الأعراق لنوع فرعي الذئبة الحمامية الجهازية. نات كومون. 2019 ؛ 10 (1): 3902.

10. بيترسون كانساس وآخرون. توصيف عدم التجانس في التسبب الجزيئي لالتهاب الكلية الذئبي من الملامح النسخية للكبيبات الملتقطة بالليزر. ياء كلين إنفست. 2004 ؛ 113 (12): 1722-1733.

11. أرازي أ وآخرون. منظر الخلايا المناعية في الكلى لمرضى التهاب الكلية الذئبي. نات إمونول. 2019 ؛ 20 (7): 902-914.

12. بتلر إيه وآخرون. دمج البيانات النصية أحادية الخلية عبر الظروف والتقنيات والأنواع المختلفة. Nat Biotechnol. 2018 ؛ 36 (5): 411-420.

13. هاشيموتو ك وآخرون. تكشف النسخ أحادية الخلية عن توسع خلايا CD4 T السامة للخلايا في المعمرين الفائقين. بروك ناتل أكاد سسي أوس أ.2019 ؛ 116 (48): 24242-24251.

14. سنجر إم وآخرون. وحدة جينية مميزة للخلل المنفصل عن التنشيط في الخلايا التائية المتسللة إلى الورم. خلية. 2016 ؛ 166 (6): 1500-1511.

15. Stubbington MJ، et al. أطلس لفأر CD4 (زائد) ترانسكريبتومات الخلايا التائية. بيول المباشر. 2015 ؛ 10:14.

16. Tibbitt CA وآخرون. يحدد تسلسل الحمض النووي الريبي أحادي الخلية لاستجابة الخلية التائية المساعدة لعث غبار المنزل توقيعًا مميزًا للتعبير الجيني في خلايا مجرى الهواء Th2. حصانة. 2019 ؛ 51 (1): 169-184.

17. Mackay LK وآخرون. المسار التنموي لـ CD103 (زائد) CD8 بالإضافة إلى خلايا الذاكرة التائية المقيمة في الأنسجة للجلد. نات إمونول. 2013 ؛ 14 (12): 1294-1301.

18. Chen PM، et al. يفرض نقص الأكسجة في أنسجة الكلى إصابة الخلايا التائية في التهاب الكلية الذئبي. Sci Transl Med. 2020 ؛ 12 (538): eaay1620.

19. أوبرت ن وآخرون. يحدد توصيف التوقيع التلوي الجزيئي لخلايا T التنظيمية الجين pro-enkephalin كعلامة جديدة في الفئران [طبع أولي]. تم النشر على bioRxiv 6 مارس 2020.

20. Martin MD ، Badovinac VP. تحديد خلية الذاكرة CD8 T. الجبهة المناعية. 2018 ؛ 9: 2692.

21. ويلينجر تي وآخرون. تميز التوقيعات الجزيئية الذاكرة المركزية البشرية عن مجموعات الخلايا الفرعية CD8 T. ياء إمونول. 2005 ؛ 175 (9): 5895-5903.

22. Ahrends T ، وآخرون. يساعد CD4 plus T cell في إنشاء ذاكرة CD8 بالإضافة إلى الخلايا التائية بقدرات استدعاء فطرية ومستقلة عن المساعدة. نات كومون. 2019 ؛ 10 (1): 5531.

23. يوسف الأول وآخرون. يعتمد إنتاج الخلايا المساعدة الجريبية للمركز الجرثومي للمركز التائي IL -4 على إشارات مستقبل جزيء التنشيط اللمفاوي (CD150). ياء إمونول. 2010 ؛ 185 (1): 190-202.

24. Luzina IG، et al. التكوين العفوي للمراكز الجرثومية في فئران المناعة الذاتية. ي لوكوك بيول. 2001 ؛ 70 (4): 578-584.

25. Blaszczyk K، et al. الدور الفريد لـ STAT2 في النسخ التأسيسي والناجم عن IFN والاستجابات المضادة للفيروسات. معامل نمو السيتوكين Rev. 2016 ؛ 29: 71-81.

26. سوارناليخا إن وآخرون. تعزز الخلايا المساعدة المقيمة التائية الاستجابات الخلطية في الرئة. Sci Immunol. 2021 ؛ 6 (55): eabb6808.

27. هايوارد سي وآخرون. تنظم الإشارات البيئية إعادة البرمجة اللاجينية لخلايا CD8 بالإضافة إلى الخلايا التائية الموجودة في مجرى الهواء. نات إمونول. 2020 ؛ 21 (3): 309-320.

28. Sacher AG، et al. CD4 بالإضافة إلى الخلايا التائية السامة للخلايا في سرطان المثانة - ترخيص جديد للقتل. الخلايا السرطانية. 2020 ؛ 38 (1): 28-30.

29. مايهارا تي وآخرون. قد تحفز الخلايا الليمفاوية التائية CD4 + السامة للخلايا على موت الخلايا المبرمج للخلايا البطانية في التصلب الجهازي. ياء كلين إنفست. 2020 ؛ 130 (5): 2451-2464.

30. Miragaia RJ وآخرون. تكشف النسخ أحادية الخلية للخلايا التائية التنظيمية عن مسارات تكيف الأنسجة. حصانة. 2019 ؛ 50 (2): 493-504.

31. Doering TA وآخرون. يكشف تحليل الشبكة عن جينات ومسارات مرتبطة مركزيًا تشارك في استنفاد الخلايا التائية CD8 بالإضافة إلى الذاكرة. حصانة. 2012 ؛ 37 (6): 1130-1144.

32. Li J، et al. تساعد المستويات العالية من المنازل على استنفاد الخلايا التائية المضادة للورم CD8 بالإضافة إلى الخلايا التائية. الجبهة المناعية. 2018 ؛ 9: 2981.

33. Seo H وآخرون. تتعاون عوامل النسخ TOX و TOX2 مع عوامل النسخ NR4A لفرض استنفاد الخلايا التائية CD8 بالإضافة إلى الخلايا التائية. بروك ناتل أكاد سسي أوس أ.2019 ؛ 116 (25): 12410-12415.

34. لي إتش وآخرون. تشكل خلايا CD8 T المختلة وظيفيًا حجرة تكاثرية منظمة ديناميكيًا داخل سرطان الجلد البشري. خلية. 2020 ؛ 181 (3): 747.

35. Celhar T، Fairhurst AM. نمذجة الذئبة الحمامية الجهازية السريرية: أوجه التشابه والاختلاف وقصص النجاح. أمراض الروماتيزم (أكسفورد). 2017 ؛ 56 (ملحق 1): i88 – i99.

36. Massengill SF، et al. يرتبط التهاب الكلية SLE بتوسع قليل النسيلة في الخلايا التائية داخل الكلية. أنا J الكلى ديس. 1998 ؛ 31 (3): 418-426.

37. وينشستر آر وآخرون. الخصائص المناعية للخلايا التائية داخل الكلى: الاتجار في CD8 الموسع بالإضافة إلى الأنماط المستنسخة للخلايا التائية في التهاب الكلية الذئبي التدريجي. التهاب المفاصل الرومات. 2012 ؛ 64 (5): 1589-1600.

38. موراتا إتش وآخرون. ذخيرة مستقبلات الخلايا التائية للخلايا التائية في الكلى لمرضى التهاب الكلية الذئبي. التهاب المفاصل الرومات. 2002 ؛ 46 (8): 2141-2147.

39. Yost KE وآخرون. الاستبدال النسيلي للخلايا التائية الخاصة بالورم بعد حصار PD -1. نات ميد. 2019 ؛ 25 (8): 1251-1259.

40. Collier JL، et al. طرفي الطيف غير المتعارضين: خلل في الخلايا التائية CD8 بالإضافة إلى العدوى المزمنة والسرطان والمناعة الذاتية. نات إمونول. 2021 ؛ 22 (7): 809-819.

41. Chang A، et al. الجوانب الخلوية للتسبب في التهاب الكلية الذئبي. Rheumatol بالعملة. 2021 ؛ 33 (2): 197-204.

42. Kiner E، et al. تعد الأنماط الظاهرية للخلايا التائية المعوية CD4 بالإضافة إلى سلسلة متصلة مصبوبة بواسطة الميكروبات ، وليس الأنماط البدائية لـ TH. نات إمونول. 2021 ؛ 22 (2): 216-228.

43. Peine M، et al. تنشأ الخلايا الهجينة T-bet (plus) GATA -3 (بالإضافة إلى) Th1 / Th2 في الجسم الحي ، ويمكن أن تتطور مباشرة من السلائف الساذجة ، وتحد من الالتهاب المناعي. بلوس بيول. 2013 ؛ 11 (8): e1001633.

44. Huang S. Hybrid T-helper cells: تثبيت المركز المعتدل في نظام مستقطب. بلوس بيول. 2013 ؛ 11 (8): e1001632.

45. شاربينج ني وآخرون. تكبح البيئة المكروية للورم التكوُّن الحيوي للميتوكوندريا للخلايا التائية لتسبب قصور خلل في التمثيل الغذائي للخلايا التائية داخل الورم واختلال وظيفي. حصانة. 2016 ؛ 45 (3): 701-703.

46. ​​شاربينج ني وآخرون. إجهاد الميتوكوندريا الناجم عن التحفيز المستمر تحت نقص الأكسجة يؤدي بسرعة إلى استنفاد الخلايا التائية. نات إمونول. 2021 ؛ 22 (2): 205-215.

47. Acharya N، et al. تنظم إشارات الجلوكوكورتيكويد الذاتية تمايز الخلايا التائية CD8 بالإضافة إلى تطور الخلل الوظيفي في البيئة الدقيقة للورم. حصانة. 2020 ؛ 53 (3): 658-671.

48. موهان سي وآخرون. التشريح الجيني لتسبب مرض الذئبة: وصفة للأضداد الذاتية الميتة. ياء كلين إنفست. 1999 ؛ 103 (12): 1685–1695.

49. هيدريش سم ، وآخرون. يتحكم مُعدِّل عنصر استجابة cAMP في تعبير IL2 و IL17A أثناء التزام النسب CD4 وتوزيع المجموعات الفرعية في مرض الذئبة. بروك ناتل أكاد سسي أوس أ .2012 ؛ 109 (41): 16606–16611.

50. ElTanbouly MA، et al. VISTA هو منظم نقطة تفتيش لهدوء الخلايا التائية الساذج والتسامح المحيطي. علوم. 2020 ؛ 367 (6475): eaay0524.

51. زعرور ج. عكس الخلل الوظيفي للخلايا التائية والإرهاق في مرض السرطان. كلين كانسر ريس. 2016 ؛ 22 (8): 1856-1864.

52. McKinney EF، et al. استنفاد الخلايا التائية والتحفيز المشترك والنتائج السريرية في المناعة الذاتية والعدوى. طبيعة. 2015 ؛ 523 (7562): 612-616.

53. ماكسويل ر وآخرون. التأثير المتباين للكورتيكوستيرويدات على فعالية العلاج المناعي المضاد للـ PD -1 لأنسجة الورم الموجودة داخل أو خارج الجهاز العصبي المركزي. علم الأورام. 2018 ؛ 7 (12): e1500108.

54. فلينت TR وآخرون. يعيد الإنترلوكين الناجم عن الورم -6 برمجة التمثيل الغذائي للمضيف لقمع المناعة المضادة للورم. ميتاب الخلية. 2016 ؛ 24 (5): 672-684.

55. Hanoteau A، et al. ينظم علاج السيكلوفوسفاميد توازن خلايا CD8 بالإضافة إلى الخلايا التائية الوظيفية / المرهقة. علم الأورام. 2017 ؛ 6 (8): e1318234.

56. Stoeckius M، et al. يتيح تجزئة الخلايا باستخدام الأجسام المضادة المشفرة تعدد الإرسال والكشف المزدوج عن جينوم الخلية الواحدة. جينوم بيول. 2018 ؛ 19 (1): 224.

57. Zappia L ، Oshlack A. تجميع الأشجار: تصور لتقييم المجموعات في قرارات متعددة. جيجاسينس. 2018 ؛ 7 (7): giy083.

58. Korsunsky I، et al. تكامل سريع وحساس ودقيق لبيانات الخلية الواحدة مع Harmony. طرق نات. 2019 ؛ 16 (12): 1289-1296.

59. تيروش الأول وآخرون. تشريح النظام البيئي متعدد الخلايا من الورم الميلانيني النقيلي بواسطة الحمض النووي الريبي أحادي الخلية. علوم. 2016 ؛ 352 (6282): 189-196.

60. Aibar S، et al. سينيك: استدلال وتجميع شبكة تنظيمية أحادية الخلية. طرق نات. 2017 ؛ 14 (11): 1083-1086.

61. Tilstra JS، et al. يعتبر التعبير الجوهري للمستقبل TLR9 عن الخلية البائية واقيًا في الذئبة الفأرية. ياء كلين إنفست. 2020 ؛ 130 (6): 3172-3187.

【لمزيد من المعلومات: david.deng@wecistanche.com / WhatApp: 86 13632399501】