كيف يقلل مستخلص Cistanche من فرط التنسج الالتهابي

جهة الاتصال: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 البريد الإلكتروني:audrey.hu@wecistanche.com

الحد من فرط التنسج الالتهابي في الأمعاء في الفئران المعرضة لسرطان القولون عن طريق مستخلص الماء من Cistanche deserticola

يامين جيا ، 1،2 وآخرون

سيستانشيشيع استخدام الجرجير في الطب الصيني التقليدي لعلاج العديد من المشاكل الصحية بما في ذلك متلازمة القولون العصبي أو الإمساك. صممت هذه الدراسة لاختبار فاعلية مستخلص مائي لنبات C. تم تحضير مستخلص الماء الغني بالعديد السكاريد من C. تم استخدام الفئران الفارغة Tgfb1Rag2 كنموذج تجريبي. أظهرنا هنا أن تغذية مستخلص الماء من C.تضخموالعدوى المعوية هيليكوباكتر في الفئران. ارتبط هذا التأثير المفيد بالتحفيز الكبير لجهاز المناعة ، والذي يتضح من تضخم الطحال مع زيادة عدد الخلايا الضامة الطحالية والخلايا القاتلة الطبيعية ، ومع سمية خلوية أكثر فاعلية للخلايا الطحالية. عزز مستخلص الماء في المختبر من C. في الختام ، تشير بياناتنا إلى أن تناول مستخلص C.التهاباتمفرط التصنعالزوائد اللحمية وعدوى الهليكوباكتر في الفئران من خلال نشاطها المناعي ، مما يشير إلى أن مستخلص المطثية الصحراوية قد يكون لديه القدرة على منع اضطرابات الالتهاب المعوي بما في ذلك سرطان القولون والمستقيم. حقوق الطبع والنشر © 2011 John Wiley & Sons، Ltd.

الكلمات الدالة: مناعة عشبية؛سيستانشمقتطف؛ السكريات. هيليكوباكتر.التهاباتتضخم؛ سرطان قولوني مستقيمي.

سيستانشمقتطفيمكن أن تقللالتهاباتتضخم

المقدمة

يعد سرطان القولون والمستقيم ثالث أكثر أنواع السرطانات شيوعًا بين الرجال والثاني بين النساء على مستوى العالم ويحتل المرتبة الرابعة بين أكثر أسباب الوفاة شيوعًا من السرطان (8 في المائة من جميع الوفيات الناجمة عن السرطان ؛ فيرلاي وآخرون ، 2010). تشير الدراسات الوبائية إلى أن العديد من عوامل الخطر المرتبطة بهذا المرض ، بما في ذلك العوامل الوراثية (مثل التاريخ العائلي لسرطان القولون) (Strate and Syngal ، 2005) والعوامل الغذائية (مثل اللحوم الحمراء والألياف المنخفضة ؛ Chao وآخرون ، 2005 ؛ Park et al. آل ، 2005) ، والتهاباتأمراض الأمعاء (IBD ؛ Eaden et al. ، 2001 ؛ von Roon et al. ، 2007 ؛ Lukas ، 2010). حتى الآن ، على الرغم من العديد من الأدوية السامة للخلايا الجديدة وتقنيات العلاج الجراحي والإشعاعي المحسّنة المستخدمة لعلاج هذا المرض (كننغهام وآخرون ، 2010) ، لا تزال نسبة كبيرة من مرضى سرطان القولون والمستقيم غير قابلة للشفاء ؛ تم تقدير حوالي 608000 حالة وفاة من هذا المرض في جميع أنحاء العالم في عام 2008 (Ferlay et al. ، 2010). ومن ثم ، هناك حاجة إلى علاجات جديدة ، وأحد المرشحين هو العلاج المناعي. تم تقييم طرق العلاج المناعي المختلفة لعلاج سرطان القولون والمستقيم ، والنتائج حتى الآن مشجعة (بورغدورف وآخرون ، 2009). لقد ثبت أن السكريات العشبية لها أنشطة تنظيم مناعية محددة (Jiang et al. ، 2010) ، مما يشير إلى أنه يمكن استخدام هذه المنتجات العشبية كمساعد معين منبه المناعي ضد سرطان القولون والمستقيم.

سيستانشتم تضمين Deserticola Ma ، المعروف باسم Rou Cong Rong في طب الأعشاب الصيني ، في التركيبات العشبية للعديد من المشكلات الصحية ، بما في ذلك العجز الجنسي ، والكريات البيضاء المرضية ، ومتلازمة القولون العصبي / الإمساك (Jiang and Tu ، 2009). كشفت الدراسات التجريبية عن أنشطة بيولوجية مختلفة لمستخلصات مختلفة من C. يحتوي مستخلص جليكوسيدات الفينيثانويد من هذه العشبة على نشاط مضاد للتعب في الفئران (Cai et al. ، 2010) ، ومسكن ومضاد-التهاباتالتأثيرات في القوارض (Lin et al. ، 2002) ، بينما تحفز السكريات المتعددة على تكاثر الخلايا اللمفاوية التائية والبائية في مزارع الخلايا الليمفاوية (Wu et al. ، 2005 ؛ Dong et al. ، 2007). ومع ذلك ، لم يتم فحص فعالية مستخلص السكاريد من C. الصحراء في تحفيز الاستجابة المناعية في الجسم الحي حتى الآن.

خردة 2^-/-تفتقر الفئران إلى الخلايا الليمفاوية التائية والبائية الناضجة ، وعلى الخلفية المختلطة (حوالي 97 بالمائة 129 S6 و ~ 3 بالمائة CF -1) تتطور تلقائيًا المرتبطة بالالتهابتضخمفي الأمعاء (Engle et al. ، 1999). يؤدي الإدخال الجيني لجين Tgfb1 (تحويل عامل النمو b1 (TGF-b1)) إلى أليل فارغ لهذه السلالة من الفئران إلى مزيد من التقدم فيتضخمإلى الورم الحميد والسرطان (Engle et al. ، 2002) ، والتهاب القولون المعتمد على البكتيريا المسببة للأمراض مطلوب لتطوير سرطان القولون (Engle et al. ، 2002) ، مما يشير إلى أن هذه السلالة من الفئران توفر نموذجًا مثاليًا لـ فحص العلاج المحتمل في علاج الالتهاب / سرطان القولون والمستقيم الناجم عن مرض التهاب الأمعاء. في هذه الدراسة ، أظهرنا لأول مرة فعالية المستخلص المائي الغني بالسكاريد من C.التهاباتتضخمفي هذا النموذج.

المواد والأساليب

مستخلص مائي غني بالسكريات لتحضير C.

تم حصاد Herbal C. تم غلي مسحوق السيقان المجففة الكاملة (300 جم) في ماء مقطر مزدوج مرتين: أولاً لمدة ساعة واحدة في 500 مل من الماء ، متبوعًا بتجميع المادة الطافية ، ثم لمدة 45 دقيقة في 400 مل من الماء. تم ترشيح المواد الطافية من خلال ورق ترشيح Whatman (سريع متوسط) بعد كل مرة من الغليان ، وتجميعها معًا. تم تجفيف محلول المستخلص عن طريق التجفيد وحفظه عند 80 درجة مئوية. وكان الناتج النهائي حوالي 10 جم (المحصول: حوالي 3 بالمائة).

الفئران وزراعة الخلايا. الفئران الناقصة TGF-b1 (Tgfb1 plus / - Rag2^-/-) على خلفية مختلطة (~ 97 بالمائة 129 S6 و ~ 3 بالمائة CF -1) تم تلقيها من مستعمرة تكاثر تمت المحافظة عليها في ظروف خالية من مسببات الأمراض في منشأة حيوانية في مركز جاك بيل للأبحاث (فانكوفر ، كولومبيا البريطانية). نشأت هذه الفئران من مستودع نماذج الفئران لاتحاد السرطان البشري (MMHCC) (المعهد الوطني للسرطان في فريدريك ، ماريلاند ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم شراء الفئران C57BL / 6 J (B6) (ذكور ، 8-10 أسابيع) من مختبر جاكسون (بار هاربور ، مي ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم الاحتفاظ بجميع حيوانات التجارب في ظل نظام غذائي تقليدي ونظام غذائي (5001 Rodent Diet ، LabDiet) بعد الفطام في عمر 4 أسابيع ، وتم إجراء العلاج بالأعشاب وجمع العينات وفقًا لإرشادات المجلس الكندي لرعاية الحيوان بموجب
تمت الموافقة على البروتوكولات من قبل اللجنة الفرعية لاستخدام الحيوانات في جامعة كولومبيا البريطانية.

تمت زراعة كل من خط الخلايا السرطانية الغدية للقولون البشري SW48 0 وخط خلايا البلاعم RAW 246.7 الفأر في وسط النسر المعدل في Dulbecco (DMEM ، Invitrogen ، Carlsbad ، CA ، الولايات المتحدة الأمريكية) الذي يحتوي على 1 0 من بقرة جنينية مصل (FBS) (وسط DMEM كامل) عند 37- درجة مئوية في حاضنة هواء مرطبة بنسبة 5 بالمائة CO2 / 95 بالمائة. تم عزل الخلايا الطحالية عن طريق تحطيم شظايا الطحال بلطف في محلول ملحي مخزّن بالفوسفات (PBS) ، متبوعًا بإزالة كريات الدم الحمراء باستخدام محلول تحلل (0 .15 M NH4Cl ، 1.0 ملي مولار KHCO3 ، 0.1 ملي مولار EDTA ، درجة الحموضة 6.8). بعد الغسل باستخدام برنامج تلفزيوني مرة أخرى ، تم تعليق الخلايا الطحالية في وسط RPMI 1640 مكملًا بنسبة 10 بالمائة FBS (وسط RPMI كامل).

سيستانشمقتطفيمكن أن تقللالتهاباتتضخم

استخراج العلاج.

مستخلص عشبي ، يسمىسيستانشمقتطففي هذه الدراسة ، تم تحضيره أخيرًا عن طريق إعادة تكوين المسحوق المجفف بالماء المقطر المزدوج المعقم واحتوائه على 2-3 في المائة (وزن / وزن) من فينيل إيثانويد ، و 65-7 0 في المائة (وزن / وزن) من السكريات ، و 0 .6-1 في المائة (وزن / وزن) من البروتين المعتمد على المقايسات التالية: تم تحديد عدد فينيل إيثانويد عن طريق الامتصاص عند 332 نانومتر باستخدام مقياس الطيف الضوئي الموصوف سابقًا (أويانغ وآخرون ، 2005) ؛ تم قياس محتوى السكريات باستخدام طريقة حمض الفينول القياسية (Dubois et al. ، 1956) بعد ترسيب الإيثانول ؛ تم تحديد البروتين والبروتين عن طريق اختبار بروتين Bio-Rad باتباع بروتوكول الشركة المصنعة (Bio-Rad Lab ، Hercules ، CA ، الولايات المتحدة الأمريكية). كانت جرعة مستخلص Cistanche 0.4 جم / كجم / يوم بناءً على دراستنا التجريبية. كان متوسط ​​تناول الماء لكل فأر بالغ يوميًا حوالي 4 مل ، وإذا احتوى 1 مل من ماء الشرب على 3 ملغ منسيستانشمقتطف، تلقى كل فأر 12 مجم من المستخلص عن طريق الفم يوميًا. بناءً على حقيقة أن متوسط ​​وزن جسم فأر بالغ كان 30 جم ، فإن مياه الشرب تحتوي على 3 مجم / مل منسيستانشمقتطفأعطيت جرعة من 0. 4 جم / كجم / يوم للفئران. عولجت الفئران بإعطاء ماء شرب يحتوي على 3 ملغ / مل من الشفرينسيستانشمقتطفتم تجديدها مرة واحدة على الأقل كل يومين ، من عمر شهرين لمدة ثلاثة أشهر في غرفة تقليدية في منشأة رعاية الحيوانات.

التصنيف النسيجي لسرطان القولون والمستقيم.

في نهاية العلاج لمدة ثلاثة أشهر ، تم حصاد الأنسجة المعوية الصغيرة والكبيرة وفتحها طوليًا ، متبوعًا بغسل المحتويات برفق باستخدام برنامج تلفزيوني. تم جمع ما مجموعه ست قطع (طول كل 2 سم) من أنسجة الأمعاء من كل فأر: ثلاث قطع من الأمعاء الدقيقة في المواقع القريبة والمتوسطة والبعيدة. اثنان من الأمعاء الغليظة في المواقع القريبة والبعيدة ، وواحد من الأعور. تم تثبيت جميع الأنسجة في 10 في المائة من الفورمالين وتم تضمينها في البارافين. تم تلوين كل قسم بهيماتوكسيلين ويوزين (HE) من أجل التصنيف النسيجي لسرطان القولون والمستقيم. تم تصنيف المرض حسب الخصائص المرضية لـتضخمأو الورم الحميد أو السرطان داخل كل عينة ، كما هو موضح سابقًا (Engle et al. ، 1999) بطريقة اختبار أعمى. العدد الإجمالي لكل تغيير مرضي (تضخم، الورم الحميد ، والسرطان) في قسمين من الأنسجة المعوية لكل فأر.

سيستانشمقتطفيمكن أن تقللالتهاباتتضخم

الكشف عن بكتيريا هيليكوباكتر الكبدية (H. hepaticus) في براز الفأر.

لفحص تأثيرسيستانشمقتطفعلى نمو البكتيريا المرضية في القناة الهضمية ، تم تحديد H. hepaticus في البراز عن طريق تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) مع بادئات rDNA 16S الخاصة بالأنواع كما هو موضح سابقًا (Shames et al. ، 1995). تم إذابة ما يقرب من 2 0 0 ملغ من البراز الطازج في 1 ميكرولتر من PBS واحتضانها عند 5 0 درجة لمدة 30 دقيقة ، تليها الطرد المركزي عند 8000 دورة في الدقيقة لمدة 10 دقائق. تم جمع المادة الطافية (200 مل) وخلطها بكمية متساوية من محلول بروتيناز K الذي يحتوي على 5 في المائة (حجم / حجم) من محلول بروتيناز K 18.7 مجم / مل (فيرمنتاس كندا ، بيرلينجتون ، أونتاريو ، كندا) في محلول هضم (50) ميكرومتر Tris – HCl ، pH 8.0 ، 0.1 M EDTA ، 0.5 بالمائة كبريتات دوديسيل الصوديوم) ، وحضنت عند 70 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. تم استخراج الحمض النووي في المحلول الناتج باستخدام مجموعة QIAprep Miniprep باتباع بروتوكول الشركة المصنعة (QIAGEN ، Mississauga ، ON ، كندا).
تم إجراء تضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل للحمض النووي البكتيري في خليط يحتوي على {{0}. 75 ميكرولتر من 1 0 محلول PCR ، 0. 5 ميكرولتر من 5 0 ملي مولار MgCl2 ، 0.5 ميكرولتر من كل جهاز تمهيدي (بمعنى: 5'-GCA TTT GAA ACT GTT ACT CTG ؛ مضاد للحس: 5'-GGG GAGCUGAAAACAG ، 100 ملي لكل منهما) ، 0.5 ميكرولتر من بوليميريز Taq ، 18.75 ميكرولتر من H2O الخالي من نوكلياز و 1 ميكرولتر من محلول الحمض النووي البراز غير الكمي. تم تسخين خليط PCR عند 94 درجة لمدة 5 دقائق ، تليها 40 دورة من التمسخ عند 94 درجة لمدة دقيقة واحدة ، والتليين عند 55 درجة لمدة 1.25 دقيقة ، والتمديد عند 72 درجة لمدة 1.5 دقيقة. تم إنهاء PCR بخطوة استطالة مدتها 10 دقائق عند 72 درجة. تعرض منتج PCR الناتج (25 ميكرولتر) للرحلان الكهربائي على هلام agarose بنسبة 1 في المائة في محلول Tris-acetate-EDTA (TAE) يحتوي على 0.5 مجم / مل من بروميد الإيثيديوم وتم تصويره تحت ضوء الأشعة فوق البنفسجية.

تحديد الضامة والخلايا القاتلة الطبيعية (NK).

تم تحديد النسب المئوية للخلايا الضامة والخلايا القاتلة الطبيعية في تعليق الخلايا الطحالية عن طريق تحليل فرز الخلايا المنشطة الفلورية (FACS). تم تحضين مليون خلية طحالية في محلول FACS مع تركيبة مناسبة من الأجسام المضادة لأنماط ظاهرية مختلفة من الخلايا في الجليد: مضاد CD 3- أيزوثيوسيانات الفلوريسين (FITC) ومضاد CD49b-phycoerythrin (PE) (BD Biosciences ، Mississauga ، ON ، كندا) لخلايا CD3 CD49b بالإضافة إلى NK وخلايا الفئران المضادة للفأر F4 / 80 بالإضافة إلى جسم مضاد أولي ومضاد IgG-FITC كجسم مضاد ثانوي (eBioscience ، سان دييغو ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية) لـ F4 / 80 بالإضافة إلى الضامة. تم قياس شدة التألق لكل نوع من الخلايا باستخدام قياس التدفق الخلوي وتحليلها عن طريق المقارنة مع عناصر التحكم في الخلفية باستخدام برنامج CELLQUEST (BD Biosciences).

مقايسة السمية الخلوية كالسين أسيتوكسي ميثيل (كالسين- AM).

تم تقييم النشاط التحلل للخلايا الطحالية المستجيبة ضد خلايا SW480 المستهدفة عن طريق مقايسة السمية الخلوية calcein-AM باستخدام نظام الثقافة المشتركة كما هو موضح سابقًا (Neri et al. ، 2001). باختصار ، تم تصنيف خلايا SW480 بصبغة فلورية كالسين- AM على النحو التالي: 1 × 10⁶تم تحضين خلايا / مل من خلايا SW48 0 في وسط DMEM الكامل مع 15 ميكرومتر كالسين- AM عند 37 درجة مع اهتزاز عرضي. بعد 30 دقيقة من الحضانة ، تم غسل الخلايا على نطاق واسع باستخدام وسط DMEM كامل لإزالة الصبغة خارج الخلية. خلايا SW480 التي تحمل صبغة الفلورسنت في وسط DMEM الكامل (0.2 × 10⁶من الخلايا / {0}. 25 مل / بئر) تم زرعها في 24- من أطباق الآبار. بناءً على النسب المختلفة (12: 1 ، 6: 1 ، 3: 1 ، 1.5: 1) من E (المستجيب): T (الهدف) ، الخلايا الطحالية في 0. 25 مل من وسط RPMI الكامل لكل بئر تمت إضافتها إلى الآبار مع وجود خلايا مستهدفة في ثلاث نسخ. حضنت الثقافات المشتركة عند 37 درجة في 5 في المائة من ثاني أكسيد الكربون لمدة 24 ساعة. تم جمع المواد الطافية بعد تدوير اللوح عند 2 0 00 دورة في الدقيقة لمدة 5 دقائق. تم تحديد إطلاق Calcein-AM إلى المادة الطافية باستخدام مقياس طيف الصفيحة الدقيقة (Fluoroskan Ascent FL ، Thermo Labsystems) بانبعاث 527 نانومتر تحت الإثارة عند 485 نانومتر. تم استخدام الخلايا المستهدفة ، المحتضنة بمزيج من 0.25 مل من وسط DMEM الكامل و 0.25 مل من وسط RPMI الكامل ، كعناصر تحكم خلفية أو تلقائية ، وفي وجود 2 بالمائة ، تم استخدام Triton X -100 كـ الضوابط القصوى للإفراج. تم حساب السمية الخلوية للخلايا الطحالية على النحو التالي:

قياس أكسيد النيتريك (NO). أكسيد النيتريك المفرز من الخلايا يتأكسد بسرعة إلى نتريت في وسط المزرعة. لذلك ، تم تحديد تركيزات النترات في الوسط باستخدام طريقة Griess كمقياس لإنتاج NO. RAW264.7 خلية (0. 25 × 10⁶

خلايا / بئر في 0. تم ​​تحفيز 5 مل من وسط DMEM الكامل) في 24- من الصفائح جيدًا باستخدامسيستانشمقتطف(50-200 ملغم / مل) وعديد السكاريد الدهني (10 نانوغرام / مل) كعنصر تحكم إيجابي. بعد 24 ساعة من العلاج ، تم أولاً خلط 50 مل من المادة الطافية للثقافة مع 50 مل من 1 بالمائة
sulphanilamide في 5 في المائة من حمض الفوسفوريك في 96- أطباق الآبار في ثلاث نسخ ، وتم حضنها لمدة 1 0 دقيقة ، ثم تمت إضافة 50 مل من 0.1 بالمائة من نفتيل إيثيلين ديامين ثنائي هيدروكلوريد في الماء المقطر لكل بئر. تمت قراءة الامتصاصية عند 550 نانومتر بعد الحضانة لمدة 10 دقائق ، وتم حساب مستوى أكسيد النيتروجين / النتريت باستخدام منحنى قياسي بتركيزات نتريت الصوديوم المعروفة.

سيستانشمقتطفيمكن أن تقللالتهاباتتضخم

لطخة غربية.

تم فحص المستويات الخلوية لمركب أكسيد النيتريك II (NOS 2 أو iNOS) بواسطة لطخة غربية كما هو موضح سابقًا (Du et al. ، 2006). باختصار ، تم تجزئة عينات البروتين (حوالي 100 مجم / عينة) بنسبة 7 بالمائة SDS-PAGE وتم نقلها إلى غشاء النيتروسليلوز. تم التعرف على نطاقات البروتين NOS II مع الجسم المضاد الأولي لـ NOS II متعدد الأضلاع للأرنب (N -20) (التخفيف 1: 500 ؛ Santa Cruz Biotech ، سانتا كروز ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية) والأجسام المضادة IgG الثانوية المضادة للأرنب الماعز ( تخفيف 1: 10000 ؛ مختبر فيكتور ، بورلينجيم ، كاليفورنيا ، الولايات المتحدة الأمريكية). تم تصور مركب البروتين والجسم المضاد NOS II بواسطة مقايسة التلألؤ الكيميائي المحسن (ECL ، Amersham Pharmacia Biotech ، باكينجهامشير ، إنجلترا). تم استنساخ البقع باستخدام مضاد B-actin IgG (Sigma-Aldrich Canada ، Oakville ، ON ، كندا) لتأكيد البروتين المحمّل في كل عينة.

فحص البلعمة. تم قياس البلعمة من خلال كمية حبات اللاتكس المسمى مضان (SigmaAldrich Canada ، L -3030 ، معدل الكربوكسيل ، متوسط ​​الحجم 2 مم) التي تغمرها خلايا RAW264.7 كما هو موضح سابقًا (Wu et al. ، 2 {{ 9}} 0 7). باختصار ، تم زرع خلايا RAW264.7 (0.1 106 خلية / 0.5 مل / بئر) في وسط DMEM الكامل في 24- أطباق جيدة وتحفيزها باستخدام 100 مجم / مل منسيستانشمقتطفأو وسط DMEM فقط كعنصر تحكم. بعد التحفيز طوال الليل ، تمت إضافة 2.5 مل من حبات اللاتكس الفلورية لكل بئر إلى مزارع الضامة واحتضانها لمدة ساعتين. لتحليل التدفق الخلوي ، تم فصل الخلايا عن طريق الماصات بعد الغسيل في برنامج تلفزيوني ، وتم قياس شدة تألق الخلايا البلعمية بواسطة مقياس التدفق الخلوي وتحليلها عن طريق المقارنة مع عناصر التحكم في الخلفية (بدون خرز) باستخدام برنامج CELLQUEST (BD Biosciences).

تحليل احصائي.

تم تقديم البيانات على أنها متوسط ​​الانحراف المعياري الإضافي (SD). تم إجراء تحليل التباين (ANOVA) أو اختبار الطالب t حسب الاقتضاء لمقارنة البيانات بين المجموعات. تم اعتبار القيمة الاحتمالية لـ <0. 05="">

النتائج

العلاج بسيستانشمقتطفيقلل من وتيرةتضخموعدوى بكتيريا H. hepaticus في الأمعاء خلال فترة العلاج (3 أشهر) ، تمت مراقبة وزن الجسم واستهلاك مياه الشرب مرة واحدة كل يومين في فئران المجموعة المعالجة بالمستخلص مقابل المجموعة المعالجة بالسيارات ، ولم يكن هناك فرق كبير. لوحظ (البيانات غير معروضة). ومع ذلك ، أظهر التحليل النسيجي أن تناوله عن طريق الفمسيستانشمقتطفاتانخفاض كبير في عددالتهاباتتضخمفي الأمعاء (الشكل 1) ، يتضح من حقيقة أن الفئران التي تتلقى الماء بالمستخلص كان لديها عدد أقلتضخم(5. 00 زائد -2. 83 / فأر ، ن=15) من أولئك الذين يشربون الماء العادي أو السيارة (7.53 بالإضافة إلى -3. 09 / فأر ، ن {{9) }}) (extract vs. vehicle: p=0. 0133، t-test). لم يكن الاختلاف في عدد الورم الحميد والسرطان بين الفئران المُستخرجة والمعالجة بالسيارات ذو دلالة إحصائية لأن عددًا قليلاً فقط من الفئران كان لديه هذه المراحل من التغيرات المرضية (البيانات غير معروضة).

الشكل 1. الحد من حدوث تضخم عن طريق العلاج بالمستخلص المائي من C.سيستانشمقتطف). Tgfb1 plus / -Rag 2- / - تمت تغذية الفئران بهاسيستانشمقتطففي مياه الشرب (مجموعة استخراج) مقارنة مع مياه الشرب العادية فقط (مجموعة المركبات). تم فحص الآفات السرطانية في الأمعاء بواسطة الأنسجة مع صبغة H&E. (أ) صورة نموذجية لقسم الأنسجة السليمة. (ب) صورة نموذجية من تضخم في المقطع المشار إليها بواسطة سهم. (ج) تم حساب عدد تضخم الأمعاء لكل حيوان عن طريق الأنسجة (ص=0. 0133 ، استخراج مقابل مركبة ، ن=15). هذا الرقم متاح بالألوان على الإنترنت على wileyonlinelibrary.com/journal/ptr

ثبت أن المحتوى الميكروبي في الأمعاء ، وخاصة عدوى H. hepaticus ، ضروري لتطوير جميع مراحل سرطان القولون بما في ذلك تضخم في Rag2^-/- الفئران (Engle et al. ، 2002 ؛ Erdman et al. ، 2003). لفحص ما إذا كان العلاج بسيستانشمقتطفاتانخفاض البكتيريا المرضية في القناة الهضمية ، ووجود جرثومة الكبد في براز الفئران المعالجةسيستانشمقتطفتم تحديده بواسطة PCR مقارنةً بعناصر التحكم في السيارة. في كل تجربة ، تم علاج ثلاثة فئران لكل قفص باستخدام مستخلص Cistanche أو مركبة. تم جمع عينات البراز في نهاية 14- ساعة بعد تنظيف القفص. كما هو مبين في الشكل 2 ، تم اكتشاف بكفاءة H. hepaticus 16S rDNA في البراز بواسطة تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل. في ثلاث تجارب منفصلة (الجدول 1) ، فقط 20-40 في المائة من العينات منسيستانش-مقتطف- تم اكتشاف الفئران المعالجة على أنها إيجابية تفاعل البوليميراز المتسلسل ، بينما كانت نسبة 60-80 في المائة من عناصر التحكم في المركبات إيجابية (المستخلص مقابل السيارة: p=0. 0189 ، اختبار t ، n=3) ، مما يشير إلى أن العلاج باستخدام قلل مستخلص الكستانش من عدوى H. hepaticus المعوية في الفئران.

يزيد العلاج بمستخلص Cistanche من عدد البلاعم الطحالية والخلايا القاتلة الطبيعية

تلعب الاستجابة المناعية دورًا رئيسيًا في القضاء على عدوى الهليكوباكتر. لفحص ما إذا كانسيستانش مقتطفأثر العلاج على الجهاز المناعي في هذه الفئران المعرضة لسرطان القولون ، وتم تحديد حجم الطحال (12 فأرًا في كل مجموعة) ، وعدد خلايا الطحال (ستة فئران تم اختيارها عشوائيًا من كل مجموعة) في نهاية العلاج. تم وزن طحال 12 فأرًا في كل مجموعة ، ولم يتم تضمين الفئران الثلاثة الأخرى في التجربة الأولية. كما هو موضح في الجدول 2 ،سيستانش-مقتطف- الفئران المعالجة (0. 0 55 زائد -0. 022 جم / طحال) كانت أثقل من مجموعة المركبات (0.038 بالإضافة إلى -0. 01 جم / طحال ؛ مستخلص مقابل السيارة: ص =0. 04 ، اختبار t). تم دعم هذه البيانات بشكل أكبر من خلال زيادة عدد الخلايا الطحالية في الفئران التي عولجت بهاسيستانشمقتطف، مشار إليه بـ 7.095 زائد -1. 353 (x10⁶ الخلايا / الطحال) مقارنة بـ 2.941 بالإضافة إلى -1 .492 (x10⁶الخلايا / الطحال) في فئران التحكم في السيارة (المستخلص مقابل السيارة: p =0. 002 ، اختبار t).

لمزيد من تقييم ما إذا كانسيستانشمقتطفأثر العلاج على نوع فرعي معين من الخلايا الطحالية في الفئران ، وهو عدد الخلايا القاتلة الطبيعية الطحالية (CD3^-CD49b^زائدالخلايا) والضامة (FT / 80^زائدخلايا) عن طريق تحليل نظام مراقبة الأصول الميدانية. نسبة CD3^-CD49b^زائدالخلايا في الطحالسيستانش-مقتطف- الفئران المعالجة (32.06 زائد -2. 13 بالمائة) لم تختلف كثيرًا عن الفئران المعالجة بالمركبات (28.47 زائد -2. 74 بالمائة ؛ المستخلص مقابل السيارة: p =0. 3741، t-test، n =6) ، لكن العدد الإجمالي لخلايا NK في طحالسيستانش-مقتطف- الفئران المعالجة (2.22 زائد - 0. 44x10⁶/ spleen) أعلى من مجموعة التحكم داخل السيارة (0. 83 زائد -0. 17x10⁶/طحال؛ extract vs. vehicle: p =0. 01، t-test، n =6؛ الشكل 3 ب). شوهدت نتائج مماثلة في فحص خلايا الطحال FT / 80 plus ؛ كما هو الحال في مجموعة خلايا الطحال NK ، الفرق في النسبة المئوية للخلايا الطحالية FT / 80 بالإضافة إلى الخلايا بين الفئران المعالجة بالمستخلص (35.25 زائد -7. 28 بالمائة) وفئران التحكم في المركبات (31.74 زائد -5. 07 بالمائة) لم يكن كبيرًا (المستخلص مقابل السيارة: p =0. 407، n =6) ، ولكن العدد الإجمالي للضامة الطحالية في المجموعة المعالجة بالاستخراج (2.439 زائد -0 .452x10⁶الخلايا / الطحال) أعلى من تلك الموجودة في مجموعات التحكم (1.114 زائد -0 .685 × 10⁶الخلايا / الطحال؛ extract vs. vehicle: p =0. 001، t-test، n =6؛ الشكل ثلاثي الأبعاد). مجتمعة ، تشير هذه البيانات إلى أن العلاج بـسيستانشمقتطفقد يزيد العدد الإجمالي ، ولكن ليس النسبة المئوية أو النسبة ، للأنواع الفرعية للخلايا الطحالية المستجيبة ، والخلايا القاتلة الطبيعية ، والضامة في الطحال.

الشكل 3. زيادة في عدد الخلايا NK الطحال والضامة عن طريق العلاج معسيستانشمقتطف. تم تحديد الخلايا القاتلة الطبيعية أو الضامة في تعليق الطحال من خلال تحليل FACS مع مجموعة صبغة من الجسم المضاد FITC-anti-CD3e وعلامة خلية APC-anti-CD49b / Pan-NK (للخلايا القاتلة الطبيعية) أو مع صبغة واحدة من FITC-anti- FT / 80 (للضامة). (أ) رسم بياني تمثيلي للنسبة المئوية لخلايا NK الطحالية (CD3^-CD49b^زائد) في الطحال من الفئران المعالجةسيستانشمقتطفمقابل السيارة. (ب) العدد الإجمالي لخلايا NK لكل طحال. يتم تقديم البيانات على أنها متوسط ​​plus -SD في كل مجموعة (ص=0. 01 ، ن=6). (C) رسم بياني تمثيلي للنسبة المئوية للبلاعم الطحال (FT / 80 plus) في الخلايا الطحالية للفئران المعالجة بـسيستانشمقتطفمقابل السيارة. (د) إجمالي عدد الضامة لكل طحال. يتم تقديم البيانات على أنها متوسط ​​plus -SD في كل مجموعة (ص=0. 001 ، ن =6).

يحفز العلاج بمستخلص Cistanche تسمم الخلايا الطحالية في الجسم الحي وفي المختبر

لا تعتمد الاستجابة المناعية على عدد الخلايا الطحالية فحسب ، بل تعتمد أيضًا على وظيفتها ، مثل السمية الخلوية. تأثيرسيستانشمقتطفتم فحص العلاج على وظيفة الخلايا الطحالية (أي السمية الخلوية) في الثقافات المشتركة مع خلايا SW480. كما هو مبين في الشكل 4 أ ، السمية الخلوية للخلايا الطحالية من الفئران المعالجةسيستانشمقتطفأعلى من الخلايا المأخوذة من الفئران المعالجة بالسيارات ، والمشار إليها بـ 39.38 بالإضافة إلى -2. 64 بالمائة من إطلاق كالسين- AM في الثقافات المشتركة للخلايا الطحالية المعالجة بالاستخراج مع SW48 0 من الخلايا عند 6 : نسبة 1 ، 51.11 زائد -2. 6 بالمائة بنسبة 3: 1 و 57.33 زائد -2. 53 بالمائة بنسبة 1.5: 1 ، مقارنة بـ 27. 75- 0. 18 في المائة في الثقافات المشتركة للخلايا الطحالية المعالجة بواسطة المركبات بخلايا SW480 بنسبة 6: 1 ، 40. 97 =-2. 85 بالمائة بنسبة 3: 1 و 45.16 زائد -0. 18 بالمائة في نسبة 1.5: 1 (المستخلص مقابل السيارة: p <0.0001 ،="" anova="" ثنائي="" الاتجاه).="" لتأكيد="" التأثير="" التحفيزي="">سيستانشمقتطفعلى السمية الخلوية الطحالية ، السمية الخلويةسيستانش-مقتطفتم فحص خلايا الطحال الساذجة المعالجة من الفئران B6 ، والتي تحتوي على خلايا T و B وظيفية ، في الثقافات المشتركة مع خلايا SW480. كما هو مبين في الشكل 4 ب ، إضافةسيستانشمقتطف(1 0 0 مجم / مل) أدى إلى زيادة كبيرة في إطلاق calcein-AM في الثقافات المشتركة بطريقة تعتمد على الطحال: 57.64 زائد -3. 41 بالمائة بنسبة 12: 1 ، 52.25 زائد { {11}}. 77 بالمائة بنسبة 6: 1 و 45.72 زائد -2. 43 بالمائة بنسبة 3: 1 ، مقارنة بـ 14.36 زائد -0. 05 بالمائة بنسبة 12: 1 ، 20.67 بالإضافة إلى -2. 03 بالمائة بنسبة 6: 1 و 23.1 زائد -3. 73 بالمائة بنسبة 3: 1 في الثقافات المشتركة غير المحفزة (المستخلص مقابل السيارة: p <0.0001 ،="" اثنان="" -way="" anova).="" هذه="" النتائج="" تشير="" إلى="">سيستانشمقتطفيحفز النشاط التحلل للخلايا الطحالية. السبب وراء انخفاض السمية الخلوية عند إضافة المزيد من الخلايا الطحالية المستجيبة غير معروف. كان أحد الاحتمالات هو أن مستوى إطلاق calcein-AM في نظام الاستزراع المشترك هذا قد لا يعكس تمامًا موت الخلية الهدف لأنه يمكن إعادة امتصاص calcein-AM بواسطة خلايا الطحال المستجيب بعد فترة طويلة من الحضانة.

ينشط مستخلص Cistanche الضامة

يعد تنشيط البلاعم أحد الاستجابات المناعية الحرجة ضد الإصابة بالعدوى وتطور الورم (Mantovani et al. ، 2002 ، 2008). لمزيد من الكشف عن نظرة ثاقبة في الآليات التيسيستانشمقتطفالعلاج يقلل من تضخم الأمعاء والمحتوى الميكروبي ، تأثيرسيستانشمقتطفتم فحص خلايا RAW264.7 على إنتاج البلعمة وأكسيد النيتروجين. كما هو مبين في الشكل 5 أ ، تم تنظيم التعبير البروتيني لـ NOS II في الثقافات التالية للحضانة باستخدامسيستانشمقتطف. تم دعم هذه النتائج بشكل أكبر من خلال الزيادة في إنتاج NO فيحفز استخراج Cistancheالثقافات (الشكل 5 ب) ، كما يتضح من 3.88 زائد -0 .13 ملي مولار من النتريت في 50 مجم / مل منسيستانشمقتطفحفز مزارع الخلايا RAW264.7 مقارنةً بـ 0. 11 بالإضافة إلى -0. 12 ملي مولار من النتريت في مزارع تحكم غير محفزة (أحادية الاتجاه ANOVA ، ص<>

البلعمة هي عملية خلوية لابتلاع الجزيئات الصلبة ، مثل البكتيريا. كما هو مبين في الشكل 5 ج ود ، إضافةسيستانشمقتطفاتالبلعمة المحفزة ، كما يتضح من الخلايا البلعمية (9.8 زائد -0. 1 في المائة) الموجودة فيسيستانش-مقتطف- مستنبتات البلاعم المحفزة مقارنة بتلك (5.2 زائد -0. 4٪) في الثقافات التي تحفزها المركبات (المستخلص مقابل السيارة: p =0. 0007، t-test، n =3) بعد فترة حضانة لمدة ساعتين. هذه البيانات تشير إلى ذلكسيستانشمقتطفقد ينشط الضامة بشكل مباشر عن طريق تنظيم إنتاج NO المحلي وتحفيز البلعمة البلاعم في أمعاء الفئران.

نقاش

توضح الدراسة الحالية لأول مرة أن تناوله عن طريق الفمسيستانشمقتطفيقلل بشكل كبير من تواتر تضخم وعدوى H. hepaticus في أمعاء الفئران المعرضة لسرطان القولون. التأثير المفيد لـسيستانشمقتطفيرتبط العلاج بزيادة في عدد وسمية خلايا الطحال NK والضامة. إضافة في المختبر منسيستانشمقتطفيحفز عدم الإنتاج والبلعمة في الضامة. TGF-b1 ناقص Rag2^-/-ثبت أن الفئران تصاب بسرطان القولون (فرط تنسج ، ورم غدي ، أو سرطان غدي) من 3 إلى 6 أشهر من العمر ، وقد ثبت أنالتهاباتترتبط البؤر دائمًا بهذه الآفات السرطانية (Engle et al. ، 1999). وقد أثبتت دراسات أخرى أن تطور سرطان القولون في هذه الفئران ضروري لوجود عدوى النباتات الميكروبية المسببة للأمراض لأن سرطان القولون يتم القضاء عليه تمامًا عن طريق إيواء الفئران في ظروف خالية من الجراثيم (Engle et al. ، 2002) ، و H. hepaticus تسبب العدوى أيضًا التهاب القولون وسرطان الأمعاء الغليظة في Rag2-/-الفئران (إردمان وآخرون ، 2003). وبالمثل ، في البشر ، تعد الحالة الجرثومية ومناعة المضيف من العوامل الرئيسية لتطور مرض التهاب الأمعاء (Fiocchi ، 1998) ، وقد تم الإبلاغ عن ارتباط سرطان المعدة بالعدوى أو الالتهاب المزمن الناجم عن الملوية البوابية (Parsonnet et al. ، 1991 ؛ العمر ومالفرتاينر ، 2001). تشير نتائج هذه الدراسات إلى أن عدوى الجهاز الهضمي قد تلعب دورًا محوريًا في تطور سرطان القولون. وبالتالي ، فإن استهداف عدوى الجهاز الهضمي قد يصبح استراتيجية علاجية للوقاية أو العلاج من سرطان القولون وكذلك مرض التهاب الأمعاء. توضح دراستنا لأول مرة أن تناوله عن طريق الفمسيستانشمقتطفيقلل من وتيرةالتهاباتتضخمفي الأمعاء ، وعدد جرثومة الكبد في البراز في الفئران التي تعاني من نقص TGF-b1. التأثير المفيد لـسيستانش مقتطفقد يكون بسبب تنشيط الضامة ، كما يتضح من زيادة في كل من إنتاج NO وبلعمة بعد العلاج معسيستانشمقتطف(الشكل 5) ، والتي قد تحد من البكتيريا المسببة للأمراض المعوية بما في ذلك هيليكوباكتر (مانتوفاني وآخرون ، 2002 ، 2008). نتيجة لذلك ، آفةالتهاباتتضخمتم تخفيضه.

تم تحديد مجموعة متنوعة من المركبات النشطة بيولوجيًا في مستخلصات C. جليكوسيدات الفينيثانويد هي مادة واقية للخلايا ، يشار إليها من خلال حقيقة أن هذه المركبات تمنع موت الخلايا في خلايا الكبد المزروعة والخلايا العصبية الحبيبية المخيخية (Xiong et al. ، 1998 ؛ Pu et al. ، 2003). بينما تحفز السكريات المتعددة تكاثر الخلايا اللمفاوية التائية والبائية التي يسببها الميثوجين (Wu and Tu ، 2005 ؛ Wu et al. ، 2005 ؛ Dong et al. ، 2007). لقد تم توثيقه جيدًا أن السكريات العشبية تعدل الاستجابة المناعية (Jiang et al. ، 2010).سيستانشمقتطفيحتوي على 2-3 في المائة من فينيل إيثانويد و 65-70 في المائة من عديد السكاريد ، مما يشير إلى أن تأثير التعديل المناعي لـسيستانشمقتطفقد يكون العلاج بسبب النشاط المناعي للسكريات ، غالبية المواد النشطة بيولوجيًا في مستخلص Cistanche. ومع ذلك ، فإن الخلايا المناعية المستهدفة (مثل البلاعم أو الخلايا القاتلة الطبيعية أو كليهما) والمسارات الجزيئية تتطلب مزيدًا من التحقيق. بالإضافة إلى ذلك ، توضح دراسة حديثة أن إعطاء أسيتونيد الفينيليثانويد العشبي ، أحد مركبات فينيل إيثانويد النشطة بيولوجيًا في مستخلص C. التهاب القولون الناجم عن كبريتات الصوديوم في الفئران (Hausmann et al. ، 2007) ، مما يدل على أن فينيلثانويدس (2-3 في المائة) فيسيستانشمقتطفقد يسهم على الأقل جزئيًا في فعاليته في تقليلالتهاباتتضخم، الأمر الذي يتطلب أيضًا التقييم في المستقبل.
في الختام ، يعد سرطان القولون والمستقيم من أكثر أنواع السرطان انتشارًا في جميع أنحاء العالم ويمكن الوقاية منه في معظم الحالات. قد يوفر استخدام المستخلصات العشبية غير السامة استراتيجية فعالة للوقاية من تطور سرطان القولون والمستقيم ، ويمكن أيضًا استخدامه كمساعد كيميائي ، والذي يمكن أن يفيد في تعزيز فعالية العلاج الكيميائي المضاد للسرطان ، و / أو تقليل العلاج الكيميائي آثار جانبية. تظهر البيانات المقدمة في هذه الدراسة بوضوح أن العلاج بالمستخلص المائي من C. عدوى هيليكوباكتر أو الأمعاءاشتعالتضخمهو عامل خطر للإصابة بسرطان القولون والمستقيم. تشير دراستنا الحالية إلى أن استخدام هذه العشبة قد يكون له القدرة على الوقاية من سرطان القولون والمستقيم وعلاجه ، خاصة بالنسبة للأفراد المصابين بمرض التهاب الأمعاء.

إعتراف

تم دعم YM بمنحة دراسية لطلاب الدراسات العليا من مجلس المنح الدراسية الصيني.

تضارب المصالح

الكتاب ليس لديهم تضارب في المصالح.

سيستانشمقتطفيمكن أن تقللالتهاباتتضخم

من: 'تخفيضالتهاباتتضخمفي الأمعاء في الفئران المعرضة لسرطان القولون عن طريق مستخلص المياهسيستانشDeserticola 'بواسطة Yamin Jia ، 1،2 وآخرون

--- حقوق الطبع والنشر © 2011 لشركة John Wiley & Sons، Ltd. Phytother. الدقة. 26: 812–819 (2012) DOI: 10.1002 / ptr.3637

المراجع

Burgdorf SK ، Nielsen HJ ، Rosenberg J. 2009. العلاج المناعي في سرطان القولون والمستقيم. سكاند جي جاسترونتيرول 44: 261-268.
Cai RL ، Yang MH ، Shi Y ، Chen J ، Li YC ، Qi Y. 2010. النشاط المضاد للإجهاد من المستخلص الغني بالفينيلثانويد منسيستانشالصحراء. Phytother Res 24: 313-315.
تشاو أ ، ثون إم جيه ، كونيل سي جيه ، إت آل. 2005. استهلاك اللحوم وخطر الإصابة بسرطان القولون والمستقيم. JAMA 293: 172 - 182.
كننغهام د ، أتكين دبليو ، لينز إتش جيه ، إت آل. 2010. سرطان القولون والمستقيم. لانسيت 375: 1030-1047.
Dong Q ، Yao J ، Fang JN ، Ding K. 2007. التوصيف الهيكلي والنشاط المناعي لاثنين من السكريات القابلة للاستخراج بالماء البارد منسيستانشصحراء كولا YC. أماه. نسبة الكربوهيدرات 342: 1343-1349.
Du C ، Guan Q ، Diao H ، Yin Z ، Jevnikar AM. 2006. أكسيد النيتريك يحث على موت الخلايا المبرمج في الخلايا الطلائية الأنبوبية الكلوية من خلال تنشيط كاسباس -8. Am J Physiol Renal Physiol 290: F1044–1054.
دوبوا إم ، جيل كجك ، هاميلتون جي كي ، ريبيرس بي إيه ، سميث إف 1956. طرق قياس الألوان لتقدير السكريات في المواد ذات الصلة. الشرج تشيم 28: 350-356.

إادن جا ، أبرامز كر ، مايبيري جيه إف. 2001. مخاطر الإصابة بسرطان القولون والمستقيم في التهاب القولون التقرحي: تحليل تلوي. القناة الهضمية 48: 526-535.
العمر إم ، مالفرتاينر 2001. هيليكوباكتر بيلوري وسرطان المعدة. Curr Opin Gastroenterol 17 (ملحق 1): S 24- S27.
Engle SJ، Hoying JB، Boivin GP، Ormsby I، Gartside PS، Doetschman T. 1999. يحول عامل النمو بيتا 1 إلى تثبيط سرطان القولون غير النقيلي في مرحلة مبكرة من تكون الأورام. الدقة في السرطان 59: 3379 - 3386.
إنجل إس جيه ، أورمسبي الأول ، باولوسكي إس ، وآخرون. 2002. القضاء على سرطان القولون في الفئران الخالية من الجراثيم المحولة عامل النمو بيتا 1- التي تعاني من نقص. الدقة السرطان 62: 6362-6366.
Erdman SE ، Poutahidis T ، Tomczak M ، et al. 2003. CD4 بالإضافة إلى CD25 بالإضافة إلى الخلايا اللمفاوية التائية التنظيمية تمنع سرطان القولون الناجم عن الميكروبات في الفئران التي تعاني من نقص 2- Rag. آم جيه باتول 162: 691-702.
فيرلاي جي ، شين إتش آر ، براي إف ، فورمان دي ، ماذرز سي ، باركين دي إم. 2010. تقديرات العبء العالمي للسرطان في عام 2008: GLOBOCAN 2008. Int J Cancer 127: 2893-2917.
فيوتشي سي 1998.التهاباتمرض الأمعاء: المسببات المرضية. أمراض الجهاز الهضمي 115: 182-205.
Hausmann M ، Obermeier F ، Paper DH ، et al. 2007. العلاج في الجسم الحي باستخدام عقار أكتيوسيد الفينيليثانويد العشبي يخفف من التهاب الأمعاء في التهاب القولون الناجم عن كبريتات ديكستران. كلين إكس إمونول 148: 373-381.
جيانغ إم إتش ، تشو إل ، جيانغ جي جي. 2010. إجراءات تنظيم المناعة من السكريات من طب الأعشاب الصيني. أهداف رأي الخبراء 14: 1367-1402.
جيانغ Y ، Tu PF. 2009. تحليل المكونات الكيميائية فيسيستانشمحيط. ي تشروماتوجر أ 1216: 1970-1979.
Lin LW، Hsieh MT، Tsai FH، Wang WH، Wu CR. 2002. مضاد للألم ومضاد-التهاباتالنشاط الناجم عنسيستانشالصحراء في القوارض. ي إثنوفارماكول 83: 177-182.
لوكاس م 2010.التهاباتمرض الأمعاء كعامل خطر للإصابة بسرطان القولون والمستقيم. حفر ديس 28: 619-624.
مانتوفاني أ ، ألافينا ب ، سيكا أ ، بالكويل ف. 2008. الالتهاب المرتبط بالسرطان. Nature 454: 436–444.
Mantovani A، Sozzani S، Locati M، Allavena P، Sica A. 2002. استقطاب البلاعم: الضامة المرتبطة بالورم كنموذج للبلعمات أحادية النواة M2 المستقطبة. اتجاهات إمونول 23: 549-555.
Neri S، Mariani E، Meneghetti A، Cattini L، Facchini A. 2001. مقايسة كالسين-أسيتوكسي ميثيل السمية الخلوية: توحيد طريقة تسمح بتحليلات إضافية على الخلايا المستجيبة المستردة والمواد الطافية. مختبر التشخيص كلين إمونول 8: 1131-1135.
Ouyang J، Wang XD، Zhao B، Wang YC. 2005. تحسين إنتاج جليكوسيدات الفينيثانويد بواسطةسيستانشتم استزراع خلايا الصحراء في مفاعل حيوي هوائي عروة داخلية مع غربال الناهض. إنزيم ميكروب تكنول 36: 982-988.
بارك واي ، هانتر دي جي ، شبيجلمان دي ، وآخرون. 2005. تناول الألياف الغذائية وخطر الإصابة بسرطان القولون والمستقيم: تحليل مجمع لدراسات الأتراب المحتملين. جاما 294: 2849-2857.
بارسونيت J ، فريدمان جي دي ، فاندرستين دي بي ، إت آل. 1991. عدوى الملوية البوابية وخطر الإصابة بسرطان المعدة. N Engl J Med 325: 1127-1131.
Pu X، Song Z، Li Y، Tu P، Li H. 2003. Acteoside fromسيستانشالسالسا يمنع موت الخلايا المبرمج بواسطة 1- ميثيل -4- أيون فينيل بيريدينيوم في الخلايا العصبية الحبيبية المخيخية. بلانتا ميد 69: 65-66.
Shames B، Fox JG، Dewhirst F، Yan L، Shen Z، Taylor NS. 1995. التعرف على انتشار عدوى هيليكوباكتر الكبدية في البراز في مستعمرات الفئران التجارية عن طريق الثقافة ومقايسة تفاعل البوليميراز المتسلسل. J Clin Microbiol 33: 2968–2972.
Strate LL، Syngal S. 2005. متلازمات سرطان القولون والمستقيم الوراثي. السيطرة على أسباب السرطان 16: 201-213.
Von Roon AC، Reese G، Teare J، Constantinides V، Darzi AW، Tekkis PP. 2007. مخاطر الاصابة بالسرطان لدى مرضى داء كرون. المستقيم ديس القولون 50: 839-855.
Wu TF، Hsu CY، Huang HS، Chou SP، Wu H. 2007. التحليل البروتيني لتأثيرات البيكنوجينول في RAW 264.7 الضامة يكشف عن تحريض تعبير cathepsin D وتعزيز البلعمة. J أغريك فود تشيم 55: 9784-9791.
وو XM وغاو XM و Tsim KW و Tu PF. 2005. أرابينوجالاكتان معزول عن سيقانسيستانشيحث الصحراوية على تكاثر الخلايا الليمفاوية المستنبتة. Int J Biol Macromol 37: 278-282.
Wu XM, Tu PF. 2005. Isolation and characterization of alpha-(1-->6) -جلوكان منسيستانشالصحراء. J Asian Nat Prod Res 7: 823-828.
Xiong Q ، Hase K ، Tezuka Y ، Tani T ، Namba T ، Kadota S. 1998. النشاط الوقائي للكبد من phenylethanoids منسيستانشالصحراء. بلانتا ميد 64: 120-125.
Xiong Q ، Kadota S ، Tani T ، Namba T. 1996. التأثيرات المضادة للأكسدة من phenylethanoids منسيستانشالصحراء. بيول فارم بول 19: 1580-1585.